Linfocitos B

Débora E. Aldana Salguero MD, PhD

Progenitor de la

estirpe mieloide

Diferenciación,

proliferación y

supervivencia

Maduración

Regulador del

desarrollo

La maduración B en la médula ósea depende de la interacción de las

células precursoras con las células estromales:

- contactos célula-célula

- factores de crecimiento (proliferación, diferenciación)

Los genes de recombinación RAG-1 y RAG-2 codifican proteínas recombinasas que reconocen secuencias de señales de recombinación (E2A y EBF)

Es necesaria la participación del Factor de Transcripción PAX -A para la activación de estos factores de transcripción , Pax-5 como regulador del desarrollo de los linfocitos B

Dos estadios: - Pro-B temprano (primera recombinación del ADN entre los genes D-J en los dos

cromosomas de cadenas pesadas) - Pro-B tardío (se recombina el gen de la región variable con los genes D-J)

El dominio de la cadena pesada esta formado por los genes V/D/J, el proceso de recombinación somático se produce por

corte y empalme del ARN mensajero

La recombinación ocurre entre fragmentos génicos en un mismo cromosoma, guiada por secuencias conservadas de ADN no

codificante (Secuencias Señales de Recombinación –SSR-)

El complejo Recombinasa VDJ actúa para producir la

recombinación VDJ

Rag-1 y Rag-2 solo se expresan en linfocitos en desarrollo Pro y

Pre B. Poseen actividad endonucleasa y son responsables del corte

de la cadena de ADN

El resto de enzimas, la Ligasa IV y la ADN-PK están

involucradas en la separación modificación y plegado del ADN.

Generación de la diversidad

de unión durante el

reordenamiento génico

Pre-B grande: - Tiene reordenada la cadena pesada (H) , forma una proteína asociada a la membrana llamada Mm. - Empieza a sintetizar dos proteínas, las cadenas ligeras sustitutas o subrogadas que pueden fijarse a las cadenas

pesadas. Una vez en la membrana ( Pre-BCR)

Pre-B pequeña: - Deja de expresar cadenas ligeras subrogadas e inicia una etapa de proliferación inducida por IL-7 hasta que

comienza el reordenamiento de los genes que codifican la cadena L. - Se deja de expresar TdT y se vuelven a expresar Rag-1 y Rag-2

La cadena ligera tiene dos locus distintos, Kappa y Lambda

Los mecanismo de control se orientan hacia la especificidad del receptor (Selección central) Los linfocitos B que no reciben señales a través de su BCR salen de la médula ósea hacia el bazo para

continuar su proceso de maduración. Disminuye la expresión de proteína Rag y cesa el reordenamiento

Zona Oscura (centroblastos)

IgD - CD38 + CD77 +

HIPERMUTACION

CFD

T

T

T

Manto Folicular

IgD + CD38 -

APOPTOSIS

Zona Clara (centrocitos)

IgD - CD38 + CD77 -

SELECCION

IgG IgE IgA

IgG

plasmocito

IgM

plasmocytes

CD38++

células B

memoria

IgD - CD38 -

Linfocitos que han sobrevivido a la

selección central en la médula ósea

tienen IgM en BCR

Pasan al bazo, expresan IgD en la

membrana, se conocen como

Linfocitos B transicionales BTr

B1: Son capaces de autorenovarse localmente. Su

principal función es la producción de anticuerpos

(IgM) dirigidos contra antígenos bacterianos no

proteicos, T independientes

Se transforman en Linfocitos B

maduros, gracias a señales de

sobrevivencia a través del BCR. En

especial, del Factor Activador de

Linfocito B (BAFF)

BZM: adaptados para producir grandes cantidades de

IgM específica (3 a 4 días después de la estimulación). Al

activarse se transforman en plasmoblastos. Proliferan

activamente formando focos de células plasmáticas

(IgM.). TH2 independientes

B2: 90% de los linfocitos circulantes. Su función

principal es reconocer antígenos proteicos y

diferenciarse en células productoras de anticuerpos

gracias a la colaboración de las TH2

Independiente del Antígeno

Médula ósea • Rearreglo genes Ig

• Selección

Dependiente del Antígeno

Órganos linfoides periféricos • Diferenciación a plasmocitos

• Diferenciación a células B memoria

• Maduración de la afinidad

• Cambio de Clase

Receptores para:

IL-2, IL-4, IL5 y Gamma Interferón

Expresión de:

CD40, CD80, CD86 y CMH Tipo II

Esto se traduce en división celular y

presentación de antígenos a TH2, y a

recibir cooperación T a través de

citoquinas que inducirán cambio de

isotipo y maduración a células

plasmáticas

Activación de

Linfocito B

Las células B que encuentran al antígeno en los órganos linfoides secundarios forman centros germinales y se diferencian a células

plasmáticas

Mecanismo por el cual la porción variable de las cadenas pesadas y livianas de las Ig sufren mutaciones puntuales. Como consecuencia, luego de la mitosis, las células hijas expresan porciones V(D)J diferentes del linfocito B que les dio origen.

Los LB que han reconocido antígenos e inician su activación, expresan receptor para IL-2,

esto inicia la generación de clonas en el folículo linfoideo y la activación de la enzima citidina desaminasa inducida por activación (AID) y en la siguiente replicación se introducen nucleótidos no reconocidos por un molde (Nontemplated). Hay ruptura de ADN y la incorporación posterior de “errores” durante la reparación.

Las mutaciones ocurren al azar La hipermutación somática ocurre principalmente en las regiones hipervariables de las

regiones variables que son las regiones de determinación de complementariedad (CDR) y se designan CDR1, CDR2 y CDR3

Maduración de la afinidad: hipermutación somática

Este proceso ocurre luego del contacto antigénico. Los primeros anticuerpos producidos son siempre IgM, pero a medida que progresa la

respuesta comienzan a observarse anticuerpos de igual especificidad antigénica, pero de distintos isotipos. Esto es consecuencia de la asociación de la porción VDJ de la cadena H con una porción constante diferente a la de la cadena M

Las regiones de “switch” son imprescindibles para que se produzca la recombinación del

ADN. Las citoquinas Gamma interferón inducen el cambio a IgG, la IL-4 cambio a IgE y el Factor de Transformación de Crecimiento Beta a IgA.

La citidin desaminasa inducida por activación (AID) es una enzima capaz de modificar al

ARN (convierte la citidina en uracilo por desaminación), este proceso se llama edición de ARNm, en el cambio de isotipo la desaminación del ARNm por la AID daría lugar a la ruptura del ADN.

El proceso de cambio de clase (switch) cambia el isotipo de una Ig manteniendo sus regiones variables (idiotipo).

Los centrocitos que han sobrevivido en el centro germinal (CG) dan lugar a dos tipos de células: Plasmoblastos que abandonan el CG para completar una diferenciación a células plasmáticas (Ig de alta afinidad) y linfocitos B de memoria

Diferenciarse en una u otra depende de: la afinidad del BCR por el antígeno y la unión del linfocito B al T, si se

establece una unión muy fuerte entre CD40 y CD40L se favorece la formación de LB de memoria

La expresión de citoquinas como IL-10, IL-4 e IL5 favorece la diferenciación a células plasmáticas y solo la expresión de IL4 a un fenotipo de memoria

Los plasmocitos pueden ser de dos tipos: uno de vida corta, de pocos días y los de vida larga que pueden durar

meses o años y siguen produciendo anticuerpos aun cuando el antígeno ya no este presente.