colilert método para coliformes totales y

9
Colilert método para coliformes totales y Escherichia coli. Actualizado enero 2007 Colilert es un comercialmente disponible enzima-sustrato líquido de caldo de cultivo medio (IDEXX Laboratories, Inc., Westbrook, Maine) que permite la detección simultánea de coliformes totales y Escherichia coli (E. coli).Se encuentra disponible en el número más probable (NMP) o el formato de presencia / ausencia (PA). El método NMP se ve facilitada por el uso de una bandeja de incubación especialmente diseñadas desechable llamado el Quanti-Tray ®. El método de PA se puede hacer utilizando cualquier botella estéril de tamaño apropiado. Ambos métodos se pueden hacer en el campo o en el laboratorio. TEORÍA: Dos sustratos de enzimas se incluyen en Colilert-un cromógeno que reacciona con la enzima que se encuentra en coliformes totales (galactosidasa), y un fluorógeno que reacciona con una enzima que se encuentra en E. coli(glucuronida sa). Después de 24 horas de incubación a 35 º C, un total de reacción-coliforme positiva se convierte en el medio amarillo; una E. coli-positivo hace que el medio de reacción a una fluorescencia bajo la luz ultravioleta de onda larga (366 nm). USO: El método Colilert está aprobado para su uso con agua potable. Se puede utilizar para controlar todos los tipos de agua, incluida el agua que es alta en los sedimentos en suspensión, sino que también se puede utilizar para controlar los sedimentos. El formato PA es adecuado para su uso en estudios de agua potable o aguas subterráneas, cuando sólo un resultado presencia o ausencia se necesita. No se requiere equipo especial para utilizar el formato PA. El formato de NMP se puede utilizar con todas las

Upload: shinidragon1

Post on 12-Sep-2015

316 views

Category:

Documents


0 download

DESCRIPTION

microbiologia

TRANSCRIPT

Colilert mtodo para coliformes totales yEscherichia coli.Actualizado enero 2007Colilert es un comercialmente disponible enzima-sustrato lquido de caldo de cultivo medio (IDEXX Laboratories, Inc., Westbrook, Maine) que permite la deteccin simultnea de coliformes totales yEscherichia coli (E. coli).Se encuentra disponible en el nmero ms probable (NMP) o el formato de presencia / ausencia (PA).El mtodo NMP se ve facilitada por el uso de una bandeja de incubacin especialmente diseadas desechable llamado el Quanti-Tray .El mtodo de PA se puede hacer utilizando cualquier botella estril de tamao apropiado.Ambos mtodos se pueden hacer en el campo o en el laboratorio.TEORA:Dos sustratos de enzimas se incluyen en Colilert-un cromgeno que reacciona con la enzima que se encuentra en coliformes totales (galactosidasa), y un fluorgeno que reacciona con una enzima que se encuentra enE.coli(glucuronidasa).Despus de 24 horas de incubacin a 35C, un total de reaccin-coliforme positiva se convierte en el medio amarillo; unaE.coli-positivohace que el medio de reaccin a una fluorescencia bajo la luz ultravioleta de onda larga (366 nm).USO:El mtodo Colilert est aprobado para su uso con agua potable.Se puede utilizar para controlar todos los tipos de agua, incluida el agua que es alta en los sedimentos en suspensin, sino que tambin se puede utilizar para controlar los sedimentos.El formato PA es adecuado para su uso en estudios de agua potable o aguas subterrneas, cuando slo un resultado presencia o ausencia se necesita.No se requiere equipo especial para utilizar el formato PA.El formato de NMP se puede utilizar con todas las aguas, sin embargo, requiere el uso de una mquina especial que sella la bandeja de incubacin.Quanti-Tray proporciona recuentos de 1 a 200 NMP/100 mL.Quanti-Tray/2000 provee el conteo de 1 a 2400 NMP/100 mL.Ambas pruebas pueden proporcionar una gama ms amplia mediante la dilucin de la muestra de 1:10 o 1:100 con agua destilada o desionizada estril.Ver Colilert Quanti-Tray instrucciones de agua (Apndice D) y sedimentos (Anexo D1).Ver Colilert presencia / ausencia de direccin (Apndice E).MEDIOS DE COMUNICACIN:El sustrato Colilert: Colilert, Cat WP020 (20 pruebas) o Cat WP200 (200 tests), O Colilert-18, Cat WP020-18 (20 pruebas) o Cat WP200-18 (200 pruebas) Bandejas de incubacin (el gato WQT100 (Quanti-Tray) o Cat WQT-2K (Quanti-Tray/2000) El sellador Quanti-Tray (Cat WQTS2X-115) es comprado por el fabricante (IDEXX, 800/321-0207).Estndar de recogida de muestra de las botellas puede ser utilizado.Debido a que el sustrato Colilert ya est tamponada, al preparar diluciones, utilizar agua destilada o desionizada estril.REFERENCIAS:American Public Health Association, American Water Works Association y la Water Pollution Control Federation, 2004, Mtodos estndar para el anlisis de aguas y aguas residuales (21ed.): Washington, DC American Public Health Association, Seccin 9223.Otras referencias estn disponibles enhttp://www.idexx.com/water/colilert/moreinfo.jsp.NWIS cdigos de parmetros:50569 coliformes totales, definidas sustrato tecnologa, ms probable nmero por 100 ml50468E.coli,definido-sustrato tecnologa, ms probable nmero por 100 ml99595 coliformes totales, definido-sustrato tecnologa, la presencia o ausencia en 100 ml99596,E.coli,definido-sustrato tecnologa, la presencia o ausencia en 100 ml

LaEscherichia coli(pronunciado /eske'rikia 'koli/), tambin conocida por laabreviacinde su nombre,E. coli, es quizs el organismoprocariotams estudiado por el ser humano. Se trata de unaenterobacteriaque se encuentra generalmente en los intestinos animales, y por ende en lasaguas negras, pero se lo puede encontrar en todos lados, dado que es un organismo ubicuo. Fue descrita por primera vez en1885porTheodore von Escherich,bacterilogoalemn, quien la denominBacterium coli. Posteriormente lataxonomale adjudic el nombre deEscherichia coli, en honor a su descubridor.Esta y otras bacterias son necesarias para el funcionamiento correcto delproceso digestivo, adems de producir lasvitaminasByK. Es un bacilo que reacciona negativamente a latincin de Gram(gramnegativo), esanaerobio facultativo, mvil porflagelos peritricos(que rodean su cuerpo), no formaesporas, es capaz defermentarlaglucosay lalactosay su prueba deIMVICes ++--.Es una bacteria utilizada frecuentemente en experimentos de gentica y biologa molecular.ndice[ocultar] 1Funcin normal 2Escherichia coliO157:H7 3Patogenia 3.1Virulencia 3.2Infecciones urinarias 4Tratamiento 5Clasificacin 5.1Escherichia colienteropatognica (ECEP) 5.2Escherichia colienterotoxignica (ECET) 5.3Escherichia colienteroinvasiva (ECEI) 5.4Escherichia colienterohemorrgica o verotoxignica (ECEH) 5.5Escherichia colienteroagregativa o enteroadherente (ECEA) 5.6Escherichia colide adherencia difusa (ECAD) 6Brotes epidmicos 6.1Brote epidmico en Alemania 2011 7Vase tambin 8Referencias 9Enlaces externos

[editar]Funcin normalLaEscherichia coli, en su hbitat natural, vive en los intestinos de la mayor parte de losmamferossanos. Es el principal organismoanaerobio facultativodelsistema digestivo. En individuos sanos, es decir, si la bacteria no adquiereelementos genticosque codifican factores virulentos, la bacteria acta como uncomensalformando parte de laflora intestinaly ayudando as a laabsorcin de nutrientes. En humanos, laEscherichia colicoloniza eltracto gastrointestinalde un neonato adhirindose a las mucosidades delintestino gruesoen el plazo de 48horas despus de la primera comida.[editar]Escherichia coliO157:H7Artculo principal:Escherichia coli O157:H7.LaEscherichia coliO157:H7es una de las cientos decepasde laEscherichia coli. Aunque la mayora de las cepas son inocuas y viven en losintestinosde los seres humanos y animales saludables, esta cepa produce una potentetoxinay puede ocasionar enfermedades graves como elsndrome urmico hemoltico.LaEscherichia coliO157:H7 fue reconocida inicialmente como causa de enfermedad en1982durante un brote dediarreaaguda consangreenEE. UU.Se determin que el brote se deba ahamburguesascontaminadas. Desde entonces, la mayora de las infecciones han provenido de comercarnedevacunopicada insuficientemente cocinada. El escritorRobin Cookescribi una novela sobre el tema tituladaToxina.En1996, cerca deSeattlese produjo un brote a causa de esta bacteria, que se encontr en botellas dezumodemanzanade la marcaOdwalla Inc.. Muchas personas, entre ellas bebs y nios, murieron despus de tomar este zumo. La bacteria entr en las botellas porque las manzanas que se exprimieron contenan excrementos devenadosde la zona y no hubo ningn tipo de pasteurizacin.Se diferencia de las otrasEscherichia colien que no fermenta elsorbitol, no crece a 44C y no produce -glucoronidasa. La combinacin de letras y nmeros en el nombre de la bacteria se refiere a los marcadoresantignicosespecficos que se encuentran en su superficie y la distingue de otros tipos deEscherichia coli: El antgeno somtico O, proveniente del lipopolisacrido de lapared celular; El antgenoflagelarH, compuesto por 75polisacridos.Elgrupo de riesgocomprende prcticamente a todas las personas, inmunocompetentes o no. Los nios menores de 5aos de edad con problemas de alimentacin, as como los ancianos son los ms susceptibles de sufrir complicaciones graves.[editar]PatogeniaLaEscherichia colipuede causar infecciones intestinales y extraintestinales generalmente graves, tales como infecciones delaparato excretor,cistitis,meningitis,peritonitis,mastitis,septicemiayneumonaGram-negativa.[editar]VirulenciaLaEscherichia coliest dividida por sus propiedadesvirulentas, pudiendo causar diarrea en humanos y otros animales. Otras cepas causan diarreashemorrgicaspor virtud de su agresividad, patogenicidad y toxicidad. En muchos pases ya hubo casos de muerte con esta bacteria. Generalmente le pasa a nios entre 1ao y 8aos. Causado generalmente por la contaminacin de alimentos, y posterior mala coccin de los mismos, es decir, a temperaturas internas y externas menores de 70C.[editar]Infecciones urinariasArtculo principal:Infeccin urinaria.Son ms comunes en mujeres por la corta longitud de la uretra (25 a 50mm, o bien 1 a 2pulgadas) en comparacin con los hombres (unos 15cm, o unas 7pulgadas). Entre los ancianos, lasinfecciones urinariastienden a ser de la misma proporcin entre hombres y mujeres. Debido a que la bacteria invariablemente entra al tracto urinario por lauretra(una infeccin ascendente), los malos hbitos sanitarios pueden predisponer a una infeccin, sin embargo, otros factores cobran importancia, como elembarazo,hipertrofia benignaomalignadeprstata, y en muchos casos el evento iniciante de la infeccin es desconocido. Aunque las infecciones ascendentes son las causantes de infecciones del tracto urinario bajo ycistitis, no es necesariamente esta la causa de infecciones superiores como lapielonefritis, que puede tener origen hematgeno.[editar]TratamientoEl uso deantibiticoses poco eficaz y casi no se prescribe. Para la diarrea se sugiere el consumo de abundante lquido y evitar la deshidratacin. Cuando una persona presenta diarrea no debe ir a trabajar o asistir a lugares pblicos para evitar el contagio masivo. Sin embargo en algunas patologas como lapielonefritishay que considerar el uso de algunacefalosporinaendovenosa.[editar]Clasificacin

Micrografa electrnica, de baja temperatura, de un cmulo de bacteriasE. coliampliado 10.000 veces. Cada cilindro redondeado es un individuo.Se distinguen seis cepas segn su capacidad patgena, -tambin se les puede llamarvirotipos-:Escherichia colienteropatognica (ECEP), enterotoxignica (ECET), enteroinvasiva (ECEI), enterohemorrgica (ECEH), enteroagregativa (ECEA) y de adherencia difusa (ECAD).[editar]Escherichia colienteropatognica (ECEP)Esta cepa causa diarrea en humanos, conejos, perros y caballos, al igual que la enterotoxignica, pero la etiologa y los mecanismos moleculares de colonizacin son diferentes. Carece defimbriasy no produce las toxinas ST y LT, pero utilizan la protena intimina, unaadhesina, para adherirse a las clulas intestinales. Este virotipo posee una serie de factores de virulencia que son similares a los que se encuentran enShigella, como la toxina shiga. La adherencia a la mucosa intestinal causa una reordenacin de laactinaen la clula hospedante, que induce una deformacin significativa. Estas bacterias son moderadamente invasivas: penetran en las clulas hospedadoras provocando una respuesta inflamatoria. La causa principal de diarrea en los afectados por esta cepa son seguramente los cambios provocados en la estructura de las clulas intestinales.[editar]Escherichia colienterotoxignica (ECET)Se parece mucho aVibrio cholerae, se adhiere a la mucosa delintestino delgado, no la invade, y elaboratoxinasque producen diarrea. No hay cambios histolgicos en las clulas de la mucosa y muy poca inflamacin. Produce diarrea no sanguinolenta en nios y adultos, sobre todo en pases en vas de desarrollo, aunque los desarrollados tambin se ven afectados. Emplea varias toxinas, incluyendo laenterotoxina resistente al calory laenterotoxina termolbil.[editar]Escherichia colienteroinvasiva (ECEI)Es inmvil, no fermenta lalactosa. Invade el epitelio intestinal causando diarrea sanguinolenta en nios y adultos. Libera elcalcioen grandes cantidades impidiendo la solidificacin sea, produciendo artritis y en algunos casosarterioesclerosis. Es una de lasE. colique causa ms dao debido a la invasin que produce en el epitelio intestinal.[editar]Escherichia colienterohemorrgica o verotoxignica (ECEH)Artculo principal:Escherichia coli enterohemorrgica.Vase tambin:Toxina Shiga.La convencin internacional de nomenclatura de patgenos ha recomendado el uso de STEC (Shiga ToxinEscherichia coli) para este grupo, debido a que estas bacterias producen una toxina citotxica para clulas Vero de cultivo de similaridad estructural a la toxina producida porShigella dysenteriae. Las STEC producenverotoxinasque actan en elcolon. Sus sntomas son: primero colitis hemorrgica, luegosndrome urmico hemoltico(lo anterior ms afeccin del rin, posible entrada en coma y muerte), y por ltimo,prpura trombocitopnica trombtica(lo de antes ms afeccin del sistema nervioso central). Esta cepa no fermenta elsorbitoly posee unfago, donde se encuentran codificadas las verotoxinas, tambin llamadas "Toxinas Shiga", no posee unafimbriaformadora de mechones, en vez de esto posee una fimbria polar larga que usa para adherencia.[editar]Escherichia colienteroagregativa o enteroadherente (ECEA)Slo encontrada en humanos. Son llamadas enteroagregativas porque tienen fimbrias con las que aglutinan clulas en loscultivos de tejidos. Se unen a la mucosa intestinal causando diarrea acuosa sin fiebre. No son invasivas. Producenhemolisinay una enterotoxina ST similar a la de las enterotoxignicas. se le asocian dos toxinas: toxina termoestable enteroagregante (EAST) toxina codificada por plasmidos (PET)[editar]Escherichia colide adherencia difusa (ECAD)Se adhiere a la totalidad de la superficie de las clulas epiteliales y habitualmente causa enfermedad en nios inmunolgicamente no desarrollados o malnutridos. No se ha demostrado que pueda causar diarrea en nios mayores de un ao de edad, ni en adultos y ancianos.[editar]Brotes epidmicos[editar]Brote epidmico en Alemania 2011Artculo principal:Escherichia coli enterohemorrgica.Artculo principal:Brote del sndrome urmico hemoltico de 2011.En Alemania en el ao 2011 se ha informado de un gran brote epidmico producido por el serotipo enterohemorrgicoEscherichia coliO104:H4.12Se trata de cerca de 3255 casos, segn la OMS, con 33 fallecidos.3Se encontraron indicios de que pudiera haber surgido en una explotacin alemana de brotes de soja, pero ya se han descartado como foco de la intoxicacin.4Sin embargo el gobierno alemn seal en principio a Espaa como origen de los productos vegetales implicados en la intoxicacin alimentaria, dando dos fuentes de produccin en Mlaga y Almera. Holanda es otro pas sealado. Tras el anlisis de las heces de los pacientes, se ha descartado el origen espaol.5Pero se desconoce el origen de la bacteria en toda la cadena hasta el consumidor, desde la produccin, el transporte y la distribucin, por lo que no se puede descartar la manipulacin de productos en Alemania, que ha sido sealada como el pas de origen de la intoxicacin ocurrida en viajeros que han tocado suelo Alemn. No se ha descrito jams, tampoco en el pasado, ningn caso en Espaa de una infeccin por la bacteria implicada en el brote alemn. En Espaa existe un posible caso de infeccin por el consumo de verduras frescas en Alemania.678La cepa de la bacteriaE. coliaparecida en Alemania es resistente a ocho tipos distintos de antibitico, segn un equipo de investigadores chinos, que lograron secuenciar el genoma del organismo. Los investigadores delInstituto de Genmica de Pekn(BGI) han descartado antibiticos como lapenicilina, lassulfamidas, lacefalotinao laestreptomicinacomo posible solucin a la enfermedad debido a los genes que la hacen resistente.9