PRÁCTICA No. 2 Separación de pigmentos vegetales mediante cromatografía en papel

Integrantes:

Camacho Luna Vanessa.

Cornejo Ramírez Karla Geraldine.

Esmeralda Hernández Rudy Alejandro.

Esquivel Fonseca Jennifer.

González López Marisol.

2016

RUDY CETIs No. 62 25/02/2016

Introducción

Un pigmento es: es un material que cambia el color de la luz que refleja como

resultado de la absorción selectiva del color.

Hay diversas clases de pigmentos, los principales son:

Clorofilas(a,b,c , d y bacterioclorofilas) de colorción verde.

Carotenoides (carotenos y xantofilias) de coloración amarilla y roja.

Ficobilinas de coloración azul y roja presentes en las algas verdeazuladas.

Fundamento

En un hoja, además de la clorofila, existen otros pigmentos que se hallan

enmascarados por el intenso color verde manifestado por la clorofila; en

una hoja lo que hay es una mezcla de pigmentos con diferentes colores:

clorofila-a (verde intenso), clorofila-b (verde), carotenos (amarillo claro) y

xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones.

En Química existe una técnica instrumental para separar, aislar, purificar e

identificar los componentes de una mezcla compleja, tal técnica recibe el

nombre de cromatografía.

La cromatografía es una técnica de separación de una mezcla de solutos

en función de la diferente velocidad con la que se mueve cada uno de ellos

a través de un medio poroso, arrastrado por un disolvente en movimiento.

Objetivo:

El objetivo que el equipo planteo para esta práctica fue el de obtener

correctamente los pigmentos de algunos vegetales tales fueron la espinaca y la

zanahoria.

Materiales:

Mortero

Espinacas

Zanahorias

Papel filtro

Tubos de ensayo en gradilla

Éter etílico

Alcohol metílico puro

Vaso de precipitado

Tubo capilar

Tira de papel cromatográfico

Sujetador

Procedimiento:

1. Colocar en un mortero trozos de hojas de

espinacas (y zanahorias) lavadas, quitando las

nevaduras más gruesas, junto con 10 o 15cc de

éter etílico.

(Nosotros agregamos 15cc de éter etílico para que

podamos tener más liquido).

2. Triturar sin golpear hasta que el líquido

adquiera una coloración verde intensa (y en

caso de la zanahoria, naranja intensa). (Utilizar

campana de gases a lo largo de toda la

práctica).

3. Filtrar en un embudo con papel de filtro y

recoger en un tubo de ensayo (es suficiente

con 2 o 3cc de solución de pigmentos).

(Intentamos sacar todo el líquido posible de la

zanahoria y las espinacas. Logramos obtener más

liquido de las zanahorias).

4. Colocar en el vaso precipitado metanol

absoluto hasta una altura de de 0.5 a 1cm.

5. Poner con el capilar en el papel de

cromatografía entre 5 y 10 gotas de solución de

pigmentos, espaciadad en el tiempo con el fin

de que vaya secándose el éter etílico y

aumente la cantidad de pigmentos. Las gotas

se pondrán siempre en el mismo punto (se

puede marcae con un lápiz), situado a unos

2cm por encima del borde inferior del papel.

6. Doblar el papel cromatográfico a lo largo y

colocarlo en el vaso precipitado con la mancha

de pigmento a 1cm de la superficie del

eluyente. Fijar el papel cromatográfico con una

pinza a un soporte horizontal colocado en el

borde de vaso.

7. Espera unos 30min. Y observar. (Nosotros nos

esperamos los 30 minutos y a cada 10 min.

observábamos los cambios que había en ella).

(Después de los 30min.)

Observaciones:

En esta práctica pudimos observar que siempre que se trabaje con reactivos una

vez que ya no se utilicen deben de cerrarse porque aparte que despiden el olor ,

se evaporan y la mezcla de gases puede generar explosiones, también

observamos que entra más se machacaban las zanahorias y las espinacas más

concentrado se volvía la disolución que se hacía y que entre más color tenga la

materia se ven mejor la concentración de los pigmentos, porque la zanahoria casi

no tenía color y se observaron muy tenuemente su pigmentación.

Conclusión:

Logramos el objetivo, ya que pudimos obtenerlos sin ningún problema.

La práctica fue un poco tediosa pero la pudimos realizar sin inconvenientes

Logramos observar cómo se separaban los pigmentos, el de la zanahoria fue un

poco vano los pigmentos ya qué la zanahoria estaba algo deshidratada.

CUESTIONARIO:

1. La solubilidad en alcohol de los pigmentos es de menor a mayor: caroteno,

clorofila a, clorofila b y xantofila. Indicar que pigmento corresponde a cada banda

2. ¿Por qué empleamos éter etílico para extraer la clorofila?

La clorofila se asocia con lípidos y proteínas hidrofóbicas de las membranas

fotosintéticas, la clorofila son compuestos insolubles en agua pero solubles en

compuestos orgánicos tales como acetona, alcohol, cloroformo, éter etílico, etc.

estas sustancias extraen cualquier compuesto soluble en ellas como: resinas,

ceras, pigmentos (como la clorofila), hormonas liposolubles, vitaminas liposolubles

y otros lípidos, etc. cuando las pruebas con éter o cetona se le realiza a plantas

fibrosas, como las gramíneas (gramas, pastos) casi todo lo extraído es clorofila

3. ¿Qué pigmentos son los más abundantes?

El Caroteno y la Xantofila

4. Por encima de las clorofilas aparece más de una banda, ¿qué significado

tiene?

CATOTENO: Generalmente se conoce como caroteno al compuesto químico

llamado más específicamente β-caroteno. Este es el carotenoide más abundante

en la naturaleza y el más importante para la dieta humana, por lo que da su

nombre a todo un grupo de compuestos bioquímicos.

XANTOFILAS: Se conoce como xantofilas a los compuestos químicos

pertenecientes al grupo de los carotenoides que poseen uno o más átomos de

oxígeno en su estructura. Según la Unión Europea, el código alimentario para esta

familia de compuestos es E-161. Las xantofilas se encuentran también de forma

natural en muchas plantas, son compuestos pigmentados y presentan también

acción fotosintética. Estos pigmentos, más resistentes a la oxidación que las

clorofilas, proporcionan sus tonos amarillentos y parduzcos a las hojas secas.

5. Explica el proceso de separación por cromatografía en papel.

• Preparación del soporte o fase estacionaria

• Aplicación de la muestra y secado.

• Desarrollo de la cromatografía

• Secado de la placa

• Revelado y cuantificación.

6. Explica que es beta-caroteno. Cuales son los beneficios de su consumo.

No solo es capaz de ayudar a nuestra piel a broncearse. También ayuda a

proteger a nuestro organismo de enfermedades como el cancér gracias a sus

virtudes antióxidantes.