factor reumatoide
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UNIVERSIDAD
AUTÓNOMA “BENITO
JUÁREZ” DE OAXACA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
LABORATORIO DE INMUNOLOGÍA
EQUIPO # 5:
CUEVAS VÁSQUEZ SOLEDAD
GARCÍA VILLAGOMEZ JUAN PABLO
HERNÁNDEZ PÉREZ PILAR
HERRERA BLAS BERTHA
RUÍZ BLAS SARAÍ
RUÍZ PÉREZ ÁNGEL RODOLFO
PRÁCTICA #6: Factor Reumatoideo y Proteína C Reactiva
INTRODUCCIÓN:
Los factores reumatoideos (FR) son autoanticuerpos antifragmento Fc
de la IgG que dan lugar a la formación de inmunocomplejos
capaces de fijar complemento y de actuar sobre las membranas
celulares, la pared vascular y la sinovial. Provocan alteraciones
(aumento de la permeabilidad y reacciones inflamatorias) que
finalmente, conducen a la destrucción de la membrana sinovial,
cartílago y hueso. Son anticuerpos contra antígenos no específicos
de órgano que puede encontrarse en suero y en líquido sinovial. Se
postula que su aparición puede deberse a factores genéticos,
persistencia de antígenos heterólogos y a la modificación de una
inmunoglobulina IgG con especificidad a un determinado antígeno.
La unión con este antígeno provocaría un cambio conformacional
en su estructura que hace que sea reconocida como extraña por el
sistema inmune. Tienen distinto tamaño molecular y distinta
especificidad.
La Proteína C Reactiva (PCR) es una proteína de fase aguda que
aumenta en el suero resultado de la liberación de interleuquina 6.
Indica presencia de inflamación pero algunos tumores malignos
como enfermedad de Hodgkin y carcinoma renal pueden producir
IL-6 que inducen una respuesta de fase aguda, con fiebre y altas
concentraciones de PCR. Es una proteína no glicosilada de síntesis
hepática, la síntesis extrahepática no contribuye a los niveles en
suero. La síntesis normal diaria es de 1-10 mg/día incrementando a 1
gr/ día en casos de inflamación aguda. La vida media en circulación
es de 19 horas. La función biológica es la unir una gran cantidad de
sustancias endógenas y exógenas y su remoción de la sangre y los
tejidos por opsonización.
OBJETIVOS:
Determinar mediante un método de aglutinación con látex la
presencia de Factor Reumatoideo y Proteína C Reactiva como
auxiliares en el diagnóstico de transtornos inflamatorios.
FUNDAMENTO:
Factor Reumatoideo en látex: es una prueba rápida de aglutinación
basada en una modificación de la técnica de Singer, para la
detección directa y la semicuantificación en placa de los factores
reumatoideos (FR) presentes en el suero. La determinación se efectúa
ensayando una suspensión de partículas de látex recubiertos con
gamma globulina humana frente a los sueros problema. La presencia
o ausencia de aglutinación visible es indicativa de la presencia o
ausencia de FR en las muestras
ensayadas.
Proteína C Reactiva en látex: es una prueba rápida de aglutinación
en placa basada en la técnica de Singer, para la detección directa
y la semicuantificación de la proteína C-reactiva (PCR) en suero.
La determinación se efectúa ensayando una suspensión de látex
recubierto con anticuerpos anti-PCR, frente a los sueros problema. La
presencia de aglutinación es indicativa de un aumento del nivel de
PCR por encima del límite superior del intervalo de referencia de las
muestras ensayadas
EQUIPO, MATERIAL Y REACTIVOS NECESARIOS:
Reactivo de látex-Factor Reumatoideo
Reactivo de látex-Proteína C reactiva
Solución amortiguadora de glicina-cloruro de sodio pH 8.2
Solución salina isotónica
MATERIALES:
Placa serológica de fondo oscuro
Aplicadores de madera
Tubos para toma múltiple sin anticoagulante con gel
separador
Agujas para venopunción
Torniquete
Torundas de algodón
MATERIAL BIOLÓGICO:
Suero de paciente.
APARATOS E INSTRUMENTOS
− Centrífuga.
− Pipetas automáticas de volumen variable 10 a 100 uL
PROCEDIMIENTO:
PREPARACIÓN DE LAS MUESTRA BIOLÓGICA.
1. Extracción de una muestra de sangre venosa.
1.- Se realizo la extracción de una muestra de sangre total por
punción venosa en un tubo sin anticoagulante y se espero por 15 min
para que la muestra coagulara completamente.
2.- Una vez concluido el tiempo se
procedió a centrifugar la muestra para
obtener el suero durante 5 minutos a
2500 r.p.m. una vez que se concluyo el
proceso de centrifugación se verifico
que el gel separador se encontrara
entre las dos fases que son sangre total
y el suero (transparente y sin indicios de
hemolisis)
PROCEDIMIENTO.
Factor Reumatoideo (FR).
Una vez obtenido el suero por el método de aglutinación en latex en
placa, se utilizo una suspensión estabilizada de partículas de latex
sensibilizadas con IgG humana.
El suero se inactivo previamente calentando en baño serológico a
56°C por 15 min. Ya inactivado se diluye 1:20 con amortiguador de
glicina-cloruro de sodio colocando 0.1 ml de suero y 1.9 ml del
amortiguador.
Se coloca una gota de la dilución
en la placa de vidrio oscura y se
añade una gota del reactivo látex-
FR.
Se mezcla y se agita suavemente
con movimientos rotatorios durante
dos minutos.
Se busca la aglutinación
macroscópica.
En el caso de la muestra analizada
dio como resultado NEGATIVA en
la aglutinación por lo tanto no se continuo haciendo diluciones.
RESULTADOS:
La sangre de la compañera de quien se tomó la muestra fue negativa, se da
este resultado debido a que la muestra se mantuvo homogénea durante 2
minutos en contacto con el reactivo de látex y al no haber aglutinación se
reporta negativa , determinando que nuestro paciente no presenta ninguna
relación con una enfermedad de este tipo. Pero aun que no fue
diagnosticado pero la presencia de este factor tampoco se descarta debido
a que múltiples factores influyen en el.
Aproximadamente un 20% de individuos con AR no presenta valores
detectables de FR o bien los presenta a muy baja concentración. En estos
casos, puede ser necesario determinar el anti-CCP para confirmar la
enfermedad.
CONCLUSIÓN:
Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos,
mayoritariamente de clase IgM, dirigidos contra determinantes de la
porción Fc de la inmunoglobulina IgG del paciente. Aunque están
presentes en diversas enfermedades se hallan elevados
principalmente en pacientes con artritis reumatoide.
En el diagnóstico clínico, los resultados de la determinación de los
factores reumatoides deben ser considerados siempre en relación a
los hallazgos clínicos y otras pruebas de laboratorio, para así poder
tener resultados prudentes que puedan favorecer a diversos
tratamientos.
En la práctica realizada acerca de este factor, obtuvimos un
resultado negativo, debido a que la prueba no presentó aglutinación
alguna, indicando ausencia de FR en las muestras ensayadas,
determinando que nuestro paciente no presenta ninguna relación
con una enfermedad de este tipo.
Es importante mencionar que su presencia no diagnostica la
enfermedad, pero su ausencia tampoco la descarta.
ANEXOS:
1. ¿Por qué se inactiva el suero?
Fundamento de la prueba de factor reumatoide en látex El FR-Látex
Test es una prueba rápida de aglutinación basada en una
modificación de la técnica de Singer, para la detección directa y la
semicuantificación en porta de los factores reumatoides (FR)
presentes en el suero. La determinación se efectúa ensayando una
suspensión de partículas de látex recubiertos con gamma globulina
humana frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de
aglutinación visible es indicativa de la presencia o ausencia de FR en
las muestras ensayadas.
2. Explique el fundamento de cada una de las pruebas.
FACTOR REUMATOIDEOS
Los factores reumatoideos (FR) son autoanticuerpos antifragmento Fc
de la IgG que dan lugar a la formación de inmunocomplejos
capaces de fijar complemento y de actuar sobre las membranas
celulares, la pared vascular y la sinovial. Provocan alteraciones
(aumento de la permeabilidad y reacciones inflamatorias) que
finalmente, conducen a la destrucción de la membrana sinovial,
cartílago y hueso. Son anticuerpos contra antígenos no específicos
de órgano que puede encontrarse en suero y en líquido sinovial. Se
postula que su aparición puede deberse a factores genéticos,
persistencia de antígenos heterólogos y a la modificación de una
inmunoglobulina IgG con especificidad a un determinado antígeno.
La unión con este antígeno provocaría un cambio conformacional
en su estructura que hace que sea reconocida como extraña por el
sistema inmune. Tienen distinto tamaño molecular y distinta
especificidad.
PCR
La Proteína C Reactiva (PCR) es una proteína de fase aguda que
aumenta en el suero resultado de liberación de interleuquina 6.
Indica presencia de inflamación pero algunos tumores malignos
como enfermedad de Hodgkin y carcinoma renal pueden producir
IL-6 que inducen una respuesta de fase aguda, con fiebre y altas
concentraciones de PCR. Es una proteína no glicosilada de síntesis
hepática,
la síntesis extrahepática no contribuye a los niveles en suero. La
síntesis normal diaria es de 1-10 mg/día incrementando a 1 gr/ día en
casos de inflamación aguda. La vida media en circulación es de 19
horas. La función biológica es la unir una gran cantidad de sustancias
endógenas y exógenas y su remoción de la sangre y los tejidos por
opsonización.
La Proteína C-Reactiva (PCR) es una proteína de fase aguda,
presente en el suero de pacientes sanos, la cual puede
incrementarse significativamente en la mayoría de los procesos
infecciosos bacterianos y virales, tejidos dañados, inflamación y
neoplasias malignas. El incremento de la concentración de esta
proteína se produce después de unas horas de desarrollarse la
enfermedad pudiendo alcanzar niveles de 300 mg/L de 12 a 24
horas.
El método se fundamenta en una reacción de aglutinación de una
suspensión de partículas de látex poliestireno sensibilizadas con
anticuerpos altamente purificados de anti-proteina C-reactiva. La
aglutinación es visible a una concentración de PCR en suero igual o
superior a 6 mg/L
3. Explique el significado clínico de una prueba FR positiva y el de una
PCR positiva
PCR
El examen de proteína C-reactiva es un examen general para
verificar si hay una inflamación en el cuerpo. No es un examen
específico. Eso significa que puede revelar que usted tiene una
inflamación en alguna parte del cuerpo, pero no puede señalar la
localización exacta. El examen de proteína C-reactiva a menudo se
realiza junto con el examen de VSG o de eritro-sedimentación, que
también sirve para buscar inflamación.
Le pueden realizar este examen para:
Buscar exacerbaciones de enfermedades inflamatorias
como artritis reumatoidea, lupus o vasculitis.
Determinar si un antinflamatorio está funcionando para tratar
una enfermedad o afección.
Sin embargo, un nivel de PCR bajo no siempre significa que no se
presente una inflamación. Los niveles de PCR pueden no estar
elevados en personas con artritis reumatoidea y lupus. La razón de
esto no se conoce.
Un examen de PCR más sensible, llamado análisis de la proteína C
reactiva de alta sensibilidad, está disponible para determinar el
riesgo de cardiopatía en una persona.
FACTOR REUMATOIDE
Este examen se usa con mayor frecuencia para el diagnóstico de
la artritis reumatoidea o el síndrome de Sjogren.
Puede aparecer POSITIVO el Factor Reumatoide (FR) en:
Artritis Reumatoide
Dermatomiositis
Escleroderma
Hepatitis crónica
Infección viral crónica
Mononucleosis infecciosa
Leucemia
Lupus Eritematoso Sistémico LES
Síndrome de Sjogren
Síndrome Nefrótico
Tuberculosis
Los niveles del factor reumatoideo superiores a los normales se
pueden ver en personas con otros problemas de salud. Sin embargo,
dichos niveles más altos del FR no se usan para diagnosticar estas
otras afecciones:
SIDA, hepatitis, influenza, mononucleosis infecciosa y otras
infecciones virales
Ciertas enfermedades del riñón
Endocarditis, tuberculosis y otras infecciones bacterianas
Infecciones parasitarias
Leucemia, mieloma múltiple y otros cánceres
Enfermedad pulmonar crónica
Enfermedades crónicas del hígado