DATOS GENERALESDatos personales del Alumno

Apellidos Saacutenchez Martiacuten Nombre JavierFecha de nacimiento 4051984Lugar de nacimiento Salamanca (Espantildea)Domicilio CMinistro Fernaacutendez Ordoacutentildeez N ordm 5 1ordm E Santa Marta de Tormes (Salamanca) Coacutedigo Postal 37900Teleacutefono 923-200987 660367669Correo electroacutenico javicheztin84hotmailcom

Datos de la empresaNombre de la empresa y ubicacioacuten

Instituto de Agricultura Sostenible (IAS) Finca Alameda del Obispo Avda Meneacutendez Pidal SN APDO 4084 14080 Coacuterdoba

Breve descripcioacuten de la empresa y Actividad

El Instituto Agricultura Sostenible (IAS) fue creado por el Consejo Superior de Investigaciones Cientiacuteficas (CSIC) en 1992 para consolidar el Instituto de Agronomiacutea y Proteccioacuten Vegetal establecido tres antildeos antes El IAS se encuentra en el Campus Alameda del Obispo compartiendo recursos e investigacioacuten con el Centro de Investigacioacuten y Formacioacuten Agraria de la Junta de Andaluciacutea y la Escuela Teacutecnica Superior de Ingenieros Agroacutenomos y Montes de la Universidad de Coacuterdoba El proyecto cientiacutefico del IAS aborda la sostenibilidad de los sistemas agriacutecolas con un compromiso especial con los sistemas agriacutecolas andaluces Sus objetivos estrateacutegicos son

1 Aumentar la eficiencia y estabilidad de la produccioacuten agriacutecola mediante la utilizacioacuten oacuteptima de los recursos y el aumento de la cantidad yo calidad de la produccioacuten

2 Conservar los recursos naturales de los sistemas agriacutecolas andaluces y disminuir los impactos negativos de la agricultura sobre el medio ambiente

3 Desarrollar sistemas de ayuda en la toma de decisiones en la gestioacuten de los sistemas agriacutecolas

La actividad del IAS se financia con fondos del CSIC y proyectos de investigacioacuten e infraestructura de los planes nacionales de I+D los programas marco de la Unioacuten Europea y convenios con empresas y otras agencias nacionales e internacionales La

1

investigacioacuten se desarrolla en dos departamentos Agronomiacutea y Mejora Geneacutetica Vegetal y Proteccioacuten de Cultivos constituidos cada uno de ellos por varios grupos de investigacioacuten

Estructura y Organizacioacuten

Direccioacuten

Dr Joseacute Mariacutea Melero Vara Director

Dr Joseacute Mariacutea Fernaacutendez Martiacutenez Vicedirector

Dordf Dulcenombre Ramiacuterez Peacuterez Gerente

Departamentos de Investigacioacuten

Dr Francisco Orgaz Rosuacutea Jefe Departamento Agronomiacutea

Dr Joseacute Ignacio Cubero Salmeroacuten Jefe Departamento Mejora

Geneacutetica Vegetal

Dra Francisca Loacutepez Granados Jefe Departamento Proteccioacuten de Cultivos

Unidades de Servicios

Ramiacuterez Peacuterez Dulcenombre Gerencia

Biechy Baldaacuten Juan Luiacutes Jefe Negociado Administracioacuten N 16

Corro Castillejo Mariacutea Beleacuten Servicios Administrativos Auxiliar

Palacios Saacutenchez Joseacute Antonio Servicios Administrativos Auxiliar

Peacuterez Ortega Angela Servicios Administrativos Habilitada Pagadora

Saacutenchez Martiacutenez Joseacute Juan Servicios Administrativos Auxiliar

Priego Torres Joseacute Manuel Servicios Generales

Unidades de Apoyo

Loacutepez de Bustamante de los Cobos Mordf Carmen Biblioteca

Muntildeoz Urbano Manuel-Laacutezaro Informaacutetica

Descripcioacuten de la praacutectica

2

El trabajo realizado ha estado relacionado con la mejora geneacutetica de cereales y leguminosas por resistencia a enfermedades actividades encuadradas dentro del proyecto CICYT AGL 2005-01781 El objetivo ha sido identificar y caracterizar fuentes de resistencia geneacutetica a enfermedades combinando el uso de la resistencia con otras estrategias de control integrado

Departamento asignado

El departamento adscrito es el Departamento de Mejora por Resistencia dentro del Departamento de Mejora Geneacutetica de Leguminosas

Calendario y Horario de PraacutecticaLas praacutecticas se realizaron en el IAS en entre el diacutea 2 de Julio hasta el 31 de Agosto de 2007 de 9 a 14 horas diarias ocupando un total de 200 horas lectivas

MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS

Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticasEl principal objetivo de la praacutectica consiste en conocer y entender la enorme importancia y trascendencia del conocimiento de los mecanismos de resistencia frente a patoacutegenos en la mejora geneacutetica vegetal

Plan de trabajo a largo plazoUno de los principales objetivos del IAS consiste en conocer los mecanismos de resistencia de las diversas liacuteneas de una coleccioacuten para su posible uso en programas de mejora geneacutetica

3

Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica

Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena El agente etioloacutegico causal de la roya de la avena es Puccinia coronata Cuando la espora cae sobre la cutiacutecula de la hoja y si las condiciones de humedad se lo permite germinaraacuten dando lugar a un tubo germinativo el cual se dirige hacia un estoma en donde desarrolla un apresorio Posteriormente daraacute lugar a la formacioacuten de una vesiacutecula subestomaacutetica en la caacutemara subestomaacutetica del estoma A partir de la vesiacutecula subestomaacutetica surgiraacuten varias hifas que se dirigiraacuten hacia varias ceacutelulas del mesoacutefilo para convertirse en ceacutelulas madre de haustorio Eacutestas pueden seguir desarrollaacutendose y haciendo auacuten maacutes grande el micelio intercelular del hongo provocando auacuten si cabe mayor dantildeo al tejido vegetal

Ilustracioacuten 1 La graacutefica muestra como una espora (U) de roya germina formando un tubo germinativo(TG) el cual a su vez forma un apresorio sobre el estoma (A) Bajo este se forma una vesiacutecula subestomaacutetica (VS) que origina unas hifas intercelulares HI Tambieacuten se pueden encontrar ceacutelulas especializadas que originan ceacutelulas madre de los haustorios (M) que emiten usos de penetracioacuten

Una vez realizada dicha documentacioacuten se procedioacute la aplicacioacuten praacutectica de los conocimientos teoacutericos adquiridos

4

Los ensayos se realizaron en condiciones controladas en una caacutemara de germinacioacuten El trabajo se llevoacute a cabo con 8 variedades de avena denominadas AC-1 PREVISION ARACELI AINTREE COBENtildeA SAIA NORLY y KANKAN

La siembra se hizo de tal manera que se obtuvieran 4 repeticiones de cada genotipo para poder aplicar anaacutelisis estadiacutesticos subsiguientes y por duplicado puesto que una parte del experimento teniacutea como objetivo estudiar los componentes macroscoacutepicos de la enfermedad y otro parte estaba dirigida al estudio microscoacutepico de la enfermedad para ver como los diferentes genotipos respondiacutean frente al patoacutegeno

Las 4 repeticiones de cada genotipo destinadas al estudio macroscoacutepico se pusieron en una bandeja llena de tierra y lo mismo para las 4 repeticiones para la parte microscoacutepica del estudio

El periodo de tiempo miacutenimo necesario para poder hacer la inoculacioacuten es el que tarde la planta en desplegar completamente su hoja primaria que en nuestro caso tardoacute unos 12-15 diacuteasUna vez dispusimos del material bioloacutegico en su estado de desarrollo oacuteptimo procedimos a la inoculacioacuten con un aislado de Roya de Avena de Coacuterdoba guardado en un arcoacuten a -80 ordm C

Las hojas se dispusieron de tal manera que el haz quedara hacia arriba para que recibiera las esporas de roya cuando las inoculara

Para la inoculacioacuten se empleoacute una torre de inoculacioacuten en cuya base se colocaron las bandejas con las plantas

5

Se utilizaron unas simples monedas de ceacutentimos de euro para lograr el propoacutesito de colocar el haz de la hoja hacia arriba

En la siguiente figura mostramos como se colocan en nuestras bandejas en la parte inferior de la torre de inoculacioacuten

6

Por la parte superior de la torre de inoculacioacuten soltamos el inoacuteculo de roya Estaba conservado en forma de polvo Para espolvorearlo nos ayudamos de un recipiente de vidrio acoplado a una pepita para dar aire y asiacute conseguir expulsar las esporas y que cayeran por la torre de inoculacioacuten

7

Una vez realizada la inoculacioacuten el experimento se dividioacute en dos partes

Parte macroscoacutepica

Consistiacutea en recopilar datos para el estudio de tres aspectos

Tipo de infeccioacuten

Se realizoacute una evaluacioacuten para el tipo de infeccioacuten empleando la escala adaptada de Mcneal el at (1971)

1 0 No se observan siacutentomas2 1 Puntos necroacuteticos sin esporulacioacuten3 Manchas necroacuteticas sin esporulacioacuten4 Puacutestulas pequentildeas rodeadas de abundante necrosis poca esporulacioacuten5 Puacutestulas medianas rodeadas de necrosis y clorosis esporulacioacuten media6 Puacutestulas medianas a grandes rodeadas de necrosis y clorosis

esporulacioacuten media7 Puacutestulas medianas-grandes rodeadas de clorosis pero no de necrosis

8

8 Poca clorosis Buenas esporulacioacuten9 No hay clorosis Muy buena esporulacioacuten

El resultado es que en los 8 genotipos excepto Kankan y Norly se presentaba el mismo estado de esporulacioacuten el 9 por lo tanto susceptibles Kankan no mostroacute puacutestulas durante le periodo de conteo y Norly una proporcioacuten muy escasa y muy al finalEsta evaluacioacuten se llevoacute a cabo despueacutes de que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara

Frecuencia de Infeccioacuten

Se define como el nuacutemero de puacutestulas esporulantes por unidad de aacuterea Para su caacutelculo se esperoacute a que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara y para cada genotipo se calculoacute el nuacutemero de puacutestulas por cm2 Los datos Obtenidos para cada genotipo y sus 4 repeticiones fueron los siguientes

AC1 PREV SAIA COBENtildeA ARACELI AINTREE NORLY KANKAN1 59 735 105 385 425 40 39 -2 68 42 55 - 675 24 19 -3 625 43 12 525 59 10 60 154 675 775 - 28 35 29 75 35M

Periodo de latencia

El periodo de latencia lo entendemos como el periodo de tiempo desde la inoculacioacuten hasta la esporulacioacuten del 50 de las lesiones

El conteo de las puacutestulas se realizoacute cuando aparecieron por primera vez en la superficie de las hojas y a partir de ahiacute cada 12 horas maacutes o menos Se anotoacute la fecha y la hora de cada medida Esta operacioacuten se realizoacute diariamente hasta que el nuacutemero de puacutestulas se asentoacute

9

Genotipo Prevision

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 34 44 77 77 86 108 123 140 145 147 735Hoja 2 32 33 50 57 62 78 85 80 82 84 42Hoja 3 28 46 60 59 75 80 81 79 82 86 43Hoja 4 39 56 64 71 109 120 145 152 150 155 775

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia Hoja 1 228 12939 202 21494 89558Hoja 2 117 76923 202 20969 87372Hoja 3 225 66667 194 20067 83611Hoja 4 262 24809 226 22848 952

Media de Tiempos de Latencia 88935

10

Genotipo AC1

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

23 42 68 66 75 104 118 112 116 118 59

Hoja 2

34 44 80 85 115 122 130 125 128 136 68

Hoja 3

37 59 71 74 100 123 130 115 112 125 625

Hoja 4

39 59 72 89 104 130 135 137 134 135 675

PuacutestlHora Tiempo Pust2

Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

325 523 202 20723 86346

Hoja 2

45 533 202 20733 86388

Hoja 3

15 23333 202 20433 85139

Hoja 4

1625 52308 202 20723 86346

Media de Tiempos de Latencia

86055

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

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• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

El trabajo realizado ha estado relacionado con la mejora geneacutetica de cereales y leguminosas por resistencia a enfermedades actividades encuadradas dentro del proyecto CICYT AGL 2005-01781 El objetivo ha sido identificar y caracterizar fuentes de resistencia geneacutetica a enfermedades combinando el uso de la resistencia con otras estrategias de control integrado

Departamento asignado

El departamento adscrito es el Departamento de Mejora por Resistencia dentro del Departamento de Mejora Geneacutetica de Leguminosas

Calendario y Horario de PraacutecticaLas praacutecticas se realizaron en el IAS en entre el diacutea 2 de Julio hasta el 31 de Agosto de 2007 de 9 a 14 horas diarias ocupando un total de 200 horas lectivas

MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS

Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticasEl principal objetivo de la praacutectica consiste en conocer y entender la enorme importancia y trascendencia del conocimiento de los mecanismos de resistencia frente a patoacutegenos en la mejora geneacutetica vegetal

Plan de trabajo a largo plazoUno de los principales objetivos del IAS consiste en conocer los mecanismos de resistencia de las diversas liacuteneas de una coleccioacuten para su posible uso en programas de mejora geneacutetica

3

Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica

Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena El agente etioloacutegico causal de la roya de la avena es Puccinia coronata Cuando la espora cae sobre la cutiacutecula de la hoja y si las condiciones de humedad se lo permite germinaraacuten dando lugar a un tubo germinativo el cual se dirige hacia un estoma en donde desarrolla un apresorio Posteriormente daraacute lugar a la formacioacuten de una vesiacutecula subestomaacutetica en la caacutemara subestomaacutetica del estoma A partir de la vesiacutecula subestomaacutetica surgiraacuten varias hifas que se dirigiraacuten hacia varias ceacutelulas del mesoacutefilo para convertirse en ceacutelulas madre de haustorio Eacutestas pueden seguir desarrollaacutendose y haciendo auacuten maacutes grande el micelio intercelular del hongo provocando auacuten si cabe mayor dantildeo al tejido vegetal

Ilustracioacuten 1 La graacutefica muestra como una espora (U) de roya germina formando un tubo germinativo(TG) el cual a su vez forma un apresorio sobre el estoma (A) Bajo este se forma una vesiacutecula subestomaacutetica (VS) que origina unas hifas intercelulares HI Tambieacuten se pueden encontrar ceacutelulas especializadas que originan ceacutelulas madre de los haustorios (M) que emiten usos de penetracioacuten

Una vez realizada dicha documentacioacuten se procedioacute la aplicacioacuten praacutectica de los conocimientos teoacutericos adquiridos

4

Los ensayos se realizaron en condiciones controladas en una caacutemara de germinacioacuten El trabajo se llevoacute a cabo con 8 variedades de avena denominadas AC-1 PREVISION ARACELI AINTREE COBENtildeA SAIA NORLY y KANKAN

La siembra se hizo de tal manera que se obtuvieran 4 repeticiones de cada genotipo para poder aplicar anaacutelisis estadiacutesticos subsiguientes y por duplicado puesto que una parte del experimento teniacutea como objetivo estudiar los componentes macroscoacutepicos de la enfermedad y otro parte estaba dirigida al estudio microscoacutepico de la enfermedad para ver como los diferentes genotipos respondiacutean frente al patoacutegeno

Las 4 repeticiones de cada genotipo destinadas al estudio macroscoacutepico se pusieron en una bandeja llena de tierra y lo mismo para las 4 repeticiones para la parte microscoacutepica del estudio

El periodo de tiempo miacutenimo necesario para poder hacer la inoculacioacuten es el que tarde la planta en desplegar completamente su hoja primaria que en nuestro caso tardoacute unos 12-15 diacuteasUna vez dispusimos del material bioloacutegico en su estado de desarrollo oacuteptimo procedimos a la inoculacioacuten con un aislado de Roya de Avena de Coacuterdoba guardado en un arcoacuten a -80 ordm C

Las hojas se dispusieron de tal manera que el haz quedara hacia arriba para que recibiera las esporas de roya cuando las inoculara

Para la inoculacioacuten se empleoacute una torre de inoculacioacuten en cuya base se colocaron las bandejas con las plantas

5

Se utilizaron unas simples monedas de ceacutentimos de euro para lograr el propoacutesito de colocar el haz de la hoja hacia arriba

En la siguiente figura mostramos como se colocan en nuestras bandejas en la parte inferior de la torre de inoculacioacuten

6

Por la parte superior de la torre de inoculacioacuten soltamos el inoacuteculo de roya Estaba conservado en forma de polvo Para espolvorearlo nos ayudamos de un recipiente de vidrio acoplado a una pepita para dar aire y asiacute conseguir expulsar las esporas y que cayeran por la torre de inoculacioacuten

7

Una vez realizada la inoculacioacuten el experimento se dividioacute en dos partes

Parte macroscoacutepica

Consistiacutea en recopilar datos para el estudio de tres aspectos

Tipo de infeccioacuten

Se realizoacute una evaluacioacuten para el tipo de infeccioacuten empleando la escala adaptada de Mcneal el at (1971)

1 0 No se observan siacutentomas2 1 Puntos necroacuteticos sin esporulacioacuten3 Manchas necroacuteticas sin esporulacioacuten4 Puacutestulas pequentildeas rodeadas de abundante necrosis poca esporulacioacuten5 Puacutestulas medianas rodeadas de necrosis y clorosis esporulacioacuten media6 Puacutestulas medianas a grandes rodeadas de necrosis y clorosis

esporulacioacuten media7 Puacutestulas medianas-grandes rodeadas de clorosis pero no de necrosis

8

8 Poca clorosis Buenas esporulacioacuten9 No hay clorosis Muy buena esporulacioacuten

El resultado es que en los 8 genotipos excepto Kankan y Norly se presentaba el mismo estado de esporulacioacuten el 9 por lo tanto susceptibles Kankan no mostroacute puacutestulas durante le periodo de conteo y Norly una proporcioacuten muy escasa y muy al finalEsta evaluacioacuten se llevoacute a cabo despueacutes de que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara

Frecuencia de Infeccioacuten

Se define como el nuacutemero de puacutestulas esporulantes por unidad de aacuterea Para su caacutelculo se esperoacute a que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara y para cada genotipo se calculoacute el nuacutemero de puacutestulas por cm2 Los datos Obtenidos para cada genotipo y sus 4 repeticiones fueron los siguientes

AC1 PREV SAIA COBENtildeA ARACELI AINTREE NORLY KANKAN1 59 735 105 385 425 40 39 -2 68 42 55 - 675 24 19 -3 625 43 12 525 59 10 60 154 675 775 - 28 35 29 75 35M

Periodo de latencia

El periodo de latencia lo entendemos como el periodo de tiempo desde la inoculacioacuten hasta la esporulacioacuten del 50 de las lesiones

El conteo de las puacutestulas se realizoacute cuando aparecieron por primera vez en la superficie de las hojas y a partir de ahiacute cada 12 horas maacutes o menos Se anotoacute la fecha y la hora de cada medida Esta operacioacuten se realizoacute diariamente hasta que el nuacutemero de puacutestulas se asentoacute

9

Genotipo Prevision

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 34 44 77 77 86 108 123 140 145 147 735Hoja 2 32 33 50 57 62 78 85 80 82 84 42Hoja 3 28 46 60 59 75 80 81 79 82 86 43Hoja 4 39 56 64 71 109 120 145 152 150 155 775

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia Hoja 1 228 12939 202 21494 89558Hoja 2 117 76923 202 20969 87372Hoja 3 225 66667 194 20067 83611Hoja 4 262 24809 226 22848 952

Media de Tiempos de Latencia 88935

10

Genotipo AC1

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

23 42 68 66 75 104 118 112 116 118 59

Hoja 2

34 44 80 85 115 122 130 125 128 136 68

Hoja 3

37 59 71 74 100 123 130 115 112 125 625

Hoja 4

39 59 72 89 104 130 135 137 134 135 675

PuacutestlHora Tiempo Pust2

Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

325 523 202 20723 86346

Hoja 2

45 533 202 20733 86388

Hoja 3

15 23333 202 20433 85139

Hoja 4

1625 52308 202 20723 86346

Media de Tiempos de Latencia

86055

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

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• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica

Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena El agente etioloacutegico causal de la roya de la avena es Puccinia coronata Cuando la espora cae sobre la cutiacutecula de la hoja y si las condiciones de humedad se lo permite germinaraacuten dando lugar a un tubo germinativo el cual se dirige hacia un estoma en donde desarrolla un apresorio Posteriormente daraacute lugar a la formacioacuten de una vesiacutecula subestomaacutetica en la caacutemara subestomaacutetica del estoma A partir de la vesiacutecula subestomaacutetica surgiraacuten varias hifas que se dirigiraacuten hacia varias ceacutelulas del mesoacutefilo para convertirse en ceacutelulas madre de haustorio Eacutestas pueden seguir desarrollaacutendose y haciendo auacuten maacutes grande el micelio intercelular del hongo provocando auacuten si cabe mayor dantildeo al tejido vegetal

Ilustracioacuten 1 La graacutefica muestra como una espora (U) de roya germina formando un tubo germinativo(TG) el cual a su vez forma un apresorio sobre el estoma (A) Bajo este se forma una vesiacutecula subestomaacutetica (VS) que origina unas hifas intercelulares HI Tambieacuten se pueden encontrar ceacutelulas especializadas que originan ceacutelulas madre de los haustorios (M) que emiten usos de penetracioacuten

Una vez realizada dicha documentacioacuten se procedioacute la aplicacioacuten praacutectica de los conocimientos teoacutericos adquiridos

4

Los ensayos se realizaron en condiciones controladas en una caacutemara de germinacioacuten El trabajo se llevoacute a cabo con 8 variedades de avena denominadas AC-1 PREVISION ARACELI AINTREE COBENtildeA SAIA NORLY y KANKAN

La siembra se hizo de tal manera que se obtuvieran 4 repeticiones de cada genotipo para poder aplicar anaacutelisis estadiacutesticos subsiguientes y por duplicado puesto que una parte del experimento teniacutea como objetivo estudiar los componentes macroscoacutepicos de la enfermedad y otro parte estaba dirigida al estudio microscoacutepico de la enfermedad para ver como los diferentes genotipos respondiacutean frente al patoacutegeno

Las 4 repeticiones de cada genotipo destinadas al estudio macroscoacutepico se pusieron en una bandeja llena de tierra y lo mismo para las 4 repeticiones para la parte microscoacutepica del estudio

El periodo de tiempo miacutenimo necesario para poder hacer la inoculacioacuten es el que tarde la planta en desplegar completamente su hoja primaria que en nuestro caso tardoacute unos 12-15 diacuteasUna vez dispusimos del material bioloacutegico en su estado de desarrollo oacuteptimo procedimos a la inoculacioacuten con un aislado de Roya de Avena de Coacuterdoba guardado en un arcoacuten a -80 ordm C

Las hojas se dispusieron de tal manera que el haz quedara hacia arriba para que recibiera las esporas de roya cuando las inoculara

Para la inoculacioacuten se empleoacute una torre de inoculacioacuten en cuya base se colocaron las bandejas con las plantas

5

Se utilizaron unas simples monedas de ceacutentimos de euro para lograr el propoacutesito de colocar el haz de la hoja hacia arriba

En la siguiente figura mostramos como se colocan en nuestras bandejas en la parte inferior de la torre de inoculacioacuten

6

Por la parte superior de la torre de inoculacioacuten soltamos el inoacuteculo de roya Estaba conservado en forma de polvo Para espolvorearlo nos ayudamos de un recipiente de vidrio acoplado a una pepita para dar aire y asiacute conseguir expulsar las esporas y que cayeran por la torre de inoculacioacuten

7

Una vez realizada la inoculacioacuten el experimento se dividioacute en dos partes

Parte macroscoacutepica

Consistiacutea en recopilar datos para el estudio de tres aspectos

Tipo de infeccioacuten

Se realizoacute una evaluacioacuten para el tipo de infeccioacuten empleando la escala adaptada de Mcneal el at (1971)

1 0 No se observan siacutentomas2 1 Puntos necroacuteticos sin esporulacioacuten3 Manchas necroacuteticas sin esporulacioacuten4 Puacutestulas pequentildeas rodeadas de abundante necrosis poca esporulacioacuten5 Puacutestulas medianas rodeadas de necrosis y clorosis esporulacioacuten media6 Puacutestulas medianas a grandes rodeadas de necrosis y clorosis

esporulacioacuten media7 Puacutestulas medianas-grandes rodeadas de clorosis pero no de necrosis

8

8 Poca clorosis Buenas esporulacioacuten9 No hay clorosis Muy buena esporulacioacuten

El resultado es que en los 8 genotipos excepto Kankan y Norly se presentaba el mismo estado de esporulacioacuten el 9 por lo tanto susceptibles Kankan no mostroacute puacutestulas durante le periodo de conteo y Norly una proporcioacuten muy escasa y muy al finalEsta evaluacioacuten se llevoacute a cabo despueacutes de que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara

Frecuencia de Infeccioacuten

Se define como el nuacutemero de puacutestulas esporulantes por unidad de aacuterea Para su caacutelculo se esperoacute a que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara y para cada genotipo se calculoacute el nuacutemero de puacutestulas por cm2 Los datos Obtenidos para cada genotipo y sus 4 repeticiones fueron los siguientes

AC1 PREV SAIA COBENtildeA ARACELI AINTREE NORLY KANKAN1 59 735 105 385 425 40 39 -2 68 42 55 - 675 24 19 -3 625 43 12 525 59 10 60 154 675 775 - 28 35 29 75 35M

Periodo de latencia

El periodo de latencia lo entendemos como el periodo de tiempo desde la inoculacioacuten hasta la esporulacioacuten del 50 de las lesiones

El conteo de las puacutestulas se realizoacute cuando aparecieron por primera vez en la superficie de las hojas y a partir de ahiacute cada 12 horas maacutes o menos Se anotoacute la fecha y la hora de cada medida Esta operacioacuten se realizoacute diariamente hasta que el nuacutemero de puacutestulas se asentoacute

9

Genotipo Prevision

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 34 44 77 77 86 108 123 140 145 147 735Hoja 2 32 33 50 57 62 78 85 80 82 84 42Hoja 3 28 46 60 59 75 80 81 79 82 86 43Hoja 4 39 56 64 71 109 120 145 152 150 155 775

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia Hoja 1 228 12939 202 21494 89558Hoja 2 117 76923 202 20969 87372Hoja 3 225 66667 194 20067 83611Hoja 4 262 24809 226 22848 952

Media de Tiempos de Latencia 88935

10

Genotipo AC1

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

23 42 68 66 75 104 118 112 116 118 59

Hoja 2

34 44 80 85 115 122 130 125 128 136 68

Hoja 3

37 59 71 74 100 123 130 115 112 125 625

Hoja 4

39 59 72 89 104 130 135 137 134 135 675

PuacutestlHora Tiempo Pust2

Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

325 523 202 20723 86346

Hoja 2

45 533 202 20733 86388

Hoja 3

15 23333 202 20433 85139

Hoja 4

1625 52308 202 20723 86346

Media de Tiempos de Latencia

86055

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

Los ensayos se realizaron en condiciones controladas en una caacutemara de germinacioacuten El trabajo se llevoacute a cabo con 8 variedades de avena denominadas AC-1 PREVISION ARACELI AINTREE COBENtildeA SAIA NORLY y KANKAN

La siembra se hizo de tal manera que se obtuvieran 4 repeticiones de cada genotipo para poder aplicar anaacutelisis estadiacutesticos subsiguientes y por duplicado puesto que una parte del experimento teniacutea como objetivo estudiar los componentes macroscoacutepicos de la enfermedad y otro parte estaba dirigida al estudio microscoacutepico de la enfermedad para ver como los diferentes genotipos respondiacutean frente al patoacutegeno

Las 4 repeticiones de cada genotipo destinadas al estudio macroscoacutepico se pusieron en una bandeja llena de tierra y lo mismo para las 4 repeticiones para la parte microscoacutepica del estudio

El periodo de tiempo miacutenimo necesario para poder hacer la inoculacioacuten es el que tarde la planta en desplegar completamente su hoja primaria que en nuestro caso tardoacute unos 12-15 diacuteasUna vez dispusimos del material bioloacutegico en su estado de desarrollo oacuteptimo procedimos a la inoculacioacuten con un aislado de Roya de Avena de Coacuterdoba guardado en un arcoacuten a -80 ordm C

Las hojas se dispusieron de tal manera que el haz quedara hacia arriba para que recibiera las esporas de roya cuando las inoculara

Para la inoculacioacuten se empleoacute una torre de inoculacioacuten en cuya base se colocaron las bandejas con las plantas

5

Se utilizaron unas simples monedas de ceacutentimos de euro para lograr el propoacutesito de colocar el haz de la hoja hacia arriba

En la siguiente figura mostramos como se colocan en nuestras bandejas en la parte inferior de la torre de inoculacioacuten

6

Por la parte superior de la torre de inoculacioacuten soltamos el inoacuteculo de roya Estaba conservado en forma de polvo Para espolvorearlo nos ayudamos de un recipiente de vidrio acoplado a una pepita para dar aire y asiacute conseguir expulsar las esporas y que cayeran por la torre de inoculacioacuten

7

Una vez realizada la inoculacioacuten el experimento se dividioacute en dos partes

Parte macroscoacutepica

Consistiacutea en recopilar datos para el estudio de tres aspectos

Tipo de infeccioacuten

Se realizoacute una evaluacioacuten para el tipo de infeccioacuten empleando la escala adaptada de Mcneal el at (1971)

1 0 No se observan siacutentomas2 1 Puntos necroacuteticos sin esporulacioacuten3 Manchas necroacuteticas sin esporulacioacuten4 Puacutestulas pequentildeas rodeadas de abundante necrosis poca esporulacioacuten5 Puacutestulas medianas rodeadas de necrosis y clorosis esporulacioacuten media6 Puacutestulas medianas a grandes rodeadas de necrosis y clorosis

esporulacioacuten media7 Puacutestulas medianas-grandes rodeadas de clorosis pero no de necrosis

8

8 Poca clorosis Buenas esporulacioacuten9 No hay clorosis Muy buena esporulacioacuten

El resultado es que en los 8 genotipos excepto Kankan y Norly se presentaba el mismo estado de esporulacioacuten el 9 por lo tanto susceptibles Kankan no mostroacute puacutestulas durante le periodo de conteo y Norly una proporcioacuten muy escasa y muy al finalEsta evaluacioacuten se llevoacute a cabo despueacutes de que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara

Frecuencia de Infeccioacuten

Se define como el nuacutemero de puacutestulas esporulantes por unidad de aacuterea Para su caacutelculo se esperoacute a que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara y para cada genotipo se calculoacute el nuacutemero de puacutestulas por cm2 Los datos Obtenidos para cada genotipo y sus 4 repeticiones fueron los siguientes

AC1 PREV SAIA COBENtildeA ARACELI AINTREE NORLY KANKAN1 59 735 105 385 425 40 39 -2 68 42 55 - 675 24 19 -3 625 43 12 525 59 10 60 154 675 775 - 28 35 29 75 35M

Periodo de latencia

El periodo de latencia lo entendemos como el periodo de tiempo desde la inoculacioacuten hasta la esporulacioacuten del 50 de las lesiones

El conteo de las puacutestulas se realizoacute cuando aparecieron por primera vez en la superficie de las hojas y a partir de ahiacute cada 12 horas maacutes o menos Se anotoacute la fecha y la hora de cada medida Esta operacioacuten se realizoacute diariamente hasta que el nuacutemero de puacutestulas se asentoacute

9

Genotipo Prevision

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 34 44 77 77 86 108 123 140 145 147 735Hoja 2 32 33 50 57 62 78 85 80 82 84 42Hoja 3 28 46 60 59 75 80 81 79 82 86 43Hoja 4 39 56 64 71 109 120 145 152 150 155 775

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia Hoja 1 228 12939 202 21494 89558Hoja 2 117 76923 202 20969 87372Hoja 3 225 66667 194 20067 83611Hoja 4 262 24809 226 22848 952

Media de Tiempos de Latencia 88935

10

Genotipo AC1

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

23 42 68 66 75 104 118 112 116 118 59

Hoja 2

34 44 80 85 115 122 130 125 128 136 68

Hoja 3

37 59 71 74 100 123 130 115 112 125 625

Hoja 4

39 59 72 89 104 130 135 137 134 135 675

PuacutestlHora Tiempo Pust2

Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

325 523 202 20723 86346

Hoja 2

45 533 202 20733 86388

Hoja 3

15 23333 202 20433 85139

Hoja 4

1625 52308 202 20723 86346

Media de Tiempos de Latencia

86055

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

Se utilizaron unas simples monedas de ceacutentimos de euro para lograr el propoacutesito de colocar el haz de la hoja hacia arriba

En la siguiente figura mostramos como se colocan en nuestras bandejas en la parte inferior de la torre de inoculacioacuten

6

Por la parte superior de la torre de inoculacioacuten soltamos el inoacuteculo de roya Estaba conservado en forma de polvo Para espolvorearlo nos ayudamos de un recipiente de vidrio acoplado a una pepita para dar aire y asiacute conseguir expulsar las esporas y que cayeran por la torre de inoculacioacuten

7

Una vez realizada la inoculacioacuten el experimento se dividioacute en dos partes

Parte macroscoacutepica

Consistiacutea en recopilar datos para el estudio de tres aspectos

Tipo de infeccioacuten

Se realizoacute una evaluacioacuten para el tipo de infeccioacuten empleando la escala adaptada de Mcneal el at (1971)

1 0 No se observan siacutentomas2 1 Puntos necroacuteticos sin esporulacioacuten3 Manchas necroacuteticas sin esporulacioacuten4 Puacutestulas pequentildeas rodeadas de abundante necrosis poca esporulacioacuten5 Puacutestulas medianas rodeadas de necrosis y clorosis esporulacioacuten media6 Puacutestulas medianas a grandes rodeadas de necrosis y clorosis

esporulacioacuten media7 Puacutestulas medianas-grandes rodeadas de clorosis pero no de necrosis

8

8 Poca clorosis Buenas esporulacioacuten9 No hay clorosis Muy buena esporulacioacuten

El resultado es que en los 8 genotipos excepto Kankan y Norly se presentaba el mismo estado de esporulacioacuten el 9 por lo tanto susceptibles Kankan no mostroacute puacutestulas durante le periodo de conteo y Norly una proporcioacuten muy escasa y muy al finalEsta evaluacioacuten se llevoacute a cabo despueacutes de que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara

Frecuencia de Infeccioacuten

Se define como el nuacutemero de puacutestulas esporulantes por unidad de aacuterea Para su caacutelculo se esperoacute a que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara y para cada genotipo se calculoacute el nuacutemero de puacutestulas por cm2 Los datos Obtenidos para cada genotipo y sus 4 repeticiones fueron los siguientes

AC1 PREV SAIA COBENtildeA ARACELI AINTREE NORLY KANKAN1 59 735 105 385 425 40 39 -2 68 42 55 - 675 24 19 -3 625 43 12 525 59 10 60 154 675 775 - 28 35 29 75 35M

Periodo de latencia

El periodo de latencia lo entendemos como el periodo de tiempo desde la inoculacioacuten hasta la esporulacioacuten del 50 de las lesiones

El conteo de las puacutestulas se realizoacute cuando aparecieron por primera vez en la superficie de las hojas y a partir de ahiacute cada 12 horas maacutes o menos Se anotoacute la fecha y la hora de cada medida Esta operacioacuten se realizoacute diariamente hasta que el nuacutemero de puacutestulas se asentoacute

9

Genotipo Prevision

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 34 44 77 77 86 108 123 140 145 147 735Hoja 2 32 33 50 57 62 78 85 80 82 84 42Hoja 3 28 46 60 59 75 80 81 79 82 86 43Hoja 4 39 56 64 71 109 120 145 152 150 155 775

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia Hoja 1 228 12939 202 21494 89558Hoja 2 117 76923 202 20969 87372Hoja 3 225 66667 194 20067 83611Hoja 4 262 24809 226 22848 952

Media de Tiempos de Latencia 88935

10

Genotipo AC1

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

23 42 68 66 75 104 118 112 116 118 59

Hoja 2

34 44 80 85 115 122 130 125 128 136 68

Hoja 3

37 59 71 74 100 123 130 115 112 125 625

Hoja 4

39 59 72 89 104 130 135 137 134 135 675

PuacutestlHora Tiempo Pust2

Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

325 523 202 20723 86346

Hoja 2

45 533 202 20733 86388

Hoja 3

15 23333 202 20433 85139

Hoja 4

1625 52308 202 20723 86346

Media de Tiempos de Latencia

86055

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

Por la parte superior de la torre de inoculacioacuten soltamos el inoacuteculo de roya Estaba conservado en forma de polvo Para espolvorearlo nos ayudamos de un recipiente de vidrio acoplado a una pepita para dar aire y asiacute conseguir expulsar las esporas y que cayeran por la torre de inoculacioacuten

7

Una vez realizada la inoculacioacuten el experimento se dividioacute en dos partes

Parte macroscoacutepica

Consistiacutea en recopilar datos para el estudio de tres aspectos

Tipo de infeccioacuten

Se realizoacute una evaluacioacuten para el tipo de infeccioacuten empleando la escala adaptada de Mcneal el at (1971)

1 0 No se observan siacutentomas2 1 Puntos necroacuteticos sin esporulacioacuten3 Manchas necroacuteticas sin esporulacioacuten4 Puacutestulas pequentildeas rodeadas de abundante necrosis poca esporulacioacuten5 Puacutestulas medianas rodeadas de necrosis y clorosis esporulacioacuten media6 Puacutestulas medianas a grandes rodeadas de necrosis y clorosis

esporulacioacuten media7 Puacutestulas medianas-grandes rodeadas de clorosis pero no de necrosis

8

8 Poca clorosis Buenas esporulacioacuten9 No hay clorosis Muy buena esporulacioacuten

El resultado es que en los 8 genotipos excepto Kankan y Norly se presentaba el mismo estado de esporulacioacuten el 9 por lo tanto susceptibles Kankan no mostroacute puacutestulas durante le periodo de conteo y Norly una proporcioacuten muy escasa y muy al finalEsta evaluacioacuten se llevoacute a cabo despueacutes de que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara

Frecuencia de Infeccioacuten

Se define como el nuacutemero de puacutestulas esporulantes por unidad de aacuterea Para su caacutelculo se esperoacute a que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara y para cada genotipo se calculoacute el nuacutemero de puacutestulas por cm2 Los datos Obtenidos para cada genotipo y sus 4 repeticiones fueron los siguientes

AC1 PREV SAIA COBENtildeA ARACELI AINTREE NORLY KANKAN1 59 735 105 385 425 40 39 -2 68 42 55 - 675 24 19 -3 625 43 12 525 59 10 60 154 675 775 - 28 35 29 75 35M

Periodo de latencia

El periodo de latencia lo entendemos como el periodo de tiempo desde la inoculacioacuten hasta la esporulacioacuten del 50 de las lesiones

El conteo de las puacutestulas se realizoacute cuando aparecieron por primera vez en la superficie de las hojas y a partir de ahiacute cada 12 horas maacutes o menos Se anotoacute la fecha y la hora de cada medida Esta operacioacuten se realizoacute diariamente hasta que el nuacutemero de puacutestulas se asentoacute

9

Genotipo Prevision

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 34 44 77 77 86 108 123 140 145 147 735Hoja 2 32 33 50 57 62 78 85 80 82 84 42Hoja 3 28 46 60 59 75 80 81 79 82 86 43Hoja 4 39 56 64 71 109 120 145 152 150 155 775

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia Hoja 1 228 12939 202 21494 89558Hoja 2 117 76923 202 20969 87372Hoja 3 225 66667 194 20067 83611Hoja 4 262 24809 226 22848 952

Media de Tiempos de Latencia 88935

10

Genotipo AC1

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

23 42 68 66 75 104 118 112 116 118 59

Hoja 2

34 44 80 85 115 122 130 125 128 136 68

Hoja 3

37 59 71 74 100 123 130 115 112 125 625

Hoja 4

39 59 72 89 104 130 135 137 134 135 675

PuacutestlHora Tiempo Pust2

Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

325 523 202 20723 86346

Hoja 2

45 533 202 20733 86388

Hoja 3

15 23333 202 20433 85139

Hoja 4

1625 52308 202 20723 86346

Media de Tiempos de Latencia

86055

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

Una vez realizada la inoculacioacuten el experimento se dividioacute en dos partes

Parte macroscoacutepica

Consistiacutea en recopilar datos para el estudio de tres aspectos

Tipo de infeccioacuten

Se realizoacute una evaluacioacuten para el tipo de infeccioacuten empleando la escala adaptada de Mcneal el at (1971)

1 0 No se observan siacutentomas2 1 Puntos necroacuteticos sin esporulacioacuten3 Manchas necroacuteticas sin esporulacioacuten4 Puacutestulas pequentildeas rodeadas de abundante necrosis poca esporulacioacuten5 Puacutestulas medianas rodeadas de necrosis y clorosis esporulacioacuten media6 Puacutestulas medianas a grandes rodeadas de necrosis y clorosis

esporulacioacuten media7 Puacutestulas medianas-grandes rodeadas de clorosis pero no de necrosis

8

8 Poca clorosis Buenas esporulacioacuten9 No hay clorosis Muy buena esporulacioacuten

El resultado es que en los 8 genotipos excepto Kankan y Norly se presentaba el mismo estado de esporulacioacuten el 9 por lo tanto susceptibles Kankan no mostroacute puacutestulas durante le periodo de conteo y Norly una proporcioacuten muy escasa y muy al finalEsta evaluacioacuten se llevoacute a cabo despueacutes de que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara

Frecuencia de Infeccioacuten

Se define como el nuacutemero de puacutestulas esporulantes por unidad de aacuterea Para su caacutelculo se esperoacute a que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara y para cada genotipo se calculoacute el nuacutemero de puacutestulas por cm2 Los datos Obtenidos para cada genotipo y sus 4 repeticiones fueron los siguientes

AC1 PREV SAIA COBENtildeA ARACELI AINTREE NORLY KANKAN1 59 735 105 385 425 40 39 -2 68 42 55 - 675 24 19 -3 625 43 12 525 59 10 60 154 675 775 - 28 35 29 75 35M

Periodo de latencia

El periodo de latencia lo entendemos como el periodo de tiempo desde la inoculacioacuten hasta la esporulacioacuten del 50 de las lesiones

El conteo de las puacutestulas se realizoacute cuando aparecieron por primera vez en la superficie de las hojas y a partir de ahiacute cada 12 horas maacutes o menos Se anotoacute la fecha y la hora de cada medida Esta operacioacuten se realizoacute diariamente hasta que el nuacutemero de puacutestulas se asentoacute

9

Genotipo Prevision

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 34 44 77 77 86 108 123 140 145 147 735Hoja 2 32 33 50 57 62 78 85 80 82 84 42Hoja 3 28 46 60 59 75 80 81 79 82 86 43Hoja 4 39 56 64 71 109 120 145 152 150 155 775

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia Hoja 1 228 12939 202 21494 89558Hoja 2 117 76923 202 20969 87372Hoja 3 225 66667 194 20067 83611Hoja 4 262 24809 226 22848 952

Media de Tiempos de Latencia 88935

10

Genotipo AC1

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

23 42 68 66 75 104 118 112 116 118 59

Hoja 2

34 44 80 85 115 122 130 125 128 136 68

Hoja 3

37 59 71 74 100 123 130 115 112 125 625

Hoja 4

39 59 72 89 104 130 135 137 134 135 675

PuacutestlHora Tiempo Pust2

Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

325 523 202 20723 86346

Hoja 2

45 533 202 20733 86388

Hoja 3

15 23333 202 20433 85139

Hoja 4

1625 52308 202 20723 86346

Media de Tiempos de Latencia

86055

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

8 Poca clorosis Buenas esporulacioacuten9 No hay clorosis Muy buena esporulacioacuten

El resultado es que en los 8 genotipos excepto Kankan y Norly se presentaba el mismo estado de esporulacioacuten el 9 por lo tanto susceptibles Kankan no mostroacute puacutestulas durante le periodo de conteo y Norly una proporcioacuten muy escasa y muy al finalEsta evaluacioacuten se llevoacute a cabo despueacutes de que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara

Frecuencia de Infeccioacuten

Se define como el nuacutemero de puacutestulas esporulantes por unidad de aacuterea Para su caacutelculo se esperoacute a que el nuacutemero de puacutestulas se estabilizara y para cada genotipo se calculoacute el nuacutemero de puacutestulas por cm2 Los datos Obtenidos para cada genotipo y sus 4 repeticiones fueron los siguientes

AC1 PREV SAIA COBENtildeA ARACELI AINTREE NORLY KANKAN1 59 735 105 385 425 40 39 -2 68 42 55 - 675 24 19 -3 625 43 12 525 59 10 60 154 675 775 - 28 35 29 75 35M

Periodo de latencia

El periodo de latencia lo entendemos como el periodo de tiempo desde la inoculacioacuten hasta la esporulacioacuten del 50 de las lesiones

El conteo de las puacutestulas se realizoacute cuando aparecieron por primera vez en la superficie de las hojas y a partir de ahiacute cada 12 horas maacutes o menos Se anotoacute la fecha y la hora de cada medida Esta operacioacuten se realizoacute diariamente hasta que el nuacutemero de puacutestulas se asentoacute

9

Genotipo Prevision

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 34 44 77 77 86 108 123 140 145 147 735Hoja 2 32 33 50 57 62 78 85 80 82 84 42Hoja 3 28 46 60 59 75 80 81 79 82 86 43Hoja 4 39 56 64 71 109 120 145 152 150 155 775

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia Hoja 1 228 12939 202 21494 89558Hoja 2 117 76923 202 20969 87372Hoja 3 225 66667 194 20067 83611Hoja 4 262 24809 226 22848 952

Media de Tiempos de Latencia 88935

10

Genotipo AC1

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

23 42 68 66 75 104 118 112 116 118 59

Hoja 2

34 44 80 85 115 122 130 125 128 136 68

Hoja 3

37 59 71 74 100 123 130 115 112 125 625

Hoja 4

39 59 72 89 104 130 135 137 134 135 675

PuacutestlHora Tiempo Pust2

Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

325 523 202 20723 86346

Hoja 2

45 533 202 20733 86388

Hoja 3

15 23333 202 20433 85139

Hoja 4

1625 52308 202 20723 86346

Media de Tiempos de Latencia

86055

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

Genotipo Prevision

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 34 44 77 77 86 108 123 140 145 147 735Hoja 2 32 33 50 57 62 78 85 80 82 84 42Hoja 3 28 46 60 59 75 80 81 79 82 86 43Hoja 4 39 56 64 71 109 120 145 152 150 155 775

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia Hoja 1 228 12939 202 21494 89558Hoja 2 117 76923 202 20969 87372Hoja 3 225 66667 194 20067 83611Hoja 4 262 24809 226 22848 952

Media de Tiempos de Latencia 88935

10

Genotipo AC1

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

23 42 68 66 75 104 118 112 116 118 59

Hoja 2

34 44 80 85 115 122 130 125 128 136 68

Hoja 3

37 59 71 74 100 123 130 115 112 125 625

Hoja 4

39 59 72 89 104 130 135 137 134 135 675

PuacutestlHora Tiempo Pust2

Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

325 523 202 20723 86346

Hoja 2

45 533 202 20733 86388

Hoja 3

15 23333 202 20433 85139

Hoja 4

1625 52308 202 20723 86346

Media de Tiempos de Latencia

86055

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

11

Genotipo Kankan

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 3 15Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 6 7 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1Hoja 2Hoja 3 021 238 3125 31488 1312Hoja 4 042 357 3125 31607 1317

Media del Tiempo de Latencia 13145

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

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Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

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Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

Genotipo Norly

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 24 31 59 66 70 91 90 80 81 78 39Hoja 2 23 34 44 40 40 33 30 36 36 38 19Hoja 3 31 39 49 63 90 123 110 115 117 120 60Hoja 4 19 21 21 20 25 14 15 17 16 15 75

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 193 415 202 20615 85896Hoja 2 012 19167 Hoja 3 147 952 2165 22602 94175Hoja 4 01 190

Media del Tiempo de Latencia

90035

12

Genotipo Aintree

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago

Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1

32 44 80 90 110 79 75 77 76 80 40

Hoja 2

28 50 57 55 54 43 44 40 41 48 24

Hoja 3

9 9 12 20 25 35 25 21 20 20 10

Hoja 4

37 54 65 66 66 55 53 56 55 58 29

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo

PrevioTotal de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1

15 533 19933 83054

Hoja 2

014 171 171 7125

Hoja 3

055 182 19582 81592

Hoja 4

019 19473 81138

19022 79258Media del Tiempo de Latencia

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

Genotipo Cobentildea

Fecha 18-ago 18-ago 19-ago 19-ago 20-ago 20-ago 21-ago 21-ago 22-ago 23-ago 23-ago 24-ago Mitad Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 21 26 37 43 56 64 63 74 73 77Hoja 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0Hoja 3 43 49 55 68 86 90 105 101 115 105Hoja 4 5 16 39 37 43 56 59 52 51 56

PuacutestlHora Tiempo Pust2 Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 063 238 2165 21888 912Hoja 2 0 0 0 0 0Hoja 3 041 854 202 21054 87725Hoja 4 159 755 202 20955 87313

Media del Tiempo de Latencia 887

13

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

15

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

14

Genotipo Araceli

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

23-ago

24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 7 19 44 56 74 83 85 86 85 85 425Hoja 2 40 42 74 81 95 120 115 130 133 135 675Hoja 3 40 47 65 6 94 100 110 91 110 118 59Hoja 4 35 46 56 73 82 76 65 73 70 70 35

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 172 1366 202 21566 89858Hoja 2 221 1154 202 21354 88975Hoja 3 124 968 202 21168 882Hoja 4 138 0 194 194 80833

Media del Tiempo de Latencia 86967

Genotipo Saia

Fecha 18-ago

18-ago

19-ago

19-ago

20-ago

20-ago

21-ago

21-ago

22-ago

23-ago

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24-ago Mitad

Hora 1100 1900 930 1900 930 1900 930 1900 930 930 1900 930 ReptHoja 1 0 0 1 4 14 16 20 22 22 22 21 105Hoja 2 0 0 1 5 7 10 10 11 11 11 11 55Hoja 3 0 0 2 3 5 17 22 25 23 23 24 12Hoja 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0

PuacutestlHora Tiempo Pust2Periodo Previo Total de Horas Periodo de Latencia

Hoja 1 069 942 226 23542 98092Hoja 2 014 357 226 22957 95654Hoja 3 126 556 2405 24606 10253Hoja 4 0 0 0 0 0

Media de Tiempo de Latencia 98757

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

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AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

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Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

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1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

A tenor de los resultados expuestos podemos sacar varias conclusiones

- Todos los genotipos a excepcioacuten de Norly y Kankan presenta un periodo de latencia muy similar

- Kankan presenta un comportamiento macroscoacutepico excepcional pues no presenta puacutestulas apenas y ademaacutes la enfermedad necesita mucho tiempo para instaurarse

- El genotipo Norly tambieacuten muestra un comportamiento bueno pero no tanto como el anterior

Parte Macroscoacutepica

Esta parte del experimento teniacutea como objetivo comprobar el comportamiento del patoacutegeno en cada uno de los 8 hueacutespedes diferentes para comprobar en funcioacuten del grado del desarrollo y crecimiento del patoacutegeno cual de los genotipos era maacutes o menos resistente Los datos obtenidos en la parte miscroscoacutepica teniacutean que tener una correlacioacuten con los obtenidos en la anterior parte como veremos a continuacioacuten

Se consideraron varios aspectos

En cada repeticioacuten se contabilizoacute el de Germinacioacuten Una vez determinado de 100 esporas germinadas se contaron el nuacutemero correspondiente a cada uno de estos estados

GT Espora germinada pero sin formar apresorioAsinV Espora germinada apresorio formado pero no la vesiacutecula subestomaacuteticaEA Espora germinada apresorio formado con vesiacutecula subestomaacutetica y menos de 6 ceacutelulas madre del haustorioEA-N idem con necrosis en las ceacutelulas del mesoacutefilo en contacto con las ceacutelulas madre del haustorioEST Colonias perfectamente establecidas EST-N Colonias establecidas pero con necrosis

Ademaacutes se midioacute la longitud y anchura asiacute como el aacuterea media de las colonias establecidas

Los resultados son los que aquiacute se muestran

AC1 Prevision Saia Cobentildea Araceli Aintree Norly Kankan A sin Vs 1825 12 1225 8 9 115 125 725EA 1475 875 61 1575 725 17 26 75EA-N 135 025 025 11EST 67 7925 1325 755 8375 715 595 3025EST-N 05 175 44

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AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

17

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

18

• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

AC1 Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 6132 1836 292152719Repeticioacuten 2 892 3092 452701937Repeticioacuten 3 9128 2572 419706057Repeticioacuten 4 614 1792 287597391 Media 758 2323 363039526

Saia Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10216 3872 548556261Repeticioacuten 2 10288 3656 524232498Repeticioacuten 3 93875 35875 501486814Repeticioacuten 4 123521739 441304348 632534525 Media 105609185 388213587 551702525

Araceli Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 19204 6072 933038836Repeticioacuten 2 17572 5272 834080723Repeticioacuten 3 1634 5376 811838444Repeticioacuten 4 175 6812 937835947 Media 17654 5883 879198488

Norly Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 14804 4796 736038412Repeticioacuten 2 15224 52 770016786Repeticioacuten 3 11612 4196 604398199Repeticioacuten 4 13868 3988 644014909 Media 13877 4545 688617077

Prevision

16

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

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1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

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• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

Promedio l Promedio w AacutereaRepeticioacuten 1 10708 3112 502579825Repeticioacuten 2 9028 2952 447864754Repeticioacuten 3 10252 298 480221394Repeticioacuten 4 9796 3144 479312611 Media 9946 3047 477494646

Cobentildea Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 1434 4768 716058762Repeticioacuten 2 14788 5604 793155315Repeticioacuten 3 1572 6308 866101956Repeticioacuten 4 15292 5436 79506307 Media 15035 5529 792594776

Aintree Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 10908 4368 597781553Repeticioacuten 2 11084 4224 582647827Repeticioacuten 3 13372 4132 650829381Repeticioacuten 4 14564 432 677068144 Media 12482 4261 627081726

Kankan Promedio l Promedio w Aacuterea Repeticioacuten 1 16796 5476 83669521Repeticioacuten 2 17016 5164 810599189Repeticioacuten 3 1854 656 953255075Repeticioacuten 4 18596 6256 926205176 Media 17737 5864 881688663

Conclusiones

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1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

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• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena

1 Los resultados macroscoacutepicos obtenidos muestran correlacioacuten con los microscoacutepicos A tenor de los resultados los genotipos AC1 Prevision y Araceli son genotipos altamente susceptibles El tipo de infeccioacuten la frecuencia de infeccioacuten el periodo de latencia asiacute lo confirman Esto estaacute correlacionado con los datos microscoacutepicos obtenidos en los que se observan en estos genotipos como la mayor parte de las esporas germinadas forman colonias bien establecidas

2 El genotipo Kankan microscoacutepicamente hablando presenta una gran proporcioacuten de colonias establecidas pero con necrosis de las ceacutelulas del mesoacutefilo adyacentes lo que quiere decir que la planta muestra resistencia por respuesta hipersensible lo cual por otra parte no es muy interesante puesto que la mayor parte de este tipo de resistencias son monogeacutenicas y faacutecilmente superadas por el patoacutegeno

Ilustracioacuten 2 Microfotografiacutea en la que se muestra la reaccioacuten hipersensible En azul la hifa del hongo En Amarillo la ceacutelula vegetal muerta

3 El genotipo Saia sin embargo muestra grandes diferencias a nivel microscoacutepico con el anterior genotipo Kankan Aunque microscoacutepicamente los datos son praacutecticamente ideacutenticos a nivel microscopio se observa como la gran mayoriacutea de las colonias no llegan a establecerse son EA (Early abortion) Este genotipo muestra resistencia por penetracioacuten que es muy interesante ya que no se trata de una resistencia monogeacutenica como la anterior sino que es multigeacutenica difiacutecilmente superable por el patoacutegeno Podriacutea ser esta variedad interesante para su inclusioacuten en un programa de mejora

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• DATOS GENERALES
• Datos de la empresa
• Calendario y Horario de Praacutectica
• MEMORIA DE LAS PRAacuteCTICAS
• Objetivos a desarrollar por el alumno en praacutecticas
• Plan de trabajo a largo plazo
• Descripcioacuten detallada de las tareas realizadas durante la praacutectica
• Tal y como debe hacerse antes de empezar el trabajo praacutectico en un laboratorio hay que documentarse Por ello lo primero realizado fue una documentacioacuten bibliograacutefica sobre los patoacutegenos con los que se han trabajado asiacute como los mecanismos de defensa de las plantas con el objetivo de conocer y comprender el fundamento de los mismos el manejo y sus aplicaciones en la mejora geneacutetica vegetal Nosotros hemos trabajado principalmente en la evaluacioacuten de la resistencia frente al oidio y la roya en el caso concreto de la avena