propuesta de creaciÓn de un bioterio para el santuario

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Page 1: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO
Page 2: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

ANIMAL WILDLIFE WAYSTATION, LOS ÁNGELES, CA.

ÁLVAREZ CRUZ LAURA TALINA

UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE COLOMBIA

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

BUCARAMANGA

2014

Page 3: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

ANIMAL WILDLIFE WAYSTATION, LOS ÁNGELES, CA.

ÁLVAREZ CRUZ LAURA TALINA

Informe Final de Práctica Profesional Presentado como Requisito para

Optar el Título de Médico Veterinario Zootecnista

Director:

Dr. ASTRID C. S. PULLEY

D.V.M

UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE COLOMBIA

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

BUCARAMANGA

2014

Page 4: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

Nota de aceptación

__________________________________

__________________________________

__________________________________

__________________________________

__________________________________

__________________________________

_______________________________

Firma del director

________________________________

Firma del asesor

________________________________

Firma del jurado

Los Ángeles, California, USA. Mayo 2014

Page 5: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

Dedico este proyecto a mis amados padres, hermanos y sobrino Esperanza, Juan

Paulo, Juan Manuel, Cesar Darío y Juan José, a mi compañero de aventuras

Christian Raúl, también a mis hermosos animales y por supuesto a cada una de

las personas que me han acompañado en las múltiples veces que he logrado salir

de mi zona de confort.

Merci à tous!

Page 6: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

Sería difícil para mí segregar en un pequeño grupo el talento humano y animal que

ha contribuido en la formación de esta servidora, tanto a nivel profesional, como

personal. Así que me iré por el camino del sabio, agradeciendo a la vida en

general por poner cada situación, persona y animal, a la hora y el lugar indicado.

Permitiéndome generar historias y anécdotas, que no solo harán parte de

experiencias vividas, sino dejarán un pedacito de mi en cada ser que he conocido.

Agradezco infinitamente, el haber podido germinar la semilla del amor por los

animales, ya que con el abono de las experiencias vividas, el árbol dará frutos

magníficos, que alimentarán a cuanto ser lo requiera.

Page 7: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

TABLA DE CONTENIDO

GLOSARIO. 1

RESUMEN. 4

ABSTRACT. 6

RÉSUMÉ. 8

INTRODUCCIÓN. 10

OBJETIVOS. 13

1. JUSTIFICACIÓN Y PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA. 14

2. ESTADO DEL ARTE. 18

3. NORMATIVIDAD QUE REGULA EL USO DE ANIMALES DE LABORATORIO. 21

3.1 NORMAS A NIVEL MUNDIAL. 21

3.1.1 CONSEJO PARA ORGANIZACIONES INTERNACIONALES DE CIENCIAS MÉDICAS (CIOMS). 21

3.1.2 GUÍA PARA EL CUIDADO Y USO DE ANIMALES DE LABORATORIO. 22

3.1.3 ORGANIZACIÓN DE LAS NACIONES UNIDAS PARA LA ALIMENTACIÓN Y LA AGRICULTURA (FAO). 23

3.2 NORMAS A NIVEL DE ESTADOS UNIDOS. 23

3.2.1 EL ACTA DE BIENESTAR ANIMAL (THE ANIMAL WELFARE ACT, AWA). 23

3.2.2 POLÍTICAS DEL SERVICIO DE SALUD PÚBLICA. 24

3.2.3 EL COMITÉ INSTITUCIONAL PARA EL CUIDADO Y USO DE LOS ANIMALES 25

3.3 NORMATIVAS QUE REGULAN EL SACRIFICIO DE ANIMALES DE LABORATORIO. 25

4. CARACTERÍSTICAS DE LAS ESPECIES. 27

Page 8: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

4.1 CARACTERÍSTICAS DE LAS ESPECIES: (MUS MUSCULUS Y RATTUS NORVEGICUS). 27

4.2 PARÁMETROS PARA EL MANEJO DE BIOTERIOS DE PRODUCCIÓN. 29

4.3 CONSTRUCCIÓN DE LA PLANTA FÍSICA Y ALOJAMIENTO. 32

4.3.1 INSTALACIONES PARA LOS ANIMALES. 36

4.3.2 CORREDORES O PASILLOS. 37

4.3.3 PUERTAS DE SALAS. 37

4.3.4 VENTANAS EXTERNAS. 38

4.3.5 PISOS. 38

4.3.6 AGUA, DESAGÜES Y CAÑERÍAS. 38

4.3.7 PAREDES. 38

4.3.8 TECHOS. 39

4.4 MANIPULACIÓN, INMOVILIZACIÓN, IDENTIFICACIÓN Y SEXAJE. 39

4.4.1 TÉCNICAS DE MANIPULACIÓN: RATÓN. 40

4.4.2 TÉCNICAS DE MANIPULACIÓN: RATA. 41

4.4.3 TÉCNICAS DE SEXAJE. 42

4.4.4 MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN. 42

4.5 EUTANASIA. 46

4.5.1 MÉTODOS ACEPTADOS. 47

4.5.2 MÉTODOS ACEPTADOS CON CONDICIONES 48

4.6 ENFERMEDADES ZOONÓTICAS. 52

4.7 ASPECTOS ÉTICOS EN EL CUIDADO Y USO DE ANIMALES DE LABORATORIO. 55

5. MATERIALES Y METODOLOGÍA 58

5.1 UBICACIÓN. 58

5.2 DESCRIPCIÓN DE LA POBLACIÓN. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.

5.3 MATERIALES. 59

5.4 METODOLOGÍA. 61

6. ESTRUCTURA DEL BIOTERIO. 62

Page 9: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

6.1 ESPECIES A MANEJAR Y SUS CARACTERÍSTICAS PRODUCTIVAS. 62

6.1.1 CLASIFICACIÓN GENÉTICA DE ROEDORES DE LABORATORIO. 62

6.1.2 PROVENIENCIA DE LA COLONIA DE LOS ROEDORES DEL PROYECTO. 63

6.1.3 SISTEMA DE CRÍA Y ESQUEMAS REPRODUCTIVOS. 66

6.2 PARÁMETROS FÍSICOS Y MEDIOAMBIENTALES DEL BIOTERIO. 79

6.2.1 UBICACIÓN DE LAS INSTALACIONES. 79

6.2.2 PLANTA FÍSICA. 81

6.2.3 MODELO ESTRUCTURA FÍSICA DEL BIOTERIO. 92

6.2.4 ALOJAMIENTO DE LOS ANIMALES. 93

6.2.5 IDENTIFICACIÓN Y MARCAJE DE LOS ANIMALES. 99

6.2.6 REGISTROS GENERALES DE LA COLONIA. 103

6.2.7 REQUERIMIENTOS BÁSICOS DE LOS ANIMALES. 106

6.3 ASPECTOS ADMINISTRATIVOS. 119

6.3.1 ENTRENAMIENTO DEL PERSONAL DEL BIOTERIO. 119

6.3.2 UBICACIÓN DE CARTELES PROMOVIENDO LA PREVENCIÓN. 139

6.3.3 NORMATIVAS INTERNAS DEL BIOTERIO. 139

7. PRESUPUESTO PREDETERMINADO Y RETORNO DE LA INVERSIÓN (RSI). 143

8. DESGLOSE DE COSTOS 144

9. CONCLUSIONES. 147

10. RECOMENDACIONES. 148

11. BIBLIOGRAFIA. 149

ANEXOS 161

Page 10: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

LISTA DE TABLAS

pág.

Tabla 1. Cálculo aproximado de ratones y ratas utilizadas

para la alimentación en la actualidad………………………………………………….16

Tabla 2. Inversión realizada entre el periodo de Octubre del

2012 y Octubre del 2013 para la compra de ratones y ratas………………………16

Tabla 3. Características de las especies……………………………………………...27

Tabla 4. Parámetros para el correcto manejo del bioterio …………….….………..30

Tabla 5. Procedimientos operativos del personal en el bioterio…………………...35

Tabla 6. Enfermedades más comunes transmitidas por roedores…………………54

Tabla 7. Materiales requeridos para la elaboración del proyecto…………………..60

Tabla 8. Esquema reproductivo del Ratón (Mus musculus)………………………..71

Tabla 9. Esquema reproductivo de la Rata (Rattus norvegicus)…………………...76

Tabla 10. Medidas del contenedor de carga………………………………………….84

Tabla 11. Cantidad de paneles requeridos de acuerdo al área

total de la estructura……………………………………………………………………..86

Tabla 12. Materiales necesarios para las instalaciones

eléctricas y sistemas de ventilación……………………………………………………88

Tabla 13. Materiales necesarios para la instalación

del agua y sistemas de drenaje………………………………………………………...91

Tabla 14. Cantidad de jaulas y estanterías requeridas para ratones……………...97

Tabla 15. Cantidad de jaulas y estanterías requeridas para ratas…………………99

Tabla 16. Técnica de marcado de orejas……………………………………………101

Tabla 17. Comparación de concentrados…………………………………………...108

Tabla 18. Cantidad aproximada de alimento consumido por año………………..109

Tabla 19. Cantidad de cama (Hemp) requerido anualmente……………………..113

Tabla 20. Artefactos de enriquecimiento ambiental………………………………..118

Tabla 21. Requisitos para obtener el título de ALAT……………………………….121

Page 11: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

Tabla 22. Cronograma semanal de limpiezas ……………………………………...126

Tabla 23. Concentración del Tego 2000…………………………………………….133

Tabla 24. Cronograma de actividades……………………………………………….133

Tabla 25. Costos……………………………………………………………………….144

Tabla 26. Desglose de costos………………………………………………………...145

Page 12: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

LISTA DE ILUSTRACIONES

pág.

Imagen 1. Modelo de bioterio de producción………………………………………...33

Imagen 2. Modelos de corredores……………………………………………………..34

Imagen 3. Medidas mínimas de animales por jaula…………………………………36

Imagen 4. Cómo retirar los ratones de la jaula………………………………………40

Imagen 5. Cómo sujetar los ratones e inmovilizarlos………………………………..40

Imagen 6. Cómo retirar las ratas de la jaula………………………………………….41

Imagen 7. Cómo sujetar e inmovilizar las ratas……………………………………41

Imagen 8. Técnicas de sexaje…………………………………………………………42

Imagen 9. Marcación con marcadores indelebles………………………………..43

Imagen 10. Marcado de orejas…………………………………………………...……44

Imagen 11. Caravanas plásticas o metálicas………………………………………44

Imagen 12. Método de tatuaje en roedores…………………………………………45

Imagen 13. Implante subcutáneo con microchip……………………………………45

Imagen 14. Ubicación del WWS. Vista satelital.…………………………………...58

Imagen 15. Ubicación del WWS. Mapa……………………………………………….59

Imagen 16. Ratón CD-1® IGS Mouse………………………………………………...65

Imagen 17. Rata CD® IGS Rat………………………………………………………...66

IImagen 18. Sistema rotacional Poiley………………………………………………..69

Imagen 19. Organización de la colonia de ratones………………………………….72

Imagen 20. Organización de la colonia de ratas…………………………………….77

Imagen 21. Back 40……………………………………………………………………..80

Imagen 22. Área 4………………………………………………………………………81

Imagen 23. Tubería para el agua presente en el Back 40………..........................81

Imágenes 24 y 25. Compartimento de carga para Tractomula……………………83

Imágenes 26 y 27. Estado de los pisos y paredes…………………………………85

Imagen 28. Modelo de panel de plástico y medidas por unidad…………………85

Page 13: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

Imagen 29. Acceso actual al compartimento de carga……………………………...87

Imagen 30. Modelo de escaleras de aluminio………………………………………87

Imagen 31. Estructura física del bioterio……………………………………………...94

Imagen 32. Modelo de alojamiento para ratones ARS-1050……………………….95

Imagen 33. Detalles estructurales del modelo ARS-1050 y ARS-5032…………...96

Imagen 34. Modelo de alojamiento para ratas ARS-5032………………………….98

Imagen 35. Tarjetas de identificación para reproductores………………………...102

Imagen 36. Tarjetas de identificación para crías…………………………………...103

Imagen 37. Registros generales de la colonia de ratones………………………...105

Imagen 38. Registros generales de la colonia de ratas……………………………106

Imagen 39. Modelo de concentrado # 5001………………………………………...108

Imagen 40. Fibra de Cáñamo (Hemp)……………………………………………….113

Imagen 41. Alojamiento de roedores en grupos…………………………………...118

Imagen 42. Flujograma de procesos………………………………………………...123

Imagen 43. Sanitización de manos…………………………………………………..127

Imagen 44. Protocolo de sexaje……………………………………………………...128

Imagen 45. Protocolo de eutanasia de los animales………………………………129

Imagen 46. Protocolo para suministro de alimento y agua………………………..131

Imagen 47. Protocolo de actividades para la limpieza de las jaulas……………..134

Imagen 48. Protocolo de actividades para la limpieza de las estanterías……….136

Imagen 49. Protocolo de limpieza y desinfección de los pisos…………………...138

Imagen 50. Protocolo de eliminación de desechos………………………………...139

Page 14: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

LISTAS DE ANEXOS

pág.

Anexo A. Fragmento del informe de gastos totales de

productos alimenticios según reportes financieros del

Wildlife Waystation del año 2013……………………………………………………..159

Anexo B. Gastos totales de compra de roedores en el

año 2013………………………………………………………………………………...160

Anexo C. Reportes de salud de cepas de ratones CD-1®

IGS Mouse………………………………………………………………………………161

Anexo D. Reportes de salud de cepas de ratas CD® IGS Rat …………………..163

Anexo E. Cómo diseñar un campo de infiltración para un tanque séptico.……..165

Anexo F. Descripción y composición del alimento

concentrado para roedores LabDiet 5001.……………………………………….....166

Anexo G. Comparación de la fibra de Cáñamo con otros

materiales ofrecidos en el mercado …………………………………………………167

Page 15: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

1

GLOSARIO

AGENTE DISOCIATIVO: Medicamentos que distorsionan las percepciones

visuales y auditivas y producen sentimientos de aislamiento o disociación del

medio y del propio individuo.

ALELO: Cada una de las formas alternativas que puede tener un mismo gen que

se diferencian en su secuencia y que se puede manifestar en modificaciones

concretas de la función de ese gen.

BARBITÚRICOS: Fármacos derivados del ácido barbitúrico que actúan como

sedantes del sistema nervioso central y producen un amplio esquema de efectos,

desde sedación suave hasta anestesia total.

BIOTERIO: Lugar físico donde se crían, mantienen y utilizan animales de

laboratorio. Este lugar debe brindar un adecuado macroambiente y microambiente,

acorde a la especie animal que se esté alojando, adaptándose a los

requerimientos y necesidades de la especie alojada.

CONSANGUINIDAD: El apareamiento de animales más estrechamente

emparentados que el promedio de la población de la cual provienen.

EFECTO BRUCE: Ocurre principalmente en roedores. Consiste en la tendencia

de las hembras a abortar tras ser expuestas a la presencia de algún macho

desconocido.

EFECTO LEE BOOT: Ocurre principalmente en roedores. Es un fenómeno

caracterizado por la supresión o prolongación del ciclo estral (anestro) de hembras

adultas, causado por la falta de la machos en los grupos conformados.

Page 16: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

2

EFECTO WHITTEN: Ocurre cuando hay sincronización del ciclo estral (múltiples

hembras se encuentran en estro al mismo tiempo) de un grupo de hembras, y es

causado debido a feromonas producidas por el macho. En este caso las hembras

se encuentran fértiles y receptivas al macho.

ENDOCRÍA: Se definen como el apareamiento de animales emparentados.

ENFERMEDADES ZOONÓTICAS: Aquellas enfermedades de los humanos que

tienen su origen o forma de transmisión en los animales.

EXOCRÍA: Apareamiento de animales pertenecientes a razas diferentes.

FERTILIDAD: Capacidad de un ser vivo de producir o sustentar una progenie

numerosa.

GENÉTICA: Campo de la biología que busca comprender la herencia biológica

que se transmite de generación en generación.

GLÁNDULAS HARDENIANAS: Asociada a los ojos. Glándula que secreta una

sustancia oleosa que llega hasta los orificios nasales. Los animales utilizan las

patas delanteras para esparcir dicha sustancia en su pelaje, creando una barrera

contra el frío y humedad.

HÍBRIDO: Apareamiento entre individuos pertenecientes a especies diferentes.

LOCI: Ubicación específica en donde se encuentra un gen en la secuencia del

ADN, o la posición en un cromosoma.

Page 17: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

3

POLIESTRICAS CONTINUAS: Hace parte de uno de los tipos de periodicidad en

que hembras de algunas especies presentan su ciclo estral. En este caso, las

hembras caracterizadas por ser poliéstricas continuas, son aquellas quienes

presentan ciclos estrales durante todo el año, interrumpiéndose solo en la preñez.

PRUEBA ELISA “Enzyme -linked immunosorbent assay” (por sus siglas en

inglés): Es una prueba diagnóstica que usa enzimas ―solid-phase enzyme

immuno assay‖, EIA) para la detección de sustancias (usualmente antígenos) en

muestras líquidas o húmedas, usualmente por medio del cambio de color de

sustrato.

SEXAJE: Es un método para determinar el sexo de un animal. Puede realizarse

por análisis de ADN, por comportamiento o por caracteres morfológicos.

Page 18: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

4

RESUMEN

El presente trabajo constituye la tesis de grado de la carrera de Medicina

Veterinaria y Zootecnia, gestado durante el periodo de pasantía llevado a cabo en

el Santuario Wildlife Waystation, ubicado en los territorios del Bosque Nacional de

Los Ángeles, California, en los Estados Unidos de América. Ésta es una

organización no gubernamental (ONG) que a través de los años ha funcionado en

su mayoría gracias a los aportes económicos de voluntarios o personas naturales.

Otro de sus ingresos importantes era la visita del público, pero debido a problemas

administrativos el Santuario cerró sus puertas a particulares, hace cerca de diez

años. El hecho de depender únicamente de las donaciones, hace que la situación

económica del Santuario sea inestable, generando un alto riesgo en su

sostenimiento.

Ante la problemática mencionada anteriormente, se aplicó la matriz DOFA y

gracias al aporte de los empleados, voluntarios y directivos de la institución, se

logró detectar la necesitad de la creación de un proyecto que pretende impulsar la

economía del Santuario, cuyo objetivo general es la creación de una propuesta de

un bioterio de producción de ratones y ratas para reducir los costos alimenticios.

Esta investigación cualitativa de tipo proyectiva, se basó en la identificación del

problema anteriormente mencionado y se desarrolló inicialmente al determinar los

gastos anuales de alimentación de las especies residentes. Posteriormente se

llevó a cabo un proceso de planeación que incluyó la selección de un contenedor

de Tractomula como planta física, su adecuación y correcta ubicación dentro de

las instalaciones del Santuario. A continuación se creó un modelo productivo de

ratas y ratones, en el cual se consideraron parámetros relacionados con la

genética, reproducción, cría, manejo y sacrificio de los animales. Finalmente

mediante el análisis del presupuesto predeterminado y retorno de la inversión

(RSI) del proyecto, se determinó la factibilidad de éste, teniendo en cuenta que el

tiempo de amortización se cumpliría a los 4.8 años y que al cabo de ese periodo

Page 19: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

5

quedaría una utilidad neta anual de US$4,947.35, además de los beneficios que

traería para el Santuario el hecho de iniciar proyectos que impulsen su auto

sostenibilidad.

Palabras claves: Santuario, ―Wildlife Waystation‖, matriz DOFA, propuesta,

investigación proyectiva, bioterio, ratas, ratones.

Page 20: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

6

ABSTRACT

This proposal corresponds a thesis from the career Veterinary Medicine and

Zootechnics, a work that follows up a prior internship project completed at the

animal Sanctuary Wildlife Waystation (WWS), a non-governmental organization

(NGO), located in the Los Angeles National Forest, California, United States of

America. Since its conception as a NGO the WWS has been maintained thanks to

the economical support of volunteers, external donors and visitors, situation that

changed during 2004 when the Sanctuary had to close its doors to the public,

making its economy unstable, depending only on people's goodwill.

Based on the need of becoming economically stable, it was crucial to detect the

weaknesses of the enterprise, reason why the SWOT analysis was used. (to

evaluate the Strengths, Weaknesses, Opportunities and Threats).Considering the

weak points previously identified, one of the principal conclusions was that there

was a big necessity of creating projects that could potentiate and improve the

economy of the place. A project idea emerged, based on the development of a

program to breed and produce rats and mice with the aim of reducing food costs.

The research was developed by using a qualitative research type called Projective

Technique. The first step was based on identifying the problem, followed by the

recognition of the amount of money destined yearly on buying the animals food.

Later a planning process was developed. This started with the selection and

adaptation of a recycled structure previously used for storage, no was the project's

building, and continued by creating a productive model to produce rats and mice,

including factors like genetics, breeding techniques, handling and euthanasia.

Finally, after measuring the Return Of Invested (ROI), Payback Period (4.8 years)

and monthly utilities (US$4,947.35) the feasibility and benefits of the project were

determined.

Page 21: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

7

Key words: Sanctuary, Wildlife Waystation, SWOT analysis, proposal, projective

technique, production, rats, mice.

Page 22: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

8

RÉSUMÉ

Ce document constitue la mémoire de thèse de la carrière de Médicine Vétérinaire

et Zootechnie. Le projet proposé a été conçu dans le cadre d‘un stage effectué au

sein du sanctuaire d‘animaux exotiques Wildlife Waystation (WWS). Le WWS est

située dans les domaines de Los Angeles National Forest, Californie, États-Unis

d‘Amérique. Il s‘agit d‘un Organisme Sans But Lucratif (OSBL) qu'à travers des

années à survécu grâce aux donations économiques. Autre revenu important était

les visites du public, mais à cause des problèmes administratifs, le sanctuaire a dû

fermer définitivement ses portes aux particuliers, il y a dix ans. Le fait de dépendre

uniquement des dons, crée une instabilité économique qui met en péril le

fonctionnement du sanctuaire.

Basée sur la problématique mentionnée avant, une matrice SWOT (par son nom

en anglais Strengths, Weaknesses, Opportunities et Threats) a été établie. On a

identifié la nécessite des actions qui permettent de stimuler l'économie du site

d‘une façon autonome. Suite à cela, on a proposé la création d'un vivarium de

production de souris et rats, avec le but de satisfaire les besoins alimentaires du

site, tout en diminuant les coûts.

Cette proposition de type qualitative, nommée « technique projective », a été

fondée sur l'identification du problème et complétée avec l‘historique des frais

annuels dépensés par le Sanctuaire en alimentation animal. Après cela, un

processus de planification a été mis en place et un des points importants a été le

choix d‘un conteneur comme infrastructure pour le vivarium. De la même manière,

le placement de ce conteneur a était analysé et établit. À continuation un model

productif de rats et souris a été développé, dont des différent paramètres ont été

considérés : la génétique, la reproduction, l'élevage, la manipulation et le sacrifice

des animaux. Finalement, une analyse économique du projet a été menée,

laquelle a permis de vérifier sa faisabilité. Le retour sur l‘investissement (RSI) a été

Page 23: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

9

fixé à 4.8 ans, date après laquelle le Sanctuaire commencerait à avoir des profits

annuels de US$4,947.35, permettant d‘améliorer la situation économique du site,

ainsi que d‘avoir une autonomie en termes du processus d‘alimentation des

animaux.

Mots-clés: Sanctuaire, Wildlife Waystation, matrice SWOT, proposition, technique

projective, reproduction, élevage, rats, souris.

Page 24: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

10

INTRODUCCIÓN

El Santuario Wildlife Waystation (SWW), está ubicado en los territorios del Bosque

Nacional de Los Ángeles, California, en los Estados Unidos de América. Se trata

de una organización sin ánimo de lucro (ONG) que alberga actualmente a más de

quinientas (500) especies animales, provenientes de diversos escenarios de

maltrato. Su papel como institución precursora y defensora de los derechos de los

animales y su protección se empezó a forjar desde su creación en el año 1979 por

la experta en fauna silvestre y exótica, de origen francés, Martine Colette1.

Desde la concepción del Santuario como ONG, a través de los años, su

manutención se había basado principalmente en donaciones económicas por

parte de voluntarios, personas particulares y finalmente recaudaciones de dinero a

partir de las visitas del público. Situación que cambió en el año 2004, cuando las

autoridades del condado de Los Ángeles, cerraron sus puertas a particulares, al

notar la carencia de algunos permisos relacionados a la infraestructura construida

para los animales. Condición que afectó directamente la estabilidad económica de

la organización, al depender únicamente de los ingresos variables, éstos

representados por las donaciones recibidas esporádicamente.

Con el fin de conocer la problemática real, basado en la aplicación de la matriz

DOFA, realizada durante el periodo de pasantía del autor (la cual evalúa las

debilidades, oportunidades, fortalezas y amenazas de una empresa), se logró

determinar que si bien a nivel administrativo el manejo es generalmente correcto,

a nivel económico existe una falencia importante, ya que no solo los gastos

superan en gran número los ingresos (situación demostrada según los reportes

1 WILDLIFE WAYSTATION. About Martine. (en línea) < http://wildlifewaystation.org/martine-

colette.htm> (citado el 2 de enero del 2014).

Page 25: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

11

financieros del año 2013 del SWW2, en donde los gastos anuales de alimentación

alcanzaron la cifra total de US$207,513.79) (ver Anexo A), simultáneamente

también existe una carencia de actividades que contribuyan a la seguridad

alimenticia del Santuario. Para lo cual se concluyó acerca de la necesidad de

generar proyectos con éste fin, proponiéndose puntualmente la creación de un

bioterio de producción de ratas y ratones, para así suplir la demanda alimenticia

de algunos animales residentes del Santuario3.

Si bien Muñoz de Mérida define un bioterio como: "El lugar físico donde se alojan,

crían y utilizan animales de laboratorio que cuentan con una calidad genética y

microbiológica definida"4, es necesario destacar que existen tres clasificaciones:

los de mantenimiento, experimentación y producción o crianza. Los bioterios de

mantenimiento son destinados ya sea para adaptar especies animales al

cautiverio o mantener animales (sin algún valor genético especializado) con el fin

de usados en diversas prácticas biomédicas. Los bioterios de experimentación

comprenden los lugares donde se crían y mantienen animales de calidad genética

y microbiológica definida, siendo una característica importante, el control estricto

de las variables que puedan interferir directa o indirectamente en aquello que se

desea estudiar. Finalmente en cuanto a los bioterios de producción o crianza,

corresponden a aquellos en donde si bien se requieren controlar las variables del

medio que puedan afectar a los animales, su finalidad consiste ya sea en albergar

2 CARY BARNHILL, Barbara. Wildlife Waystation transaction report. En: Wildlife Waystation

financial statements for the year ended October 15, 2013 and independent auditor‘s report (base

de datos electrónica). (Oct. 2012 - Oct. 2013). (citado el 2 de enero del 2014).

3 ALVAREZ CRUZ, Laura. Informe de pasantía llevada a cabo en el Santuario Wildlife

Waystation. Los Ángeles, California, 2013, 70 h. Informe final de pasantía (Medicina Veterinaria

y Zootecnia). Universidad Cooperativa de Colombia. Facultad de Medicina Veterinaria y

Zootecnia.

4 MUÑOZ DE MÉRIDA, María. Bioterio. (en línea). <

http://es.scribd.com/doc/55492124/BIOTERIO> (citado el 24 de Julio del 2014).

Page 26: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

12

los núcleos parentales requeridos para un experimento concreto, o cepas de

animales que se produzcan con el fin de ser comercializadas como mascotas o

alimento de otras especies5.

De acuerdo a lo mencionado anteriormente es importante destacar que el bioterio

desarrollado en la presente propuesta constituye a uno de producción, con la

aclaración que su objetivo sería de producir animales saludables para el

autoconsumo, beneficiando tanto la salud de sus consumidores, como la

estabilidad económica del Santuario, al aportar a su seguridad alimenticia.

La investigación que se llevó a cabo durante la realización de la propuesta fue de

tipo proyectiva, para su desarrollo se tuvieron en cuenta parámetros relacionados

con la selección, adecuación y locación de las instalaciones físicas, y la creación

de un modelo productivo, en el cual se consideraron factores como: la genética,

reproducción, cría, manejo y sacrificio de los animales. Asimismo, se complementó

con un componente económico, al analizar tanto el presupuesto predeterminado

como retorno de la inversión (RSI) del proyecto, demostrando la factibilidad del

proyecto, debido a su reducido tiempo de amortización (4.8 años), a las utilidades

producidas anualmente (US$4,947.35) y al gran beneficio que traería para el

Santuario el hecho de iniciar proyectos que impulsen su auto sostenibilidad.

5 PEREIRA CARDOZO, Celia. Animais de Laboratório: criação e experimentação: Classificação

de biotérios quanto à finalidade. En: SciELO Books (en línea). No. 4 (2002) <

http://books.scielo.org/id/sfwtj/pdf/andrade-9788575413869-06.pdf> (citado el 24 de julio del

2014).

Page 27: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

13

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL.

Diseñar un bioterio de producción de ratas y ratones con el fin de reducir costos de

alimentación en el Santuario Wildlife Waystation.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS.

- Diseñar un modelo de bioterio de producción de ratas y ratones que se ajuste a

las condiciones medioambientales del Santuario Wildlife Waystation.

- Crear un proyecto piloto que impulse la seguridad alimenticia de los animales

del Santuario Wildlife Waystation.

- Determinar la factibilidad de la implementación del bioterio de producción de

ratas y ratones en el Santuario Wildlife Waystation.

Page 28: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

14

1. JUSTIFICACIÓN Y PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.

Dentro de los tres factores principales que componen la producción pecuaria, la

nutrición constituye el punto crítico más relevante, superando a la genética y la

reproducción. Esto debido, a que dicha área no sólo es la base de la supervivencia

de los organismos vivos, sino que representa en los costos de producción totales

de una empresa un porcentaje que varía entre el 60 y el 85%6. Por esto, con el fin

de reducir costos, existe la tendencia por parte de los productores a buscar

nuevas alternativas de alimentación, de manera que se aumente la eficiencia de

las empresas. Lo anterior, si bien es una representación de un modelo animal

productivo, es posible aplicarlo en cualquier caso puntual de empresas o

instituciones que alberguen animales (como es el caso de los zoológicos,

santuarios o albergues) así su objetivo principal no sea la reproducción genética o

producción de alimento para humanos.

Según reportes financieros del WWS del año 2013, los gastos totales incurridos en

la compra de alimento para los animales fueron aproximadamente de

US$207,513; siendo la carne el ítem que representa mayor costo (US$104,889),

seguido por los productos concentrados (US$50,539), las frutas y verduras

(US$15,600) y en cuarto lugar los roedores (US$14,076). Cifras que se esperan

aumenten con el tiempo, teniendo en cuenta el alto flujo de animales que ingresan

al Santuario7.

6 BRAUTIGAN IM. Nutrición Animal. 1 ed. Costa Rica: Universidad Estatal a Distancia; 2007.

7 CARY BARNHILL, Barbara. Wildlife Waystation inventory report. (base de datos electrónica).

(Oct. 2012 - Oct. 2013). (citado el 2 de enero del 2014).

Page 29: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

15

Con el fin de dar una idea al lector acerca de la situación actual del Santuario, es

importante tener en cuenta que todo alimento ofrecido a los animales, es y ha sido

adquirido por medio de productores externos o donado por diferentes fuentes;

dependencia que no solo afecta a la organización a nivel económico, sino

funcional, puesto que no hay ninguna medida de respuesta inmediata que asegure

la alimentación de los animales en caso de escasez, sea producida por problemas

económicos internos, por el aumento de precios en el mercado o por el cambio de

insumos por parte de los productores.

Lo anterior, justificación principal del presente proyecto, corresponde a una de las

conclusiones obtenidas tras haber realizado el análisis del diagnóstico del WWS,

para el cual se aplicó la matriz DOFA. A continuación se listarán los resultados

obtenidos durante dicho proceso diagnóstico.

- Insuficiente número de personal especializado, lo cual dificulta y retrasa

procesos.

- Alimentación de los animales depende estrictamente de proveedores externos,

lo cual afecta la estabilidad económica del Santuario.

- Necesidad de formular proyectos de enriquecimiento ambiental que tengan en

cuenta limitaciones tales como: dimensión de las jaulas y materiales en que se

encuentran construídas. De manera que se potencialicen los materiales

dispuestos a éste fin.

- Falta de implementación de protocolos para el control de parásitos en los

animales. Afectando directamente la salud de los animales al no tener un

programa ordenado de recolección de muestras, valoración e implementación

de tratamientos.

- Falta de organización de algunos insumos encontrados en las áreas del

hospital, lo cual dificulta los procesos.

Page 30: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

16

De acuerdo a registros actuales, las cifras mostradas a continuación representan

la cantidad aproximada de roedores que se utilizan mensual, semestral y

anualmente como alimento.

Fuente: Base de datos llevada por Dr. Silvio Santinelli

Fuente: Reportes Bárbara Brace Barnhill contadora del WW.

Tabla 1. Cálculo de ratones y ratas utilizadas para la alimentación en la actualidad.

Tabla 2. Inversión realizada entre el periodo de Octubre del 2012 y Octubre del 2013 para la compra de ratones y ratas.

Page 31: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

17

Según la tabla anterior, entre el periodo de Octubre 15 del año 2012 y Octubre 15

del año 2013, los gastos totales en que incurrió el Santuario en la compra de

roedores con fines alimenticios fueron de US$14,076, lo cual representa el 6,78%

de la cifra total de la inversión de alimento anual por parte del Santuario. Es

importante denotar que la inversión total anual no solo depende del flujo de

animales que haya entrado o salido del Santuario, sino también de la fluctuación

de precios en el mercado. Si bien es cierto, que los roedores no son la fuente de

alimento en que se incurre el mayor gasto, debido a la dificultad de lograr producir

los demás alimentos, la alternativa de la creación de un bioterio con fines

productivos se plantea como solución para demostrar que es posible reducir

costos y problemáticas, cuando se refuerza la autonomía productiva, beneficiando

la economía del Santuario, al contribuir a su seguridad alimenticia.

Page 32: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

18

2. ESTADO DEL ARTE

Si bien los bioterios constituyen aquellos lugares físicos en donde se alojan y crían

animales de laboratorio4 y su clasificación formal está compuesta por tres (3) tipos

diferentes5. Es necesario determinar que en el día a día y a través del paso de los

años dos modelos generales se han desarrollado, constituyendo a los modelos

empírico y formal.

Con respecto al modelo empírico es posible decir que se trata de aquel tipo de

producción de ratas y ratones llevado a cabo por personas naturales, quienes

poseen nula o poca experiencia en el tema, adquiriéndola usualmente gracias a

fuentes informativas como el internet o tras aplicar sistemas de prueba y error.

Dichas producciones se crean generalmente ya sea para su autoconsumo (tras

poseer mascotas que así lo necesiten), o para realizar ventas al minoreo de

roedores como mascotas o alimento (vivo o muerto). En este caso, la toma de

registros y bases de datos tienden a ser incompletas o totalmente inexistentes, lo

cual ocasiona que el pequeño productor generalmente se limite supliendo

únicamente sus necesidades momentáneas o de corto plazo. Si bien dichos

modelos pueden estar basados ya sea en técnicas previamente desarrolladas o

modelos innovadores, su posibilidad de ser repetidos o reproducidos es cercana a

nula, esto debido a la falta de producción de datos confiables y verídicos.

Por otro lado, el modelo formal se encuentra representado por dos tipos de

empresas: los laboratorios científicos y las compañías especializadas en la

producción, distribución y venta de roedores.

Con respecto a la contribución de los laboratorios científicos en este campo, es

posible determinar que ésta ha sido la más relevante ya que ha consistido no solo

en la producción tanto de cepas de roedores usadas generalmente como pies de

Page 33: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

19

cría en proyectos productivos y/o bioterios de experimentación, como de infinidad

de información científica, permitiendo el nacimiento de un lenguaje científico de

tipo universal y el desarrollo de diversos proyectos de diferentes índoles8. Los

tipos de cepas producidos por los laboratorios son usualmente adquiridas por los

usuarios cuando la trazabilidad, el grado de parentesco y el rendimiento

reproductivo son considerados como prioridades, lo cual depende de la naturaleza

y los objetivos del proyecto. En este caso, dos compañías representativas de este

grupo son los laboratorios Jackson Laboratory9 y Charles River10, empresas

consideradas como líderes en la producción de cepas de roedores con

características y fines definidos, ya sea para su uso en el campo productivo o

científico (siendo mayormente utilizadas para diferentes tipos de investigaciones,

con respecto al comportamiento de algunas enfermedades o al descubrimiento de

medicamentos, esto con el fin de mejorar la salud del ser humano).

Con respecto a las compañías especializadas en la producción, es importante

puntualizar que son aquellas que se dedican a la venta de diferentes especies de

laboratorio con fines alimenticios. Es de destacar que entre las múltiples empresas

ofrecidas en el mercado, dedicadas al mismo fin, tres (3) fueron seleccionadas

para así ejemplarizar el modelo que la presente propuesta desea seguir, debido no

solo a su trayectoria sino su capacidad de producir datos con posibilidad de ser

reproducidos o repetidos. Es importante tener en cuenta que uno de los factores

primordiales que contribuyeron a dicha selección, consistió en que el WWS es

cliente activo, y por ende es testigo tanto de su servicio, como de la calidad de sus

productos. Dichas compañías corresponden a: RodentPro11, MiceDirect12 y Layne

8 BRAMANTI, Peggy. Charles River Laboratory International Genetic Standards. Volume 11 #1.

Wilmington, MA: Charles River Laboratory, 1999.

9 JACKSON LABORATORY (en línea) <http://www.jax.org> (citado el 10 de marzo del 2014).

10 CHARLES RIVER (en línea) <http://www.criver.com> (citado el 10 de marzo del 2014).

11 RODENTPRO (en línea) <http://www.rodentpro.com/?gclid=CLr5u_DczLwCFciCfgodakoA9Q>

(citado el 10 de marzo del 2014).

Page 34: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

20

Laboratories13. Empresas Estadounidenses las cuales su misión en común,

consiste en: ser especialistas en la producción y distribución de pequeños

mamíferos y aves congeladas, usados como alimento para especies tales como:

reptiles, aves rapaces, especies acuáticas y carnívoras en general, y sus

objetivos, consisten en la venta de productos de alta calidad, ofreciendo al cliente,

directa atención por parte del productor, facilidad de entrega y disponibilidad a lo

largo del año.

12

MICEDIRECT (en línea) <https://micedirect.com/> (citado el 10 de marzo del 2014).

13 LAYNE LABORATORIES (en línea) <http://www.laynelabs.com/frozen-

mice?gclid=CJOarqvdzLwCFRSPfgodE14AUA> (citado el 10 de marzo del 2014).

Page 35: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

21

3. NORMATIVIDAD QUE REGULA EL USO DE ANIMALES DE

LABORATORIO A NIVEL MUNDIAL Y EN LOS ESTADOS UNIDOS DE

AMÉRICA

Existen normas generales o marcos que regulan el uso de animales de laboratorio

a nivel mundial, otras específicas de algunos continentes (Asia y Europa) y

algunas otras de naciones (Australia y Nueva Zelanda, Canadá, India, Israel,

México y Sur África).

3.1 NORMAS A NIVEL MUNDIAL.

3.1.1 Consejo para Organizaciones Internacionales de Ciencias Médicas

(CIOMS).

Durante el mes de diciembre del año 2012, el Consejo Internacional de la Ciencia

de los Animales de Laboratorio (ICLAS, por sus siglas en inglés)14 junto con el

Consejo de Organizaciones Internacionales de las Ciencias Médicas (CIOMS, por

sus siglas en inglés)15 crearon la "Guía de Principios Internacionales para

Investigaciones Biomédicas que Envuelven Animales". Su objetivo principal se

basó en la creación de un marco, que sirviese como punto de referencia para

lograr la vigilancia y control de actividades relacionadas con investigaciones y

programas de enseñanza que incluyesen animales, llevadas a cabo en países

emergentes en cuanto a su desarrollo científico. Asimismo, que sirviese como pilar

14 INTERNATIONAL COUNCIL FOR LABORATORY ANIMAL SCIENCE, ICLAS. (en línea) <

http://iclas.org/> (citado el día 25 de julio del 2014).

15 THE COUNCIL FOR INTERNATIONAL ORGANIZATIONS OF MEDICAL SCIENCES, CIOMS.

(en línea) < http://www.cioms.ch/> (citado el día 25 de julio del 2014).

Page 36: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

22

para los países desarrollados que posean programas de investigación ya

establecidos, en los cuales se incluyan animales.

3.1.2 Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio.

La octava edición de la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio (la

Guía)15, publicada por el Consejo de Investigación Nacional, es reconocida en

muchos países como un marco regulador de estándares de calidad, relacionados

al uso y cuidado de animales de laboratorio. La Asociación Internacional para la

Evaluación y Acreditación del Cuidado de Animales de Laboratorio (AAALAC, por

sus siglas en inglés)16 utiliza tres estándares principales para evaluar el cuidado y

el uso de los animales en los diferentes programas. Entre éstos se encuentran la

Guía15: igualmente la "Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Producción en

Investigaciones y Educación17 y la Convención Europea para la Protección de

Animales Vertebrados Usados para Experimentación y otros Propósitos

Científicos18. Es importante resaltar que el Consejo de la AAALAC también utiliza

diferentes tipos de referencias y recursos durante el proceso diagnóstico, los

cuales dependerían de la ubicación del programa y el tipo de investigación.

16

ASSOCIATION FOR ASSESSMENT AND ACCREDITATION OF LABORATORY ANIMAL

CARE, AAALAC. (en línea) < http://www.aaalac.org/about/index.cfm> (citado el 25 de julio del

2014). 17

GUIDE FOR THE CARE AND USE OF AGRICULTURAL ANIMALS IN RESEARCH AND

TEACHING, Third edition. Federation of Animal Science Societies, FASS. Champaign, IL:

Federation of Animal Science Societies, 2010.

18 CONSEIL OF EUROPE. European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used

for Experimental and other Scientific Purposes. Strasbourg: 1986 (ETS No. 170).

Page 37: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

23

3.1.3 Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la

Agricultura (FAO, por sus siglas en inglés).

Existe una división en la FAO llamada "Departamento de Agricultura y Protección

del Consumidor, Protección y Salud Animal"19, la cual se encarga de servir como

veedor en cualquier escenario en donde se incluyan animales sin importar su uso

o destino.

3.2 NORMAS A NIVEL DE ESTADOS UNIDOS.

3.2.1 El Acta de Bienestar Animal (The Animal Welfare Act, AWA).

En Acta de Bienestar Animal (AWA, por sus siglas en inglés)20 constituye la única

ley de tipo federal en los Estados Unidos de América que regula el cuidado y uso

de animales en diversas áreas, incluyendo la investigación. Desde su concepción,

en el año 1969, el acta ha sido modificada y actualizada siete veces, datando su

última versión del año 2008. Actualmente el acta cubre y protege todos los

animales de sangre caliente excepto las ratas, los ratones, las aves y los animales

de granja utilizados para investigaciones relacionadas con la alimentación. Es

importante resaltar que si bien existen otras leyes, políticas o guías que poseen

cobertura adicional en cuanto a otras especies o especificaciones con respecto a

19

FOOD AND AGRICULTURE ORGANIZATION OF THE UNITED STATIONS. Agriculture and

Consumer Protection Department Animal Production and Health Division (en línea) <

http://www.fao.org/ag/againfo/home/en/index.htm> (citado el día 25 de julio del 2014).

20 TADLOCK, C. The Animal Welfare Act: Background and Selected Legislation (PDF). The

Animal Welfare Act: Background and Selected Legislation. Congressional Research Service,

2012.

Page 38: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

24

su cuidado y/o uso, todas éstas se basan en la AWA al referirse de los estándares

mínimos para el tratamiento y cuidado de los animales.

El organismo federal responsable de regular el AWA es constituido por el

Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA, por sus siglas en

inglés)21, mediante su división correspondiente al Servicio de Inspección de la

Salud de los Animales y Plantas (APHIS, por sus siglas en inglés)22. El APHIS

mantiene un grupo de investigadores encargados de inspeccionar los centros de

investigaciones que posean animales mínimo una vez al año, teniendo en cuenta

que aquellos que no cumpliesen con las regulaciones establecidas por el AWA,

serían reportados al USDA y sus licencias serían revocadas.

3.2.2 Políticas del Servicio de Salud Pública.

El Servicio de Salud Pública de los Estados Unidos (PHS, por sus siglas en inglés)

por medio de sus "Políticas de Cuidado Humano y Uso de Animales de

Laboratorio" sirve como ente regulador al controlar que las instituciones (ya sea

que trabajen para el PHS o únicamente reciban su apoyo)23 establezcan y

mantengan medidas que aseguren el cuidado y uso de cualquier especie animal

utilizado en investigaciones, formación en investigaciones o experimentos

biológicos.

21

UNITED STATES DEPARTMENT OF AGRICULTURE, USDA. (en línea) <

http://www.usda.gov/wps/portal/usda/usdahome> (citado el día 25 de julio del 2014).

22 ANIMAL AND PLANT HEALTH INSPECTION SERVICE, APHIS. (en línea) <

http://www.aphis.usda.gov/wps/portal/aphis/home/> (citado el 25 de julio del 2014).

23 PUBLIC HEALTH SERVICE POLICY ON HUMANE CARE AND USE OF LABORATORY

ANIMALS, PHS. (en línea) <

http://grants.nih.gov/grants/olaw/references/phspolicylabanimals.pdf> (citado el 25 de julio del

2014).

Page 39: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

25

Es importante tener en cuenta que el PHS por medio de sus políticas respalda

"Los Principios del Gobierno de los Estados Unidos para el Uso y Cuidado de

Animales Vertebrados Usados en Experimentación, Investigación y

Entrenamiento" desarrollados por el Comité Interinstitucional de Investigación

Animal (IRAC, por sus siglas en inglés)23, los cuales se encargan de controlar el

uso y manejo general de animales vertebrados usados para la investigación.

3.2.3 El Comité Institucional para el Cuidado y Uso de los Animales

Según el Acta de Bienestar Animal (AWA) todas las instituciones encontradas en

el territorio de los Estados Unidos de América que manejen animales en

programas de investigación deben acogerse y por ende encontrarse respaldadas

por el "Comité Institucional para el Cuidado y Uso de Animales (IACUC, por sus

siglas en inglés)24, el cual se encargará de proveer los marcos necesarios para

que éstas cumplan con las políticas federales, guías y principios relacionados con

el uso de animales de experimentación, con el fin de asegurarse la correcta

aplicación de protocolos y procedimientos

3.3 NORMATIVAS QUE REGULAN EL SACRIFICIO DE ANIMALES DE

LABORATORIO.

Existen dos normas a nivel internacional, las cuales regulan los procesos de

eutanasia y por ende los clasifican entre métodos aceptados y no aceptados. Los

documentos que rigen dicha actividad son: a nivel de los Estados Unidos de

América, las ―Directrices para el uso de eutanasia, emitidas por la Asociación

24 INSTITUTIONAL ANIMAL CARE AND USE COMMITTEE, IACUC. (en línea) <

http://iacuc.utk.edu/> (citado el 25 de julio del 2014).

Page 40: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

26

Americana de Médicos Veterinarios‖25 y a nivel de la Comisión Europea,

―Recomendaciones para eutanasia en animales de experimentación‖26 27.

Es importante tener en cuenta que un punto crítico en el proceso investigativo y

productivo corresponde al sacrificio digno de los animales, ya que su correcta o

incorrecta ejecución no solo afectará su bienestar, sino en la integridad de los

resultados esperados. Para esto, es necesario que se tengan en cuenta los

siguientes factores: que el método de elección evite o disminuya el dolor y estrés

previo y durante el procedimiento, causando rápida inconsciencia, paro cardiaco

y/o respiratorio y pérdida de la función cerebral, que reduzca al mínimo la

perturbación emocional, incomodidad y/o sufrimiento experimentado por la

persona que lleve a cabo el procedimiento, y por último, que contribuya

positivamente a los resultados esperados por los investigadores o productores28.

25

LEARY, Steven. UNDERWOOD, Wendy. ANTHONY, Raymond. CARTNER, Samuel. et al.

AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals. Edición 2013. Schaumburg, Illinois (60173),

2013. American Veterinary Medical Association. 26

CLOSE, Bryony. BANISTER, Keith. BAUMANS, Vera. BERNOTH, Eva-María. et al.

Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 2. En: Working party report.

Segunda parte, sección 3.

27 HERRERO, Emiliana. MOURELLE, Ana C. RICCA, Micaela. Procedimientos experimentales 1:

Eutanasia - parte 1, 2 y 3. Argentina, 2008. (en línea). <http://www.CampusBioterios/com.ar>

(citado el 5 de Febrero del 2014).

28 Manual del Bioterio UAMI. Lineamientos del Bioterio de la UAM-I de la División de CB,

Eutanasia. Universidad Autónoma Metropolitana – Itzapalapa (UAM). México.

Page 41: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

27

4. CARACTERÍSTICAS DE LAS ESPECIES.

4.1 CARACTERÍSTICAS DE LAS ESPECIES: (MUS MUSCULUS Y RATTUS

NORVEGICUS).

Tabla 3. Características de las especies. 29 30

PARÁMETROS

Ratón de laboratorio, (Mus

musculus)

Imagen: http://www.boston.com

Rata de laboratorio, (Rattus

norvegicus)

Imagen: http://www.npr.org/

Peso gr (adulto)

18 – 25,99

275 – 374

Longitud cm

6,35 – 7,62

22,86 – 27,94

Hábito

Nocturno

Nocturno

Tipo de

alimentación

Omnívora

Omnívora

Número de

mamas

5 pares (3 torácicas 2

inguinales).

6 pares (3 torácicas,1 abdominal, 2

inguinales)

Tipo de

periodicidad del

ciclo estral

Poliéstricas continuas, ciclo

estral cada 4 a 5 días con

duración del estro de 12-14 hs.

Poliéstricas continuas. Ciclo estral

cada 4 a 5 días, con duración del

estro de aprox. 12hs. Ciclo estral

responde y se beneficia de acuerdo

a largos periodos de luz.

29

FUENTES, Flor. MENDOZA, Rosa. FERNANDEZ, Arturo. CISNEROS, Rosario. Guía de

manejo y cuidado de animales de laboratorio: Ratón. Lima: Gráfica técnica S.R.L, 2008. 1-52.

ISBN 978-9972-857-69-0.

30 RODRÍGUEZ, Jesús M. Animales de Laboratorio: Biología de las Especies más Usadas en

Experimentación. Bucaramanga: Universidad Industrial de Santander.

Page 42: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

28

Características

reproductivas

- Presencia de efecto Lee Boot,

efecto Whitten y efecto Bruce.

- Después del acoplamiento,

tapón vaginal (duración 24 hs).

- Gestación de 19 a 21 días y

lactancia 21 días.

- Presencia de estro pos-parto,

fértil (14 a 24 hs posteriores al

parto). Al lograrse, puede

retrasar la implantación y

prolongar la gestación de 3 a 5

días.

- Mortalidad aproximada al

primer parto 1%.

- Porcentaje aproximado de

fertilidad 98%.

- 5-6 camadas antes de

reemplazar a los

reproductores.

- Número de crías por parto 9 a

11.

- Sincronización puede hacerse por

la administración de

medicamentos.

- Después del acoplamiento tapón

vaginal (duración 12 a 24 hs).

- Presencia de estro posparto fértil,

igual comportamiento que en los

ratones.

- Gestación de 21 a 23 días y

lactancia 21 días.

- Número de crías por parto 8 a 12

(promedio 9).

- Mortalidad aproximada al primer

parto 1%.

- Porcentaje aproximado de

fertilidad 98%.

- 5 camadas antes de reemplazar a

los reproductores.

Sexado

Sexo de los animales se

determina por la distancia ano-

genital, es mayor en machos que

en hembras.

Sexo de los animales se determina

por la distancia ano-genital, es

mayor en machos que en hembras.

Temperamento

Generalmente puede ser

agresivo.

Manso.

Cantidad de

alimento (gr) y

agua (ml) que

consume diario

- 3 – 5 gr.

- 5 ml (ofrecida ad libitum).

- 10 – 20 gr.

- 25 ml (ofrecida ad libitum).

Sintomatología

producida por

estrés

Excesiva producción de

porfirinas (sustancia color

marrón) por parte de las

Glándulas Harderianas ubicadas

en la zona peri ocular.

Excesiva producción de porfirinas

(sustancia color marrón) por parte

de las Glándulas Harderianas

ubicadas en la zona peri ocular.

Page 43: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

29

4.2 PARÁMETROS PARA EL MANEJO DE BIOTERIOS DE PRODUCCIÓN.

Es esencial tener en cuenta que para tener éxito en cualquier proyecto que

involucre animales de laboratorio, ya sea, con fines científicos, académicos o

productivos, el correcto diseño de las instalaciones (basándose en las normativas)

debe ir de la mano junto con la estandarización genética y sanitaria, la

estabulación y el manejo apropiado de los animales, y la capacitación del personal

encargado. Dichos elementos se fusionan perfectamente con el fin de contribuir al

bienestar físico, fisiológico y comportamental de los animales, permitiendo así el

desarrollo y por ende el cumplimiento de los objetivos del proyecto31.

A continuación se listarán las directrices que se deben cumplir con el fin de lograr

el manejo correcto del medio ambiente de los animales en el bioterio. Dichos

parámetros pueden ser adecuados a cualquier tipo de bioterio, sin llegar a afectar

el bienestar de los animales.

31

GUIDE LABORATORY FOR THE CARE AND USE OF ANIMALS, Eighth Edition. Committee

on Care and Use of Laboratory Animals of the Institute of Laboratory Animals Resources

Commission on Life Sciencies. National Research Council U.S. Department of Health and

Human Services. Washington D.C: The National Academies Press, 1985.

Page 44: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

30

Tabla 4. Parámetros para el correcto manejo del bioterio. 32 33 34 35

PARÁMETROS

Temperatura y

ambiente

- 18 – 23°C (65 – 75°F) (evitar grandes fluctuaciones).

- Ofrecimiento de recursos para termorregulación (material para nidos)

evitando así estrés por frío.

Humedad relativa

- 50 – 60%.

Ventilación

- Depende del tipo de jaula en donde se alojen los animales.

- El sistema de inyección y extracción debe operar las 24 horas del día y

los 365 días del año.

- Aproximadamente de 10 a 15 cambios de aire fresco por hora.

- Se debe tener en cuenta: el volumen del aire, características físicas y

patrón de difusión.

- Evitar exposición a corrientes directas de aire.

- Se recomienda el uso de sistemas de calefacción, ventilación y

acondicionamiento de aire (HVAC).

- Se recomienda el uso de jaulas de ventilación individual (IVCs) pues

evitan el constante manejo de la ventilación de la habitación,

necesitando lo suficiente para limpiar el macroambiente.

- Evitar el uso de aire reciclado.

32

MASCHI, Fabricio. Bioterios: Diseño y Construcción. Cátedra de Animales de Laboratorio y

Bioterio. Facultad de Ciencias Veterinarias Universidad Nacional de La Plata.

33 FAWCETT, Anne. Guideline 22: Guidelines for the Housing of Mice in Scientific Institutions. En:

Animal Research Review Panel 2. Sidney: 2012. p. 23 - 113.

34 SHERWIN, Chris M. Comfortable Quarters for Mice in Research Institutions. Centre for

Behavioral Biology. Department of Clinical Veterinary Science Langford House. University of

Bristol. Bristol, United Kingdom. BS40 5DU.

35 FOX, James. DAVISSON, Muriel. QUIMBY, Fred. BARTHOLD, Stephen. et al. The Mouse in

Biomedical Research, 2nd Edition: Normative Biology, Husbandry and Models. Elsevier, 2007.

ISBN: 978-0-12-369454-6. p. 254 - 258.

Page 45: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

31

Iluminación

- Debido a que los roedores usualmente se aparean en la noche, el

rendimiento reproductivo es mejor cuando el ciclo de luz y oscuridad es

consistente y no se interrumpe. Se recomienda usar un sistema de 12

horas luz y 12 horas de oscuridad.

- Buena difusión en el área, permitiendo el confort de los animales y el

desarrollo de actividades por parte del personal.

- Debe permitir su regulación, para así ajustar el fotoperiodo.

- El tipo de luz debe ser fría (5.500 y 6.500 grados Kelvin), fluorescente o

con diodos.

- De acuerdo a la intensidad de luz, se recomienda mantener una

relación de 400 lux para un cuarto con medidas de 1m (3,3ft) del piso al

techo.

- Evitar el uso de jaulas transparentes si el control de luminosidad se

dificulta.

- Proveer a los animales alternativas para protegerse de la luz.

Filtración del agua

- Se debe considerar para la prevención de enfermedades.

- Alargamiento de la vida útil de equipos que necesitan agua para

funcionar.

- Útil en el caso de emplear bebederos automáticos.

- Generalmente se emplean en tren (filtro de malla, filtro de carbón, es

posible adicionar sistema con luz U.V).

Ruidos y

vibraciones

- Exposición mayor de 85db puede ocasionar problemas auditivos y

fisiológicos en los animales (Ej. Eosinopénia, reduce su fertilidad).

- Alta susceptibilidad a ultrasonidos.

- Evitar sonidos innecesarios (radios, alarmas, etc.).

- Uso de técnicas para aislar el área de animales de vibraciones de alta

intensidad, frecuencia y duración.

Enriquecimiento

ambiental

- Proveer adecuado sustrato para cama y estructuras para descanso, lo

cual estimula al comportamiento normal del animal.

- Proveer materiales de madera o fibrosos para masticar.

- Proveer objetos para refugiarse en momentos de estrés o descanso.

En cuanto a las

jaulas

- Proveer un ambiente seguro para los animales.

- Fabricadas con materiales no tóxicos y resistentes a la corrosión.

- Se requieren superficies lisas, impermeables, con mínimos ángulos,

facilitando la limpieza. Se deben evitar superficies superpuestas que

faciliten el acumulo de residuos.

Page 46: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

32

Manejo social y de

los animales

- Es importante tener en cuenta que la creación de grupos sociales de la

misma especie tiende a estimular el comportamiento normal de los

animales. Por lo tanto, al existir la necesidad de segregación de

individuos se debe permitir un mínimo contacto visual, auditivo y

olfatorio, evitando posible presencia de estrés.

- Los animales responden mejor a un manejo calmado y consistente.

- Hembras preñadas, a punto de dar a luz y con camada se deben

manipular lo menos posible.

Nutrición

- Los siguientes son los nutrientes requeridos para el correcto desarrollo

de los animales (son relativamente iguales entre las dos especies), los

cuales están basados en una dieta de 100gr/día. El primer valor de

cada parámetro equivale a la etapa de crecimiento, gestación y

lactancia y el segundo a la de mantenimiento.

Energía (kcal): 377 - 360.

Grasa (g): 7 – 4.

Proteínas (g) (N * 6,25): 17,9 – 12,6.

Cenizas (g): 4,2 – 3,9.

Humedad (g): 6,6 – 6,8.

Calcio (g): 0,50

Fosforo (g): 0,30.

Cloruro (g): 0,16.

Magnesio (g): 0,051.

Potasio (g): 0,36.

Sodio (g): 102.

4.3 CONSTRUCCIÓN DE LA PLANTA FÍSICA Y ALOJAMIENTO.

Al llegar a éste punto del proceso de planeación de un bioterio, diversos factores

se debieron haber evaluado y aplicado, entre los que se encuentran: la

determinación de los objetivos o finalidad del proyecto, el tipo de animales a

utilizar, la cantidad de animales requerida para dar inicio a la producción, la

ubicación de las instalaciones, el acceso a servicios básicos, la facilidad para el

desecho de los residuos, entre otros.

Page 47: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

33

Con respecto al tipo de instalaciones necesarias para los bioterios de producción

es importante resaltar que existen dos alternativas. La primera, consta del

reciclaje de edificios, y la segunda, de la construcción de obras nuevas. Asimismo,

es necesario tener en cuenta que sin importar el tipo de instalación utilizada, éstas

siempre deben poseer las siguientes características: flexibilidad, sencillez en el

mantenimiento, posibilidades de expansión, satisfacción de los investigadores, los

técnicos encargados y los animales36.

La Imagen 1 muestra una referencia de un bioterio de producción, la cual puede

ser tenida como modelo en el momento de construir el propio.

Fuente: Maschi F, Cátedra de animales de laboratorio y bioterio, Facultad de Ciencias Veterinarias,

Universidad de la Plata, Argentina, 2010.

36

MASCHI, Fabricio. Bioterios: Diseño y Construcción. Cátedra de Animales de Laboratorio y

Bioterio. Facultad de Ciencias Veterinarias Universidad Nacional de La Plata.

Imagen 1. Modelo de bioterio de producción.

Page 48: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

34

Es importante asimismo que la planeación de la planta física vaya de la mano con

las normas vigentes de bioseguridad descritas para bioterios, éstas encontradas

en la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio, propuestas por el

Departamento de la Salud y Servicios Humanos de los Estados Unidos de

América31. Uno de los aspectos más relevantes tratados en la Guía se refiere la

instalación de barreras sanitarias, las cuales son definidas como: ―sistemas que

combinan aspectos constructivos, equipamientos y procedimientos de trabajo que

buscan estabilizar las condiciones ambientales de las áreas restrictas,

minimizando la probabilidad de que organismos patógenos u otros organismos

indeseables se pongan en contacto con la población animal del área limpia‖37. Un

ejemplo del empleo de dichas barreras, consiste en la ubicación de corredores que

se dirija de las zonas limpias a las zonas sucias.

Fuente: MASCHI. F, Cátedra de animales de laboratorio y bioterio, Facultad de Ciencias

Veterinarias, Universidad de la Plata, Argentina, 2010.

37

ILAR. Laboratory Animal Medicine: Guidelines for Education and Training (Committee on

Education, Institute of Laboratory Animal Resources, Division of Biological Sciences). 1979.

Vol. XXII, No. 2.

Imagen 2. Modelos de corredores.

Page 49: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

35

Con el fin de lograr una mayor efectividad en el uso de las barreras de corredores,

en la Tabla 5. se hará una descripción paso a paso de los procedimientos que

deben llevar a cabo los empleados del bioterio desde el momento de su entrada.

Tabla 5. Procedimientos operativos del personal en el bioterio.29 31 36 37

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS EN EL BIOTERIO

1. Cambio de calzado y ropa del personal.

2. Ducha previa al ingreso a las áreas limpias.

3. Puesta de ropa estéril.

4. Flujo de insumos unidireccionales, separando siempre las

actividades limpias y sucias, evitando contaminaciones cruzadas.

5. Procedimientos previos de desinfección de superficies de botas y

guantes antes del ingreso a cada sala.

6. Uso de prácticas correctas de manipulación, contención y

movilización de animales (serán expuestas posteriormente).

7. Procedimientos de limpieza y desinfección general.

8. Protocolos de trabajo con los animales.

9. Protocolos de trabajo para la preparación de insumos.

10. Validación de protocolos y procedimientos a través de controles.

Page 50: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

36

4.3.1 Instalaciones para los animales.

- Dimensión de las jaulas apropiadas de acuerdo con el volumen de

animales por cm2 (ver Imagen 3).

Fuente: Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio,1985. 31

- No debe poseer ventanas.

- Techos y paredes impermeables, con uniones suaves (forma redondeada)

permitiendo la correcta desinfección.

- Ingreso de aire forzado desde la parte superior.

- Conductor de extracción en la parte inferior.

Imagen 3. Medidas mínimas de animales por jaula.

Page 51: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

37

- Acceso a servicios básicos (ej. Agua, luz y teléfono) de manera fácil y en lo

posible ubicados en el exterior.

- Acondicionamiento térmico independiente en cada sala.

- Caída de los pisos hacia los desagües y hacia zonas sucias.

- Apertura de puertas hacia el interior o exterior, dependiendo de la función de

cada sala.

- Pisos con rejillas enterizas cerradas o móviles.

4.3.2 Corredores o pasillos.

- Deben estar ubicados estratégicamente para conectar las dependencias y

facilitar el flujo operativo de los distintos procedimientos.

- Los flujos operativos deben realizarse desde el sector limpio al sucio.

- Preferiblemente pasillos dobles.

- Diseñados con el fin de facilitar la limpieza y desinfección.

- Deben ser anchos para facilitar el movimiento de los insumos y equipos.

4.3.3 Puertas de salas.

- Impermeables, que permitan y resistan procesos de limpieza, desinfección y

presiones constantes.

- Deben ser anchas (1m -1,2m).

- Con marcos y bisagras reforzadas con aluminio.

- Con cerraduras resistentes.

- Equipadas con abre puertas.

Page 52: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

38

4.3.4 Ventanas externas.

- Generalmente no es aconsejable debido a la posibilidad de ingreso de

animales del exterior y salida de los animales del laboratorio en caso de

escape, así mismo dificulta el control del fotoperiodo.

- Es posible que sean ubicadas en corredores externos y depósitos, sin embargo

deben estar siempre selladas y protegidas.

4.3.5 Pisos.

- La base de los pisos debe ser de concreto.

- Las juntas de expansión deben localizarse debajo de las paredes.

- Resistente a desinfectantes químicos.

- Juntas con paredes redondeadas.

- Pueden tener una lámina vinílica en la superficie (corredores).

4.3.6 Agua, desagües y cañerías.

- El agua debe ser potable para consumo humano y animal.

- Es necesario agua fría y caliente para facilitar la limpieza y desinfección.

- Evitar la ubicación de cañerías en áreas restringidas o limpias.

- Los drenajes deben poder cerrarse al no utilizarse e igualmente poseer un

sistema de sifón.

- El nivel de caída debe ser hacia el sector sucio.

4.3.7 Paredes.

- Cubiertas con pinturas resistentes al agua, a procesos de limpieza y de

desinfección.

Page 53: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

39

- Idealmente de concreto y con terminación de cemento y yeso.

- No se aconsejan los azulejos o revestimientos en cerámica.

- Se aconseja la protección de las paredes de los corredores contra golpes,

haciendo uso de separadores o barandas.

4.3.8 Techos.

- Deben ser resistentes a lavados y desinfecciones periódicas.

- Deben ser de superficie lisa, cubiertos con pintura resistente, epoxi o sintética.

- Si son de tipo suspendido (cielorraso) deben ser reforzados.

- Las uniones no deben ser en ángulos agudos.

4.4 MANIPULACIÓN, INMOVILIZACIÓN, IDENTIFICACIÓN Y SEXAJE.

Con el fin de evitar afectar negativamente el bienestar de los animales debido a

prácticas de manejo incorrectas, es importante que el personal del bioterio sea

tanto advertido, como capacitado en los siguientes aspectos: biología de la

especie con que se está trabajando, prácticas de manejo y capacitación y

actualización en relación a prácticas de bioseguridad. Asimismo, actividades como

la interacción positiva con los animales y la ejecución de movimientos predecibles,

lentos y suaves con el fin de no alterar la rutina de los animales, constituyen

puntos importantes a tener en cuenta.38

38

RODRÍGUEZ, Jesús M. Animales de laboratorio: Manipulación, inmovilización, identificación y

sexado. Departamento de Ciencias Básicas, Facultad de Salud, Universidad Industrial de

Santander. Bucaramanga, 2011.

Page 54: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

40

4.4.1 Técnicas de manipulación comúnmente utilizadas en el ratón, Mus

musculus. 38 39

4.4.1.1 Para retirarlos de la jaula.

Imagen 4. Cómo retirar los ratones de la jaula.

Fuente: Rodríguez 2011.

4.4.1.2 Para sujetarlos e inmovilizarlos.

Fuente: Rodríguez 2011.

39

BUERGE, Thomas. WEISS, Tilla. Chapter 31: Handling and Restraint. Basel, Switzerland:

Elsevier, 2004. ISBN 0-1233-6425-6.

Imagen 5. Cómo sujetar los ratones e inmovilizarlos.

Page 55: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

41

4.4.2 Técnicas de manipulación comúnmente utilizadas en la rata, Rattus

norvegicus.38 39

4.4.2.1 Para retirarla de la jaula.

Fuente: Rodríguez 2011.

4.4.2.2 Para sujetarla e inmovilizarla.

Fuente: Rodríguez 2011.

Imagen 6. Cómo retirar las ratas de la jaula.

Imagen 7. Cómo sujetar e inmovilizar las ratas.

Page 56: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

42

4.4.3 Técnicas de sexaje.

- Distancia ano-genital (Aprox. el doble en el macho que en la hembra)

- Bolsa escrotal en los machos.

- Presencia del canal inguinal en los machos (dificulta la observación de los

testículos).

- Presencia de las líneas mamarias en las hembras.

- Presencia de una fina línea depilada en la hembra.

Fuente: Rodríguez 2011.

4.4.4 Métodos de identificación.

A continuación se mostrarán los diferentes métodos permitidos para la

identificación y marcación de los animales. En este caso es importante elegir el

método que más le convenga al investigador o productor, sin que éste afecte de

forma significativa el bienestar de los animales.

Imagen 8. Técnicas de sexaje.

Page 57: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

43

4.4.4.1 Métodos temporales. Este tipo de marcaje se utiliza cuando se requiere

dar una identificación temporal a los animales, asimismo pueden ser usados en

animales que no poseen un alto valor genético y son usualmente destinados al

sacrificio. Las siguientes imágenes demuestran los lugares en donde usualmente

los animales son marcados cuando se usan dichos materiales.

4.4.4.1.1 Marcadores indelebles o con ácido pícrico.

Imagen 94. Marcación con marcadores indelebles.

Fuente: Rodríguez 2011.

4.4.4.2 Métodos permanentes. Este tipo de marcaje es utilizado cuando los

animales ya sea poseen una valiosa carga genética, hacen parte de procesos

investigativos o simplemente se necesiten identificar las cepas con el fin de no

hacer cruzamientos entre una misma línea.

Page 58: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

44

4.4.4.2.1 Marcación en las orejas.

Fuente: Rodríguez 2011.

4.4.4.2.2 Colocación de caravanas plásticas o metálicas.

Fuente: Rodríguez 2011.

Imagen 10. Marcado de orejas.

Imagen 11. Caravanas plásticas o metálicas.

Page 59: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

45

4.4.4.2.3 Tatuado.

Fuente: Rodríguez 2011.

4.4.4.2.4 Implante subcutáneo con microchips (para ratones y ratas de más

de 21 días de edad).

Fuente: Rodríguez 2011.

Imagen 13. Implante subcutáneo con microchip.

Imagen 12. Método de tatuaje en roedores.

Page 60: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

46

4.5 EUTANASIA.

La palabra Eutanasia se deriva de los términos griegos eu que significa ―bueno‖ y

thanatos que significa ―muerte‖. Según el documento publicado por la Asociación

Americana de Médicos Veterinarios (AVMA por sus siglas en inglés) ―Guidelines

for the Euthanasia of Animals‖31, la eutanasia es definida como ―el acto de finalizar

con la vida de un individuo animal, dando uso a métodos que reduzcan o eliminen

el estrés y el dolor. Teniendo en cuenta que una buena muerte es equivalente a la

terminación de manera humana de la vida de un animal‖.

A pesar que legalmente el Médico Veterinario es el único profesional capacitado y

autorizado para ejecutar una eutanasia, en el caso de los animales de producción,

éste procedimiento puede ser llevado a cabo por operarios previamente

capacitados y con experiencia, proceso realizado bajo la estricta supervisión del

Veterinario.40 Existen ciertos factores que el Veterinario o el operario deben

considerar antes de llevar a cabo aquel procedimiento, entre los cuales se

encuentran: la determinación de la necesidad y por ende el beneficio que trae

dicho sacrificio, posesión y disposición de los materiales necesarios para ejecutar

el procedimiento y la puesta en práctica de técnicas que induzcan la muerte de

manera rápida, indolora y pertinente, con el fin de no causar daño innecesario.41

Con respecto a la eutanasia de animales de laboratorio, existen consideraciones a

tener en cuenta a fin de escoger la técnica adecuada. Dichas consideraciones

40

TAYLOR, Gale. ANDERSON, Lynn. BLAKE, David. DAHM, Lynn. et al. Education and Training

in the Care and Use of Laboratory Animals: A Guide for Developing Institutional Programs.

Washington D.C: National Academy Press, 1991. ISBN: 0-309-57463-3, 152 pages, 8.5 x 11.

41 CARDOZO, Carmen A. OSORIO, Afife M. Aspectos técnicos y éticos en el cuidado y uso de

modelos animales en investigación. (en línea). <

https://umshare.miami.edu/web/wda/ethics/PABI_Agendas/colombia/Modules/Module14487.pdf

> (citado el 10 de febrero de 2014).

Page 61: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

47

radican principalmente en la finalidad por la cual el animal será sacrificado, ya que

si el método escogido no es el indicado, es posible afectar negativamente las

características metabólicas e histológicas del animal, y por lo tanto el fin al que se

tenga destinado.42

A continuación se describirán los métodos aceptados y aceptados con condiciones

usados para el sacrifico de los animales de laboratorio.43 Es importante recalcar

que no todos los métodos presentes en la siguiente descripción son los adecuados

para el sacrificio de animales criados para consumo, por lo tanto a pesar de que

se hace necesario su conocimiento general, en el capítulo 5. Diseño de la

estructura del Bioterio, se hablará acerca de la técnica de elección que se tendría

en cuenta en la presente propuesta.

4.5.1 Métodos aceptados.

4.5.1.1 Agentes no inhalables.

4.5.1.1.1 Barbitúricos y derivados del ácido barbitúrico: Los barbitúricos

inyectables actúan rápido y suavemente en el momento de llevar el animal a la

inconsciencia. Se recomienda altamente el uso del método intravenoso, siendo el

42

CORNELL UNIVERSITY, INSTITUTIONAL ANIMAL CARE AND USE COMMITTE. ACUP

513.02 Rodent Husbandry and Breeding. (en línea)

<http://www.research.cornell.edu/care/documents/ACUPs/ACUP513.pdf> (citado el 30 de abril

del 2014).

43 ASOCIACIÓN AMERICANA DE MÉDICOS VETERINARIOS (AVMA por sus siglas en inglés)

―Guidelines for the Euthanasia of Animals: 2013 Edition (8).

Page 62: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

48

método intraperitoneal el más práctico, sin embargo el más asociado con dolor44

(aunque actualmente no sea posible medirlo). La dosis para la eutanasia

corresponde tres veces más la dosis anestésica. El pentobarbital es el de mayor

uso debido a su larga vida y rapidez de acción.

4.5.1.1.2 Combinación de barbitúricos inyectables: Los barbitúricos inyectables

son usualmente usados en combinación con anestésicos locales y anticonvulsivos.

Sin embargo, una adecuada dosis del barbitúrico es lo más importante en dichas

combinaciones.

4.5.1.1.3 Combinación de agentes disociativos: Dosis letales de agentes

disociativos como Ketamina, son comúnmente utilizados en el laboratorio. En

algunas especies la Ketamina sola puede inducir la estimulación, más que la

sedación y pérdida de conciencia. En roedores consientes, la Ketamina y cualquier

agente disociativo debe ser utilizado con un agonista de receptores alfa

adrenérgicos como la Xilacina o benzodiacepinas como el Diazepam45.

4.5.2 Métodos aceptados con condiciones

4.5.2.1 Agentes inhalables.

44

SVENDSEN O, KOK L, LAURITZEN B. Nociception after intraperitoneal injection of a sodium

pentobarbitone formulation with and without lidocaine in rats quantified by expression of

neuronal c-fos in the spinal cord— a preliminary study. Lab Anim2007; 41:197–203.

45 Vaupel DB, McCoun D, Cone EJ. Phencyclidine analogs and precursors: rotarod and lethal

dose studies in the mouse. J PharmacolExpTher 1984; 230:20–27.

Page 63: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

49

4.5.2.1.1 Anestésicos inhalados: Isoflurano, sevoflurano o desflurano con o sin

óxido nítrico (óxido nítrico no debe ser utilizado solo) son aceptados bajo

condiciones para la eutanasia de roedores de laboratorio. Éstos agentes pueden

ser útiles cuando la contención física del animal sea difícil o no sea práctica. En el

caso en que se utilicen como único agente, los animales deben ser expuestos por

tiempos prolongados con el fin de asegurar su muerte, y los agentes deben ser

suministrados con uso de vaporizador o en una cámara de anestesia (open-drop

technique).46 Así mismo se recomienda que el procedimiento sea ejecutado en

grupos pequeños de animales compatibles. La muerte del animal debe ser

confirmada por medio de un examen físico completo.47

4.5.2.1.2 Dióxido de carbono (CO2): El dióxido de carbono con o sin pre

medicación de anestésicos inhalables es aceptado bajo condiciones para la

eutanasia de pequeños roedores. CO2 comprimido en cilindros es la fuente que se

recomienda con el fin de regular el flujo de gas. Un caudal de flujo óptimo debe

desplazarse en un 10% a 30% por volumen de la cámara/minuto.48 Es inaceptable

el pre llenado de las cámaras. Si la eutanasia no se puede llevar a cabo en la jaula

original del animal, las cámaras que se tengan para este fin deben ser limpiadas

antes y después de cada uso. La muerte del animal debe ser confirmada por un

examen clínico exhaustivo. Si el animal no se encuentra muerto, se debe adicionar

inmediatamente otro método de eutanasia. No debe ser combinado el O2 con CO2

46

Brunson DB. Pharmacology of inhalation anesthetics. In: Kohn DF, Wixson SK, White WJ, et al,

eds. Anesthesia and analgesia in laboratory animals. San Diego: Academic Press, 1997; 32–

33.

47 Garnett N. PHS policy on humane care and use of laboratory animals clarification regarding use

of carbon dioxide for euthanasia of small laboratory animals. Release date: July 17, 2002.

Available at: grants.nih.gov/grants/guide/notice-files/NOTOD- 02-062.html. Accessed Dec 14,

2010.

48 Hornett TD, Haynes AP. Comparison of carbon dioxide/air mixture and nitrogen/air mixture for

the euthanasia of rodents: design of a system for inhalation euthanasia. AnimTechnol

1984;35:93–99.

Page 64: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

50

al momento de la eutanasia pues puede dificultar la determinación de un estado

de inconsciencia y muerte del animal.49

4.5.2.1.3 Monóxido de carbono: A pesar de que su uso no es común, es posible

su administración cuando las condiciones de uso y efectividad son cumplidas.

4.5.2.2 Agentes no inhalables.

4.5.2.2.1 Tribomoetanol: A pesar de su inviable uso debido al bajo grado

comercial y farmacéutico50. Es un anestésico comúnmente utilizado en roedores.

Sin embargo su uso es controversial debido a la producción de efectos

secundarios (peritonitis y muerte). Tribomoetanol es aceptable bajo condiciones

como método de eutanasia cuando se ha preparado, almacenado y administrado

con las dosis correctas.

4.5.2.2.2 Etanol: Se ha sugerido que la inyección intraperitoneal de etanol al 70%

puede ser un método de eutanasia apropiado cuando métodos físicos no son

deseados u otros métodos no se encuentran disponibles.51 Ratones inyectados

con 0.5 ml de etanol al 70% demuestran una pérdida gradual del control de la

musculatura, coma y muerte en 2 a 4 minutos.52 A pesar de que el etanol es

utilizado bajo condiciones en la producción de anticuerpos en ratones, se

recomienda el uso de otros métodos.

49

HEWETT TA, KOVACS MS, ARTWOHL JE, et al. A comparison of euthanasia methods in rats,

using carbon dioxide in prefilled and fixed flow-rate filled chambers.Lab AnimSci 1993; 43:579–

582.

50 UNITED STATES PHARMACOPEIA. (en línea) < http://www.usp.org/> (citado el día 25 de julio

del 2014).

51 LORD R. Humane killing. Nature 1991; 350:456.

52 LORD R. Use of ethanol for euthanasia of mice. Aust Vet J 1989; 66:268.

Page 65: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

51

4.5.2.3 Métodos físicos.

4.5.2.3.1 Dislocación cervical: Método comúnmente utilizado en el laboratorio.

Se requiere tanto equipo especializado, como el transporte del animal al lugar en

donde se efectuará el sacrificio. Su alto uso se debe a que produce animales no

contaminados con agentes químicos. La pérdida de la función cortical por medio

de la dislocación cervical es rápida y ocurre entre 5 a 10 segundos.53 Es una

técnica aceptada bajo condiciones para ratones y ratas con pesos menores de 200

gr. El personal debe ser previamente entrenado utilizando animales muertos o

anestesiados.

4.5.2.3.2 Decapitación: Su uso se debe a que produce ratones y ratas no

contaminadas con agentes químicos. La pérdida de la función cortical ocurre entre

5 a 30 segundos. Guillotinas especializadas para roedores están disponibles en el

mercado. Éstas deben mantenerse limpias y las hojas de metal debidamente

afiladas. El personal debe ser previamente entrenado en animales anestesiados o

muertos.

4.5.2.3.3 Haz enfocado, irradiación de microondas: Se debe utilizar una

máquina especializada en eutanasia de animales. Es el método de elección

cuando la fijación inmediata de metabolitos en el cerebro es requerida para fines

de estudios.

53

CARTNER SC, BARLOW SC, NESS TJ. Loss of cortical function in mice after decapitation,

cervical dislocation, potassium chloride injection, and CO2 inhalation. Comp Med 2007;

57:570–573.

Page 66: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

52

4.6 ENFERMEDADES ZOONÓTICAS.

El término zoonosis, fue creado por Virchow en el siglo XIX a partir de dos

palabras griegas zoon: animal y nosos: enfermedad, si bien etimológicamente se

traduciría como "enfermedad de los animales" se consideraban a las zoonosis

como aquellas enfermedades que sufre el hombre debidas al contacto con los

animales. Así, la Organización Mundial de la Salud (OMS) desde 1959 definió

dicho término como "Enfermedades e infecciones que se transmiten naturalmente

de los animales vertebrados al hombre y viceversa".54 En esta definición oficial

habría que añadir el término de infestación, puesto que las zoonosis se basan

fundamentalmente en el estudio de agentes infecciosos y también parasitarios.55

Un número importante de enfermedades infecciosas se clasifican como zoonosis,

debido a que los animales constituyen su reservorio natural, éstas pueden llegar a

tener altas tasas de incidencia causando una importante morbilidad y mortalidad.

Existen dos grupos de zoonosis, en el primero, los animales juegan un papel

fundamental en el mantenimiento de la infección en la naturaleza y la transmiten al

hombre, quien es un huésped accidental y en el segundo, el hombre y los

animales generalmente se infectan de la misma fuente: suelo, agua, animales

invertebrados y plantas. En este caso, si bien los animales no desempeñan un

papel esencial en el ciclo vital del microorganismo, pueden contribuir a la

distribución y transmisión de las infecciones.56

54

ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD, OMS. (en línea) <

http://www.paho.org/panaftosa/index.php?option=com_content&view=article&id=137&Itemid=2

33 > (citado el 25 de julio del 2014). 55

BENCOMO, Laura M. ALCALDE, José C. ÁLVAREZ, Ernesto. FONTE, Nohary. RAMÍREZ,

Taimara. Manual de zoonosis de animales de laboratorios. En: Veterinaria.org La web de los

veterinarios < http://www.veterinaria.org> (citado el 15 de abril del 2014).

56 NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES. Companion guide to infectious diseases of mice and

rats. Committee on Infectious Diseases of Mice and Rats, Institute of Laboratory Animal

Page 67: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

53

La aparición de nuevas enfermedades zoonóticas está íntimamente ligada a los

avances logrados en las investigaciones biomédicas; de este modo, enfermedades

que hasta hace poco eran desconocidas hoy representan un serio problema para

la Salud Pública: un ejemplo de ello es el Síndrome Pulmonar por Hantavirus

(SPH).57 58 La emergencia de estas nuevas enfermedades humanas alertan sobre

la probable introducción de agentes infecciosos, a través de sus reservorios,

desde el ámbito natural a sitios de mayor presencia humana, y está asociada con

factores demográficos y cambios en el comportamiento humano (migraciones

poblacionales, déficit de infraestructura básica y cambios en la estructura

demográfica de las poblaciones).

En el caso de los animales de laboratorio es primordial tener en cuenta que el

contacto directo con animales infectados y el manejo de sus utensilios (jaulas,

viruta, etc.) representa un peligro y facilita la transmisión de dichas enfermedades,

por lo tanto correctas prácticas de manejo, mediante la implementación de

parámetros de bioseguridad son necesarias.31

A continuación la Tabla 6. mostrará las enfermedades zoonóticas más comunes

transmitidas por roedores.

Resources, Commission on Life Sciences, National Research Council. Washington D.C:

National academy press, 1991. ISBN: 0-309-58270-9, 108 pages, 6 x 9. 57

BAKER, David G. Natural Pathogens of Laboratory Mice, Rats, and Rabbits and Their Effects

on Research. En: Clinical microbiology reviews. p. 231±266 Vol. 11, No. 2 , 1998.

58 ENFERMEDADES EN ANIMALES DE LABORATORIO. (en línea) < box.jisko.net/d/237c0918 >

(citado el 10 de abril del 2014).

Page 68: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

54

Tabla 6. Enfermedades más comunes transmitidas por roedores.

Fuente: CALDERÓN, G. Zoonosis transmitidas por roedores. (en línea) <

http://www.fumigacionycontrol.com.ar/plagas/plagas09.pdf) (consultada el día 25 de julio del 2014).

Page 69: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

55

4.7 ASPECTOS ÉTICOS EN EL CUIDADO Y USO DE ANIMALES DE

LABORATORIO.

Si bien existen diferentes marcos que legislan y por ende sirven como referentes

para mejorar el uso y cuidado de los animales sometidos a experimentaciones,

existen también principios que regulan los aspectos éticos de tales prácticas

(considerados como de ejecución obligatoria), y asimismo, conceptos que evalúan

el bienestar de los animales cuando se encuentran en cualquier tipo de

confinamiento. Con respecto a los marcos legisladores se habla de los Principios

Éticos del Consejo Internacional de Organizaciones Médicas (CIOMS) para

Investigación Biomédica en Animales y los Principios de Reemplazo, Reducción y

Refinamiento (más conocidos como las 3R's). De acuerdo a los conceptos

evaluadores del bienestar de animales se habla de "Las cinco libertades"59, el

"Concepto del deber de cuidado"60 y "El concepto de la vida que vale la pena

vivir"61.

En cuanto al CIOMS es importante tener en cuenta que si bien afirma que para

promover el avance del conocimiento, la protección de la salud y/o bienestar de

los hombres y los animales, se requieren experimentaciones con animales,

promulga once principios que se basan en las siguientes premisas: provisión de

justificación de uso de los animales debidamente argumentada y puesta en

59

FARM ANIMAL WELFARE COUNCIL. Five Freedoms. (en línea) <

http://www.fawc.org.uk/freedoms.htm> (consultado el día 27 de julio del 2014).

60 MULDOON. J, WILLIAMS. J, LAWRENCE. A, LAKESTANI. N, CURRIE. C. Promoting a ‗duty

of care‘ towards animals among children and young people. (en línea) <

http://www.cahru.org/content/04-publications/04-reports/defra-yr-1-report-sept-09.pdf> (citado el

27 de julio del 2014).

61 WATHES. C. Lives worth living?. (en línea) < http://www.fawc.co.uk/pdf/vetrecord-100410.pdf>

(citado el 27 de julio del 2014).

Page 70: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

56

práctica tanto de controles estrictos de los experimentos, como de protocolos con

altos niveles de excelencia garantizando el bienestar de los animales.62

De acuerdo a las 3 R's, es importante destacar que si bien datan del año 1959

cuando Russell y Burch63 las desarrollaron en su libro "'The Principles of Humane

Experimental Techniques"64, hoy en día siguen en vigencia, no solo porque sirven

como complemento a los principios propuestos por CIOMS, en cuanto a reforzar y

mejorar el cuidado general y uso de los animales durante las experimentaciones,

también porque son un punto clave al servir como marco para alcanzar el objetivo

de desarrollar estrategias que permitan la experimentación con humanos. El

concepto de las 3 R's promueve el hecho de Reemplazar en lo posible el uso de

animales por el uso de técnicas alternativas, Reducir al mínimo el número de

animales utilizados en un experimento (obteniendo la información necesaria del

mismo número de animales) y por último, Refinar las técnicas y protocolos

llevados a cabo en los experimentos, asimismo, el manejo para con los animales,

asegurando que su bienestar sea afectado en lo más mínimo.65

62

BANKOWSKI. Z, HOWARD-JONES. N. International Guiding Principles for Biomedical

Research Involving Animals. CIOMS, 1985. 28p. ISBN 9290360194.

63 REPLACEMENT, REDUCTION AND REFINEMENT, GOOD ANIMAL PRACTICE IN

SCIENCE. Three Rs Microsite: About the Three Rs. (en línea) <

http://3rs.ccac.ca/en/about/three-rs.html> (citado el 27 de julio del 2014).

64 RUSSELL. W.M.S, BURCH. R.L. The Principles of Humane Experimental Technique.(en línea)

< http://altweb.jhsph.edu/pubs/books/humane_exp/het-toc> (citado el día 27 de julio del 2014). 65

UNDERSTANDING ANIMAL RESEARCH. Animal Welfare and the three Rs: Replacement,

Refinement and Reduction. (en línea) <

http://www.understandinganimalresearch.org.uk/assets/document/AC139C41-B7DD-B46C-

8D05FE15E5C4B61D/05%20The%20Three%20R's%20for%20web1.pdf> (citado el día 27 de

julio del 2014).

Page 71: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

57

Con respecto a los conceptos evaluadores del bienestar de animales en

confinamiento, es importante destacar que "Las cinco libertades"66 y el "Concepto

del deber de cuidado"67 serían los mas pertinentes a ser utilizados en este caso,

puesto que el tercero "El concepto de la vida que vale la pena vivir"68, no se podría

aplicar al tratarse de animales dedicados únicamente al sacrificio.

El concepto de las cinco libertades creado por el "Farm Animal Welfare Counsil"

en los años setenta, fue desarrollado con el fin de definir más que estándares,

estados ideales en que los animales deberían estar. 66 En este caso las libertades

de: tener hambre y sed, dolor y enfermedad, miedo, malestar y estrés, y la libertad

a poder expresar un comportamiento natural, si bien han servido como marco de

referencia para el análisis del bienestar de los animales y por ende el

mejoramiento de sus condiciones, fue considerado limitante al no poder ser

aplicado en todos los escenarios. Para lo cual se creó el " Concepto del deber de

cuidado"69, que obliga a proveer cuidado y responsabilidad legal a la persona o

entidad que lo posea, sin importar el porqué se tiene el animal, si se es o no

dueño, el propósito de éste o el tiempo que se posee.

66

FARM ANIMAL WELFARE COUNCIL. Five Freedoms. (en línea) <

http://www.fawc.org.uk/freedoms.htm> (consultado el día 27 de julio del 2014).

67 MULDOON. J, WILLIAMS. J, LAWRENCE. A, LAKESTANI. N, CURRIE. C. Promoting a ‗duty

of care‘ towards animals among children and young people. (en línea) <

http://www.cahru.org/content/04-publications/04-reports/defra-yr-1-report-sept-09.pdf> (citado el

27 de julio del 2014).

68 WATHES. C. Lives worth living?. (en línea) < http://www.fawc.co.uk/pdf/vetrecord-100410.pdf>

(citado el 27 de julio del 2014).

69 MULDOON. J, WILLIAMS. J, LAWRENCE. A, LAKESTANI. N, CURRIE. C. Promoting a ‗duty

of care‘ towards animals among children and young people. (en línea) <

http://www.cahru.org/content/04-publications/04-reports/defra-yr-1-report-sept-09.pdf> (citado el

27 de julio del 2014).

Page 72: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

58

5. MATERIALES Y METODOLOGÍA

5.1 UBICACIÓN.

La propuesta del proyecto se desarrolló con el fin de ser llevada a cabo en el

santuario de animales exóticos Wildlife Waystation (WWS), ubicado en los

territorios del Bosque Nacional de Los Ángeles, California, en los Estados Unidos

de América, en la dirección 14831 Little Tujunga Canyon Road, Lake View

Terrace, California, 91342.

Imagen 14: Ubicación del WWS. Vista satelital.

Fuente: Google maps. (en línea) < https://maps.google.com/> (consultado el 27 de julio del 2014).

Page 73: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

59

Imagen 15: Ubicación del WWS. Mapa.

Fuente: Google maps. (en línea) < https://maps.google.com/> (consultado el 27 de julio del 2014).

5.2 MATERIALES.

A continuación, se enlistan los materiales que fueron empleados durante la

ejecución del presente trabajo (Ver Tabla 7).

Tabla 7: Materiales requeridos para la elaboración del proyecto.

ETAPA DEL PROYECTO

MATERIALES

USOS

Etapa diagnóstica.

- Matriz DOFA.

Realizar el diagnóstico de

la empresa.

Page 74: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

60

- Bases de datos

financieras del WWS.

Conocer los gastos en que

incurre la empresa para

alimentación de los

animales.

- Recurso humano.

Indagar punto de vista de

directivas con respecto al

proyecto.

- Computador e

internet.

Almacenar datos

recogidos.

Iniciar búsqueda sobre

proyectos similares.

Etapa de elaboración de la

propuesta.

- Libros e internet.

Consecución de

información referente a

normatividad, gestión y

administración de bioterios

y manejo de los animales.

- Recurso humano

Expertos en diferentes

áreas de conocimiento en

cuanto al manejo de

bioterios.

- Cámara.

Identificación de la

locación del bioterio.

- Empresa Home

Depot.

Cotización de materiales.

Etapa de evaluación de la

factibilidad del proyecto.

- Excel.

Elaboración de tablas de

costos.

- Recurso humano.

Asesoría en elaboración

de costos e interpretación

de resultados.

.

Fuente: Álvarez 2014.

Page 75: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

61

5.3 METODOLOGÍA.

El proyecto se basó en una investigación cualitativa de tipo proyectiva, la cual se

fundamenta en la identificación de una necesidad por medio de un proceso

diagnóstico, posteriormente proponiendo una solución, para así lograr el

cubrimiento de dicha necesidad.70

El proceso diagnóstico se llevó a cabo haciendo uso de la matriz DOFA, el cual,

mediante la medición de las Debilidades, Oportunidades, Fortalezas y Amenazas

del Santuario arrojó resultados necesarios para la formulación de la idea del

proyecto. Posteriormente, con el fin de determinar la viabilidad del proyecto se

realizó un proceso indagatorio, en el que se justificó mediante el uso de datos

provistos por las directivas del Santuario, la necesidad de la creación de la

propuesta. A continuación se llevó a cabo el proceso de elaboración, en donde se

estructuró todo lo relacionado con la organización, manejo y gestión del bioterio.

Por último se evaluó y determinó la factibilidad, comparando los costos

predeterminados del proyecto, con los gastos anuales de compra de roedores por

parte del Santuario y evaluando las utilidades.

70

BARRERA, JH. La investigación proyectiva. Blog sobre metodología de la investigación, la

epistemología y la didáctica desde una comprensión holística de la ciencia. Powered by

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Page 76: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

62

6. ESTRUCTURA DEL BIOTERIO.

6.1 ESPECIES A MANEJAR Y SUS CARACTERÍSTICAS PRODUCTIVAS.

6.1.1 Clasificación genética de roedores de laboratorio.

Existen tres categorías genéticas que clasifican los grupos más importantes de

roedores de laboratorio empleados para la investigación, las cuales son: los

consanguíneos (endocriados), caracterizados por presentar uniformidad genética

que sobrepasa el 98% de los alelos en condición homocigota (siendo el resultado

de 20 generaciones de apareamientos consecutivos entre hermanos con

hermanas), los F1 híbridos, caracterizados por ser el producto entre dos líneas

consanguíneas los cuales adquieren heterocigosidad en sus loci y características

de uniformidad (a pesar de no ser homocigotos como sus progenitores) 71 72 y por

último, los no consanguíneos (exocriados), caracterizados por poseer un limitado

coeficiente de consanguinidad <1% por generación y un alto grado de variabilidad

genética, al provenir de apareamientos entre individuos de diferentes grupos

genéticos.73

71 RODRIGUEZ - RAMIREZ. N. Monitoreo Genético y Fenotípico en Ratas no Consanguíneas

Sprague-Dawley Producidas en el Bioterio de la Universidad de Los Andes. Mérida, 2008, 84h.

Trabajo de grado (Licenciada en Biología). Universidad de los Andes. Facultad de Ciencias.

Departamento de Biología.

72 CHARLES RIVER. (en línea) <http://www.criver.com/find-a-model?animal_type=Mice>

(consultado el día 27 de julio del 2014).

73 KRINK, Georg J. The Laboratory Rat: Physiology of Reproduction, Reproduction and Breeding.

Stein, Switzerland: Academic Press, 2000. ISBN: 978-0-12-426400-7. p. 148 - 149.

Page 77: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

63

Con respecto a la última categoría, es importante recalcar que debido a poseer

una alta variabilidad genética (si bien la completa heterocigosidad jamás sería

alcanzada debido a la imposición de una selección de parejas de tipo

inconsciente74), se generan animales con importantes características de tipo

reproductivas, a diferencia de las dos primeras categorías. Razón por la cual el

modelo de animales exocriados será tenido en cuenta en la elaboración del

presente proyecto.

6.1.2 Proveniencia de la colonia de los roedores del proyecto.

Es de vital importancia que en el momento de escoger el proveedor de la colonia

de animales se tengan en cuenta aquellos criadores que ofrezcan no solo altos

niveles de heterogeneidad en los reproductores, sino también: trazabilidad,

animales saludables (demostrado por medio de reportes de exámenes realizados)

y calidad en cuanto a la atención al cliente se refiere.75

Para el presente proyecto se propone como proveedor principal el Laboratorio

Charles River, empresa de tipo mundial, pionera en el desarrollo de técnicas para

la crianza de animales de laboratorio enfocados a ser utilizados en los diferentes

campos de la investigación y la producción76. Con respecto a los animales

requeridos, se recomiendan específicamente las colonias de ratones y ratas

clasificadas como multipropósito: CD-1® IGS Mouse y CD® IGS Rat

respectivamente.

74 WHITE. WJ, LEE CS. The development and maintenance of the CRL:CD®(SD)IGS BR Rat

Breeding System. En: Matsuzawa T, Inoue H, editors. Biological Reference Data on CD(SD)IGS

Rats. Yokohama, Japan: CD(SD)IGS Study Group; 1998. pp. 8–14.

75 THE UNIVERSITY OF TOLEDO. Rodent Breeding Colony Guidelines. (en línea) <

https://www.utoledo.edu/depts/dlar/manualsandguidelines.html> (citado el 30 de abril del 2014).

Page 78: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

64

6.1.2.1 Ratón (Mus musculus) Colonia CD-1® IGS.

Fuente: CHARLES RIVER. (en línea) <http://www.criver.com/products-services/basic-research/find-

a-model/cd-1-mouse> (consultado el 29 de julio del 2014).

Colonia proveniente de un grupo original de ratones importados de Suiza a los

Estados Unidos en el año 1926 por la Dra. Clara Lynch del Instituto Rockefeller. El

grupo de progenitores se encontraba conformado por dos (2) machos y siete (7)

hembras albino, derivadas de una cepa exógena en el laboratorio del Dr. De

Coulon, ubicado en el ―Centre Anticancéreux Romand‖ en la ciudad de Lausanne,

Suiza.

Utilizada como modelo multipropósito, en casos de pruebas de seguridad y

eficacia, envejecimiento, seudoembarazos, modelo quirúrgico, entre otros.

Para reportes de salud: Ver Anexo C.

Imagen 16. Ratón CD-1® IGS Mouse.

Page 79: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

65

6.1.2.2 Rata (Rattus norvegicus) Colonia CD® IGS.

Fuente: CHARLES RIVER. (en línea) <http://www.criver.com/products-services/basic-research/find-

a-model/cd-igs-rat> (consultado el día 29 de julio del 2014).

Colonia proveniente de una pareja de híbridos de la raza Wistar desarrollada por

Robert W. Dawley en el año 1925. Fue adquirida por los Laboratorios Charles

River en el año 1950. En 1991, ocho (8) colonias de esta raza fueron

seleccionadas para hacer parte de la formación de colonias para el programa IGS

(International Genetic Standardization Program, IGS por sus siglas en inglés). Es

considerada como una raza de animales IGS, producidas bajo los estándares del

Sistema Internacional de Estandarización de Genética desarrollados por los

laboratorios Charles River.

Utilizada como modelo multipropósito, en caso de pruebas de seguridad y eficacia,

envejecimiento, nutrición, obesidad inducida por dieta, oncología y constituye un

modelo para cirugías.

Para reportes de salud: Ver Anexo D.

Imagen 17. Rata CD® IGS Rat.

Page 80: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

66

6.1.3 Sistema de cría y esquemas reproductivos.

6.1.3.1 Criterios para la producción y mantenimiento de colonias no

consanguíneas.

Debido a la falta de homogeneidad genética de los animales exocriados, éstos

dejan de llamarse "cepas" o "líneas" (como en el caso de los animales

endocriados) para ser llamados "grupos" o "colonias". 77 Para la producción de

dichos animales, puesto que no están definidos genéticamente, en aras de que no

pasen el 1% de endocría por generación, se establecieron los siguientes

requisitos: que se cuente con variadas parejas reproductoras, que todos los

animales aptos para la reproducción tengan igual oportunidad de participar en el

programa de cría, y por último, que no exista un programa de cría estructurado o

algún criterio de selección que pueda inhibir el proceso azaroso del sistema.

Teniendo en cuenta y con el fin de cumplir los requisitos mencionados

anteriormente, existen varios sistemas de cría para animales exocriados, los

cuales se utilizan dependiendo de la preferencia del productor y de la magnitud de

su colonia. Entre éstos se encuentran: el sistema IGS, desarrollado por los

laboratorios Charles River basado en apareamientos de tipo aleatorio entre

colonias ubicadas en diferentes sedes a nivel mundial, exclusivo para ser usado

en grandes colonias; el sistema Poiley, el cual por medio de cruces en rotación

intenta copiar los apareamientos al azar que se generan en las poblaciones

naturales, ajustado para colonias medianas a grandes; y el sistema Han, en el que

77

JIMÉNEZ. R. Estandarización genética. En: Estandarización genética, transgenización y

clonación. Departamento de Genética. Facultad de Ciencias. Universidad de Granada. p. 2-24.

Page 81: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

67

se intercalan una o dos veces las generaciones de apareamientos, apropiado para

colonias pequeñas.78

Debido a que la colonia desarrollada en el presente proyecto se espera tenga una

magnitud mediana, el sistema de cría que se llevará a cabo será el desarrollado

por Poiley.79

6.1.3.2 Sistema de cría Poiley.

El sistema se basa en que cada macho reproductor contribuye con un macho y

cada hembra con una hembra para la formación de la próxima generación. Se

pasan los machos de una unidad y las hembras de otra distinta a una tercera de

forma rotatoria (ver Imagen 18), con el fin de reemplazar la colonia matriz por su

progenies. Dicho ejercicio se debe repetir sistemáticamente.

Es importante tener en cuenta que en este caso individuos con antepasados

procedentes de una misma unidad no llegarán a cruzarse hasta varias

generaciones después80 (pudiendo en algunos casos llegar a pasar hasta

veinticinco años antes de que esto ocurra81).

78

BENAVIDES. F, GUENET. JL. Manual de Genética de Roedores de Laboratorio: Principios

Básicos y Aplicaciones. Madrid: Universidad de Alcalá de Henares, Servicio de Publicaciones,

2003. 312 p.

79 POILEY. S.M. A systematic method of breeder rotation for non-inbreed laboratory animals

colonies. Proceedings of the Animal Care Panel 10: 159-166, 1960.

80 JIMÉNEZ. R. Estandarización genética. En: Estandarización genética, transgenización y

clonación. Departamento de Genética. Facultad de Ciencias. Universidad de Granada. p. 2-24.

81 FUENTES M y F. RAMÍREZ. 1997. Correlación entre el peso corporal y el peso de los órganos

en ratones NMRI/UCLA de 3 a 9 semanas de edad. Acta Científica Venezolana. XLVII.

Valencia. Venezuela. 48 (1): 208.

Page 82: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

68

Imagen 18. Sistema rotacional Poiley.

Fuente: Rodríguez 2014.

6.1.3.3 Esquemas reproductivos.

6.1.3.3.1 Cantidad de animales requeridos para el proyecto.

Con el fin de determinar la cantidad de grupos parentales de ratas y ratones que

se requieren para formar la colonia de roedores del bioterio, es importante basarse

en los requerimientos alimenticios semanales de los animales habitantes del

Santuario. Dichos si bien se encuentran expuestos en la Tabla 1. Cálculo de

ratones y ratas utilizados para alimentación en la actualidad, serán brevemente

descritos a continuación.

Cantidad de ratas requeridas a la semana.

- Ratas Medianas: 33 ratas (6 semanas de edad, aprox. 85 - 174.99 gr).

- Ratas Grandes: 27 ratas (8 semanas de edad, aprox. 175 - 274.99 gr).

- Ratas Extra Grande: 15 ratas (10 semanas de edad, aprox. 275 - 374.99 gr).

Page 83: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

69

Cantidad de ratones requeridos a la semana.

- Ratones Destetos: 2 ratones (4 semanas de edad, aprox. 13 - 17.99 gr).

- Ratones Adultos: 100 ratones (6 semanas de edad, aprox. 18 - 24.99 gr).

6.1.3.3.2 Esquema reproductivo: Ratón (Mus musculus) CD-1® IGS.

Teniendo en cuenta los parámetros reproductivos de los ratones de laboratorio

mencionados en la Tabla 3. Características de las especies, la siguiente tabla fue

propuesta con el fin dar un mejor entendimiento al esquema reproductivo que se

llevaría a cabo en el presente proyecto.

Page 84: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

70

Tabla 8. Esquema reproductivo del Ratón (Mus musculus).

Fuente: Álvarez 2014.

Page 85: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

71

Inicialmente, con el fin de calcular la cantidad de animales necesaria con la cual se

suplirían las demandas alimenticias del Santuario y determinar los esquemas

productivos del bioterio, se tuvieron en cuenta parámetros como: porcentaje de

fertilidad de las hembras, promedio de crías producido por parto, porcentaje de

mortalidad de los ratones a la primera semana 82 (ver Tabla 8), asimismo,

requerimiento semanal de ratones (ver Tabla 1).

La presente propuesta productiva de ratones proyecta contar con una colonia

formada por un total de ochenta y cuatro (84) hembras y veinticuatro (24) machos.

Las hembras, estarían divididas en siete (7) grupos (de a doce (12) hembras por

grupo), cada uno compuesto por seis (6) subgrupos (de a dos (2) hembras por

subgrupo). Asimismo, los machos, estarían divididos en cuatro (4) grupos de a

seis (6) animales en cada uno, teniendo en cuenta que dos de éstos

corresponderían a los reproductores principales, y los dos restantes a los de

reserva. (ver Imagen 19).

Imagen 19. Organización de la colonia de ratones.

Fuente: Álvarez 2014.

82

ENTREVISTA con Emily Giroux, Technical Services, Sr. Supervisor, Marketing Call Center,

Charles River Laboratories. Los Ángeles, California. 24 de Marzo del 2014.

Page 86: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

72

Con respecto al flujo de producción, es esencial tener en cuenta que con el fin de

lograr una producción de animales constante, éste daría inicio en la semana No 1

con el primer grupo de hembras (grupo azul, ver Tabla 8), el cual sería cubierto

durante una semana (con el fin de lograr un control de nacimientos, detectando

problemas reproductivos) por el grupo No 1 de machos reproductores principales

(ver Imagen 19), teniendo en cuenta una relación hembra/macho de 2:1. Al cabo

de cumplida dicha semana, las hembras cubiertas pasarían a periodo de gestación

y lactancia, mientras los machos continuarían el cubrimiento de los grupos de

hembras restantes. En este caso cabe resaltar que los primeros tres (3) grupos de

hembras serían cubiertos por el grupo No 1 de machos (grupo gris, ver Tabla 8) y

los cuatro (4) restantes por el No 2 (grupo verde, ver Tabla 8) (de manera que

exista mayor variedad genética y se permita un respectivo descanso a los

machos), teniendo cada grupo un subgrupo de machos de reemplazo en caso de

ser necesitado. Ciclo que se cumpliría al cabo de siete (7) semanas (con el fin de

proporcionar un adecuado descanso a las hembras), momento en el cual el grupo

de hembras No 1 reiniciaría labores.

Es importante recalcar que el alojamiento de hembras en parejas se realiza con el

fin tanto de ahorrar espacio, como de potencializar la supervivencia de las

camadas, al permitir la crianza y cuidado de las crías en grupo. 82 83 Al término de

la lactancia, aproximadamente 21 días después del parto, sería necesaria la

separación de la progenie en jaulas diferentes, con el fin de evitar la

sobrepoblación y los problemas que ésta genera, teniendo en cuenta aspectos

como la diferenciación de sexo y la capacidad de alojamiento de animales en la

nueva jaula84.

83

ENTREVISTA con Jesús Rodríguez. Bioterio Experimental (Departamento de Ciencias Básicas

- Escuela de Medicina), Asesor interno Comité de Ética (Facultad de Salud, Universidad

Industrial de Santander). Bucaramanga, Colombia. 24 de Mayo del 2014.

84 DAVIS, Karen. DAVISSON, Muriel. FANCHER, Karen. GREENE, Michael. Breeding Strategies

for Maintaining Colonies of Laboratory Mice. Jackson Laboratory, 2009.

Page 87: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

73

En general, cada grupo parental de ratones produciría un total de seis (6)

generaciones de progenie (si bien éstos pueden llegar a tener una vida sexual

activa hasta los catorce meses de edad, es importante tener en cuenta que en

condiciones de cautiverio y de producción constante, el número seis (6)

constituiría el límite recomendado de camadas producidas85, esto con el fin de

evitar su desgaste, respetando así su bienestar 86), para después ser sacrificados

y reemplazados por las crías provenientes de la segunda generación (ver Tabla

8). Proceso que transcurriría durante un periodo aproximado de 42 semanas

(aprox 10.5 meses). Al cabo de dicho periodo, teniendo en cuenta los nuevos

reproductores (los cuales provienen de la segunda generación producida por los

primeros parentales) se llevaría a cabo el Sistema rotacional de cría Poiley

(descrito en el subcapítulo 6.1.3.2 Sistema de cría Poiley). Dicho procedimiento

sería repetido ininterrumpidamente.

De acuerdo a los parámetros productivos de la colonia de ratones, teniendo en

cuenta lo descrito en la Tabla 8 y los requerimientos alimenticios del Santuario, se

esperaría que cada grupo de hembras tenga una producción semanal de 105

ratones, de los cuales se sacrificarían dos (2) al cumplir las cuatro (4) semanas de

edad (aprox. 13 - 17.99 gr de peso vivo) y cien (100) al cumplir las seis (6)

semanas de edad (aprox. 18 - 24.99 gr de peso vivo), teniendo un sobrante

aproximado de tres (3) animales por semana (lo cual podría variar de acuerdo al

aumento de crías por parto).

Es esencial tener en cuenta, con respecto al manejo de los animales, que tras

haber expuesto la hembra al macho predeterminado, se debe evitar

85

BENAVIDES, Fernando. GUÉNET, Jean-Louis. Manual de Genética de Roedores de

Laboratorio, Principios y Aplicaciones: Biología y manejo reproductivo del ratón. Capítulo II.

Smithville: Universidad de Alcalá de Henares y la SECAL, 2003. p. 59 - 81.

86 Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Eighth edition. National research council.

Printed in the United States of America by the National Academies Press.2002.

Page 88: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

74

completamente la exposición de ésta a machos ajenos o sus secreciones, esto

por lo menos por los primeros cinco (5) días de la gestación, ya que debido a la

presencia del efecto Bruce, existe la posibilidad de que la preñez sea interrumpida

prematuramente.

6.1.3.3.3 Esquema reproductivo: Rata (Rattus norvegicus) CD® IGS.

Teniendo en cuenta los parámetros reproductivos de los ratones de laboratorio

mencionados en la Tabla 3. Características de las especies, la siguiente tabla fue

propuesta con el fin dar un mejor entendimiento al esquema reproductivo que se

llevaría a cabo en el presente proyecto.

Page 89: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

75

Tabla 9. Esquema reproductivo de la Rata (Rattus norvegicus).

Fuente: Álvarez 2014.

Page 90: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

76

Inicialmente, con el fin de calcular la cantidad de animales necesaria con la cual se

suplirían las demandas alimenticias del Santuario y determinar los esquemas

productivos del bioterio, se tuvieron en cuenta parámetros como: porcentaje de

fertilidad de las hembras, promedio de crías producido por parto, porcentaje de

mortalidad de las ratas a la primera semana 87 (ver Tabla 9), asimismo,

requerimiento semanal de ratas (ver Tabla 1).

La presente propuesta productiva de ratas proyecta contar con una colonia

formada por un total de sesenta y tres (63) hembras y veinte (20) machos. Las

hembras, estarían divididas en siete (7) grupos (de a nueve (9) hembras por

grupo), cada uno compuesto por cinco (5) subgrupos (de a dos (2) y a una (1)

hembra por subgrupo). Asimismo, los machos, estarían divididos en cuatro (4)

grupos de a cinco (5) animales en cada uno, teniendo en cuenta que dos de éstos

corresponderían a los reproductores principales, y los dos restantes a los de

reserva. (ver Imagen 20).

Imagen 20. Organización de la colonia de ratas.

Fuente: Álvarez 2014.

87

ENTREVISTA con Emily Giroux, Technical Services, Sr. Supervisor, Marketing Call Center,

Charles River Laboratories. Los Ángeles, California. 24 de Marzo del 2014.

Page 91: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

77

Con respecto al flujo de producción, si bien éste sería el mismo que el que se

llevaría a cabo con los ratones (ver subcapítulo 6.1.3.3.2 Esquema reproductivo:

Ratón (Mus musculus) CD-1® IGS), existiría un cambio en cuanto al manejo

reproductivo de los animales, el cual consistiría en ubicar previamente el macho

en la jaula predestinada durante dos (2) días previos a la llegada de la hembra,

con el fin de favorecer el acoplamiento e interés sexual entre las parejas.83

Es importante recalcar que el alojamiento de hembras se realizaría en parejas,

esto con el fin tanto de ahorrar espacio, como de potencializar la supervivencia de

las camadas, al permitir la crianza y cuidado de las crías en grupo. 82 88 Asimismo,

al término de la lactancia, aproximadamente 21 días después del parto, sería

necesaria la separación de la progenie en jaulas diferentes, con el fin de evitar la

sobrepoblación y los problemas que ésta genera, teniendo en cuenta aspectos

como la diferenciación de sexo y la capacidad de alojamiento de animales en la

nueva jaula89.

En general, cada grupo parental de ratas produciría un total de seis (6)

generaciones de progenie (si bien éstos pueden llegar a tener una vida sexual

activa hasta los catorce meses de edad, es importante tener en cuenta que en

condiciones de cautiverio y de producción constante, el número seis (6)

constituiría el límite recomendado de camadas producidas90, esto con el fin de

88

ENTREVISTA con Jesús Rodríguez. Bioterio Experimental (Departamento de Ciencias Básicas

- Escuela de Medicina), Asesor interno Comité de Ética (Facultad de Salud, Universidad

Industrial de Santander). Bucaramanga, Colombia. 24 de Mayo del 2014.

89 DAVIS, Karen. DAVISSON, Muriel. FANCHER, Karen. GREENE, Michael. Breeding Strategies

for Maintaining Colonies of Laboratory Mice. Jackson Laboratory, 2009. 90

BENAVIDES, Fernando. GUÉNET, Jean-Louis. Manual de Genética de Roedores de

Laboratorio, Principios y Aplicaciones: Biología y manejo reproductivo del ratón. Capítulo II.

Smithville: Universidad de Alcalá de Henares y la SECAL, 2003. p. 59 - 81.

Page 92: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

78

evitar su desgaste, respetando así su bienestar 91), para después ser sacrificados

y reemplazados por las crías provenientes de la segunda generación (ver Tabla

9). Proceso que transcurriría durante un periodo aproximado de 42 semanas

(aprox 10.5 meses). Al cabo de dicho periodo, teniendo en cuenta los nuevos

reproductores (los cuales provienen de la segunda generación producida por los

primeros parentales) se llevaría a cabo el Sistema rotacional de cría Poiley

(descrito en el subcapítulo 6.1.3.2 Sistema de cría Poiley). Dicho procedimiento

sería repetido ininterrumpidamente.

De acuerdo a los parámetros productivos de la colonia de ratas, teniendo en

cuenta lo descrito en la Tabla 9 y los requerimientos alimenticios del Santuario, se

esperaría que cada grupo de hembras tenga una producción semanal de 79 ratas,

de los cuales se sacrificarían treinta y tres (33) al cumplir las seis (6) semanas de

edad (aprox. 85 - 174.99 gr de peso vivo), veintisiete (27) al cumplir las ocho (8)

semanas de edad (aprox. 175 - 274.99 gr de peso vivo) y quince (15) al cumplir

las diez (10) semanas de edad (aprox. 275 - 374.99 gr de peso vivo) teniendo un

sobrante aproximado de cuatro (4) animales por semana (lo cual podría variar de

acuerdo al aumento de crías por parto).

91

Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Eighth edition. National research council.

Printed in the United States of America by the National Academies Press.2002.

Page 93: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

79

6.2 PARÁMETROS FÍSICOS Y MEDIOAMBIENTALES DEL BIOTERIO.

6.2.1 Ubicación de las instalaciones.

Teniendo en cuenta que el Santuario se encuentra ubicado en un cañón dentro de

los dominios del Bosque Nacional de Los Ángeles y que por ende no posee

acceso al agua (se compra diariamente) y la electricidad es limitada, se hizo

necesario identificar la zona adecuada en los predios del Wildlife Waystation, que

cumpla con dichos requisitos básicos.

Fuente: Álvarez 2014.

La Imagen 21 corresponde a la entrada del Back 40, sección ubicada dentro del

área cuatro. Se propone ésta zona para albergar el bioterio, no solo porque cuenta

con los servicios mencionados anteriormente (agua y electricidad, ver Imagen 23),

sino también porque su localización en este lugar facilitaría el acceso al personal

encargado del bioterio, asimismo, posee las dimensiones necesarias para alojar la

infraestructura requerida y se encuentra en un ambiente en donde los sonidos de

alta frecuencia son escasos y por ende la ruptura de la armonía del entorno no se

vería muy afectada.

Imagen 21. Back 40.

Page 94: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

80

Fuente: Parasite control chart Wildlife Waystation.

Fuente: Álvarez 2014.

Imagen 22. Area 4.

Imagen 23. Tubería para el agua presente en el Back 40.

Page 95: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

81

6.2.2 Planta física.

6.2.2.1 Reciclaje de edificios.

Con el fin de lograr la reducción de costos de construcción del bioterio es

importante que el proceso de planeación sea eficiente, de manera que se

maximice el aprovechamiento de los recursos que se tienen y los que se

obtendrán. Para esto, Mashi (2010) propone entre sus lineamientos para la

construcción de bioterios, que el reciclaje de instalaciones e infraestructura

constituye un punto crucial cuando de disminuir gastos se trata. Sin embargo,

señala también que dichas instalaciones deben igualmente poseer las siguientes

características: flexibilidad, sencillez en el mantenimiento, posibilidades de

expansión, satisfacción de los investigadores, los técnicos encargados y los

animales.

Siguiendo lo estipulado anteriormente, se realizó una inspección general de las

estructuras que el Santuario posee, con el fin de evaluar el mejor sitio en que se

podría ubicar el bioterio. De esta revisión se concluyó que la mayoría de éstas no

tienen un uso definido en la actualidad, por lo tanto la idea de potencializar su uso,

se considera como pertinente. Entre algunas de las estructuras que se evaluaron y

por ende se consideraban mas pertinentes, se encuentran los diversos

compartimentos de carga para tractomulas (actualmente usados como bodegas)

ubicados en la zona denominada ―third plateau‖ como edificación para el bioterio.

A continuación se expondrán evidencias de la estructura.

Page 96: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

82

Fuente: Álvarez 2014.

En este caso se tuvo en cuenta la inclusión de la presente edificación a la

propuesta ya que por su naturaleza sencilla como contenedor de carga, no solo

permite realizar diferentes modificaciones que se acomoden a su nuevo uso, sino

también posee suficiente espacio para alojar tanto los animales como los insumos

necesarios, asimismo, tiene la posibilidad de ser movilizado y adecuado al lugar

en donde se desee ubicar. Por otro lado, al no poseer ventanas y tener acceso a

servicios básicos debido a la zona en donde se encontraría (agua y luz) cumple

con algunos de los lineamientos básicos para la construcción de bioterios de

producción, ―Construcción de la planta física y alojamiento de los animales‖. En la

Tabla 10 se podrán evidenciar las medidas reales de la infraestructura propuesta.

Imágenes 24 y 25. Compartimento de carga para Tractomula.

Page 97: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

83

Tabla 10. Medidas del contenedor de carga.

Fuente: Álvarez 2014.

6.2.2.2 Adecuaciones de las instalaciones.

Si bien es cierto que el contenedor de carga propuesto anteriormente como

edificación para el bioterio cumple con algunos de los requerimientos básicos, con

el fin de hacerlo ciento por ciento útil para el presente proyecto, será necesario

tener en cuenta la realización de ciertas adecuaciones. Dichas modificaciones

serán expuestas en las siguientes secciones.

6.2.2.2.1 Pisos y paredes.

En cuanto al estado actual de los pisos y paredes de la estructura, se encontraron

diversos problemas de humedad y vencimiento de las maderas que los conforman,

debido a su antigüedad y los variados usos a los que han sido sometidos, éste fue

el común denominador en la mayoría de contenedores de carga pertenecientes al

Santuario. Ver Imágenes 26 y 27.

MEDIDAS

www.frontrangecontainers.com

Alto: 2.80 m (9 ft 2‖).

Ancho: 2.38 m (7 ft 8‖).

Largo: 13.53 m (44 ft 4‖)

Page 98: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

84

Fuente: Álvarez 2014.

Teniendo en cuenta los parámetros mínimos requeridos para la construcción de la

infraestructura de bioterios de producción, los cuales recalcan la necesidad de

contar con pisos y paredes que permitan la limpieza y desinfección constante, se

hizo necesaria la planeación de una propuesta con el fin de llegar a modificar

dichas falencias presentadas.

Al haber evaluado los diferentes materiales disponibles en el mercado para

cumplir la función que se requeriría, se llegó a la conclusión que los paneles de

plástico podrían ser utilizados en este fin, debido a su capacidad de repeler el

agua. Más específicamente, se propone el modelo número # 63003 de paneles de

plástico, ofrecidos por la empresa Home Depot.

Fuente: HOME DEPOT. (en línea) <http://www.homedepot.com/s/plastic%2520panels?NCNI-5>

(consultado el día 10 de abril del 2014).

Imágenes 26 y 27. Estado de los pisos y paredes.

Imagen 28. Modelo de panel de plástico y medidas por unidad.

Page 99: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

85

A continuación se evidenciará la cantidad total de paneles que se requerirían, de

acuerdo al espacio total a cubrir.

Tabla 11. Cantidad de paneles requeridos de acuerdo al área total de la estructura.

Fuente: Álvarez 2014.

6.2.2.2.2 Acceso al bioterio.

Un punto muy importante que se debe considerar en el momento de realizar la

planeación y construcción de las instalaciones, comprende a la facilidad y eficacia

de la accesibilidad del sitio. Esto debido a que no solo aporta positivamente al

buen desarrollo de las operaciones diarias llevadas a cabo, sino en situaciones de

emergencia, para la entrada y salida del personal tanto técnico como de socorro.

La ilustración presentada a continuación, representa el modelo del compartimento

de carga que se tomó como ejemplo para el desarrollo de la propuesta, en donde

se permite evidenciar la falta de un correcto sistema de acceso al sitio. A pesar de

que no todos los compartimentos carezcan de dicho acceso, se propone su

mejoramiento con el fin de obtener los resultados esperados del proyecto.

Estructuras (área total)

Cantidad de paneles

- Paredes (960.48 ft2) # 30.

- Pisos (346.32 ft2) # 11.

- Techos (346.32 ft2) # 11.

TOTAL # 52.

Page 100: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

86

Fuente: Álvarez 2014.

Con el fin de mejorar la situación de la accesibilidad al sitio se propone la

adquisición de un modelo de escaleras portátiles que contengan pasamanos, de

manera que sea posible su traslado en caso que necesite y brinde estabilidad a

las personas que ingresen al bioterio, evitando accidentes indeseables.

El modelo de escaleras presentado a continuación fabricado por la empresa de

escaleras ―STARR‖, se encuentra elaborado en aluminio lo cual hace el producto

más resistente y duradero, asimismo presenta las siguientes características:

contiene materiales antideslizantes, pasamanos suaves y resistentes, no es

necesario su mantenimiento, al igual contiene materiales no corrosivos ni

combustibles.

Fuente: GREAT LAKE. (en línea) <http://greatlakesentry.com/aluminum-stairs> (consultado el día

10 de abril del 2014).

Imagen 29. Acceso actual al compartimento de carga.

Imagen 30. Modelo de escaleras de aluminio.

Page 101: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

87

6.2.2.2.3 Electricidad y sistemas de ventilación.

De acuerdo a este tema es importante resaltar que el compartimento de carga no

cuenta con un sistema básico de electricidad o de ventilación, por lo tanto se

requiere la instalación de los materiales necesarios para proveer los servicios.

Tabla 12. Materiales necesarios para las instalaciones eléctricas y sistemas

de ventilación.

MATERIALES REQUERIDOS PARA LA INSTALACIÓN DE LA ELECTRICIDAD Y

SISTEMAS DE VENTILACIÓN

Lámparas fluorescentes B40 # 5 de

75w, 2.50m (8ft) de largo.

Con el fin de brindar luz a la estructura se

planea ubicar las cinco (5) lámparas de

forma lineal, en la parte media del techo

del compartimento de carga.

Estructuras # 5.

Bombillos # 10.

Fuente: http://www.homedepot.com/

Cable eléctrico 12-2 Romex # 30.48m

(100ft).

Fuente: http://www.homedepot.com/

Page 102: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

88

Panel para interruptores 50 amp # 1.

Fuente: http://www.homedepot.com/

Interruptores automáticos 20 amp # 2.

Fuente: http://www.homedepot.com/

Interruptor # 1.

Fuente: http://www.homedepot.com/

Cajas de metal para interruptores # 5.

Fuente: http:// www.homedepot.com/

Tomacorrientes de metal # 4.

Fuente: http://www.homedepot.com/

Sistema de ventilación y extracción de

aire # 1.***

Heavy Duty Type Exhaust Fan Efficient

Industrial Ventilation.

- Blade material: Stainless steel.

Fuente: http://www.alibaba.com/

Page 103: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

89

- Model number: JLF(c)-1530(56").

- Air volume: 55800m3/hr.

- Voltage: 380V.

- Speed: 325rpm.

- Diameter blades: 1400mm.

- Size: 1530*1530*400mm.

Sistema de aire acondicionado y

calefacción # 1.

Se recomiendausar el modelo ―GE 12,000

BTU Window Air Conditioner with Heat‖.

Fuente: http:// www.homedepot.com/

Fuente: Álvarez 2014.

***

Page 104: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

90

6.2.2.2.4 Instalaciones para el agua y sistemas de drenaje.

Al igual que en el tema de la electricidad, a pesar de que el sitio en donde el

compartimento de carga se encontraría posea el servicio del agua, éste no cuenta

con la infraestructura necesaria para obtener su acceso.

La siguiente tabla muestra los materiales que se requerirían para lograr la

instalación del servicio del agua en el bioterio.

Tabla 13. Materiales necesarios para la instalación del agua y sistemas de

drenaje.

MATERIALES REQUERIDOS PARA LA INSTALACIÓN DEL AGUA Y SISTEMAS DE

DRENAJE.

Lavamanos de acero inoxidable # 1.

Fuente: http:// www.homedepot.com

Tubo de PVC de 1.27cm (1/2”) de

diámetro, 3.04m (10ft) de longitud # 4.

Fuente: http:// www.homedepot.com

Guarniciones de PVC 1.27cm (1/2”) de

diámetro # 10.

Fuente: http:// www.homedepot.com

Page 105: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

91

Fuente: Álvarez 2014.

*** Es importante tener en cuenta que antes de dar inicio a la obra del sistema de

drenaje (en inglés, "Onsite Wastewater Treatment System" OWTS) se debe

Grifo de acero inoxidable # 1.

Fuente: http:// www.homedepot.com

Tubo para el drenaje del lavamanos

# 6.09mt (20ft).

Fuente: http:// www.homedepot,com

Tubo PVC para drenaje 5.08cm (2”) de

diámetro # @ 9.14mt (30ft).

Fuente: http:// www.homedepot.com

Campo de infiltración para tanque

séptico # 1 (ver Anexo E)***

- Caja de distribución #1.

- Pala #1.

- Tubo PVC perforado de 10.16 cm de

diámetro (4‖) # @ 18.28 mt (60 ft).

- Guarniciones para tubo PVC.

- Grava o gravilla.

- Paja.

- Tierra (topsoil).

Fuente: http://www.centraljerseyseptic.com/

Page 106: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

92

obtener previamente un permiso de construcción por parte del Departamento de

Salud Pública del Condado de Los Ángeles. Para la consecución de éste, basarse

en la guía ―Application Procedures for Approval of an Onsite Wastewater

Treatment System (OWTS)‖, desarrollada en el mes de enero del año 2000, la

cual provee los procedimientos a seguir para la obtención del permiso, basándose

en los requerimientos expuestos en los capítulos 11 y 28 del Código del Condado

de Los Ángeles.

6.2.3 Modelo estructura física del bioterio.

La Imagen 31 muestra un boceto diseñado para ejemplarizar la organización de la

estructura física del bioterio. Si bien se cuenta con un espacio abierto, pero

relativamente angosto, se manejarán tres zonas: mantenimiento, ratones y ratas.

Las zonas estarán divididas por medio de puertas deslizantes, esto con el fin de

poner en funcionamiento las barreras sanitarias; favoreciendo la protección de los

animales (en cuanto a ruidos y posible presencia indeseada), la separación de

espacios de acuerdo a las especies y el manejo de actividades con movimientos

unidireccionales.

Page 107: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

93

Imagen 31: Estructura física del bioterio.

Fuente: Álvarez 2014.

6.2.4 Alojamiento de los animales.

6.2.4.1 Cantidad y tipo de jaulas requeridas.

Con el fin de calcular la cantidad de jaulas que se utilizarían por colonia de ratones

y ratas, se tuvieron en cuenta los parámetros expuestos en la Imagen 3. Medidas

mínimas de animales por jaula, propuestos por la Guía para el cuidado y uso de

animales de laboratorio (Committee on Care and Use of Laboratory Animals of the

Institute of Laboratory Animals Resources). Asimismo, para tener una idea acerca

del tipo de modelo de jaulas que se podría usar para alojar a los roedores, se

evaluaron parámetros como: facilidad de manejo, capacidad de manejo de altas

Page 108: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

94

densidades de animales y simplicidad en la fabricación y mantenimiento.92 A

continuación en los siguientes subcapítulos se presentarán los modelos de jaulas

que reúnen las especificaciones expuestas anteriormente y la cantidad de éstas

que se necesitarían.

6.2.4.1.1 Ratón (Mus musculus) Cepa CD-1® IGS.

- Modelo de alojamiento para ratones recomendado.

El siguiente sistema de alojamiento para ratones corresponde al modelo ARS-

1050 ofrecido por la compañía ARS Caging. Es importante recalcar que a pesar de

que en la presente propuesta se recomiende su uso, dicho modelo de estanterías

podría variar si se encontrase algún otro con mejores características; precio,

estructura y función.

Fuente: ARS CAGING (en línea) <http://www.arscaging.com/ars1050.html> (citado el 20 de abril

del 2014).

92

CORNELL UNIVERSITY, INSTITUTIONAL ANIMAL CARE AND USE COMMITTE. ACUP

513.02 Rodent Husbandry and Breeding. (en línea)

<http://www.research.cornell.edu/care/documents/ACUPs/ACUP513.pdf> (citado el 30 de abril

del 2014).

Imagen 32. Modelo de alojamiento para ratones ARS-1050.

Page 109: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

95

El presente sistema de alojamiento ARS-1050 fue teniendo en cuenta debido a

que posee las siguientes características (ver Imagen 32):

- Medidas de las estanterías: Altura 1.27m (50‖), anchura 1.95m (77‖) y

profundidad 54.61cm (21.50‖).

- Medidas de las jaulas: Altura 8.89cm (3.5‖), anchura 24.13cm (9.5‖) y

profundidad 54.61cm (21.50‖).

- Posee diez (10) niveles.

- Ofrece 50 jaulas para los animales por estantería.

- Marco inferior posee cuatro (4) ruedas.

- Incluye sistema de comederos y bebederos automáticos.

Imagen 33. Detalles estructurales del modelo ARS-1050 y ARS-5032.

Fuente: ARS CAGING (en línea) <http://www.arscaging.com/ars1050.html> (citado el 20 de abril

del 2014).

Page 110: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

96

- Cantidad de jaulas y estanterías (racks) requeridas.

De acuerdo al espacio de cada jaula ofrecido por el modelo de estanterías para

ratones ARS-1050, que consta con un área total de 1317.73 cm2 (0.1317 m2), y

teniendo en cuenta las medidas mínimas de espacio por animal (77.4 cm2 para

animales de hasta 25g) provistas por la Guía para el cuidado y uso de animales de

laboratorio, se requeriría un total de sesenta y tres (63) jaulas, de las cuales

cuarenta y dos (42) alojarían los machos, hembras gestantes y crías lactantes, y

las veintiuno (21) restantes las crías destetadas (ver Tabla 14). Se calcula que

cada una alojaría aproximadamente quince (15) ratones (en el caso de las crías),

y/o una familia compuesta por dos hembras y sus crías en el caso de los

reproductores.

Tabla 14. Cantidad de jaulas y estanterías requeridas para ratones.

Fuente: Álvarez 2014.

Page 111: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

97

6.2.4.1.2 Rata (Rattus norvegicus) Cepa CD® IGS.

- Modelo de alojamiento para ratas recomendado.

El sistema de alojamiento para ratas descrito a continuación corresponde al

modelo ARS-5032 de la compañía ARS Caging. Es importante recalcar que a

pesar de que en la presente propuesta se recomiende su uso, dicho modelo de

estanterías podría variar si se encontrase algún otro con mejores características,

ya sea basadas en su precio, su estructura y función.

Fuente: ARS CAGING (en línea) <http://www.arscaging.com/ars1050.html> (citado el 20 de abril

del 2014).

El presente sistema de alojamiento ARS-5032 fue teniendo en cuenta debido a

que posee las siguientes características (ver Imagen 33 e Imagen 34):

- Medidas de las estanterías: Altura 2 m (78.75‖), anchura 1.41 m (55.75‖) y

profundidad 0.71 m (28‖).

- Medidas de las jaulas: Altura 13.97 cm (5.5‖), anchura 33.02 cm (13‖) y

profundidad 68.58cm (27‖).

- Posee ocho (8) niveles.

Imagen 34. Modelo de alojamiento para ratas ARS-5032.

Page 112: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

98

- Ofrece 32 jaulas para los animales por estantería.

- Marco inferior posee cuatro (4) ruedas.

- Incluye sistema de comederos y bebederos automáticos.

- Cantidad de jaulas y estanterías (racks) requeridas.

De acuerdo al espacio de cada jaula ofrecido por el modelo de estanterías para

ratas ARS-5032, que consta con un área total de 2,264.51 cm2 (0.2264 m2), y

teniendo en cuenta las medidas mínimas de espacio por animal (387 cm2 para

animales de hasta 400 g) provistas por la Guía para el cuidado y uso de animales

de laboratorio, se requeriría un total de noventa y dos (92) jaulas, de las cuales

treinta y dos (32) alojarían los machos, hembras gestantes y crías lactantes, y

sesenta y uno (61) restantes las crías destetadas (ver Tabla 15). Se calcula que

cada jaula alojaría aproximadamente seis (6) ratas adultas en el caso de las crías,

y/o una familia compuesta por una hembra, un macho y sus crías en el caso de los

reproductores.

Fuente: Álvarez 2014.

Tabla 15.Cantidad de jaulas y estanterías requeridas para ratas.

Page 113: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

99

6.2.5 Identificación y marcaje de los animales.

6.2.5.1 Identificación de los animales.

Uno de los factores críticos que influye en el mantenimiento de las colonias

exógenas de roedores en bioterios destinados a la producción, consiste en la

eficacia del método de identificación de los animales. En la actualidad, la literatura

ofrece variadas técnicas las cuales son utilizadas de acuerdo a las preferencias

del productor, entre éstas se encuentran: el marcaje con métodos temporales

(marcadores indelebles o con ácido pícrico) y/o con métodos permanentes

(marcación por muescas en las orejas, colocación de caravanas plásticas o

metálicas, tatuado y/o implante subcutáneo con microchip) (Ver Capítulo 3.

Métodos de identificación).93

Teniendo en cuenta los requerimientos del presente proyecto y la necesidad que

la identificación de los animales sea tanto eficaz, como precisa, se propone que se

haga uso de un método permanente de marcaje, en este caso el marcaje por

muescas en las orejas, complementándolo con la toma y registro de datos, por

medio de la creación de tarjetas de identificación.

Con respecto al marcaje por muescas, éste fue el elegido ya al ser el método más

identificación más conocido y usado en ratones, si bien se caracteriza por ser un

método permanente que no tiene un mayor impacto en el bienestar de los

animales; no requiere el uso de agentes anestésicos, no necesita de

93

EXPOSICIÓN INFORMATIVA elaborada por Jesús M. Rodríguez H. Animales de laboratorio:

Manipulación, inmovilización, identificación y sexado. Departamento de Ciencias Básicas,

Facultad de Salud, Universidad Industrial de Santander. Bucaramanga, 2011.

Page 114: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

100

equipamiento sofisticado 94 y no pone en riesgo la salud de los animales

consumidores. A continuación en la Tabla 16 se hará una breve y concisa

descripción de la técnica.

Tabla 16. Técnica de marcado de orejas.

Fuente: Álvarez 2014.

94 MEMORIAS DE CURSO titulado Animal de experimentación como reactivo biológico en

investigación, diagnóstico y control de fármacos. Aspectos Generales de roedor de laboratorio

(especies, cepas, líneas): Sistemas de producción para mantenimiento de condición genética.

Ofrecido por Lic. Mariela Santos. Unidad de Reactivos y Biomodelos de Experimentación.

Facultad de Medicina. (en línea) <

http://www.urbe.fmed.edu.uy/cursos/animales_experimentacion/Roedores%20de%20laboratorio

.pdf> (citado el 11 de agosto del 2014).

Page 115: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

101

Por otro lado, con respecto a la toma y registro de datos, por medio de las tarjetas

de identificación, éstas que estarían adheridas a cada jaula, contendrían los datos

principales que permitirían al operador no solo identificar a los animales que se

alojan en ellas, sino el estado actualizado de los ciclos de rotación de los

reproductores. Asegurándose de esta manera que todos los animales que

componen la colonia sean tenidos en cuenta en el programa reproductivo.

6.2.5.1.1 Tarjetas de identificación.

Con respecto a las fichas de identificación, se propone que se manejen dos tipos.

El primero exclusivamente para los reproductores y el segundo para las crías. En

las imágenes a continuación se mostrarán los modelos desarrollados.

Fuente: Álvarez 2014.

Imagen 35. Tarjetas de identificación para reproductores.

Page 116: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

102

Fuente: Álvarez 2014.

De acuerdo al modo de uso, es esencial tener en cuenta las siguientes

recomendaciones:

- La cantidad de fichas a utilizar estaría directamente relacionado con el número

de jaulas que componen el bioterio. Éstas solo se renovarían en caso de

declararse inservibles.

- El tipo de ficha a utilizar dependerá del tipo de animal que se encuentre en

cada jaula, ya sea en el caso de los reproductores o las crías.

- Con el fin de economizar recursos, una vez impresa cada ficha, ésta se debe

plastificar, con el fin de prolongar su vida de uso.

Imagen 36. Tarjetas de identificación para crías.

Page 117: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

103

- Para la escritura sobre las fichas de identificación, se recomienda el uso de

marcadores permanentes. De manera que permita que la información sea

legible y no se borre fácilmente. Asimismo, en el momento del cambio de jaula

de los animales, la información necesaria debe permanecer y solo borrar la que

no lo es.

- Dichas fichas constituirían el único documento que debe adherirse a las jaulas.

En el caso de que haga falta información precisa, se recomienda la

actualización del modelo actual.

6.2.6 Registros generales de la colonia.

Como bien se dio a conocer en el subcapítulo anterior la importancia y necesidad

del uso de registros individuales por jaula. A continuación se propondrá el manejo

de un registro complementario, el cual si bien sería llevado exclusivamente por los

veterinarios encargados y les servirá para llevar un control general de actividades,

igualmente permitirá al personal del bioterio (actual y futuro) informarse acerca de

aspectos importantes que caracterizan la colonia, entre los cuales se encuentran:

la proveniencia de los animales, su edad y la frecuencia en que se llevarían a cabo

algunos procesos, entre otros.

A continuación las Imágenes 37 y 38 expondrán los modelos de registros de la

colonia.

Page 118: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

104

Fuente: Álvarez 2014.

Imagen 37. Registros generales de la colonia de ratones.

Page 119: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

105

Fuente: Álvarez 2014.

Imagen 38. Registros generales de la colonia de ratas.

Page 120: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

106

6.2.7 Requerimientos básicos de los animales.

6.2.7.1 Alimentación.

Para identificar el alimento más apropiado que contribuya al correcto desarrollo de

los roedores y la sostenibilidad de la producción, se tuvieron en cuenta dos

alternativas: la primera, basada en concentrados secos producidos especialmente

para ratas y ratones, la segunda, en concentrados para caninos bajos en proteínas

y grasas95.

Si bien en el caso de los bioterios de producción e investigación, con el fin de

reducir costos, se tienen en cuenta en ocasiones alternativas nutricionales

basadas en alimento para otras especies (ej. concentrado de caninos, enriquecido

con alimento de pollo de engorde83), que cuenten con composiciones de

ingredientes similares a los requerimientos dietarios de los roedores. En el

presente proyecto, se tendrán en cuenta las dietas fabricadas específicamente

para roedores, ya que no solo se componen por ingredientes de alta calidad,

supliendo las necesidades alimenticias de los animales en cualquier etapa de su

vida, sino, a nivel económico, su precio llega a ser similar y en ocasiones menor al

de la mayoría de marcas de concentrado para caninos posiblemente utilizadas

para éste fin ofrecidas en el mercado estadounidense. Esto, debido a que al ser

Estados Unidos el país productor de la mayoría de dichas dietas especializadas,

éstas tienden a ser más accesibles, cuando se comparan con el mismo producto

en algún otro país. (ver Tabla 17).

95

RATTITUDE. (en línea) < http://rattitude.com/articles/information/heathy-rat-diet/> (citado el 10

de Agosto del 2014).

Page 121: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

107

Tabla 17. Comparación de concentrados.

Fuente: Álvarez 2014.

Teniendo en cuenta lo anterior se llega a la conclusión que el modelo de

concentrado para roedores de nombre LabDiet ® (serial # 5001) producido por la

marca Purina® es el más apropiado en este preciso caso. (ver Anexo F).

Fuente: LabDiet (en línea) <www.labdiet.com> (citado el día 10 de enero del 2014).

Imagen 39. Modelo de concentrado # 5001

Page 122: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

108

6.2.7.1.1 Cantidad y manejo de la alimentación.

Los animales deberán recibir alimento en cantidad y calidad suficiente para cubrir

sus necesidades y así conservar la salud. El acceso a éste deberá ser libre y

suficiente (de acuerdo al número de animales que conformen cada jaula). Su

suministro deberá ser diario y renovación deberá ser diario. A continuación en la

Tabla 18 se dará un estimado de la cantidad total de alimento consumida

anualmente por los roedores del bioterio.

Fuente: Álvarez 2014.

De acuerdo al manejo, se debe tener en cuenta que cada ingreso de alimento a

las instalaciones deberá ser registrado, asegurándose de evitar el despilfarro

(priorizando el uso de los más antiguos). Los sacos en uso deberán ser

almacenados en contenedores de plástico cerrados y ubicados en plataformas que

Tabla 18. Cantidad aproximada de alimento consumido por año.

Page 123: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

109

permitan el aislamiento del piso. El cuarto en donde estarían los contenedores

deberá ser de un material que permita su limpieza y desinfección, igualmente éste

deberá ser ventilado y encontrarse a una temperatura promedio de 25 C (77°F)

con humedades relativas mayores a 60%. Por último, los contenedores no

deberán movilizarse a diferentes salas y deberán lavarse y sanearse

regularmente.

6.2.7.2 Agua.

Debido a que en la actualidad existe un protocolo establecido para el manejo y

tratamiento de las aguas ofrecidas a los mamíferos, reptiles y aves resistentes del

Santuario, no será necesario instaurar nuevos sistemas de procesamiento para el

agua de consumo de los roedores del bioterio.

6.2.7.3 Materiales para lecho o cama.

El ofrecimiento de materiales de cama de calidad a los roedores en estado de

confinamiento y/o cautiverio se considera necesario no solo por cuestiones

higiénicas (pues facilita la limpieza de los excrementos), sino también porque

contribuye al desarrollo normal del comportamiento propio de las especies, ya que

Page 124: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

110

permite que actividades naturales como la excavación se lleven a cabo y

comportamientos indeseables como la agresión se disminuyan.

De acuerdo a la cantidad de material de cama requerido, se debe tener en cuenta

que éste debe ser suficiente para cubrir la superficie entera del suelo de la jaula y

a su vez ocupe mínimo dos (2) centímetros de altura96. El monto total utilizado

mensualmente dependerá de factores tales como: la calidad y el tipo de sustrato

usado, el número de animales albergados por jaula y la frecuencia en que se

realicen labores de limpieza. Por otro lado, con respecto a su elección, es

importante saber que éste debe contar con las siguientes características: no ser

tóxico, libre de polvo, microbios, parásitos o contaminantes químicos, que se

encuentre conformado por grandes partículas (evitando la irritación de las

mucosas y vías aéreas de los animales), que sea altamente absorbente y permita

la reducción de los niveles de amoniaco, y por último, que sea económico, de fácil

consecución, almacenamiento, uso y desecho94.

Si bien es conocido que los materiales para cama provenientes de la madera han

sido usados extensamente a través de los años en los bioterios que albergan

roedores, e igualmente que son los sustratos de elección por parte de los

animales97, estudios recientes han demostrado que debido a componentes

naturales que algunas contienen; taninos, alcaloides, ligninos y resinas, su

acumulación puede producir afección en diferentes órganos de los roedores,

96

REINHARDT. V, REINHARDT. A. Variables, refinement and environmental enrichment for

Rodents and Rabbits kept in research institutions. 2005.

97 SHERWIN C. M. Observations on the prevalence of nest-building in non-breeding TO strain mice

and their use of two nesting materials. Division of Animal Health and Husbandry, Department of

Clinical Veterinary Science, University of Bristol, Langford House, Langford, Bristol BS187DU,

UK. 1997.

Page 125: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

111

provocando en ocasiones su muerte98. Por lo cual se recomienda el uso de

sustratos que reduzcan las posibilidades de que se presente dicho riesgo.

El presente proyecto pretende dar uso a un material, el cual, si bien fue

inicialmente desarrollado para servir como cama para caballos, debido a sus

excelentes resultados, su manejo fue adoptado para el mismo fin en los pequeños

mamíferos. Se trata del Hemp (fibra de cáñamo por su traducción al español), el

cual posee características que favorecen tanto el bienestar de los animales, como

la economía de la producción; ya que está compuesto de grandes partículas, es

libre de polvo, suave, tiene bajo nivel de palatabilidad, posee un alto porcentaje de

absorción (400% más comparado con viruta de madera y paja, 250% y 225%

respectivamente), alto control de olores, alto nivel de desintegración, requiere

menos espacio de almacenamiento y menos mano de obra, es económico cuando

se compara con los demás y además debido a su composición presenta un muy

bajo costo al desecharse99, pues al desintegrarse fácilmente podría ser arrojado

en la pila de compostaje del Santuario. Cualidades que se ven reflejadas no solo

en la necesidad de su uso en pequeñas cantidades, sino en el aumento en el

lapso de tiempo entre limpiezas y reemplazo total de las camas. (ver Anexo G).

98

BLOM H. J. VANTINTELEN G. VAN VORSTENBOSCH C. J. Preferences of mice and rats for

types of bedding material. Department of Laboratory Animal Science and Department of

Functional Morphology, Faculty of Veterinary Medicine, Utrecht University and Laboratory

Animals Centre, Agricultural University, Wageningen, The Netherlands. 1995.

99 HEMP TECHNOLOGIES GLOBAL HempBed Consumption Comparison Trial. (en línea) <

http://www.hemp-technologies.com/page27/styled-12/page20.html> (citado el día 10 de agosto

del 2014).

Page 126: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

112

Fuente: HEMP TECHNOLOGIES GLOBAL (en línea) < http://www.hemp-

technologies.com/page27/styled-12/page20.html> (citado el día 10 de agosto del 2014).

Fuente: Álvarez 2014.

Imagen 40. Fibra de Cáñamo (Hemp).

Tabla 19. Cantidad de cama (Hemp) requerido anualmente.

Page 127: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

113

Teniendo en cuenta un cambio semanal de camas, es posible deducir que

anualmente para los ratones se requerirían 8.09 pacas de material, y para las

ratas 20.32 (ver Tabla 19), teniendo un gasto total anual de USD $568.22. Es

importante denotar que a medida que se iría utilizando el sustrato, se evaluará su

eficiencia y por lo tanto los protocolos de uso podrían verse sujetos a

modificaciones.

6.2.7.4 Enriquecimiento ambiental.

Es importante tener en cuenta que en el momento en que un animal es extraído

y/o criado fuera de su ambiente natural y mantenido en condiciones en donde se

exponga a situaciones adversas provocadas por el ser humano, la presentación

del estrés se incrementa, produciendo así consecuencias negativas en su

bienestar general.100

El concepto de estrés fue inicialmente desarrollado por el fisiólogo Cannon en el

año 1929, refiriéndose a éste como ―una serie de cambios fisiológicos

relacionados con la actividad del sistema simpático y la glándula adrenal, los

cuales se producen en situaciones que requieren una respuesta de acción rápida

por parte del organismo‖. Posteriormente establecido por Selye (1960) al

describirlo como ―un conjunto de cambios fisiológicos y neurofisiológicos ocurridos

por diferentes estímulos externos o internos llamados estresores‖, aquellos

cambios que se producirían de una manera secuencial y con distintas

repercusiones sobre el organismo, en un proceso que Selye denominó "Síndrome

General de Adaptación, SGAD", el cual comprende los diferentes estados

fisiológicos por los que un organismo pasa, desde el primer momento en que se

100

BAUMANS, V. BRAIN, P.F. BRUGERE, H. CLAUSING, P. et al. Pain and Distress in

Laboratory Rodents and Lagomorphs. Londres: Royal Society Press of London, 1992.

Page 128: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

114

expone a agentes estresores, creando en primera estancia una reacción inmediata

de emergencia, pasando por el estado de resistencia, hasta llegar a la fase o

estado de agotamiento, en donde los mecanismos reguladores comienzan a fallar

ocasionando cambios degenerativos en los distintos órganos corporales.101

A raíz de lo anterior, se hace necesaria la evaluación del estado de bienestar

general de los animales que se encuentren en cautiverio, para lo cual, Calduch, en

su Curso de Formación de Personal Investigador Usuario de Animales de

Experimentación ofrecido a los estudiantes de la Universidad de Barcelona,

expresa que dicha evaluación se debe realizar teniendo en cuenta el

conocimiento de las necesidades fisiológicas y etológicas de los animales,

denotando la ausencia de indicadores de malestar, sufrimiento o precursores de

enfermedad.102

Uno de los principales factores que afectan el bienestar de un animal, consiste en

la imposibilidad de manifestación de pautas normales de conducta debido al hecho

de encontrarse en un ambiente diferente o inapropiado, lo cual finalmente se ha

demostrado que puede ser parcial o totalmente resuelto mediante el ofrecimiento

de las denominadas Técnicas de Enriquecimiento Ambiental.103 104

Enriquecer significa hacer que las cosas tengan sentido, The Shape of Enrichment

101

BAUMANS, V. BRAIN, P.F. BRUGERE, H. CLAUSING, P. et al. Pain and Distress in

Laboratory Rodents and Lagomorphs. Londres: Royal Society Press of London, 1992.

102 CALDUCH, Teresa R. Comportamiento y bienestar animal: homeostasis y estrés. Curso de

formación de personal investigador usuario de animales de experimentación. Universidad de

Barcelona.

103 REINHARDT, Viktor. REINHARDT, Annie. Variables, refinement and enviromental enrichment

for rodents and rabbits kept in research institutions. Washington D.C: Animal Welfare Institute,

2007. ISBN 0-938414-99-2.

104 CRUZ.J, GUTIÉRREZ. G. Avances en ciencias del comportamiento. Vol. 1. Laboratorios de

Psicología. Primera edición digital. Bogotá: septiembre 2005.

Page 129: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

115

(La forma del enriquecimiento), es una organización no gubernamental

especialmente dedicada a crear alternativas para mejorar ambientes de animales

cautivos. Éstos, describen el enriquecimiento ambiental (o comportamental) como

―la mejora de la calidad de vida de los animales en cautiverio, alterando su

ambiente o creando oportunidades de comportamiento‖. Se puede decir que el

enriquecimiento ambiental es lo que usted hace al ambiente y el enriquecimiento

comportamental es la respuesta animal o los resultados del cambio. El

enriquecimiento es una herramienta que se puede usar para dar oportunidad y

alternativas a los animales en cautiverio, la cual los motiva a mostrar los

comportamientos específicos de la especie y a que hagan uso de sus

adaptaciones para sobrevivir105, por lo tanto se busca que éste sea dinámico y

limitado solo por nuestra propia imaginación.

Cuando el enriquecimiento es efectivo se espera que provoque en el animal los

siguientes tipos de respuesta: aumento de la actividad general, incremento de la

actividad reproductiva, reducción del comportamiento estereotipado, reducción del

estrés, reducción de la agresión y la automutilación, y por último el desarrollo de

un comportamiento más normal de acuerdo a la especie.100

Teniendo en cuenta que en la presente propuesta se trabajaría con animales

confinados en un sistema de producción intensiva, el enriquecimiento de su

ambiente se haría más que necesario, en donde se buscaría tanto el incremento

del bienestar de los animales, como resultados productivos que beneficie el

proyecto. A continuación se describen algunas técnicas de enriquecimiento que

pueden ser utilizados.

105

CALDUCH, T. Comportamiento y bienestar animal: homeostasis y estrés. Curso de Formación

de Personal Investigador Usuario de Animales de Experimentación. Universitat de Barcelona.

Page 130: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

116

- Manejo de los animales:

Según Hirsjärvi y Junnila (1988) y Hirsjärvi y Valiaho (1995) en sus estudios con

ratas Wistar, demostraron que el contacto directo y constante manejo de los

animales por parte de los investigadores (cuando éste se realizaba

correctamente), ayudó a incrementar su bienestar general, viéndose reflejado en

su cambio positivo de conducta y reducción de estrés, esto evaluado por medio de

la disminución en la pérdida de excrementos y agresión al momento de la

manipulación, durante el desarrollo de actividades ligadas a procesos

investigativos, permitiendo así su correcto desarrollo.

A raíz de lo anterior, capacitaciones promoviendo el correcto manejo y

manipulación de los animales por parte del personal del bioterio se instaurarían,

de manera que se reduzcan tanto los accidentes que afecten al personal, como el

estrés de los animales.

- Alojamiento de roedores en grupos:

Teniendo en cuenta que tanto las ratas y ratones se caracterizan por ser animales

sociables, la autora propone su alojamiento en sistemas de grupos, de manera

que se permita la expresión de su comportamiento natural como ser social.106

106

TÁMARA, C. & GUTIÉRREZ, G. Problemas de Comportamiento en Animales de Laboratorio.

En: Problemas de comportamiento en animales de laboratorio. Vol. 1. Laboratorios de

Psicología. Primera edición digital. Bogotá: septiembre 2005.

Page 131: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

117

Fuente: En línea. <http://www.ucla.edu.ve/dveterin/bioterio/NMRI.jpg> (citado el 10 de enero del

2014).

- Artefactos ofrecidos:

A pesar de haber incluido en la presente propuesta jaulas con dimensiones

suficientes para albergar altas densidades de animales, la necesidad de contar

con artefactos artificiales que ofrezcan tanto protección como entretenimiento es

más que urgente. A continuación en la Tabla 20 se describirán algunos artefactos

que podrían ser utilizados para proveer dicha protección a los animales.

Tabla 20. Artefactos de enriquecimiento ambiental.

DESCRIPCIÓN

Pedazo de madera colgado en el techo de

la jaula usando un gancho de acero para

papeles.

Imagen 41. Alojamiento de roedores en grupos.

Page 132: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

118

Con el fin de aumentar el espacio en la

jaula, amarrar un tapabocas quirúrgico al

techo.

Ofrecimiento de implementos de cartón

para ser utilizados como escondederos.

Tiras de papel ofrecidas a las madres para

construir sus nidos.

Materiales de madera provistos para

promover el mordisqueo y que puedan ser

útiles como nidos.

Ofrecimiento de tubos de PVC

promoviendo la naturaleza curiosa de los

animales.

Ofrecimiento de ruedas para promover la

actividad física en los ratones.

Page 133: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

119

Imágenes: Reinhardt. V, Reinhardt. A. Variables, refinement and environmental enrichment for

Rodents and Rabbits kept in research institutions. 2005

6.3 ASPECTOS ADMINISTRATIVOS.

6.3.1 Entrenamiento del personal del bioterio.

Con el fin de lograr que los procesos y procedimientos llevados a cabo en el

bioterio se ejecuten de la manera más precisa y por ende se reduzca la presencia

de situaciones inesperadas, se propone que las siguientes recomendaciones

sean tenidas en cuenta en el momento de planear las actividades de

entrenamiento del personal operativo del bioterio.

6.3.1.1 Introducción al trabajo de Bioterista.

Inicialmente se debería realizar una capacitación introductoria por parte de los

Médicos Veterinarios encargados, dirigida al personal (fijo o temporal) responsable

del mantenimiento del bioterio. Allí se aclararían conceptos teóricos y prácticos

acerca de los bioterios de producción, asimismo, el propósito del funcionamiento

del presente bioterio, las funciones a desempeñar (de manera teórica y práctica) y

los riesgos potenciales a los que se exponen al llevarlas a cabo.

Una vez se tenga el personal necesario y se logre que cumpla alguno de los

requisitos necesarios (ver Tabla 21), se recomienda asimismo propender para que

éste adquiera la certificación de "Asistente Técnico de Laboratorio Animal (ALAT,

Page 134: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

120

por sus siglas en inglés)" ofrecida por "The American Association for Laboratory

Animal Science, AALAS". 107

Tabla 21: Requisitos para obtener el título de ALAT.

Fuente: The American Association for Laboratory Animal Science, AALAS. (en línea) <

https://www.aalas.org/certification/technician-certification#.U-jrYvldVFZ> (citado el 11 de agosto del

2014).

6.3.1.2 Implementación de Procedimientos Operativos Estandarizados

(P.O.E).

Con el fin de que los conocimientos adquiridos por parte del personal se

mantengan actualizados y se logre llevar a cabo procesos de una manera

eficiente, se recomienda el uso de los P.O.E´s, que consisten en documentos que

facilitan la ejecución de procesos, mediante la descripción (a través de un conjunto

de instrucciones o pasos) cronológica y secuencial de cada una de las

operaciones de rutina que se llevan a cabo, ya sean desarrolladas de manera

individual o grupal, con una frecuencia diaria, semanal, quincenal o mensual, etc.

108. La puesta en práctica promueve que dichas actividades se realicen dentro de

107

The American Association for Laboratory Animal Science, AALAS. (en línea) <

https://www.aalas.org/certification/technician-certification#.U-jrYvldVFZ> (citado el 11 de

agosto del 2014).

108 DAVID, J. ¿Cómo hacer un POE?. Artículo publicado el 21/04/13 en la página web:

http://www.bioterios.com/2013/post.php?s=2013-04-21-cmo-hacer-un-poe.

Page 135: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

121

un ámbito predeterminado de aplicación, en forma segura para los operadores y

los animales, evitando generar un impacto negativo en el ambiente.

6.3.1.2.1 Flujograma de procesos.

Con el fin de favorecer la comprensión de las actividades llevadas a cabo por el

personal del bioterio de una forma concreta y simple, y asimismo facilitar la

detección de posibles falencias presentadas en los procesos, se propone la

creación de un Flujograma de procesos, el cual consiste en una representación

gráfica de una secuencia de acciones realizadas de manera rutinaria, que por

medio del empleo de símbolos que representan las etapas o pasos en el proceso,

permite el entendimiento de la secuencia lógica en que las acciones son

realizadas, y asimismo la interacción coordinada entre los encargados de llevarlas

a cabo 109.

109

Ministerio de planificación nacional y política económica, Mideplan. Guía para la Elaboración

de Diagramas de Flujo. Costa Rica. Julio, 2009.

Page 136: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

122

Imagen 42. Flujograma de procesos.

Page 137: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

123

Page 138: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

124

Fuente: Álvarez 2014.

6.3.1.2.2 Cronograma de actividades.

Con el fin de facilitar y regular las labores diarias del personal del bioterio, a

continuación se presentará un calendario de actividades, el cual compila de

manera cronológica todos los procesos que se llevarían a cabo por parte de los

operadores.

Page 139: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

125

Fuente: Álvarez 2014.

6.3.1.2.3 Formulación e implementación de protocolos.

6.3.1.2.3.1 Sanitización de manos.

Es primordial tener en cuenta que con el fin de reducir la presencia de posibles

enfermedades transmitidas de los animales a los operarios y/o viceversa, la

correcta higiene debe ser una prioridad, por lo que el siguiente protocolo debe ser

puesto en práctica a todo momento en las instalaciones del bioterio.

Tabla 22. Cronograma de actividades.

Page 140: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

126

Imagen 43. Sanitización de manos.

Fuente: RODRÍGUEZ. J. Manual de protocolos y procedimientos del bioterio UIS. Universidad

Industrial de Santander. Facultad de Salud. Departamento de Ciencias Básicas. Bioterio Central

Page 141: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

127

6.3.1.2.3.2 Sexado de los animales.

Con el fin de evitar el perjuicio a la salud del operario, de los animales y asegurar

el correcto desarrollo de la actividad, a continuación se describe protocolo que

deberá ser llevado a cabo por los operadores durante el proceso de sexaje (ver

Imagen 44).

Fuente: Álvarez 2014.

Imagen 44. Protocolo de sexaje.

Page 142: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

128

6.3.1.2.3.3 Eutanasia.

Si bien la técnica usada para el sacrificio de los animales del bioterio será la del

Dióxido de carbono, a continuación se describirá el protocolo a seguir antes,

durante y después del sacrificio de los roedores (ver Imagen 45).

Imagen 45. Protocolo de eutanasia de los animales.

Page 143: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

129

Fuente: Álvarez 2014.

6.3.1.2.3.4 Protocolo para suministro de alimento y agua.

Page 144: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

130

Imagen 46. Protocolo para suministro de alimento y agua.

Fuente: RODRÍGUEZ. J. Manual de protocolos y procedimientos del bioterio UIS. Universidad

Industrial de Santander. Facultad de Salud. Departamento de Ciencias Básicas. Bioterio Central

Page 145: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

131

6.3.1.2.3.5 Limpieza y desinfección de las jaulas y estanterías.

Es considerado que para los roedores de laboratorio, los procesos de limpieza y

desinfección de las jaulas son actividades que generan estrés, esto debido a la

manipulación necesaria de los animales (en ocasiones viéndose reflejado en la

reducción de la ganancia de peso, incremento de agresión entre animales,

reducción en la productividad y cambios fisiológicos, entre otros)110, por lo cual se

hace importante el uso de las correctas prácticas de manejo y la instauración de

protocolos que expliquen al personal el orden y descripción de los procedimientos

adecuados durante las labores de limpieza del bioterio.

Con respecto al producto a utilizar para las labores de desinfección, basados en la

información provista por la "Guía de manejo y cuidado de animales de laboratorio:

Ratón", desarrollada por el Instituto Nacional de Salud Peruano, se recomienda el

uso de Tego 2000 al 1% en conjunto con agua (ver Tabla 22) a una relación de 50

ml de desinfectante por 5 L de agua. El Tego 2000 es un agente antimicrobiano

versátil y efectivo basado en tensioactivos anfotéricos, adecuado para la limpieza

de superficies en empresas dedicadas al procesamiento de alimentos, bebidas,

farmacéuticas, cosméticas y laboratorios111.

110

Baumans V, Brain P, Brugere H, Clausing P, Jeneskog T, Perretta G. Pain and distress in

laboratory rodents and lagomorphs. Laboratory Animals. 1994;28:97-112.

111 JOHNSON DIVERSEY TEGO 2000. (en línea) <http://www.dbm-

ltd.co.uk/hygiene/products/johnsondiversey/che0.

micals/open_plant_cleaning/disinfectants/tego_2000_PIS.pdf> (citado el 11 de agosto del

2014.

Page 146: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

132

Tabla 23. Concentración del Tego 2000.

Fuente: Guía de manejo y cuidado de animales de laboratorio: ratón. Instituto Nacional de Salud

Peruano. Lima, 2008.

A continuación se presentará el calendario semanal de actividades y los

protocolos de actividades para la limpieza de las jaulas y estanterías (ver Tabla

24, Imagen 47 e Imagen 48).

Fuente: Álvarez 2014.

Tego 2000 ……………… 1ml

Fuente: http://www.iab-reinraumprodukte.de/

Agua c.s.p ……………… 100 ml

Tabla 24. Cronograma semanal de limpiezas.

Page 147: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

133

Imagen 47. Protocolo de actividades para la limpieza de las jaulas.

Page 148: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

134

Fuente: RODRÍGUEZ. J. Manual de protocolos y procedimientos del bioterio UIS. Universidad

Industrial de Santander. Facultad de Salud. Departamento de Ciencias Básicas. Bioterio Central.

Page 149: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

135

Imagen 48. Protocolo de actividades para la limpieza de las estanterías.

Fuente: RODRÍGUEZ. J. Manual de protocolos y procedimientos del bioterio UIS. Universidad

Industrial de Santander. Facultad de Salud. Departamento de Ciencias Básicas. Bioterio Central.

Page 150: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

136

6.3.1.2.3.6 Limpieza y desinfección de los pisos.

Los materiales y utensilios de limpieza deberán ser exclusivos del bioterio y

mantenerse en buenas condiciones de uso para así evitar que actúen como

vectores de microorganismos. Estos materiales corresponden a: baldes,

trapeadores, escobas, esponjas, bolsas plásticas, canecas de basura, detergentes

y desinfectantes, entre otros.

Se recomienda que para la desinfección de pisos se haga uso del protocolo ya

establecido por el Santuario para la limpieza de jaulas y utensilios de los animales,

que consiste en el uso del producto Simple Green al 10%. Dicha recomendación

se basa en el hecho de que éste constituye un producto no tóxico para los

animales y es biodegradable, además, posee propiedades limpiadoras y

desengrasantes112.

112 SIMPLE GREEN (en línea) < http://gsa.simplegreen.com/gsa_products_all_purpose.php>

(citado el 11 de agosto del 2014).

Page 151: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

137

Imagen 49. Protocolo de limpieza y desinfección de los pisos.

Fuente: RODRÍGUEZ. J. Manual de protocolos y procedimientos del bioterio UIS. Universidad

Industrial de Santander. Facultad de Salud. Departamento de Ciencias Básicas. Bioterio Central.

Page 152: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

138

6.3.1.2.3.7 Control de desechos.

Con respecto al control de desechos, es importante tener en cuenta que para

reducir la cantidad de residuos a eliminar de manera no sostenible, se haría

necesaria la separación de las basuras, clasificándolas en de origen orgánico e

inorgánico.

Imagen 50. Protocolo de eliminación de desechos.

Fuente: Álvarez 2014.

Page 153: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

139

6.3.2 Ubicación de carteles promoviendo la prevención.

Es importante tener en cuenta que uno de los puntos críticos del manejo de

bioterios y por ende de animales, consiste en los posibles eventos adversos que

se pudiesen presentar ocasionados por la falta de prevención. Por lo anterior, se

propone que una manera de recordar al personal acerca de la importancia de ésta,

sería ubicar carteles en el idioma inglés y español (teniendo en cuenta a los

empleados hispanohablantes) en sitios visibles, los cuales ofrezcan información

acerca de cómo realizar correctamente procesos de higiene, manejo de animales,

desecho de residuos, manejo de sustancias químicas, prevención de accidentes,

entre otros.

6.3.3 Normativas internas del bioterio. 113

A continuación se darán a conocer los lineamientos que regirán el funcionamiento

general del bioterio. Dichas normas deberán ser cumplidas tanto por el personal

de planta, como por cualquier individuo externo que con previa autorización

ingrese a las instalaciones.

6.3.3.1 Normas de conducta dentro del bioterio.

Queda absolutamente prohibido:

- Introducir animales de otras instituciones y/o silvestres dentro las instalaciones

del bioterio sin autorización previa por parte de los Médicos Veterinarios.

113 Manual del Bioterio UAMI. (en línea) <

http://cbs.izt.uam.mx/informacion/consejo_divisional/lineamientos/MANUALBIOTERIO.pdf> (citado el

15 de abril del 2014).

Page 154: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

140

- Permitir el ingreso de personas no autorizadas.

- Consumir bebidas o alimentos en el interior de las instalaciones. Asimismo,

fumar, o usar sustancias de tipo recreativo.

- Utilizar radios, grabadoras, televisores o cualquier otra fuente de ruido para los

animales. Con respecto al uso del radio comunicador éste debe permanecer a

bajo volumen y las conversaciones se deben limitar a ser breves y concisas.

- Hacer ruido excesivo, jugar o correr en los pasillos. Asimismo, utilizar a los

animales como objeto de diversión o experimentos.

- Dejar desechos de cualquier tipo en las estanterías de los animales o cualquier

otra superficie que no se encuentre indicada para ese fin.

6.3.3.2 Normativas de carácter general para el personal del bioterio.

- Es obligatorio usar dentro de las instalaciones ropa de protección (se

recomienda el uso de una bata) guantes y tapabocas apropiados (utensilios

que estarán dispuestos a la entrada del bioterio).

- El personal debe abstenerse de realizar cambios, mejoras o desarrollar nuevos

proyectos (ya sean relacionados directamente con los animales o la

infraestructura) que no hayan sido avalados por los Médicos Veterinarios.

- El personal debe tener en cuenta que los implementos de aseo ubicados en el

bioterio deben ser únicamente utilizados allí mismo. En caso de que sea

Page 155: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

141

necesario su reemplazo, se debe dirigir a un supervisor para que éste provea

nuevos materiales.

- El acceso debe ser restringido a solo el personal necesario para llevar a cabo

las labores

- En caso de vacaciones, inasistencia o enfermedad, el personal debe

comunicar previamente a los supervisores (3 semanas, 4 días y 1 día

respectivamente) acerca del tiempo en que estará ausente, quedando su

aprobación a menester de ellos (dependiendo del caso).

- Es imperativo que exista una excelente comunicación entre el personal

encargado del mantenimiento del bioterio (fijo o temporal) de manera que los

procesos se lleven a cabo correctamente, evitando su interrupción.

- Las labores de limpieza y alimentación deberán ser las primeras actividades

que el personal realizará, de manera que se evite el posible estrés generado

por el hambre y/o suciedad.

- El personal deberá cerciorarse que siempre haya disponibilidad de insumos

que abastezcan las necesidades del bioterio (alimenticios, limpieza, entre

otros).

6.3.3.3 Del cuidado de los animales por parte del personal del bioterio.

Para lograr proporcionar bienestar a los animales del bioterio, el personal debe

comprometerse a realizar las siguientes actividades de manera correcta:

- Alimentación, mantenimiento sanitario, y la puesta en práctica de métodos

adecuados de eutanasia.

Page 156: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

142

- Una vez los roedores se hayan sacrificado, se debe asegurar que se lleven a

cabo ciclos de refrigeración o congelación correctos, esto con el fin de que se

garantice el ofrecimiento de alimento de calidad a los animales residentes del

Santuario.

- Con respecto al manejo de los animales, éste debe ser adecuado y limitado,

manipulándolos únicamente lo necesario, siempre realizando movimientos

predecibles y suaves.

- Estricta vigilancia del estado sanitario de los animales, de manera que se

hagan reportes inmediatos a los Médicos Veterinarios ante la presencia de

anomalías.

- Llevar el control de los parámetros reproductivos del bioterio (fechas de

nacimiento de las camadas, número de recién nacidos, fechas de destete, etc.)

de manera que se logre cumplir con los objetivos por los cuales fue creado.

- Higiene de las jaulas e instalaciones del bioterio. Asimismo, coordinación de

las actividades de mantenimiento del local y de los equipos.

- Evitar el hacinamiento y maltrato de los animales.

- Control del fotoperiodo y temperatura del bioterio.

Page 157: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

143

7. PRESUPUESTO PREDETERMINADO Y RETORNO DE LA

INVERSIÓN (RSI).

Fuente: Álvarez 2014.

Según la Tabla No 25, es posible concluir que los costos totales en que incurriría

el Santuario en caso de llevar a cabo el proyecto del bioterio, corresponderían a la

suma de US$14,019.22. Cifra la cual sería completamente amortizada en un

periodo total de 4.8 años, permitiendo al cabo de dicho periodo tener una utilidad

neta de US$4,947.35. Situación que demuestra la factibilidad del proyecto.

Tabla 25. Costos.

Page 158: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

144

8. DESGLOSE DE COSTOS

A continuación en la Tabla 25 se hará una explicación detallada de los costos en

que incurriría el Santuario en caso de implementar el proyecto del bioterio. Dicha

tabla también permitirá al lector un mejor entendimiento de la Tabla 24.

denominada Costos.

Tabla 26. Desglose de costos.

Page 159: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

145

Page 160: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

146

Fuente: Álvarez 2014.

Page 161: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

147

9. CONCLUSIONES.

Teniendo en cuenta que el tiempo de amortización del proyecto se cumpliría a

los 4.8 años y que al cabo de ese periodo quedaría una utilidad neta anual de

US$4,947.35, además de los beneficios que traería para el Santuario el hecho

de iniciar proyectos que impulsen su auto sostenibilidad, es posible concluir

que el proyecto es factible.

Se desarrolla un modelo productivo de ratas y ratones que tuvo en cuenta los

factores ambientales del Santuario. Permitiendo el reciclaje y la adecuación de

instalaciones ya existentes.

Se incluyen elementos y procedimientos que favorecen el bienestar general de

los roedores del bioterio.

Teniendo en cuenta los altos costos de alimentación en que el Santuario

incurre anualmente, se logró comprobar la necesidad de creación de

alternativas de producción de alimento, que sirvan como soporte en la

economía de la institución.

Se determina que el área del Back 40 sería el lugar más adecuado para la

ubicación de la planta física del bioterio.

Page 162: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

148

10. RECOMENDACIONES.

- Ejecutar el presente proyecto, el cual servirá de modelo para impulsar el

planteamiento y formulación de políticas de crecimiento que incluyan la

seguridad alimenticia de los animales del Santuario.

- En caso de ejecución del proyecto se hace indispensable evitar la

sobrepoblación de ratas y ratones, siempre llevando a cabo los protocolos de

eutanasia propuestos, sin importar la reducción de la población de animales

consumidora.

- En caso de finalización del bioterio, se recomienda realizar un sacrificio masivo

y congelamiento de los animales, evitando que su procreación deliberada

afecte el ecosistema silvestre.

Page 163: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

149

11. BIBLIOGRAFIA.

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161

ANEXOS

ANEXO A.

Fragmento del informe de gastos totales de productos alimenticios según

reportes financieros del Wildlife Waystation del año 2013.

Fuente: Barnhill 2013.

Page 176: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

162

ANEXO B.

Gastos totales de compra de roedores en el año 2013.

Fuente: Barnhill 2013.

Page 177: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

163

ANEXO C.

Reportes de salud de cepas de ratones CD-1® IGS Mouse.

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Reportes de salud de cepas de ratones CD-1® IGS Mouse.

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Page 179: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

165

ANEXO D.

Reportes de salud de cepas de ratas CD® IGS Rat.

Page 180: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

166

Reportes de salud de cepas de ratas CD® IGS Rat.

Fuente: CHARLES RIVER. (en línea) <http://www.criver.com/HealthData/na/H02P100M.pdf>

(citado el 10 de enero del 2014).

Page 181: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

167

ANEXO E.

Cómo diseñar un campo de infiltración para un tanque séptico.

Fuente: (en línea) <http://www.ehow.com/how_5232985_design-leach-field-septic-system.html>

(citado el 10 de enero del 2014).

Page 182: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

168

ANEXO F.

Descripción y composición del alimento concentrado para roedores

LabDiet 5001.

Fuente: LabDiet. (en línea) <http://www.labdiet.com/Products/StandardDiets/index.html> (citado el

10 de enero del 2014).

Page 183: PROPUESTA DE CREACIÓN DE UN BIOTERIO PARA EL SANTUARIO

169

ANEXO G.

Comparación de la fibra de Cáñamo con otros materiales ofrecidos en el

mercado.

Fuente: Hemp Technologies (en línea) < > (citado el 10 de enero del 2014).

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