UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS Facultad de Farmacia y Bioquímica

E.A.P. Farmacia y Bioquímica

Quinto Año Semestre 2013-I

Profesor Responsable: Q.F. José Llahuilla Quea

Integrantes:

Cano Mori, César Eduardo 08040003

Chávez Carbajal, Lucero 08040103

Gamarra Domínguez, Eliane 08040007

Lima Clemente, Jon 07040066

Pérez Guerrero, Fiorella 08040106

Quispe Ibarra Anthony 08040024

Horario de Laboratorio: Martes10:00 am – 2:00

pm

Práctica Nº1: Cuantificación de Arsénico por el Método de Vasac y Sedivec.

Introducción

Como sabemos el Arsénico es uno de los elementos más tóxicos que pueden ser encontrados, debido a sus efectos tóxicos este elemento se encuentra naturalmente en la tierra en muy pequeñas cantidades; sin embargo los seres humanos podemos estar expuestos al Arsénico a través de la comida, el agua e inclusive el aire que respiramos a diario. Esta exposición puede ocurrir a través del contacto directo con la piel, con el suelo o el agua que contenga Arsénico.

Los niveles de Arsénico en la comida son bastante bajos, no es añadido debido a su toxicidad, pero los niveles de Arsénico en peces y mariscos puede ser alta, porque los peces absorben Arsénico del agua donde viven. Por suerte esto esta es mayormente la forma de Arsénico orgánico menos dañina, pero peces que contienen significantes cantidades de Arsénico inorgánico pueden ser un peligro para la salud humana. 1

La exposición al Arsénico puede ser más alta para la gente que trabaja con Arsénico, para gente que bebe significantes cantidades de vino, para gente que vive en casas que contienen conservantes de la madera y gente que viven en granjas donde el Arsénico de los pesticidas ha sido aplicado en el pasado 2; sin embargo la exposición al Arsénico inorgánico puede causar varios efectos sobre la salud, como es irritación del estómago e intestinos, disminución en la producción de glóbulos rojos y blancos, cambios en la piel, e irritación de los pulmones. Es sugerido que la toma de significantes cantidades de Arsénico inorgánico puede intensificar las posibilidades de desarrollar cáncer, especialmente las posibilidades de desarrollo de cáncer de piel, pulmón, hígado, linfa, ya que puede dañar el ADN.

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Práctica Nº1: Cuantificación de Arsénico por el Método de Vasac y Sedivec.

Objetivos

o Comprender y poner en práctica las normas de Bioseguridad.

o Conocer el efecto toxicológico del Arsénico en el organismo humano.

o Determinar cuantitativamente mediante el Método de Vasac y Sedivec la cantidad de Arsénico presente en una muestra de origen biológico (orina).

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Cuantificación de Arsénico por el Método de Vasac y Sedivec.

I. Parte Experimental

I.1. Fundamento

Este procedimiento está diseñado para determinar la presencia de trazas de Arsénico y se basa en la transformación de Arsénico (As+5) en arsénico trivalente o Arsenito (As+3), la cual forma un complejo de color rojo en contacto con una solución de Dietilditiocarbamato de plata (DDCAg); este grado de coloración obtenida se determina por espectrofotometría frente a un control que tiene una cantidad de Arsénico equivalente al límite especificado en la monografía correspondiente, por lo tanto la cantidad de Arsénico encontrado en nuestra muestra problema no debe exceder el límite especificado en la monografía correspondiente, de ser así estaríamos frente a una muestra contaminada y que sobrepasan los limites tolerados de Arsénico en orina.3

I.2. Reactivos

Reactivos: Cantidad:H2SO4 20% 5mlIK 16.5% 5mlCl2Sn 40% 0.2mlCuSO4 2% 1mlZnº granallas 1-2Dietilditiocarbamato de plata (DDCAg)

5ml

Piridina 0.5% -

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I.3. Materiales

Materiales: Cantidad:Tubo de ensayo 13 x100 1Manguerilla de 10cm 1Matraz Erlenmeyer 100ml 1Tubo de absorción en U 1Fiola 100ml 1

I.4. Equipos

Equipos: Cantidad:Campana Extractora 1Ecpectrofotometro Miltron Roy –Espectrovic 601( 450nm)

1

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I.5. Técnica OperatoriaA. Preparación de la Muestra Problema

Se recoge 850ml de orina 24h antes del análisis y se procede a calcinar, se toma nuevamente 50 ml y se lleva a una fiola de 100ml hasta el enrace junto con NaOH Y DMO. En esta muestra solo se cuenta con (As+3) por ello se toman 20 ml para realizar la marcha.

B. Método de VASAC Y SEDIVECEn un Matraz Erlenmeyer de volumen 100ml colocar 20 mL de muestra problema (orina calcinada), luego agregamos 5ml de H2SO4 20%, 5mL de IK 16.5%, y 0.2ml de Cl2Sn (40 HCl ), luego dejamos en reposo por un tiempo aprox. de 2 mín.Colocar 1 ml de CuSO4 al 2% y de 1-2 granallas de Zinc y un reposo por 30 mín. (Figura 1)Recibir la Arsenamina formada en un tubo que contenga 5 mL de DDCCAg (0.5) % y piridina. (Figura 2)Luego leer en el espectrofotómetro en un rango de longitud de onda de 450 nm. (Figura 3)

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(Figura 1) (Figura 2)

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I.4.1. Reacciones Químicas Balanceadas

H2SO4 + IK HI + K2SO4

H3AsO4 + 2HI H3AsO3 + I2 + H2O

H3AsO3 + HCl AsCl3 + 3 H2O

2AsCl3 + 3SnCl2 As+3 + 3SnCl4

As+3 + Zn0 +3H+ AsH3 + 3Zn+2

AsH3 + C5H10NS2Ag N (C5H10NS2)3As + Ag+

II. Resultadoso Lectura en el espectrofotómetro a 450nm de longitud de onda la

absorvancia correspondiente a la muestra problema fue de 1.115 Abs.o Para obtener la concentración de Arsénico en la muestra problema se

procede a construir una Curva de Calibración de Arsénico estándar y al

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(Figura 3)

1.115 Abs.

H

CuSO4

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determinar la absorvancia correspondiente a nuestra muestra problema obtendremos una concentración específica en µg de Arsénico.

o Otra forma de determinar la concentración de As en la muestra problema es realizando los siguiente cálculos según estándares.

III. Discusión de Resultados

Mediante los resultados obtenidos se puede llegar a discutir y concluir varios puntos, en primer lugar La cantidad máxima permitida (CMP) de Arsénico presente en una muestra biológica de orina es de 0,05 mg/L 4; sin embargo en la muestra de orina estudiada se obtuvo 2.3694 mg de As correspondiente a 850ml de muestra sobrepasando enormemente la cantidad permitida de arsénico en la orina. Una de las causas probables de esta alta concentración de As en la muestra estudiada se trate de una persona que habita en zonas donde el agua bebida es altamente contaminada con este metal o que la causa de esta

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CÁLCULOS:

0.20 Abs. 5µg As

1.115 Abs. X1= 27.875 µg As

20 ml MP 27.875 µg As

100ml MP X2= 139.375 µg As

50 ml ORINA 139.375 µg As

850ml ORINA X3= 2369.375 µg As = 2.3694mg

NOTA: Según la monografía correspondiente indica que debe existir una cantidad máxima permitida (CMP) de arsénico en orina es de 0,05 mg/L 4

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alta cantidad de arsénico en su organismo sea producto a su actividad laboral en contacto directo con este compuesto.

Otro punto de vista es el rango de longitud de onda trabajado este suele ser para este tipo de compuestos coloreados igual a 540 nm; sin embargo se trabajó a 450nm lo cual podría haber alterado el resultado no siendo tan exacto.

IV. Conclusiones

Mediante el presente estudio se llegó a determinar la Cuantificación de Arsénico por el método de Vasac y Sedivec presente en una muestra de orina, teniendo como resultado una concentración correspondiente a 2.3694mg en 850 ml de orina. Si bien podemos decir que es factible encontrar presencia de concentraciones de Arsénico en orina, llegamos a concluir que la concentración encontrada en este estudio sobrepasan los límites normales y tolerados según la OMS (0.05mg/L de orina).

El presente estudio también nos lleva a concluir que nos encontramos frente a un paciente con una enfermedad crónica causada ya sea por la exposición prolongada

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al arsénico, por el consumo continuado de agua contaminada o por el contacto directo a nivel laboral con dicha sustancia.

V. Bibliografía

1. Riesgo tóxico por metales presentes en los alimentos: Toxicología alimentaria. Gemma Falco A., Marti Nadal L. Editorial Díaz de Santos, Madrid- España. 2012.

2. Laboratorio Lenntech, tratamiento y purificación del agua. Biblioteca virtual. Propiedades químicas del Arsénico, Efectos del Arsénico sobre la salud y

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Efectos ambientales del Arsénico Disponible en: [http://www.lenntech.es/periodica/elementos/as.htm#ixzz2PqMpSmTF]

3. Química analítica cualitativa. Fernando Burriel Martí. Editorial Paraninfo. 18º edición. Madrid –España-2008

4. Adan Felix Campos Vásquez Cuantificación Espectrofotométrica de Arsénico en agua de consumo de Lima Metropolitana 1975 pag. 26

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