Dra. Mara Beln Rodriguez CardozoDirectora BANCO NACIONALBANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS DE DATOS GENETICOS ( B. N. D. G. )( B. N. D. G. ) CREACION Y OBJETO CREACION Y OBJETO1.-1.-

Motivacin histrica Motivacin histrica2.-2.- Antecedentes de su creacin y Antecedentes de su creacin yemplazamiento en el Hospital emplazamiento en el Hospital Dr. C. G. Durand Dr. C. G. Durand 3.-3.- Ley de creacin y DecretoLey de creacin y Decreto ReglamentarioReglamentario4.-4.- Convenio MSyAS - MCBA Convenio MSyAS - MCBA ElBancoNacionaldeDatosGenticos(BNDG)creadoporElBancoNacionaldeDatosGenticos(BNDG)creadoporLeyNacionalLeyNacional 23.511 23.511tienesumotivacinhistricaenladesaparicinforzadadetienesumotivacinhistricaenladesaparicinforzadade personasocurridadurantelosaos19761983enlaRepblicapersonasocurridadurantelosaos19761983enlaRepblica Argentina,noobstantelocualestaLeycomprendeyalcanzaatodoArgentina,noobstantelocualestaLeycomprendeyalcanzaatodo conflicto relativo a la filiacin de las personas.conflicto relativo a la filiacin de las personas. Desde el ao 1984 hasta la fecha se han extrado en este BNDG muestrasDesde el ao 1984 hasta la fecha se han extrado en este BNDG muestras hemticasde8.000personasfamiliaresdedesaparecidos,nioshemticasde8.000personasfamiliaresdedesaparecidos,nios secuestradosonacidospresuntamenteduranteelcautiveriodesussecuestradosonacidospresuntamenteduranteelcautiveriodesus madresquenosfueranenviadosexclusivamenteporlosJuzgadosmadresquenosfueranenviadosexclusivamenteporlosJuzgados PenalesintervinientesyporlaComisinNacionalporelDerechoalaPenalesintervinientesyporlaComisinNacionalporelDerechoala Identidad.Identidad. LosarchivosdeestapoblacindelBNDGincluyenaaproximadamenteLosarchivosdeestapoblacindelBNDGincluyenaaproximadamente 360gruposfamiliares(ramaspaternasymaternas),lamayoradelos360gruposfamiliares(ramaspaternasymaternas),lamayoradelos cuales integran los registros de la Comisin Nacional por la Desaparicincuales integran los registros de la Comisin Nacional por la Desaparicin dePersonas(CONADEP)antelacualfueronefectuadaslasdenunciasdePersonas(CONADEP)antelacualfueronefectuadaslasdenuncias por la desaparicin de personas a partir del ao 1984. por la desaparicin de personas a partir del ao 1984.BANCO NACIONAL BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOSDE DATOS GENETICOSAlafecha,sehanidentificadoporestudiosgenticosAlafecha,sehanidentificadoporestudiosgenticos realizadosenesteBNDG97menoresyjvenesquedeestarealizadosenesteBNDG97menoresyjvenesquedeesta forma recuperaron su identidad e insercin familiar. forma recuperaron su identidad e insercin familiar. LaactividaddelBNDGhacontinuadoincrementndosedesdeLaactividaddelBNDGhacontinuadoincrementndosedesde lacreacindelaComisinNacionalporelDerechoalalacreacindelaComisinNacionalporelDerechoala Identidad(CONADI)lacualrecepcionalasdenunciasquenoIdentidad(CONADI)lacualrecepcionalasdenunciasqueno fueronpresentadasanteCONADEPycontinaconlafueronpresentadasanteCONADEPycontinaconla investigacindeaquellasquetienensulegajoanteesainvestigacindeaquellasquetienensulegajoanteesa Comisin,comprendiendoapresuntasupresindeestadoComisin,comprendiendoapresuntasupresindeestado civil, trfico de menores, etc. civil, trfico de menores, etc. LaComisinNacionalporelDerechoaIaIdentidaddesdeelLaComisinNacionalporelDerechoaIaIdentidaddesdeel ao 1998 centraliza los estudios para la identificacin genticaao 1998 centraliza los estudios para la identificacin gentica en este BNDG. en este BNDG.BANCO NACIONAL BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOSDE DATOS GENETICOS Artculo 2 - El Director del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS tendr a su cargo las siguientes funciones:Organizar, coordinar y supervisar las actividades cientficas y tcnicas propias.Fijar las pautas y polticas cientficas y tcnicas necesarias para su desarrollo, de acuerdo a lo determinado por la ley.Preparar el presupuesto y clculo de recursos del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS y someterlo a aprobacin de la prioridad.Decreto 700/89 Art. 7 - Los servicios del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS sern prestados en forma gratuita, debiendo los interesados abonar nicamente al mismo, el costo de los reactivos a emplearse para la realizacin del examen respectivo.Estarn exceptuados de abonar los reactivos aludidos en el prrafo anterior, los familiares de nios desaparecidos o supuestamente nacidos en cautiverio o aquellos que acrediten imposibilidad econmica de afrontar el pago de los citados reactivos. Art. 11 - El BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS determinar el da y la hora en que se realizar las pruebas procediendo a notificar dicha circunstancia a los interesados por medio fehaciente.Todo lo concerniente al control de la prueba por las partes como a la intervencin de los consultores tcnicos, se regir por las normas establecidas en los Cdigos Procesales en lo Civil y Comercial y en Materia Penal de la Nacin y Leyes Complementarias.En la fijacin de los turnos para la realizacin de las pruebas, deber respetarse rigurosamente el orden cronolgico de la recepcin de oficios el que no deber ser alterado salvo por la existencia de fuerza mayor o de urgencia derivada de causas graves, las que debern ser debidamente fundadas por el Director General del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS. Art. 13- La Direccin del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS dictar las normas necesarias para garantizar la correccin y veracidad de los estudios y habilitar a los funcionarios responsables de las reas de identificacin de personas, de extraccin, de inmunogentica, de conservacin de muestras y de registro para que den fe de los actos que les corresponda, bajo pena de nulidad.Art. 14 - El BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS no proporcionar informacin a particulares sobre los datos registrados, ni tampoco a entidades pblicas o privadas, cualquiera sea la ndole de las razones alegadas.La informacin almacenada solo ser suministrada por requerimiento judicial, en causa determinada. Artculo 1 - Sustityese el artculo 1 del Decreto N 700 del 24 de mayo de 1989, por el siguiente: ARTICULO 1 - El BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS tendr su asiento en el Hospital General de Agudos Carlos G. DURAND dependiente del GOBIERNO DE LA CIUDAD AUTONOMA DE BUENOS AIRES. La estructura y planta de personal, mbito fsico, mobiliario y equipamiento son los que se detallan en los Anexos I, II y III del convenio a que se refiere el artculo 3 el cual, a todos los efectos, forma parte del presente. El BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS estar bajo la conduccin tcnica y administrativa de un profesional en bioqumica o biologa molecular, con reconocida experiencia en gentica forense, quien desempear el cargo de Director del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS (Ley N 23.511), y tendr su despacho en dependencias del Hospital General de Agudos Carlos G. DURAND. El Director del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS ser seleccionado en concurso pblico de oposicin y antecedentes, que garantice su idoneidad cientfica y la transparencia del proceso de seleccin. DECRETO 511 /09 Art. 2 - Sustityese el artculo 14 del Decreto N 700 del 24 de mayo de 1989, por el siguiente: ARTICULO 14.- El BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS no proporcionar informacin a particulares sobre los datos registrados, ni tampoco a entidades pblicas y/o privadas cualquiera sea la ndole de las razones alegadas. La informacin almacenada slo podr ser suministrada por requerimiento judicial, en causa determinada, a los fines de respaldar las conclusiones de los dictmenes periciales elaborados por el citado Banco para posibilitar su control por los peritos de parte. MARCADORES GENTICOS Y FILIACIN MARCADORES GENTICOS Y FILIACINCondiciones previas al empleo de un sistema1 - La transmisin gentica del sistema debe ser bien conocida2 - Los determinantes genticos deben estar bien desarrollados al nacimiento y permanecer constantes durante toda la vida.3 - La identificacin de los antgenos o de los genes deber ser realizada con mtodos fiables y reproductibles.Caractersticas de MHC - HLA y ADN Ambas investigaciones ya no pertenecen al campo experimental. Los mtodos para su investigacin son controlables, seguros yreproductibles. Existen tablas de frecuencias de antgenos y de genes segn las razas y el lugar geogrfico de la investigacin. MARCADORES GENTICOS Y FILIACIN MARCADORES GENTICOS Y FILIACIN

(CONT...) (CONT...)Caractersticas del ADN Caractersticas del ADN Permite su utilizacin para el estudio de evidencias talesPermite su utilizacin para el estudio de evidencias tales como: manchas, fludos, cabellos, restos cadavricos, etc. como: manchas, fludos, cabellos, restos cadavricos, etc. Las tcnicas de amplificacin (PCR) permiten acceder aLas tcnicas de amplificacin (PCR) permiten acceder a pequeas cantidades de material genmico aunque stepequeas cantidades de material genmico aunque ste se encuentre parcialmente degradado. se encuentre parcialmente degradado. El locus del ADN investigado debe estar revalidado porEl locus del ADN investigado debe estar revalidado por estudios familiares que demuestren que ese locus cumpleestudios familiares que demuestren que ese locus cumple con las Leyes de Mendel y que muestra una bajacon las Leyes de Mendel y que muestra una baja frecuencia de mutaciones. frecuencia de mutaciones. GENTICAFORENSEES UNA RAMA DE LA MEDICINA LEGAL CONSISTE EN LA APLICACIN DE LOS CONOCIMIENTOSDE LA GENTICA A LA RESOLUCIN DE LOS PROBLEMASJUDICIALES 4Posibilidad de analizar caractersticas fsicas a travs de los marcadores genticos SNPs: Que puede Investigarse hoy adems de todo lo que veremos en esta presentacin?SexoColor del pelo: pelirrojo Pigmentacin: Color de los ojos, color de la pielCaractersticas facialesLateralidad (zurdo o diestro).- gen CAPG?? EdadParmetros biomtricos- altura -masa corporal Posibilidad de analizar caractersticas Fsicas: El pelo rojo est regulado por un solo genMelanocortin 1 receptor gene MC1RAlgunas caractersticas faciales pueden ser simples ESTUDIOS PERICIALES : MetodologasI. Tcnicas Inmunoserolgicas a) Aglutinacin-elucin : antgenos ertrocitarios (ABO, Rh-Hr, MNSs, P, Kell, Kidd y Duffy). b) Microlinfocitotoxicidad-doble fluorocromasia: antgenos HLA Clase I. c) Microlinfocitotoxicidad antgenos HLA Clase IIII. Tcnicas de Biologa Molecular1- Genoma Nuclear: ADN Codificante.a) PCR-SSP y PCR-SSO (low-medium y high resolution) Genes MHC Clases I y II.b) PCR-SSOP (high resolution) Genes MHC Clases I y II BANCO NACIONAL BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOSDE DATOS GENETICOS BANCO NACIONAL BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOSDE DATOS GENETICOS Genoma Nuclear : ADN no codificante. (VNTRs)QSin amplificacin: SLPs: Locus D7S21, D7S22, D12S11, D16S309, D4S163 y D2S44.QPCR-Ampli FLP : Locus D1S80.QPCR-STRs : Locus CSF1PO, D3S1358,TPOX, FGA, TH01, D8S1179, vWA, D21S11, D16S539, D7S820, D13S317,D18S51,D5S818, Amelogenina. D2S531 D19 Penta D y Penta EQCromosoma Y PCR-STRs: Locus DYS393, DYS19, DYS389 II , DYS390, DYS391, DYS385, DYS438, DYS439, DYS436,DYS434, DYS435, DYS437, GATA A7.2, GATA A7.1, GATA A4, GATA A10, GATA C4, GATA H4.QGenoma Mitocondrial : Secuenciacin de Region D-Loop, Segmentos Hipervariables HV1 y HV2 La Prueba de ADNConsiste en el anlisis de un nmero determinado de Polimorfismos genticos en una muestra biolgicaEl conjunto de los distintos alelos presentes se denomina PERFIL GENTICOSi se cuenta con el perfil gentico de dos individuos se puede proceder a calcular su ndice de relacin por medio delclculo matemtico estadstico adecuado. ETAPAS DE UN ESTUDIO PERICIALOEtapa PreanaliticaOEtapa analiticaOEtapa postanalitica ETAPAS DE UN ESTUDIO PERICIALOEtapa PreanaliticaOEtapa analiticaOEtapa postanalitica De que depende el xito de la pericia? Bolsas tipo ziploc o papel maderaguantesPrecauciones durante el proceso de recogida y envo de muestras al laboratorio TOMA DE MUESTRAS DE REFERENCIAQSANGREQCLULAS EPITELIALESBUCALES Material esteril Taco de Globulos BlancosADN en condiciones de ser ADN en condiciones de ser utilizadoutilizadoHLAADN MitocondrialSTRsCromosoma XCromosoma YAutosmicosAlmacenamiento Todas las muestras que se tomen del cadver deben ser congeladasJAMS debern ser colocadas en formol.Si se realiza la toma de muestra inmediatamente despus del fallecimiento se podr acceder a un fragmento de Hgado o msculo esqueltico, en caso contrario se acceder a hueso o dientes-Toma de Muestra en Sala de Autopsia Muestras indubitadas en cadaveres en buen estado de conservacin QSangre Postmortem:QSe toma una muestra de 10 ml de sangre en EDTAal 5% QMsculo esqueletico:QSe seleccionan dos fragmentos de msculo esqueletico de unos 10 g de peso se coloca en un recipiente plstico con boca ancha y tapa a roscaQMsculo cardiacoQ4 piezas dentalesMuestras indubitadas en cadaveres en avanzado estado de putrefaccin o esqueletizadosHuesos: preferentemente huesos largosDientes: 4 piezas dentarias que no esten externamente daados ni hayan sido sometidos a endodoncias. Otras Muestras de referencia en personas fallecidasAnlisis de restos biolgicos existentes en centros hospitalarios: sangre, biopsias, preparaciones histologicasAnlisis de restos biolgicos del fallecido que an permanezcan en el ambito familiar: maquinas de afeitar, peines, cepillos de dientes, ropas usadas. Restos CadavericosRestos CadavericosEn buen estado de conservacinEn buen estado de conservacin: si se trata de : si se trata de tejido muscular se coloca el mismo en un frasco tejido muscular se coloca el mismo en un frasco estril de boca ancha sin lquido fijador. Si se estril de boca ancha sin lquido fijador. Si se trata de viceras se eligen las que estn mejor trata de viceras se eligen las que estn mejor conservadas: ej: coraznconservadas: ej: coraznCarbonizadoCarbonizado:: se procesa lo que se encuentre se procesa lo que se encuentre sin haberse carbonizadosin haberse carbonizadoEn mal estado de conservacinEn mal estado de conservacin:: se elige huesos se elige huesos largos y piezas dentarias.largos y piezas dentarias.Restos Fetales y PlacentariosSe colocan en un frasco estril sin lquido fijador Recogida de Indicios Biolgicos en el lugar de los hechosManchas secasIndicios hmedosIndicios lquidos Pelos dubitadosRestos cadavericosRestos fetales y Placentarios En Espaa esta labor la realizan los mdicos forenses y la Polica Judicial, sin perjucio de que el Juez Instructor pueda solicitar la colaboracin de otros expertos calificados de acuerdo a la Ley de Enjuiciamiento Criminal. Este Personal debe tener formacin, conocimiento tcnico y experiencia adecuada para el desempeo de estas funciones por lo cual se realizan programas de formacin y entrenamiento en estas reas. Indicios LquidosIndicios LquidosSemen: oLos preservativos con semen lquido se atan y se coloca enun frasco estriloSemen en escasa cantidad: se deber tomar con un hisopo estrilPelos Dubitados: oSe toman con una pinza limpia colocando cada pelo o grupo de pelos en un papel pequeo y luego se introduce en una bolsa de papel pequea. Indicios HmedosRopas u otros objetos con indicios hmedos: se dejarn secar en un lugar protegido sobre una superficie limpiaIndicios Lquidos-Sangre en gran cantidad: se debe tomar con una pipeta de plstico estril y colocarla en un tubo con EDTA al 5%-Sangre en escasa cantidad: se deber tomar con un hisopo estril-Sangre coagulada: se deber tomar con una cucharita de plstico e introducirla en tubo o frasco estril Manchas secas en muestras pequeas y de fcil transporteManchas secas en muestras pequeas y de fcil transporteArmas blancas: se colocan por separado en cajas de cartnLlaves, monedas, joyas: con pinzas se colocan en bolsas de papelPiedras, ramas y hojas: idem anteriorBilletes, papeles, cartones pequeos: idem Manchas secas en muestras grandes no TransportablesSoportes no absorbentes (cristales, metales) puedo proceder as: A) Frotando con un hisopo estril ligeramentemojado en agua destilada B) Raspando la mancha con un bistur sobre un papelSoportes absorbentesTelas, alfombras, se recorta la mancha con un bistur o una tijera y se coloca en una bolsa de papel. Manchas secas en muestras pequeas y de fcil transporteColillas: deben tomarse con pinzas limpias e introducirse por separado en bolsas de papelChicles: deben tomarse con pinzas limpias e introducirse en envases de plstico duroSobres y sellos: sin despegarse se recogen con pinzas y se introducen en bolsas de papel o plstico Proteccin de las MuestrasContaminacin por material biolgico humano: Se debe al depsito de material biolgico humano en el lugar de los hechos y/o en el cuerpo de la vctima con posterioridad a la produccin del delito.Puede estar causada por personas ajenas a la investigacin (curiosos o familiares) o personas que colaboran en la investigacin y que de forma accidental o desconocimiento producen la contaminacin. Documentacin en casos de Inters criminalDocumentacin en casos de Inters criminalDocumentacin necesaria:Formulario de envo de muestras: en este formulario debe constara) La investigacin solicitadab) Antecedentes y datos de inters sobre la causa c) Causa de los hechos, lugar, fecha instrumento utilizado en la agresin, si hay cadaver: antigedad, conservacind) Datos de la vctima:e) Edad, sexo, grupo poblacional, existencia de lesiones, traumatismos heridas, relacin con el sospechoso Documentacin en casos de Documentacin en casos de Inters criminalInters criminalDatos del o los sospechosos:Edad, sexo, grupo poblacional, existencia de lesiones, traumatismos, heridas. Documentacin Recomendable4Informe Preliminar de autopsia4Informe clnico4Informe o datos de la inspeccin ocular4Localizacin de las muestras o indicios biolgicos4Fotografa de los indicios biolgicosIdentificacin de las muestrasIdentificacin de las muestrasListado de los indicios Biolgicos:Nmero de referencia de la muestraTipo de muestra con una descripcin breve (hisopado vaginal, camisa azul )A quin pertenece (victima, imputado/s)Tipo de indicio en concreto que debe estudiarse (semen, sangre, saliva etc) -Nombre o identificacin y firma de las Nombre o identificacin y firma de las personas responsables de la recogida de personas responsables de la recogida de muestrasmuestras-Fecha y hora de la toma de muestrasFecha y hora de la toma de muestras-Condiciones de almacenaje de las muestras Condiciones de almacenaje de las muestras hasta el envo al Laboratoriohasta el envo al Laboratorio De la correcta recoleccin de las muestras y de la elaboracin del Documento de cadena de custodiaEste es el principio de la Prueba Forense AGRESIONES SEXUALES Documentacin requeridaDatosdelavctima:Edad,sexo,grupopoblacional, relacionessexualesprximasalaagresin,usode productosvaginales,datosdelreconocimiento ginecologicoDatosdelaagresin:lugardeloshechos,fechay horadeloshechos,penetracin(vaginal,analy/o bucalRelacin de parentesco vctima-agresorSi hubo uso de preservativos TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS EN EL CUERPO DE LA VICTIMAManchasde sangre, semen u otros fludos biolgicosSaliva en marcas de mordedurasUasPelos dubitadosManchasde sangre, semen u otros fludos biolgicosTomar la mancha con un hisopo estril ligeramente mojado en agua destilada. Limpiar toda el rea presionando suavemente y si es posible con un solo hisopo Toma de indicios BiolgicosToma de indicios Biolgicos2 tomas bucales 2 tomas bucales: con hisopo estril : con hisopo estrilSe buscarn manchas de semen o saliva as comoSe buscarn manchas de semen o saliva as como posibles mordeduras posibles mordedurasPeinado de vello pbico Peinado de vello pbico2 tomas cervicales, 2 tomas vaginales, y 1 toma de2 tomas cervicales, 2 tomas vaginales, y 1 toma de genitales externos genitales externosLavado vaginal Lavado vaginal: Luego del hisopado se utilizarn: Luego del hisopado se utilizarn 10 ml10 ml de suero fisiolgico estril de suero fisiolgico estril que se recoge en un frascoque se recoge en un frasco plsticoplstico Toma de indicios BiolgicosO2 tomas anales y toma del margen anal: mediante hisopos estriles OLas ropas vestidas por la vctima en el momento de la agresin: debe envolverse por separado en papelORecogida de muestras indubitadas:Muestras indubitadas de la vctimaMuestras indubitadas del sospechosoSaliva en marcas de Saliva en marcas de mordedurasmordeduras Tomar la mancha con un hisopo estril ligeramente mojado en agua destilada. Limpiar de forma circular la marca dejada por los dientes y toda el rea interior que delimita.Uas y Pelos DubitadosUas: primero tomar con una pinza todo indicio que se pueda visualizar y guardarlo en frasco estril luego cortar las uas y almacenarlas en otro frasco estrilPelos: deben ser tomados con una pinza colocados sobre papel pequeo y luego en un sobre de papel SISTEMAS DE EMPAQUETADO Y PRESERVACIN DE MUESTRASIdentificacin de las muestrasCadena de custodiaSistemas de empaquetado Sistemas de empaquetado y preservacin de muestras Los indicios lquidos, los tejidos blandos y rganos y los indicios hmedos (si estos ltimos no se dejan secar)se deben mantener y enviar refrigerados Identificacin de las muestras:El nmero de referencia de la muestraTipo de muestraA quien pertenece y/o localizacin Sistemas de empaquetado y Sistemas de empaquetado y preservacin de muestraspreservacin de muestrasoFrascos o recipientes con indicios lquidos o con rganos, tejidosFrascos o recipientes con indicios lquidos o con rganos, tejidos blandosblandosoHisopos estriles en seco: Hisopos estriles en seco: Los hisopos sern empaquetados enLos hisopos sern empaquetados en cajas de cartn pequeas en estos recipientes los hisopos estncajas de cartn pequeas en estos recipientes los hisopos estn protegidos y se secan totalmente. protegidos y se secan totalmente.oMuestras con manchas secas Muestras con manchas secas: Cada muestra ser colocada sobre: Cada muestra ser colocada sobre un papelun papel oPelos dubitados: Pelos dubitados:Deben ser recogidos en papeles pequeos que Deben ser recogidos en papeles pequeos que sern doblados y luego introducidos en bolsas precintadas ysern doblados y luego introducidos en bolsas precintadas y correctamente identificadas. Enviar al laboratorio sin refrigerar correctamente identificadas. Enviar al laboratorio sin refrigerar Recepcin de Muestras en el LaboratorioNormas de recepcin de muestras Normas de Normas de recepcinrecepcin de muestrasde muestras-Recibir las muestras y rellenar la hoja de custodia dondeRecibir las muestras y rellenar la hoja de custodia donde debe constar debe constar-Nombre de la persona que entrega las muestras Nombre de la persona que entrega las muestras-Nombre de la persona que recibe las muestras Nombre de la persona que recibe las muestras-Fecha y hora de entrega Fecha y hora de entrega-Empresa que realiza el transporte Empresa que realiza el transporte-Chequear el nmero de referencia de cada muestra Chequear el nmero de referencia de cada muestra-Comprobar que todas las muestras estn empaquetadas y que losComprobar que todas las muestras estn empaquetadas y que los precintos estn integros precintos estn integros ConclusionesQEs fundamental la recoleccin de muestras y su almacenamientoQEs absolutamente imprescindible que se mantega la cadena de seguridad para todas las etapas de la periciaQEl Laboratorio que realizar la pericia deber cumplir con todo lo pautado: infraestructura, tecnologa y materiales necesarios para la pericia. Etapa AnalticaEtapa AnalticaLas Muestras en poder del Laboratorio pericial A.D.N: Acido desoxirribonucleico A.D.N: Acido desoxirribonucleico. . Genes: Son tramos funcionales del ADN. Genes: Son tramos funcionales del ADN. Locus: posicin de un gen sobre un cromosoma (pluralLocus: posicin de un gen sobre un cromosoma (plural Loci Loci). ). Alelos: formas alternativas o variantes de un locus Alelos: formas alternativas o variantes de un locus. . Homocigota:los dos alelos (materno y paterno ) soniguales. Homocigota:los dos alelos (materno y paterno ) soniguales. Heterocigota: los dos alelos (materno y paterno ) son distintos. Heterocigota: los dos alelos (materno y paterno ) son distintos. Polimorfismo gentico:variabilidad entre personas, es decirPolimorfismo gentico:variabilidad entre personas, es decir mltiples alelos para un mismo locus en distintas personas. mltiples alelos para un mismo locus en distintas personas.Sources of Biological EvidenceBloodSemenSalivaUrineHairTeethBoneTissue Cantidad de ADN obtenidoCantidad de ADN obtenidoTipo de muestra ADN esperadoTipo de muestra ADN esperadoSangre total 20-40 g/mlSangre total 20-40 g/mlSemen 150-450 g/ml (1-3 pg/cel.)Semen 150-450 g/ml (1-3 pg/cel.)Pelo con bulbo 1-750 ng/bulboPelo con bulbo 1-750 ng/bulboSaliva 1-10 g/mlSaliva 1-10 g/mlOrina 1-20 ng/mlOrina 1-20 ng/mlHgado 15 g/mgHgado 15 g/mgMsculo-Piel 3 g/mgMsculo-Piel 3 g/mgHuesos 3-10 ng/mgHuesos 3-10 ng/mg Muestras en soportes no absorbentes Eleccin de la tcnica de Eleccin de la tcnica de extraccin de ADNextraccin de ADNExtraccin con solventes Organicos: sobre todo en muestras con escasa cantidad de ADN y sobre todo si ellas proceden de material graso.Extraccin Diferencial: para muestras procedentes de una violacin (masculina-femenina) separa ambos componentes Eleccin de la tcnica de Eleccin de la tcnica de extraccin de ADNextraccin de ADN cont. cont. Pelo: es de difcil extraccin la melanina hidrosoluble forma un complejo con la enzima polimerasa inhibiendo la PCR Uas: para encontrar material procedente de otro individuo hace falta una presion de 1.2 gr que rara vez se logra con un rasguo. REAL TIME Se Extraen dos fracciones de cerdas en dos recipientes distintos.Se recolecto en bolsas tipo Ziploc Se corta de la Prenda usada una fraccin que visualmente presente zonas de roce o manchas Se puede fraccionar esa regin en dos o mas tubos distintos FTA cards. Se recorta o con Punch o con bistur una fraccin de la mancha Mancha ya recortada Ropa intima femenina recortada Media parte posterior del taln (se saca una parte del gnero y se corta y fracciona en varios eppendorf) HISTOCOMPATIBILIDAD Evolucion tcnica Biologia MolecularSerologia 2.- ESTUDIO DE ANTIGENOS DE HISTOCOMPATIBILIDAD 2.- ESTUDIO DE ANTIGENOS DE HISTOCOMPATIBILIDADLOCUS LOCUSLOCI LOCITitular Titular Padre Alegado Padre Alegado Abuela Materna Alegada (fallecida) Abuela Materna Alegada (fallecida)FENOTIPO FENOTIPOGENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO FENOTIPOGENOTIPO MAS ROBABLE GENOTIPO MAS ROBABLEClase I Clase IABC ABC A03011-05 A03011-05A11011-03/05/06 A11011-03/05/06B4101/02/03 B4101/02/03B5801-04/05 B5801-04/05A03011-05 - B4101/02/03 A03011-05 - B4101/02/03A11011-03/05/06 A11011-03/05/06B5801-04/05 B5801-04/05 A03011-05 - B5801-04/05 A03011-05 - B5801-04/05A11011-03/05/06 A11011-03/05/06 -- B4101/02/03 B4101/02/03A11011-03/05/06 A11011-03/05/06A31012-04 A31012-04B07021/022/023/03-06/07- B07021/022/023/03-06/07-10/15/17 10/15/17B5801-04/05 B5801-04/05A11011-03/05/06 -A11011-03/05/06 - B07021/022/023/03-06/07-10/15/17 B07021/022/023/03-06/07-10/15/17 A31012-04 -A31012-04 - B5801-04/05 B5801-04/05 A11011-03/05/06 A11011-03/05/06 B5801-04/05B5801-04/05 A31012-04 A31012-04B07021/022/023/03-06/07-10/15/17 B07021/022/023/03-06/07-10/15/17A03011-05 A03011-05A11011-03/05/06 A11011-03/05/06B07021/022/023/03-06/07- B07021/022/023/03-06/07-10/15/-17 10/15/-17B3501-04/06- B3501-04/06-092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/ 092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/29/30/33 29/30/33A11011-03/05/06 - B3501-04/06- A11011-03/05/06 - B3501-04/06-092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/ 092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/29/30/33 29/30/33A03011-05 -A03011-05 - B07021/022/023/03-06/07- B07021/022/023/03-06/07-10/15/-17 10/15/-17 LOCUS LOCUSLOCI LOCITo Materno Alegado To Materno AlegadoTa Materna Alegada 1 Ta Materna Alegada 1Ta Materna Alegada 2 Ta Materna Alegada 2FENOTIPO FENOTIPOGENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO MASGENOTIPO MAS PROBABLE PROBABLEClase I Clase IABC ABC A3, A11; A3, A11;B35, B41 B35, B41A3-B41 A3-B41 / A11-B35 / A11-B35 A03011-05 A03011-05B07021/022/023/ 03-06/07- B07021/022/023/ 03-06/07-10/15-17 10/15-17B4101/02/03 B4101/02/03A03011-05 - A03011-05 - B4101/02/03 B4101/02/03A03011-05 -A03011-05 - B07021/022/023/03-06/07- B07021/022/023/03-06/07-10/15-17 10/15-17 A11011-03/05/06 A11011-03/05/06A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14B3501-04/06- B3501-04/06-092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/ 092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/29/30/33 29/30/33B3801-022/04 B3801-022/04A11011-03/05/06 - A11011-03/05/06 - B3501-04/06- B3501-04/06-092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/ 092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/29/30/33 29/30/33A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 - B3801-022/04 - B3801-022/04 LOCUS LOCUSLOCI LOCITa Abuela Paterna Materna Alegada 1 Ta Abuela Paterna Materna Alegada 1 Ta Abuela Paterna Materna Alegada 2 Ta Abuela Paterna Materna Alegada 2 Ta Abuela Paterna Materna Alegada 3 Ta Abuela Paterna Materna Alegada 3FENOTIPO FENOTIPOGENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO MASGENOTIPO MAS PROBABLE PROBABLEClase I Clase IABC ABC A03011-05 A03011-05A2601/02/04/05/08/09/11N/ A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 12/14B3801-022/04 B3801-022/04B4101/02/03 B4101/02/03A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 B3801-022/04 B3801-022/04A03011-05 A03011-05 B4101/02/03 B4101/02/03A2601/02/04/05/08/09/11N/12/ A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 14B1501101/01102N/013/04- B1501101/01102N/013/04-07/20/25-27/28/32-35/38-40/50 07/20/25-27/28/32-35/38-40/50B3801-022/04 B3801-022/04A2601/02/04/05/08/09/11N/12/ A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 - B1501101/01102N/013/04- 14 - B1501101/01102N/013/04-07/20/25-27/28/32-35/38-40/50 07/20/25-27/28/32-35/38-40/50A2601/02/04/05/08/09/11N/12/ A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 - B3801-022/04 14 - B3801-022/04 A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14B1501101/01102N/013/04- B1501101/01102N/013/04-07/20/25-27/28/32-35/38-40/50 07/20/25-27/28/32-35/38-40/50B3801-022/04 B3801-022/04A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 - B3801-022/04 - B3801-022/04A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 - B1501101/01102N/013/04- - B1501101/01102N/013/04-07/20/25-27/28/32-35/38-40/50 07/20/25-27/28/32-35/38-40/50 MARCADORES GENETICOS1.-ESTUDIO DE ANTIGENOS ERITROCITARIOSSISTEMATitular Padre Alegado Abuela Materna Alegada (fallecida)FENOTIPOGENOTIPO MAS PROBABLEFENOTIPO GENOTIPO MAS PROBABLE FENOTIPOGENOTIPO MAS PROBABLEABO O --- O --- O ---Rh / Hr CDce CDe/cde R1/r CDe CDe / CDeR1 / R1 CDEce CDE/cdeRz / rMNSs MSs MS / Ms Ms Ms / Ms MS MS / MSP P1 --- P1 --- P1 ---KELL CELLANOKk K / k k k / k k k / kKIDD Jk (a-b+) Jkb / Jkb Jk (a-b+) Jkb / Jkb Jk (a-b+) Jkb / JkbDUFFY Fy (a-b+) Fyb / Fyb Fy (a+b+) Fya / FybFy (a-b+) Fyb / FybSISTEMATo Materno AlegadoTa Materna Alegada 1Ta Materna Alegada 2FENOTIPOGENOTIPO MAS PROBABLEFENOTIPO GENOTIPO MAS PROBABLE FENOTIPOGENOTIPO MAS PROBABLEABO A2 --- B --- A2Rh / Hr CDEc CDE/cDERz/R2 CDEce CDE / cdeRz / r ce cde/cde r / rMNSs MSs MS / Ms --- --- MSs MS / MsP P1 --- P1 P1KELL CELLANOK k K / k K k K / k K k K / kKIDD Jk (a+b+) Jka / Jkb Jk (a+b+) Jka / Jkb Jk (a+b+) Jka / JkbDUFFY Fy (a-b+) Fyb / Fyb Fy (a-b+) Fyb / Fyb Fy (a-b+) Fyb / FybSISTEMATa Abuela Paterna Materna Alegada 1Ta Abuela Paterna Materna Alegada 2Ta Abuela Paterna Materna Alegada 3FENOTIPOGENOTIPO MAS PROBABLEFENOTIPO GENOTIPO MAS PROBABLE FENOTIPOGENOTIPO MAS PROBABLEABO --- --- --- --- --- ---Rh / Hr --- --- --- --- --- ---MNSs --- --- --- --- --- ---P --- --- --- --- --- ---KELL CELLANO --- --- --- --- --- ---KIDD --- --- --- --- --- ---DUFFY --- --- --- --- --- ---A25 B44 A25 B44A31 B51 A31 B51DR7 DR7DR8 DR8DQ2/ DQ3 DQ2/ DQ30 0cDE/cDE R2/R2 cDE/cDE R2/R2P1 P1Ms/Ms Ms/Msk/k k/kJkb/Jkb Jkb/JkbFya/Fyb Fya/FybA2 B48 A2 B48A29 B44 A29 B44DR8 DR8DRX DRXDQ4DQ4 / DQX/ DQX 0 0cDE / cDER2/R2 cDE / cDER2/R2P1 P1Ns/Ns Ns/Nsk/k k/kJKb/JKb JKb/JKbFyb/FybFyb/Fyb 8 8A2 B48 A2 B48A31 B51 A31 B51DR8 DR8DR8 DR8DQ4 DQ4DQ3 DQ30 0cDE/cDE R2/R2 cDE/cDE R2/R2P1 P1Ms/Ns Ms/Nsk/k k/kJkb/Jkb Jkb/JkbFya/Fyb Fya/FybA29 B44 A29 B44A31 B51 A31 B510 0cDE/cDE R2/R2 cDE/cDE R2/R2P1 P1Ms/Ns Ms/Nsk/k k/kJkb/Jkb Jkb/JkbFya/Fyb Fya/Fyb2 21 19 91) abuelo paterno alegado. 1) abuelo paterno alegado.2) abuela paterna alegada. 2) abuela paterna alegada.3) abuelo materno alegado. 3) abuelo materno alegado.4) abuela materna alegado. 4) abuela materna alegado.5) padre alegado desaparecido. Informacin gentica deducida. 5) padre alegado desaparecido. Informacin gentica deducida.6) madre alegada desaparecida. Informacin gentica deducida. 6) madre alegada desaparecida. Informacin gentica deducida.7) ta paterna alegada. 7) ta paterna alegada.8) ta paterna alegada. 8) ta paterna alegada.9) ta paterna alegada. 9) ta paterna alegada.10) ta materna alegada. 10) ta materna alegada.11) nieta alegada. 11) nieta alegada.A29 B44 A29 B44A31 B51 A31 B510 0cDE/cDE R2/R2 cDE/cDE R2/R2P1 P1Ms/Ns Ms/Nsk/k k/kJkb/Jkb Jkb/JkbFyb/Fyb Fyb/Fyb7 7A29 B44A29 B44 A25 B44 A25 B44A2 B48 A2 B48 A25 B44 A25 B44A29 B44 A29 B44A31 B51A31 B51 A2 B48 A2 B48A31 B51 A31 B51DR8 DR8 DR7 DR7 DR8 DR8 DR8 DR8DRX DRXDR7 DR7DRX DRXDR8 DR8DQ4 DQ4DQ2 DQ2DQ4 DQ4DQ3 DQ3 DQX DQXDQ2 DQ2 DQX DQXDQ3 DQ35 5A2 B48 A2 B48A2 B35 A2 B35DR8 DR8DR4 DR4DQ4 DQ4DQ3 DQ30 0CDE/CDE R1/R2 CDE/CDE R1/R2Ns/Ns Ns/Nsk/k k/kJka/Jkb Jka/JkbFya/Fya Fya/Fya11 11A1 B37 A1 B37A2 B7 A2 B7DR15 DR15DR4 DR4DQ3/DQ6 DQ3/DQ6A1 A1Cde/cDE R0/R2 Cde/cDE R0/R2P1 P1Ns/Ns Ns/Nsk/k k/kJka/Jkb Jka/JkbFya/Fyb Fya/FybA2 B35 A2 B35A31 B51 A31 B51DR4 DR4DR8 DR8DQ3 /DQ3 / DQ3 DQ30 0CDe/cde R1/r CDe/cde R1/rMs/Ns Ms/Nsk/k k/kJka/Jkb Jka/JkbFya/FyaFya/Fya 3 34 4A2 B48 A2 B48A2 B35 A2 B35DR8 DR8DR4 DR4DQ4 DQ4DQ3 DQ30 0CDE/CDE R1/R2 CDE/CDE R1/R2Ns/Ns Ns/Nsk/k k/kJka/Jkb Jka/JkbFya/Fya Fya/FyaA1 B37A1 B37 A31 B51 A31 B51A1 B37A1 B37 A2 B35 A2 B35A2 B7 A2 B7A31 B51 A31 B51A2 B7 A2 B7A2 B35 A2 B35 DR15 DR15 DR8 DR8DR15DR15 DR4 DR4DR4 DR4DR8 DR8 DR4 DR4DR4 DR4DQ3DQ3 DQ3 DQ3DQ3 DQ3 DQ6DQ6 11 116 610 10A1 B37 A1 B37A31 B51 A31 B51DR 15 DR 15DR8 DR8DQ3 / DQ6 DQ3 / DQ6A1 A1cDE/cDER0/r cDE/cDER0/rNs/Ns Ns/Nsk/k k/kJka/Jkb Jka/JkbFya/Fya Fya/Fya1) abuelo paterno alegado. 1) abuelo paterno alegado.2) abuela paterna alegada. 2) abuela paterna alegada.3) abuelo materno alegado. 3) abuelo materno alegado.4) abuela materna alegado. 4) abuela materna alegado.5) padre alegado desaparecido. Informacin gentica deducida. 5) padre alegado desaparecido. Informacin gentica deducida.6) madre alegada desaparecida. Informacin gentica deducida. 6) madre alegada desaparecida. Informacin gentica deducida.7) ta paterna alegada. 7) ta paterna alegada.8) ta paterna alegada. 8) ta paterna alegada.9) ta paterna alegada. 9) ta paterna alegada.10) ta materna alegada. 10) ta materna alegada.11) nieta alegada. 11) nieta alegada. Marcadores VNTRs y STRsHerencia Mendeliana o al Azar OPrimera ley, o Principio de la segregacin.OSegunda ley, o Principio de la transmisin independiente.Gregor Johann MendelLEYES DE MENDELA aB AB aBb Ab abPADREMADRE STRs AUTOSOMICOS EN ESTUDIOS DE FILIACIN En procesos de Filiacin: Paternidad, En procesos de Filiacin: Paternidad, Maternidad y otrosMaternidad y otros..En Criminalstica.En Criminalstica.En identificacin de cadveres y/o restos En identificacin de cadveres y/o restos cadavricos.cadavricos.ESTUDIOS DE ADN APLICACIN FORENSE 1900-1950: Grupos sanguneos o Antgenos Eritrocitarios (ABO, Rh) 1947-1960:Protenas Plasmticas (Haptoglobina,Transferrina,Factores del Complemento, etc).1965-1980: Enzimas Eritrocitarias (GPT, PGM, etc).1980: Sist. HLA o Complejo Mayor de Histocompatibilidad1985: Polimorfismos del ADN.Huella Digital Gentica o FingerprintSTRs EVOLUCION HISTORICA DE LOS ESTUDIOS DE FILIACIONUnidades de repeticin de 2 a 7 pb.Altamente polimrficas.Pueden ser analizados por tcnicas de amplificacin (PCR). Escasa muestra Muestras parcialmente degradadas PCR MultiplexREPRESENTACION GRAFICA DE LOS STRs Grupo Espaol Portugus de la ISFGhttp://www.isfg.org/ Ubicacin en cromosomas diferentesUbicacin en cromosomas diferentes..Alta reproducibilidad en los resultadosAlta reproducibilidad en los resultados..Escasa o nula tendencia a produccin de Escasa o nula tendencia a produccin de artefactos ( STRs tetramricos).artefactos ( STRs tetramricos).Bajo ndice de mutacinBajo ndice de mutacin..Rango de longitud allica de 90-500 pb.Rango de longitud allica de 90-500 pb.STRs AUTOSOMICOSRequisitos para ser aplicados en Gentica Forense Nmero de unidades de repeticin completas. Nmero de unidades de repeticin completas.Nmero de unidades de repeticin completas, separacinNmero de unidades de repeticin completas, separacin con un punto y nmero de unidades de repeticincon un punto y nmero de unidades de repeticin incompletas. incompletas.STRs: Nmero de loci STRs: Nmero de lociActualmente se recomienda el estudio deActualmente se recomienda el estudio de por lo menos 13por lo menos 13 lociloci autosmicos. autosmicos.STRs NOMENCLATURA cromosoma TERMOCICLADOR REACCION EN CADENA DE LA POLIMERAZA (PCR) SECUENCIADOR AUTOMATICO ABI 3100 ABI 3100 TECNOLOGIA ELECTROFEROGRAMALADDER ALELICOALELOS INVESTIGACION DE LA PATERNIDAD ADN NUCLEAR amelogeninD19D3D8TH01VWAD21FGAD16D18 D2amelogeninD19D3D8TH01VWAD21FGAD16D18D2Two different individualsDNA Size (base pairs)Results obtained in less than 5 hours with a spot of blood the size of a pinheadResults obtained in less than 5 hours with a spot of blood the size of a pinheadprobability of a random match: ~1 in 3 trillionprobability of a random match: ~1 in 3 trillion Human Identity Testing with Multiplex STRsSimultaneous Analysis of 10 STRs and Gender IDAmpFlSTR SGM Plus kit 1 D8S117915-15 13-15 13-152 D21S1128-30 30-31 30-313 D7S820 8-11 12-12 12-124 CSF1PO 10-12 11-13 12-135 D3S1358 16-18 16-17 17-186 TH01 7-9 6-7 6-67 D13S317 10-12 10-12 10-118 D16S539 9-12 9-11 9-159 D2S1338 24-25 16-17 17-2310 D19S433 13-13 12-13.2 12-1411 VWA 19-19 18-18 18-1812 TPOX11-11 11-11 10-1113 D18S51 13-13 13-17 13-1514 D5S818 10-13 11-11 11-1215 FGA 19-22 20-24 20-2516 Amelogenina X-Y X-X X-X Padre HijoMadre Investigacin de Paternidad : TRO 1 D8S117915-15 13-15 13-152 D21S1128-30 30-31 30-313 D7S820 8-11 12-12 12-124 CSF1PO 10-12 11-13 12-135 D3S1358 16-18 16-17 17-186 TH01 7-9 6-7 6-67 D13S317 10-12 10-12 10-118 D16S539 9-12 9-11 9-159 D2S1338 24-25 16-17 17-2310 D19S433 13-13 12-13.2 12-1411 VWA 19-19 18-18 18-1812 TPOX11-11 11-11 10-1113 D18S51 13-13 13-17 13-1514 D5S818 10-13 11-11 11-1215 FGA 19-22 20-24 20-2516 Amelogenina X-Y X-X X-X Padre HijoMadreInvestigacin de Paternidad : TRO 1 D8S117915-15 13-15 13-152 D21S1128-30 30-31 30-313 D7S820 8-11 12-12 12-124 CSF1PO 10-12 11-13 12-135 D3S1358 16-18 16-17 17-186 TH01 7-9 6-7 6-67 D13S317 10-12 10-12 10-118 D16S539 9-12 9-11 9-159 D2S1338 24-25 16-17 17-2310 D19S433 13-13 12-13.2 12-1411 VWA 19-19 18-18 18-1812 TPOX11-11 11-11 10-1113 D18S51 13-13 13-17 13-1514 D5S818 10-13 11-11 11-1215 FGA 19-22 20-24 20-2516 Amelogenina X-Y X-X X-XPadreHijoMadreInvestigacin de Paternidad : TRO 1 D8S117915-15 13-15 13-152 D21S1128-30 30-31 30-313 D7S820 8-11* 12-12 12-124 CSF1PO 10-12* 11-13 12-135 D3S1358 16-18 16-17 17-186 TH01 7-9 6-7 6-67 D13S317 10-12 10-12 10-118 D16S539 9-12 9-11 9-159 D2S1338 24-25* 16-17 17-2310 D19S433 13-13* 12-13.2 12-1411 VWA 19-19* 18-18 18-1812 TPOX11-11 11-11 10-1113 D18S51 13-13* 13-17 13-1514 D5S818 10-13* 11-11 11-1215 FGA 19-22* 20-24 20-2516 Amelogenina X-Y X-X X-X Padre HijoMadreInvestigacin de Paternidad : TRO El Hijo comparte con su madre biolgica el 50% de los marcadores STRs estudiados.El Padre Alegado NO comparte 8 de los 15 marcadores STRs autosmicos investigados.El Padre Alegado queda excludo de ser el padre biolgico del Hijo.CONCLUSIONES 1 D8S117915-15 13-152 D21S1128-30 30-313 D7S820 8-11 12-124 CSF1PO 10-12 11-135 D3S1358 16-18 16-176 TH01 7-9 6-77 D13S317 10-12 10-128 D16S539 9-12 9-119 D2S1338 24-25 16-1710 D19S433 13-13 12-13.211 VWA 19-19 18-1812 TPOX11-11 11-1113 D18S51 13-13 13-1714 D5S818 10-13 11-1115 FGA 19-22 20-2416 Amelogenina X-Y X-XPadreHijoInvestigacin de Paternidad : Do 1 D8S117915-15 13-152 D21S1128-30 30-313 D7S820 8-11* 12-124 CSF1PO 10-12* 11-135 D3S1358 16-18 16-176 TH01 7-9 6-77 D13S317 10-12 10-128 D16S539 9-12 9-119 D2S1338 24-25* 16-1710 D19S433 13-13* 12-13.211 VWA 19-19* 18-1812 TPOX11-11 11-1113 D18S51 13-13 13-1714 D5S818 10-13* 11-1115 FGA 19-22* 20-2416 Amelogenina X-Y X-X Padre HijoInvestigacin de Paternidad : Do Debido a que se carece del perfil gentico de la madre NO es posible definir en el Hijo el haplotipo materno.En consecuencia, tampoco es posible definir los genes obligados paternos.El Padre Alegado NO comparte 7 de los 15 marcadores STRs autosmicos investigados.El Padre Alegado queda excludo de ser el padre biolgico del Hijo.CONCLUSIONES 1 D8S117915-15 13-15 13-152 D21S1128-30 30-31 30-313 D7S820 8-11 12-12 12-124 CSF1PO 10-12 11-13 12-135 D3S1358 16-18 16-17 17-186 TH01 7-9 6-7 6-67 D13S317 10-12 10-12 10-118 D16S539 9-12 9-11 9-159 D2S1338 24-25 16-17 17-2310 D19S433 13-13 12-13.2 12-1411 VWA 19-19 18-18 18-1812 TPOX11-11 11-11 10-1113 D18S51 13-13 13-17 13-1514 D5S818 10-13 11-11 11-1215 FGA 19-22 20-24 20-2516 Amelogenina X-Y X-X X-X PadreHijoMadre 1 D8S117913-13 13-16 13-162 D21S1130.2-28 30-30.2 30-303 D7S820 8-12 8-12 10-124 CSF1PO 11-13 12-13 11-125 D3S1358 18-18 18-18 16-186 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.37 D13S317 9-11 8-9 8-128 D16S539 9-11 11-11 10-119 D2S1338 19-20 17-20 17-2510 D19S433 12-16 12-14 13-1411 VWA 16-17 17-17 17-1712 TPOX11-11 8-11 8-1113 D18S51 12-15 13-15 13-1314 D5S818 11-12 12-13 11-1315 FGA 19-25 24-25 21-2416 Amelogenina X-Y X-Y X-X Padre HijoMadre 1 D8S117913-13 13-16 13-162 D21S1130.2-28 30-30.2 30-303 D7S820 8-12 8-12 10-124 CSF1PO 11-13 12-13 11-125 D3S1358 18-18 18-18 16-186 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.37 D13S317 9-11 8-9 8-128 D16S539 9-11 11-11 10-119 D2S1338 19-20 17-20 17-2510 D19S433 12-16 12-14 13-1411 VWA 16-17 17-17 17-1712 TPOX11-11 8-11 8-1113 D18S51 12-15 13-15 13-1314 D5S818 11-12 12-13 11-1315 FGA 19-25 24-25 21-2416 Amelogenina X-Y X-Y X-X Padre HijoMadre 1 D8S117913-13 13-16 13-162 D21S1130.2-28 30-30.2 30-303 D7S820 8-12 8-12 10-124 CSF1PO 11-13 12-13 11-125 D3S1358 18-18 18-18 16-186 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.37 D13S317 9-11 8-9 8-128 D16S539 9-11 11-11 10-119 D2S1338 19-20 17-20 17-2510 D19S433 12-16 12-14 13-1411 VWA 16-17 17-17 17-1712 TPOX11-11 8-11 8-1113 D18S51 12-15 13-15 13-1314 D5S818 11-12 12-13 11-1315 FGA 19-25 24-25 21-2416 Amelogenina X-Y X-Y X-XPadreHijoMadre 1 D8S117913-13 13-16 13-162 D21S1130.2-28 30-30.2 30-303 D7S820 8-12 8-12 10-124 CSF1PO 11-13 12-13 11-125 D3S1358 18-18 18-18 16-186 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.37 D13S317 9-11 8-9 8-128 D16S539 9-11 11-11 10-119 D2S1338 19-20 17-20 17-2510 D19S433 12-16 12-14 13-1411 VWA 16-17 17-17 17-1712 TPOX11-11 8-11 8-1113 D18S51 12-15 13-15 13-1314 D5S818 11-12 12-13 11-1315 FGA 19-25 24-25 21-2416 Amelogenina X-Y X-Y X-X Padre HijoMadre El Hijo comparte con su madre biolgica el 50% de los marcadores STRs estudiados, quedando definidos los genes obligados paternos.El Padre Alegado comparte con el Hijo Alegado el 50 % restante de los marcadoresSTRs autosmicos investigados.Por lo tanto no se puede excluir el alegado vnculo biolgico.Se procede al clculo matemtico-estadstico del ndice y Probabilidad de Paternidad.CONCLUSIONES INCOSISTENCIAS GENTICAS EN STRs Una mutacin es cualquier cambio que se produce en la secuencia de nucletidos del ADN.Dicho cambio es estable y heredable en el material gentico.La mutacin es la fuente primaria de variabilidad genticaDEFINICINMUTACIONES Es la frecuencia con la que se observa un tipo particular de mutacin en una poblacin de clulas o de individuos.Frecuencia de mutacin=2/8=0,25. Estn diferenciadas en maternas y paternas. Se describen para cada locus, pero no para cada alelo. Se expresan como un cociente o en % Tasas de mutacin entre 5 x 10-4 y 7 x 10-3 Un laboratorio que efecte 100 pruebas de paternidad al ao con 15 marcadores, puede observar entre 2 y 20 mutaciones cada ao.1 D8S117913-13 13-16 13-162 D21S1130.2-28 30-30.2 30-303 D7S820 8-12 8-12 10-124 CSF1PO 11-13 12-13 11-125 D3S1358 18-18 18-18 16-186 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.37 D13S317 10-11 8-9 8-128 D16S539 9-11 11-11 10-119 D2S1338 19-20 17-20 17-2510 D19S433 12-16 12-14 13-1411 VWA 16-17 17-17 17-1712 TPOX11-11 8-11 8-1113 D18S51 12-15 13-15 13-1314 D5S818 11-12 12-13 11-1315 FGA 19-25 24-25 21-2416AmelogeninaX-Y X-Y X-X Padre HijoMadre 1 D8S117913-13 13-16 13-162 D21S1130.2-28 30-30.2 30-303 D7S820 8-12 8-12 10-124 CSF1PO 11-13 12-13 11-125 D3S1358 18-18 18-18 16-186 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.37 D13S317 10-11 8-9 8-128 D16S539 9-11 11-11 10-119 D2S1338 19-20 17-20 17-2510 D19S433 12-16 12-14 13-1411 VWA 16-17 17-17 17-1712 TPOX11-11 8-11 8-1113 D18S51 12-15 13-15 13-1314 D5S818 11-12 12-13 11-1315 FGA 19-25 24-25 21-2416AmelogeninaX-Y X-Y X-XPadreHijo Madre1 D8S117913-13 13-16 13-162 D21S1130.2-28 30-30.2 30-303 D7S820 8-12 8-12 10-124 CSF1PO 11-13 12-13 11-125 D3S1358 18-18 18-18 16-186 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.37 D13S317 10-11 8-9 8-128 D16S539 9-11 11-11 10-119 D2S1338 19-20 17-20 17-2510 D19S433 12-16 12-14 13-1411 VWA 16-17 17-17 17-1712 TPOX11-11 8-11 8-1113 D18S51 12-15 13-15 13-1314 D5S818 11-12 12-13 11-1315 FGA 19-25 24-25 21-2416AmelogeninaX-Y X-Y X-XPadre HijoMadre Calcular los IP de cada locus y el IPA y la PPA, sin incluir el locus con la inconsistencia gentica.CalcularelIPdelD13S317,considerandolatasade mutacin correspondiente a ese locus.Calcular el IPA y la PPA incluyendo tambin al D13S317. Como las tasas de mutacin tienen valores muy bajos, tanto el IPAComo las tasas de mutacin tienen valores muy bajos, tanto el IPA como la PPA con elcomo la PPA con el D13S317D13S317 descienden significativamente descienden significativamente. .RECOMENDACIONES DE ISFG En el informe deben constarIPA y PPA sin mutacin.IPA y PPA con mutacin.Para confirmar que se trata de una mutacin se debera SECUENCIAR. Son producto de una limitacin tcnica.Se evidencian como Falsos HomocigotasPrincipalcausa:modificacindelazonade anillamientodelprimer,queimpideasteunirse durante la reaccin de PCR, por lo que dicho alelo no se amplificar. Encasosexcepcionalessevisualizalano amplificacindeningnalelo,siocurreenambos cromosomas.EQUIPO COMERCIAL POWERPLEXEQUIPO COMERCIAL IDENTIFILER1 D8S117913-13 13-16 13-162 D21S1130.2-28 30-30.2 30-303 D7S820 8-12 8-12 10-124 CSF1PO 11-13 12-13 11-125 D3S1358 18-18 18-18 16-186 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.37 D13S317 9-11 8-9 8-128 D16S539 9-11 11-11 10-119 D2S1338 19-20 17-20 17-2510 D19S433 12-16 12-14 13-1411 VWA 16-16 17-17 17-1812 TPOX11-11 8-11 8-1113 D18S51 12-15 13-15 13-1314 D5S818 11-12 12-13 11-1315 FGA 19-25 24-25 21-2416AmelogeninaX-Y X-Y X-XPadreHijoMadreMutacin oalelo nulo? Clculo del IPA y PPA sin el locus que presenta la inconsistencia.Clculo del IPA y PPA considerando al vWA como posible mutacin. Clculo del IPA y PPA considerando al vWA como posible alelo nulo. La nica forma de confirmar la inconsistencia es por SECUENCIACIN. STRs de cromosomas STRs de cromosomas sexualessexualesAplicaciones Forenses Aplicaciones Forenses STRs del cromosoma XSTRs del cromosoma XAplicaciones ForensesAplicaciones Forenses Caractersticas del Cromosoma XEEl cromosoma X fue descubierto por Barr y Bertram en 1949.ESe cree que, al igual que el cromosoma Y, evolutivamente deriva de los cromosomas autosmicos.ECorresponde a un 5% del genoma humano.EEs pobre en genes.ESe asocia a ciertas enfermedades genticas. Mujeres HomocigotasHombres Hemicigotas. Herencia del Cromosoma XUn padre transmite su nico cromosoma X a todas sus hijas mujeres. Importancia en Gentica ForenseTodas las hijas mujeres de un mismo padre tienen el mismo cromosoma X Utilidad de los STRs del Cromosoma X en Utilidad de los STRs del Cromosoma X en aplicaciones forensesaplicaciones forenses Casos de Paternidad en ausencia del Padre, Casos de Paternidad en ausencia del Padre, donde la titular es una donde la titular es una mujermujer..-Entre una hija legal y una hija alegada.Entre una hija legal y una hija alegada.-Entre una abuela paterna y una nieta alegada.Entre una abuela paterna y una nieta alegada. Estudio de STRs del Cromosoma XEstudio de STRs del Cromosoma XLosSTRsdelCromosomaXsonlosmarcadoresms nuevos,conrespectoalosotrosSTRsdeutilidaden Gentica Forense.Nohaydisponibilidaddeequiposcomercialesporel momento.Elaboracindebasesdedatospoblacionalesatravs detrabajosdecooperacinentrelaboratoriosde distintos pases. STRs del Cromosoma X incluidos en el estudio- DXS7423- DXS6809- DXS7132- DXS9902- DXS6789 Ejemplo de estudio de STRs - XMadre Hija alegada Padre Alegado MARCADOR PADRE ALEGADOTITULAR MADREDXS8378 11 11-12 10-12DXS9898 12 12-12 12-12DXS7133 9 9-10 9-10GATA31E08 10 10-11 11-11GATA172D05 8 6-8 6-12DXS7423 15 15-15 15-15DXS6809 33 33-33 32-33DXS7132 14 13-14 12-13DXS9902 12 11-12 10-11DXS6789 20 20-20 20-20Perfiles genticos: MARCADOR PADRE ALEGADOTITULAR MADREDXS8378 11 11-12 10-12DXS9898 12 12-12 12-12DXS7133 9 9-10 9-10GATA31E08 10 10-11 11-11GATA172D05 8 6-8 6-12DXS7423 15 15-15 15-15DXS6809 33 33-33 32-33DXS7132 14 13-14 12-13DXS9902 12 11-12 10-11DXS6789 20 20-20 20-20Definimos lo que la titular hered de su madre... MARCADOR PADRE ALEGADOTITULAR MADREDXS8378 11 11-12 10-12DXS9898 12 12-12 12-12DXS7133 9 9-10 9-10GATA31E08 10 10-11 11-11GATA172D05 8 6-8 6-12DXS7423 15 15-15 15-15DXS6809 33 33-33 32-33DXS7132 14 13-14 12-13DXS9902 12 11-12 10-11DXS6789 20 20-20 20-20Comparamos los genes obligados paternos con el perfil gentico del padre alegado... CONCLUSIONES:EncasodecompartirelperfildeSTRsdel cromosomaX,nopuedeserexcluido elalegado vnculo biolgico.ElestudiodeSTRsdelcromosomaXpermite excluirconcertezaunvnculobiolgicocuando nosecompartenlosmarcadores(enaquellos vnculos que tienen una herencia obligada). STRs del cromosoma YSTRs del cromosoma YAplicaciones ForensesAplicaciones Forenses Representacin grfica del Cromosoma Y Cromosoma pequeo (2% del genoma). 60% de su contenido de ADN est constituido por secuencias repetitivas polimrficas. Carece de cromosoma homlogohaploida parcial falta de recombinacin durante la meiosis, excepto PAR y PAR2. Todas las secuencias polimrficas constituyen un grupo de ligamiento, es decir quese heredan en bloque. COMO LOS STRs DEL CROMOSOMA Y SE HEREDAN EN BLOQUE.AL CONJUNTO DE ESTOS MARCADORES TIPIFICADOS EN UN INDIVIDUO CONSTITUYE UN HAPLOTIPO Importancia en Gentica ForenseTodos los hijos varones de un mismo padre tienen el mismo haplotipo de cromosoma Y Herencia del Cromosoma YUn Utilidad de los STRs del Cromosoma Y en aplicaciones forenses4Estudios antropolgicos y/o evolutivos.4Gentica de poblaciones.4Identificacin humana.4Estudios de filiacin en ausencia del padre.4Casos forenses asaltos sexuales. Bases de Datos para STRs del Bases de Datos para STRs del cromosoma Ycromosoma YEn Berln, en 1998 se crea una importante base de datosEn Berln, en 1998 se crea una importante base de datos europea. europea.Disponible en Internet:Disponible en Internet: http:// http://ystr.charite.de ystr.charite.deTiene 4 objetivos principales: Tiene 4 objetivos principales:-Estandarizar un haplotipo comn de STRs del cromosoma Y.-Garantizar los resultados emitidos por los laboratorios mediante controles de calidad peridicos-Determinar la estratificacin poblacional caucsica en Europa.-Recopilar una amplia base de datos que permita la estimacin real de frecuencias haplotpicas para su aplicacin en la prctica forense. YHRD (Y cromosome Haplotype Reference Database) Disponible en Internethttp://www.yhrd.org Cuenta con mas de 59.000 haplotipos distribuidos en todos los continentes. Todos los laboratorios que desean contribuir con datos de sus poblaciones deben realizar un control de calidad obligatorio previo. El BNDG ha contribuido con ms de 300 haplotipos. Herencia del Cromosoma YEl cromosoma Y se hereda por lnea paterna Filiacin en ausencia del PadreCaso 1TitularAbuelo Paterno Alegado MARCADOR TITULAR ABUELO PATERNO ALEGADO1 - DYS456 16 162 - DYS389I 13 133 - DYS390 24 254 - DYS389 II 29 305 - DYS458 18 156 - DYS19 14 177 - DYS385 a/b 11-14 11-148 DYS393 12 129 DYS391 10 1010- DYS439 12 1111-DYS635 23 2312-DYS392 13 1113-Y GATA H4 12 1214-DYS437 15 1415-DYS438 12 1116-DYS448 19 20 MARCADOR TITULAR ABUELO PATERNO ALEGADO1 - DYS456 16 162 - DYS389I 13 133 - DYS390 24 254 - DYS389 II 29 305 - DYS458 18 156 - DYS19 14 177 - DYS385 a/b 11-14 11-148 DYS393 12 129 DYS391 10 1010- DYS439 12 1111-DYS635 23 2312-DYS392 13 1113-Y GATA H4 12 1214-DYS437 15 1415-DYS438 12 1116-DYS448 19 20 CONCLUSIONESLatipificacinenelhaplotipodel CromosomaYdeltitularydelabuelo paternoalegadodifiereen9 delos16loci analizados.Porlotantoeltitularyelabuelopaterno alegadoNOpresentanidentidad haplotpica,yquedaexcluidoelvnculo biolgico por rama paterna entre ambos. Filiacin en ausencia del PadreCaso 2 TitularTo Paterno Alegado MARCADOR TITULAR TIO PATERNO ALEGADO1 - DYS456 14 142 - DYS389I 13 133 - DYS390 24 244 - DYS389 II 29 295 - DYS458 18 186 - DYS19 14 147 - DYS385 a/b 11-14 11-148 DYS393 12 129 DYS391 10 1010- DYS439 12 1211-DYS635 23 2312-DYS392 13 1313-Y GATA H4 11 1114-DYS437 15 1515-DYS438 12 1216-DYS448 19 19 CONCLUSIONES1. La tipificacin en el haplotipo del Cromosoma Y del titular y deltopaternoalegadomuestranidentidadtotalenel haplotipo investigado.2. El haplotipono presenta/presenta n nmero de ocurrencias enlaBasedeDatosYHRD,paralos16lociSTRs investigados. El tamao de la base de datos vara segn el nmero de loci que se ingresan. 3. EnnuestraBasedeDatosdeSTRsdelcromosomaYel mencionadohaplotiponopresenta/presentannmerode ocurrencias, sobre 301 haplotipos de 10 loci STRs. CONCLUSIONESEl titular y su to Paterno alegado presentan identidad haplotpica del cromosoma Y y para los 16 marcadores STRs estudiados. Por lo tanto no puede ser excludo entre ellos el alegado vnculo biolgico por rama paterna. Aplicaciones de STRs autosomicos y del Cromosoma YEn Muestras Complejas Qu tcnicas moleculares podemos utilizar?Ya est extrado el ADNSTRs autosmicos:a) Identifilerb) Minifilerc) Strs del Cromosoma YSecuenciacin del ADN mitocondrial Balance perfecto de los picosPerfil gentico obtenido de un cepillo de dientes Se trata de pequeos picos que suelen ser una unidad de repeticin menos del pico principal. Stutter ProductsStutter ProductsSTUTTERStutter ProductsAllele Dropout or Null AllelesMutations in the primer binding sites may result in an allele failing to amplify. Descontando el patrn de la victimaPerfil gentico obtenido de un hisopado vaginal Degraded/Trace DNA SamplesLarger alleles drop-out when template DNA is low in quantity or quality, reducing certainty of genotypes.BAJA CONCENTRACION DE ADN CONCLUSIONESDeacuerdoalosresultadosobtenidosparaellocus Amelogeninalamuestraremitidaeidentificadacomo N4cepillodedientes..Corresponderaaun individuo del sexo masculinoNoesposibleexcluirelalegadovnculobiolgicopor ramamaternapaternaentrelamuestraremitidae identificadaporelJuzgadointervinientecomoN4 cepillodedientescolorrojomarcaNNyelSr/Sra. -------- (padre alegado desaparecido) Perfil mezcla: procede de mas de una persona.Se detecta por la presencia de mas de dos alelos en variosde los sistemas analizados; adems los diferentes alelosque aparecen en un marcador pueden estar desbalanceados.ANALISIS DE PERFILES MEZCLA Etapas en el anlisis de mezclas forensesPrimero: Identificar la presencia de una mezcla y designar los alelos sin ambigedad. Las mezclas se detectan por1) Presencia de extra bandas: descartar bandas artefactuales. -Stutter o tartamudeos-Contaminacin-Amplificacin inespecfica, bandas pull-up, anomalas cromosmicas, etc. Segundo: Identificar el nmero de personas que contribuyen a la mezcla y su proporcin relativa.Tercero: Comparar con muestras indubitadas.Cuarto: Valoracin estadstica.2) Desbalance entre las intensidades de los alelos-Mutaciones en la zona de annealing del primer-Amplificacin diferencial por escasa cantidad de ADN DNA Mixtures MEZCLAS COMPLEJASMuestra D3S1358 Penta E D5S818 Penta D D8S1179Bombacha 14-15-17-1813-14-15-1911-12 9*-10-12-1613-14Hisopado(f.espermat.)14-15-(17-18)12-13-14-15-1911-12 9-9*-10-12-13-1612-13-14vctima 15 12-15 11-12 9-13 12Sospechoso 117-18 12-15 7-11 10-13 10-15Sospechoso 217-18 13-14 11 10-12 12-13Sospechoso 314-15 15-19 11-12 9*-16 14Caso: Violacin mltiple, se analizan una bombacha, un hisopada vaginal y muestras de Sangre de la vctima y de 3 sospechosos. Se estudian 17 STRs autosmicos y 5 Y-STRs. MEZCLAS COMPLEJASMuestra D3S1358 Penta E D5S818 Penta D D8S1179Bombacha14-15-17-18 13-14-15-1911-12 9*-10-12-1613-14Hisopado(f.espermat.)14-15-(17-18) 12-13-14-15-1911-12 9-9*-10-12-13-1612-13-14vctima15 12-15 11-12 9-13 12Sospechoso 117-18 12-15 7-11 10-13 10-15Sospechoso 217-18 13-14 11 10-12 12-13Sospechoso 314-15 15-19 11-12 9*-16 14 Muestra AMELG DYS19 DYS390 DY391 DYS392 DYS393BombachaXY14-15 23-25 10-12 11-13 13-14Hisopado(f.espermat.)XY14-15 23-25 10-12 11-13 13-14Sospechoso 1XY16 23 11 12 14Sospechoso 2XY14 25 12 13 13Sospechoso 3XY15 23 10 11 14CONTINUACION MinifilerMuestras altamente degradadas Conclusiones hisopado vaginalDe acuerdo al analisis del locus genetico amelogenina se definio un perfil mezcla de por lo menos mas de un individuo masculino y femeninoDescontando el perfil gentico de la victima podemos inferir que existe mas de un individuo de sexo masculino como posible contribuyente a la mezcla. Si le incorporamos el Cromosoma Y?No es posible excluir a los imputados de autos como contribuyentes de la mezcla HisopadoVaginal por presentar identico haplotipo de Cromosoma Y con los evidenciados para la muestra mencionada 0.5 ng DNADYS393DYS390DYS389-IDYS19DYS393DYS390DYS389-IDYS389-IIDYS190.5 ng DNADYS393DYS390DYS389-IDYS389-IIDYS19INDIVIDUO AZOOSPERMICOINDIVIDUO 1INDIVIDUO 2DYS393DYS390DYS389-IDYS389-IIDYS19ESPERMA CAVIDAD VAGINAL CLCULOS DE PATERNIDAD CLCULOS DE PATERNIDADConceptos BsicosOBJETIVO PRINCIPAL DE LA VALORACINCLCULO DE LR IP para cada locusCLCULO DE LR IP para cada locus CLCULOS DE PATERNIDAD CLCULOS DE PATERNIDADPaternidades SimplesPremisas1. Ambos progenitores no estn relacionados2. Poblacin en Equilibrio de H-W3. No mutaciones4. Herencia Mendeliana CLCULOS DE PATERNIDAD CLCULOS DE PATERNIDADPaternidades SimplesProbabilidad de transmisin de alelos de los progenitoresIndividuos homocigotos: 1Individuos heterocigotos: 0.5Probabilidad de transmisin de alelos por un hombre al azarFrecuencia poblacional del alelo CLCULOS DE PATERNIDAD CLCULOS DE PATERNIDADPaternidades SimplesIdentificacin: Madre Alegada-Hijo-Padre AlegadoH1: MA y PA son los padres biolgicos del HH0: Los padre biolgicos de H son dos individuos al azar no relacionados con MA y PAEj:TPOXMA: 8,11H: 8,9PA: 9,11CSF1POMA: 11,12H: 11,12PA: 12,12?HPA MA CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOSRelaciones FamiliaresIncesto (Vnculo biolgico entre la Madre y el Padre Alegado (Hno, Padre, etc.)H1: el padre alegado (PA) es el padre biolgico del hijoH0: el padre alegado (PA) NO es el padre biolgico del hijo y por lo tanto el padre biolgico es otro individuoEj:TPOXH: 9,11PA: 8,11CSF1POH: 11,12PA: 11,12?HPA M1M2 CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOSRelaciones FamiliaresIncestoValores del coeficiente de consanguinidad ( )No relacin: 0Padre/Hijo, hermanos completos: 1/4To/Sobrino, medio hermanos: 1/8Primos hermanos: 1/16 CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOSRelaciones FamiliaresFamiliares del Padre AlegadoSituaciones en las que se piensa que el PA puede ser familiar del Padre BiolgicoDistintas Hiptesis:A) Indice de Paternidad (IP)H1: el padre alegado (PA) es el padre biolgico del hijoH0: el padre alegado (PA) NO es el padre biolgico del hijo y por lo tanto el padre biolgico es otro individuoB) ndice Avuncular (AI)H1: un familiar del padre alegado (PA) es el padre biolgico del hijoH0: el padre biolgico es un individuo no relacionado CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOSPaternidad con Abuelos Paternos Alegados?HMAbo AbaH1: el padre biolgico de H es un hijo biolgico de Aba y AboH0: el padre biolgico es un individuo al azar no relacionadoEj:CSFIPOM: 10,11H: 10,12Aba: 9,10Abo: 12,122 enfoques CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOSPaternidad con Hijos del Padre Alegado?H1PA MH2 H3 TH1: el padre biolgico de H1, H2, H3 es el padre biolgico de TH0: el padre biolgico de T es un individuo al azar no relacionadoEj:TPOXM: 8, 8H1: 8, 8H2: 8, 8H3: 8, 8T: 8, 8CSF1POM: 10,12H1: 10,12H2: 10,12H3: 10,12T: 10,12 CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS CLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOSPaternidad con Hermanos del Padre Alegado?HMAbo AbaH1: el padre biolgico de H es un hermano completo de T1, T2 y T3H0: el padre biolgico de H es un individuo al azar no relacionadoT1 T2 T3 CLCULOS MATEMTICO-ESTADSTICOS EN CASOS COMPLEJOS CASOS COMPLEJOS1-Parentalidad2-Paternidad en ausencia de padre Reconstruccin a partir de familiares. 3-Vnculos biolgicos discontinuos4-Relacin biolgicaIncesto Familiar del padre alegado5-Casos de supresin de identidad 1-PARENTALIDAD1-PARENTALIDADCasos en que no puede considerarse a la Casos en que no puede considerarse a la madre como indubitada.Ej:madre como indubitada.Ej:Cambio de bebs en maternidadCambio de bebs en maternidadIdentificacin de restos cadavricosIdentificacin de restos cadavricosConvienetesteartambinaambos Convienetesteartambinaambos padres por separado.padres por separado. CLCULO DE PARENTALIDAD(Padre y Madre dubitados) Clculo del IP (Padre y Madre dubitados) Pob A = a(frecuencia poblacional del alelo A)Pob B = b(frecuencia poblacional del alelo B) 2-PATERNIDAD EN AUSENCIA DE PADREA partirdelosfamiliaresdisponiblesse reconstruyelainformacingenticadel presuntopadre.Conelperfilgentico deducido,serealizaelclculode paternidad.ESTAMOS ASUMIENDO VINCULOS BIOLOGICOS QUE NO TENEMOS CERTEZA QUESEANREALES. EL UNICO DATO EL UNICO DATO INDUBITADO ES EL DE LOS INDUBITADO ES EL DE LOS RESTOS OSEOS DEL RESTOS OSEOS DEL PADRE ALEGADO PADRE ALEGADO FALLECIDOFALLECIDO RECONSTRUCCIN DE LA INFORMACIN GENTICATitularAbuelo Paterno AlegadoAbuela PaternaAlegadaPAFMadre Reconstruccin a partir de los Reconstruccin a partir de los abuelosabuelosVentajaVentaja::Los abuelos tienen todos los alelos del Los abuelos tienen todos los alelos del perfil gentico del PAF.perfil gentico del PAF.DesventajaDesventaja::El resultado aplica a cualquier hijo de El resultado aplica a cualquier hijo de esos abuelos.esos abuelos. RECONSTRUCCIN DE LA INFORMACIN GENTICAOtros familiares:hermanos, hijos biolgicos.Se recomienda por lo menos 2 familiares de la misma rama( cuantos ms sean, mejor)MadresSi hay pocos familiares otros marcadores, como STRs del cromosoma Y, ADN mitocondrial, etc segn el caso. 3-VNCULOS BIOLGICOS DISCONTINUOSEntre 2 personas:oHermandadoMedia hermandadoTo sobrinooAbuela nietooetc Limitacin del ADN nuclearen este tipo de periciasEs difcil la valoracin de resultados 4-RELACIN BIOLGICACasosenquelospadresalegadosestn relacionados biolgicamente entre ellos.Lasrelacionesfamiliareshacenquese compartanalelosycomoconsecuencia disminuye la probabilidad de exclusin. Se debe incluir en el clculo un Coeficiente de cosanguinidad ().Se debe calcular el ndice Avuncular (AI).Clculo convencional: "padre alegado frente a individuo no relacionado Clculo en estos casos: "padre alegado frente a familiar del padre alegado Casos en que padre alegado y madre del titular estn relacionados biolgicamente entre s INCESTO -Si disponemos de Madre-Padre-Hijo el clculo se realiza como enunestudioconvencional,peroseobservarmayornmero de marcadores homocigotas en el hijo.-Sinodisponemosdelamadressemodificanlasfrmulas, incorporando el Coeficiente de cosanguinidad () a las frmulas. 5-CASOS DE SUPRESIN DE IDENTIDAD Enlamayoradeloscasosserealizaelclculode Parentalidad.LosperfilesgenticosdeMadreyPadrealegadosse reconstruyenapartirdelosfamiliaresconquese cuenta.Se recurre a programasinformticos.Serealizanparalelamenteotrosmarcadoresgenticos: ADNmitocondrial,STRsdelCromosomaY,HLA, Antgenos Eritrocitarios. Programas informticos Programas gratuitos- Distribuidos por Internet - Entregado a pedido por los autoresProgramas caseros- Desarrollados en cada laboratorioProgramas comerciales Objetivo de los programas informticosBase de Datos de Patrones Genticos Estudios genticos poblacionales Clculos en Relaciones de Parentesco Clculos en Causas de Incriminacin Programas informticos en clculo de parentescoCASOS SENCILLOS A MUY COMPLEJOSFAMILIAS: (Hilde-Gunn Bruu, Ingvild Dalen, Thore Egeland,Petter Mostad )http://www.nr.no/familiasRelaciona posibles pedigrees obteniendo un valor numrico del pedigree ms probable.Los casos vistos anteriormenteCasos de parentesco con presencia defamiliares indirectos CONCLUSIONESEsimportanteinformarallaboratorioquerealizalapericiatodas aquellas situaciones que puedan influir en los clculos.Solicitarasesoramientoacercadequfamiliaressonlosms aconsejablespararealizarunareconstruccindeinformacin gentica.Tenerencuentaqueenreconstruccionesseestnasumiendo vnculos biolgicos.El nico dato indubitado es SIEMPRE el obtenido de una muestra directa del presunto padre.BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOSADN MITOCONDRIAL EN MUESTRAS FORENSES DNA NUCLEAR vs MITOCONDRIAL ADN MITOCONDRIALADN MITOCONDRIALEvidencias biolgicas muy degradadas o enEvidencias biolgicas muy degradadas o en pequea cantidad (cabellos, huesos, dientes). pequea cantidad (cabellos, huesos, dientes).Muestras sin ADN Nuclear (cabello sin bulbo). Muestras sin ADN Nuclear (cabello sin bulbo).Asignacin de vnculo biolgico entre muestrasAsignacin de vnculo biolgico entre muestras seas recuperadas y familiares de una ramaseas recuperadas y familiares de una rama materna. materna.Aplicaciones en Gentica Aplicaciones en Gentica ForenseForense 1 copia por clula Mltiples copias por clulaNO ES UNICO DE UN INDIVIDUOUNICO DE CADA INDIVIDUOADNmt: LINAJE MATERNO Tasa de mutacin del ADN mitRadicales libres en la mitocondria que tienen efecto mutagnico sobre el ADN.No posee protenas de proteccin.Actividad reparadora de la DNA polimerasa deficiente.Mayor N de rondas de replicacin que el ADN nuclear.Factores que intervienen en los mecanismos deFactores que intervienen en los mecanismos de mutacin del ADN mit: mutacin del ADN mit: 16093 (C/T)16086 16101Figure 10.9, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition 2005 Elsevier Academic PressmtDNA Sequence Heteroplasmy Cmo se analiza la secuencia obtenida?1630316311 1631916327 16336GTACATAGTACATAAAGCCATTTACCGTACATAG ANDERSONGTACATAGCACATAAAACCATTTATCGTACATAG SEC EN ESTUDIOSE DESCRIBEN TODAS LAS DIFERENCIASMUTACIONALES QUE ENCUENTRE CON RESPECTO A LASECUENCIA DE REFERENCIA (Sec de Anderson) Y SEOBTIENE EL HAPLOTIPO DE LA MUESTRA EN ESTUDIO.

Ej: 16311-C, 16319-A, 16327-T ANALISIS DE ADNmt DE HUESOS Y DIENTESANALISIS DE ADNmt DE HUESOS Y DIENTES IDENTIFICACION DE PERSONASATENTADOS DESASTRES EN MASADESAPARICION DE PERSONAS FILIACION MATERNA ANTROPOLOGIAmtDNA FORENSEmtDNA PERMITIO LA IDENTIFICACION DE: Czar Nicholas II (Russia), Rey Louis XVII (France) Dr. Joseph Mengele (Germany)Soldados de Viet Nam y KoreaDNA sequence analysis of two hypervariable regions of mitochondrial DNA showed identical sequences for the three daughters and the Tsarina, as would be expected for a maternally inherited character. In addition, the same sequence was found in the current Duke of Edinbrough (Prince Phillip) who is related to the late Tsarina through a maternal line. The same regions of mtDNA for the Tsar had a different sequence from the Tsarina.Zarina ZarPrincesa AliciaFelipede EdimburgoPERFIL COMPLETOPERFIL PARCIALSIN RESULTADOSANALISIS DE ADNmt DE PELOSPELOS COMO EVIDENCIAABUNDANTE: el hombre tiene ms de 100.000 bulbos pilosos slo en la cabezaFACILMENTE TRANSFERIBLE: una persona pierde un promedio de 100 pelos por daDURABLE: se han recuperado pelos de momias de 2000 aosMORFOLOGIA DEL PELORAIZBULBOTALLOPUNTADNA NUCLEARDNA MTel xito en la obtencion y analisis del dnamt no depende solo del largo del pelo sino del diametro del peloPelo pbico: mejores resultadosSe puede obtener ADN aun de fragmentos de pelo de 5 mm.Prximo a la raz: ms ADNDistal a la raz: menos ADNPELOS COMO EVIDENCIATIEMPOSIN PERFILPERFIL PARCIALPERFIL COMPLETOTAMAO6-10 0-5 11-20 +211-1.9 cm2-2.9 cmEXTRACCION Y CUANTIFICACION DEL DNAAMPLIFICACION POR PCR D-LOOP MtDNASECUENCIACIONGENOTIPIFICACIONCOMPARACION DEL GENOTIPO CON MUESTRAS DE REFERENCIACOMPARACION DEL PERFIL OBTENIDO CON BASES DE DATOSINFORMEEVALUACION DE LAS EVIDENCIASRECOLECCION Y CADENA DE CUSTODIA DE LAS EVIDENCIASCaso #1 Caso #2QuestionedGCAT TATTG GCGC CCTAGCATATTGCGCCTAKnown GCAC CATTA ACGT TCTAGCATATTGCGCCTA EXCLUSIONNO EXCLUSIONCOMPARAR LAS SECUENCIAS Q-RCRITERIOS DE NOMENCLATURAQSiempre se reportan todas las diferencias con respecto a la secuencia de Anderson conocida como SECUENCIA DE REFERENCIA DE CAMBRIDGE.QCada diferencia con respecto a la secuencia de Andersonse define con un nmero y una letra. Ej: 16.223-TQLas deleciones se reportan anotando la posicin donde aparece la delecin seguida de la letra d. Ej: 88 dQ Las inserciones se reportan indicando la menor posicin donde aparece dicha insercin seguida de la expresin .1. Ej: 89.1-CQLas heteroplasmias confirmadas se reportan con los 2 nucletidos que coexisten en la misma posicin. Ej: 73 A=G , 73 A>G 73 A