resÚmenes de proyectos de investtigaciÓn...

FUNDAMENTO

La infección por el virus de la hepatitis B (VHB)constituye una de las enfermedades infecciosas másfrecuente a nivel mundial, más de 350 millones de per-sonas en todo el mundo y en España afecta a un 2% dela población. Aunque en la mayor parte de los casos lainfección conduce al desarrollo de una hepatitis agudacon posterior recuperación clínica, un porcentaje sig-nificativo de enfermos progresan hacia la infección cró-nica con el consiguiente riesgo de desarrollar cirrosishepática y hepatocarcinoma. El IFNa constituye, juntocon los análogos de nucleosidos: lamivudina, adefoviry entecavir el tratamiento actual de esta patología. Latasa de respuesta al tratamiento con el IFN-a recombi-nante es de un 30% y sus efectos adversos son fre-cuentes y moderadamente importantes. Los análogosde nucleosidos aunque muy activos en la inhibición dela replicación viral, inducen la aparición de resisten-cias durante el tratamiento y la retirada del fármacosupone casi invariablemente la reactivación de la infec-ción. Por todo ello existe la necesidad de desarrollarnuevas estrategias terapéuticas más eficaces que subs-tituyan o complementen las actualmente disponiblesfrente a la infección por el virus de la hepatitis B.

Una de las posibilidades más atractivas consiste enutilizar sistemas que bloqueen la información genéticade los virus. La inhibición de la síntesis de proteínasesenciales para la biología del virus nos permitirá elimi-nar o reducir la infección viral. Para ello, durante los últi-mos años se han desarrollado una serie de estrategiasque tienen como objetivo la interferencia con RNAs men-sajeros específicos. Estas técnicas basadas en híbridosde la molécula inhibidora con el RNA diana incluyenmoléculas como los ribozimas, los oligos antisentido, losRNAs interferentes (iRNAs) y un sistema desarrollado ennuestro laboratorio los snRNAs U1 modificados. Estosdos últimos métodos son los que han producido losmejores resultados tanto por su especificidad como porel porcentaje de inhibición que se obtiene.

Una limitación muy importante para la eficaciaterapéutica de estos sistemas de inhibición es conse-guir su vehiculización al órgano o célula diana. Por estarazón en este proyecto hemos trabajado también en lacaracterización de vectores para traducir el hígado deforma eficaz.

MATERIALES Y MÉTODOS

Diseño de los snRNA U1. Se han elegido secuen-cias muy conservadas del genoma viral, para evitarque mutaciones puntuales en el genoma viral haganque el virus escape a la inhibición.

Construcción de los plásmidos. Para la expresiónsnRNA U1 modificados utilizaremos un plásmido queproduce Us a partir del propio promotor de U1.

Análisis de la inhibición de la expresión génicain vitro. Se transfectaron células HEPG2-2215 queexpresan el genoma del virus de la hepatitis B. 2 díasdespués de la transfección hemos cuantificado porElisa la cantidad de antígeno de superficie (SAg) y antí-geno E (EAg) presentes en el sobrenadante de las célu-las. Comparado con células control transfectadas conun snRNA U1 agreste.

Construcción y producción de vectores basadosen el virus adenoasociado serotipos 1, 5, 6 y 8. Losvirus AAV recombinantes expresan el gen de la lucife-rasa cuya expresión puede ser analizada y cuantificadain vivo utilizando una cámara CCD.

RESULTADOS

Desarrollo de los sistemas de inhibición.Construimos cuatro plásmidos que codifican moléculasde U1 snRNA capaces de interaccionar con el extremo 3´de los mRNAs del virus de la hepatitis B. Con elloshemos transfectado células 2215 que expresan el geno-ma del virus de la hepatitis B se han transfectado conplásmidos que expresan el U1 agreste (U1WT) o combi-naciones de dos (U1+U3) o cuatro (Mix) plásmidos quecodifican para U1 snRNAs modificados en su extremo 5´para hibridar con los mRNAs del virus de la hepatitis B.Dos días después de la transfección se cuantificómediante Elisa la cantidad de antígeno de superficie(SAg) y de antígeno E (EAg). Células presentes en elsobrenadante de las células. Comparado con célulascontrol transfectadas con un snRNA U1 agreste, ningunode los RNAus construido fue capaz de disminuir la pro-ducción de los antígenos virales. Sin embargo, combina-ciones de dos RNAus transfectados en la misma célulapermiten disminuir la acumulación de EAg y combina-ciones de los cuatro RNAus, permiten inhibir la produc-ción de los dos antígenos virales (Fig. 1 A).

Selección del vehículo apropiado para la transfe-rencia génica al hígado. Hemos construido y produci-do AAVs con cápsides de los serotipos 1, 5, 6 y 7 por-tadores de dos tipos de estructuras genómicas diferen-tes una de cada sencilla y otra de doble hebra. Todoslos virus portaban el gen reportero luciferasa y tras suinyección en ratones por vía intravenosa se analizó laexpresión del trasgen en el hígado in vivo.

A partir de estos resultados (Fig. 1B) podemosconcluir que el AAV serotipo 8 es el mejor vector parala transducción de los hepatocitos murinos. También

Inhibición de la expresión génica de proteínas del virus de la hepatitisB utilizando diferentes sistemas de inhibición

G. GonzálezDepartamento de Medicina Interna. Universidad de Navarra. Pamplona.

505An. Sist. Sanit. Navar. 2007, Vol. 30, Nº 3, septiembre-diciembre

RESÚMENES DE PROYECTOS DE INVESTTIGACIÓN CONCEDIDOS POR EL DEPARTAMENTO DE SALUD

NOTAS INFORMATIVAS

506 An. Sist. Sanit. Navar. 2007, Vol. 30, Nº 3, septiembre-diciembre

podemos concluir que la estructura genómica de doblehebra nos permite alcanzar mayores niveles de expre-sión. Por estas razones hemos determinado que el vec-tor que vamos a utilizar para realizar la realización delos ensayos de inhibición de la replicación del HBV vaa ser un AAV serotipo 8 de doble hebra.

CONCLUSIONES

Hemos diseñado cuatro snRNAs U1 modificadosque administrados en combinación a células que per-

miten la replicación del virus de la hepatitis B soncapaces de inhibir en mas de un 50% la expresión deproteína virales. Por otro lado hemos caracterizadoun sistema de vehiculización basado en virus adeno-asociados capaces de transferir con una gran eficaciamaterial genómico al hígado. En estos momentosestamos en condiciones de vehiculizar nuestro siste-ma de inhibición al hígado con objeto de inhibir en elhepatocito la replicación del HBV.

Figura 1. A. Inhibición de la producción de antígenos del virus de la hepatitis B en células HepG2-HBV tras habersido transducidas con plásmidos que expresan U1 modificados.

B. Análisis de la expresión de luciferasa in vivo tras inyección de AAVs de los serotipos 1,8,5 y 6 en rato-nes BALB/c hembras y machos. El AAV serotipo 8 es el mejor serotipo para la transducción del hígado.

1600

1400

1200

1000

800

600

400

200

0

ELIS

A U

NIT

S/ug

pro

teim

U1WT U1 + U3 Mix

S Ag

Ag

B

Log

(ph

oton

s/se

c/cm

2

9

8

7

6

5

4

AAV1

0 71421 35 91 0 14 35 91Days

0 14 35 91 0 14 35 91

AAV8 AAV5 AAV6

AAVdsAAVss Male

AAVdsAAVss Female


PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN CONCEDIDOS DPTO. DE SALUD

Opiniones y actitudes de la sociedad navarra hacia la sanidad en laComunidad Foral. 2006

F. San MiguelInstitución Futuro. Gorraiz. Navarra.

FUNDAMENTO

Las encuestas de satisfacción y opinión sobre losservicios públicos pueden ser utilizados como un indi-cador de su calidad. Por ello, La Institución Futuro rea-lizó una encuesta a una muestra de la población nava-rra en 2004 con el fin de valorar su satisfacción con elsistema público de salud. No hay que olvidar que comoapunta Street (2006), este tipo de estudios de satisfac-ción no aportan información sobre el efecto que la asis-tencia sanitaria tiene sobre la salud de la población,tampoco sobre cuáles deberían ser la medidas quedeberían ser desarrolladas y no permiten valorar laevolución de la atención a lo largo del tiempo.

Por ello, se vuelve a realizar la misma encuestapasados dos años, con el fin de medir la evolución dela satisfacción de los ciudadanos con el sistema sanita-rio público y la posible influencia de las políticas públi-cas desarrolladas en este periodo.

Además, la encuesta aborda no sólo cuestionesrelacionadas con la satisfacción sino la opinión sobreaspectos considerados importantes en la atenciónsanitaria, como la información que reciben los ciuda-danos, el control del gasto sanitario o la atención far-macéutica. En esta edición, el estudio hace hincapié yprofundiza además en la utilización y valoración de losservicios de urgencias hospitalarias, la opinión sobrelas listas de espera y la información sobre la salud y laatención sanitaria que reciben los ciudadanos.

MATERIAL Y MÉTODOS

Se realiza una encuesta telefónica a una muestraaleatoria de 302 individuos mayores de 18 años de lapoblación navarra, lo que representa un error muestralde cerca del 6% (en el supuesto del muestreo aleatoriosimple). Además se realizaron 200 encuestas adiciona-les siguiendo la misma metodología para las preguntastipo Likert, las preguntas de carácter sociodemográfi-co y las dos primeras preguntas sobre uso de los ser-vicios sanitarios y satisfacción con los mismos. Porello, al presentar los resultados, en algunos casos secuenta con 502 observaciones y 302 en otros.

La encuesta se realizó a finales de octubre (302entrevistas) y a comienzos de diciembre de 2006 (las200 adicionales), prácticamente dos años después dela realizada en 2004.

El análisis de la información obtenida se basa prin-cipalmente en la comparación de distribuciones de fre-cuencias para cada una de las cuestiones tratadas. Laexistencia de relaciones significativas de asociaciónentre diferentes variables se contrasta mediante elestadístico Chi Cuadrado utilizando el programa SPSS14.0. en los aspectos más interesantes se comparan losresultados con los obtenidos en 2004.

RESULTADOS

De forma general, al igual que en 2004, la mayoríade los encuestados realiza una valoración satisfactoria

o muy satisfactoria de la atención (Tabla 1) y la infor-mación recibida, destacando la motivación y la prepa-ración del personal sanitario por una mayoría de lamuestra. Se hace una buena valoración también delservicio de urgencias hospitalarias. Destaca el hechode que el 22,2% de las personas que fueron a urgenciasconsideraba que su problema era leve y el 21% desco-nocía que pudiera acudir a un centro de urgencias deAtención Primaria. La mayoría de las personas (71%)considera que el tiempo que tuvo que esperar fue razo-nable o corto y el 63% reconoce que su problema fueatendido con seriedad, profesionalidad e interés.

La principal demanda, por casi la mitad de la mues-tra, en relación a la atención primaria es conseguir citade forma rápida, y de forma contraria quizá a lo quecabría esperar y los resultados obtenidos en 2004, el30% reclama más tiempo con su médico (Figura 1).

En cuanto a las secciones que se han ampliado enesta edición, se aprecia un cambio en los medios utili-zados por la población para obtener información sobretemas relacionados con la salud y la asistencia sanita-ria. Este resultado es más visible para los más jóvenesy de mayor nivel educativo, que tienden a utilizar fuen-tes alternativas de información, especialmenteInternet. El 50% de los encuestados cree que los ciuda-danos deberían estar mejor informados y recibir másinformación sobre temas relacionados con la salud y laatención sanitaria y de forma mayoritaria se piensaque debe ser la administración y los médicos de cabe-cera quien proporcione dicha información.

De forma mayoritaria se reconoce que es necesariocontrolar el gasto sanitario siempre que ello no afecte ala calidad asistencial. En cuanto a la disponibilidad de losindividuos a participar en mayor medida en la financia-ción de la atención, se percibe una ligera mayor predis-posición en 2006. Cuando no se consideran las respues-tas indecisas, el 46% de la muestra estaría dispuesta aaceptar subidas impositivas (28% en 2004) y el 50% acep-taría tener que pagar por algunos servicios (40% en2004). Esta opinión es más clara entre las personas másjóvenes y de mayor nivel educativo.

Las cuestiones referidas a la farmacia y los medi-camentos indican también algunos cambios con res-pecto a 2004 y de forma clara también en este caso porparte de los grupos de población más jóvenes y demayor nivel educativo. Resulta positivo comprobarque el 47% declara que el farmacéutico les ofrece medi-camentos más baratos e igualmente eficaces que losrecetados por su médico y cerca del 60% estaría dis-puesto a aceptar dichas sustituciones. Aumenta tam-bién (al 70%) la opinión de que se abusa del consumode medicamentos cuando no hay que pagar por ellos.

El dato más negativo se refiere a las listas de esperaquirúrgicas. Más del 70% de los encuestados piensa quelas listas de espera son demasiado largas debido princi-palmente a la falta de recursos humanos y materiales(69%). El crecimiento que han experimentado las listas

NOTAS INFORMATIVAS


de espera en los últimos años en Navarra se percibe tam-bién a través de la opinión de los encuestados: la granmayoría opina que éstas han aumentado en el último añoasí como el número de personas que tiene que esperarmás de seis meses. Por otra parte, más del 80% de losencuestados cree que las listas de espera en Navarra soniguales o menores que en otras CCAA (aunque un 50% nopodría valorarlo). Preguntados sobre su disponibilidad apagar para reducir las listas de espera, un 50% admiteque dependería de su estado de salud, y son más los queno estarían dispuestos frente a los que sí.

Esta cuestión ha podido influir negativamente enla percepción sobre la evolución de la calidad asisten-cial en los últimos años. Ante la afirmación “la calidadde la sanidad navarra ha descendido en los últimosaños”, aumenta la proporción de personas que diceestar de acuerdo, del 28% en 2004 al 42% en 2006.

CONCLUSIÓN

La principal conclusión se refiere a la satisfaccióny la valoración positiva que los encuestados hacen dela sanidad pública navarra en general. Algunos datosson llamativos, como la relativa elevada proporción de

los encuestados que afirma estar dispuesto a contri-buir a la financiación pública. Esto puede deberse aque la muestra utilizada en 2006 es algo más joven y demayor nivel educativo que la empleada en 2004 y estesubgrupo poblacional, como se ha mencionado se dis-tingue de forma clara en cuanto a sus opiniones y acti-tudes ante la sanidad pública.

Los resultados pueden sugerir también que las per-sonas más jóvenes y de mayor nivel educativo se distin-guen por su mayor disponibilidad a jugar un papel másactivo en la provisión de atención sanitaria, demandanmás información, tienen una mayor conciencia de lanecesidad de controlar el gasto sanitario y están másdispuestos a asumir cierta cofinanciación del mismo.

De cara al futuro, destacan dos cuestiones quedeberán ser tenidas en cuenta por los gestores del sis-tema: el control de las listas de espera quirúrgicas, sugestión por “tipologías” de pacientes y la adecuadagestión de sus recursos humanos. Otro elemento sobreel que existe también espacio para la mejora es la refe-rente a la corresponsabilidad del ciudadano, tratada demanera tímida en el III Plan de Salud 2006-2012.

Tabla 1. Satisfacción con los servicios sanitarios.

Valoración satisfactoria o muy satisfactoria de la atención (%)

2004 2006

Atención primaria 96,1 94,6Urgencias hospitalarias 86,1 87,6Urgencias de atención primaria 91,3 91Radiografía 98,5 99,2Mamografía 100 97,1Ecografía 100 98,1Scanner 100 95,5Resonancia Magnética 100 90,9Consulta con el especialista 94,2 93,9Atención Hospitalaria 100 97,2

Figura 1. Principales demandas sobre la Atención Primaria.

Disponer de más tiempopara ser atendido por elmédico

Conseguir cita deforma rápida

Ser recibido a la horade la cita

2,3

6

30,5

46

40

10,3

10,1

17,8

43,3

54

61,4

12,4

0 20 40 60 80



Carcinoma urotelial. Detección de alteraciones cromosómicas mediantehibridación in situ fluorescente y su significado en la progresión de laenfermedad como marcadores de capacidad de recidiva tumoral

E. Urbiola, Y. Laplaza, R. Guarch, E. Almudévar, S. Rázquin, M. Ruiz Ramos, A. Rivas, A.PurasHospital Virgen del Camino. Pamplona.

INTRODUCCIÓN

En el carcinoma urotelial se han investigado dosvías de carcinogénesis: mutaciones de p53 y anomalíascromosómicas numéricas y estructurales, principal-mente aneusomías y deleciones. La primera vía inter-viene más en casos de carcinoma de alto grado depatrón sólido o plano mientras que la segunda se rela-ciona con carcinomas papilares de bajo grado, superfi-ciales y con gran capacidad de recidiva.

El diagnóstico del carcinoma urotelial sigue basán-dose en la biopsia y el seguimiento de los pacientes serealiza mediante cistoscopias y citologías de orina. Enlos últimos años se han desarrollado nuevas técnicas.Algunas alteraciones cromosómicas (aneuploidías, dele-ciones) se pueden detectar mediante hibridación in situfluorescente (FISH). Se ha observado que las alteracio-nes más frecuentes en cáncer urotelial son las polisomí-as del 3, 7 y 17 y la deleción 9p21, en el cromosoma 9,donde se localiza el gen supresor tumoral CDKN2A/p16.La pérdida de este gen se considera un hecho crítico enla recidiva y progresión del carcinoma urotelial. No obs-tante, no se sabe si reflejan la existencia de una neopla-sia o un estado de inestabilidad del urotelio que propiciael que se desarrolle ésta, y de qué forma evolucionanestas alteraciones a lo largo de la progresión de la enfer-medad. Esto impide que, en el momento actual, estemétodo de detección pueda aplicarse de manera que dis-minuya el número de cistoscopias necesarias para elseguimiento del paciente. Este estudio pretende analizarlas alteraciones cromosómicas observadas en la progre-sión de la enfermedad en casos de cáncer urotelial reci-divante desde el tumor primario hasta la recidiva y ver sise puede predecir su curso.

MATERIAL Y MÉTODOS

Estudio retrospectivo: Se seleccionaron 83 pacien-tes (archivo 1998-2002) con carcinoma urotelial recidi-vante, tomando un bloque de parafina del tumor prima-rio (83) y otro de la o las recidivas (96). Se contruyeron12 bloques multitejidos con un Tissue-arrayer MTA1 deBeecher Instruments Inc., con aguja de 2.0 mm. . Para laFISH se utilizó el ”Urovysion Bladder Cancer RecurrenceKit” de Vysis, con un cóctel de sondas (CEP 3 ,CEP 7 ,CEP17, y LSI 9p21), y se procedió según instrucciones delfabricante. Se valoró cada sonda CEP considerandocomo positiva cuando al menos un 10% de las célulasvalorables mostraban más de dos señales por núcleo. Lasonda 9p21 se valoró de forma similar, considerándosedeleción si se observaba en un 25% de las células. Lainmunohistoquímica (IHQ) se llevó a cabo en un sistemaBondMax de Vision Biosystems automatizado, con p53monoclonal (clon DO-7) Dako, prediluído, y p16 mono-clonal (clon 16P07) MD a 1:50.

Estudio prospectivo: Se seleccionaron muestrasde orina de 24 pacientes con sospecha de carcinomade vejiga procediéndose de forma similar a la descritaen el estudio prospectivo. En las cistoscopias se reali-zó toma de biopsias en los casos sospechosos.

RESULTADOS

Los resultados se exponen en la tabla 1 (estudioretrospectivo) y tabla 2 (estudio prospectivo).

DISCUSIÓN

En la génesis del carcinoma urotelial se han plantea-do dos grupos con diferente carcinogénesis: los tumorespapilares exofíticos no invasivos, que suponen el 80% delos casos y que tienen un comportamiento recidivante, ylos tumores sólidos infiltrantes que tienen un comporta-miento agresivo, con invasión, progresión en estadio ymetástasis. Entre estos dos grupos hay cierto solapa-miento ya que un 10-15% de los tumores papilares pro-gresan hacia los invasivos de alto grado. No se conoce elmecanismo de esta progresión.

Los conocimientos genéticos actuales han propi-ciado un cambio en la clasificación de los carcinomasuroteliales. Anteriormente, se dividían en superficiales(pTa, pT1 y CIS) e invasivos (pT2-T4). La actual clasifi-cación de la OMS (2004) diferencia tres grupos:

– Neoplasia papilar urotelial de bajo potencial malig-no.

– Carcinoma transicional de bajo grado: son tumo-res papilares no invasivos de bajo grado (antiguospTa G1-2). Muestran pocas alteraciones génicas,entre ellas pérdidas del cromosoma 9. La aneu-ploidía se da en menos del 50% de los casos. Lasmutaciones de p53 son raras.

– Carcinoma transicional de alto grado: tumoresinfiltrantes (pT1-4) y tumores no infiltrantes dealto grado (pTaG3 y CIS). Son genéticamente ines-tables: amplificaciones, mutaciones de p53, aneu-ploidía en 90% de los casos, pérdida total o parcialdel cromosoma 9. La aneuploidía parece estar muyrelacionada con el grado y el estadio tumoral.

En nuestro estudio retrospectivo (1998- 2002) sehan dividido los carcinomas en dos grupos, siguiendola actual clasificación de la OMS: los carcinomas debajo grado (126) y los de alto grado (53) .

El diagnóstico del carcinoma urotelial y su segui-miento sigue basándose en la cistoscopia y biopsia.Las técnicas de estudio de alteraciones genéticas,como el análisis mutacional no son aplicables al diag-nóstico y seguimiento de los pacientes en la práctica.El seguimiento se realiza con cistoscopias y citología,

NOTAS INFORMATIVAS


con una sensibilidad baja para el diagnóstico de tumo-res de bajo grado.

En los últimos años se han desarrollado nuevastécnicas que no han demostrado un incremento en lasensibilidad o bien exigen un gran consumo de tiempoy personal. Algunas alteraciones cromosómicas (aneu-ploidías, deleciones) se pueden detectar mediante FISHbasada en sondas de DNA. Las alteraciones más fre-cuentes en cáncer urotelial son las polisomías del 3, 7y 17, y la deleción 9p21, locus del gen supresor tumo-ral CDKN2A. La pérdida de este gen es un hecho críticoen la recidiva y progresión del carcinoma urotelial.

En la carcinogénesis de los tumores uroteliales seha visto implicados genes como CDKN2a (p16) ( 9p21),cuya pérdida se da en el 50% de los tumores indepen-diente del grado y estadio, o p53 (17p13), con mutacio-nes frecuentes en tumores invasivos.

La aneuploidía en los carcinomas de urotelio se harelacionado con el grado y estadio. En los tumores dealto grado se refiere hasta en un 90 % de los casos, y enlos de bajo grado en un 50%. Otros no encuentran poli-somías y sí pérdidas del cr. 9 como un evento tempra-no en la carcinogénesis. En nuestro estudio se confir-ma la mayor incidencia en los tumores de alto grado(77%) frente a los de bajo (42%). No se observaron dife-rencias entre los tumores primarios y los recidivados.

El gen CDKN2A localizado en 9p21 está inactivadoen muchas neoplasias. Codifica la proteína p16INK4a.Se ha observado en algunos estudios pérdidas del cr. 9en más del 50% de los tumores uroteliales de cualquiergrado y estadio, e incluso llegando en algunos estudiosal 90%. Casi siempre es debida a deleciones tanto entumores superficiales como invasivos.

En nuestro estudio la deleción 9p21 se da en un71% de los casos de bajo grado y en el 60% de los dealto. En la literatura se describen pérdidas totales oparciales del cromosoma 9 en un porcentaje variablellegando hasta el 90%. Esta diferencia puede deberse aque la sonda utilizada aquí está restringida a la región9p21 por lo que no detecta pérdidas de otros locus. Noobstante, esta región es la de mayor interés ya quealoja el gen CDKN2a (p16).

Combinando las alteraciones numéricas 3, 7 y 17 yla deleción 9p21, se detecta un 88% de tumores conalguna alteración cromosómica, llegando al 91% en losde alto grado. Esto concuerda con estudios previos ydemuestra su utilidad en la detección de carcinoma deurotelio. No obstante, siempre habrá un porcentaje decasos (12%) que no será detectado.

En este estudio se han abordado los genes p53(17p13) y CDKN2a (9p21) (p16) desde dos puntos devista: mediante la IHQ de las proteínas que codifican(p53 y p16) y con las sondas dirigidas a la región CEPdel cr 17 y al locus 9p21 del cr. 9.

En el estudio de p53, los tumores son positivos enun 63%, sin que se observen diferencias entre alto ybajo grado.

La proteína p53 nativa, producto del gen supresortumoral p53, de vida media corta, interviene en la para-da en G1-G0 y G2-M, y en la apoptosis. Si falta, la célula sereplica de forma incontrolada. Las mutaciones de p53resultan en una pérdida de su función, con una p53mutante de vida media larga que se acumula en elnúcleo, por lo que será detectada por IHQ. Sin embargono todas las p53 mutantes se acumulan y en circunstan-cias (hipoxia, activación de oncogenes…) puede acumu-

larse p53 nativa, no mutada, en el núcleo y ser detectada.A pesar de esto suele interpretarse la detección IHQ dep53 como indicativo de mutación. Debido a estas cir-cunstancias, el valor predictivo de la p53 en cuanto a pro-nóstico falla en muchos de los casos.

En nuestro estudio, si comparamos la expresiónIHQ de p53 con el número de cr 17 no existe diferenciaentre los tumores con polisomía del cr 17 y aquelloscon dos copias. Ambos expresan p53 (66 y 64 % res-pectivamente). Esto podría deberse a que la expresiónde p53 es debida a mutaciones, independientementedel número de copias del cromosoma y por tanto delgen. Sin embargo, en los casos con pérdida de uno delos cr. 17 (8%), un 60% eran negativos para p53.

Algunos estudios consideran que la p53 mutantees la causante de inestabilidad genómica ya que lasneoplasias que sobreexpresan p53 se acompañan deaneusomía. Sin embargo no encuentran tampoco unacorrelación entre la polisomía y la expresión de p53,considerando que hay otros mecanismos implicadosque colaboran en la inestabilidad genómica.

En nuestro estudio en un 34% de casos coexistenaumento de copias de cr 17 y negatividad de p53. Enestos casos es evidente que la p53, mutada o no, no hasido la causa de inestabilidad cromosómica. Y que tam-poco el aumento de número de copias del cr. 17, y portanto del gen p53, conlleva incremento de proteína, porlo que tiene que haber diversos fenómenos imbricados(mutaciones, polisomías, silenciamiento por metila-ción u otras causas) en cada caso en particular.

La expresión IHQ de p16 presenta resultados simi-lares entre los grupos de alto y bajo grado (30% positi-vos). Comparando los resultados obtenidos en el estu-dio IHQ y en el de la deleción 9p21, veremos que el 86%de los casos con pérdida homocigota de esta región noexpresan p16, y lo mismo para el 73% de los casos conpérdida de uno de los alelos.

La proteína p16, producto del gen CDKN2A, parti-cipa en el ciclo celular. Hay distintas causas de inacti-vación del gen. Lo más frecuente es la deleción homo-cigota. Las mutaciones son raras. Otros mecanismosepigenéticos (metilación) se han descrito. Cualquierforma de inactivación del gen lleva a una pérdida deexpresión de la proteína p16.

Sin embargo, en este estudio no hay una correla-ción significativa, lo que sugiere la intervención deotros mecanismos distintos. Se ha apuntado un posiblepapel colaborador entre p53 y p16 en la carcinogénesisdel cáncer de urotelio.

Analizando por separado los siete casos que reci-divaron con progresión se observa una correlaciónpositiva en la deleción 9p21 entre primarios y recidi-vas que puede indicar que se trata de un evento tem-prano que se perpetúa en ellos. Así mismo, hay corre-lación lineal entre p53 y p16 en cada caso, tal vez porel papel colaborador que se les ha atribuido.

En cuanto al significado de las anomalías cromo-sómicas en el carcinoma urotelial, la deleción de 9p21se ha relacionado con carcinomas recidivantes, habién-dose referido cifras del 90%, si bien algunos estudiabanotras regiones distintas del cr. 9. Nuestros resultados(77%) indican que, aunque la pérdida de esta región esde gran interés, usada aisladamente podría no detectarmuchos casos. Por tanto, es recomendable su usojunto con el resto de sondas. Como hemos podido veren este estudio, un 90% de los tumores sí muestranalguna alteración, aneusomía o deleción.

Lo que no se ha podido demostrar es que algunode estos parámetros pueda tener un valor predictivode la evolución del tumor. Un 22% no mostró alteracio-nes y sin embargo recidivaron. Lo mismo ocurre con laexpresión de p53: un 37% fueron negativos.

Para estudiar la eficacia del test en cáncer urotelialse han desarrollado estudios analizando comparativa-mente los resultados de citología y FISH, concluyendoque la FISH tiene mayor sensibilidad y similar especifi-cidad. En nuestro estudio se abordó este aspecto en laparte prospectiva del trabajo. Se diagnosticaron porFISH el 73% de los carcinomas uroteliales, mientras quela citología urinaria detectó un 64% de los mismos. Loscasos negativos fueron diagnosticados en un 87% porFISH frente al 60% de la citología. Los tres falsos nega-tivos por FISH correspondieron en las biopsias poste-riores a dos displasias de bajo grado y a un carcinomapobremente diferenciado. De los ensayos positivos, endos no se ha confirmado hasta el momento la presen-cia de recidiva. La evolución posterior de los casospodrá confirmar o no el posible “efecto anticipatorio”del test. Creemos que, más que un valor predictivo, loque puede indicar el hallazgo de alteraciones por FISHes la presencia de neoplasia no detectable por cistos-copia ni citología o biopsia.

No se conoce si las alteraciones cromosómicas quese detectan por este método reflejan la existencia de unaneoplasia o un estado de inestabilidad del urotelio quepropicia el que se desarrolle ésta. En todos los trabajosse detectan casos que cumplen los criterios de positivi-dad para FISH en los que no se observa tumor en la cis-toscopia y biopsia inmediata. También ha habido casoscon neoplasia probada por biopsia en la que la FISH no

ha detectado alteraciones. Esto impide que este métodode detección pueda aplicarse aisladamente, pero cree-mos que es una herramienta válida como complementode la cistoscopia y la citología de orina y que el uso con-junto de las tres puede suponer una mejora en el diag-nóstico y seguimiento del carcinoma de urotelio y, porconsiguiente, un beneficio para el paciente.



Aneusomía Eusomía Aneusomía > Deleción No Aneus y/o p53 + p53 - p16 + p16 -3,7,17 2 cr 9p21 deleción del

Tumores bajo grado 53(42%) 73(58%) 37(29%) 90(71%) 36(29%) 110(87%) 79(63%) 46(37%) 43(34%) 82(66%)(n=126)

Tumores alto grado 41(77%) 12(23%) 34(64%) 32(60%) 21(40%) 48(91%) 33(63%) 19(37%) 16(31%) 36(69%)(n=53)Tumores primarios 52(63%) 31(37%) 59(71%) 24(29%) 73(88%)(n=83)Recidivas 63(66%) 33(34%) 63(66%) 33(34%) 85(89%)(n=96) Primarios con 5 2 5 2 3 3 3 3progresiónRecidivas con 5 2 5 2 4 2 2 4progresión

n= 29 Tumor + (biopsia) % Tumor - (cistoscopia y/o biopsia) %Test + (n=10) 8 80% 2 20%Test - (n=16) 3 19% 13 81%Test no informativo 2Diagnosticado por FISH 8 73% 13 87%Diagnosticado por citologia 7 64% 9 60%No diagnosticado por FISH 3 27% 2 13%No diagnosticado por citología 4 36% 4 27%

Figura 1. Célula urotelial con polisomía de los cr 7(SpectrumRed) y 17 (SpectrumAqua).Dotación normal de cr 3 (SpectrumGreen)y 9p21(SpectrumGold). (x100).

NOTAS INFORMATIVAS


OBJETIVOS

El objetivo principal del proyecto es demostrarque la normalización de los niveles plasmáticos dehomocisteina que se consiguen con tratamiento consuplementos vitamínicos (ácido fólico y vitamina B12)se acompañan de mejoría de parámetros de disfunciónendotelial, inflamación, factores procoagulantes yestrés oxidativo. La determinación de estos paráme-tros se han realizado con la medición de marcadoresséricos, plasmáticos y urinarios, así como mediante larealización de Ecografía Doppler braquial (valoración

de la capacidad de dilatación endotelial a nivel de arte-ria braquial). Las determinaciones se realizaron en unavisita basal y pasados tres meses.

Se comparan tres grupos de pacientes, trasplantesrenales con homocisteina normal (<14mmol/L), tras-plantes con homocisteina alta (>14mmol/L) que noreciben tratamiento y trasplantes con homocisteinaalta que tratamos con la terapia indicada.

Todos los pacientes dan su consentimiento infor-mado por escrito y se les da una hoja de información alpaciente.

El mieloma múltiple (MM) es una neoplasia carac-terizada por la producción de una inmunoglobulinamonoclonal tumor-específica que es posible emplearcomo diana inmunológica en el contexto de la denomi-nada vacunación idiotípica. A pesar de regímenes qui-mioterápicos agresivos, el curso clínico del MM secaracteriza por la progresión de la enfermedad. Laúnica terapia que hasta el momento ha producido res-puestas completas, o incluso curativas, ha sido el tras-plante alogénico de progenitores hematopoyéticos(TAPH). Con el fin de reducir la elevada toxicidad deltrasplante alogénico convencional, manteniendo elefecto injerto contra mieloma, se han desarrollado pro-tocolos de TAPH empleando un acondicionamiento nomieloablativo (minialotrasplante).

Por otra parte, el mieloma tiene una característicabiológica que es la presencia de antígenos tumoralesespecíficos de tumor (el idiotipo tumoral y los frag-mentos peptídicos derivados de él). Estos antígenospueden ser utilizados como diana del sistema inmuney por tanto, la inmunoterapia puede ser un comple-mento terapéutico útil para el control de las recaídasde la enfermedad. En este sentido, el empleo de vacu-

na idiotípica en el tratamiento del MM y de otras neo-plasias B, como el linfoma folicular, esta ampliamentedescrito en la literatura. El Dr. Bendandi (Director deLaboratorio de Inmunoterapia en el que se ha llevado acabo este proyecto) ha sido pionero junto a LarryKwak en el desarrollo de la vacunación idiotípica enpacientes con LNH y MM en el National CancerInstitute (NCI) de EEUU.

Nuestro centro está actualmente coordinando unensayo clínico multicéntrico que emplea de maneracombinada la vacunación idiotípica (de donante ypaciente) y el minialotrasplante en pacientes con MM.Con este ensayo clínico se pretende inducir, mediantela vacunación idiotípica, una respuesta inmune humo-ral y/o celular en los donantes de progenitores hema-topoyéticos, que luego se intentará transferir a lospacientes mediante el trasplante. La respuesta inmunese intentará mantener en los pacientes mediante suvacunación periódica después del transplante.

En el contexto de este estudio, resulta crucial estu-diar detalladamente la respuesta inmune inducida tras lavacunación. Se estudia tanto la respuesta celular,mediante la determinación de la secreción de citoquinas

La hiperhomocisteinemia como factor de riesgo cardiovascular tras eltrasplante renal

P. Errasti, J. ManriqueClínica Universitaria Navarra. Servicio de Nefrología. Pamplona.

Monitorización de la respuesta inducida en donantes y en pacientescon mieloma múltiple tras el procedimiento terapéutico consistente envacunación idiotípica del donante seguido de minialotrasplante deprogenitores hematopoyéticos y vacunación idiotípica del paciente

S. InogésÁrea de Terapia Celular. Clínica Universitaria de Navarra. Pamplona



Estudio de incidencia de la enfermedad cerebrovascular aguda en lacomarca de Pamplona

E. Martínez, J. Gállego, F. Guillén, J. Muruzábal, G. Delgado, J.A. Villanueva, J.M.Manubens, B. Bermejo, F. Zubiri, F. Lacruz, J. Masdeu, A. Pereda, J. RocafortServicio de Neurología. Hospital de Navarra. Pamplona.

Departamento de Neurología. Clínica Universitaria de Navarra. Pamplona.

(ELISA / ELISPOT de TNF- e IFN- ), estudios de citoto-xicidad (con métodos radioactivos) y estudios de proli-feración (con métodos radioactivos), siempre en res-puesta al antígeno tumoral (idiotipo) como la repuestahumoral (determinación de la presencia de anticuerposanti-idiotipo mediante ELISA). También se estudia la res-puesta humoral y celular frente a KLH. Para estas deter-minaciones, tanto en el donante como en el paciente seextrae sangre antes de cada vacuna de forma que se com-para la respuesta de cada dosis con la situación basalprevia a la vacunación (muestra extraída antes de la pri-mera vacuna).

Aunque en principio se pretendían incluir 30 pare-jas donante/paciente, finalmente sólo ha sido posibleincluir 9. En todas ellas se ha completado la vacunacióndel donante, pero debido al curso natural de esta enfer-medad, sólo va a ser posible vacunar a dos pacientes:uno de ellos ha recibido ya ocho vacunas y le quedancuatro para completar el número total de dosis y el otrocomenzará en breve el calendario vacunal.

Nuestros resultados señalan en primer lugar encuanto a los donantes, que el tratamiento no tiene

ningún efecto secundario. Además demuestran queaunque en algún caso se ha conseguido inducir unadiscreta respuesta idiotipo específica, la estrategiadiseñada no es suficiente para generar una respuestainmune eficaz, por lo que se debería plantear diseñaruna estrategia capaz de inducir una respuesta inmunemás potente, bien sea aumentando el número dedosis de vacuna o bien incluyendo en la formulaciónde la vacuna un adyuvante, como por ejemplo GM-CSF. En cuanto a los pacientes, no podemos sacar nin-guna conclusión, sólo señalar que el único pacienteque hemos vacunado permanece sin enfermedad másde dos años después del transplante. En este momen-to el paciente ha recibido ocho dosis de vacuna y aúnle quedan por recibir cuatro vacunas trimestralesantes de completar el calendario vacunal. No ha teni-do ningún efecto adverso como consecuencia de lavacunación. Los demás pacientes, excepto uno queestá a punto de empezar las vacunaciones, han pro-gresado antes de poder iniciar el calendario vacunal ohan muerto como consecuencia de complicacionespost-transplante.

FUNDAMENTOS

La enfermedad cerebrovascular aguda (ECVA) esla primera causa de mortalidad en la mujer y la terceraen el varón en Navarra. Es uno de los principales moti-vos de discapacidad en los adultos y supone un gastosociosanitario muy elevado al año. El envejecimientoprogresivo de la población en los países desarrolladoshace prever un incremento en la incidencia de ECVA enlos próximos años. Las cifras de incidencia de ictusoscilan entre 140-280 casos por 100.000 hab/año. Parapoder comparar estudios a nivel internacional es nece-sario cumplir una serie de requisitos establecidos porSudlow y Warlow hace años y revisados recientemente(2005). Actualmente, ni en Navarra ni en España exis-ten estudios de incidencia que reúnan estas caracte-rísticas. El fácil acceso a los medios sanitarios tantopúblicos como privados de la población de Pamplonay Barañain permite realizar un estudio epidemiológicopara conocer en profundidad el estado de la ECVA ennuestra Comunidad Foral. Los objetivos de nuestroestudio son conocer la incidencia de ECVA y de los dis-tintos subtipos de infarto cerebral según criterios

TOAST en población mayor de 20 años de Pamplona yBarañain, analizar la mortalidad y factores de riesgovascular (FRV) asociados y la recurrencia en un año delos casos incidentes en el primer año con sus FRV aso-ciados.

MATERIAL Y METODOS

Se ha considerado la definición de ictus de OMS.Se han recogido todos los casos incidentes desdenoviembre del 2003 hasta noviembre del 2005. Para ellose han empleado diversas fuentes de información intray extrahospitalarias. El denominador para el cálculo dela incidencia se ha obtenido de datos del censo revisa-dos a 1 de enero de 2005. Se han introducido todos losdatos en una base informática anónima para su poste-rior análisis estadístico.

RESULTADOS

Se han detectado 616 casos de una población de175.734 habitantes, con una edad media de 73,95 años yuna distribución entre hombres y mujeres similar. Laincidencia de ictus en población mayor de 18 años es de

Figura 1. Subtipos de infarto cerebral según la clasificación TOAST.

NOTAS INFORMATIVAS


174,9 (161,7-189,3) casos por 100.000 hab/año (Tabla 1).El subtipo de ictus más frecuente ha sido el infarto car-dioembólico con una incidencia de 43,2 (36,8-50,6) segui-do del lacunar 34,6 (29-41,4) y aterotrombótico 13,6(10,3-18,1) (Fig. 1). La mortalidad al mes se sitúa en el14,9% de los casos asociada principalmente al infartocardioembólico. Destaca el buen pronóstico del infartolacunar con una mortalidad del 0%. El principal FRVpara todos los subtipos de ictus es la HTA. Destaca lafibrilación auricular como FRV para el infarto cardioem-bólico, diabetes e HTA para el ictus lacunar e hipercole-terolemia para el aterotrombótico. La recurrencia el pri-

mer año se sitúa en el 2,4% de los casos y es más fre-cuente en mujeres y en el ictus cardioembólico.

CONCLUSIONES

Las cifras de incidencia son similares a las obteni-das en otros estudios en países desarrollados. La mor-talidad en la fase aguda del ictus es algo menor. Existenmuy pocos estudios poblacionales que analicen lossubtipos de ictus isquémico, nuestros resultados sonsimilares al último publicado. El principal interés deeste trabajo es sentar las bases para nuevos estudiosepidemiológicos de tendencias de incidencia y mortali-dad de la ECVA en nuestra comunidad.

Tabla 1. Incidencias por edades y sexo.

Varón Mujer Total

IC95% IC95% IC95%

Grupo de

edadCasos

Persona xtiempo

Tasa deIncidencia100.000)

Lim.Inf.

Lim.Sup

CasosPersona x

tiempo


Lim.Inf.

Lim.Sup

CasosPersona

x tiempo


Lim.Inf.

Lim.Sup

20-24 0 14326 0,0 1 14206 7,0 1,0 50,0 1 28532 3,5 0,5 24,9

25-34 4 38408 10,4 3,9 27,7 2 36876 5,4 1,4 21,7 6 75284 8,0 3,6 17,7

35-44 13 34032 38,2 22,2 65,8 5 34070 14,7 6,1 35,3 18 68102 26,4 16,7 42,0

45-54 21 26942 77,9 50,8 119,5 11 30258 36,4 20,1 65,6 32 57200 55,9 39,6 79,1

55-64 51 23864 213,7 162,4 281,2 24 26624 90,1 60,4 134,5 75 50488 148,6 118,5 186,3

65-74 90 16322 551,4 448,5 677,9 38 20494 185,4 134,9 254,8 128 36816 347,7 292,4 413,4

75-84 82 9958 823,5 663,2 1022,5 130 16194 802,8 676,0 953,3 212 26152 810,6 708,5 927,5

>=85 52 2566 2026,5 1544,2 2659,4 92 6984 1317,3 1073,8 1616,0 144 9550 1507,9 1280,6 1775,4

Total 313 166418 188,1 168,4 210,1 303 185706 163,2 145,8 182,6 616 352124 174,9 161,7 189,3

160

140

120

100

80

60

40

20

0 aterotr. cardio. lacunar indeter. determin.

completoincompletocomorb.



FUNDAMENTO

Los tumores neuroblásticos son los tumores sóli-dos extracraneales más frecuentes durante los dos pri-meros años de vida. Se localizan en la médula adrenaly ganglios del sistema nervioso simpático. Las lesionesgenéticas típicas de estos tumores son la amplificaciónde MYCN, la deleción de 1p, 11q y 14q.

RASSF1, efector de Ras, se localiza en 3p21.3, locusque sufre frecuentemente LOH en tumores de pulmóny mama, entre otros. RASSF1 tiene tres transcriptosmayores (A, B y C). Se ha observado que RASSF1A pre-senta hipermetilación aberrante en un porcentaje sig-nificativo de carcinomas como son por ejemplo los demama, ovario y próstata.

El gen NORE1 humano, situado en 1q32.1, ha sidorecientemente descrito como efector de Ras. Presentatres isoformas (A, B y C) de las cuales NORE1A sufrehipermetilación en líneas celulares tumorales de pul-món, mama, colon y riñón. Se ha demostrado queRASSF1A homodimeriza y heterodimeriza con Nore1 através de su segmento aminoterminal no homólogo, yno se une a Ras directamente.

El gen BLU se sitúa en 3p21.3, al igual que RASSF1.De hecho, ese locus sufre frecuentemente LOH y dele-ciones homocigóticas en cáncer de pulmón. Existendos isoformas de BLU, la isoforma de pulmón (12 exo-nes) y la isoforma de testículo (11 exones). BLU com-parte un 30% de homología con proteínas de la familia

de factores de transcripción MTG/ETO y las supresi-nas, que se supone regulan la entrada al ciclo celular.

El gen CASP8 se localiza en 2q33-q34 y codifica unacistein-proteasa implicada en la apoptosis. Se ha obser-vado que este gen sufre deleciones e hipermetilaciónasociada a la amplificación de MYCN en neuroblasto-mas.

MATERIAL Y MÉTODOS

Material

Se dispuso de 41 DNAs extraídos de tumores neu-roblásticos. Asimismo se estudiaron 12 líneas celularesde neuroblastoma. Se utilizaron DNAs extraídos de san-gre periférica de donantes sanos como controles nega-tivos de metilación. La línea celular SW48 de carcinomade colon fue utilizada como control positivo de metila-ción de los genes RASSF1A y NORE1A. En el caso deBLU y CASP8 se utilizó un DNA metilado “in vitro”(CpGenomeTM Universal Methylated DNA, Chemicon)como control positivo de metilación.

Metodología

Modificación con bisulfito. Se trataron tanto lasmuestras como los controles con bisulfito según el“CpGenomeTM DNA Modification Kit” (Chemicon), demodo que las citosinas no metiladas presentes en elDNA son convertidas en uracilos.

Inactivación epigenética de RASSF1A, NORE1A y BLU, y su correlacióncon alteraciones genéticas típicas, en neuroblastoma: los efectores deRas como posible nueva vía de tratamiento del neuroblastoma

P. Lázcoz1, I. Encío1, J. Sáez2

1. Universidad Pública de Navarra. Pamplona.

2. Universidad de Navarra. Pamplona.

Tabla 1. Hipermetilación de RASSF1A, NORE1A BLU y CASP8 en tumores neuroblásticos y líneas celulares de neu-roblastoma.

Tumores RASSF1A NORE1A BLU CASP 8

Nº total tumores analizados 41 41 41 41No amplificados 6 7 6 6No metilados (-) 6 33 32 14Metilados (+) 29 (83%) 1 (3%) 3 (8%) 21 (60%)Línea Celular RASSF1A NORE1A BLU CASP8Kelly (+) (+) (+) (+)SIMA (+) (-) (+) (+)MC-IXC (+) (-) (-) (+)SK-N-FI (+) (-) (-) (+)SH-SY-5Y (+) (-) (+) (+)SK-H-SH (+) (-) (+) (+)SK-Y-MC (+) (+) (-) (-)IMR 32 (+) (+) (+) (+)MHH-NB-11 (+) (+) (+) (+)SK-N-Be(2) (+) (-) (-) (+)SK-N-DZ (+) (+) (+) (+)Be(2)C (+) (+) (-) (+)

NOTAS INFORMATIVAS


MSP (Methylation Sensitive PCR). Los DNAs tras eltratamiento con bisulfito fueron sometidos a dos reac-ciones de PCR utilizando dos parejas de cebadoresespecíficos de cada gen: una de ellas diseñada bajo lapremisa de que no hubiera metilación a nivel del pro-motor y la otra suponiendo que sí la había.

Expresión de los genes en líneas celulares mediante RT-PCR.

RESULTADOS

Los resultados obtenidos tanto en los tumorescomo en las líneas celulares se resumen en la tabla 1 yla figura 1.

CONCLUSIONES

– La inactivación de RASSF1A por metilación podríaconstituir una nueva vía de tumorigénesis en neu-roblastomas.

– La metilación de NORE1A no parece ser un fenó-meno frecuente en la génesis de estos tumores.

– La metilación del gen BLU localizado en el cromo-soma 3p21.3 (al igual que RASSF1A) no pareceestar asociada a la metilación de RASSF1A.

– La metilación del gen CASP8 parece estar asociar-se al desarrollo del neuroblastoma.

Figura 1. Metilación de RASSF1A en tumores neuroblásticos.

Geles de agarosa al 2,5% teñidos con bromuro de etidio (0.5 g/ml). La primera muestra (99,27) corres-ponde a DNA genómico extraído de sangre periférica de un donante sano (control negativo de metilación),seguida de 10 neuroblastomas, la línea celular SW48 (control positivo de metilación de RASSF1A) y un con-trol negativo de PCR. Se utilizó un marcador de peso molecular (1Kb Plus Ladder, Invitrogen) para deter-minar el tamaño de las bandas.



Efecto de la terapia de resincronización cardiaca sobre un marcadorbioquímico de fibrosis miocárdica en pacientes con insuficienciacardiaca avanzada

I. García-Bolao1, A. Macías1, B. López2, A. González2, J. Gavira1, P. Azcárate1, E. Alegría1,J. Díez1

1. Departamento de Cardiología y Cirugía Cardiovascular. Clínica Universitaria de Navarra. Facultad deMedicina. Pamplona.

2. Área de Ciencias Cardiovasculares. Centro para la Investigación Médica Aplicada. Universidad deNavarra. Pamplona. Navarra.

FUNDAMENTO

La terapia de resincronización cardiaca (TRC) esun tratamiento eficaz para la insuficiencia cardiacarefractaria (IC). Sin embargo su mecanismo de actua-ción todavía no es del todo conocido y hasta un 30% delos pacientes no responden a la TRC.

OBJETIVO

Hemos investigado si los niveles séricos del pro-péptido carboxy-terminal del procolágeno tipo I(PICP), un marcador de la síntesis y el depósito mio-cárdico de colageno tipo I, están relacionados con larespuesta a largo plazo a la TRC.

MÉTODOS

El estudio fue llevado a cabo en 38 pacientes con ICcon indicacion de TRC a los que se le implantó con éxito.La evaluación clínica y ecocardiográfica, así como ladeterminación sérica de PICP, se realizaron antes de laimplantación del dispositivo y un año después.

RESULTADOS

Veintiséis pacientes (68%) fueron respondedores

a la TRC y 12 (32%) no respondedores. Los nivelesbasales de PICP séricos fueron mayores (P <0,001) enlos respondedores que en los no respondedores y enlos controles. Después de un año de seguimiento, losniveles séricos de PICP disminuyeron (P <0,001) enlos respondedores y aumentaron en los no responde-dores (P <0,005). Utilizando curvas ROC (receiveroperating charasteristic curves), observamos que unvalor de corte de 73 mg/L de PICP sérico tiene unaespecificidad del 83% y una sensibilidad del 85% parapredecir una respuesta positiva a TRC con una oddsratio de 27,5 (IC 95% 4,3 a 175,7, P <0.001).

CONCLUSIONES

Estos hallazgos sugieren que una disminución enla síntesis y depósito miocárdico excesivo de colágenotipo I puede ser uno de los mecanismos que contribu-yen en los efectos beneficiosos a largo plazo de la TRCen pacientes con IC. Además el nivel de PICP séricopuede ser un buen predictor de respuesta a la TRC enestos pacientes.

Tabla 1. Capacidad global de los distintos parámetros para predecir una respuesta favorable a la TRC de acuerdocon la curvas ROC

Parámetros Valor Sensibilidad Especificidad Odds ratiode corte (%) (%) (95% IC)

PICP 73 μg/L 85 83 27,5 (4,3-175,7)

NT-proBNP 815 pg/mL 71 49 0.750(0,15-3,62)

DTD 67,5 mm 75 61.5 5.6(1,2-26,3)

RSPL 95 ms 67 40 0.333(0,067-1,65)

PICP própeptido carboxy-terminal del procolageno tipo I; NT-proBNP, propéptido amino-terminal del péptido natriurético cerebral.; DTD,diametro telediastólico; RSPL, restraso septo-pared lateal; IC, intervalo de confianza

NOTAS INFORMATIVAS


FUNDAMENTO

La aterotrombosis, sustrato fisiopatológico delictus e infarto agudo de miocardio (IAM), es unaenfermedad poligénica y multifactorial, resultado dela interacción entre factores genéticos y ambientales.Mientras que los factores tradicionales de riesgo car-diovascular (hipertensión arterial, hipercolesterole-mia, tabaquismo y diabetes mellitus) son responsa-bles de un 50% de los episodios trombóticos, un por-centaje importante de pacientes con ictus e IAM nopresentan ninguno de dichos factores, lo que sugierela importancia del componente genético. Por ello,diversos estudios han analizado la presencia de poli-morfismos, cambios en la secuencia de un gen, engenes candidatos para el desarrollo de la enfermedad.Sin embargo, en la mayoría de los casos no se ha podi-do establecer la implicación real de polimorfismosaislados.

El análisis conjunto de polimorfismos en múlti-ples genes puede permitir una aproximación más realy definir con precisión la propensión para un deter-minado fenotipo aterotrombótico. Por otra parte, sibien el efecto de los polimorfismos sobre la inciden-cia de trombosis en enfermedades complejas, como elictus de IAM puede ser modesto, su importancia esmayor si se consideran simultáneamente los factoresambientales.

MATERIAL Y MÉTODOS

Se contactó con los servicios de Neurología yCardiología para la captación de pacientes menores de60 años que hubieran sufrido un ictus o IAM y que enel momento de la recogida de las muestras de sangrehubiese transcurrido al menos un mes y no más dedoce meses.

Los pacientes que accedieron a participar en elestudio fueron citados en la consulta de hematología ytras la firma del consentimiento informado, se recogie-ron los siguientes datos de cada paciente: tipo de even-to (IAM o ictus), fecha del evento, sexo, edad, peso,talla, hábito tabáquico, antecedentes familiares de IAMy ACV, antecedentes personales de HTA, hiperlipemia,diabetes mellitus, tratamiento antes y después delevento, tratamiento hormonal sustitutivo en el caso delas mujeres y microalbuminuria.

Como grupo control se extrajeron muestras deEDTA y posteriormente el DNA de personas menoresde 60 años con factores de riesgo vascular que nohubieran padecido IAM ni ictus.

En el estudio participaron 169 pacientes, 65 conictus, 102 con IAM y 78 controles. Se extrajeron lasmuestras de sangre: 2 tubos de EDTA, 1 tubo de sueroy 1 tubo de plasma citratado. El plasma y el suero fue-

ron congelados a -80ºC para una posterior determina-ción de proteína C reactiva y factor von Willebrandantigénico. Con los tubos de EDTA de cada paciente seprocedió a la extracción del DNA y determinación delos polimorfismos genéticos mediante un kit CVDstripAssay (Izasa).

RESULTADOS

Las características demográficas y de los factoresde riesgo vascular se muestran en la tabla 1. En elestudio participaron 78 controles (edad media 52años), 65 pacientes con ictus (edad media: 51,7) y 102con IAM (edad media: 51,3), la mayoría eran hombres.En cuanto al índice de masa corporal hubo diferenciassignificativas entre los controles y los pacientes conictus (p=0,01) pero no entre los controles y pacientescon IAM. Entre los factores de riesgo vascular seobservaron diferencias significativas en la frecuenciade pacientes diabéticos con ictus (p=0,001) y conIAMA (p=0,01) en relación a los sujetos controles perono en cuanto al consumo de tabaco o pacientes conHTA. Además hubo diferencias respecto al grupo con-trol en los niveles de LDL-colesterol (p=0,004) y trigli-céridos (p<0,001) de los pacientes con ictus pero noen los niveles de colesterol y HDL-colesterol. En lospacientes con IAM los niveles de colesterol (p=0,001),HDL-colesterol (p<0,001), LDL-colesterol (p<0,001), ytriglicéridos (p<0,001) estaban significativamentereducidos.

La frecuencia de antecedentes familiares de enfer-medad cardiovascular fue mayor en los pacientes conictus (p=0,005) e IAM (p<0,001) que en los sujetos con-trol.

Los niveles de fibrinógeno tras el evento fueronmás elevados en el grupo de pacientes con ictus(p<0,001) e IAM (p<0,001) que en el grupo control y nohubo diferencias en los niveles de proteína C reactivatras el evento en ambos grupos.

No se observaron diferencias significativas en lossiguientes polimorfismos genéticos. FV R506Q(Leiden), FV H1299R (R2), Mutación G20210A de la pro-trombina, Factor XIII (V34L), Fibrinógeno (-455 G7A),MTHFR C677T MTHFR 1298C, ACE (del/ins) y Apo E(E2, E3, E4), entre los sujetos con ictus e IAM en rela-ción al grupo control. No se observaron polimorfismosdel gen APO B. En nuestro estudio se observaron dife-rencias significativas para los polimorfismo PAI-14G/5G y GP IIIa L33P (HPA-1) en ambos eventos.

Se observó una mayor prevalencia del alelo 4G enlos sujetos con ictus e IAM respecto al grupo control.

En cuanto al polimorfismo HPA-1 no se observarondiferencias significativas respecto al alelo 1b pero sí

Análisis de polimorfismos de genes candidatos para aterotrombosis enpacientes con infarto agudo de miocardio e ictus

M. J. PalomaServicio de Hematología. Hospital Virgen del Camino. Pamplona.



Tabla 1. Características demográficas, factores de riesgo vascular y marcadores inflamatorios.

CONTROL 78 ICTUS 65 IAM 102 P ICTUS P IAM

EDAD 52±8 51,7±6,8 51,3±6,5 ns ns

SEXO (M/F) 57/17 43/22 87/15 ns ns

ICM 27,7±3,9 26,4±4,4 27,7±3,4 0,015 ns

HTA 44,6% 55,4% 46,1% ns ns

DIABET 3,8% 21,5% 15,7% 0,001 0,01

T-ABAC 39,2% 53,8% 53,9% ns ns

COLEST 225,9±43,3 219,1±46 203,6±53 ns 0,001

HDL-C 49,5±11,9 46,6±14,4 40,5±12 ns <0,001

LDL-C 153±41,8 133±32,1 130±33,5 0,004 <0,001

TRIGLIC 123,3±68,1 164±71,1 204±299,3 <0,001 <0,001

AF IAM 18,7% 41,5% 53,9% 0,005 <0,001

FIBRINOG 286,4±74,5 342,6±60,7 353,9±72 <0,001 <0,001

PCR 0,3±0,5 0,4±0,4 0,3±0,4 ns ns

una mayor prevalencia de la forma heterocigoto tantoen ictus como en IAM.

CONCLUSIONES

En la serie analizada existió una asociación esta-dísticamente significativa del polimorfismo 4G/5G delgen PAI-1 en los pacientes con ictus e IAM con diferen-cias en la frecuencia del alelo 4G que fue más preva-lente. Diversos estudios han demostrado que concen-traciones elevadas de PAI-1 están asociadas con un

mayor riesgo de trombosis tanto arterial como venosa.Los sujetos con el alelo 4G presentan concentracionesmás elevadas de PAI-1.

El genotipo 1a1b presenta unas característicasfisiológicas similares al genotipo 1a1a, por lo que sufrecuencia aumentada en ambos eventos no condicio-na el desarrollo de los mismos.

El resto de polimorfismos genéticos clásicamenterelacionados con trombosis venosa no se asociaron atrombosis arterial.

NOTAS INFORMATIVAS


Los pacientes con carcinomas localmente avanza-dos de cabeza y cuello constituyen un grupo de malpronóstico, con menos del 30% de pacientes supervi-vientes a los cinco años del tratamiento. La utilizaciónsimultánea de radioterapia hiperfraccionada con“Boost Concomitante” y cisplatino ofrece, en los ensa-yos publicados en la literatura, una mayor tasa de res-puestas en estos pacientes. Basado en las considera-ciones anteriores, el Servicio de Oncología del Hospitalde Navarra comenzó en el 2002 un protocolo de trata-miento con radioterapia hiperfraccionada y aceleradacon “Boost Concomitante” y cisplatino concurrente enpacientes con carcinomas de cabeza y cuello local-mente avanzados.

Aunque los factores clínicos pronósticos que con-dicionan la respuesta tumoral al tratamiento oncológi-co están suficientemente estudiados, no ocurre lomismo con los factores moleculares. Existen diversosmarcadores2 en la capacidad de respuesta al trata-miento instaurado(2).

En este estudio hemos analizado en las muestrasde biopsia diagnóstica de pacientes con carcinomaescamoso de cabeza y cuello la expresión, a nivel deARN mensajero, de los factores p53R2 y CHK2 en rela-ción con la respuesta a la radioterapia hiperfracciona-da con “Boost Concomitante”. También se ha analizadola respuesta tumoral y la supervivencia tras el trata-miento.

MATERIAL Y MÉTODOS

Obtención de muestras. Se recogieron muestrasde biopsia de pacientes diagnosticados de cáncer decabeza y cuello en el Servicio de Otorrinolaringologíadel Hospital Virgen del Camino previo consentimientoinformado. Se recogieron en total 22 muestras pertene-cientes a 2 mujeres y 20 hombres.

Extracción de ARN total. Para la extracción deARN de tejido tumoral empleamos el reactivo TRIzolâ(Invitrogen). A continuación purificamos el ARN con elKit RNeasy Mini Kit (Qiagen) Para medir la cantidad deARN extraído de cada muestra se empleó el espectró-metro “NanoDrop® ND-1000 UV-Vis” (NanoDropTechnologies, Inc.). Se procedió a guardar e ARN extra-ído hasta su utilización a –80 grados centígrados preci-pitando con 2,5 volúmenes de etanol absoluto y 0,1volúmenes de acetato sódico 3 molar pH=5,2Síntesis deADN complementario.

Síntesis de ADN complementario. El protocolo deretrotranscripción seguido fue el propuesto por la casacomercial Applied Biosystems empleando los reactivosespecificados por la misma para ese fin.

Cuantificación de la expresión mediante PCR entiempo real.

RESULTADOS

La localización primaria del tumor y la clasificacióndel estadio del los pacientes según el criterio de la AJCno presenta asociación estadística significativa ni con larespuesta desarrollada (P = 0,324, P:0,89), ni con el desa-rrollo de recidivas locales (P = 0,392, P = 0,382) ni con elestatus actual de los pacientes (P = 0,695, P = 0,793).

Sin embargo si aparece una asociación estadística-mente muy significativa (P<0,001) entre la aparición derecidiva local y una mayor expresión del ARN mensaje-ro del factor CHK2. La media del ratio de expresión deCHK2 para los pacientes que presentan recidiva fue de2,12 y para los pacientes sin recidiva 0,66

El seguimiento de la supervivencia de los pacien-tes incluidos en este seguimiento arroja los siguientesresultados: la mediana de supervivencia de los pacien-tes que desarrollaron una respuesta completa o parciales de 22,93 meses (IC95%: 19,42-26,43) frente a lospacientes que no respondieron al tratamiento cuyamediana de superviviencia es de 17,68 meses.

En análisis de la supervivencia comparando la res-puesta completa frente a todos los demás tipos de res-puesta no pudo alcanzarse la mediana en el grupo depacientes con respuesta completa. En este grupo másdel 50% de los pacientes continuaba con vida al finaldel periodo de seguimiento. Por el contrario los pacien-tes que tan sólo presentaban respuesta parcial tienenuna media de supervivencia de 14,93 meses (IC95%:4,04-25,82).

CONCLUSIONES

El tratamiento con radioterapia hiperfraccionada yacelerada con “Boost Concomitante” y cisplatino concu-rrente busca reducir la tasa de metástasis a distancia yde recidivas locales. La presencia de recidiva local puederesponder a un fallo del tratamiento radioterápico. Alcomienzo del estudio se postulaba como hipótesis que elfracaso a podría estar relacionado con una mayor activi-dad de los mecanismos de reparación genéticos.

A pesar del limitado tamaño muestral los resultadosobtenidos muestran una clara relación entre el aumentode expresión de CHK2 y la aparición de recidivas locales.CHK2 parece portar un papel en la actuación y control dela reparación del ADN. Constituye uno de los primerossensores moleculares activados por el sistema ATM/ATRen respuesta al daño genético. Así mismo, es capaz deregular tanto el ciclo celular, a través de Cdc25 y de TP53,como la reparación del ADN a través también de TP53 ydel factor BRCA1 entre otros.

Los datos alcanzados en este estudio sugieren unposible papel del CHK2 en la predicción de recidivaspost-radioterapia. Sería conveniente incrementar eltamaño muestral hasta que permita validar los resulta-dos obtenidos.

Estudio de la expresión de la subunidad R2 de la ribonucleótidoreductasa inductible por TP53 y de la CHK2 en relación con larespuesta a radioterapia en carcinoma de laringe

F. Arias de la VegaHospital de Navarra. Pamplona.



La asociación entre el nivel de colaboración interprofesional en lasunidades de hospitalización de oncología y los resultados en lospacientes y en los profesionales

L. San Martín, D. D’Amour, C. Oroviogoicoechea, M. Leduc, J.L. Pérez

FUNDAMENTO

La formación de equipos interprofesionales quetrabajan en colaboración se ha convertido en base fun-damental de la organización del trabajo en los hospita-les. Del desarrollo de la colaboración entre los profe-sionales de la salud se esperan resultados positivos,tanto para los pacientes, como para los profesionalesmiembros de los equipos. El objetivo de este estudio esevaluar los efectos de la colaboración interprofesionalsobre los pacientes hospitalizados en las unidades deoncología (satisfacción, incertidumbre con respecto asu enfermedad, hospitalización y tratamiento, adecua-ción de la gestión del dolor y estancia hospitalaria) ysobre los profesionales que forman parte de esos equi-pos (satisfacción en el trabajo y compromiso con laorganización).

MATERIAL Y MÉTODOS

La evaluación de los efectos en los profesionalesse ha realizado mediante un diseño correlacional,mientras que la evaluación de los efectos en los pacien-tes se ha realizado mediante un diseño comparativo o«natural experiment». La muestra la han formado 41profesionales (médicos, residentes y enfermeras) y de312 pacientes, pertenecientes a 4 equipos de oncologíay hematología de un centro hospitalario de laComunidad Foral. El análisis de datos se ha realizado

con ayuda de modelos de regresión lineal múltiple ymodelos ANOVA y ANCOVA.

RESULTADOS

Los resultados indican que la intensidad de la cola-boración interprofesional tiene un efecto positivosobre la satisfacción de los profesionales en el traba-jo(b = 0,572; p <0,001), así como sobre la satisfacciónde los pacientes (F = 21,254; p <0,001), el nivel de incer-tidumbre del paciente (F = 3,985; p = 0,047) y la ade-cuación de la gestión del dolor del paciente (F = 5,912;p = 0,016). Los resultados indican también que la inten-sidad de la colaboración interprofesional no tiene efec-tos ni sobre el compromiso de los profesionales con laorganización (p = 0,086), ni sobre la estancia delpaciente en el hospital (t = 1,535; p = 0,217).

DISCUSIÓN

Estos resultados pueden explicarse por el nivel decoordinación que caracteriza a los equipos que trabajanen colaboración, así como por el nivel en el que los pro-fesionales que trabajan en equipo llegan a compartir elconjunto de actividades clínicas, lo que resulta en unaatención holística y completa. Este estudio supone unacontribución al avance en la comprensión de los efectosde la colaboración interprofesional sobre los profesio-nales de los equipos y sobre los pacientes hospitaliza-dos en las unidades de oncología y hematología.

FUNDAMENTO

El síndrome metabólico (SM) consiste en un con-junto de factores de riesgo al que subyace un estadoproinflamatorio, que se asocia a una mayor morbi-mor-talidad cardiovascular. La díada proinflamatoria

CD40/CD40L participa en el desarrollo de la ateroscle-rosis y sus complicaciones, pero no se ha caracteriza-do esta diada en pacientes con SM. El objetivo generaldel presente trabajo es profundizar en los mecanismosde inflamación que subyacen al SM. Las hipótesis delpresente trabajo fue que los pacientes con SM presen-

Niveles elevados del mediador proinflamatorio CD40L en el síndromemetabólico

C. Natal, I. Colina, P. Restituto, J. Díez, N. Varo1. Laboratorio de Hipertensión y Metabolismo (CN, JD, NV), Área de Ciencias Cardiovasculares,

Centro de Investigación Médica Aplicada. Universidad de Navarra. Pamplona.

2. Unidad de Chequeos (IC). Clínica Universitaria de Navarra. Pamplona.

3. Servicio de Bioquímica (PR, NV). Clínica Universitaria de Navarra. Pamplona.

NOTAS INFORMATIVAS


tan un aumento de la expresión del sistemaCD40/CD40L.

Se plantearon los siguientes objetivos: 1. la asocia-ción entre los niveles circulantes de sCD40L y adipo-nectina, y la presencia de aterosclerosis subclínica. 2.Determinar la expresión génica y proteica de CD40 yCD40L en monocitos circulantes aislados de sujetossanos y pacientes con SM. 3. Determinar la expresión yliberación de CD40L en plaquetas aisladas de sujetossanos y pacientes con SM. 4. el efecto de la adiponecti-na, vía el sistema CD40/CD40L, sobre las células aso-ciadas al ateroma humano.

MATERIAL Y MÉTODOS

Se estudiaron 128 pacientes con SM (CriteriosATPIII) (90% varones, 56±11 años) y 246 sujetos sanos(73% varones, 54±11 años) que acudieron al Área deRiesgo Vascular de la Clínica Universitaria de Navarra.El diagnóstico de SM se estableció según los criteriosdel Adult Treatment Panel III del National CholesterolEducation Program (ATPIII, 2001) es decir cuando elpaciente presentó 3 o más de los siguientes factores deriesgo: obesidad abdominal (circunferencia cintura>102cm en hombres y >88cm en mujeres), triglicéridos>150 mg/dL, HDL-colesterol (<40mg/dL en hombres y<50mg/dL en mujeres), hipertensión arterial(>130/85mm Hg) y glucosa plasmática en ayunas>110mg/dL. Aquellos pacientes que no cumplían el cri-terio de diagnostico de SM fueron considerados con-trol. Se determinó el espesor íntima-media carotideomediante ultrasonografía.

Se determinaron los niveles séricos de sCD40L yadiponectina mediante ELISA.

Los monocitos obtenidos a partir de sangre perifé-rica, mediante gradiente de ficoll se incubaron en pre-sencia o ausencia de 30 g/ml de adiponectina. Lascélulas endoteliales se pre-trataron o no con TNF- (50ng/ml) y después se incubaron en presencia o ausenciade 30 g/ml de adiponectina. Tras el cultivo, se deter-minó la expresión génica (4 h) y proteica (24h) delligando CD40 y su receptor, CD40, por RT-PCR a tiemporeal y western-blot.

Se extrajeron plaquetas mediante gradiente dedensidad (OptiprepÒ) y se determinó el contenidointraplaquetar de CD40L, y la liberación plaquetar desCD40L tras estimulación con trombina medianteELISA.

RESULTADOS

Los pacientes con más de tres factores de riesgodel SM presentaron niveles plasmáticos de sCD40Lsuperiores (p<0,05) a los que presentaban uno o dos, oninguno (0,88 ± 0,1 vs 0,79 ± 0,08 ó 0,65 ± 0,12 ng/ml,respectivamente p<0,05). Se observaron niveles decre-cientes de adiponectina conforme aumentaba el núme-ro de factores de riesgo en pacientes con SM compara-dos con los individuos control (16,5 ± 2,0 mg/ml vs11,98 ± 0,82 mg/ml vs 10,10 ± 0,64 mg/ml respectiva-mente, p<0,05).

La expresión de CD40L fue superior (CD40L/18S:0,036±0,044) en los pacientes con SM con respecto alos controles sanos (0,026±0,018). Sin embargo, no seobservaron diferencias en la expresión de mRNA delreceptor CD40 entre ambos grupos. La expresión pro-teica de CD40 fue superior en los pacientes con SMcomparados con los individuos control (Unidades arbi-trarias: 1,31±0,92 vs. 0,79±0,49, respectivamente).

La liberación plaquetar de la forma soluble sCD40Linducida por trombina (1U/ml) fue superior en pacien-tes con SM que en las plaquetas obtenidas de controlessanos (16,8-fold s. 4,5-fold).

La expresión, del receptor CD40 en monocitosaumentó significativamente tras la incubación con adi-ponectina (24 h), comparado con el control (34,77±5,6vs 15,23±6,04, respectivamente). Sin embargo, laincubación con adiponectina redujo de manerasignificativa la expresión del mediador proinflamatorioCD40L (16,8±0,14 vs 33,20±0,03).

CONCLUSIÓN

En el contexto del concepto actual del SM comouna enfermedad inflamatoria, el presente estudiomuestra que la activación de la vía del CD40/CD40Lpuede desempeña un papel en el mayor riesgo cardio-vascular de estos pacientes. Asimismo, se muestramayor liberación de sCD40L de las plaquetas depacientes con SM, lo cual podría explicar el aumentode sCD40L en el plasma de estos pacientes y la mayoractivación monocitaria. Finalmente, nuestros datossugieren que la adiponectina puede ejercer un efectoanti-inflamatorio directo sobre la vasculatura inhibien-do la vía CD40/CD40L. Estas nuevas acciones anti-infla-matorias de la adiponectina pueden explicar la aparen-te disminución de efectos cardiovasculares no total-mente atribuibles a sus acciones hipoglucémicas.



Estudio de la administración de medicación por parte de enfermería:errores de medicación y su prevención

M.T. DíazUniversidad de Navarra. Pamplona.

FUNDAMENTO

El principio “Primero no hacer daño” del juramen-to hipocrático ha sido una guía para los profesionalesde salud. Sin embargo como bien se evidencia por laliteratura se hace “daño” cada día. La literatura revisa-da pone de manifiesto la existencia de errores en lossistemas sanitarios como resultante de una acción uomisión. Dentro de todas las estructuras sanitariasexisten evidencias que los hospitales, por su propiacomplejidad y el gran número de profesionales queinteractúan entre sí y con los pacientes, acogen elmayor porcentaje de errores. Se estima que 7.000pacientes mueren anualmente en EE.UU. como conse-cuencia de errores de medicación.

La actividad de Enfermería de mayor riesgo conconsecuencias graves para el paciente es la que sederiva de la administración de medicación en el casode existir errores. Sin embargo los hospitales adolecende sistemas bien definidos y seguros que aseguren unabuena práctica en la administración de medicación. yque ayuden a que las enfermeras comuniquen los erro-res en la administración de medicación con el fin demonitorizarlos y tener un conocimiento ajustado deesta realidad con el fin de prevenir. Por tanto nos plan-teamos como objetivo cuantificar y caracterizar loserrores de medicación que ocurren en nuestro entor-no, introducir medidas preventivas.

MATERIAL Y MÉTODOS

El estudio consistió en 4 actividades:

• Observación directa a ciegas del proceso deadministración de medicación por parte delpersonal de enfermería. Se aleatorizan 17enfermeras en 17 turnos que tenían que admi-nistrar medicación a 87 pacientes.

• Encuestas sucesivas de actitudes, conoci-mientos y creencias sobre errores de medica-ción al personal de enfermería en 3 momentosdiferentes.

• Desarrollo e implementación de un sistema denotificación de errores.

• Desarrollo de un programa de formación ymodificaciones estructurales reportadas en laliteratura como efectivas.

RESULTADOS

Los resultados más relevante se han presentadosen congresos internacionales y revistas científicas. Auncuando el tiempo de observación fueron 17 horas, sedetectaron 551 (24,3%) posibilidad de error en los 2263pasos que se observaron. El 65% de las enfermerasconfirman que alguna vez en su vida profesional come-tieron o presenciaron un error de medicación siendo elmás frecuente el debido a equivocación de paciente. Sibien son las enfermeras son el grupo profesional quemás reporta errores de medicación (prescripción, dis-pensación y administración), menos del 6% de los erro-res notificados se debe a un error de administración.

DISCUSIÓN

Es la primera vez que en nuestro entorno cuantifi-camos de forma directa actitudes, conocimientos y cre-encias relacionadas con errores de medicación porparte de las enfermeras. La seguridad resulta novedosaen los sistemas sanitarios y cada vez existe una impe-rante necesidad de introducirla en los hospitales a tra-vés de distintos sistemas (notificación de errores, cues-tionarios y observación) si realmente queremos dar unaatención segura y de calidad a nuestros pacientes.

resÚmenes de proyectos de investtigaciÓn...

Documents