muestras válidas para el diagnóstico de una infección...
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Muestras válidas para el diagnóstico
de una infección nosocomial
Laboratorio de Bacteriología
Hospital Infantil de México Federico Gómez.
EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA EN
EL CONTROL DE INFECCIONES
IDENTIFICACION DE MICRORGANISMOS
INFORME DE PATRONES DE SUSCEPTIBILIDAD A DISTINTOS ANTIMICROBIANOS.
DESARROLLO Y APLICACIÓN DE METODOS PARA EL ESTABLECIMIENTO DE MICROORGANISMOS COMO RESPONSABLES DE BROTES EPIDEMICOS;
CULTIVO DE PERSONAL, PACIENTES, INSTRUMENTAL O SUPERFICIES AMBIENTALES PARA ESTABLECER PATRONES DE COLONIZACION EN CASOS DE EPIDEMIAS;
EDUCACION DEL PERSONAL DE SALUD.
PROCEDIMIENTO
PREANALITICO
INDICACION DEL EXAMEN
PREPARACION DEL PACIENTE
OBTENCION DE LA MUESTRA
MANIPULACION DE LA MUESTRA
CONSERVACION Y TRANSPORTE DE LA MUESTRA.
Una muestra mal tomada da resultados inútiles que confunden al profesional que la solicita y pueden llegar a constituir un riesgo para el paciente.
Obtención de la muestra
La muestra debe ser de material del sitio real de infección y tiene que ser tomada con el mínimo de contaminación de los tejidos adyacentes.
Deben establecerse los momentos óptimos para la toma de la muestra.
Cantidad suficiente.
Envases y Medios de cultivo.
Cultivos previos a la toma de antibióticos.
Rotular el recipiente en forma adecuada.
Criterios para rechazo de muestras
Muestras mal rotuladas
Tiempo de transporte más prolongado
Uso de recipientes no estériles
Cantidad de muestra insuficiente.
Solicitud de exámen bacteriológico:
Nombre del paciente.
No. De Registro
Sala o Servicio
Edad
Diagnóstico o indicación para el estudio
Tipo de muestra
Técnica de recolección
Hora de la toma y Fecha.
TIPOS DE MUESTRAS SANGRE
ORINA
LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO
LIQUIDO DE CAVIDADES SEROSAS:
Líquido pleural, peritoneal, pericárdico y sinovial.
MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR:
Secreción Faríngea, Nasal, Ocular, Otica, Senos paranasales.
MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR:
Esputo, Aspirado endotraqueal.
PIEL Y TEJIDO SUBCUTANEO:
Heridas y úlceras, Abscesos.
TRACTO GENITAL.
Vaginal, Uretral.
MATERIA FECAL.
Transporte de muestras
Objetivo:
Mantener la muestra tan próxima a
su estado original como sea posible.
o STUART
o AMIES
o CARY BLAIR
Condiciones de preservación para diferentes sistemas
de transporte. Conservar a 4C A 25ºC
Autopsias, lavado bronquial,
catéter,LCR, biopsia pulmón,
líquido pericardico, esputo,
orina
L.C.R. (bacterias), líquido
sinovial.
Transporte anaeróbico Líquido amniótico, abdominal,
cultivo anaeróbico, aspirados,
placenta, aspirado
transtraqueal, orina (punción
suprapúbica)
Directa inoculación Cultivos de sangre, Neisseria
gonorrhoeae
Transporte aeróbico Biopsias, Campylobacter,
Shigella, Vibrio, Yersinia
Médula ósea, respiratorio
superior, nasofaringe,
conjuntiva. Bordetella,
Neisseria, Salmonella.
Manual of CLINICAL MICROBIOLOGY. 7th edition.
American Society for Microbiology
Guía de recolección de muestras
Tipo de
muestra
Recolección Tiempo de
transporte
Temperatura No. de
muestras
Comentarios
Abscesos Solución
salina estéril ó
alcohol 70 %
Absceso
abierto
<= 2 horas T. Ambiente <
24 horas
1 1 absceso
1 lesión
Absceso
cerrado
Aspiración
con jeringa
Transporte
anaeróbico. >
1 ml
<= 2 horas. T.
ambiente
1
Cultivos de
sangre
Alcohol
isopropilico
70%
Adultos: 10 a
20 ml.
Niños: 1 a 10
ml
< 2 horas a T.
ambiente
3 en 24 horas Sepsis aguda: 2 a 3
(dentro de 10 min.)
Endocarditis aguda: 3 de
diferentes sitios ( 1 a 2
horas)
Endocarditis subaguda: 3
de 3 sitios diferentes (>
15 min.)
Catéter Alcohol 70 %
5 cm.
Colocar en
recipiente
estéril
< 15 min. < 24 h, 4ºC Cultivo
semicuantitativo
(método de Maki)
Neumonía asociada a ventilación
mecánica.
Criterios diagnósticos I. Clínicos generales.
II. Radiológicos
III. Microbiológicos
Con broncoscopio 1. Lavado broncoalveolar
2. Con cepillo protegido
No broncoscópicas 1. Aspirado traqueobronquial
1.Tinción de Gram
2.Cultivos cuantitativos
Aspirado traqueobronquial. Cuenta bacteriana >105
UFC/mL
Lavado broncoalveolar: cuenta bacteriana >
104 UFC/mL
Cepillo protegido: Cuenta bacteriana > 103
UFC/mL
Neumonía NOM.045-SSA2-2005
Esputo purulento ó drenaje purulento a través de cánula
endotraqueal que al exámen seco débil muestra < 10
células epiteliales y más de 20 leucocitos por campo.
Identificación de microorgnismo patógeno en hemocultivo,
en secreción endotraqueal (cepillado transtraqueal ó
biopsia ó en esputo
Neumonia asociada a
ventilación mecánica
Tratamiento antibiótico
Β-lactamasas de espectro
extendido.
Microorganismos
multidrogoresistentes
1. E.coli
2. Klebsiella pneumoniae
1. Pseudomonas aeruginosa
2. Acinetobacter baumannii
Sepsis abdominal e infección
del sitio quirúrgico
Sepsis abdominal
Primaria
Secundaria
Terciaria
Infección del sitio quirúrgico.
Se inicia poterior a las 48 horas del procedimiento
quirúrgico
Infección superficial
Infección profunda
De órganos y espacios
Sepsis abdominal e infección del sitio
quirúrgico: Diagnóstico:
Infecciones superficiales y
profundas.
Exploración física
– Dolor
– Eritema
– Aumento de volúmen
– Secreción purulenta
Infecciones de órgano o
espacio y sepsis abdominal
Evaluación clínica
Estudios de imagen
Ultrasonido
Tomografía
BacT/ALERT®
Sepsis abdominal e infección
del sitio quirúrgico
Estudios microbiológicos
1. Tinción de Gram
2. Cultivos
Hisopado de herida
Aspiración de
secreción
Biopsia de tejidos
DIAGNOSTICO:
Sepsis abdominal e infección
del sitio quirúrgico
Colonización vs Infección
Colonización: Presencia de microorganismos en un cultivo de
secreción ó biopsia de tejido sin la presencia de datos clínicos de inflamación
local ó sistémica. Aislamiento de un microrganismo obtenido de un drenaje ó
sonda.
Infección. Aislamiento microbiológico asociado con síntomas clínicos
locales
Infecciones complicadas de
vías urinarias
Bacteriuria asintomática
Infección de vias urinarias
asociada a sonda permanente.
Infección de vías urinarias
nosocomial en pacientes con
catéter vesical durante la
hospitalización.
Infección de vías urinarias no
complicada
Infección de vías urinarias
complicada.
Persistencia bacteriana.
Reinfección.
Recurrencia.
Infección de vías urinarias
aislada.
Infección de vías urinarias NOM.045-SSA2-2005
Orina a) Chorro medio
b) Cateterismo
c) Punción suprapúbica
Sonda de Foley
1. Urocultivos al momento
de la colocación
2. Cada cinco días durante
su permanencia
3. Al momento del retiro
- Mayor 50,000 UFC/mL
- Más de 50,000 UFC/mL
- Cualquier crecimiento
EPIDEMIOLOGIA
La IVU ocupa el 3er. Lugar entre las infecciones más frecuentes bacterianas en el niño.
En su mayoría son causadas por bacterias.
El grado de infección está determinado por el tamaño del inóculo, los factores de defensa del huésped y los factores de virulencia de la cepa infectante.
A nivel nosocomial pueden llegar a ser graves (uso de sondas, microorganismos resistentes, métodos exploratorios invasivos, pacientes inmunocomprometidos).
Infección asociada a línea vascular,
derivación ventriculoperitoneal y
dialisis peritoneal
• Más de un hemocultivo positivo obtenido de una vena periférica
• Manifestaciones clínicas (sistémicas).
• Se han descartado otras fuentes aparentes de infección.
• Presenta al menos un resultado positivo de cultivo de catéter
semicuantitativo (mayor de 15 UFC en un segmento de catéter).
• Debe ser aislado el mismo organismo del segmento de catéter y del
hemocultivo positivo.
• Diferencia entre los tiempos de positividad de los hemocultivos: 2
horas.
Peritonitis asociada a catéter
peritoneal Datos clínicos consistentes de peritonitis.
Conteo de leucocitos en líquido de diálisis mayor a 100
leucocitos/ml, con más de 50% de polimorfonucleares en
un líquido con estancia mínima de dos horas en cavidad.
Cultivo positivo con un microorganismo del líquido de
diálisis.
En el caso de dos ó más microorganismos considerar
peritonitis secundaria.
Infecciones asociadas a
ventriculostomías
Meningitis
Ventriculitis
Abscesos cerebrales
Procedimientos invasivos
– Craneotomías
– Colocación de dispositivos intracraneales
Medir la presión intracraneal
Drenar el L.C.R.
Infecciones asociadas a
ventriculostomía Meningitis ó ventriculitis
1. El paciente debe tener
microorganismos cultivados a
partir de LCR.
2. Al menos uno de los siguientes
signos ó sintomas:
1. Fiebre > 38ºC, dolor de cabeza.
2. Rigidez de nuca
3. Signos meníngeos
4. Signos de nervios craneales
5. Irritabilidad..
National Healthcare Safety Network
Centers for Disease Control and Prevention
3. Y al menos uno de los
siguientes:
o Aumento de la cuenta de
leucocitos, proteínas elevadas
y/o disminución de la glucosa en
LCR.
o Microorganismos identificados
en la tinción de Gram
o Hemocultivos positivos
o Prueba de antígeno positiva de
LCR, sangre u orina.
Tratamiento antimicrobiano Factores que influyen
Desconocimiento de la
prevalencia de resistencia de los
microorganismos causales de
ventriculitis
Es necesario conocer el mapa
microbiológico de las
infecciones nosocomiales de
cada hospital:
– Prevlencia de SAMR
– BGN productores de BLEE
– Carbapenemasas
– Microorganismos panresistentes.
Administración de
antimicrobianos antes
de la toma adecuada
de muestras de LCR
para cultivo
Susceptibilidad a antimicrobianos en Líquido Cefalorraquídeo 2013
Antibiótico Staphylococcus aureus
n=6
% S
Bencilpenicilina 17
Ciprofloxacina 17
Clindamicina 17
Detección de cefoxitina 17
Eritromicina 17
Gentamicina 100
Levofloxacina 17
Linezolid 100
Moxifloxacina 67
Nitrofurantoína 100
Oxacilina 17
Quinupristina/Dalfopristina 100
Resistencia inducible a clindamicina 100
Rifampicina 100
Tetraciclina 100
Tigeciclina 100
Trimetoprim/sulfametoxazol 100
Vancomicina 100
Susceptibilidad a antimicrobianos en Líquido Cefalorraquídeo
2013
Antibiótico Klebsiella
pneumoniae Stenotrophomonas maltophilia
Serratia marcescenss
n=9 n=4 n=4
%S %S %S
Amikacina 88 100
Ampicilina 0
Ampicilina/Sulbactam 38
BLEE 38
Cefepima 50 100
Cefoxitina 100 50
Ceftazidima 38 100
Ceftriaxona 38 100
Ciprofloxacina 75 100
Ertapenem 100 100
Gentamicina 38 100
Imipenem 100 100
Levofloxacina 100 67 100
Nitrofurantoína 0 0
Piperacilina/tazobactam 80 100
Tobramicina 38 75
TMP/SXT 50 0 100
PROCESO DE PREPARACIÓN
5
EVALUACION DE LOS METODOS
DE SUSCEPTIBILIDAD
UTILIZACION DE CEPAS ATCC
“AMERICAN TYPE CULTURE COLLECTION”
Escherichia coli ATCC 35218
Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Escherichia coli ATCC 25922
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Haemophilus influenzae ATCC 49247
RESISTENCIA BACTERIANA: ALGUNOS EJEMPLOS DEL IMPACTO
CLINICO EN EL
TRATAMIENTO DE INFECCIONES NOSOCOMIALES
Staphylococcus resistente a meticilina Staphylococcus spp Enterococcus spp multirresistentes, incluyendo resistencia a vancomicina El terror de Staphylococcus aureus con disminución de la susceptibilidad a vancomicina Gram-negativos con resistencia a cefalosporinas de tercera generación y monobactámicos por producción de b-lactamasas de espectro extendido (BLEEs): Klebsiella spp, Enterobacter spp Serratia spp entre otros Resistencia de otros Gram negativos a b-lactámicos por la producción de b- lactamasas inducibles tipo AmpC Resistencia de Pseudomonas spp, Acinetobacter spp a Carbapenemes