asociaciÓn morfolÓgica e inmunohistoquÍmica con ......caracterizar las alteraciones genéticas...

ASOCIACIÓN MORFOLÓGICA E INMUNOHISTOQUÍMICA CON ALTERACIONES GENÉTICAS EN CÁNCER DE PULMÓN DE CELULAS NO

PEQUEÑAS

Dra. Natalia Aguirre Vásquez Anatomía patológica y Patología Clínica - Universidad del Valle

Patología del Aparato Respiratorio - Universidad Nacional Autónoma de México

1

Epidemiología Nuevos casos en 2018

2,093,876 (11.6%).

No. Defunciones en 2018

1,761,007 (18.4%)

Bray F et al. Global Cancer Statistics 2018: GLOBOCAN Estimates of Incidence and Mortality Worldwide for 36 Cancers in 185 Countries. CA CANCER J CLIN 2018;0:1–31

AJCC, 2018Supervivencia a 5 años

2

Clasificación histológica

Transl Lung Cancer Res 2015;4(1):36-54.

• La secuenciación del genoma humano hapermitido la identificación más eficiente demutaciones, inactivación de genes supresoresde tumores o activación de proto-oncogenescomo posibles objetivos de tratamiento.

• Se reconoce que la clasificaciónhistológica es un punto de inicio en labúsqueda de marcadoresmoleculares.

3

Biología molecular del CPCNP

Tsao AS et al. J Thorac Oncol. 2016 May;11(5):613-638. Jänne PA et al. JAMA. 2017 May 9;317(18):1844-1853.

• .

4

Medicina de Precisión

https://vector.childrenshospital.org/2016/02 Am J Pathol. 2016 Mar;186(3):500-6.

El objetivo de la medicina deprecisión es aprovechar el nuevoconocimiento y tecnología paraoptimizar el tiempo y la orientaciónde las intervenciones para elbeneficio terapéutico máximo.

5

https://vector.childrenshospital.org/2016/02

Objetivo

Caracterizar las alteraciones genéticas del cáncer de pulmón de célulasno pequeñas por subtipo histológico mediante secuenciación de nuevageneración en los pacientes diagnosticados en el laboratorio depatología del Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias, duranteel periodo del 1ero de enero al 31 de diciembre del 2018

6

Materiales y Métodos

7

Pacientes con diagnostico CPCNP laboratorio patología INER

1 enero – 31 diciembre 2018 (n = 232)

No disponibilidad Bloques de parafina de la Biopsia y/o historia clínica (n=165)

Casos de CPCN que cumplen criterios de inclusión (n=56)

Material insuficiente para análisis molecular (n=11)


Estudio Morfológico• Patólogo pulmonar y un Residente de CPAEM

• Clasificación de los patrones morfológicos en la tinción H&E (The 2015 World Health Organization Classification of Lung Tumors)

• Tinciones inmunohistoquimica realizadas en la plataforma automatizada Roche VENTANA para los anticuerpos CK7, Napsina, TTF1 y P40(Positivo /Negativo)

8


9


10P40


Análisis Molecular

• Centro de investigación en enfermedades infecciosas (CIENI)

• Plataforma Illumina

• Panel de secuenciación TruSight 15 (EFGR, ALK, ROS1, TP53, KRAS, NRAS, BRAS, ERB2, AKTI, KIT y PI3KCA).

11


Análisis Estadístico

• Estudio descriptivo y transversal

• Análisis estadístico se realizó con R “Feather spray”

• Las características basales, el patrón morfológico y alteraciones genéticas se estudiaron mediante estadística descriptiva.

• La asociación entre el patrón morfológico y las mutaciones se estimo mediante chi2 o prueba exacta de fisher de acuerdo a como fue apropiado.

12

Resultados

13

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

Tabaquismo Humo de leña Asbesto

Femenino n:26 Masculino n:30

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%

Adenocarcinoma Carcinoma epidermoide Adenoescamoso


TABLA 2. CARACTERISTICAS CLINICAS

Características N=56 % (#)

Genero Femenino 46 % (26)

Masculino 54% (30)

Edad Mediana 63.5 (24-87)

<60 36% (20)

>60 64% (36)

Antecedentes Patológicos Hipertensión arterial sistémica 27%(15)

Diabetes Mellitus 5%(3)

Tuberculosis pulmonar 0%(0)

Enfermedad pulmonar obstructiva crónica 5%(3)

Fibrosis Pulmonar 7%(4)

Asma 2%(1)

Exposición Tabaco 57%(32)

Asbesto 9%(5)

Humo de leña 25% (14)

Diagnostico Carcinoma Epidermoide 18% (10)

Adenocarcinoma 80% (45)

Carcinoma Adenoescamoso 2% (1)

Sitio de la Biopsia Primario 77% (43)

Metástasis 23%(13)

Estadio clínico Sin datos 27% (15)

I0%(0)

II2% (1)

III7% (4)

IV64% (36)

ResultadosTABLA 3. PERFIL MUTACIONAL

GEN N=56%(#)

EXON %(#)

EFGR 36%(20) Exón 18 (G791A) 1

Exón 19 (Delección) 6

Exón 21 (L858R) 7

Exón 20 (T790M) 2

Exón 20 (Inserción) 4

ALK 0%(0)

KRAS 14%(8) Exón 2 8

TP53 57%(32) Exón 4 32

BRAF 2%(1) Exón 15 1

NRAF 0%(0)

ERBB2 20%(11) Exón 20 11

AKTI 0%(0)

PI3KCA 4%(2) Exón 10 1

Exón 21 1

KIT 2%(1) Exón 10 1

14

Resultados

15

0

5

10

15

20

25

30

35

EFGR KRAS TP53 ERBB2 Otras


ResultadosTABLA 4. ASOCIACION MUTACION EFGR Y CARACTERISTICAS CLINICAS

N: 56 EFGR (-)n:36

EFGR (+)n:20

P

Género30 (54%) 20 (56%) 10 (50%) 0.78

Edad (DE)62 (12.2) 60 (13.2) 65 (10.6) 0.21

Carcinoma Epidermoide

Adenocarcinoma

Adenoescamoso

10 (18%)

45 (80%)

1 (2%)

8 (23%)

27 (75%)

1 (3%)

2 (10%)

18 (90%)

0 (0)

---

Tabaquismo

32 (57%) 24 (67%) 8 (40%) 0.08

Asbesto

5 (9%) 3 (8%) 2 (10%) NS

Humo de leña

14 (25%) 7 (19%) 7 (35%) 0.21

16

Resultados

17

TABLA 5. ASOCIACIONES ENTRE MUTACIONES EGFR Y EL PATRON MORFOLÓGICO PREDOMINANTE

N:56 EFGR (-)n:36

EFGR(+)n:20

p

LEPIDICO9 (16%) 5 (14%) 4 (20%) 0.70

ACINAR24 (43%) 12 (33%) 12 (60%) 0.08

PAPILAR2 (3%) 0 (0%) 2 (1%) 0.12

MICROPAPILAR15 (27%) 7 (19%) 8 (40%) 0.12

SOLIDO24 (43%) 15 (42%) 9 (45%) NS

C. ANILLO DE

SELLO 2 (3%) 2 (6%) 0 (0%) 0.53

C.CLARAS3 (5%) 2 (6%) 1 (5%) NS

Resultados

18

TABLA 6. ASOCIACIONES ENTRE MUTACIONES KRAS Y EL PATRON MORFOLÓGICO PREDOMINANTE

N:56KRAS (-)

n:48KRAS (+)

n:8p

LEPIDICO9 (16%) 7 (14%) 2 (25%) 0.60

ACINAR24 (43%) 19 (40%) 5 (62%) 0.268

PAPILAR2 (3%) 2 (4%)

0NS

MICROPAPILAR15 (27%) 13 (27%)

2 (25%) 0.899

SOLIDO24 (43%) 20 (42%)

4(50%) 0.71

C. ANILLO DE

SELLO 2 (3%) 1 (2%)

1(12%) 0.267

C.CLARAS3 (5%) 3 (6%) 0

NS

Resultados

19

TABLA 8. RESULTADOS DE INMUNOHISTOQUIMICA

CK7 TTF1 Napsina P40

Adenocarcinoma n:45

98%(44/45) 80%(36/45) 64%(29/45) 0%(0)

Carcinoma Epidermoiden:10

2%(2/10) 0%(0) 0%(0) 100%(10)

Adenoescamoso n:1

0%(0) 0%(0) 0%(0) 100%(1/1)

TABLA 9. ASOCIACION ENTRE MUTACION EN EGFR /KRAS/ERBB2 E INMUNOFENOTIPO

TTF1 Napsina CK7 p

EFGR n:20 17 (85%) 15 (75%) 18 (90%) 0.43

KRAS n:8 5 (62%) 2 (25%) 8 (100%) 0.009

ERB2 n:11 7 (64%) 6 (54%) 9 (82%) 0.52

Resultados

20

Resultados

21

Conclusiones

• EGFR: 36%, Pacientes no fumadores (p=0.08), Patron acinar (p=0.08) y conservan la reactividad de TTF1, CK7 y Napsina.

• KRAS: 14%, Adenocarcinoma mucinoso, patrones solido y acinar con perdida de la reactividad de TTF1 y Napsina (p=0.009).

• ERB2: 20%

• TP53: 57%

• Continuar estudios para conocer el perfil mutacional de la población mexicana.

22

24Gracias.

asociaciÓn morfolÓgica e inmunohistoquÍmica con ......caracterizar las alteraciones genéticas...

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