manual de protocol os 1

7/22/2019 Manual de Protocol Os 1

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MANUAL PARA EL ANLISIS DE AGUASRESIDUALES

I.C. DAYANA KATERINE GRISALES PENAGOSI.M. LINDA JOELA ORTEGA LPEZ

SERGIO ANDRS BLANCO LONDOO, ESPTATIANA RODRGUEZ CHAPARRO, Ph. D.

CARLOS EDUARDO MUOZ ORTIZ, ESPI.C. ANGLICA ANDREA MNDEZ REVOLLO

FACULTAD DE INGENIERAPROGRAMA INGENIERA CIVIL

UNIVERSIDAD MILITAR NUEVA GRANADABOGOT 2012


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CONTENIDO

Pg.

PRESENTACIN..................................................................................................................... 10

PREPARACIN DE SOLUCIONES ........................................................................................... 11

A. SOLUCIN H2SO41.0N ................................................................................................. 11

B. SOLUCIN H2SO40.5N0.05N .................................................................................... 11

C. FACTOR DE DILUCIN .................................................................................................. 12

ANLISIS FSICOS .................................................................................................................. 14

1. COLORMTODO N 2120 ...................................................................................... 14

A. CONCEPTO .................................................................................................................... 14

B. PRINCIPIO DEL MTODO ............................................................................................ 14

C. EQUIPOS Y MATERIALES ............................................................................................. 14

D. PROCEDIMIENTO ......................................................................................................... 15

E. CLCULOS ...................................................................................................................... 16

2. SLIDOSMTODO N 2540 .................................................................................... 16

A. CONCEPTO .................................................................................................................... 16

B. PRINCIPIO DEL METODO ............................................................................................ 16


D. PROCEDIMIENTO ......................................................................................................... 17

ANLISIS QUMICOS ............................................................................................................. 20


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3. ALCALINIDAD Y CIDOS VOLTILES TOTALESMTODO N 2320 .......................... 20

A. CONCEPTO ................................................................................................................... 20

B. PRINCIPIO DEL METODO ........................................................................................... 20

C. EQUIPOS Y MATERIALES ............................................................................................ 20

E. PREPARACIN DE REACTIVOS .................................................................................. 20

F. PROCEDIMIENTO ......................................................................................................... 22

G. Calibracin medidor de pH ........................................................................................... 22

H. CLCULOS .................................................................................................................... 24

4. DUREZA ........................................................................................................................ 26

A. CONCEPTO ................................................................................................................ 26

B. MATERIALES .............................................................................................................. 26

C. REACTIVOS ................................................................................................................ 27

D. PROCEDIMIENTO ..................................................................................................... 27

E. CALCULOS ................................................................................................................. 28

5. REQUERIMIENTO EN DEMANDA OXIDANTEMTODO N 2350 ............................ 28

A. CONCEPTO ................................................................................................................... 28

B. PRINCIPIO DEL MTODO ........................................................................................... 28


D. REACTIVOS ................................................................................................................... 29

E. PREPARACIN DE LOS REACTIVOS .......................................................................... 29

F. PROCEDIMIENTO ......................................................................................................... 30

G. CLCULOS .................................................................................................................... 30


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I. Clculo de la produccin y dosis de ozono ................................................................ 31

6. CLORUROSMTODO N 4500-Cl-........................................................................... 32

A. CONCEPTO .................................................................................................................... 32

B. PRINCIPIO DEL MTODO ............................................................................................ 32


D. REACTIVOS .................................................................................................................... 32

F. PROCEDIMIENTO .......................................................................................................... 33

G. CLCULOS .................................................................................................................... 34

7. FSFOROORTOFOSFATOS (PO4-2)MTODO N 4500-P ..................................... 35

A. CONCEPTO .................................................................................................................... 35

B. PRINCIPIO DEL METODO ............................................................................................ 35


D. REACTIVOS .................................................................................................................... 35


F. PROCEDIMIENTO ......................................................................................................... 36

G. CALCULOS .................................................................................................................... 39

8. SULFATOSMTODO N 4500-SO42-........................................................................ 40

A. CONCEPTO ................................................................................................................... 40



D. REACTIVOS ................................................................................................................... 40

E. PREPARACION DE REACTIVOS .................................................................................. 40


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F. PROCEDIMIENTO .......................................................................................................... 41

G. CALCULOS .................................................................................................................... 43

9. NITRGENOMTODO N 4500-Norg...................................................................... 44A. CONCEPTO ................................................................................................................... 44



D. PREPARACIN DE REACTIVOS ................................................................................. 45

E. PROCEDIMIENTO......................................................................................................... 45

F. CLCULOS ..................................................................................................................... 47

10. DEMANDA QUMICA DE OXIGENO (DQO)MTODO N 5220 ............................ 47

A. CONCEPTO ................................................................................................................... 47

B. PRINCIPIO DEL METODO ........................................................................................... 47


D. REACTIVOS ................................................................................................................... 48


F. PROCEDIMIENTO ......................................................................................................... 49

11. DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGENO DBO5MTODO N 5210 ........................ 52

A. CONCEPTO ................................................................................................................... 52

B.PRINCIPIO DEL METODO ............................................................................................ 52

B. EQUIPOS Y MATERIALES ............................................................................................. 53

C. REACTIVOS .................................................................................................................... 53

D. PREPARACIN DE REACTIVOS .................................................................................. 53


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6

E. PROCEDIMIENTO..........................................................................................................55

F. CLCULOS ..................................................................................................................... 57

12. RESIDUAL DE PEROXIDO DE HIDROGENO ................................................................. 59A. CONCEPTO.................................................................................................................... 59

B. EQUIPOS Y MATERIALES ............................................................................................... 59

C. REACTIVOS ................................................................................................................ 59

D. PROCEDIMIENTO.......................................................................................................... 60

13. CONSTITUYENTES ORGNICOS ABSORCIN-UVMTODO N 5910 .................. 62

A. CONCEPTO ................................................................................................................... 62

B. EQUIPOS Y MATERIALES ............................................................................................ 62

C. PROCEDIMENTO .......................................................................................................... 62

D. CLCULOS .................................................................................................................... 62

14. MEDIDA DE LA ABSORCIN UV .................................................................................. 64

A.PRINCIPIO DEL MTODO ............................................................................................ 64

B.EQUIPOS Y MATERIALES.................................................................................................... 64

C.PROCEDIMIENTO............................................................................................................... 65

2. Preparacin de la muestra................................................................................................ 65

Medicin de la absorcin ultravioleta (UV)........................................................................... 66

Como extraer datos a una USB............................................................................................. 68

15. MTODO PARA DETERMINACIN DE FOSFORO- UTILIZANDO ELESPECTOFOTOMETRO DR 5000 ....................................................................................... 69

A. PRINCIPIO DEL MTODO ........................................................................................... 69



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C. REACTIVOS ................................................................................................................... 69

D. PROCEDIMIENTO ........................................................................................................ 69

E. CLCULOS ...................................................................................................................... 71

16. MTODO PARA DETERMINACIN DE NITROGENO TOTAL (2 a 150 mg/L N), MTODODIGESTIN DE PERSULFATO ............................................................................................ 72



C. REACTIVOS ................................................................................................................... 72

D. PROCEDIMIENTO ........................................................................................................ 72

E. CLCULOS ..................................................................................................................... 75

17. MTODO PARA DETERMINACIN DE CARBONO ORGNICO TOTAL (COT), MTODODIRECTO ........................................................................................................................... 76



C. REACTIVOS ................................................................................................................... 76

D. PROCEDIMIENTO ........................................................................................................ 77

E. CLCULOS ..................................................................................................................... 79

18. MTODO PARA DETERMINAR METANO POR DESPLAZAMIENTO ............................. 79

A. PRINCIPIO DEL MTODO ........................................................................................... 79


C. REACTIVOS ................................................................................................................... 79

E. ESQUEMA DEL MONTAJE ........................................................................................... 80

F. PROCEDIMENTO .......................................................................................................... 80


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.............................................................................................................................................. 81

19. HIDROGENO Y METANO POR CROMATOGRAFIA GASEOSA ..................................... 82

A.CONCEPTO .................................................................................................................... 82


C. PROCEDIMIENTO.............................................................................................................. 82

D. CALCULOS .................................................................................................................... 94

ANLISIS DE SUELOS ............................................................................................................ 96

.............................................................................................................................................. 96

20. MTODO PARA DETERMINAR CALCIO Y MAGNESIO SOLUBLES EN SUELO ............... 96

A. MTODO CUANTIFICACIN COMPLEXOMTRICA. .............................................. 96


C. REACTIVOS ................................................................................................................... 96

D. PREPARACIN DE LOS REACTIVOS ......................................................................... 96

E. PROCEDIMIENTO......................................................................................................... 97

F. CLCULOS ..................................................................................................................... 97

21. MTODO PARA LA MEDICIN DE pH EN SUELOS ...................................................... 99

A. EQUIPOS Y MATERIALES ............................................................................................ 99

B. REACTIVOS ................................................................................................................... 99

C. PREPARACIN DE LOS REACTIVOS .......................................................................... 99

D. PROCEDIMIENTO ........................................................................................................ 99

22. MTODO PARA LA MEDICIN DE LA MATERIA ORGNICA EN SUELOS .................. 100

A. EQUIPOS Y MATERIALES ........................................................................................... 100


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B. PROCEDIMIENTO ....................................................................................................... 100

C. CLCULOS ................................................................................................................... 100

ANLISIS MICROBIOLGICO............................................................................................. 101A.CONCEPTO .................................................................................................................... 101

22. TCNICA DEL FILTRO MEMBRANA PARA MIEMBROS DEL GRUPO COLIFORME . 102

A. PRINCIPIO DEL METODO .......................................................................................... 102

B. EQUIPOS Y MATERIALES ........................................................................................... 102

C. REACTIVOS .................................................................................................................. 102

D. PREPARACIN DE REACTIVOS ................................................................................ 102

E. PROCEDIMIENTO........................................................................................................ 103

F. CLCULO ...................................................................................................................... 104

ANLISIS DE TOXICIDAD ............................................................................... 105

23. ENSAYO DE TOXICIDAD TOTAL CON BULBOS DE CEBOLLAALLIUM CEPA L....... 106

A. CONCEPTO .................................................................................................................. 106

B. EQUIPOS Y MATERIALES ........................................................................................... 106

D. REACTIVOS .................................................................................................................. 106

E. PREPARACIN DE LOS REACTIVOS ......................................................................... 106

F. PROCEDIMIENTO ........................................................................................................ 107

G. CLCULOS ................................................................................................................... 109

BIBLIOGRAFA ..................................................................................................................... 111
http://c/Users/tatiana.rodriguez/Tareas%20temporales/Manualdeprotocolos1.docx%23_Toc375040549http://c/Users/tatiana.rodriguez/Tareas%20temporales/Manualdeprotocolos1.docx%23_Toc375040549http://c/Users/tatiana.rodriguez/Tareas%20temporales/Manualdeprotocolos1.docx%23_Toc375040549http://c/Users/tatiana.rodriguez/Tareas%20temporales/Manualdeprotocolos1.docx%23_Toc375040549


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PRESENTACIN

El Laboratorio de Saneamiento Ambiental de la Universidad Militar Nueva Granadapresenta en este documento las tcnicas de laboratorio para el anlisis de la calidad delagua residual y suelos con el objetivo de unificar los procesos seguidos por los usuarios dellaboratorio en el desarrollo de las diferentes prcticas.

Para la elaboracin de este manual se consultaron las normas del Standard Methods forthe Examination of Water and Wastewater de AWWA, APHA y WEF ao 2005, as como elManual Prctico de Anlise de gua de Funasa Brasil ao 2006 y el manual de Mtodos

Analticos del Laboratorio de Suelos del IGAC 2006.

El manual aborda anlisis fsicos, qumicos y microbiolgicos en aguas residuales y suelos.En la primera parte se abordan los anlisis fsicos, en la segunda parte se tratanparmetros de anlisis qumicos de compuesto inorgnicos y orgnicos presentes en lasaguas residuales y gases. En la tercera parte se presentan anlisis para suelos y extractosde suelo. En la cuarta y quinta parte se presenta una metodologa para la determinacinde microorganismos del grupo Coliforme tanto en aguas como en suelos y un ensayobiolgico para la determinacin de toxicidad en aguas.

De acuerdo con lo anterior deseamos que este documento se utilidad para aquellaspersonas que deseen realizar ensayos de calidad del agua residual y suelos.


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PREPARACIN DE SOLUCIONES

A. SOLUCIN H2SO41.0N

Para preparar una solucin de H2SO4 1N diluir cuidadosamente 30mL de H2SO4

concentrado en un baln de 1000mL con agua destilada.

B. SOLUCIN H2SO40.5N0.05N

A partir de la solucin de H2SO4 normalizada se obtienen las respectivas soluciones

empleado la siguiente ecuacin:

Donde:

V1= Volumen a tomar

C1= Concentracin conocida

V2= Volumen a preparar

C2= Concentracin esperada

Como ejemplo para concentraciones de 0.5N se requiere diluir 500mL de solucin 1N en

un baln de 1.0L con agua destilada de acuerdo con lo siguiente:

Como ejemplo para concentraciones de 0.05N se requiere diluir 25mL de solucin 1N en

500mL de agua destilada de acuerdo con lo siguiente:


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C. FACTOR DE DILUCIN

Para obtener diferentes concentraciones de muestras se requiere realizar diluciones de lamisma para esto se emplea el Factor de Dilucin, el cual se presenta en la siguienteecuacin:

Donde:

F.D = Factor de Dilucin

VF= Volumen final que se coloca de la muestra

VT= Volumen total (VF+ Vrestantepara completar)

C = Concentracin

D. PREPARAR SOLUCIONES HCL (10 mol/L)

Peso molecular HCL

H=1 gr/mol O=16 gr/mol Cl=35,5 gr/mol

Densidad HCL = 1,175 gr/cm3

Masa = densidad x volumen

= 1,175 gr/cm3x 1000 cm3

= 1175 gr de HCL en 1L de solucin

Como la solucin es de 37% de HCL, las cantidades de soluto y solvente que ah en un litro

son:


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ANLISIS FSICOS

1. COLORMTODO N 2120

A. CONCEPTO

Usualmente cuando se examina el agua, las primeras propiedades que se suelenconsiderar son las siguientes: color, sabor y olor, caractersticas inherentes a ella. El aguade uso domstico e industrial tiene como parmetro de aceptacin la de ser incolora,pero en la actualidad, gran cantidad del agua disponible se encuentra coloreada y se tieneel problema de que no puede ser utilizada hasta que no se le trata removiendo dichacoloracin.

Las aguas superficiales pueden estar coloreadas debido a la presencia de iones metlicosnaturales (hierro y manganeso), humus, materia orgnica y contaminantes domsticos eindustriales como en el caso de las industrias de papel, curtido y textil; esta ultima causacoloracin por medio de los desechos de teido los cuales imparten colores en una ampliavariedad y son fcilmente reconocidos y rastreados

B. PRINCIPIO DEL MTODO

Se pueden efectuar dos medidas de color en el agua: real y aparente. El color real del aguanatural es el que presenta cuando se ha eliminado la turbidez (filtrando o centrifugando),

siendo principalmente causado por materiales hmicos coloidales. Por el contrario, elcolor aparente es determinado directamente de la muestra original (sin filtracin nicentrifugacin), es debido a la existencia de slidos en suspensin.

Para la determinacin de color en el agua existe el mtodo espectrofotomtrico, el cual seusa principalmente en aguas industriales contaminadas que tienen colores poco usuales,y que no pueden ser igualados por el mtodo colorimtrico. El color se determinamediante un espectrofotmetro, cuyo esquema de funcionamiento se recoge en la figura,a tres longitudes de onda distribuidas por el conjunto del espectro visible: 1 = 436nm ;2= 525nm y 3 = 620 nm, de acuerdo con lo sugerido por een (1999).

C. EQUIPOS Y MATERIALES

Espectrofotmetro DR 2800 o DR 5000.

Bomba de vaco.

Membrana de filtracin de 1.2 m de fibra de vidrio o centrifugar por 5 min a 1500rpm.


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Probeta 50mL.

D. PROCEDIMIENTO

a. Para determinar el color real se debe filtrar la muestra en filtro de fibra de vidrio de 1,2m o en filtro de acetato de celulosa de 0,45 m y para color aparente tomar la muestrade agua directamente de la original.

1. Encender el espectrofotmetro y seleccionar la longitud de onda en 436nm.2. Calibrar el equipo con la lectura inicial del blanco.3. Realizar la lectura de la absorbancia de la muestras de agua.

a) Paso 1 b) Paso 2 a 3 c) Paso 4

Figura 1. Pasos para el procedimiento de medicin de color

b. Si se utiliza el espectrofotmetro DR 2800 O DR 5000, las unidades de medida sondirectamente UPC, as:

1. Seleccionar el programa correspondiente a color 455 nm o 465 nm.

2. Insertar la multiadaptador usando el portacelda respectivo frente al usuario.

3. Para preparar el blanco se llena un recipiente de 10 ml de agua destilada hasta el

borde indicado.

4. Llenar el segundo recipiente hasta el aforo de la muestra a analizar.

5. Limpiar los recipientes de tal manera que estn mojados ni que queden rastro dehuellas; luego, insertar el blanco pulsar , y retirar una vez salga .

6. Realizar los mismos con el recipiente que contiene la muestra y pulsar .


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E. CLCULOS

Para el numeral (a) el color se expresa en trminos de absorbancia (cm -1) en la longitudde onda 436 nm .

2. SLIDOSMTODO N 2540

A. CONCEPTO

Los slidos se refiere a la materia en suspensin o disuelta en agua o agua residuales. Losslidos pueden afectar el agua o adversamente la calidad del efluente. Aguas con altocontenido de slidos disueltos en general son de menor potabilidad y pueden inducir areacciones fisiolgicas en el consumidor. Por estas razones, un lmite de 500mg de slidosdisueltos/l es el deseado para el consumo en aguas.

B. PRINCIPIO DEL METODO

Son los materiales suspendidos y disueltos en un agua. Se obtienen despus de someter alagua a un proceso de evaporacin a temperaturas comprendidas entre 103 y 105C. Laporcin filtrable representa a los Slidos Coloidales Totales Disueltos y la no-filtrable sonlos Slidos Totales en Suspensin.

El contenido de slidos voltiles se interpreta en trminos de materia orgnica, teniendoen cuenta que a 55050C la materia orgnica se oxida formando el gas carbnico y aguaque se volatilizan. Sin embargo, la interpretacin no es exacta puesto que la prdida depeso incluye tambin prdidas debido a descomposicin o volatilizacin de ciertas sales

minerales como por ejemplo las sales de amonio o carbonato de magnesio.


Desecador

Bomba de vaco.

Balanza analtica.

Horno tipo mufla 550C.

Horno (103C y 105C).

Embudo tipo Buchner para membrana con dimetro de 47mm.

Membrana filtrante tipo micro-fibra de vidrio, con tamao nominal de abertura de

0,45m o 1,2m. Capsulas de porcelana.

Pinza metlica.

Probeta de 50mL.

Guantes para mufla.


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D. PROCEDIMIENTO

PREPARACIN DE CPSULA Y MEMBRANA PARA ST - SST

a. Calcinar la capsula de porcelana en mufla a 550C hasta que la masa sea constante(aproximadamente 15 minutos) y dejar enfriar en el desecador.

b. Colocar una membrana filtrante en el sistema de filtracin.c. Hacer 3 lavados a la membrana con el sistema de filtracin utilizando 20mL de

agua destilada para cada lavado (total de 60mL) que deben ser despreciados.d. Colocar la membrana en la capsula de porcelana y calcinar en la mufla por 15

minutos y dejar enfriar.

1. DETERMINACIN DE SLIDOS TOTALES (ST)

Este procedimiento es limitado a una cantidad de slidos secos de 200mg, debido a la

posibilidad de la formacin de una capa que impide el secado de los residuos.

a. Preparar una cpsula de porcelanab. Determinar la masa M1 en gramos en la balanza analtica.c. Transferir un volumen de la muestra V1(en mililitros.d. Secar la muestra en el horno a 103C-105 C con tiempo suficiente para lograr una

masa constante (24 horas) y determinar la masa despus de enfriar en eldesecador M2.

Ecuacin 12. DETERMINACIN DE SLIDOS TOTALES FIJOS Y VOLTILES (STFSTV)

a. Despus de determinar la concentracin de los slidos totales, colocar la cpsulacon la muestra en la mufla a 550C para alcanzar masa constante (en este caso, 15minutos para una nica muestra y, no ms de 2 horas cuando son varias muestras).

b. Determinar la masa despus del enfriamiento en el desecador (M3, en g) en labalanza analtica y calcular STF con la Ecuacin 2 y STV con la Ecuacin 3:

Ecuacin 2

Ecuacin 33. DETERMINACIN DE SLIDOS SUSPENDIDOS TOTALES (SST)

Este procedimiento es limitado a una cantidad de slidos secos de 200mg debido a laposibilidad de la formacin de una capa que dificulta el secado.


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a. Preparar una cpsula y una membrana para el ensayo.b. Determinar la masa del conjunto (membrana + cpsula)M4en (g).c. Colocar con una pinza metlica la membrana calcinada en el sistema de filtracin..d. Filtrar un volumen conocido (V2) de muestra, utilizando el sistema de filtracin.

e. Transferir la membrana que contiene el residuo a la cpsula de porcelana.f. Secar el conjunto (membrana + cpsula) a 103C 105C hasta conseguir una

masa constante (por 24 horas) y despus enfriar en el desecador.g. Determinar la masa M5en (g) y calcular con la Ecuacin 4.

Ecuacin 4

Figura 2. Paso d a f

4. DETERMINACIN DE SLIDOS SUSPENDIDOS FIJOS Y VOLTILES (SSFSSV)

a. Despus de la determinacin de la concentracin de slidos suspendidos totales,colocar el conjunto en la mufla, a 550C por un tiempo suficiente hasta conseguir

una masa constante (aproximadamente 15 minutos) y despus de enfriar endesecador determinar la masa M6en (mg).b. Calcular SSF con la Ecuacin 5 y SSV con la Ecuacin 6

Ecuacin 5 Ecuacin 6

5. DETERMINACIN DE SLIDOS DISUELTOS TOTALES, FIJOS Y VOLTILES (SDT, SDF Y SDV)

Los valores de las concentraciones de slidos disueltos se pueden obtener por ladiferencia entre las masas de los slidos totales y de los slidos suspendidos,considerando las respectivas fracciones (totales, fijos y voltiles).


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ST = SST + SDT = SSV +SSF + SDV + SDF = SVT + SFT;

SVT = SSV + SDV y SFT = SSF + SDF;

SST = SSV + SSF y SDT = SDV + SDF;

Figura 3. Clasificacin de los slidos

Slidos Totales (ST)

Slidos Suspendidos Totales (SST) Slidos Disueltos Totales (SDT)

SlidosSuspendidos

Fijos (SSF)

SlidosDisueltos

Voltiles (SDV)

SlidosDisueltos

Fijos (SDF)

Slidos Fijos Totales (SFT)

SlidosSuspendidos

Voltiles (SSV)

Slidos Voltiles Totales (SST)


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ANLISIS QUMICOS

3. ALCALINIDAD Y CIDOS VOLTILES TOTALESMTODO N 2320

A. CONCEPTO

La alcalinidad de un agua es su capacidad de neutralizar cidos. Las sustancias mscomnmente encontradas en aguas superficiales causadoras de alcalinidad son loscarbonatos (CO3

-2), bicarbonatos (HCO3-) e hidrxidos (OH-). No obstante, algunas sales de

cidos dbiles como boratos, silicatos, nitratos y fosfatos pueden tambin contribuir a laalcalinidad de estar tambin presentes. Estos iones negativos en solucin estncomnmente asociados con iones positivos de calcio, magnesio, potasio, sodio y otroscationes. El bicarbonato constituye la forma qumica de mayor contribucin a laalcalinidad. Dicha especie inica y el hidrxido son particularmente importantes cuando

hay gran actividad fotosinttica de algas o cuando hay descargas industriales en un cuerpode agua (APHA, 2005).

La alcalinidad se expresa como la concentracin equivalentes de iones hidroxilo, mg/l ocomo la cantidad equivalente de CaCO3en mg/l.


Los iones relacionados a la alcalinidad presentes en una muestra como resultado de ladisociacin o la hidrlisis de solutos, reacciona con la adicin de un cido patrn. Laalcalinidad como la acidez depende del valor del punto final del pH fijado.


Medidor de pH, precisin 0.01

Buretas digitales o vidrio, 10, 25mL

Pipeta volumtrica

Beaker, 80mL

Centrfuga

cido sulfrico (H2SO4) concentrado, p. a.

Hidrxido de Sodio (NaOH) en lentejas, p. a.

E. PREPARACIN DE REACTIVOS

Solucin normalizada de cido sulfrico (H2SO4) 1N

Pipetear 27.5mL de (H2SO4) concentrado y transferir lentamente a un baln volumtricode 1L con aproximadamente 500mL de agua y completar el volumen del baln.


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La normalizacin de la solucin de H2SO4se realiza con patrn primario de Tetra Borato deSodio decahidratado (Brax), Na2B4O7.10H2O.

La normalizacin debe ser hecha por triplicado, con masas conocidas del patrn en torno

de 0,1900 g, disueltas en cerca de 50mL de agua destilada. Se deben usar 2 gotas desolucin de azul de bromotinol como indicador de punto final (color amarillo) o metilnaranja hasta un punto final incoloro, el clculo de la concentracin normalizada es:

Tener en cuenta 0.5N =1M

Para preparar una solucin de H2SO40,05N tomar de la solucin patrn 1,0N.

Solucin normalizada de Hidrxido de sodio (NaOH) 1N

En un beaker limpio disolver 40 g de NaOH con agua destilada. Dejar enfriar y transferir lasolucin cuantitativamente para el baln volumtrico de 1000 ml. Completar el volumendel baln hasta la marca con agua destilada, agitar para homogenizar y transferir para labureta.

La solucin de NaOH es inestable: la reaccin con CO2 atmosfrico exige normalizacinsemanal.

La normalizacin de NaOH debe ser hecha utilizando como patrn primario Biftalato cidode Potasio (KPH).

El KPH se debe secar previamente en el horno a 120 C, por 24 horas y enfriar endesecador. La normalizacin deber ser realizada por triplicado. Se deben determinarmasas de KPH prximas de 0,1022 g para normalidades menores o iguales de 0.05N pesar0,01022g, y debe anotarse el valor exacto de cada una. Posteriormente, se disuelven encerca de 25 ml de agua destilada, en frascos erlenmeyer.

En los frascos erlenmeyer que contienen la solucin de KPH, adicionar 2 gotas de solucinde fenolftalena, trabajar en fondo blanco, luego entonces, adicionar la solucin de NaOHhasta alcanzar una leve coloracin rosada que persista, anotar cada volumen.

La molaridad o normalidad de la solucin normalizada se calcula con la ecuacin 7:

22,204

1000)(

xvolumeNaOH

xgmassaKPHMNaOH Ecuacin 7

42,381)(

1000)(

4242 xmLSOvolumenH

boraxxgmasaM SOH


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La solucin del indicador de fenolftalena se prepara, disolvindose 80 mg de fenolftalenaen 60 ml de Etanol p.a., y completar con agua destilada hasta 100 ml en un balnvolumtrico.

Para preparar una solucin de NaOH 0,02N tomar de la solucin patrn 1,0N.

NOTA: Cuando el indicador es la solucin de fenolftalena se tiene una solucintrasparente para la regin cida y rosa en la regin alcalina.

F. PROCEDIMIENTO

G. Calibracin medidor de pH

Calibrar el medidor de pH marca Schott con las soluciones buffer de pH 7,0 y 4,0 atemperatura ambiente. De la siguiente manera.

a. Lavar la sonda (sensor) y secarlo.b. Presionar la tecla Cal en modo Ct 1 y sumergir en la solucin buffer de pH 7,0.c. Presionar la tecla run/enter en modo Ct 1 AR parpadea y esperar a que se

estabilice el valor de milivoltaje (el valor es estable cuando aparece modo Ct 2).d. Lavar la sonda (sensor) y secarlo.e. Sumergir la sonda en la solucin buffer de pH 4,0.f. Presionar la tecla run/enter AR parpadea y esperar a que se estabilice el valor de

milivoltaje.g. Presionar la tecla pH.

Calibrar el medidor de pH marca Ezoda PL-700AL con las soluciones buffer de pH 7,0 y 4,0a temperatura ambiente. De la siguiente manera.

a. Asegurarse que el sensor es el electrodo de pH. Este equipo es multiparamtrico yhay sensores de oxgeno disuelto y conductividad.

b. Sumergir el electrodo dentro de la solucin buffer pH 7.00. Agitar suavemente yesperar hasta que la lectura sea estable. Presionar y mantener la tecla /CAL por 3

segundos. Aparecer en la pantalla CAL y parpadea el valor 7.00. cuando lapantalla deje de parpadear e indique SA, luego END mientras la calibracin

termina, y regresara al modo de medicin.c. Enjuagar el electrodo con agua limpia y secarlo con un pao seco o con papel scott.

Sumergir el electrodo dentro de la solucin buffer pH 4.00 como en los pasosanteriores

d. Despus de la calibracin realizada con el buffer pH 4.00, la pantalla indicara elporcentaje de pendiente (PTS) para mostrar el estado del electrodo. Si el PTS estpor debajo de 70% o por encima de 130%, el electrodo debe ser sustituido. Unapendiente con un valor 100% es Lo ideal.


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NOTA:a. Aparecer el icono indicador de error de calibracin, y Err en lugar de SA, si la

calibracin fallo.b. Al hacer 2 o 3 puntos de calibracin, calibrar primero con el buffer para pH 7 y en

seguida con el buffer para el pH 4 0 10.c. Calibracin del pH tipo USA o NIST se puede cambiar en la configuracin

avanzada.d. Los puntos de calibracin de USA son 1.68, 4.01, 7.00, 10.01 y 12.45.e. Los puntos de calibracin de NIST son 1.68, 4.01, 6.86, 9.18 y 12.45

NOTA PARA TODOS LOS USUARIOS

*El agitador del medidor de pH solo se puede usar con beaker o Erlenmeyer concapacidad hasta de 1000ml.

1. ALCALINIDAD PARCIAL

a. Centrifugar la muestra por 3min a 1500rpm. La centrifugacin se puede obviar si lamuestra no presenta un contenido considerable de slidos en suspensin.

b. Homogenizar el contenido del frasco de la muestra.c. Medir 50mL de la muestra y transferir para un beaker de 100mL.d. Colocar una barra magntica y acomodar el beaker en un agitador magntico.e. Introducir el electrodo del potencimetro en el contenido del beaker y dejar en

agitacin.f. Llenar una bureta de 50mL con H2SO4 0,05N y unir al conjunto del beaker y del

electrodo.

g. Esperar hasta que se estabilice el pH original de la muestra.h. Iniciar la titulacin hasta que se obtenga un pH de 5.75 y anotar el volumen

gastado (V1).

2. ALCALINIDAD TOTAL

a. Continuar titulando hasta un pH de 4.3, el volumen gastado (V2) es el volumentotal y con este se calcula la alcalinidad total.

3. CIDOS VOLTILES TOTALES

a. Al terminar el ensayo de alcalinidad en pH 4,3 bajar el pH hasta 3,0 con H2SO4sincontabilizar el volumen gastado.

b. Agregar pocas perlas de vidrio y calentar en una plancha de calentamiento hastaque salga vapor y dejar por 3min, hacer esto en un lugar aireado preferiblementecon campana extractora y no aspirar los vapores.


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c. Dejar enfriar en un lugar y luego subir el pH hasta 4,0 con solucin normalizada0,02N de NaOH, colocar en cero la bureta y titular con NaOH hasta pH 7,0.

H. CLCULOS

1. ALCALINIDAD PARCIAL

, Ecuacin 8Donde:

N=Normalidad de H2SO4.

=Volumen gastado en la titulacin de H2SO4 (ml)

=Volumen de muestra, (ml)

2. ALCALINIDAD TOTAL

, Ecuacin 9Donde:

N=Normalidad de H2SO4

=Volumen gastado en la titulacin de H2SO4,(ml)=Volumen de muestra, (ml)

3. ALCALINIDAD INTEMEDIA

, Ecuacin 10

4. CIDOS VOLTILES TOTALES


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, Ecuacin 11Donde:

Vtitulado= Volumen de la muestra titulada, (ml)

NNaOH= Normalidad del Hidrxido de Sodio

Vmuestra= Volumen de la muestra, (ml)


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4. DUREZA

A. CONCEPTOLa dureza es una propiedad qumica del agua caracterizada por la presencia decarbonatos, bicarbonatos, cloruros, sulfatos y ocasionalmente nitratos de calcio ymagnesio. Desde el punto de vista domstico e industrial, la dureza es indeseable, enprocesos como el lavado de ropa, pisos y losa, adems de algunos procesos industriales delimpieza, puesto que genera un mayor consumo de jabn, al producirse sales insolubles.En calderas y sistemas enfriados por agua, se producen incrustaciones en las tuberas yuna prdida en la eficiencia de la transferencia de calor. Importantes concentraciones dedureza son indeseables y deben ser removidas antes de que el agua tenga uso apropiadopara las industrias de bebidas, lavanderas, acabados metlicos, teidos y textiles.Igualmente adiciona un sabor indeseable al agua potable, por lo tanto en este sentido,ms que un parmetro de riesgo potencial, representa un parmetro de calidad del

recurso. La mayora de los suministros de agua potable tienen un promedio de 250 mg/lde dureza. Niveles superiores a 500 mg/l son indeseables para uso domstico.La dureza es caracterizada comnmente por el contenido de calcio y magnesio yexpresada como carbonato de calcio equivalente. Es importante aclarar que existen dostipos de dureza:

Dureza Temporal o Clcica:La cual est determinada por el contenido de carbonatos ybicarbonatos de calcio y magnesio. Esta puede ser eliminada mediante ebullicin del aguay posterior eliminacin de precipitados formados por filtracin.

Dureza Permanente o Total:Est determinada por todas las sales de calcio y magnesio

excepto carbonatos y bicarbonatos. No puede ser eliminada por ebullicin del agua.

B. MATERIALES 2 Erlenmeyer de 250ml

1 Beaker de 250ml

Probeta aforada de 50ml

Goteros

Bureta dosificadora

Agua destilada

Plancha agitadora Barra magntica


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C. REACTIVOS Solucin Buffer pH=10 (Disolver 6.56 gr. de NH4Cl y 57 ml de NH4OH en agua

destilada y aforar a 100 ml.)

Solucin Buffer pH=12 Solucin indicadora Negro de Ericromo (Disolver 0.5 g de Eriocromo negro T y 4.5 gr

de clorhidrato de hidroxilamina en 100 ml de etanol).

Solucin indicadora Murexide

Solucin Titulante EDTA (Disolver 2 gr de EDTA (sal disdica) ms 0.05 gr deMgCl2.6H2O en agua destilada y aforar a 1000 ml).

D. PROCEDIMIENTOa) Dureza Total

I. Preparar 50ml la muestra a evaluar, depositndola en el respectivo erlenmeyer,adems introduciendo la barra magntica y poniendo este conjunto sobre laplancha, para comenzar con la agitacin.

II. A continuacin, colocar 10 gotas de solucin Buffer pH=10, en el erlenmeyer.III.Adicionar 3 gotas de solucin indicadora Negro de Ericromo.IV.Finalmente, realizar la titulacin con solucin titulante EDTA, desde el color

morado hasta un tono azul, donde se realiza la respectiva lectura de EDTA,empleado.

b) Dureza ClcicaI. Se prepara la muestra de 50ml, tal y como se present en el tem 1, de la dureza

total.II. Luego, se agregan 12 gotas de solucin Buffer pH=12, en el erlenmeyer.III. Introducir 5 gotas de solucin indicadora Murexide.IV. Titular con solucin titulante EDTA, desde el color rosado hasta violeta,

momento en el que se realiza la medicin de EDTA, gastado.

Nota: Antes de empezar el ensayo, se debe preparar el montaje, el cual consiste en laplancha y la barra agitadora, adems de la bureta para adicionar EDTA.


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E. CALCULOS

, Ecuacion 12Donde :

V=ml Gastados de EDTA, N=Normalidad del EDTA

5. REQUERIMIENTO EN DEMANDA OXIDANTEMTODO N 2350

A. CONCEPTO

Los oxidantes se adicionan al agua potable y al agua residual para desinfectar. Otrobeneficio incluye remocin de limos, la oxidacin de especies inorgnicas no deseables(e.g. iones de hierro, reduccin de manganeso, sulfuros, y amonio) y la oxidacin deconstituyentes orgnicos (e.g. compuestos productores de olor y sabor). La demandaoxidante se refiere a la diferencia entre la dosis oxidante agregada y la concentracinoxidante residual medida despus de un tiempo de contacto prescrito a un pH ytemperatura dado.

La demanda oxidante y los requerimientos de oxidacin estn significativamenteafectados por las caractersticas fsicas y qumicas de la muestra y la manera en la cual semide el consumo del oxidante. Particularmente, la reactividad oxidante est influenciadapor la temperatura, el pH, el tiempo de contacto, y la dosis oxidante. La temperatura de la

muestra afecta fuertemente las reacciones cinticas y por ende la demanda a un tiempode contacto dado. El pH de la muestra afecta la forma y naturaleza del oxidante y el gradode demanda. El ozono es inestable a valores de pH muy altos y la demanda de ozono esespecialmente sensible al pH de la muestra. La demanda oxidante incrementa con eltiempo y por lo tanto la demanda debe ser definida para un tiempo de contacto dado. Lademanda oxidante tambin es independiente de la dosis oxidante pues al incrementar ladosis oxidante usualmente se incrementa la demanda, pero es incorrecto que al duplicarla dosis oxidante se duplicar la demanda oxidante.


Este mtodo semi-batch involucra la determinacin de la demanda de ozono con unaadicin contina de ozono gaseoso al reactor batch. Los resultados obtenidos de estemtodo dependen de la transferencia de masa y las caractersticas del reactor. En adicin,algunos componentes que consumen el ozono se pueden volatilizar durante el ensayo.


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Generador de ozono capaz de proveer por encima del 5% de ozono gaseoso.

Botellas limpiadoras de gas, vidrio de borosilicato, con un volumen mnimo 250ml.

Tubos, nicamente se deben usar tubos sin metal o un tubo TFE. Vidriera: bureta de 50ml; beaker de 400ml; cilindro graduado de 250ml.

Botella de lavado 500ml.

Agitador magntico (opcional).

Balanza analtica.

D. REACTIVOS

Agua libre de demanda de ozono.

cido sulfrico H2SO4.

Yoduro de potasio.

Tiosulfato de sodio titulante normalizado Na2S2O3 0.1 Tiosulfato de sodio titulante normalizado Na2S2O3 0.05N

Solucin indicadora de almidn

E. PREPARACIN DE LOS REACTIVOS

cido sulfrico H2SO4 2N:

Con precaucin adicionar 56mL concentrado de H2SO4a 800mL de agua libre de demandade ozono en un frasco volumtrico de 1L. Mezclar a fondo y adicionar hasta la marca conagua libre de demanda de ozono.

Yoduro de potasio (2%) KI:

Disolver 20 g de KI en 800mL de agua libre de demanda de ozono en un beaker y agitarpor 1minuto, transferir la mezcla a un baln volumtrico de 1000mL y llenar hasta el aforocon agua libre de demanda de ozono.

Tiosulfato de sodio titulante estndar Na2S2O3 0.1N:

Disolver 25 g de Na2S2O3 * 5H2O en 1L de agua destilada hervida fresca, almacenar por 24hy normalizar contra el bi-yodato de potasio o con dicromato de potasio despus de dos

semanas de almacenamiento. Este almacenamiento inicial es necesario para permitir laoxidacin de cualquier ion de bisulfito presente. Para minimizar la descomposicinbacteriana adiciona agua destilada hervida y adiciona unos mililitros de cloroformo(CHCL3).

Tiosulfato de sodio titulante estndar Na2S2O3 0.005N:


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30

Diluir 50mL de la solucin de Tiosulfato de sodio 0.1N Na2S2O3 en un 1L de agua destilada.

Normalizacin del Tiosulfato de Sodio

Mtodo del Yodato: Disolver 3.249g de Bioyodato de Potasio anhidro KH (IO 3)2o Yodatode Potasio KIO3 seco a 103C por 1h en 1L de agua destilada para mantener 0.1N.

En 80mL de agua destilada adicione en constante agitacin 1mL de H2SO4concentrado,10,0mL de 0.1N de KH (IO3)2 y 1g de KI. Titular inmediatamente con tiosulfato de sodio0.1N, antes de que el color amarillo desaparezca adicione 1mL de la solucin del almidn ycontine titulando hasta que el color azul desaparezca. Calcule la normalidad con laecuacin 13:

, Ecuacin 13Solucin indicadora de almidn:

1. Disolver 2g de almidn en 100ml de agua destilada caliente, adicionar 0.2g de cidosaliclico y dejar enfriar.

F. PROCEDIMIENTO

1. Determina la salida del generador de ozono pasando el ozono en fase gaseosa atravs de KI (2%) por unos 10 minutos. La solucin de KI se mantiene en unrecipiente aforado con volumen conocido (mnimo 200mL).

2. Transferir cuantitativamente muestras del recipiente ozonizado en un beaker, y

titular con 0.1N Na2S2O3 normalizado hasta que el color amarillo del yodo haya casidesaparecido.

3. Adiciona de 1 a 2ml de solucin indicadora de almidn y continuar titulando hastaque desaparezca el color azul.

G. CLCULOS

Clculo de ozono residual:

Donde:

V =Volumen gastado en la titulacin de sodio (ml).

N= normalidad del Na2S2O3. =0.1N


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eq = Numero del equivalente en gramos del Ozono = 24mg/m eq

t = Tiempo de ozonizacin (min)

I. Clculo de la produccin y dosis de ozono , Ecuacin 15

= Volumen de tiosulfato gastado en la titulacin de la muestra menos volumengastado en la titulacin del blanco (ml).

= Volumen de yoduro de potasio ozonizado (ml).

= Volumen de la muestra de yoduro de potasio titulado (ml).t = Tiempo de contacto (min)

N = Normalidad del tiosulfato de sodio, preferible 0.025N normalizada.

Dosis aplicada

P= Produccin de ozono en la columna de ozonizacin .t = Tiempo de contacto (min)

V = Volumen de agua ozonizada (ml)

= Dosis aplicada de ozono

Dosis efectiva


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6. CLORUROSMTODO N 4500-Cl-

A. CONCEPTO

Los cloruros, en forma del in cloruro (Cl -), son unos de los mayores aniones inorgnicospresentes en las aguas. En el agua potable, el sabor salado producido por la concentracinde cloruros es variable e independiente de la composicin qumica del agua. En algunasaguas que contienen 250 mg Cl-/l se puede detectar sabor salado si el catin es sodio. Porotro lado, el sabor salado tpico puede estar ausente en aguas que contienen hasta 1000mg/l cuando los cationes predominantes son calcio y magnesio.

La concentracin de cloruros es mayor en aguas residuales que en agua cruda por causadel cloruro de sodio (NaCl) el cual es un elemento comn de la dieta alimenticia y pasa atravs del sistema digestivo sin cambios. A lo largo de las costas, los cloruros pueden estaren altas concentraciones por causa de la fuga del agua salada dentro de los sistemas dealcantarillado. Este tambin puede aumentar por procesos industriales.

Un alto contenido de cloruros puede daar las tuberas metlicas y las estructuras, ascomo afectar el crecimiento de las plantas.


En una solucin neutra o ligeramente alcalina, el cromato de potasio puede indicar elpunto final de titulacin del nitrato de plata de los cloruros. El cloruro de plata se precipitacuantitativamente antes de que se vuelva rojo el cromato de plata.


Frasco erlenmeyer, (250ml).

Bureta, (50ml).

Probeta, (100 ml).

D. REACTIVOS

Solucin indicadora de cromato de potasio.

Solucin titulante de nitrato de plata estndar 0.0141N.

Cloruro de sodio estndar 0.0141N.


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G. CLCULOS

, Ecuacin 18Donde:

A = ml del titulante gastado para la muestra,

B = ml de titulante gastado para el blanco, y

N = Normalidad del AgNO3.


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7. FSFOROORTOFOSFATOS (PO4-2)MTODO N 4500-P

A. CONCEPTO

Los compuestos que contienen fsforo ocurren en aguas naturales y en efluentes(domsticos e industriales) en forma de fosfatos. Estas formas son clasificadas en: Ortofosfatos, fosfatos condensados (Poli fosfatos) y fosfatos orgnicos; pueden presentarse enforma de solucin, de partculas o de desechos o en la constitucin de organismoacuticos. Los compuestos que contiene fosforo son esenciales para el crecimiento deorganismos y pueden ser considerados como nutrientes que limitan la produccin denuevas clulas.


Es un mtodo de reduccin con cloruro estagnoso. El fosfato reacciona con el molibdato

amnico y luego es reducido por el cloruro estagnoso para formar un complejo azul. Losresultados se expresan en (mg/L) de P.


Fotmetro: Espectrofotmetro.

Bomba de vaco.

Balanza Analtica.

Pipeta automtica de 10ml.

Balones volumtricos de 100ml.

Pipetas automticas de 200L y 1000l.

Campana de extraccin. Agitador magntico.

Beaker.

Barras agitadoras.

Perlas de vidrio.

Erlenmeyers.

D. REACTIVOS

Fenolftalena.

Fosfato dihidrogeno de potasio (KH2PO4). cido sulfrico (H2SO4).

Persulfato de Potasio (K2S2O8).

cido Ntrico (HNO3).

Molibdato de amonio (NH4)6Mo7O24 4 H2O.

Cloruro estagnosodihidratado (SnCl2.2H2O).
http://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidroniohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidroniohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidroniohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidroniohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidroniohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasio


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Glicerol (C3H8O3).

Hidrxido de sodio (NaOH).


Solucin estndar de fosfato (KH2PO4):

Disolver 0.2195 g de Fosfato dihidrogeno de potasio (KH2PO4) en 1L de agua destilada.

Solucin cido Sulfrico (H2SO4) 1.59N:

Diluir 15mL de cido Sulfrico (H2SO4) en 35mL de Agua destilada.

Acida Fuerte

En un baln volumtrico adicionar a 60mL de agua destilada 30ml de cido sulfrico

concentrado (H2SO4), 0.4mL de cido Ntrico (HNO3) y llenar hasta 100ml con aguadestilada.

Solucin de Molibdato de amonio

Disuelva 25g de molibdato de amonio (NH4)6Mo7O24 4 H2O.en 175ml de agua destilada.

En 400mL de agua destilada agregar 280mL de cido sulfrico (H 2SO4) concentrado, dejarenfriar y luego agregar la solucin del paso 1.

Cloruro estagnoso

Disuelva 2.5g de Cloruro estagnosodihidratado (SnCl2.2H2O) en 100ml de glicerol (C3H8O3).Calentar la solucin al bao mara y revolver con varilla de vidrio. Este reactivo es establey no requiere preservativos ni almacenamiento especial.

Hidrxido de sodio (NaOH) 1N.

Disuelva 40g de Hidrxido de sodio (NaOH) en 1l de agua destilada.

F. PROCEDIMIENTO

DETERMINACIN DE LA CURVA DE CALIBRACION

1. En un erlenmeyer adicionar el volumen de la solucin estndar de fosfatodeterminada (Tabla1) y llenar hasta 50mL con agua destilada.

1ml de solucin estndar P = 0.05mg P
http://es.wikipedia.org/wiki/Hidroniohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidroniohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidroniohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidroniohttp://es.wikipedia.org/wiki/Hidronio


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Tabla 1.Volmenes de la solucin estndar de fosforo para la curva de calibracin

mg P ml (Sol. Estndar) mg P ml (Sol. Estndar)

0.00 0.0 0.20 4.0

0.01 0.2 0.25 5.0

0.05 1.0 0.30 6.0

0.08 1.6 0.40 8.0

0.10 2.0 0.50 10.0

0.15 3.0

2. Colocar en agitacin y adicionar 2 gotas de fenolftalena, 1mL de Solucin AcidoSulfrico (H2SO4), 0.5g de Persulfato de Potasio (K2S2O8)y 4 perlas de vidrio.

3. Llevar a digestin hasta que el volumen reduzca a 10mL y se deja enfriar.4. Agregar a cada erlenmeyer30mL de agua destilada y 2 gotas de fenolftalena.5. Adicionar gotas de Hidrxido de sodio (NaOH) hasta que cambie a color rosado.6. Luego agregar acida fuerte hasta que el color rosado desaparezca.7. Transferir las soluciones a balones volumtricos de 100mL y llenar hasta el aforo

con agua destilada.8. Adicionar 4mL de Solucin de Molibdato de amonio y 10 gotas de Cloruro

estagnoso.

9. Despus de 5 minutos medir la absorbancia con longitud de onda de 690nm.

Figura 5. Pasos 1 a 7
http://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasio


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Tabla 2. Medida de absorbancia

CURVA DE CALIBRACION FOSFORO

mg P ml

(Sol.Estndar)

Abs.cm

-1

(690nm)

mg P ml

(Sol.Estndar)

Abs.cm

-1

(690nm)

0.00 0.0 0.000 0.20 4.0 0.160

0.01 0.2 0.039 0.25 5.0 0.250

0.05 1.0 0.045 0.30 6.0 0.300

0.08 1.6 0.055 0.40 8.0 0.400

0.10 2.0 0.085 0.50 10.0 0.600

0.15 3.0 0.140

Para la curva de calibracin, dibujar la absorbancia medida en el eje de las abscisas, versusla cantidad de mg P/len el eje de las ordenadas y determinar la ecuacin de la rectaobtenida (Figura 7).

Figura 6. Curva de calibracin P, Absorbancia vs mgP

Determinacin de concentracin de fsforo

y = 0,8706x + 0,0213R = 0,9713

0.00

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

0.000 0.200 0.400 0.600 0.800

ABSORBANCIA (cm-1)

mgP


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1. Se toma 50ml de la muestra y 50ml de agua destilada (Blanco) en dos erlenmeyers.2. Colocar en agitacin y adicionar 2 gotas de fenolftalena, 1ml de Solucin cido

Sulfrico (H2SO4), 0.5g de Persulfato de Potasio (K2S2O8)y 4 perlas de vidrio.3. Llevar a digestin hasta que el volumen reduzca a 10ml y se deja enfriar.

4. Agregar a cada erlenmeyer30ml de agua destilada y 2 gotas de fenolftalena.5. Adicionar gotas de Hidrxido de sodio (NaOH) hasta que cambie a color rosado.6. Luego agregar acida fuerte hasta que el color rosado desaparezca.7. Transferir las soluciones a balones volumtricos de 100ml y llenar hasta el aforo

con agua destilada.8. A cada muestra se le adicionar 4ml de Solucin de Molibdato de amonio y 10 gotas

de Cloruro estagnoso (al blanco no se le agrega Cloruro estagnoso)9. Despus de 5 minutos medir la absorbancia con longitud de onda de 690nm.10.Llevar el valor de la diferencia a la curva para encontrar la concentracin de

sulfatos.

G. CALCULOS

CONCENTRACIN DE FSFORO

Con el valor obtenido de concentracin de fsforo (P) en la curva calcular:

( )

mgP=Valor encontrado de la concentracin de fsforo P en la curva de calibracin.

Vm= Volumen de la muestra, (ml).
http://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Potasio


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8. SULFATOSMTODO N 4500-SO42-

A. CONCEPTO

Los sulfatos (SO42-) estn altamente distribuidos en la naturaleza y pueden estar presentes

en el agua en concentraciones que varan de pocos a cientos de miles de miligramos porlitro. Los residuos del drenaje de la minera pueden contribuir con grandes cantidades deSO4

2-a travs de la oxidacin de la pirita.


El Ion sulfato (SO42-) es precipitado en un medio de cido actico con cloruro de Bario

(BaCl2) para formar sulfato de bario (BaSO4) en cristales de tamao uniforme. La luz deabsorbancia del (BaSO4) es medida por un fotmetro y la concentracin de sulfato (SO4

2-)es determinada por la comparacin de la lectura en la curva de calibracin.


Fotmetro: Espectrofotmetro.

Bomba de vaco.

Balanza Analtica.

Pipeta automtica de 10ml.

Balones volumtricos de 100ml.

Pipetas automticas de 200l y 1000l.

Campana de extraccin.

Agitador magntico.

D. REACTIVOS

Sulfato de Sodio (Na2SO4).

Cloruro de Magnesio (MgCl2).

Acetato de Sodio (CH3COONa).

Nitrato de potasio (KNO3).

Acido actico (CH3-COOH) (C2H4O2).

Cloruro de Bario (BaCl2).

E. PREPARACION DE REACTIVOS

Solucin estndar de sulfato:

Disolver 0.1479 g de Sulfato de Sodio (Na2SO4) en 1l de agua destilada.
http://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbono


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Solucin Buffer:

Disolver 30g de Cloruro de Magnesio (MgCl2), 5g Acetato de Sodio (CH3COONa), 1g deNitrato de potasio (KNO3) y 20ml de cido actico (CH3-COOH (C2H4O2).en 500ml de agua

y completar a 1l en un baln volumtrico.

F. PROCEDIMIENTO


1. En un erlenmeyer adicionar el volumen de la solucin estndar determinada (Tabla3) y completar a 100mL con agua destilada.

1ml de solucin estndar de sulfato = 0.1mg SO2

Tabla 3. Volmenes de la solucin estndar de sulfatos para la curva de calibracin

mg SO4 ml

(Sol.Estndar)

mg SO4 ml

(Sol.Estndar)

0.0 0 2.0 20

0.1 1 2.5 25

0.5 5 3.0 30

1.0 10 3.5 35

1.5 15 4.0 40

2. Colocar en agitacin y adicionar 20ml de solucin buffer por 1 minuto, durante laagitacin aadir 1g de Cloruro de Bario (BaCl2) y se deja agitar por 1 minuto.

3. Despus de 5 minutos medir la absorbancia y la turbidez.
http://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Ox%C3%ADgenohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbonohttp://es.wikipedia.org/wiki/Carbono


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Tabla 4. Medida de la absorbancia y turbidez.

ABSORBANCIA TURBIDEZ mgSO4

0,025 0,3 00,03 4 1

0,035 42,5 5

0,045 55 10

0,07 78 15

0,165 110 20

0,19 120 25

0,235 140 30

0,29 145 35

0,32 160 40

Para la curva de calibracin, dibujar la absorbancia media en el eje de las abscisas, versusla cantidad de mgSO4 en el eje de las ordenadas y determinar la ecuacin de la rectaobtenida (Figura 7).

Figura 7. Curva de calibracin SO4, absorbancia vs mgSO4

DETERMINACIN DE CONCENTRACIN DE SULFATOS

y= 122,1x + 0,945R = 0,958

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35

mgSO4

Absorbancia cm-1


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1. Se toman 100mL de la muestra en dos erlenmeyer ms el blanco.2. Se agrega 20mL de buffer a las muestras y agitar por 1 minuto.3. A una de las muestras agregar 1g Cloruro de Bario (BaCl2) agitar por 1 minuto y

dejar en reposo por 5 minutos.

4. Calibrar el espectrofotmetro a 420nm con la muestra del blanco o calibrar elturbidmetro con los patrones segn sea el caso.

5. Medir a la muestra que tiene solo buffer la absorbancia o turbidez (Lectura inicial).6. A la muestra con Cloruro de Bario (BaCl2) medir la absorbancia o turbidez (Lectura

final).7. Hacer diferencia de absorbancias.

8. Llevar el valor de la diferencia a la curva para encontrar la concentracin de

sulfatos.

G. CALCULOS

CONCENTRACIN DE SULFATOS

Con el valor obtenido de concentracin de sulfatos (SO4) en la curva calcular:

( )

mgSO4=Valor encontrado de la Concentracin de sulfatos SO4en la curva de calibracin.

Vm= Volumen de la muestra, (ml).


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9. NITRGENOMTODO N 4500-Norg

A. CONCEPTO

El Nitrgeno es uno de los nutrientes de mayor importancia en el vertido de las aguasresiduales tratadas. Un agua que contenga gran cantidad de nitrgeno acelerar laeutrofizacin de embalses, ros y lagos, y puede provocar el estmulo del crecimiento dealgas y plantas en cursos de agua poco profundos. La reduccin de la concentracin deoxgeno disuelto en las aguas receptoras y la toxicidad para la vida acutica son algunos delos efectos negativos de la elevada concentracin de nitrgeno amoniacal en efluentestratados.

El anlisis de este ensayo suele determinar el NTK (Nitrgeno Total Kjeldahl) que incluye elnitrgeno orgnico y el amoniacal.


La suma de amonio libre y compuestos orgnicos nitrogenados que son convertidos a unasal de amonio (NH4)2SO4 despus de la digestin de la muestra en medio cido y enpresencia de un catalizador. El amonio es destilado en medio alcalino y recuperadonuevamente para su cuantificacin.

La presencia de cido sulfrico (H2SO4), sulfato de potasio (K2SO4), y sulfato de cobre(CuSO4), como catalizador, convierten el nitrgeno amonio de cualquier material orgnicoa amonio. El amoniaco liberado tambin es convertido a amonio, despus se adicionabase y el amoniaco es destilado del medio alcalino y absorbido en cido brico o sulfrico.

El amonio liberado es determinado titulando con una solucin estndar de cido sulfrico(H2SO4). Los resultados se expresan en mgNT /L.


Equipo de digestin con sistema de recoleccin de gases (Digestor y Scrubber).

Equipo de destilacin con flujo de vapor.

Equipo titulador.

Potencimetro.

Erlenmeyer de 250 ml.

Vasos de precipitado.

Tubos de ensayo para nitrgeno (para digestor y destilador).


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D. PREPARACIN DE REACTIVOS

Hidrxido de Sodio 6N (NaOH):

Diluir 320g en agua destilada y completar 1l.

Solucin de cido Brico:

Disolver 20g de reactivo analtico en agua y diluir a 1l.

Solucin indicadora de cido brico:

Disolver 20g de H3BO3en agua, agregar 10ml de la solucin indicadora mixta y diluir a 1l.Preparar mensualmente.

Solucin indicadora mixta:

Disolver 200mg de indicador rojo de metilo en 100ml de alcohol etlico del 95%. Disolver100mg de azul de metileno en 50ml de alcohol etlico del 95%. Combinar las soluciones.Preparar mensualmente.

Solucin de acido sulfrico (H2SO4) al 0.02N para titulacin:

Diluir 3ml de cido sulfrico (H2SO4) concentrado en 1l con agua destilada libre deCO2.Luego diluir 200ml de esta solucin a 1l con agua destilada. Normalizar el cido 0.02N

contra una solucin de Na2CO30.02N (1.060g de Na2CO3anhidro secado a 140C, diluido a1000ml con agua destilada).

E. PROCEDIMIENTO

Volumen de la muestra

1. El volumen de la muestra es 25ml. Para casos particulares de muestras lquidas sepuede seguir lo que indica la Tabla 5.


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Tabla 5. Medida de la absorbancia y turbidez.

Nitrgeno Orgnico en la muestra, mg/l Volumen de muestra, ml

4-40 50

8-80 25

20-200 10

2. Para muestras de lodos y sedimentos, pesar una porcin de muestra hmeda quecontenga entre 0.2mg y 2mg de nitrgeno orgnico. Transferir la muestra al tubode digestin limpiando el recipiente de pesaje varias veces con pequeascantidades de agua. Hacer esta operacin con la cantidad ms pequea posible deagua, sin exceder un volumen de 50ml.

Digestin

1. Encender el digestor y scrubber 15min antes de iniciar el ensayo y limpiarlos. En eltubo agregar: 25ml de la muestra, 15ml de cido sulfrico (H2SO4), 3,0g de Sulfatode Potasio, 1,0g de Sulfato de cobre.

2. Colocar el digestor en 60C-80C (temperatura). Colocar la Flauta (tapa deldigestor para desviar los gases) y conectar la manguera de la flauta al scrubber.

3. Dejar en digestin aproximadamente 2 horas o hasta que las muestras tengan uncolor azul claro.

4. Al alcanzar ese color se apaga el digestor y se deja enfriar 30min con el scrubber

prendido.

Destilacin

1. Encender la unidad de destilacin hasta que caliente (aproximadamente 15min).2. Transferir las muestras fras de los tubos de digestin a los tubos de destilacin con

mucho cuidado.3. Agregar a los tubos poco a poco 30ml de agua destilada y agregar Hidrxido de

Sodio 6N (NaOH) con la vlvula dosificadora hasta obtener un colar caf.4. En los frascos erlenmeyers que recibirn el destilado adicionar 100ml de cido

brico al 2% y de 3 a 4 gotas de indicador mixto.

5. Destilar entre 150-250mL en los erlenmeyer.


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Titulacin

Tomar los erlenmeyers y titular entre 150-250mL de destilacin con cido sulfricoH2SO40.02N hasta llegar al color rosado.

F. CLCULOS

Donde:

V(H2SO4).= Volumen gastado de H2SO4en la muestra,(ml).

VBlanco= Volumen gastado de H2SO4en el blanco, (ml).

Vm= Volumen inicial de la muestra, (ml).

10. DEMANDA QUMICA DE OXIGENO (DQO)MTODO N 5220

A. CONCEPTO

La demanda qumica de oxigeno es la medida del oxgeno necesario para oxidar lamateria orgnica e inorgnica susceptible de oxidacin, contenida en una muestra bajocondiciones de un agente especifico, temperatura y tiempo. Los valores de esteparmetro estn asociados al grado de avance de la oxidacin de los contaminantes.


Las sustancias orgnicas e inorgnicas oxidables presentes en la muestra, se oxidanmediante reflujo en solucin fuertemente cida (H2SO4) con un exceso conocido dedicromato de potasio (K2Cr2O7) en presencia de sulfato de plata (AgSO4) que acta comoagente catalizador, y de sulfato mercrico (HgSO4) adicionado para remover lainterferencia de los cloruros. Despus de la digestin, el remanente de K2Cr2O7sin reducirse titula con sulfato ferroso de amonio; se usa como indicador de punto final el complejoferroso de ortofenantrolina (ferroina). La materia orgnica oxidable se calcula en trminosde oxgeno equivalente.


Espectrofotmetro DR 2800 o DR 5000.

Bomba de vaco.

Balanza Analtica.

Digestor de DQO.


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Dispensadores de 5.0ml.

Horno (103C y 120C).

Embudo tipo Buchner para membrana con dimetro de 47mm.

Membrana filtrante tipo micro-fibra de vidrio de 1,2 m.

Balones volumtricos de 10.0ml, 500ml, y 1000ml. Beaker de 500ml y 1000ml.

Pipetas automticas de 200l y 1000l.

Tubos DQO.

Campana de extraccin.

D. REACTIVOS

Sulfato de plata (Ag2SO4).

cido sulfrico (H2SO4, 96-97% Pureza).

Sulfato de mercurio (HgSO4). Dicromato de potasio (K2Cr2O7).

Hidrogenoftalato cido de Potasio (KPH) HOOCC6H4COOK.


Solucin de sulfato de plata en cido sulfrico

Solucin de 5.5g/Kg de H2SO4 ,96-97% Pureza. ATENCION: Trabajar en la campana.

Triturar con bastn de vidrio 10.12g de sulfato de Plata (Ag2SO4) y transferir para unfrasco con un contenido de 1l de cido sulfrico (H

2SO

4, 96-97% Pureza), adicionar ene le

mismo frasco de origen del cido). Cerrar el frasco hermticamente. La mezcla deber sermantenida en oscuro durante dos das antes de ser utilizada.

Solucin de Digestin (2l)

Solucin de K2Cr2O7 + HgSO4.ATENCIN: Trabajar en campana y con guantes. Secar cercade 25g de K2Cr2O7 a 103C en una estufa durante 24 horas. Enfriar en el desecador.Transferir 1.5L de agua destilada para un beaker de 2.0 L. Adicionar cuidadosamente334mL de cido sulfrico (H2SO4) sobre un bao de hielo. Retirar del bao, adicionar 66.6gde HgSO4 y agitar para disolver. Adicionar 20.432g de K2Cr2O7 previamente seco a 105C

por 2 horas y mantener en agitacin. Dejar Enfriar y transferir a un baln volumtrico de2.0L y completar el volumen con agua destilada.

La utilizacin de una nueva solucin de digestin exige una nueva preparacin de unarecta de calibracin.


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F. PROCEDIMIENTO


1000mg de Hidrogenoftalato de Potasio (KHP)= 1.176mg DQO

1. Secar aproximadamente 500mg de KHP en capsulas de porcelana a 120C enhorno hasta que la masa sea constante (24h) y enfriar el KHP en desecador.

2. Disolver cerca de 0.425g aproximadamente de KHP en agua destilada, transferircuantitativamente al baln volumtrico de 500ml y completar el volumen con aguadestilada.

Entonces como caso de ejemplo:

Tomamos 0.4639g KHP

436.9mg KHP

1000mg KHP1176mgDQO

436.9mg KHP X

X=513.79mgDQO

Lo llevamos a Litros:

513.79mgDQO500mL

X1000mL

X=1027.58mgDQO/L

X=1.02758mgDQO/ml

Luego aplicar C1V1=C2V2 para determinar DQOTeorica.

(1.02758mgDQO/ml)V1= DQOTeorica2.5mL


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DQOTeorica=

Hacer la curva de calibracin con concentraciones conforme a los volmenes deseados

para el procedimiento de la determinacin de concentracin de DQOTeorica.(Tabla 6) ycompletarlos con agua destilada para un volumen total de 2.5mL.

Tabla 6. Curva de calibracin para hallar la DQOTeorica

CURVA DE CALIBRACION DQO

V1Sol.KHP

DQOTeorica ABS.1 ABS.2 ABS(Xmed)

100 41.10 0 0.006 0.003

200 82.21 0.016 0.016 0.016

400 164.41 0.04 0.040 0.040

600 246.62 0.063 0.080 0.072

1000 411.03 0.119 0.119 0.119

1600 657.65 0.177 0.172 0.175

1800 739.86 0.199 0.198 0.199

2000 822.06 0.228 0.216 0.222

2200 904.27 0.238 0.241 0.240

2400 986.48 0.268 0.283 0.276

2500 1027.58 0.273 0.276 0.275

Para la curva de calibracin, dibujar la absorbancia media en el eje abscisas, versus laDQOTeorica en el eje de las ordenadas y determinar la ecuacin de la recta (Figura 8).


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Figura 8. Curva de calibracin DQO, absorbancia vs DQOTeorica.

DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE DQO.

1. En tubos de borosilicato con tapa de rosca, adicionar 2.5ml de la muestraconcentrada o diluida (la dilucin de la muestra se hace necesaria cuando la DQOesperada es mayor que 800mg/l) o 2.5ml de agua destilada (para el blanco) o delas soluciones patrn preparadas para la curva de calibracin.

2. Adicionar enseguida con ayuda de dispensadores 1.5ml de solucin de digestin y

vigorosamente 3.5ml de la solucin de sulfato de plata en cido sulfrico.3. Cerrar hermticamente los tubos y agitar.4. Colocar los tubos en el digestor a temperatura de 150C y dejarlos calentando por

un periodo de 120minutos.5. Despus enfriar y limpiar los tubos con papel absorbente humedecido con alcohol

y en seguida secar.6. Observar el espectrofotmetro hora antes de la lectura y fijar la longitud de

onda en 620m.7. Reiniciar el equipo con la solucin de la muestra para el blanco. Leer la absorbancia

de la solucin patrn y de las muestras.

y = 3489,1x + 53,611R = 0,9792

0

200

400

600

800

1000

1200

0.000 0.100 0.200 0.300

ABSORBANCIA (cm

-1

)


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11. DEMANDA BIOQUIMICA DE OXIGENO DBO5MTODO N 5210

A. CONCEPTO

La Demanda Bioqumica de Oxigeno (DBO) es un mtodo emprico en el cual suprocedimiento es usado para determinar la cantidad de oxigeno relativo en aguasnaturales, efluentes domsticos e industriales.

El test de DBO es empleado para determinar los niveles de contaminacin, evaluar cargascontaminantes y para evaluar la eficiencia de un determinado sistema de tratamiento.

B.PRINCIPIO DEL METODO

Gran parte de los organismos vivos dependen, directa o indirectamente del oxgeno paramantener su proceso metablicos que producen la energa necesaria para su crecimiento

y reproduccin.

Se le llaman organismos aerobios a aquellos que dependen exclusivamente del oxgeno deforma libre para la mineralizacin de materia orgnica, resultando como producto finalsubstancias inorgnicas ms simples, tales como CO2, NH3, H2O, etc.

La materia orgnica presente en aguas naturales y en los efluentes domsticos eindustriales tienen la tendencia a ser mineralizadas naturalmente por los microorganismosaerobios existentes, consumiendo oxgeno disuelto en el medio acuoso. El test de DBOtiene por objetivo, determinar esas cantidades de oxigeno consumido, y as mismo,relacionar con las cantidades de materia orgnica biodegradable presente en unamuestra.

Los mtodos usualmente empleados para la determinacin de la DBO es el de la dilucin,incubacin por un periodo de 5 das a 20C, con una determinacin de los niveles incialesy finales de oxgeno a travs del mtodo de Azida modificado.

Para garantizar una mejor eficiencia en el metabolismo de los microorganismosdesarrollados en el test es adicionado a el frasco de incubacin, soluciones nutritivas yuna solucin buffer, con el fin de garantizar un pH neutro de 6.5 a 7.5 (Llamada agua dedilucin).

Es importante que durante los 5 das del test, la muestra se encuentre en un ambiente sinluz, a fin de evitar el aparecimiento de seres clorofilados fotosintticos.


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B. EQUIPOS Y MATERIALES

Incubadora (Termo regulable).

Frascos DBO.

Pipetas volumtricas. Balones Volumtricos.

Beaker.

Erlenmeyer.

Equipo de titulacin (Bureta de 50mL).

C. REACTIVOS

Solucin Buffer de Fosfato.

Solucin de Sulfato de Magnesio (MgSO4.7H2O).

Solucin de Cloruro de calcio (CaCl2).

Solucin de Cloruro Frrico (FeCl3). Agua de dilucin.

Inhibidor de Nitrificacin Sulfito de Sodio.

Cloruro de Cobalto.

Solucin Patrn de cido glutmico/glucosa.

Solucin de sulfato Manganoso (MnSO4.H2O)

Solucin de lcaliIoduro-Azida (AIA).

cido Sulfrico Concentrado.

Solucin Indicadora de Almidn.

D. PREPARACIN DE REACTIVOS

Solucin Buffer de Fosfato

Disolver en aproximadamente 600mLde agua destilada, 8.5g de fosfato monobsico dePotasio (KH2PO4), 21.75g de fosfato bibsico de Potasio (KHPO4), 33.4g de Fosfato bibsicode sodio heptahidratado (Na2HPO4.7H2O) y 1.7g de Cloruro de Amonio (NH4Cl).

Transferir para un baln volumtrico de 1L y completar el volumen con agua destilada, talsolucin debe ser guardada en baja temperatura y en ausencia de luz.

Solucin de Sulfato de Magnesio (MgSO4.7H2O)

Disolver 22.5g de sulfato de magnesio heptahidratado en aproximadamente 800ml deagua, transferir para un baln volumtrico de 1l y completar el volumen; tal solucin debeser guardada en baja temperatura y en ausencia de luz.


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Solucin de Cloruro de Calcio (CaCl2)

Disolver 27.5g de Cloruro de Calcio anhidro en aproximadamente 800ml de agua,transferir para un baln volumtrico de 1L y completar el volumen; tal solucin debe ser

guardada en baja temperatura y en ausencia de luz.

Solucin de Cloruro Frrico (FeCl3)

Disolver 0.25g de Cloruro Frrico hexahidratado en aproximadamente 800ml de agua,transferir para un baln volumtrico de 1l y completar el volumen; tal solucin debe serguardad en bajas temperaturas y en ausencia de luz.

Agua de dilucin

Adicionar en un garrafn previamente limpio y estril agua destilada de acuerdo con lasnecesidades a ser empleada en la prueba. Mantener el contenido de este garrafn enaireacin por un mnimo de 24 horas; dejar en reposo por aproximadamente 30 minutosy aadir al agua 1ml de cada una de las soluciones mencionadas anteriormente para cadalitro de agua destilada usado.

Solucin Patrn de cido glutmico/glucosa

Disolver, previamente seco en estufa a 103C por 1hora, 150mg de glucosa y 150mg decido glutmico, en aproximadamente 800mL de agua destilada. Transferir para un balnvolumtrico de 1L. Preparar semanalmente. Tal solucin debe presentar una DBO tericade 194mg/L (Siendo tolerado un desvi patrn de hasta +/-15%).

Solucin de sulfato Manganoso (MnSO4.H2O)

Disolver 364g de sulfato Manganoso monohidratado (MnSO4.H2O) en aproximadamente800mL de agua destilada, filtrar en papel de filtro Watman N4 y diluir en balnvolumtrico de 1l.

Solucin de lcaliIoduro-Azida (AIA).

Disolver en aproximadamente 800mL de agua, 500g de Hidrxido de Sodio (NaOH), 135gde Iodeto de sodio (NaI) y diluir en 1L de agua destilada; adicionar 10g de Azida Sdica

(NaN3), previamente disuelta en 40mL de agua destilada. Guardar en un frasco de PVC.

Solucin Patrn de Tiosulfato de Sodio (Na2S2O3.5H2O) 0.025N


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Disolver 6.205g de Tiosulfato de sodio pentahidratado con 1.5ml de Hidroxido de sodio6N (o 0.4g de NaOH), en aproximadamente 800ml de agua destilada, transferir para unbaln volumtrico de 1l y completar el volumen.

Normalizacin: Normalizar con 10ml de solucin de Dicromato de Potasio (K2Cr2O7) 0.1N,1ml de cido sulfrico concentrado y cerca de 80ml de agua. Se debe dejar por 6 minutosy en la oscuridad, en seguida adicionar con una esptula (+/-1g) de KI y titular la solucinde Tiosulfato hasta que aparezca una coloracin amarillo paja, en ese punto adicionaralmidn y proseguir la titulacin hasta que cambie de azul a incoloro. Calcular lanormalidad real del tiosulfato con la ecuacin 22:

Na2S2O3=

Solucin Indicadora de Almidn

Disolver 2g de almidn en 100 ml de agua destilada hervida, mezclar y dejarla sedimentarpor una noche.

E. PROCEDIMIENTO

Preparacin de los frascos DBO

1. Dejar con jabn extran alcalino por 1 da.2. Enjuagar varias veces con agua del grifo y en seguida con agua destilada.3. Autoclavar los frascos a una temperatura de 120C y 1kg/cm2de presin, por 30

minutos.4. Dejar enfriar en lugar limpio y seco.5. Almacenar en lugar limpio y seco.

Procedimiento DBO sin inculo

1. Adicionar una muestra a los frascos preparados de DBO y completar hasta la tasade dilucin de acuerdo con la Tabla 7, hacer por lo menos 4 diluciones diferentes.

2. Anotar el nmero N y el volumen del frasco.3. Adicionar si es necesario inhibidor de nitrificacin.4. Completar el volumen del frasco con agua de dilucin evitando la formacin de

bolas y turbulencia.5. Agregar a cada botella 1 ml de sulfato manganoso y posteriormente 1 ml dereactivo alcalina.

6. Tapar la botella y agitar 20 veces, luego agregar 1mL de cido sulfricoconcentrado (H2SO4) alrededor del cuello de la botella con mucho cuidado y volvera agitar por 20 veces.


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7. Transferir 200mL de la muestra que se encuentra en la botella Winkler a un beakery poner en agitacin.

Tabla 7. Tabla de Diluciones.

Tasa de dilucin

(ml)

Rango de DQO Tasa de dilucin

(ml)

Rango de DQO

0.001 128000-130000 2 300-1050

0.002 118000-125000 5 120-420

0.005 60000-115000 10 60-210

0.02 12000-42000 20 30-105

0.1 6000-21000 50 12-42

0.2 300-10000 100 6-21

1 600-2100 300 0-7

ODi - ODf 2mg/L;

1 ODf 6 mg/L.

8. Titular la muestra con Tiosulfato de Sodio 0.025N hasta que la muestra tenga uncolor amarillo paja y agregar 1mL de almidn.

9. Seguir titulando con Tiosulfato de Sodio 0.025N hasta que el color cambie de azuloscuro a transparente.

10.Medir el OD inicial.11.Llevar a la incubadora la rplica de las botellas y despus de 5 das de encubar

medir OD final. Envolver las botellas que se dejan en la

manual de protocol os 1

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