CULTIVO IN VITRO Y ESTABLECMIENTO DE YEMAS DE ROSA (rosa spp) .

Alulema, Valeria; Peralta Gabriela. Entregado el 21 de Diciembre del 2010.

Escuela Politécnica del Ejército.Ingeniería en Biotecnología.

Resumen.

En el presente trabajo se realizó el cultivo in vitro de yemas de rosa (Rosa spp) para el posterior estudio de el cultivo de las mismas. El método in vitro utilizado durante este trabajo se ha desarrollado a partir de explantes de tallo de aproximadamente dos centímetros de longitud con yema, desinfectados con detergente, solución de hipoclorito de sodio y alcohol para que posteriormente sean cultivados en un medio MS enriquecido con BAP y AIA.La diferenciación final del explante se logró llegando a producir indicios de brotes en los explantes sembrados en la mayoría de casos sin contaminación.

Palabras clave: yemas, AIA, BAP, rosa.

Introducción.

Los rosales (Rosa spp.) son un tipo de arbustos espinosos, llenos de flores. Son los representantes más importantes de la familia de las rosáceas (Linares, 2004)..

Existen aproximadamente 100 especies de rosales silvestres, provenientes de áreas templadas del Hemisferio Norte. Gran parte de las especies de rosa se cultivan para ser ornamentales por su llamativa flor: la rosa; pero también para la extracción de aceite esencial, usos gastronómicos y medicinales (Linares, 2004)..

Actualmente, las variedades comerciales de rosa son híbridos de especies de rosa desaparecidas, existe una enorme variedad de cultivares de rosas y cada año aparecen nuevos (Linares, 2004).

Las especies progenitoras mayormente implicadas en los cultivares son: R. moschata, R. gallica, R. damascena, R. wichuraiana, R. californica y R. rugosa. Los nuevos

productores de rosas han mejorado el tamaño y variado los colores, obteniendo flores grandes y atrayentes con distintos niveles de aroma (Valle, 2008)..

Las estructuras encargadas del crecimiento del tallo son las yemas, que también producen hojas y ramificaciones. La yema es el extremo joven de un vástago y del meristema apical, lleva hojas inmaduras o primordios foliares. La yema situada en el extremo del eje es la yema terminal. Las que se encuentran en la unión de las hojas con el tallo son las yemas axilares (Valle, 2008).

El explante más usado para los procesos de propagación in vitro son las yemas vegetativas de las plantas (Castillo, 2004).

La propagación de yemas es el método más empleado a nivel comercial, éstas presentan mayor longitud y más tejido nodal en la base, disminuyendo así las pérdidas debidas a enfermedades. Para el injerto de yema el patrón más común es Rosa

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manetti y, ocasionalmente R. odorata. En Nueva Zelanda se emplea R. multiflora inermis y en zonas más frías como Holanda, R. canina (Aguilera, 2004).

El objetivo de este trabajo, fue el establecimiento de yemas en un medio MS enriquecido con AIA y BAP.

Materiales y Métodos.

RECOLECCIÓN DEL MATERIAL VEGETAL.

Se tomaron muestras de rosa aparentemente sanas; a partir de la planta entera se procedió a cortar las ramas en el laboratorio.

PREPARACIÓN DE LA SALA DE SIEMBRA.

Se desinfectó el piso de la sala de siembra utilizando desinfectante kalipto, se limpiaron las cámaras de flujo laminar con papel toalla estéril y alcohol al 90%. Se introdujo en la cámara todo el material a utilizar en la siembra (mecheros de alcohol, juego de pinzas y bisturí, papel toalla estéril, plástico adherente, ligas, botellas de agua estéril, vasos de precipitación vacíos, alcohol y sablón), se encendió la luz UV durante 15 minutos y finalmente se encendió el flujo de las cámaras luego de apagar el UV.

DESINFECCIÓN.

Se cortaron entre los nudos de la rama de rosa de manera que en cada corte se obtuvo una yema.

Se lavaron las yemas en agua corriente s para eliminar las impurezas más grandes. Se lavaron la yemas en una solución al 2% de detergente más tres gotas de tween en agitación durante 20 minutos.

Se enjuagaron las yemas dos veces con agua destilada y una vez con

agua estéril. Se sumergieron las muestras en una solución de cloro al 2,5 % con tres gotas de tween 20 durante 10 minutos en agitación.

Se lleva a la cámara y se coloca en una solución de alcohola al 90% durante 10 segundos. Finalmente se extrajo el explante de la solución de alcoho y se enjuagó con agua estéril, se dejo el explante en agua estéril.

SIEMBRA.

Se sacó el explante del agua estéril. Utilizando las técnicas asépticas se realizaron dos cortes transversales utilizando las pinzas y el bisturí, uno al principio y otro al final del explante de manera que se eliminen las partes quemadas por el cloro.

Se sembró el explante en un frasco con medio MS enriquecido con BAP y AIA de manera que las yemas en cada explante sembrado queden orientadas hacia la boca del frasco; se flameó la boca del frasco y se selló el mismo con plástico adherente y una liga. Se sembraron 2 frascos, 2 explantes por frasco; se rotularon los frascos y se incubaron en condiciones de oscuridad, se observaron los resultados después de 7 y 14 días.

Resultados y Discusión.

Conclusiones.

Se obtuvo el desarrollo de las yemas a partir de los explantes sembrados.

Se evidencia contaminación fúngica,lo tanto los explantes que la presentan deben ser descartados, debido a que no se puede eliminar este tipo de contaminante.

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Las yemas son una especie de tejido meristemático, por lo que el porcentaje de posible contaminación debido al explante disminuye.

Es importante colocar las yemas en el medio en el sentido correcto debido a que este puede ser u factor que influye en el tiempo de desarrollo del brote.

Bibliografía.

Aguilera, M. 2004. Cultivo de la rosa. En línea. (http://beta1.indap.cl/Docs/Documentos/Floricultura/Rosa/Cultivo%20de%20la%20Rosa.pdf). Consultado el 07 de junio de 2010.

Castillo, A. Propagación de plantas por cultivo in vitro: una biotecnología que nos acompaña hace mucho tiempo. En línea (http://www.inia.org.uy/publicaciones/documentos/lb/ad/2004/ad_382.pdf). Consultado el 07 de junio de 2010.

Linares, H. 2204. MANUAL DEL PARTICIPANTE EL CULTIVO DEL ROSAL. En línea (http://www.sra.gob.mx/internet/informacion_general/programas/fondo_tierras/manuales/Cultivo_rosal.pdf). Consultado el 07 de junio de 2010.

Valle, M. Mascorro, J. Gil, I., Iturriaga, G. (2008). Regeneración Directa In vitro de Crisantemo, Dendranthema X grandiflorum Kitan, a Partir de Segmentos de Tallo. Universidad y Ciencia.

Anexos.

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