bioterio consideraciones generales dr. rubén lijteroff bioseguridad y gestión ambiental...

Bioterio Bioterio Consideraciones GeneralesConsideraciones Generales

Dr. Rubén LijteroffDr. Rubén Lijteroff

Bioseguridad y Gestión AmbientalBioseguridad y Gestión Ambiental

[email protected]@yahoo.com.ar

• El El BIOTERIOBIOTERIO es un es un departamento departamento especializado en la especializado en la reproducción, reproducción, mantenimiento y control mantenimiento y control de diversas especies de de diversas especies de animales de laboratorio, animales de laboratorio, en óptimas condiciones, en óptimas condiciones, los cuales son utilizados los cuales son utilizados para la experimentación para la experimentación en Investigación Científica en Investigación Científica y Desarrollo Tecnológico.y Desarrollo Tecnológico.


Los ANIMALES DE LABORATORIOLos ANIMALES DE LABORATORIO deben deben considerarse como REACTIVOS BIOLÓGICOS.considerarse como REACTIVOS BIOLÓGICOS.

Son un instrumento de medida que nos devuelve Son un instrumento de medida que nos devuelve resultados estandarizados.resultados estandarizados.

Debemos usar animales acreditados de calidad Debemos usar animales acreditados de calidad genética y estado de salud que nos permita genética y estado de salud que nos permita obtener resultados confiables, comparables y obtener resultados confiables, comparables y reproducibles.reproducibles.

¿Que son los animales de laboratorio?¿Que son los animales de laboratorio?


RatónRatón ( Mus Musculus): Se utilizan en estudios renales, ( Mus Musculus): Se utilizan en estudios renales, neoplasias, virología, bacteriología, obesidad, toxicidad.neoplasias, virología, bacteriología, obesidad, toxicidad.

ESPECIES MAS COMUNES USADAS EN INVESTIGACIÓNESPECIES MAS COMUNES USADAS EN INVESTIGACIÓN

RatasRatas (Rattus norvegicus): Se utilizan en estudios de (Rattus norvegicus): Se utilizan en estudios de neoplasia, efectos de drogas, metabolismo de lípido, neoplasia, efectos de drogas, metabolismo de lípido, diabetes, artritis, nutrición. diabetes, artritis, nutrición.

CobayoCobayo ( Cavia porcellus) : Se utilizan en estudios de ( Cavia porcellus) : Se utilizan en estudios de hipersensibilidad, alergia, anafilaxia, hormonas de la preñez.hipersensibilidad, alergia, anafilaxia, hormonas de la preñez.

ConejoConejo (Ortyctolagus cuniculus): Se utilizan para estudios (Ortyctolagus cuniculus): Se utilizan para estudios fisiológicos, nutrición, reproducción, inmunología, fisiológicos, nutrición, reproducción, inmunología, parasitarias, pruebas de irritantes cutáneos y oculares, parasitarias, pruebas de irritantes cutáneos y oculares, pruebas de piretógenos.pruebas de piretógenos.


RatónRatón RataRata


¿POR QUÉ SE USAN LOS RATONES COMO MODELO ¿POR QUÉ SE USAN LOS RATONES COMO MODELO EXPERIMENTAL?EXPERIMENTAL?

• Son mamíferos, por lo cual gran parte de los procesos Son mamíferos, por lo cual gran parte de los procesos bioquímicos son similares al hombre.bioquímicos son similares al hombre.

• El tiempo generacional muy corto, muy prolíficos, fáciles El tiempo generacional muy corto, muy prolíficos, fáciles de criar, pequeños y se adaptan fácilmente a la vida del de criar, pequeños y se adaptan fácilmente a la vida del bioterio, lo que permite controlar las variables ambientales bioterio, lo que permite controlar las variables ambientales en las experimentaciones.en las experimentaciones.

• Es una de las especies mejor estudiadas desde el punto Es una de las especies mejor estudiadas desde el punto de vista genético, tienen alta variabilidad genética.de vista genético, tienen alta variabilidad genética.

• Es el único animal que posee sistemas eficientes de cultivo Es el único animal que posee sistemas eficientes de cultivo de células embrionarias pluri potenciales para generar de células embrionarias pluri potenciales para generar quimeras, lo que permite realizar mutaciones dirigidas o quimeras, lo que permite realizar mutaciones dirigidas o condicionales. condicionales.


LEGISLACIÓN VIGENTE EN LA REPUBLICA ARGENTINALEGISLACIÓN VIGENTE EN LA REPUBLICA ARGENTINA

Nuestro país carece de Legislación, Reglamentos, Guías Nuestro país carece de Legislación, Reglamentos, Guías referidas al Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio.referidas al Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio.

Ley nacional 14346 sobre Protección de los Animales. Ley nacional 14346 sobre Protección de los Animales. Septiembre 1954Septiembre 1954

Disposición 6344/96 ANMAT (Administración Alimentos y Disposición 6344/96 ANMAT (Administración Alimentos y Tecnología Médica) ”Reglamentación para Bioterios de Tecnología Médica) ”Reglamentación para Bioterios de laboratorios elaboradores de especialidades medicinales y /o laboratorios elaboradores de especialidades medicinales y /o de análisis para terceros”.1997de análisis para terceros”.1997

Resolución 617/02 SENASA ( Servicio Nacional de Sanidad Resolución 617/02 SENASA ( Servicio Nacional de Sanidad Animal y Calidad Agroalimentaria).Animal y Calidad Agroalimentaria).


NORMAS INTERNACIONALES NORMAS INTERNACIONALES Buenas Prácticas de Laboratorios (BPL) OMS 1975.Buenas Prácticas de Laboratorios (BPL) OMS 1975.Normas ISO 9000, 9001, 9002, 9003.(International Normas ISO 9000, 9001, 9002, 9003.(International

Organization for Standarization).Organization for Standarization).

DOCUMENTO DE REFERENCIA INTERNACIONAL DOCUMENTO DE REFERENCIA INTERNACIONAL Guide for the care and use of Laboratory Animals. Guide for the care and use of Laboratory Animals.

(NRC) National Research Council.USA.(NRC) National Research Council.USA.


PRINCIPIOS PARA EL TRABAJO CON ANIMALESPRINCIPIOS PARA EL TRABAJO CON ANIMALES(W. M. Russell y R. L. Burch – 1.959)(W. M. Russell y R. L. Burch – 1.959)

REEMPLAZO : Sustitución de animales vivos por REEMPLAZO : Sustitución de animales vivos por material insensible.material insensible.

REDUCCIÓN : en el número de animales usados para REDUCCIÓN : en el número de animales usados para obtener la información de una determinada cantidad y obtener la información de una determinada cantidad y precisión.precisión.

REFINAMIENTO: Disminución en la incidencia o REFINAMIENTO: Disminución en la incidencia o severidad de procedimientos inhumanos (dolor y severidad de procedimientos inhumanos (dolor y disconfort) aplicados a estos animales que tienen que disconfort) aplicados a estos animales que tienen que ser utilizados.ser utilizados.


REEMPLAZOREEMPLAZO

1-USO DE SISTEMAS VIVIENTES1-USO DE SISTEMAS VIVIENTES• Técnica in vitro: cultivo de células, tejidos y órganos. Técnica in vitro: cultivo de células, tejidos y órganos. Ejemplo: cultivo de células para producir anticuerpos Ejemplo: cultivo de células para producir anticuerpos monoclonales.monoclonales.

• Animales invertebrados: Ejemplo Drosophila Animales invertebrados: Ejemplo Drosophila melanogaster como modelo para estudio de genética, melanogaster como modelo para estudio de genética, especies marinas para estudio del sistema nervioso.especies marinas para estudio del sistema nervioso.

• Microorganismos: cultivo de Salmonella typhimurium Microorganismos: cultivo de Salmonella typhimurium para la prueba de Ames de mutación / carcinogénesis.para la prueba de Ames de mutación / carcinogénesis.

• Plantas: estudio de mecanismos moleculares básicos, Plantas: estudio de mecanismos moleculares básicos, ya que existe poca diferenciación de organelas aisladas ya que existe poca diferenciación de organelas aisladas en plantas de los animales.en plantas de los animales.


REEMPLAZOREEMPLAZO

2-USO DE SISTEMAS NO VIVIENTES2-USO DE SISTEMAS NO VIVIENTES• Técnicas Químicas: Las técnicas de inmunoquímica usan la Técnicas Químicas: Las técnicas de inmunoquímica usan la capacidad de acoplarse de anticuerpos altamente específicos capacidad de acoplarse de anticuerpos altamente específicos para encontrar cantidades mínimas de un antígeno. para encontrar cantidades mínimas de un antígeno.

• Sistemas Físicos y /o Mecánicos: Pueden reemplazar Sistemas Físicos y /o Mecánicos: Pueden reemplazar animales vivos y son aplicables para enseñar habilidades animales vivos y son aplicables para enseñar habilidades específicas y / o reacciones en un conjunto definido de específicas y / o reacciones en un conjunto definido de circunstancias predeterminadas. circunstancias predeterminadas.

• Simulación Computarizada: Para que un fenómeno biológico Simulación Computarizada: Para que un fenómeno biológico sea adaptado a un modelo de computadora los procesos sea adaptado a un modelo de computadora los procesos básicos deben ser expresados en una fórmula matemática, básicos deben ser expresados en una fórmula matemática, una vez desarrollada se puede introducir las variables y ser una vez desarrollada se puede introducir las variables y ser expresadas. El elemento clave es realizar un completo expresadas. El elemento clave es realizar un completo modelo matemático.modelo matemático.


REDUCCIÓN REDUCCIÓN

Reducir significativamente el número de animales usados Reducir significativamente el número de animales usados dentro de una institución. Es difícil pero efectivo.dentro de una institución. Es difícil pero efectivo.

• Diseño estadístico mejoradoDiseño estadístico mejorado: diseño experimental y uso : diseño experimental y uso de métodos estadísticos correctos, resultan en reducción de de métodos estadísticos correctos, resultan en reducción de animales en uso.animales en uso.

• Animales de CalidadAnimales de Calidad: animales experimentales de : animales experimentales de excelente calidad genética, sanitaria y ambiental conduce a excelente calidad genética, sanitaria y ambiental conduce a un menor uso de animales y menos dispersión de datos.un menor uso de animales y menos dispersión de datos.

• Banco de DatosBanco de Datos: Publicación de resultados negativos para : Publicación de resultados negativos para no repetir. no repetir. Acceso a literatura especializadaAcceso a literatura especializada


REFINAMIENTOREFINAMIENTOTécnicas que reducen el dolor y molestia al animal.Técnicas que reducen el dolor y molestia al animal.

• Uso de técnicas no invasivas o telemétricasUso de técnicas no invasivas o telemétricas: proporciona : proporciona datos más consistentes y reproducibles. datos más consistentes y reproducibles.

• Mejora de instrumentos para monitoreo de animales y Mejora de instrumentos para monitoreo de animales y análisis de muestraanálisis de muestra: permiten minimizar el stress del animal : permiten minimizar el stress del animal por medio de reducción de nivel de restricción / por medio de reducción de nivel de restricción / manipulación para obtener muestras biológicas (catéteres) manipulación para obtener muestras biológicas (catéteres) y uso de equipos de diagnóstico que requieran por ejemplo, y uso de equipos de diagnóstico que requieran por ejemplo, micro litros de sangre.micro litros de sangre.•Uso de anestésicos, analgésicos y tranquilizantesUso de anestésicos, analgésicos y tranquilizantes..

• Eutanasia anticipadaEutanasia [email protected]@yahoo.com.ar

TIPOS DE BIOTERIOTIPOS DE BIOTERIO

INSTALACIONES CONVENCIONALESINSTALACIONES CONVENCIONALES: Los cuartos para : Los cuartos para animales tienen un solo acceso por el que entran y salen animales tienen un solo acceso por el que entran y salen artículos limpios y sucios. Existe riesgo de contaminación artículos limpios y sucios. Existe riesgo de contaminación cruzada entre los cuartos. Debe tener un flujo de aire cruzada entre los cuartos. Debe tener un flujo de aire apropiado, es decir dentro del cuarto debe haber presión apropiado, es decir dentro del cuarto debe haber presión negativa y afuera positiva.negativa y afuera positiva.



CORREDORES LIMPIO y SUCIOCORREDORES LIMPIO y SUCIO: Existe un flujo de tráfico en : Existe un flujo de tráfico en una sola dirección, la entrad conduce desde el corredor limpio una sola dirección, la entrad conduce desde el corredor limpio al cuarto y la salida del cuarto conduce al pasillo sucio. El flujo al cuarto y la salida del cuarto conduce al pasillo sucio. El flujo de aire tiene diferentes presiones.de aire tiene diferentes presiones.



BIOTERIO DE BARRERA Y CONTENCIÓNBIOTERIO DE BARRERA Y CONTENCIÓN: mantiene la : mantiene la contaminación fuera de un área y de contención mantiene la contaminación fuera de un área y de contención mantiene la contaminación dentro de un área.contaminación dentro de un área.


2-AREAS FUNCIONALES2-AREAS FUNCIONALESLas instalaciones de un bioterio se dividen en varias áreas, Las instalaciones de un bioterio se dividen en varias áreas, cada una equipada para facilitar las actividades:cada una equipada para facilitar las actividades:

Salas de cría y producción Salas de cría y producción RecepciónRecepciónSala de cuarentenaSala de cuarentena Depósito de materiales limpiosDepósito de materiales limpiosDepósito de materiales suciosDepósito de materiales sucios LavaderoLavaderoDepósito de comidaDepósito de comida Duchas y vestuariosDuchas y vestuariosBañosBaños CocinaCocinaOficinasOficinas Sala de cirugíaSala de cirugíaSala de necropsiaSala de necropsia Sala de máquinasSala de máquinas


AMBIENTEAMBIENTE


4-SEGURIDAD EN AMBIENTES DE TRABAJO CON 4-SEGURIDAD EN AMBIENTES DE TRABAJO CON RIESGO BIOLÓGICORIESGO BIOLÓGICO

Al igual que los laboratorios, los bioterios pueden Al igual que los laboratorios, los bioterios pueden clasificarse en cuatro niveles de bioseguridad, con arreglo clasificarse en cuatro niveles de bioseguridad, con arreglo a una evaluación del riesgo y al grupo de riesgo al quea una evaluación del riesgo y al grupo de riesgo al quepertenecen los microorganismos investigados.pertenecen los microorganismos investigados.


PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO Y EQUIPO DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO Y EQUIPO DE SEGURIDADSEGURIDAD

11 Acceso restringido, ropa y guantes protectoresAcceso restringido, ropa y guantes protectores

22

Procedimientos del NBSA-1, más señales de advertencia del Procedimientos del NBSA-1, más señales de advertencia del riesgo. CSB de clase I o II para las actividades que producen riesgo. CSB de clase I o II para las actividades que producen aerosoles. Descontaminación de desechos y jaulas antes del aerosoles. Descontaminación de desechos y jaulas antes del lavado.lavado.

33Procedimientos del NBSA-2, más acceso controlado. CSB y Procedimientos del NBSA-2, más acceso controlado. CSB y ropa protectora especial para todas las actividades.ropa protectora especial para todas las actividades.

44

Procedimientos del NBSA-3, más acceso estrictamente Procedimientos del NBSA-3, más acceso estrictamente restringido. Muda de ropa antes de entrar. CSB de clase III o restringido. Muda de ropa antes de entrar. CSB de clase III o trajes de presión positiva. Ducha a la salida. trajes de presión positiva. Ducha a la salida. Descontaminación de todos los desechos antes de su salida Descontaminación de todos los desechos antes de su salida de las instalaciones.de las instalaciones.

NBSA: nivel de bioseguridad de las instalaciones para los animales; NBSA: nivel de bioseguridad de las instalaciones para los animales; CSB: cámaras de seguridad biológica.CSB: cámaras de seguridad biológica.


ACCIDENTES DERIVADOS DEL ANIMALACCIDENTES DERIVADOS DEL ANIMAL

Los animales de laboratorio como “reservorios y Los animales de laboratorio como “reservorios y trasmisores de zoonosis y causantes de agresiones”.trasmisores de zoonosis y causantes de agresiones”.

Los mecanismos generales de transmisión pueden ser: Los mecanismos generales de transmisión pueden ser: mordeduras, arañazos, contaminación de heridas mordeduras, arañazos, contaminación de heridas existentes, vía digestiva y vía aerógena.existentes, vía digestiva y vía aerógena.

Los animales de laboratorio como fuente de “alergenos”.Los animales de laboratorio como fuente de “alergenos”.

La principal fuente de alergenos son ratas y ratones La principal fuente de alergenos son ratas y ratones producidas por la orina (prealbúmina, albúmina, producidas por la orina (prealbúmina, albúmina, globulinas), descamaciones de la piel, pelo y plumas, globulinas), descamaciones de la piel, pelo y plumas, sangre y ácaros de polvo.sangre y ácaros de polvo.


MEDIDAS PARA PREVENIR ACCIDENTESMEDIDAS PARA PREVENIR ACCIDENTES

• Calidad sanitaria de los animales.Calidad sanitaria de los animales.• Control sanitario periódico de los animales.Control sanitario periódico de los animales.• Educación sanitaria del personal e instrucción en la Educación sanitaria del personal e instrucción en la prevención de accidentes.prevención de accidentes.• Adiestramiento en el manejo y manipulación de los Adiestramiento en el manejo y manipulación de los animales.animales.• Prohibición de fumar, comer, beber y maquillarse en Prohibición de fumar, comer, beber y maquillarse en las habitaciones de los animales y laboratorios.las habitaciones de los animales y laboratorios.• Inmunoprofilaxis del personal.Inmunoprofilaxis del personal.• Sedación de los animales, si el experimento lo Sedación de los animales, si el experimento lo permite.permite.• Uso de jaulas con mecanismos de inmovilización y Uso de jaulas con mecanismos de inmovilización y técnicas de sujeción adecuadas.técnicas de sujeción adecuadas.


MEDIDAS PREVENTIVAS MEDIDAS PREVENTIVAS

• Informar casos de lesiones producidas por animales.Informar casos de lesiones producidas por animales.• Realizar un examen médico pre ocupacional y Realizar un examen médico pre ocupacional y

ocupacional periódico con ausencia de alergia.ocupacional periódico con ausencia de alergia.• Recurrir al botiquín de primeros auxilios.Recurrir al botiquín de primeros auxilios.• Uso de elementos de protección personal: (Ropa de Uso de elementos de protección personal: (Ropa de

trabajo adecuada, protectora y cómoda, guantes, trabajo adecuada, protectora y cómoda, guantes,

barbijos, anteojos y semi máscara con filtros y cofias).barbijos, anteojos y semi máscara con filtros y cofias).


bioterio consideraciones generales dr. rubén lijteroff bioseguridad y gestión ambiental...

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