ANÁLISIS PRELIMINAR DE INÓCULOS ANÁLISIS PRELIMINAR DE INÓCULOS MICROBIANOS COMO BIOFERTILIZANTES Y MICROBIANOS COMO BIOFERTILIZANTES Y

ACELERADORES DEL COMPOSTAJEACELERADORES DEL COMPOSTAJEDE MACRÓFITAS ACUÁTICAS PRESENTESDE MACRÓFITAS ACUÁTICAS PRESENTES

EN LA LAGUNA DE FÚQUENEEN LA LAGUNA DE FÚQUENE

MERCEDES DEL PILAR CALIXTO DÍAZMERCEDES DEL PILAR CALIXTO DÍAZMARIA ANGÉLICA DEL BASTO RIAÑOMARIA ANGÉLICA DEL BASTO RIAÑO

Laguna de FúqueneLaguna de Fúquene

FUQUENE Agricultura, ganadería y turismo Pérdida en el espejo de agua Aguas residuales vertidas Invasión de plantas acuáticas.

Buchón

Extracción mecánica de Extracción mecánica de las macrófitaslas macrófitas

Proceso de compostaje Proceso de compostaje llevado a cabo por la CARllevado a cabo por la CAR

Alternativas para el manejo de Alternativas para el manejo de contaminación ambientalcontaminación ambiental

Proceso de compostajeProceso de compostaje

Microorganismos + Oxígeno = Biomasa + CO2 + Microorganismos + Oxígeno = Biomasa + CO2 + H2O + H2O + Energía Energía

Oxígeno

TemperaturaTemperatura

Relación C/N

Humedad

Factores fisicoquímicos del compostaje

Tamaño de partícula

Proceso de descomposición y estabilización Proceso de descomposición y estabilización de la materia orgánica mediada por de la materia orgánica mediada por microorganismos.microorganismos.

Microorganismos del proceso Microorganismos del proceso de Compostajede Compostaje

HongosHongosTrichoderma Trichoderma spsp., Mucor ., Mucor spsp., Rhizomucor, ., Rhizomucor, Paicelomyces Paicelomyces spsp., Chaetomium thermofilium, ., Chaetomium thermofilium, Penicillum Penicillum sp.sp., Aspergillus , Aspergillus sp.sp., Scopulariopsis , Scopulariopsis sp.sp., Cropinus , Cropinus sp.sp., Cephalosporium , Cephalosporium sp.sp., , Mycotypha Mycotypha sp.sp., Humicola , Humicola sp.sp., Trichothecuim , Trichothecuim sp. sp.

ActinomicetosActinomicetos Streptomyces Streptomyces sp.,sp., Thermomonospora Thermomonospora spsp., .,

ThermoactinomycetesThermoactinomycetes sp. sp., Micromonospora , Micromonospora sp.,sp., StreptosporangiumStreptosporangium sp. sp.

Bacterias Etapa mesofílíca : Bacillus, Enterobacter , Flavobacterium , Pseudomonas . Etapa termofílica: Acinetobacter , Agrobacterium, Alcalígenes, Arthrobacter,

Bacillus, Cellulomonas, Corynebacterium, Micrococos, Stapylococcus, Streptococcus y Xanthomonas.

Enzimas en el proceso de compostajeEnzimas en el proceso de compostaje

Degradación de celulosa, lignina, proteínas, Degradación de celulosa, lignina, proteínas, otros polisacáridos y compuestos tóxicos otros polisacáridos y compuestos tóxicos

Enzimas MicrobianasEnzimas MicrobianasEnzimas amilolíticasEnzimas amilolíticas

α-amilasas

β amilasas

Glucoamilasas

PulunasasIsoamilasas

Proteasas neutras Proteasas alcalinas Proteasas ácidas

Enzimas proteolíticasEnzimas proteolíticas

Enzimas MicrobianasEnzimas Microbianas

Enzimas celulolíticasEnzimas celulolíticas

Endo-Endo-ββ-1,4-glucano glucanohidrolasa -1,4-glucano glucanohidrolasa o endo-o endo-ββ-1,4-glucanasa-1,4-glucanasa

Exo-Exo-ββ-1,4-glucano celobiohidrolasa, -1,4-glucano celobiohidrolasa, exo-exo-ββ-1,4-glucanasa -1,4-glucanasa

ββ-1,4- glucano glucohidrolasa o -1,4- glucano glucohidrolasa o ββ-1,4--1,4-glucosidasa glucosidasa

Propiedades del CompostPropiedades del Compost

Abono orgánicoAbono orgánico Restaurador de suelosRestaurador de suelos Buffer y retiene humedadBuffer y retiene humedad Regula temperaturaRegula temperatura

FertilizantesFertilizantes BiofertilizantesBiofertilizantes BioabonoBioabono

ObjetivoObjetivo

A partir de los hallazgos de la CAR, seleccionar los A partir de los hallazgos de la CAR, seleccionar los microorganismos que presenten las mejores microorganismos que presenten las mejores características enzimáticas y producir características enzimáticas y producir inóculos inóculos microbianos, que aceleren el proceso de degradación microbianos, que aceleren el proceso de degradación de las macrófitas, Ede las macrófitas, Elodea brasilera (lodea brasilera (Eigeria densaEigeria densa) y ) y Buchón (Buchón (Eichhornia crassipes)Eichhornia crassipes), en la laguna de , en la laguna de Fúquene; además, Fúquene; además, experimentar los inóculos experimentar los inóculos trabajados, como biofertilizantes del rábano.trabajados, como biofertilizantes del rábano.

MATERIALES MATERIALES YY

MÉTODOSMÉTODOS

DiseñoDiseño

Conservación de CepasConservación de Cepas

Criopreservación Criopreservación en glicerol 20%en glicerol 20%

Banco de cepas primarioBanco de cepas primario Banco de cepas de Banco de cepas de

trabajotrabajo

Caracterización DefinitivaCaracterización Definitiva

BacteriasBacterias Crecimiento 4ºC, 42ºC, King BCrecimiento 4ºC, 42ºC, King B Catalasa Catalasa

ActinomicetosActinomicetos Reducción de nitratosReducción de nitratos Crecimiento 45ºC, 60ºC, 90ºC, gelatina 15%Crecimiento 45ºC, 60ºC, 90ºC, gelatina 15% Hidrólisis de caseínaHidrólisis de caseína

HongosHongos Crecimiento en Agar PDA y Extracto de maltaCrecimiento en Agar PDA y Extracto de malta Coloración con azul de lactofenolColoración con azul de lactofenol

Pruebas de AntagonismoPruebas de Antagonismo BacteriasBacterias

Técnica de anillosTécnica de anillos ActinomicetosActinomicetos

Técnica de estríasTécnica de estrías HongosHongos

Técnica de enfrentamiento dualTécnica de enfrentamiento dual

ANILLOS ESTRIAS DUAL

Actividad Enzimática CualitativaActividad Enzimática Cualitativa

RevelaciónRevelación

BacteriasBacterias Agar CelulosaAgar Celulosa1% p/v Rojo Congo1% p/v Rojo Congo

ActinomicetosActinomicetos Agar Almidón 1% p/v Agar Almidón 1% p/v Lugol LugolHongosHongos Agar Leche 1% p/v Agar Leche 1% p/v

Siembra Siembra en placaen placa

Proceso de FermentaciónProceso de Fermentación

Inóculo BacterianoInóculo Bacteriano

Temperatura: 32 ºCTemperatura: 32 ºC Agitación: 120 rpm – 140 rpmAgitación: 120 rpm – 140 rpm Aireación: 1 vvmAireación: 1 vvm Duración: 48 horasDuración: 48 horas Parámetros cinéticos: Parámetros cinéticos:

Formación de biomasaFormación de biomasa Consumo de sustratoConsumo de sustrato pHpH

Proceso de FermentaciónProceso de Fermentación

Inóculo hongos y actinomicetosInóculo hongos y actinomicetos• Agitación 130 rpm - 150 rpm

• Temperatura: 28°C

• Aireación

• Duración: 96 horas

• Parámetros cinéticos Biomasa

Consumo de sustrato

pH

Actividad Enzimática CuantitativaActividad Enzimática Cuantitativa Inóculo Inóculo 40 ml40 ml

pHpH

Bradford ProteínasBradford ProteínasDNSDNS Almidón Almidón

Bacterias Bacterias 360 ml 360 ml Celulosa CelulosaActinomicetos Almidón 1% p/vActinomicetos Almidón 1% p/vHongos Celulosa 1% p/vHongos Celulosa 1% p/v

Leche 1% p/vLeche 1% p/v

Pruebas de EstabilidadPruebas de Estabilidad

InóculosInóculos pH pH 1; 31; 3

BacteriasBacterias 5.5; 7 5.5; 7ActinomicetosActinomicetos 8; 10 8; 10HongosHongos 11 11

50 ml 50 ml TemperaturaTemperatura

CongelaciónCongelaciónBacteriasBacterias Refrigeración RefrigeraciónActinomicetosActinomicetos Ambiente AmbienteHongosHongos 60°C 60°C 50 ml50 ml

Proceso de CompostajeProceso de Compostaje

• 10 pilas de 90 cm x 90 cm x 1 m

• Materiales utilizados: Buchón Elodea Vainas de arveja y fríjol Cascarilla de arroz

• Relación C/N

• Humedad

82 Kg TOTAL7 KgSuelo15

% humedad en campoMelaza 1:4147 KgElodea 13

14 KgBuchón12% humedad en campoMelaza 1:411

0.5 KgCal10

4.5 KgVaina de arveja y fríjol97 KgElodea 8

14 KgBuchón7% humedad en campoMelaza 1:46

0.5 KgCal54.5 KgVaina de arveja y fríjol47 KgElodea 3

14 KgBuchón22 KgCascarilla de Arroz1

MASACLASECAPA

Montaje

InoculaciónInoculación

0 ml2250 ml 

900 ml 

1800 ml 

900 ml 

Total Inoculación

750 ml  

- 

- 

- 

Medio Natural Hongos

Actinomicetos 750 ml- 

- 

- 

Medio Natural

750 ml 

- 

- 

- 

Medio Natural Bacterias

- 

300 mldiluidos 1/2

600 ml 

300 ml 

Inóculo Hongos

- 

300 mldiluidos 1/2

600 ml 

300 ml 

InóculoActinomicetos

    

Corresponde al material sin inocular

     

- 

300 mldiluidos 1/2

600 ml 

300 ml 

Inóculo Bacterias

T5 (Control) 

T4 

T3 

T2 

T1 

TratamientosInoculación

MonitoreoMonitoreo

Parámetros microbiológicosParámetros microbiológicosRecuento en placaRecuento en placa

Parámetros FisicoquímicosParámetros FisicoquímicospHpHHumedadHumedadTemperaturaTemperatura

Análisis FinalesAnálisis Finales

Determinación de patógenosDeterminación de patógenos Prueba de germinaciónPrueba de germinación Relación C/N - FRelación C/N - F Reducción de materialReducción de material

Ensayo Ensayo in vivoin vivo

Estimulación del crecimiento vegetal de Raphanus sativus

Parámetros vegetales Crecimiento aéreo Biomasa aérea Biomasa total Número y peso de tubérculos Nitrógeno Total Inicial/Final

Análisis estadístico

DiseñoDiseño

Suelo 9

Suelo + Turba (1:1)8

Suelo + 5 ml de Inóculo Actinomicetos7

Suelo + 5 ml Inóculo Hongos6

Suelo + 5 ml Inóculo Bacterias5

Compost T4 R1 + Suelo (1:1)4

Compost T2 R2 + Suelo (1:1)3

Compost T4 R12

Compost T2 R21

DescripciónNúmero

Caracterización definitivaCaracterización definitiva

Rhizomucor Rhizomucor spsp Scopulariopsis candidaScopulariopsis candida

Aspergillus flavusAspergillus flavus Actinosynema Actinosynema sp.sp.

Resultados

Antagonismo de BacteriasAntagonismo de Bacterias

213 19 23 25 30 37 48

213

1923

2530

3748

0123456789

10111213

Halo de Inhibición

(mm)

Cepas Bacterias

Cepas Bacterias

2 12 13 18 19 21 23 24 25 29 30 32 37 39 48 52

Comamonas acidovorans, Sphingonomas paucimobilis, Stenotrophomonas maltophila; Bacillus licheniformis, Pseudomonas sp., Bacillus mycoides, Providencia sp.

AntagonismoAntagonismo

HongosHongosSyncephalastrumSyncephalastrum sp., sp., Aspergillus Aspergillus sp., sp., Aspergillus Aspergillus fumigatusfumigatus, , Aspergillus Aspergillus terreusterreus, , Rhizopus Rhizopus spsp., ., Absidia corymbifera, Absidia corymbifera, Aspergillus flavus, Aspergillus flavus, Aspergillus clavatusAspergillus clavatus..

ActinomicetosActinomadura sp., Streptomyces avermistitis, Streptomyces sp., Nocardiopsis sp., Nocardiodes sp., Kineospira sp., Pseudonocardia thermophila, Actinobispora sp., Streptomyces griseus, Actinokineospora sp., Dactilosporamgium vinareum.

Actividad Enzimática CualitativaActividad Enzimática Cualitativa

Fermentación de BacteriasFermentación de BacteriasCurva de crecimiento

8,0E+085,0E+121,0E+131,5E+132,0E+132,5E+133,0E+13

0 10 20 30 40 50 60Tiempo (Horas)

Form

ació

n B

iom

asa

UFC

/ml

• Duración 52 horas• Máximo crecimiento a las

24 horas• Recuento de 24 x 1012

UFC/ml

Fermentación Discontinua de Bacterias

0,0

5,0

10,0

15,0

20,0

25,0

0 20 40 60Tiempo (Horas)

Glu

cosa

Res

idua

l

0,0

5,0

10,0

15,0

20,0

Con

sum

o de

Su

stra

to

Glucosa Res idualConsumo de Sustrato

Máximo consumo de sustrato 17.46 g/l en la hora 52 de fermentación.

Fermentación de ActinomicetosFermentación de Actinomicetos

Duración 114 horas.Duración 114 horas.

Máxima formación de Máxima formación de biomasa hora 80.biomasa hora 80.

Recuento de 32 x 10Recuento de 32 x 1066 UFC/ml. UFC/ml.

Curva de Crecimiento

0,0E +00

5,0E +06

1,0E +07

1,5E +07

2,0E +07

2,5E +07

3,0E +07

3,5E +07

0 20 40 60 80 100 120Tiempo (Horas)

UFC/

ml

Fermentación Discontinua Actinomicetos

0

2

4

6

8

10

0 20 40 60 80 100 120Tiempo (Horas)

Glu

cosa

Res

idua

l g/

l

0246810

Glucosa Residual Consumo de Sustrato

Máximo consumo de sustrato 4.88 g/l

a la hora 56

Fermentación de HongosFermentación de HongosCurva de Crecmiento Hongos

1,00E+06

1,00E+07

1,00E+08

1,00E+09

1,00E+10

0 50 100 150Timepo (Hora)

UFC

/ml

Fermentación Hongos

0

5

10

15

20

0 20 40 60 80 100 120Tiempo (Horas)

Glu

cosa

Res

idua

l g/

l

0

5

10

15

20

Cons

umo

de

Sust

rato

g/l

Glucosa Residual Consumo de Sustrato

•Duración 114 horas.•Máxima formación de biomasa hora 80.•Recuento máximo de 8 x 109 UFC/ml

Máximo consumo de sustrato 15.58 g/l en

hora 114

Actividad Enzimática CuantitativaActividad Enzimática Cuantitativa

513 4,05 70 x 1013 48

5434,2 96 x 101332

6014,16 54 x 101324

22614,7949 x 101214

24224,8242 x 1012 12

14505,2316 x 10108

7546,12 23 x 107 4

7906,4523 x 1070

ActividadUA//LpHUFC/mlTiempo

Actividad Amilolítica Bacterias

Actividad Amilolítica

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

0 50 100 150Tiempo (Horas)

B acterias Hongos Actinos

Actividad AmilolíticaActividad Amilolítica

1884.85 92 x 106 8294,52 16 x 107 104

2634.85 14 x 1079054,55 22 x 107 96

5844.91 15 x 10714264,56 20 x 10780

17445.0215 x 10710604,5711 x 10772

7525.11 50 x 106 2804,7587 x 10656

7155.18 56 x 1063374,76 80 x 106 48

5787.48 95 x 105 3644,7278 x 10632

4477.25 90 x 105 4006,71 64 x 106 24

1987.1917 x 10625126,7539 x 1068

2847.1962 x 10626926,43 31 x 106 0

Actividad UA//LpHUFC/mlActividad

UA//LpHUFC/ml Tiempo

ACTINOMICETOS HONGOS

Actividad CelulolíticaActividad Celulolítica

13.717.1215 x 1012 48

233.27.09 20 x 101232

31.356.93 10 x 101224

35.276.75 49 x 101114

43.1 6.4124 x 1010 12

558.46.98 22 x 1098

448.77.0133 x 106 4

427.17.0310 x 1060

ActividadUC/ LpHUFC/mlTiempo

BACTERIAS

Actividad Celulólitica

0200400600

80010001200

0 20 40 60 80 100 120Tiempo (Horas)

UC

/min

/L

A ctinos Hongos B acterias

Actividad CelulolíticaActividad Celulolítica

278.27.08 18 x 106 701.47.02 42 x 106 104

472.27.11 21 x 106668.16.81 74 x 106 96

668.17.13 36 x 106556.46.17 86 x 10680

634.87.16 35 x 105258.65.48 83 x 10672

621.17.19 34 x 106 84.255.48 84 x 10656

5766.93 28 x 10639.195.57 81 x 106 48

485.97.06 19 x 106 201.86.4663 x 10632

1926.89 64 x 105 209.66.79 15 x 106 24

203.87.01 59 x 105848.57.034 x 1058

242.97.06 80 x 10510977.02 32 x 106 0

Actividad UC/ /LpHUFC/ml

Actividad UC/ /LpHUFC/ml Tiempo

ACTINOMICETOSHONGOS

Actividad ProteolíticaActividad Proteolítica

5561,176604.4423x101348

4437,976404.5980x101232

2898,555404.4515x101224

2407,435004.8236x101114

2529,644804.9740x101012

2705,314205.4614x10108

349,693606.3325x1074

238,893006.5714x1070

Actividad específica

ActividadUP/ml

pHUFC/ml 

Tiempo 

BACTERIASActividad Proteolìtica

0100200300400500600700

0 50 100 150Tiempo (Horas)

UP/

ml

Actinomicetos Hongos B acterias

Proteínas Extracelulares

00,20,40,60,8

11,21,4

0 50 100Tiempo (Horas)

Con

cent

raci

ón

mg/

ml

Actinomicetos Hongos B acterias

ActividadActividad ProteolíticaProteolítica

4521,745205.4045x10628985,54004.5224x105104

4137,934805.4156x10612794,63804.5539x10596

2576,694205.4247x10610650,93604.5622x10680

1969,853925.6544x1069659,13404.5754x10672

614,623706.8714x1069275,43204.7535x10656

339,663407.4519x1066500,02604.7624x10648

264,553007.2980x10513836,52204.7295x10532

483,092406.9819x106734,21906.7112x10624

339,512206.6917x106359,01606.7517x1068

157,211806.7318x106323,51506.4328x1060

Actividad Específica

ActividadUP/ mlpH

 UFC/ml

 

Actividad Específica

ActividadUP/ml

pH 

UFC/ml  

Tiempo

 

ACTINOMICETOSHONGOS

Estabilidad a Temperatura y pH Estabilidad a Temperatura y pH Estabilidad a Temperatura Bacterias

1,00E+061,00E+081,00E+101,00E+121,00E+141,00E+16

0 10 20 30

Tiempo (Días)

UFC

/ml

C ongelación R efrigeración Ambiente 60°C

Estabilidad a pH de inóculo bacteriano

1,0E+091,0E+101,0E+111,0E+121,0E+131,0E+141,0E+151,0E+16

0 10 20 30 Tiempo (Dias)

UFC/

ml

pH 1 pH 3 pH 5.5 pH 7 pH 9 pH 10 pH 11

Estabilidad a Temperatura y pHEstabilidad a Temperatura y pHEstabilidad a Temperatura Actinomicetos

1,0E+03

1,0E+04

1,0E+05

1,0E+06

1,0E+07

1,0E+08

0 10 20 30Tiempo (Dias)

UFC

/ml

Congelación Refrigerador Ambiente 60°C

Estabilidad a pH Actinomicetos

1,0E+031,0E+041,0E+051,0E+061,0E+071,0E+08

0 10 20 30 40Tiempo (Días)

UFC/

ml

pH 1 pH 3 pH 5,5 pH 7pH 8 pH 10 pH 11

Estabilidad a Temperatura y pHEstabilidad a Temperatura y pH

Estabilidad pH Hongos

1,0E+031,0E+041,0E+051,0E+061,0E+071,0E+08

0 10 20 30Tiempo (Días)

UFC

/ml

pH 1 pH 3 pH 5,5 pH 7pH 8 pH 10 pH 11

Estabilidad a Temperatura Hongos

1,0E+041,0E+051,0E+061,0E+071,0E+081,0E+09

0 10 20 30 40Tiempo (Días)

UFC/

ml

Congelación RefrigeraciónAmbiente 60°C

Proceso de CompostajeProceso de Compostaje

Parámetros Fisicoquímicos: TemperaturaParámetros Fisicoquímicos: Temperatura

Temperatura Compostaje

15202530354045505560

0 10 20 30 40 50 60 70Tiempo (Días)

Tem

pera

tura

°C

T1 T2 T3 T4 T5

• EPA: 40ºC por 5 días – 55ºC por 4 horas

• Cornell: 40ºC o 50ºC de 2 a 3 días - 55ºC por 4 horas

Proceso de CompostajeProceso de Compostaje

Parámetros Fisicoquímicos: pHParámetros Fisicoquímicos: pH

Variación de pH en el proceso de compostaje

7

7,5

8

8,5

9

- 10 20 30 40 50 60 70Tiempo (Días)

Valo

r pH

T1 T2 T3 T4 T5 (Control)

• OMS: pH 7.0 – 8.5 (Compost maduro)

• Normas chilenas: pH 5.5 – 8.5

• Washington: pH 5.5 – 8.0

Parámetros FisicoquímicosParámetros FisicoquímicosHumedadHumedad

Humedad del compostaje

60

65

70

75

80

- 20 40 60 80Tiempo (Días)

Porce

ntaje

de

hume

dad

T1 T2 T3 T4 T5

Parámetros FisicoquímicosParámetros FisicoquímicosRelación C / N y FRelación C / N y F

31.9328.3828.1834.9433.5Materia Seca

0.260.250.250.2550.27Fósforo

9.212.2212.0712.7412.48Relación C/N

1.591.4251.4051.7051.54Nitrógeno

14.6217.4116.9021.6819.20Carbono

T5% B.S

T4% B.S

T3% B.S

T2% B.S

T1% B.S

Análisis

Parámetros MicrobiológicosParámetros Microbiológicos

Recuento bacteriano

1,00E+07

1,00E+09

1,00E+11

1,00E+13

1,00E+15

1,00E+17

0 10 20 30 40 50 60 70Tiempo (días)

UFC/

ml

T1 T2 T3 T4 T5

Variación Biomasa (Hongos)

0,0E+00

5,0E+06

1,0E+07

1,5E+07

2,0E+07

2,5E+07

3,0E+07

3,5E+07

0 20 40 60 80Tiempo (Días)

UFC

/ml

T1 T2 T3 T4 T5

Variación Actinomicetos

1,00E+051,01E+072,01E+073,01E+074,01E+075,01E+076,01E+077,01E+07

0 20 40 60 80

Tiempo (Días)

UFC

/ml

T1 T2 T3 T4 T5

Otros Parámetros de CalidadOtros Parámetros de Calidad Determinación de PatógenosDeterminación de Patógenos

(2 UFC/g)31 x 10149 x 10190T5

A1522 x 101295T4

A217x 101180T3

A326 x 101260T2

A668 x 101750T1

UFC/gNMP/g

Salmonella sp(A/P)

E. coliUFC/g

Coliformes totales

Tx.

Impurezas

76T4R2 74T1R1 70T2R1 70T1R2 69T4R1 68T3R2 64T5R2 64T5R1 62T3R1 54T2R2

Duración (Días)Tx

69T560T468T367T261T1

% Reducción Tx

93,3T590T4

100T393.4T283.3T1

% germinaciónTx

Otros Parámetros de Calidad

Duración del proceso

Ensayo Ensayo in vivo in vivo para determinar la capacidad para determinar la capacidad estimuladora de crecimiento de estimuladora de crecimiento de

rábano (rábano (Raphanus sativus)Raphanus sativus)

Crecimiento (cm2)

33,4 25,943

94,9

149,8

8,7

153,5

90,1

150,4

020406080

100120140160180

Compo

st T2

Compo

st T4

Compo

st T2:S

uelo (1

:1)

Compo

st T4:S

uelo (1

:1)

5 mL Bac

terias

5 mL H

ongo

s

5 mL Acti

nomice

tos

Suelo:

Turba (

1:1)

Suelo

cm2

Ensayo Ensayo in vivoin vivo CrecimientoCrecimiento

Prueba rango múltiple Prueba rango múltiple DuncanDuncan

CRECIMIENTO(cm2)

S+H CT4 CT2 CT2+S T+S CT4+S S+B S S+A PROMEDIO 8.7 25.9 33.4 43 90.1 94.9 150 150.4 153.5

S+H: Suelo + hongos S+B: Suelo + bacteriasCT4: Compost T4 S: SueloCT2: Compost T2 S+A: Suelo + actinomicetosCT2+S: Compost T2 + suelo T+S: Turba + sueloCT4 +S: Compost T4 + suelo

Nivel de Significancia: 0.01

Ensayo Ensayo in vivoin vivo

Biomasa TotalBiomasa TotalBiomasa total (g)

5,1 4

9,8 10,99,5

1,2

14,87

6,6

12,4

02468

10121416

Compo

st T2

Compo

st T4

Compo

st T2:S

uelo (1

:1)

Compo

st T4:S

uelo (1

:1)

5 mL Bac

terias

5 mL H

ongo

s

5 mL Acti

nomice

tos

Suelo:

Turba (

1:1)

Suelo

Gra

mos

Prueba rango múltiple Duncan Prueba rango múltiple Duncan

BIOMASA TOTAL (g) S+H CT4 CT2 S+T S+B CT2+S CT4+S S S+A

PROMEDIO 1.15 4.02 5.14 6.61 9.45 9.84 10.93 12.41 14.87

S+H: Suelo + hongos S+B: Suelo + bacteriasCT4: Compost T4 S: SueloCT2: Compost T2 S+A: Suelo + actinomicetosCT2+S: Compost T2 + suelo T+S: Turba + sueloCT4 +S: Compost T4 + suelo

Nivel de Significancia: 0.01

Ensayo Ensayo in vivoin vivo

Porcentaje de Producción

37,5

7562,5

37,5

62,5

37,5

100

62,550

020

406080

100120

Compo

st T2

Compo

st T4

Compo

st T2:S

uelo (1

:1)

Compo

st T4:S

uelo (1

:1)

5 mL B

acter

ias

5 mL H

ongo

s

5 mL A

ctino

miceto

s

Suelo:

Tur

ba (1

:1)

Suelo

Por

cent

aje

(%)

Producción de TubérculosProducción de Tubérculos

Ensayo Ensayo in vivoin vivo

Nitrógeno Total de suelo

0,82 0,82

0,630,47

0,64

0,45

0,64

0,36

0,63

00,10,20,30,40,50,60,70,80,9

Compo

st T2

Compo

st T4

Compo

st T2:S

uelo (1

:1)

Compo

st T4:S

uelo (1

:1)

5 mL Bac

terias

5 mL Hon

gos

5 mL Actin

omice

tos

Suelo:

Turba (

1:1)

Suelo

Porc

enta

je (%

)

Ensayo Ensayo in vivoin vivo

Nitrogeno Foliar (g/planta)

0,5030,445

0,378 0,363 0,3450,276

0,158 0,1230,037

0

0,1

0,2

0,3

0,4

0,5

0,6

5 mL Actin

omice

tos Suelo

5 mL Bact

erias

Compo

st T4:S

uelo (1

:1)

Compo

st T2:S

uelo (1

:1)

Suelo:

Turba (

1:1)

Compo

st T2

Compo

st T4

5 mL Hong

os

(g/p

lanta

)

Valores de Nitrógeno Valores de Nitrógeno

9,8866,112,9750,4453,591,080,364,500S

6,0152,162,3940,2764,171,920,644,590T+S

11,1758,822,6470,5033,381,350,454,500S+A

0,8224.001,0800,0372,511,920,644,500S+H

8,4060,262,7120,3784,001,410,474,500S+B

6,7358,183,1340,3633,321,890,635,387CT4+S

8,4545,221,8450,3453,511,890,634,080CT2+S

2,8839,581,6920,1233,052,460,824,275CT4

3,0848,802,4970,1583,082,460,825,115CT2

g/planta% g/bolsa%

% asimilación

% total N perdidoN

perdidog/bolsa

N Total FoliarN final N inicial

g/bolsaTratamiento

CONCLUSIONESCONCLUSIONES

Las condiciones en el proceso de fermentación Las condiciones en el proceso de fermentación permitieron la obtención de una alta concentración de permitieron la obtención de una alta concentración de biomasa, (10biomasa, (1013 13 UFC/ml para bacteriasUFC/ml para bacterias;10;1088 UFC/ml en UFC/ml en hongos y 10hongos y 106 6 UFC/ml para actinomicetos)UFC/ml para actinomicetos)

Los inóculos presentaron un buena producción Los inóculos presentaron un buena producción enzimática, permitiendo una mayor actividad enzimática, permitiendo una mayor actividad microbiana en el compostaje y alta degradación de microbiana en el compostaje y alta degradación de materia orgánica.materia orgánica.

La adición de 600 ml de cada inóculo aceleró la La adición de 600 ml de cada inóculo aceleró la degradación de las macrófitas acuáticas en el degradación de las macrófitas acuáticas en el compostaje, acortando el proceso de degradación, compostaje, acortando el proceso de degradación, obteniendo un compost con el máximo grado de obteniendo un compost con el máximo grado de calidad de acuerdo con la normatividad internacional. calidad de acuerdo con la normatividad internacional.

La utilización de compost mezclado con suelo (1:1) y La utilización de compost mezclado con suelo (1:1) y la inoculación con actinomicetos y bacterias estimuló la inoculación con actinomicetos y bacterias estimuló el desarrollo vegetal y producción en el desarrollo vegetal y producción en Raphanus Raphanus sativussativus, lo que permite utilizarlos como abonos , lo que permite utilizarlos como abonos orgánicos y biofertilizantesorgánicos y biofertilizantes..

RECOMENDACIONESRECOMENDACIONES

• Llevar a cabo pruebas de antagonismo entre las Llevar a cabo pruebas de antagonismo entre las cepas de actinomicetos, bacterias y hongos, para cepas de actinomicetos, bacterias y hongos, para optimizar su actividad al ser adicionados en un optimizar su actividad al ser adicionados en un proceso de compostaje como inóculo mixto. proceso de compostaje como inóculo mixto.

• Utilizar los inóculos producidos en una concentración Utilizar los inóculos producidos en una concentración de 2% en el manejo de residuos como buchón o de 2% en el manejo de residuos como buchón o elodea y en procesos de degradación de otros elodea y en procesos de degradación de otros sustratos orgánicos.sustratos orgánicos.

• Hacer análisis de macro y microelementos, para Hacer análisis de macro y microelementos, para determinar el flujo de estos del suelo a la planta y su determinar el flujo de estos del suelo a la planta y su influencia en el crecimiento y desarrollo en el cultivo influencia en el crecimiento y desarrollo en el cultivo de rábanode rábano..

Determinar la existencia o ausencia de sustancias Determinar la existencia o ausencia de sustancias tóxicas o inhibitorias del crecimiento vegetal del tóxicas o inhibitorias del crecimiento vegetal del rábano y la disponibilidad de nutrientes en el suelo rábano y la disponibilidad de nutrientes en el suelo que se inocula con los hongos producidos en esta que se inocula con los hongos producidos en esta investigación; lo cual permitirá dilucidar el efecto investigación; lo cual permitirá dilucidar el efecto de éste en el desarrollo de las plantas. de éste en el desarrollo de las plantas.

Usar los inóculos producidos en este trabajo tanto Usar los inóculos producidos en este trabajo tanto de bacterias como de actinomicetos en acciones de bacterias como de actinomicetos en acciones estimuladoras de crecimiento vegetal para estimuladoras de crecimiento vegetal para diferentes cultivos agrícolas, así como el compost diferentes cultivos agrícolas, así como el compost mezclado con suelo como acondicionador orgánico.mezclado con suelo como acondicionador orgánico.

“Abre nuestros ojos, oh Señor, para que veamos tu

esplendor; une a nuestra fe, ciencia y virtud, derrama en

nosotros tu plenitud”

Variación de temperatura en el Variación de temperatura en el proceso de compostajeproceso de compostajeVolverVolver