TITULO:

“Estudio Fitoquimico y Efecto Antiulceroso del Extracto Acuoso de

Hojas Vallea stipularis L.f. “CHUILLUR” en ratas”

AUTORES:

®Ramirez Carbajal, Gino ®Barahona Osejo, Daniel

RESUMENSe realizo el estudio fitoquimico y la determinación de la actividad antiulceroso de Vallea stipularis L.f. ”Chuillir”.La especie es ubicada en el departamento de Apurimac a 3100 m.s.n.m. Con la muestra pulverizada de hojas se realizo una maceración acuosa .Mediante una marcha fitoquimica se detectaron compuestos fenolicos, taninos, alcaloides,esteroides,saponinas y carbohidratos. Para el análisis cromatografico en capa fina analítica , en escala preparativa, se el sistema de solventes : CHCl3 – EtOH (9:1).La actividad antiulcerosa se determino por la técnica de Lee 1971, induciendo ulcera gástrica en estomago de rata ,el tratamiento con mayor eficacia fue el extracto acuoso de hojas a dosis de 600mg/kg observándose una inhicion del 62% comparado con el grupo patrón que obtuvo un 18% de inhibición . Vallea stipularis L.f. ”Chuillur” presenta actividad antiulcerosa por via intragastrica , dicha actividad probablemente se debe a la presencia de flavonoides en el extracto acuoso de hojas .

INTRODUCCIONDesde la antigüedad la medicina tradicional ha desempeñado un rol importante aliviando las enfermedades y el dolor .Actualmente existe un gran interés por el mejor conocimiento y uso de medicinas alternativas , entre las que destaca la medicina natural .El presente trabajo es un aporte al estudio fitoquimico y farmacológico de Vallea stipularis L.f de nombre vulgar ”Chuillur” .La clasificación taxonómica fue determinada en los laboratorios del Museo de Historia Natural de la Universidad Mayor de San Marcos .Vallea stipularis L.f ”Chuillur” es un arbusto de 2 a 3 metros de altura , con frutos redondeados pequeños con protuberancia en su superficie se desarrolla a una temperatura media anual 10-17 C y se encuentra entre 2200 a 3200 m.s.n.m. El genero de Vallea, posee dos especies en habitas desde Venezuela, hasta Bolivia , una de ellas, nativa del Peru : Vallea stipularis L.f ”Chuillur”.A esta especie se le conoce también como : achacapuli , cugur, crosckash, chchicllur, chuillur (Tamburco), chijllurmay (Cuzco), gorgor, yongasil. Es una plata de la región andina empleada por las comunidades campesinas para el tratamiento de : escorbuto , cicatrizante gastritis, reumatismo, como purgante drástico y analgésico.La importancia del presente trabajo radica en brindar un aporte al estudio fitoquimico y farmacológico de la especie vegetal Vallea stipularis L.f ”Chuillur” a la que se atribuye tradicionalmente muchas propiedades medicinales que aun no han sido estudiadas por este motivo se planteo el estudio de la actividad antiulcerosa del extracto acuoso de las hojas de Vallea stipularis L.f ”Chuillur”

ULCERA PEPTICADefinición: Una úlcera péptica es una erosión o herida en la mucosa del estómago (úlcera gástrica) o en la parte superior del intestino delgado, llamado duodeno (úlcera duodenal). Las úlceras suelen tener un tamaño entre 0.5 y 1.5 cm de diámetro.

Fisiopatologia: La úlcera péptica se define como la pérdida de sustancia que ocurre en aquella parte del tubo digestivo que está bajo la acción del ácido y la pepsina. Estos sitios son frecuentemente el estómago y la primera porción del duodeno, pero puede ocurrir en cualquier lugar del tracto gastrointestinal que por la presencia de mucosa ectopática gástrica produzcan ácido y pepsina, se describen así úlceras pépticas en esófago, vías biliares, colon, recto etc.

 

TIPOS DE ULCERA

CAUSAS

FISIOLOGIA

FISIOLOGIA

Vallea stipularis. L.f

Descripcion botánica: Vallea stipularis L.f.es un árbol de 8 a 10 metros de altura de copa redonda tronco cilíndrico .Su corteza externa es fisurada , de color café sin secreciones ni exudados . Las hojas son acorazonados, simples, alternas(4-7cm de largo; 2-4 cm de ancho) de base truncada , apice acuminado y borde entero :el haz es verde amarillento, y el envés verde claro; las hojas viejas se vuelven rojizas.

Flavonoides y Saponinas Esteroidales

ESTRUCTURA QUIMICA

El principio activo fue aislado en 1828 por Johann BuchnerEl ácido salicílico o salicilato, producto metabólico de la aspirina, es un ácido orgánico antiinflamatorios, aunque la aspirina tiende a ser más eficaz como analgésicoel ácido

acetilsalicílico actúa interrumpiendo estos mecanismos de producción de las prostaglandinas y tromboxanos.Así, gracias a la utilización de la aspirina, se restablece la temperatura normal del organismo y se alivia el dolor

MECANISMO DE ACCION

úlcera pépticas gástricas y sangrado estomacal. En pacientes menores de 14 años se ha dejado de usar la aspirina para el control de los síntomas de la gripe o de la varicela debido al elevado riesgo de contraer el síndrome de Reye

EFECTOS ADVERSOS

DESCRIPCION

ESTRUCTURA QUIMICA

La ranitidina fue desarrollada por Glaxo

La ranitidina (INN) es un antagonista H2, uno de los receptores de la histamina, que inhibe la producción de ácido estomacal

MECANISMO DE ACCION

DESCRIPCION

PARTE EXPERIMENTAL1. OBTENCION DEL EXTRACTO DE CHUILLUR

Una vez seco se paso a pulverizarlo. Para luego hacer dos macerados.

Chuillur se diseco a menos de 40 C para no perder los metabolitos

Una vez seco se paso a pulverizarlo. Para luego hacer dos macerados.

EXTRACTO HIDROALCOHOLICO

Y así lo dejamos macerar por 72 horas en un lugar oscuro con la finalidad de no perder ningún metabolito.

PARTE EXPERIMENTAL

Y así lo dejamos macerar por 72 horas en un lugar oscuro con la finalidad de no perder ningún metabolito.

Y lo llevamos al baño maría .Lo llevamos hasta 100C y lo filtramos .

PARTE EXPERIMENTAL

Agregamos 1000ml de agua destilada

100g obtenidos de la pulverizacion

Nota: Este extracto utilizaremos para inyectas a las ratas y probar la efectividad del Chuillur.

MARCHA FITOQUIMICA

PRUEBA DE MOLISH: 2 ml de extracto acuoso mas 5 gotas de ac.sulfurico concentrado dando como resultado positiva la prueba (+++)

Nos dio positivo ya que muestra el anillo violáceo. Indicando que hay azucares.

PRUEBA DE FEHLING: 2 ml de extracto acuoso mas Reactivo de Fehling A+1ml de Fehling B llevarlo al Baño María dando como resultado positiva la prueba (+) Nos dio positivo ya que muestra el color

rojo ladrillo. Indicando azucares reductores.

PRUEBA DE BENEDICT : 2 ml de extracto acuoso mas Reactivo de Benedict llevarlo al Baño María dando como resultado positiva la prueba (+)

Nos dio positivo ya que muestra el color rojo ladrillo. Indicando azucares reductores.

PRUEBA DE TANINOS : 2 ml de extracto acuoso mas Tricloruro de Fierro dando como resultado positiva la prueba (+++)

FECl3FECl3

Nos dio positivo ya que muestra el color azul negruzco .Indicando la presencia de taninos.

PRUEBA DE GOMAS : 2 ml de extracto acuoso mas Acetato de plomo dando como resultado positiva la prueba (+++)

Nos dio positivo ya que muestra el color amarillo y precipito en el fondo del tubo indicando la presencia de gomas.

PRUEBA DE DRAGENDORFF : 1ml del extracto alcoholico + 2 gotas de rctv de Dragendorff.

RVO. DRAGENDORFF

RVO. DRAGENDORFF

Nos dio positivo ya que muestra el color naranja-rojizo. Indicando presencia de alcaloides

PRUEBA DE SOLUBILIDAD

Para hacer esta prueba se coloca en una placa el extracto y se lleva a la estufa a 40 C y lo secamos .De aquí sacamos 1 g para 3 tubos para realizarles pruebas de solubilidad. Usando etanol, benceno, y acetona

CROMATOGRAFIA

Cromatograma en escala preparativa del extracto acuoso de Vallea stipularis L.f. “Chuillur” sistema estacionario : silicagel , sistema de solventes : CHCl3 : EtOH(9:1)v/v , revelador : solución de AlCl3 y sol.FeCl3 1%

MARCHA FITOQUIMICA “CHUILLUR” Vallea stipularis L.f

Reactivo Metabolitos primarios y secundarios

Resultados

Tricloruro de Aluminio

Flavonoides +++

Shinoda Flavonoides +++

Tricloruro Ferrico

Compuestos Fenolicos

+++

Benedict Carbohidratos +++

Molish Carbohidratos +++

Mayer alcaloides +++

Dragendorff Alcaloides +++

Fehling A y B Azucares Reductores

++

•SOLUCION DE LA ASPIRINA

Solución de 160mg/ml

Solución de 50mg/2ml

•SUERO FISIOLOGICO

2. PREPARACION DE LAS SOLUCIONES:

Solucion de Ranitidina

3. Calculos para Volumen para Administrar:

FARMACOS DOSIS SOLUCIONES VOLUMEN A ADMINISTRAR POR VIA I.P

ASPIRINA 80mg/kg 50mg/ml RATA

Cabeza:

0.39ml

Cola:

0.37ml

Pecho:

0.38

RANITIDINA 50mg/kg 50mg/2ml Cola: 0.08ml

EXTRACTO DE CHUILLUR 600/Kg 600mg/1ml Cabeza: 0.4ml

SUERO FISIOLOGICO 5ml/kg Lomo: 2.15ml

PROCEDIMIENTO1. Pesamos y marcamos a cada rata.2. Medimos la glucosa basal a cada rata.3. Administramos vía oral un volumen

especifico de solucion de aspirina de acuerdo al peso de cada rata

4. Se le dio por 4 dias a las ratas correspondientes el extracto y ranitidina

5. Con la ayuda de una hoja de bisturí, observamos el estomago de cada rata.

RATA PESO VOLUMEN DE ASPIRINA/ RANITIDINA/SUERO

FISIOLOGICO

Lomo A este se aplico suero fisiológico.

Cola

Cabeza

Pecho

DISECCION

Una vez de haberle dado el agente antiulceroso , se evidencio que al pasar de las 2 horas las ratas , se presentaban inquietas, y presencia de heces oscuras. Pasado el quinto día , cuando pasamos a diseccionar y la ratas la abrimos el estomago por el tercio superior encontramos que , presentaba color rojizo, que a comparación de la rata ( lomo) control , ella tenia un color normal pero las ratas que recibieron el agente antiulceroso (aspirina)El estomago de las tres ratas se presentaban mas rojizas de , mayor tamaño y presentaba mal olor.La rata (pecho) la cual fue tratada con el extracto acuoso (chuillur) presento cuatro ulceras.La rata cabeza presento 8 ulceras y mal olor y también, presentaban inflamación, y un color mas rojizo. La rata (cola) que solo se le indujo la ulcera con la aspirina, cuando se le abrió mostraba 12 ulceras pequeñas, mal olor, tamaño del estomago mas grande y color rojizo.

RESULTADOS

•El ”screenig” fitoquimico, llamado también marcha fitoquimico o tamizado fitoquimico , es una de las estapas iniciales de la investigación fitoquimica , que permite determinar cualitativamente los principales grupos de constituyentes químicos de la planta :•Saponinas•Flavonoides•Taninos •Compuestos Fenolicos•Aminoácidos•Carbohidratos •Y en menor concentración de alcaloides,esteroides.•La prueba de solubilidad del extracto acuoso “Chuillur” Se observa su solubilidad en metanol, de donde se deduce que los componenentes químicos mayoritarios son de estructura y naturaleza polar. 

DISCUSION

DISCUSIONSolvente Solubilidad

Agua Destilada ++

Etanol ++

Metanol +++

n-Butanol ++

Acetato de Etilo +-

Cloroformo +-

Benceno -

Acetona -

Éter de Petroleo -

n-Hexano -

DISCUSION•Mediante el análisis cromatografico en capa fina , teniendo en cuenta la polaridad de flavonoides se obtuvo mejores resultaos con el sistema de solventes CHCl3: EtOH(9:1), la detección de flavonoides en cromatografía en capa fina y cromatografía en escala preparativa.Se oserbo 7 manchas , se analizaron 4 fracciones, que se revelaron con solución FeCl3 1%,AlCl3 1% y solución H2SO4 50%, en presencia de vapores de amoniaco; el color amarillo observado, indicaría la presencia de flavonas. •El extracto acuoso de la especia Vallea Stipularis L.f ”Chuillur” presentan actividad antiulcerosa a dosis de 600 mg/kg del extracto, en esta concentración no se observa hemorragias , edemas,perdida de plieges.Mientras que en la muestra de ranitidina se mostro menor inhibion de daños. •El efecto antiulceroso se explicaría a la presencia de flavonoides y saponinas esteroidales en Stipularis L.f ”Chuillur” dado que los flavonoides y saponinas interfieren en el metabolismo de las prostaglandinas especialmente en las PGE2 que son responsables de la inhibición de la secreción de acido clorhídrico producido por el mucocitoprotector.

www.cybertesis.edu.pe/sisbib/2006/chavez_fj/.../chavez_fj-TH.1.pdf.backtoeden2.blogspot.com/2008/07/raque-vallea-stipularis-l.htmlwww.asocam.org/apc-asocam/modules/.../download.php?file...2...www.siac.net.co/sib/catalogoespecies/especie.do?idBuscar=1775...www.sacha.org/famil/n_to_z/elaeocarp_sp.htm

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS