formula para conteo
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RECUENTO BACTERIANO
Dra. Natalia Izurieta CergneuxPRÁCTICA No. 4 – LABORATORIO DE BACTERIOLOGIA Y MICOLOGIA
GENERALIDADES Replicación bacteriana: fisión
binaria o bipartición.
De una célula madre se
originan dos células hijas
idénticas.
Crecimiento ordenado de todos
los constituyentes y estructuras
celulares.
Aumento exponencial en el
número de células.
TIPOS DE CRECIMIENTO
CRECIMIENTO INDIVIDUAL
La bacteria alcanza un tamaño y peso fijo. Constituye el paso previo
a la división celular.
CRECIMIENTO POBLACIONAL
Es el incremento en el número de células como consecuencia del
crecimiento y división celular.
RECUENTO BACTERIANO
CONTEO DE CÉLULAS VIABLES
La célula viable es aquella capaz de dividirse y formar una colonia en el
medio de cultivo.
Se basa en que cada colonia surge de una simple célula.
Cada colonia contiene una sola especie bacteriana.
ALIMENTO
CAJA PETRIMICROSCOPIO
CONTEO DE CÉLULAS VIABLES
El número de bacterias viables por muestra se expresa en:
UNIDADES FORMADORAS DE
COLONIAS (UFC) Representa cada colonia contada y su número total representa el
número total de bacterias viables en la muestra.
DETERMINACIÓNNo. UFC
Método de vertidoen placa
Método de extensiónen placa
CONTEO DE CÉLULAS VIABLESMÉTODO DE EXTENDIDO EN PLACA
Es el método de elección para anaerobios facultativos y cultivo de microaerófilos.
CONTEO DE CÉLULAS VIABLES
MÉTODO DE VERTIDO EN PLACA. Esta técnica se usa generalmente para bacterias aerobias obligatorias.
CONTEO DE CÉLULAS VIABLES
Útil para la técnica de
vertido en placa o extensión
en placa.
Se siembran volúmenes
conocidos de cada dilución
Luego se incuba a 35 – 37 0C
durante 24 – 48 horas.
TÉCNICAS DE RECUENTO
Finalizado el tiempo de incubación, se realiza el recuento.
Se toman en cuenta únicamente aquellas cajas Petri que tengan
entre 30 y 300 colonias.
Este número de colonias es estadísticamente representativo.
Aquellas placas que tengan más de 300 colonias se reportan como
“INCONTABLES”.
TÉCNICAS DE RECUENTO Para el recuento bacteriano se puede usar cuentacolonias.
RECUENTO CON CUENTACOLONIAS
Puede ser contada toda la placa o por cuadrantes.
Cuando la carga bacteriana es alta, se toma en cuenta un cuadrante con
carga alta, un cuadrante con carga media y un cuadrante con carga baja.
Se realiza la sumatoria de los tres cuadrantes y se saca el promedio.
Finalmente el promedio se multiplica por 65
No. Colonias = (CA + CM + CB /3) * 65
CA = 32
CM = 19
CB = 10
Sumatoria
Σ = 61
Promedio
61/3 = 20.33
Factor
= 20.33*65
= 1322
OBTENCIÓN DE RESULTADOS
Terminado el conteo por cualquier método, se debe aplicar la
siguiente fórmula para obtener el No. de UFC/ ml o UFC/g.
UFC/ml ó UFC/g = No. de colonias por placa X el factor de
dilución *
ml de la muestra sembrada
*Factor de dilución: inversa de la dilución.
EJEMPLOS
EJEMPLO 1
No. de colonias: 280
Dilución: 10 -3
Volumen de siembra: 1 ml
UFC/ ml = 280 X 1000 /1
UFC/ ml= 280.000
EJEMPLO 2
No. de colonias: 56
Dilución: 10 -4
Volumen de siembra: 0.2 ml
UFC/ ml = 56 X 10000 /0.2
UFC/ ml= 2 800.000
Cuando se realiza más de una dilución para cada uno de los
parámetros se garantiza los resultados obtenidos.
Este método disminuye el margen de error y abaliza la calidad de las
pruebas.
Para obtener los resultados por duplicado se aplica la siguiente
fórmula:
UFC / ml parámetro = UFC / ml dilución A + UFC / ml dilución B
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EJEMPLOS Ejemplo 1Dilución A: 5 600.0000Dilución B: 6 000.000Resultado : 5 600.000 + 6 000.000 / 2 = 5 800.000 UFC / ml FLORA TOTAL
Ejemplo 2Dilución A: 1 245.647Dilución B: 2 340.500Resultado: 1 245.647 + 2 340.500 / 2 = 1 793.074 UFC / ml FLORA
COLIFORME