método de detección de coliformes
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Integrantes:
Mendoza Blancas DarghiTarazona Tapia Maricruz
Coliformes fecales Mesofilos
MICROORGANISMOS INDICADORES
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Libre microorganismos
consideradospatógenos
libre de bacterias indicadoras de contaminación
fecal
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Determinar la calidad bacteriológica del agua subterránea de consumo humano determinando el recuento de heterótrofos, coliformes totales y termotolerantes
22/10/13
Muestra:
Aguas Subterráneas de los 46 pozos de la Yarada y Los Palos –
Tacna
Muestra:
Aguas Subterráneas de los 46 pozos de la Yarada y Los Palos –
Tacna
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Composición y preparación de medios de cultivos y reactivos
Verde Brillante Bilis 2% Caldo (gramos/litro )
• Bilis de buey deshidratada………… 20,0gr • Lactosa ………………………………..10,0gr • Peptona……………………………… 10,0 gr• Verde brillante ………………………..0,0133gr
pH: 7,2 +/-0,2
Preparación de Brilla simple en tubos de 10 ml: 66 tubos x 10 ml = 660 ml pero se prepara 661
40 g -----------> 1000 ml X g <------------ 661 ml
X = 24,44 g para 66 tubos simples.
Preparación del Brilla doble en tubos de 10 ml: 33 tubos x 10 ml = 330 ml pero se prepara 331
40 g ------------> 1000 ml X g <------------- 331 ml
X = 13,24 g pero por ser doble se usa 13,24 x 2 = 26,48 g Agua Peptonada (gramos/litro)
• Peptona de carne………. 10,0 gr• Cloruro de sodio………... 5,0gr pH: 7,2 +/-0,2
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Agar Cuenta Colonias + TTC al 0,5%
Agua destilada estéril
+ 0,5 g de TTC
Filtro de celulosa estéril de 45 µm
Solución TTC al 0,5 % estéril
Agar Cuenta Colonias PCA +
TTC 0,5%
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Procedimiento
COLIFORMES TERMOTOLERANTES
Muestra de Agua Subterránea
Gas (+) 24
horas
Gas (-) 24
horas
Reincubar 24 HorasPrueba de
temperatura elevada en Caldo Bri l la e incubar a 44,5 +/- 0,2
°CGas (+) 48
horas: Prueba posit iva
para Coliformes
totales
Gas ( -) 48 horas: Prueba
negativa
Gas (+) 24 horas
Prueba confirmati
va posit iva
para Coliforme Termotole
rante
Gas (-) 24
horas
Prueba negativ
a
10ml
Caldo Brilla Doble
Concentrado
Caldo Brilla Simple
Concentrado
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Siembra en Caldo Brilla
Presencia de turbidez
Colonias coloreadas teñidas por la reducción del TTC
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conteo de bacterias mesófilas
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se observa que la mayoría del agua subterránea de los pozos muestreados (54%), no cumplió con la norma nacional establecida para la cantidad aceptable de
coliformes totales
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resultados
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MO Aerobios Mesófilos :
Muestra : preparados de nutricion enteral Metodo : recuento en placa por siembra en profundidad Medio : agar plate countDiluyente : agua de peptona 0,1 %
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MO Coliformes Fecales :
Muestra: preparados de nutricion enteral Metodo: recuento en placa Medio : agar violeta cristal rojo neutro bilis (VRBA)Diluyente: agua de peptona 0,1%
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MO AEROBIOS MESÓFILOS
•ISO 4833 :Directiva general para el recuento de microorganismos. Método por recuento de colonias a 30º C
•AF V 08-01 :Método de rutina para el recuento de microorganismos. Método de recuento de las colonias a 30º C
COLIFORMES TOTALES
•ISO 4831 Directiva general para el recuento de coliformes
•NF V 08-050 Método de rutina para la enumeración de coliformes mediante el recuento de colonias a 30º C.
Métodos normalizados
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