principios de la microscopia

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Tamaño celularLas células son las unidades básicas de los seres vivos. La mayoría son de pequeño tamaño por lo que es necesario el uso de instrumentos como

los microscopio para su visualización.

Poder resolutivo del ojo humano es de 0,2mm(200um)

LA INVENCIÓN DEL MICROSCOPIO SIGLO XVII.

• Posibilito una serie de descubrimientos.

• En 1665 Robert Hooke utilizo un microscopio óptico simple, examino una corteza, encontró que estaba compuesta por una masa de diminutas cámaras, que llamo células, en realidad solo vio las paredes celulares.

Tipos básicos de microscopio (OPTICO Y ELECTRÓNICO)

MICROSCOPIO OPTICO

• Es el mas utilizado, que sirve de la luz visible para crear una imagen aumentada del objeto. Algunos microscopios ópticos pueden aumentar un objeto por encima de las 2,000 veces.

EL MICROSCOPIO ÓPTICO MAS SIMPLE ES LA LENTE CONVEXA DOBLE.

Distancia focal cortaPueden aumentar un objeto hasta 15 veces

MICROSCOPIO COMPUESTO.Se utilizan con frecuenciaDisponen varios lentes que consiguen aumento mayores.

MICROSCOPIO COMPUESTO

• Consisten Dos sistemas de lentes, El objetivo Ocular, montados en extremos opuestos de un tubo cerrado.

• Objetivo.- compuesto de varias lentes que crean una imagen real aumentada.

• Lentes.- dispuestas de forma que el objetivo se encuentre en el punto focal del ocular.

EQUIPAMIENTO ADICIONAL DE UN MICROSCOPIO

• Consta de un armazón con un soporte que sostiene el material examinado

• De un mecanismo que permite acercar y alejar el tubo para el enfoque de la muestra.

• El soporte tiene un orificio por el que pasa la luz.

• Bajo el soporte se encuentra un espejo que refleja la luz

• El microscopio puede contar con una fuente de luz electrónica.

Los especímenes o muestra que se examinan son transparentes y suelen colocarse sobre un rectángulo fino de vidrio ( laminas porta objetos).

VARIANTES DE OBSERVACIÓN EN DISTINTOS MICROSCOPIOS

• Microscopia óptica normal(campo brillante coloreado).- el material a observar se colorea con colorantes específicos que aumentan el contraste y revelan detalles que no aprecian de otra manera.

Microscopia de campo brillante.- el material se observa sin coloración. La luz pasa directamente y se aprecian detalles que estén naturalmente coloreados.

Microscopio de campo oscuro.- utiliza una luz intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espécimen, el campo de visión de objeto se encuentra en la zona hueca del cono de luz y solo recoge la luz que refleja en el objeto. Por ello las proporciones claras de espécimen aparecen con un fondo oscuro.

Microscopia en contraste de fase.- se usa para el aumento del contraste entre las partes claras y oscuras de las células sin colorear. Ideal par especímenes delgados o células aisladas.

Microscopia de fluorescencia.- una sustancia natural en las células o un colorante aplicado al corte es estimulado por un haz de luz, emitiendo parte de la energía absorbida como rayas luminosas.

Nomarski, microscopia diferencial de contraste de interferencia.- utiliza dos rayos de luz y las imágenes combinadas aparecen como si la célula estuviera proyectando sombras hacia un lado. Diseñado parea observar relieves de especímenes muy difíciles de manejar.

la longitud de onda mas corta de la luz visibles es de alrededor de 4,000 angstroms (1 angstrom es 0,0000000001 metros). La longitud de onda de los electrones que se utiliza en los microscopios electrónicos es de 0,5 angstroms.

MICROSCOPIA ELECTRÓNICA. Utiliza electrones para iluminar un objeto. Dado que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que de la luz, lo cual puede mostrar estructuras mucho mas pequeñas.

TIPOS DE M.E. (M.E. TRANSMICION Y M.E.DE BARRIDO).

• M.E DE TRANSMICION.- permite la observación de muestras en cortes ultrafinos. M.E.T, dirige el haz de luz de electrones hacia el objeto que se desea aumentar.

• Para utilizarlo se corta la amuestra en capas finas( no mayores de un par de miles de angstroms)

• Se coloca una placa fotográfica o una pantalla fluorescente detrás del objeto

El M.E.DE TRANSMICION puede aumentar un objeto hasta un millón de veces.

M.E. DE BARRIDO.- Crea una imagen ampliada de la superficie de un objeto.

• No es necesario cortar en capas.

• Su funcionamiento se basa a recorrer la muestra con un haz muy concentrado de electrones, de forma parecida al barrido de un haz de electrones por la pantalla de un televisor.

• Pueden ampliar los objetos 200,000 veces o mas.

• Es muy útil por que, produce imágenes tridimensionales realista de la superficie del objeto.

OTROS TIPOS DE MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS.

• Microanalizador de sonda de electrones.- M.E. que cuenta con un analizador de espectro de rayos x.

No solo proporciona una imagen amplia de la muestra, sino también información sobre la composición química del material.

Microscopio electrónico de barrido y transmisión (scanning trasnmission electron microscope, stem).- combina los elementos de un M.E.B y un M.E.T. puede mostrar átomos individuales de un objeto.

MICROSCOPIO A OPTOFLUIDO O A CHIP

• Optofluido.- se utiliza para nombrar a los sistemas ópticos fabricados con fluidos.

• Fluidos.- poseen propiedad únicas que no tienen equivalentes en los sistemas ópticos solidos, y se puede utilizar para fabricar nuevos instrumentos.

Propiedades:Facilidad de cambiar la propiedad óptica de un instrumento solo con cambiarlo en

fluido que contiene.Las características de la interface de dos líquidos no miscibles.Posibilidad de crear gradientes de propiedades ópticas por difusión con fluidos

miscibles.

• La mayor parte de los sistemas ópticos utilizados actualmente se realizan con material solidos (vidrio, metales, semiconductores, etc.)

• Pero hay casos en los que se usan líquidos como el aceite de inmersión.