Preparacin y Procesamiento

de Componentes SanguneosJonathan Strohm

Director del Centro N. Londres

Qu cubrimos Produccin de componentes sanguneos Tipos de bolsas Especificaciones y consideraciones del

procesamiento Conceptos y prcticas de monitoreo de calidad

y qu no cubrimos

Usos de los componentes sanguneosvCJD

Producto Inicial

Volumen (405-495ml) Conc.de Hb Seguridad Velocidad Temperatura - (no menor a

20oC para produccin de plaquetas)

Resumen Procesamiento

Leucodeplecin Retiro de los leucocitos de todos los componentes

clnicos (excepto granulocitos clnicos!) Generalmente se hace a travs de fitracin En el RU un componente leucodepletado contiene

Tipos de Bolsas de Sangre

Filtro de Sangre Total (WBF)

Gbulos rojos Crioprecipitado PFF

Filtracin antes del procesamiento

Top and Bottom (TAB)

Buffy coat plaquetas Glbulos rojos (PFF)

Filtracin de productos terminados

Bolsa con filtro de sangre total

XXXX

X

XXXXX XXXXXXXXXX

Collection bag SAGM

Plasma

Bolsa Top and Bottom (TAB) Collection bag

SAGMPlasma

CentrifugacinSepara:Los elementos celulares del plasmaTipos celulares de acuerdo al tamao y densidadTemperatura controlada

SeparacinSe requieren programas desarrollados cuidadosamente Se depositan los glbulos rojos y blancosSe dejan las plaquetas suspendidas en el plasma

Glbulos Rojos

Suspendidos en SAGM aditiva Salino, Adenina, Glucosa, Manitol

Vida til de 35 das Volumen: 220 - 340ml Hematocrito: 0.50 - 0.70 Rcto blancos: 40g

1. Plasma congelado2. Produccin crioprecipitado3. PFF & pool Cro

Vida til 2 aos congelados

Plasma para fraccionamientoOriginalmente enviado a fbricaPooleado y procesado, para fabricar:

Concentrado de factores de coagulacinInmunoglobulinasAlbmina

Actualmente plasma del RU se descarta debido al riesgopotencial de vCJD en los productos pooleados

La planta de fraccionamiento procesaplasma de EEUU

Pooling4 BCs + 1 plasma de un donante hombre

Del mismo grupo ABORh y CMV slo neg si todos negSe genera un nmero nico de pool

Conexin estrilUne tubuladuras de manera asptica

Hoja de cobre desechableSe crea un tren

PoolingLos Buffy coat se vacian a una bolsaSe usa plasma para enjuagar a travs de los buffy y maximizar la recuperacin

Plaquetas de AfresisDosis doble o tripleLeucodepletadas durante coleccinUtil para pediatra y HLA

Especificacin

Volumen: 150 - 340ml Contenido de plaquetas: >240x109 por

dosis pH: 6.4 - 7.4 (actualmente medido al final

de la vida til) Recuento de leucocitos:

Irradiacin GammaProductos irradiados en stockVida til de los glbulos rojos reducida a 14 das, las plaquetas se mantienen 5 dasLa irradiacin es apoyada a travs de PulseSe irradian aproximadamente 20000 componentes al mes en Colindale

Inactivacin de patgenos

Actualmente slo utilizada para PFF El agente activo es Azul de Metileno Se est usando PFF congelado de Austria Centralizada en Colindale y Manchester

Cmo funciona?

85g de AM (hidrochlorid, anhidr.)

Entrega una concentracin de 1M en un plasma dede volumen promedio

Sistema seco para facilitar el almacenamiento

El sistema de Procesamiento

Filtracin de Priones Total de casos de vCJD en RU

hasta Marzo 2010Primarios = 169 Secundarios (transfusin) = 3

Rendimiento anual

1.9 millones de donaciones de sangre total procesadas en: 1.8 millones de glbulos rojos 50 000 glbulos rojos neonatales

320 000 PFF 7 000 PFF neonatales

75 000 crioprecipitados

Produccin de plaquetas

750 000 buffy coats convertidos en 155000 pools

100 000 dosis de plaquetas de afresis 10 000 componentes plaquetarios

neonatales

Monitoreo de CalidadMnimo 1% de los productos son monitoreadosLa mayora testeados sin destruirlosRepartidos durante el mes

VolumenHematocritoRecuento de plaquetaspHConc. de FVIII & fibringeno

Monitoreo de Procesos Estadsticos En este momento slo usado para LDMonitorea el proceso, no el productoSistema de alerta tempranaCitometra de flujo usada para recuento de leucocitos

Qu es un producto especializado?

Es un trmino no estandarizado que identifica principalmente productos no relacionados

De baja demanda No se mantienen en stock Con frecuencia tienen una vida til corta Implican un procesamiento extra significativo

Productos Especializados

Glbulos rojos lavados en salino Plaquetas suspendidas en PAS (solucin

aditiva ) Glbulos Rojos

Congelados/Descongelados

Glbulos Rojos Lavados en Salino Se agrega 0.9% de salino a los glbulos rojos

(conexin estril) Centrifugacin Se retira sobrenadante Repetir proceso (2 bolsa de lavado) Dejar ~2cm de sobrenadante en el producto

final para corregir Hcto Tomar muestra para protenas totales (menos

de 0.5g/bolsa) Expiracin a las 24 horas desde el comienzo del

proceso.

El futuro

Procesamiento automatizado de clulas lavadas usando flujo continuo

Resuspensin en SAGM proporcionando 14 das de vida til

Producto en stock

Plaquetas en PAS

Transferencia estril a bolsa de plaquetas Centrifugar Remover todo el plasma con cuidado Agregar PAS (llamado previamente PSM) Dejar reposar durante 30 minutos para que

las plaquetas se desagreguen Expiracin en 24 horas desde el comienzo

del proceso

Por qu se requieren estos productos ?

Transfusin de receptores IgA deficientes con anticuerpos anti-IgA para prevenir reacciones anafilcticas (cuando no hay disponibles unidades IgA deficientes).

Transfusin de otros pacientes con reacciones alrgicas severas a los constituyentes del plasma.

Glbulos Rojos congelados

Glbulos rojos congelados dentro de los 5 primeros das despus de la colecta

Si los gbulos rojos son mayores de 5 das, pueden ser rejuvenecidos para restaurar los niveles de ATP y 2.3 DPG

Centrifugar para remover el exceso de plasma Anteriormente en sistema abierto

Haemonetics ACP 215

Adicin controlada de glicerol.

Sistema cerrado que usa filtros bacterianos y equipo de conexin estril.

Ocupa poco espacio

Las unidades se llenan al vaco y se ponen en un liner de cartn

Congelados a -80oC Muy frgiles cuando estn congelados

Una vez congelados se les asigna una posicin en un congelador para su futuro retiro

almacenamiento congelado por 10 aos (al menos)

Para hacer la compatibilidad se pueden usar muestras congeladas de las unidades consideradas aptas,

Las unidades se retiran del congelador (-80oC) Se descongelan en el bao termorregulado (y

se entibian) Se deglicerolizan y lavan usando ACP215

Descongelamiento

Descongelamiento Se utiliza un kit autnomo

para el procesamiento. Se usa salino 12% para

retirar lentamente el glicerol de los glbulos rojos.

Concentracin del remanente con salino al 0.9%

Lavar con 2l salino Resuspender en SAGM

Se toman muestras para Recuento globular y Hb sobrenadante

Vida til hasta 7 das debido al SAGM 20% de prdida de glbulos rojos durante el

proceso (principalmente hemlisis) Remocin casi completa de leucocitos,

plaquetas & plasma

Usos de los glbulos rojos congelados/descongelados

Mantencin de un banco de fenotipos raros (U-, Bombay etc.)

Tambin para fenotipos menos comunes con mltiples antgenos negativos

Autlogo (menos probable actualmente) Militar