BIOL 3725BIOL 3725MicrobiologíaMicrobiologíaEjercicio #1Ejercicio #1

ProntuarioProntuario

��El prontuario del laboratorio lo El prontuario del laboratorio lo podrán podrán accesaraccesar en la siguiente en la siguiente dirección electrónica:dirección electrónica:

http://academic.uprm.edu/~lrios/3725http://academic.uprm.edu/~lrios/3725http://academic.uprm.edu/~lrios/3725http://academic.uprm.edu/~lrios/3725/Prontuario3725Lab.pdf/Prontuario3725Lab.pdf

��Todas las presentaciones están Todas las presentaciones están disponibles en esta dirección.disponibles en esta dirección.

http://academic.uprm.edu/~lrios/3725http://academic.uprm.edu/~lrios/3725

REGLAS DE SEGURIDADREGLAS DE SEGURIDADY NORMAS GENERALES Y NORMAS GENERALES

TÉCNICAS ASÉPTICASTÉCNICAS ASÉPTICAS

�� Lavarse las manos con jabón y secarse con papel Lavarse las manos con jabón y secarse con papel toalla al inicio y final de la sesión .toalla al inicio y final de la sesión .

�� Mantener el pelo recogido para evitar accidentes.Mantener el pelo recogido para evitar accidentes.�� Utilizar los “rack” o gradillas para transportar los Utilizar los “rack” o gradillas para transportar los

tubos de ensayos.tubos de ensayos.�� Ante un derrame o contaminación, cubrir el área con Ante un derrame o contaminación, cubrir el área con �� Ante un derrame o contaminación, cubrir el área con Ante un derrame o contaminación, cubrir el área con

papel toalla, bañar con desinfectante y avisar al papel toalla, bañar con desinfectante y avisar al instructor.instructor.

�� Prohibido pipetear con la boca, utilice los Prohibido pipetear con la boca, utilice los pipeteadorespipeteadores..

�� No marque el material de vidrio con marcadores o No marque el material de vidrio con marcadores o labelslabels permanentespermanentes

�� Material de metal utilizado, desinfectarlo mediante Material de metal utilizado, desinfectarlo mediante flameadoflameado

�� Trabajar las muestras biológicas ante la protección Trabajar las muestras biológicas ante la protección de una flama y/o de una cámara de flujo laminar.de una flama y/o de una cámara de flujo laminar.

�� No colocar material contaminado en contacto No colocar material contaminado en contacto con las superficies de trabajocon las superficies de trabajo

�� Mantenga cerradas puertas y ventanas.Mantenga cerradas puertas y ventanas.�� Material de vidrio contaminado colocarlo en Material de vidrio contaminado colocarlo en

soluciones desinfectantes o en depósitos para soluciones desinfectantes o en depósitos para manejo de este tipo de materialmanejo de este tipo de material

�� ManejarManejar TODOSTODOS los los microorganismosmicroorganismos comocomoposiblesposibles patógenospatógenos..posiblesposibles patógenospatógenos..

�� ColocarColocar laslas banquetasbanquetas o o sillassillas bajobajo la mesa.la mesa.

��FirmarFirmar laslas normasnormas y y reglasreglasde de seguridadseguridad en el en el laboratoriolaboratorio

PruebaPrueba DiagnósticaDiagnóstica

��15 15 minutosminutos

��NO NO escribirescribir la la pruebaprueba!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

��Al Al terminarterminar entregarentregar al instructor!!!!!al instructor!!!!!

MICROSCOPÍA:MICROSCOPÍA:Tipos de MicroscopioTipos de MicroscopioTipos de MicroscopioTipos de Microscopio

Uso y manejoUso y manejo

MicroscopioMicroscopio

�� Simple: a finales de los 1600 Simple: a finales de los 1600 porpor Antony Van Antony Van Leeuwenhoek. Leeuwenhoek.

�� CompuestoCompuesto: Robert Hooke : Robert Hooke inventainventa el el microscpiomicroscpiocompuestocompuesto ((muymuy similar al de similar al de hoyhoy díadía). ).

�� Se Se utilizautiliza parapara aumentaraumentar el el tamañotamaño de de imágenesimágenes�� Se Se utilizautiliza parapara aumentaraumentar el el tamañotamaño de de imágenesimágenesmicroscópicasmicroscópicas y y poderpoder ser vistas ser vistas porpor el el ojoojohumanohumano..

�� InicióInició el campo de la el campo de la microbiologíamicrobiología

�� AnatomíaAnatomía compuestacompuesta porpor dos dos partespartes básicasbásicas: : SistemasSistemas ópticosópticos y y SistemaSistema mecánicomecánico. .

Anatomía del MicroscopioAnatomía del Microscopio

Los Objetivos:Los Objetivos:��Comunes:Comunes:

––4X 4X

––10X10X

––40X40X

––100X (inmersión de aceite)100X (inmersión de aceite)Ocular

––100X (inmersión de aceite)100X (inmersión de aceite)

––Calcular la magnificación total:Calcular la magnificación total:

(magnificación del objetivo X (magnificación del objetivo X magnificación del ocular)magnificación del ocular)

Ejemplo: 10X * 20X = 200XEjemplo: 10X * 20X = 200X

Ocular

Objetivos

Tipos de MicroscopioTipos de Microscopio

��Microscopio de Campo claroMicroscopio de Campo claro

��Microscopio de Campo oscuroMicroscopio de Campo oscuro

��Microscopio de Contraste de FaseMicroscopio de Contraste de Fase

Microscopio de FluorescenciaMicroscopio de Fluorescencia��Microscopio de FluorescenciaMicroscopio de Fluorescencia

��Microscopio Electrónico de Microscopio Electrónico de Transmisión (TEM)Transmisión (TEM)

��Microscopio Electrónico de Rastreo Microscopio Electrónico de Rastreo (SEM)(SEM)

Microscopio de LuzMicroscopio de Luz

��Secciones Secciones ultrafinasultrafinas de la muestra de la muestra

��Magnificación máximaMagnificación máxima-- 1,000X1,000X

��ResoluciónResolución-- menor distancia menor distancia discernible entre dos puntos (0.2µm)discernible entre dos puntos (0.2µm)discernible entre dos puntos (0.2µm)discernible entre dos puntos (0.2µm)

��Fuente de iluminaciónFuente de iluminación––lámparalámpara

��Tinción diferencialTinción diferencial

��Micrografías a coloresMicrografías a colores

Microscopio de Campo ClaroMicroscopio de Campo Claro

Microscopio de Campo OscuroMicroscopio de Campo Oscuro

Contraste de Fase:Contraste de Fase:

Fluorescencia:Fluorescencia:

Microscopía ElectrónicaMicroscopía Electrónica

�� Fuente de iluminaciónFuente de iluminación-- haz de haz de electrones (por filamento de tungsteno)electrones (por filamento de tungsteno)

�� Magnificación máxima 200,000XMagnificación máxima 200,000X

�� Colores artificiales con computadorColores artificiales con computador

M.E. de Transmisión (TEM):M.E. de Transmisión (TEM):

M.E. de Rastreo o Scanning (SEM):M.E. de Rastreo o Scanning (SEM):

TrabajoTrabajo del del diadia de de hoyhoy

1) Aprender a usar el instrumento de trabajo: Microscopio.

2) Observar laminillas

3) Hacer dibujos de lo observado a diversas magnificacionesSiempre comenzamos con la menos magnificación