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Proyecto PNUD/GEF/RLA/99/G31 Acuerdo 082

PROTECCION AMBIENTAL DEL RIO DE LA PLATA Y SU FRENTE MARITIMO: PREVENCION Y CONTROL DE LA CONTAMINACION Y PRESERVACION DE HABITATS

“Plaguicidas organoclorados y metales pesados en la

biota del Río de La Plata y su Frente Marítimo”

Dirección Técnica: Dra. Julia E. Aizpún

Grupo de Investigación: Ecotoxicología, Departamento de Ciencias Marinas,

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacional de Mar del Plata.

Investigadores intervinientes: Dr. Víctor J. Moreno

Dra. Marcela S. Gerpe Dra. Karina S.B. Miglioranza Lic. Mariana Gonzalez Srta. Paola Ondarza

1er INFORME DE AVANCE

15 de abril de 2003

INDICE Página INTRODUCCION 1 CARACTERISTICAS BIOLOGICAS DE LAS ESPECIES Merluza 7 Corvina 8 Boga 8 Sábalo 9 MATERIALES Y METODOS 9 Determinación de contaminantes orgánicos 12 Determinación de metales pesados 15 GRADO DE AVANCE DE LAS ACTIVIDADES DESARROLLADAS 19 RESULTADOS Y DISCUSION 20 1. Condición general de los organismos. Datos morfométricos 20 1.1. Merluza 20 1.2. Corvina rubia 21 1.3. Boga 21 1.4. Sábalo 21 2. Datos preliminares sobre el estado de contaminación por POCs 21 3. Concentración y distribución de POCs 23 3.1. Merluza 23 3.1.1. Hígado 24 3.1.1.1. Parentales y metabolitos 25 3.1.2. Músculo 26 3.1.2.1. Parentales y metabolitos 27 3.2. Corvina rubia 28 3.3. Boga 28 3.4. Sábalo 29 3.4.1. Hígado 30 3.4.1.1. Parentales y metabolitos 32

4. Datos preliminares sobre el estado de contaminación por metales pesados 33

5. Concentración y distribución de metales pesados 35 5.1. Merluza 35 5.2. Corvina rubia 38 BIBLIOGRAFIA 42

PNUD ACUERDO 082 Primer Informe Página 1 de 43

INTRODUCCION

El Río de La Plata constituye una de las cuencas fluviales más

importantes del mundo, tiene una extensión aproximada de 250 km. de largo y

cubre un área de 38.800 km2, con una cuenca hidrográfica de 3.170.000 km2

(1). Constituye un vasto sistema hidrográfico formado por los ríos Paraguay,

Paraná y Uruguay, cuya cuenca de drenaje ocupa parte de Argentina, Brasil,

Bolivia, Paraguay y Uruguay, y en Sudamérica sólo es superada por la

correspondiente al río Amazonas (2). En sus costas se encuentran ubicados

numerosos asentamientos urbanos e industriales cuyos desechos son

eliminados a las aguas del río con escaso o ningún tratamiento, como así

también extensas áreas agrícolo-ganaderas. El río también recibe el

escurrimiento superficial de la tierra y residuos de hidrocarburos provenientes

del tráfico marítimo. Es un ambiente utilizado para pesca comercial y deportiva,

navegación desde y hacia varios puertos de importancia y recreación y turismo.

Además, las aguas del río transportan una cantidad significativa de sedimentos

en suspensión, materia orgánica asociada y una variedad de contaminantes

orgánicos e inorgánicos de amplia gama, constituyendo un aporte significativo

para su frente oceánico. Debido a la importancia del Río de La Plata, tanto en

caudal como en cantidad de material transportado, su área de influencia en el

sector marino es de consideración.

En el marco del proyecto de monitoreo de la cuenca del Río de La Plata

y su frente marítimo, se estudiaron contaminantes orgánicos e inorgánicos en

especies representativas de los ambientes dulceacuícola, estuarial y marino.

Los xenobióticos son compuestos químicos presentes en los análisis de

matrices biológicas y abióticas como resultado de la contaminación, sin función

fisiológica reconocida, extraños a los sistemas biológicos, que incluyen a los

plaguicidas y compuestos químicos industriales.

El ambiente acuático puede dividirse en fases relativamente

homogéneas que incluyen el agua, sólidos en suspensión, sedimentos del

fondo y biota. Por lo tanto cualquier sustancia química, en adelante “químico”,


incorporado en estos ambientes será particionado en las fases mencionadas.

Como muchos xenobióticos son lipofílicos y en consecuencia poco o nada

solubles en agua, se particionan en los compartimentos ricos en lípidos del

ambiente. Como resultado, los químicos frecuentemente dejan residuos que

persisten en los tejidos de la biota una vez que la exposición ha cesado.

Los compuestos lipofílicos son detoxificados en los organismos con

dificultad y en consecuencia son difíciles de excretar. La mayoría son

metabolizados o degradados muy lentamente y como consecuencia persisten

por períodos de tiempo relativamente largos. Los plaguicidas organoclorados ,

que en adelante llamaremos POCs, constituyen junto a los bifenilos

policlorados (BPCs) los grupos principales de xenobióticos orgánicos, lipofílicos

y persistentes.

La presencia de POCs en el ambiente tiene como fuente principal el

tratamiento directo de cultivos para combatir o preservar de plagas de insectos,

hongos y malezas, gran parte de los cuales se depositan en el suelo, cuerpos

de agua, biota, etc. Son contaminantes ubicuos debido a su persistencia y

naturaleza semivolátil y los aplicados en tierra llegan finalmente a los

ambientes acuáticos.

De acuerdo a sus propiedades fisico-químicas (por ej.: presión de vapor,

solubilidad en agua, partición partícula/solución) son distribuidos entre los

diferentes compartimentos bióticos y abióticos.

Los POCs incluyen 5 grupos de compuestos:

1) DDT y metabolitos.

2) Hexaclorociclohexanos o HCHs.

3) Ciclodienos (Heptacloro, Aldrin, Endosulfanes, Clordanos).

4) Toxafeno.

5) Mirex.


Estos plaguicidas han sido utilizados intensamente en todo el mundo

durante los últimos 40 años. Debido a su persistencia y efectos adversos en el

ambiente, se han prohibido en la mayoría de los países desarrollados, con

excepción del Endosulfán.

Los organismos acuáticos están expuestos durante su vida a la acción

de contaminantes ambientales como los POCs. A concentraciones elevadas en

el ambiente originan alteraciones en el reparto de energía y metabolismo de los

organismos, tales como cambios en la dinámica de los lípidos y de las

proteínas e incluso pueden llegar a ocasionar la muerte. Por otra parte, una

exposición a largo plazo, a concentraciones insignificantes de contaminantes

puede provocar daños crónicos como alteraciones en los sistemas

inmunológicos y reproductivos .

Los plaguicidas están presentes en los organismos acuáticos como

resultado de la incorporación desde el agua, a concentraciones alrededor de

100 veces más elevada, proceso conocido como bioconcentración (3). En los

organismos de mayor talla (edad) las concentraciones son superiores, lo que

se conoce como bioacumulación. Finalmente también son incorporados

desde la dieta con un incremento 70 a 100 veces mayor en el predador que en

la presa, mecanismo conocido como biomagnificación (4).

Los organismos acuáticos en general y los peces en particular, tienen

una gran superficie corporal externa, cubierta con membranas

semipermeables, en contacto con el agua donde se encuentran los

contaminantes. Por lo tanto es probable que la difusión juegue el papel más

importante en la bioacumulación de estos compuestos en el ambiente acuático.

La incorporación desde el alimento está relacionada a la posición del

organismo en particular en la cadena alimentaria y la mayor incorporación será

por biomagnificación. De esta forma, el potencial de acumulación de

xenobióticos persistentes varía con la especie, contenido lipídico de la misma y

nicho ecológico del organismo, como también con las características del

compuesto.


Por su lado, y a diferencia de los xenobióticos, los metales pesados son

elementos naturales que el hombre, por extracción y uso, ha alterado sus ciclos

biogeoquímicos y consecuentemente los incidentes de contaminación han

aumentado considerablemente. Los metales pesados fueron usados por el

hombre desde época inmemorable, desde la Era del fuego con el quemado de

madera, seguido por la Era de los metales donde se inició la etapa de

extracción y uso directo de los mismos y desde la Revolución Industrial la

liberación de metales al ambiente ha sido incrementada de manera importante

y sostenida.

De todos los elementos conocidos ochenta y cuatro se clasifican como

metales, por lo tanto las oportunidades de contaminación metálica son

potencialmente numerosas. No obstante no todos representan un riesgo para

el ambiente y la salud de los organismos, algunos no son tóxicos mientras que

otros, aún cuando lo sean, son muy escasos o sus compuestos son insolubles

y no biodisponibles. En el caso de los metales estudiados en este proyecto,

cadmio, cobre, cinc y mercurio, están considerados como muy tóxicos y

relativamente accesibles (5).

Los aportes de metales al ambiente pueden ser por fuentes naturales o

antropogénicas. Las primeras comprenden principalmente el desgaste

geológico y el vulcanismo, los cuales aportaron los niveles “naturales” desde

tiempos geológicos muy antiguos. Los aportes humanos están relacionados

con el manipuleo de los metales desde la extracción y procesamiento sus

minerales hasta los diversos usos que se hacen de los metales puros y sus

compuestos, los cuales constituyen fuentes quizás más importantes que las

naturales.

En cuanto a efectos, es muy conocido que cantidades traza de ciertos

elementos pueden tener una influencia negativa o positiva sobre los

organismos, la cual está relacionada con la esencialidad del mismo. Un

elemento es esencial cuando se encuentra en todos los organismos, la

concentración no varía ampliamente de especie a especie, hay síntomas de


deficiencia cuando se disminuye o se elimina, y no puede ser reemplazado

completamente por otro ya que tiene una influencia directa sobre el organismo

por estar involucrado en su metabolismo.

Los metales pueden desarrollar diferentes funciones en los organismos,

como ser electroquímicas (formas iónicas), catalíticas (activación de enzimas) e

integración de macromoléculas específicas (hierro en hemoglobina, magnesio

en clorofila y cobalto en vitamina B12, entre otros) (6).

De todas maneras, el hecho de que un metal sea esencial no significa

que no pueda ser tóxico, manifestándose como tal cuando sus niveles superan

a aquellos requeridos por los organismos, los denominados niveles

nutricionales. En este caso, el metal se encuentra en exceso y es allí cuando

los mecanismos homeostáticos, encargados de la regulación dentro de los

valores metabólicos, se saturan o superan y el metal comienza a manifestar

efectos negativos. Los efectos varían con el metal, las concentraciones de

exposición y la condición del organismo, siendo desde disturbios a nivel

molecular (alteraciones de membranas y macromoléculas como enzimas,

proteínas y ácidos nucleicos) hasta aquellos a nivel de órganos y sistemas de

órganos, pudiendo ocasionar alteraciones fisiológicas de consideración

llegando incluso a provocar la muerte (7).

En el ambiente los metales se encuentran en los distintos

compartimentos bajo distintas formas químicas, denominadas especies físico-

químicas, las cuales están en íntima relación con la disponibilidad biológica de

los mismos, es decir, la proporción del metal total que puede ser asimilada por

los organismos. Las especies individuales pueden incluír formas particuladas y

disueltas, tales como especies inorgánicas simples, complejos orgánicos y

elementos sorbidos a una variedad de partículas coloidales. Las formas más

biodisponibles de metales son los iones disueltos y las formas orgánicas

permeables a las membranas celulares.

En el ambiente acuático los sedimentos constituyen un compartimento

muy importante ya que en ellos se concentran, por distintos procesos físicos y


químicos, los elementos pesados que se encuentran en la columna de agua. Si

bien las concentraciones en este compartimento son elevadas, la mayor

proporción no es biodisponible, debido a que se encuentran “fijados” y solo

ciertos cambios naturales o antropogénicos los pueden movilizar. Los procesos

diagenéticos, es decir las reacciones biogeoquímicas naturales que tienen

lugar en los sedimentos, pueden ser alterados por las actividades del hombre.

Así, la liberación de sustancias orgánicas e inorgánicas a través de desechos,

la exposición de sedimentos anóxicos a la oxidación por el dragado, alteración

del flujo y mezcla del agua sobre los sedimentos por instalación de distintas

estructuras, etc., pueden constituir procesos que removilicen metales de los

mismos.

Todos los químicos mencionados son analizados frecuentemente en

peces y otros organismos acuáticos para establecer el nivel de contaminación

del ambiente del cual son originarios. Actualmente y a escala mundial, se

realizan numerosos programas de monitoreo para determinar cambios

temporales y espaciales en la contaminación de los ambientes acuáticos

mediante el análisis de residuos en muestras biológicas.

El conocimiento de los parámetros biológicos de las especies de

invertebrados y peces seleccionados en este trabajo con distribución de tallas,

largo de primera madurez sexual, ciclo reproductivo y sus hábitos tróficos,

permite considerar adecuadas a las especies analizadas provenientes del Río

de La Plata y su Frente Marítimo, para investigar los niveles de contaminantes

en esas áreas.

La fauna de peces del Río de La Plata está compuesta por dos grupos

principales, uno de peces de agua dulce y otro de origen marino. Los peces de

agua dulce provienen principalmente de la fauna de los ríos Paraná y Uruguay,

que forman el sector sur de la cuenca fluvial. La fauna de peces de origen

marino está compuesta en su mayoría por especies que habitan la región

costera de la plataforma interior del frente oceánico del Río de la Plata.

Según esta clasificación, en este primer informe analizamos:


- Corvina rubia, especie eurihalina que cumple gran parte de su ciclo de vida

en la zona costera del Río de la Plata medio e inferior, tanto en la costa

uruguaya como en la bahía de Samborombón (Argentina) y también se

encuentra en aguas de mayor salinidad,

- Sábalo y boga, especies dulceacuícolas, provenientes del Río de La Plata

Superior y

- Merluza, especie marina, capturada en la Zona Común de Pesca

Argentino–Uruguaya.

Para obtener resultados significativos se debió realizar una elección

correcta de los parámetros a tener en cuenta, como ser:

- Elección del tejido apropiado para las determinaciones (pez entero,

órgano blanco, tejido o fracción celular).

- Consideración de las diferencias entre sexos.

- Consideración de las diferencias con el estadío de maduración del

organismo.

- Relación entre los compuestos parentales y sus metabolitos

(xenobióticos).

CARACTERISTICAS BIOLOGICAS DE LAS ESPECIES ESTUDIADAS

Las cuatro especies seleccionadas para realizar este primer informe del

proyecto son de importancia comercial, dedicadas al consumo humano, ya sea

fresco o congelado, y en el caso del sábalo y la corvina rubia, los mismos

también se utilizan en la obtención de harina de pescado.

Merluccius hubbsi (merluza común)

Es una especie netamente marina, demersal, con una distribución

geográfica en todo el Mar Argentino, presentando migraciones verticales

(diaria, trófica) y horizontales (estacional, reproductiva). Por la primera

asciende a las aguas superficiales para alimentarse durante la noche, mientras


que en la segunda se desplaza en primavera hacia aguas menos profundas

para reproducirse. Normalmente habita entre los 50 y 500 m de profundidad, si

bien la mayor concentración se encuentra a los 200 m. En cuanto a sus hábitos

tróficos, se puede decir que es una especie carnívora, predadora y oportunista,

zooplanctófaga por excelencia hasta tallas entre 30 y 35 cm. Entre sus items

alimentarios se encuentran anchoítas, mictófidos, crustáceos y juveniles de

merluza. Es una especie de cierta longevidad, alcanzando los 14 años. La talla

de primera madurez sexual es de 36 cm para las hembras y de 33 cm para los

machos, correspondiendo a edades de 3 y 4 años respectivamente. La merluza

presenta puestas casi todo el año, con dos períodos de mayor intensidad, en el

invierno (mayo – julio) en el norte de su distribución y en el verano (octubre –

marzo) en la zona costera norpatagónica (9).

Micropogonias furnieri (corvina rubia)

Especie marina-estuarial con capacidad de soportar un amplio rango de

salinidades (eurihalina), realizando parte de su ciclo de vida en aguas

estuariales, llegando los juveniles a penetrar en ríos y arroyos que desembocan

en el mar. Es una especie costera que habita fondos arenosos y fangosos y de

la cual no se conoce con certeza si presenta migraciones. En cuanto a sus

hábitos tróficos, se puede decir que se alimenta principalmente de organismos

bentónicos como crustáceos (camarones, langostinos y cangrejos), poliquetos

y moluscos (bivalvos y caracoles). Es una especie longeva, la edad máxima

registrada fue de 30 años y la talla de primera madurez sexual es de 29 cm

para los machos y 30 cm para las hembras. Durante la época invernal las

corvinas provenientes de la Zona Común de Pesca Argentino – Uruguaya, se

encuentran en estadío de reposo gonadal (1).

Leporinus spp (boga)

Especie dulceacuícola con amplia distribución y de gran importancia en

el área estudiada, si bien su biomasa es significativamente menor a la

correspondiente al sábalo. En cuanto a sus hábitos tróficos, se puede decir que

es una especie omnívora, con predominio de la nutrición a base de vegetales


acuáticos. No se conoce mucho sobre su ciclo reproductivo, si bien se sabe

que la edad de primera madurez es a los dos años y que el desove se

concentra entre octubre y diciembre (8).

Prochilodus platensis (syn P. lineatus, sábalo)

Especie dulceacícola, de gran importancia comercial y en términos de

biomasa, constituyendo más del 60% de la fauna ictícola de los cuerpos de

agua dulce de nuestro país. Presenta una amplia distribución en los ríos que

constituyen el sistema hidrográfico del Río de La Plata. Es una especie iliófaga

durante todo su ciclo de vida, alimentándose de la materia orgánica presente

en el fango. El sábalo presenta migraciones reproductivas cíclicas y regulares,

desde abril hasta agosto. Los ejemplares migran aguas arriba para su

reproducción, interrumpiendo la alimentación durante este período (8).

MATERIALES Y METODOS

Obtención de las muestras

En la presente etapa del proyecto se analizaron las siguientes muestras:

Ejemplares juveniles y adultos de ambos sexos de merluza común

provenientes de una campaña pesquera realizada en la Zona Común de

Pesca Argentino-Uruguaya en julio de 2002. Ejemplares analizados (n): 9

inmaduros, 2 hembras maduras y 9 machos maduros.

Ejemplares juveniles y adultos de ambos sexos de la corvina rubia

provenientes de la Bahía de Samborombón, diciembre de 2001. Ejemplares

analizados (n): 5 inmaduros, 5 hembras maduras y 5 machos maduros.

Ejemplares juveniles y hembras adultas de boga obtenidos en el Río de La

Plata superior en noviembre de 2001. Ejemplares analizados (n): 4

inmaduros y 4 hembras maduras.

Ejemplares juveniles y adultos de ambos sexos de sábalo capturados en el

Río de La Plata superior en noviembre de 2001. Ejemplares analizados (n):

5 inmaduros, 2 hembras maduras y 3 machos maduros.


En la Figura 1 se presentan las áreas correspondientes a los muestreos

de las especies estudiadas.

Figura 1: Zonas de distribución y muestreo de las especies estudiadas en el presente informe de avance.

De cada ejemplar se determinó el peso total usando una balanza

granataria (al 0,01g) y el largo estándar con un ictiómetro. También se pesó el

hígado y el contenido estomacal con una balanza analítica (al 0,0001g). De

cada organismo se determinaron los índices hepático (IH), gonadal (IG) y el de

condición (K), los cuales fueron calculados de la siguiente manera:

IH = peso hígado x 100 / peso total

IG = peso gónada x 100 / peso total

K = peso total x 100 / largo total3

(pesos expresados en gramos y largo en centímetros)

Durante la disección de los organismos se determinó el sexo de los

mismos, identificándose las gónadas femeninas o masculinas a simple vista.

OCEANO ATLANTICO

Boga / Sábalo

Corvina rubia

Merluza común

33

35

37

3958 5462

Río de La Plata

50


Los tejidos elegidos para llevar a cabo el estudio fueron hígado, músculo

dorsal y contenido estomacal. Una vez extraídos, el tejido/órgano fue envuelto

en papel de aluminio (contaminantes orgánicos) o en bolsas de polietileno

(metales pesados) y conservados a -20°C hasta el momento de su análisis.

Para las determinaciones los organismos seleccionados se agruparon en

"pooles" determinándose así la muestra a analizar. La agrupación de tejidos

bajo esta manera permite una estimación más cercana a la realidad de los

niveles de contaminación, dado que se presenta una mayor parte de la

población bajo estudio, alcanzando una mayor representatividad. Cada grupo

de tejido fue homogenizado sin perder el frío hasta obtener una mezcla

homogénea del mismo. Los homogenatos fueron utilizados para la

determinación de los contaminantes orgánicos y los metales pesados.

Los resultados informados son promedio de dos determinaciones.


Determinación de contaminantes orgánicos

Extracción y fraccionamiento de los POCs

Los plaguicidas organoclorados debido a su conocido carácter lipofílico,

son extraídos de las muestras junto al material lipídico. Para todos los tejidos

se empleó la misma metodología (Figura 2)

+ Figura 2: Esquema de la metodología utilizada para la extracción, purificación y análisis cuali-cuantitativo de los POCs en las muestras de peces.

Homogenización de la muestra

Submuestra 2-3 gramos SO4Na2 anhidro

Extracción en Soxhlet 4 horas

Cromatografía de permeación en gel (GPC)

Lípidos %

POCs

Fraccionamiento en columna de Acido Silícico Activado

Fracción A

Análisis cuali-cuantitativo por cromatografía gaseosa con detector de captura electrónica (GC-ECD)

Fracción B


Preparación de las muestras Para cada tejido, se tomaron 3 g (al 0.0001 g) del homogenato y se los

mezcló con suficiente SO4Na2 anhidro en un mortero de vidrio hasta formar un

polvo homogéneo fino. Se determinó que la relación óptima g tejido: g sulfato

de sodio fue 1:9. El objetivo de este tratamiento fue lograr una completa

deshidratación de la muestra.

Extracción de lípidos y/o material lipofílico por método Soxhlet Se utilizó como solvente de extracción 110 ml. de mezcla

hexano:diclorometano de calidad “para análisis de plaguicidas” en una relación

50:50. Cada extracción tuvo una duración de 4 hs. El extracto obtenido fue

evaporado a 30°C hasta un volumen final de 3 ml.

Remoción de lípidos por cromatografía de permeación en gel (GPC) Los lípidos del extracto obtenido fueron removidos por cromatografía de

permeación en gel. Dicha cromatografía se basa en el principio de exclusión

molecular. La filtración o permeación en gel es una forma de separación

cromatográfica en columna con relleno de perlas. Los compuestos grandes,

mayores que el límite de exclusión (lípidos), pasan a través de la columna sin

impedimento, siendo recolectados en una primera fracción. Por su parte, los

compuestos pequeños como los POCs penetran en los poros de las perlas y

por lo tanto se retardan en el pasaje por la columna siendo colectados en una

segunda fracción.

Se utilizó una columna de 30 mm. de diámetro x 30 cm. de altura

rellena con perlas Bio Beads SX-3 y previamente calibrada con un blanco de

aceite de origen vegetal. La muestra se sembró en la parte superior de la

columna y se eluyó con 280 ml. de mezcla hexano–diclorometano en relación

55:45, a razón de 5 ml./min. Los primeros 40 ml. fueron descartados. Los

segundos 90 ml., correspondientes a los lípidos (primera fracción), se

colectaron en una probeta. De igual manera, se procedió con los últimos 150

ml. donde se encontraban los POCs (segunda fracción).


La fracción de lípidos (90 ml.) fue traspasada a un balón previamente

tarado y se llevó a sequedad por evaporación a una temperatura entre 40-50

°C, con bomba de vacío. Finalmente, se secó con gas nitrógeno AP (alta

pureza) y así, por diferencia de peso se obtuvo el peso de los lípidos de la

muestra analizada.

Fraccionamiento de los POCs (2º fracción de GPC)

La segunda fracción obtenida en la GPC fue evaporada a 27-30 ºC

hasta un volumen final de 2 ml. para realizar su fraccionamiento por

cromatografía de adsorción. Para ello se utilizó una columna de 1 cm. de

diámetro interno y 30 cm. de longitud, rellena de ácido silícico, previamente

activado a 200 °C durante 24 horas. La columna se lavó previamente con 20

ml. de hexano y se sembró la muestra en la parte superior. Se eluyó con 40 ml.

de hexano obteniéndose la fracción A donde se encuentran los plaguicidas

aldrin, heptacloro y parte del DDE, luego con 80 ml. de mezcla hexano-

diclorometano (50:50), se obtuvo la fracción B, donde se encuentran:

α−, β−, γ−, y δ− HCH, heptacloro epóxido, α− y γ− clordano, α- y β-endosulfan ,

endosulfán sulfato, resto del DDE, DDT, DDD, dieldrin, endrin y endrin

aldehído. Las 2 fracciones fueron evaporadas a 27–30ºC hasta un volumen

final de 1 ml. y traspasadas a viales para su análisis cuali-cuantitativo.

Análisis cuali-cuantitativo de los POCs (10)

El análisis cuali-cuantitativo de los POCs se realizó por Cromatografía

Gaseosa con Detector de Captura Electrónica (GC-ECD). El detector de

captura electrónica responde selectivamente a las moléculas que contienen

átomos electronegativos, tal como los átomos de cloro de los POCs. A medida

que el gas portador He fluye a través del detector, una lámina de Ni63 radiactivo

ioniza las moléculas de He y forma electrones lentos, los cuales se desplazan

hacia el ánodo. Al colectarse estos electrones producen una corriente de fondo

constante. Si en ese momento se introduce en el detector una muestra que

contenga moléculas que capturan electrones, la corriente disminuye y con una

calibración apropiada se relaciona la pérdida de corriente con la concentración

de la muestra.


Se utilizó un cromatógrafo Shimadzu–17A equipado con detector de

captura electrónica (63Ni) y columna capilar DB-5 de Supelco, de 0.25 mm de

diámetro interno, 0.25 µm. de espesor de fase, 30 m. de longitud y operada en

modo "splitless". Las condiciones operativas y el programa de calentamiento de

columna fueron los siguientes: temperatura del inyector: 275°C; temperatura

del detector: 300°C; temperatura inicial de columna: 100°C, 1 min., gradiente

de 5 °C/min. hasta 150°C, 1 min., luego gradiente de 1.5 °C/min. hasta 240°C,

0 min. Luego a 10ºC/min hasta 300°C, 3 min. Velocidad del flujo de Helio: 3.7

cm/seg.

Los diferentes compuestos se identificaron por medio de estándares

externos a través de sus tiempos de retención y utilizando el #PCB 103 como

estándar interno.

Se analizó un estándar, Mix 16 (M-001H, Accustandard, New Haven,

CT) para la confección de las curvas de calibración correspondientes para cada

compuesto.

Expresión de los resultados

Las concentraciones de POCs están expresadas en ng/g o ppb (peso

húmedo), ng/g o ppb (peso seco) y ng/g o ppb de lípidos.

Límites de detección del método Los límites de detección del método (peso seco) fueron: < 0.006, para

los HCHs, heptacloros y el aldrin; < 0.1 para el heptacloro epóxido, dieldrin,

endrin, endrin aldehído, clordanos y endosulfanes y < 0.2 para los DDTs.

Determinación de metales pesados

Determinación de Mercurio total El método usado para la determinación de mercurio total es el descripto

por Moreno et al. (11).


• Mineralización de las muestras

Se pesaron 100 a 200 mg de muestra en tubos de ensayo de 5 ml, se

agrega 50 ml de mezcla de ácido nítrico y ácido sulfúrico (1:4) y se calienta a

64°C durante 90 minutos (agitando cada 10’). Luego de enfriados los tubos en

un baño de hielo, se le añade 15 ml de solución de permanganato de potasio

(6%) para aumentar la oxidación de la materia orgánica. Al día siguiente de

agrega peróxido de hidrógeno hasta completar la oxidación.

• Medición de la absorbancia de las muestras

Este procedimiento se realizó con un Espectrofotómetro de Absorción

Atómica Perkin-Elmer Analyst 300 con horno de grafito HGA800 y FIAS 100.

En el momento de las mediciones, a cada tubo se le agrega solución de cloruro

estañoso (10%), cuya función es reducir el mercurio a su estado elemental.

Luego el mercurio es barrido con una corriente de aire y entra en la celda de

cuarzo del equipo, obteniéndose las señales correspondientes.

Cada set de tubos está constituido por las muestras problema y 6

muestras testigo: una es el blanco de reactivos y los restantes contienen

concentraciones crecientes conocidas de mercurio, con las cuales se realiza

una curva de calibración para calcular las concentraciones de las muestras.

• Condiciones del equipo para las mediciones:

Altura de la celda (mm) 20

Longitud de onda de la lámpara de mercurio (nm) 253,7

Abertura (Å) 3,8

Corriente de la lámpara (mA) 3

Determinación de las concentraciones de cadmio, cinc y cobre

Para las determinaciones de estos metales se sigue el método descripto

por FAO/SIDA (12).


• Mineralización de las muestras

Se pesa aproximadamente 1g de muestra problema y se acidifica con

4ml de ácido perclórico y ácido nítrico concentrados (1:3). Se calienta en baño

de glicerina (temperatura menor a 85°C) hasta reducir su volumen a

aproximadamente 1ml, luego se lleva a 5ml con ácido nítrico (1%).

• Medición de las absorbancias de las muestras

Las absorbancias son medidas por Espectrofotometría de Absorción

Atómica (EAA) con llama aire/acetileno con corrección de fondo mediante

lámpara de deuterio. Además de los tubos correspondientes a las muestras, se

lee un blanco de reactivos y testigos con concentraciones conocidas y

crecientes de estándares de los tres metales a medir. Al igual que para el caso

del mercurio, se realiza una curva de calibración a partir de la cual se

determinan las concentraciones de cada uno de los metales en las distintas

muestras analizadas.

• Condiciones del EAA para las determinaciones

CADMIO COBRE CINC

Altura del quemador mm 3 4 4

Longitud de onda de las lámparas nm 228,8 324,7 213,9

Abertura Å 3,8 3,8 3,8

Corriente de la lámpara mA 5 7 6

Flujo de aire lt/min 10 10 10

Flujo de acetileno lt/min 1,3 2,3 2,4

Las determinaciones se realizaron con un EAA Perkin-Elmer Analyst 300

con horno de grafito HGA800 y FIAS 100. Las muestras son filtradas

previamente a la aspiración al espectrofotómetro, para evitar la entrada de

partículas produciendo su apagado. Debido a que las muestras son pasadas

por un filtro, también se realizó un blanco del mismo en las corridas de los

metales, lo cual descarta la posibilidad de que el mismo aporte metales y por lo

tanto estemos sobrestimando las muestras.


Expresión de los resultados

En todos los casos los resultados están expresados en µg/g de tejido

húmedo (ppm).

Límites de detección Los límites de detección del método, expresados en ppm, para los cuatro

metales analizados son: Cd 0,003, Zn 0,004, Cu 0,004 y Hg 0,005.


Especie

Tej

ido

Sexo

Dis

ecci

ón

Ext

rac.

líp

idos

GPC

Cua

nt.

lípid

os

Sílic

a ge

l

GC

-EC

D

Proc

es.

dato

s C

uant

. hu

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ad

Min

er.

Hg

tota

l E

AA

H

g to

tal

Min

. Cd,

C

u, Z

n E

AA

Cd,

C

u, Z

n Pr

oces

. da

tos

2 X X X X X X X X X X X X X 1 X X X X X X X X X X X X X M

SD X X X X X X X X X X X X X 2 X X X X X X X X X X X X X 1 X X X X X X X X X X X X X

MERLUZA

H SD X X X X X X X X X X X X X 2 X X X X X X X X 1 X X X X X X X X M

SD X X X X X X X X 2 X X X X X n.d. 1 X X X X X X

SÁBALO

H SD X X X X X n.d. 2 X X X X X X

M SD X X X X X X 2 X X X X X X

H SD X X X X X n.d. 2 X X X X X n.d.

BOGA

CE SD X X X X X n.d. 2 X X X X X X X X X X 1 X X X X X X X X X X M

SD X X X X X X X X X X 2 X X X X X X X X X X 1 X X X X X X X X X X H

SD X X X X X n.d. X X X X 2 X X X X X n.d. X X X X 1 X X X X X n.d. X X X X

CORVINA

CE SD X X X X X n.d. X X X X 2 X 1 X M

SD X 2 X 1 X

LISA

H SD X 2 X 1 X M

SD X 2 X 1 X H

SD X 2 X 1 X

GATUZO

CE SD X

M SD Caracol Atigrado MV SD

Almeja asiática E SD Corbícula E SD Mejillón E SD

Mejillón asiático E SD

Metales Pesados Orgánicos

Cuadro 1: Grado de avance de las actividades programadas. M: músculo, H: hígado, CE: contenido estomacal, MV: masa visceral, E: entero, 1: macho, 2: hembras, S.D.: sin diferenciar, X: realizado, n.d.: no determinado, cuadrícula vacía: a realizar


RESULTADOS Y DISCUSIÓN

1. Condición general de los organismos: datos morfométricos

Los pesos y tallas totales y los índices de condición (K), hepático (IH) y

gonadal (IG) de los organismos utilizados en el presente estudio están

indicados en el Cuadro 2.

Sexo Estadío Peso

Total Largo total K IH IG

Hembra M 373.85 ± 49.67 38 ± 1.41 0.68 5.86 - Macho M 304.36 ± 45.07 36.55 ± 1.1 0.62 4.96 - S.D. I 204.48 ± 29.84 32.06 ± 1.16 0.62 3.92 - M

erluza

Hembra M 758.96 ± 259.29 41.16 ± 4.52 1.09 9.56 4.05 Macho M 925.26 ± 353.87 44.5 ± 5.41 1.05 8.94 1.80 S.D. I 272.21 ± 16.43 29.43 ± 0.96 1.07 1.00 0.52 Co

rvina

Hembra M 1588.93 ± 558.54 52.36 ± 3.99 1.11 0.63 0.57 S.D. I Bo

ga

Hembra M 1831.53 ± 15.87 51.7 ± 1.27 1.33 1.32 3.25 Macho M 1558.17 ± 202.4 53.07 ± 6.43 1.04 0.77 - S.D I 663.69 ± 230.14 38.8 ± 0.41 1.14 0.53 0.28 Sá

balo

Cuadro 2: Datos morfométricos de las especies de peces capturados en el Río de La Plata y su Frente Marítimo. S.D.: sin diferenciar, M: maduro, I: inmaduro. 1.1-Merluza

Las gonadas de los ejemplares maduros se presentaron en estadío de

reposo gonadal, siendo los pesos de las mismas despreciables, razón por la

cual no se determinaron sus IG. El K de las hembras maduras presentó un

valor ligeramente superior al de los machos maduros y al de los organismos

inmaduros. Respecto a los IH los valores mas elevados correspondieron

también a las hembras maduras seguidos en orden decreciente por los machos

y organismos inmaduros.


1.2-Corvina El K no presentó diferencias marcadas entre adultos de ambos sexos y

entre maduros e inmaduros. Los IH e IG de los organismos capturados en

noviembre presentaron valores mayores a los obtenidos en corvinas

capturadas en la misma zona durante los meses de invierno (período de reposo

gonadal) (13). Así estas observaciones indican que las corvinas capturadas en

noviembre se encuentran en el período de pre-freza (elevado IG) y de

alimentación intensiva (elevado IH). Los organismos inmaduros, por su parte,

presentaron valores mas elevados de IH y marcadamente menores de IG,

respecto a los maduros, como era de esperar.

1.3-Boga El valor del K de las hembras utilizadas en este trabajo coincide con los

valores obtenidos por Delfino et al. (8) correspondientes a bogas en periodo de

post-freza los cuales fueron capturados aguas arriba en primavera. El valor

bajo del IG encontrado en los ejemplares analizados en este trabajo sugeriría

que dichos organismos se encuentran en periodo de post-presa.

1.4 -Sábalo El K de las hembras maduras presentó un valor superior al de los

machos maduros y organismos inmaduros. Esta relación también fue

observada en los IH e IG. Teniendo en cuenta la fecha de captura y los valores

elevados del IG de las hembras, sugiere que estos organismos se encuentran

en periodo de pre-freza.

2. Datos preliminares sobre el estado de la contaminación por POCs en las especies de peces capturadas en el Río de La Plata y el Frente Marítimo.

En esta primera etapa se consideró valioso informar la concentración

promedio de POCs (sin diferenciación de sexos y estadios gonadales) de los

tejidos con el objeto de poder comparar estos resultados con otros realizados

sobre las mismas especies u otras como así también capturados en otros

lugares del mundo. Se detectaron POCs en todos los tejidos/órganos y

contenidos estomacales de las especies analizados (Cuadro 3).


Este cuadro muestra las concentraciones promedio de POCs en la

totalidad de las muestras analizadas.

Especie Tejido % lípidos POCs ng/g ph POCs ng/g lípidos

Hígado 48.55 (44.2-51.8)a 23.74 ± 6.54b 48.89 Merluza Músculo 1.18 (1.0-1.5) 6.56 ± 3.32 555.93

Hígado 5.55 (4.17-6.78) A.D. A.D. Músculo 1.34 (1.05-1.87) A.D. A.D. Corvina Cont. Estomacal 1.68 (1.1-2.82) A.D. A.D.

Hígado 7.77 (2.9-12.6) A.D. A.D. Músculo 0.9 (0.6-1.2) A.D. A.D. Boga Cont. Estomacal 2.17 (0.9-3.43) A.D. A.D.

Hígado 8.82 (7.9-11.1) 21.8 ± 12.19 247.16 Sábalo Músculo 6.46 (1.5-11.4) A.D. A.D.

Cuadro 3: Concentraciones totales de POCs en los diferentes tejidos de los peces analizados, capturadas en el Río de La Plata y su Frente Marítimo. Ph: peso húmedo. a: rango, b: desviación estándar, A.D.: a determinar

Debido a la naturaleza lipofílica de los POCs, estos se acumulan en los

tejidos de los organismos acuáticos en general, de acuerdo a su nivel lipídico

(14-15). Por este motivo el contaminante orgánico incorporado está relacionado

a la concentración y a la composición lipídica del tejido (16).

Los tejidos hepáticos de las cuatro especies mostraron mayores

porcentajes de lípidos que el músculo, siendo la relación % lípidos en músculo /

% lípidos en hígado menor en la merluza (pez magro) y mayor en el sábalo

(pez graso).

La concentración de POCs en los tejidos de las cuatro especies de

peces analizadas, indican en una primera aproximación, que:

a- En el músculo de la merluza, tejido analizado por las implicancias

que acarrea para el consumo humano, las concentraciones fueron

menores a los niveles de tolerancia establecidos por, la guía

americana de consumidores (1.7 ug/g) (17).

b- En el hígado de la merluza y el sábalo, órgano que refleja el ingreso

reciente de contaminantes, los valores fueron menores a los hallados


en peces que habitan zonas estuariales de otras latitudes y mayores

a los registrados en hígado de Odontesthes bonaeriensis, de Mar

Chiquita (18)

3. Concentración y distribución de POCs

3.1.Merluza

El Cuadro 4 muestra los porcentajes medios de lípidos y

concentraciones promedio de POCs totales en la merluza (Merluccius hubbsi).

Concentración de POCs Sexo Tejido % Humedad % lípidos ng/g p. h. ng/g p. s.

Músculo 75.24 1.04 7.66 10.18 Hembra Hígado 44.9 44.15 25.65 57.13

Músculo 77.86 1.0 9.35 12.01 Macho Hígado 39.4 51.8 24.51 62.21

Músculo 80.03 1.5 7.21 9.01 S.D. Hígado 39.80 49.7 21.05 52.89

Cuadro 4: Porcentaje de lípidos, humedad y concentraciones de POCs en los diferentes tejidos de merluza. ph: peso húmedo, ps: peso seco, S.D.: sin diferenciar

Las concentraciones de POCs en los tejidos de los organismos

inmaduros fueron inferiores a aquellas de los maduros de ambos sexos. Este

aumento de la concentración de POCs con la edad y/o talla del organismo se

conoce como el proceso de bioacumulación y se ha observado en varias

especies (3-4).

El tejido hepático de organismos inmaduros y maduros de ambos sexos

presentaron mayores concentraciones de lípidos y plaguicidas totales (ng/g ph)

que en el músculo. Así, la naturaleza lipofílica de los POCs determina que

estos se acumulen en los tejidos de los organismos de acuerdo a su nivel

lipídico. Se ha comprobado que variaciones cualitativas en los lípidos alterarían


los niveles de contaminantes por los cambios en el número y tipo de sitios de

unión disponibles para los POCs.

Al comparar ambos sexos, se observó que los machos maduros

presentaron mayores concentraciones de POCs que las hembras tanto en el

hígado como en el músculo (expresado en ng/g ph). Este resultado sería

consecuencia de que los machos no poseen la capacidad de desprenderse

durante la puesta de grandes cantidades de lípidos con contaminantes ligados

a ellos, como ocurre en las hembras (14-15, 19). Resultados similares fueron

encontrados en C. guatucupa (20).

La concentración de POCs expresada en ng/g lípidos, presentó valores

mas elevados en el músculo que en hígado. En este último tejido las

concentraciones de POCs en ambos sexos fueron similares, sugiriendo la

exposición de ambos a una misma dieta.

3.1.1. Hígado La figura 3 muestra la distribución porcentual de los grupos de POCs en

el tejido hepático de la merluza. La misma distribución de grupos fue observada

en el tejido hepático de los organismos maduros e inmaduros, presentando el

siguiente orden decreciente: ciclodienos > DDTs > HCHs.

Figura 3: Distribución porcentual de grupos de POCs en el tejido hepático de organismos maduros e inmaduros de merluza

En el Cuadro 5 se muestran las concentraciones de plaguicidas (ng/g

peso húmedo) en el tejido hepático de la merluza.

0%

20%

40%

60%

80%

100%

hembras machos juveniles

HCHs DDTs ciclodienos


Organismos maduros Plaguicida Hembra Macho

Organismos inmaduros

α-HCH 0,616 0,480 0,447 β−HCH 0,139 0,120 0,076 γ-HCH 0,864 0,517 0,876 δ-HCH 0,193 0,054 0,088

Σ HCH 1.812 1.17 1.487

Heptacloro 0,057 0,033 - Hept. Epóxido 0,248 0,554 0,319

Σ Heptacloros 0.305 0.587 0.319

Aldrin - - - Dieldrin 2,322 2,711 1,934 Endrin 0,850 1,352 1,284

Σ Aldrines 3.172 4.063 3.218

α-Endosulfán 0,834 0,637 0,380 β-Endosulfán 1,655 1,785 2,265 Endosulfán sulfato 7,891 6,982 11,796

Σ Endosulfanes 10.379 9.404 8.543

γ-clordano 0,874 0,877 1,119 α-clordano 1,430 0,848 1,862

Σ Clordanos 2.304 1.726 2.981

DDE 5,128 4,900 0,665 DDD 2,009 1,720 2,169 DDT 0,422 0,681 1,264

Σ DDTs 7.558 7.301 4.098

TOTAL 25,531 24,251 26.545 Cuadro 5: Concentración de POCs (ng/g peso húmedo) en el tejido hepático de la merluza.

El grupo de los endosulfanes, perteneciente al grupo de los ciclodienos,

fue el más importante cuantitativamente seguidos en orden decreciente por los

DDTs, aldrines, clordanos, HCHs y heptacloros en todos los organismos.

3.1.1.1.Parentales y metabolitos

La relación entre las concentraciones del metabolito a su compuesto

parental nos indica la capacidad de la especie a biotransformar o detoxificar los

plaguicidas organoclorados.

-Endosulfanes: El metabolito endosulfán sulfato predominó sobre sus

parentales: α- y β-endosulfán en el tejido hepático de organismos maduros e


inmaduros y la relación α-/β- fue < 1.

-DDTs: La relación metabolito/parental fue > 1 en todos los organismos

predominando el DDD en los organismos inmaduros y el DDE en lo maduros.

-Heptacloros: Fue el grupo de menor importancia dentro de los ciclodienos.

La relación Heptacloro/Heptacloro epóxido fue < 1 en todos los casos.

-Aldrines: El aldrin no estuvo presente en el hígado. El dieldrin y endrin,

productos del metabolismo del aldrin y en ocasiones usados como plaguicidas,

fueron los principales compuestos dentro del grupo, guardando la relación

dieldrin > endrin.

-Clordanos: Este grupo estuvo presente en todos los organismos, con una

relación α-/γ-clordano ≥ 1.

-HCHs: En todos los organismos, el isómero γ- fue el compuesto más

importante dentro del grupo, seguido por el isómero α-.

3.1.2.Músculo La figura 4 muestra la distribución porcentual de los grupos de POCs en

el tejido muscular de la merluza. La distribución de grupos fue similar en

hembras maduras y organismos inmaduros, siendo el orden ciclodienos >

HCHs > DDTs, mientras que los machos maduros presentaron el mismo orden

que en el tejido hepático: ciclodienos > DDTs > HCHs.

Figura 4: Distribución porcentual de grupos de POCs en el tejido muscular de organismos maduros e inmaduros de merluza

En el Cuadro 6 se muestran las concentraciones de plaguicidas en el

tejido muscular de la merluza.

0%20%40%60%80%

100%

hembras machos juvenilesHCHs DDTs ciclodienos




α-HCH 0,077 0,057 0,120 β−HCH 0,051 0,040 0,127 γ-HCH 0,350 0,293 0,545 δ-HCH 0,190 0,083 0,147

Σ HCH 0.668 0.473 0.939

Heptacloro 0,013 - - Hept. Epóxido 0,049 - 0,024

Σ Heptacloros 0.062 - 0.024

Aldrin - - - Dieldrin 0,176 0,227 0,115 Endrin - - -

Σ Aldrines 0.176 0.2278 0.115

α-Endosulfán 0,035 - 0,049 β-Endosulfán 0,084 - - Endosulfán sulfato 5,933 6,729 5,543

Σ Endosulfanes 6.052 6.729 5.592

γ-clordano 0,214 0,124 0,249 α-clordano - - 0,092

Σ Clordanos 0.214 0.124 0.342

DDE 0,237 1,646 0,015 DDD 0,054 - - DDT 0,202 0,153 0,184

Σ DDTs 0.492 1.799 0.199

TOTAL 7,665 9,351 7,209 Cuadro 6: Concentración de POCs (ng/g peso húmedo) en el tejido muscular de la merluza.

Dentro de los ciclodienos, el grupo de los endosulfanes fue

cuantitativamente el mas importante, seguido por los clordanos, aldrines y

heptacloros tanto en hembras maduras como en organismos inmaduros,

mientras que en los machos estuvo seguido por los aldrines y clordanos.


-Endosulfanes: Al igual que en el hígado se observó un predominio del

metabolito endosulfán sulfato. Los compuestos parentales, α- y β-endosulfán,

presentaron concentraciones bajas, inferiores a 0.1 ng/g.

-DDTs: La relación metabolito/parental (DDE/DDT) fue > 1 en los machos y ≤ 1

en hembras y organismos inmaduros.


-Heptacloros: Las concentraciones de los componentes de este grupo fueron

muy bajas, inferiores a 0.05 ng/g.

-Aldrines: El dieldrin fue el único representante del grupo, mostrando

concentraciones similares entre los diferentes organismos.

-Clordanos: El isómero γ- fue el compuesto mas importante dentro del grupo

en todos los organismos.

-HCHs: El isómero γ- predominó en todos los organismos, seguido por el

isómero δ-.

3.2.Corvina

El Cuadro 7 muestra los porcentajes medios de lípidos y humedad en la

corvina (Micropogonias furnieri)

Concentración de POCs Sexo Tejido %

Humedad % lípidos ng/g p. h. ng/g p. s.

Músculo 77.34 1.87 A.D. A.D. Hígado 78.4 6.78 A.D. A.D. Hembra C. estom. N.D. 1.1 A.D. A.D.

Músculo 79.5 1.05 A.D. A.D. Hígado 57.1 5.7 A.D. A.D. Macho C. estom. N.D. 2.82 A.D. A.D.

Músculo 78.9 1.1 A.D. A.D. Hígado N.D. 4.17 A.D. A.D. S.D. C. estom. N.D. 1.14 A.D. A.D.

Cuadro 7: Porcentaje de lípidos, humedad y concentraciones de POCs en los diferentes tejidos de corvina. ph: peso húmedo, ps: peso seco, A.D.: a determinar, N.D.: no determinado, S.D.: sin diferenciar 3.3.Boga

El Cuadro 8 muestra los porcentajes medios de lípidos y humedad en la

boga (Leporinus spp.)


Concentración de POCs Sexo Tejido % Humedad % lípidos ng/g p. h. ng/g p. s.

Músculo 77.07 1.2 A.D. A.D. Hígado 76.57 12.6 A.D. A.D. Hembra C. estom. N.D. 3.43 A.D. A.D.

Músculo 78.9 0.5 A.D. A.D. Hígado N.D. 2.94 A.D. A.D. S.D. C. estom. N.D. 0.91 A.D. A.D.

Cuadro 8: Porcentaje de lípidos, humedad y concentraciones de POCs en los diferentes tejidos de boga. ph: peso húmedo, ps: peso seco, A.D.: a determinar, N.D.: no determinado, S.D.: sin diferenciar

3.4.Sábalo

El Cuadro 9 muestra los porcentajes medios de lípidos y

concentraciones promedio de POCs totales en el sábalo (Prochilodus platensis)

(syn. P. lineatus)

Concentración de POCs Sexo Tejido Humedad relativa % lípidos ng/g p. h. ng/g p. s.

Músculo 74.6 6.5 A.D. A.D. Hembra Hígado N.D. 11.1 22.855 N.D.

Músculo 68.6 11.4 A.D. A.D. Macho Hígado 77.11 7.98 25.025 32.45

Músculo 78.02 1.46 A.D. A.D. S.D. Hígado N.D. 7.42 17.526 N.D.

Cuadro 9: Porcentaje de lípidos, humedad y concentraciones de POCs en los diferentes tejidos de sábalo. ph: peso húmedo, ps: peso seco, A.D.: a determinar, N.D.: no determinado, S.D.: sin diferenciar

Las concentraciones de POCs en los tejidos de los organismos

inmaduros fueron inferiores a aquellas de los maduros de ambos sexos,


mostrando la capacidad de bioacumulación de estos compuestos. Asimismo,

las concentraciones en los machos maduros fueron mayores que en las

hembras, sugiriendo que al igual que en la merluza, esta especie pierde

importantes cantidades de POCs unidos a los lípidos de los ovocitos durante el

desove.

3.4.1. Hígado La figura 5 muestra la distribución porcentual de los grupos de POCs en

el tejido hepático del sábalo. La misma distribución de grupos fue observada en

hembras maduras y organismos inmaduros, presentando el siguiente orden

decreciente: ciclodienos > DDTs = HCHs, mientras que en los machos, la

concentración de DDTs fue mayor, siendo la relación DDTs > HCHs.

Figura 5: Distribución porcentual de grupos de POCs en el tejido hepático de organismos maduros e inmaduros del sábalo

En el Cuadro 10 se muestran las concentraciones de plaguicidas (ng/g

peso húmedo) en el tejido hepático del sábalo.

0%

20%

40%

60%

80%

100%

hembras machos juvenilesHCHs DDTs ciclodienos




α-HCH 0.434 0.476 0.440 β−HCH 1.415 0.790 0.742 γ-HCH 1.028 0.700 1.156 δ-HCH 0.314 0.301 0.519

Σ HCH 3.191 2.267 2.857

Heptacloro 0.001 - - Hept. Epóxido 0.901 0.314 0.257

Σ Heptacloros 0.902 0.314 0.257

Aldrin - - - Dieldrin 1.136 0.847 0.185 Endrin 0.414 - 0.330

Σ Aldrines 1.550 0.847 0.514

α-Endosulfán 3.990 0.299 0.859 β-Endosulfán 2.851 2.134 1.938 Endosulfán sulfato 4.055 2.389 7.875

Σ Endosulfanes 10.897 4.821 10.673

γ-clordano 2.199 4.078 0.110 α-clordano 0.892 2.984 0.771

Σ Clordanos 3.091 7.062 0.881

DDE 0.483 0.331 4.131 DDD 1.833 7.473 1.539 DDT 0.907 1.909 0.805

Σ DDTs 3.223 9.714 2.344

TOTAL 22.855 25.025 17.526 Cuadro 10: Concentración de POCs (ng/g peso húmedo) en el tejido hepático del sábalo.

Los organismos inmaduros presentaron un predominio de los grupos

mas hidrofílicos, tales como endosulfanes y HCHs, constituyendo el 77% del

total de los POCs. Este resultado estaría relacionado con la posición trófica de

los organismos inmaduros, los cuales se alimentan de eslabones tróficos

inferiores. Asimismo, en estos organismos la incorporación de POCs por las

branquias (principalmente aquellos presentes en la columna de agua, tal como

HCHs y endosulfanes) adquiere una gran importancia, factor que justifica el

predominio de ambos grupos de plaguicidas.

El grupo de los endosulfanes, perteneciente al grupo de los ciclodienos,

fue el más importante cuantitativamente (50%) en las hembras maduras

seguidos por DDTs, clordanos y HCHs a concentraciones similares. Por su

parte, en los machos maduros se observó un predominio de los grupos mas


hidrofóbicos, tales como DDTs y clordanos, constituyendo en 70% del total de

POCs, seguidos en orden decreciente por endosulfanes y HCHs. Esta

diferencia entre hembras y machos maduros estaría relacionado con la

capacidad que poseen las hembras en detoxificarse especialmente de

compuestos altamente hidrofóbicos durante el periodo de desove, como se

mencionó anteriormente.


-Endosulfanes: El metabolito endosulfán sulfato predominó sobre sus

parentales: α- y β-endosulfán en el tejido hepático de organismos maduros e

inmaduros.

-DDTs: La relación metabolito/parental fue > 1 en todos los organismos

predominando el DDE en los organismos inmaduros y el DDD en lo maduros.

-Heptacloros: Fue el grupo de menor importancia dentro de los ciclodienos.

La relación Heptacloro/Heptacloro epóxido fue < 1 en todos los casos.

-Aldrines: El aldrin no estuvo presente en el hígado. El dieldrin y endrin, fueron

los principales compuestos dentro del grupo, guardando la relación dieldrin >

endrin.

-Clordanos: Este grupo estuvo presente en todos los organismos, con una

relación γ-/α-clordano > 1, en organismos maduros y < 1 en los inmaduros.

-HCHs: En los organismos maduros, el isómero β- fue el compuesto mas

importante dentro del grupo, seguido por el isómero γ-, mientras que en los

organismos inmaduros predomino el isómero γ-.


4. Datos preliminares sobre el estado de la contaminación por metales pesados en las especies de peces capturadas en el Río de La Plata y su Frente Marítimo.

Al igual que como se presentó la información sobre POCs, una primera

evaluación de los resultados de metales serán analizados sin diferenciar sexo

ni estadio de maduración (CUADRO 11).

Concentración µg/g ph Especie Tejido Hg Cd Cu Zn

Músculo 0,36±0,25a ND 3,86±2,00 29,26±6,61 Merluza Hígado 1,02±0,20 1,15±0,38 3,61±1,54 35,12±5,53

Músculo 0,24±0,06 ND 2,62±0,52 15,30±1,00 Hígado 1,18±0,25 1,11±0,84 4,37±0,74 23,25±4,30 Corvina Cont. Estomacal 1,50±0,16 2,58±0,59 4,72±0,68 24,00±6,42

Cuadro 11: Concentraciones totales de metales pesados en merluza y corvina rrubia capturadas en el estuario del Río de La Plata y su Frente marítimo. ph: peso húmedo, a desviación estándar.

De los cuatro metales estudiados, las concentraciones más altas fueron

las correspondientes a cinc, seguidas por las de cobre. Estos metales son

esenciales para el normal funcionamiento metabólico de los organismos, de allí

que sus concentraciones generalmente puedan superar a las de mercurio y

cadmio, de los cuales no se conoce una función fisiológica. En cuanto al

cadmio, las concentraciones fueron no detectables en el músculo de ambas

especies, mientras que el mercurio estuvo por encima del límite de detección.

Si bien no se analizaron diferentes especies físico-químicas de mercurio, se

sabe, por la bibliografía internacional, que los peces acumulan mercurio en el

músculo como metilmercurio (21). Por esta razón, podemos asegurar que el

mercurio encontrado en el músculo de merluza y corvina sería bajo esa

especie, la cual sería de fácil asimilación para sus predadores incluso el

hombre. De todos modos cabe aclarar que las concentraciones encontradas no

superan los límites internacionalmente aceptados para el consumo (0,7 µg/g;

22).


Al analizar de manera general los hígados de ambas especies, podemos

decir que las concentraciones entre las mismas no presentaron diferencias,

tanto para mercurio como para cadmio, presentando concentraciones

superiores a los límites de consumo mencionados. Esta situación revela la

capacidad de este órgano para acumular metales, lo cual está íntimamente

relacionado con su función natural. El hígado recibe y metaboliza los nutrientes

asimilados por el organismo, teniendo una actividad metabólica alta, procesos

que involucran también a todas aquellas sustancias que siguen la misma vía

que los nutrientes. Además, el hígado es un órgano que presenta

concentraciones elevadas de metalotioneína, proteínas de bajo peso molecular

que unen metales divalentes en su molécula (23). Estas macromoléculas

presentan altas concentraciones de cisteína, responsable de dicha unión a

través de sus grupos sulfhidrilos (-SH).

De la misma manera que para mercurio, las concentraciones de cadmio

encontradas en el hígado responden a la misma situación. El hígado es un

órgano blanco para los metales pesados en general y en especial para aquellos

no esenciales, cuya presencia se debe a la incorporación del ambiente. El nivel

trófico que ocupan los peces en las tramas acuáticas y en especial las dos

especies estudiadas en este informe de avance, consumidores secundarios o

terciarios, la dieta es el principal aporte de metales. Por tal motivo, es

interesante conocer las concentraciones de estos metales en sus especies

alimento o en el contenido estomacal. Lamentablemente los ejemplares de

merluza analizados presentaban los estómagos vacíos y por tal motivo sólo se

pudieron analizar los contenidos de la corvina rubia. Las concentraciones de

mercurio estuvieron en el mismo orden que las encontradas en el hígado,

mientras que las de cadmio duplicaron a las hepáticas. Esto significa un aporte

de cadmio mayor que mercurio en su dieta, lo cual está relacionado con la

alimentación de la corvina, crustáceos y bivalvos, acumuladores de metales y

de cadmio en particular (24,25).

Como conclusiones preliminares de este análisis general de ambas

especies, podemos decir que:


1. El músculo estuvo por debajo de los límites permitidos para su consumo, no

constituyendo un riesgo para la salud humana.

2. El hígado permitirá evaluar procesos de acumulación en las especies

estudiadas debido a su capacidad concentradora.

5. Concentración y distribución de metales pesados

5.1. Merluza

En el Cuadro 12 se presentan las distribuciones de los cuatro metales

estudiados en músculo e hígado de juveniles (sin diferenciar sexo).

Merluza (Juveniles)

0.0

5.0

10.0

15.0

20.0

25.0

30.0

35.0

Conc

entr

ació

n (p

pm)

Mercurio 0.08 0.83

Cadmio 0.00 0.77

Cinc 22.44 29.16

Cobre 1.56 2.00

Músculo Hígado

Cuadro 12: Concentración (µg/g ph) de los metales estudiados en ejemplares juveniles de merluza.

En este estadio se observa que las concentraciones de cinc superaron

ampliamente a los otros 3 metales, principalmente las correspondientes a los

no esenciales. Dentro de estos últimos, solamente el mercurio estuvo por

encima de los límites de detección para ambos tejidos, mientras que el cadmio

sólo en el hígado. Esta situación fue la misma que presentaron los adultos

(Cuadro 13), si bien las concentraciones de las hembras fueron inferiores a las

encontradas en los machos.


Cuadro 13: Concentración (µg/g ph) de los metales estudiados en ejemplares adultos de ambos sexos de de merluza.

En el análisis de cada metal en particular (Cuadro 14) las concentraciones

del músculo fueron inferiores a las correspondientes al hígado, incluso las

primeras fueron no detectables para el cadmio.

Tanto para los metales esenciales, cobre y cinc, como los no esenciales,

mercurio y cadmio, se puede observar que los adultos presentan una mayor

concentración que los juveniles. Esto estaría evidenciando un proceso de

bioacumulación con la talla, estimativo de la edad, en esta especie.

Merluza (Hembras adultas)

0.0

10.0

20.0

30.0

40.0

M ercurio 0.43 0.99

C admio 0.00 1.53

C inc 35.63 36.11

C o bre 5.23 5.06

M úsculo Hígado

Merluza (Machos adultos)

0.0

10.0

20.0

30.0

40.0

50.0

M ercurio 0.57 1.23

C admio 0.00 1.16

C inc 29.7 40.08

C o bre 4.80 3.78

M úsculo Hígado


Cuadro 14: Distribución de las concentraciones de metales pesados (µg/g ph) en músculo e hígado de juveniles y adultos de la merluza.

Cuando se comparan los sexos, solo en adultos, se encontraron

diferentes patrones de acuerdo al metal. En el caso de los metales no

esenciales, las concentraciones de mercurio en los machos fueron mayores

que las correspondientes a las hembras, mientras que en éstas últimas se

encontraron las más elevadas de cadmio. Esto podría deberse a dos factores,

la diferencia de alimentación entre ambos sexos o alguna condición particular

de cada sexo. En el primer caso, no hay evidencia de migraciones tróficas

diferenciales entre sexos como tampoco que las hembras preden sobre

diferentes ítems alimentarios que los machos (26). De esta manera, la dieta no

constituiría una razón para dicha diferencia. Quizás la respuesta a esta

situación esté relacionada con la puesta por parte de las hembras, la cual

Mercurio

0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

1,2

1,4

Con

cent

raci

ón (p

pm)

Músculo 0,08 0,57 0,43Hígado 0,83 1,23 0,99

Juveniles Machos Adultos Hembras Adultas

Cadmio

0,0

0,2

0,4

0,6

0,8

1,0

1,2

1,4

1,6

1,8

Con

cent

raci

ón (p

pm)

Músculo 0,00 0,00 0,00Hígado 0,77 1,16 1,53


Cinc

0,0

5,0

10,0

15,0

20,0

25,0

30,0

35,0

40,0

45,0

Con

cent

raci

ón (p

pm)

Músculo 22,44 29,7 35,63Hígado 29,16 40,08 36,11


Cobre

0,0

1,0

2,0

3,0

4,0

5,0

6,0C

once

ntra

ción

(ppm

)

Músculo 1,56 4,80 5,23Hígado 2,00 3,78 5,06



permitiría a las mismas eliminar mercurio bajo su forma metilada y así reducir

las concentraciones hepáticas. En el caso del cadmio, del cual no se conoce

bajo que especie(s) preferentemente se encuentra en los peces, estaría

imposibilitado de ser eliminado por la puesta.

En el caso de los metales esenciales, cobre y cinc, las mayores

concentraciones del primero se encontraron en músculo mientras que las de

cinc en el hígado. Nuevamente y para ambos metales, las hembras no

presentaron diferencias importantes entre ambos tejidos. Quizás los cambios

metabólicos que se producen en relación a la puesta también tengan una

influencia sobre estos metales esenciales, lo cual sería esperable por su

condición.

5.2. Corvina rubia

En esta especie también se pudieron analizar los contenidos

estomacales, dato que enriquece los resultados obtenidos y principalmente su

discusión. Permite inferir de alguna manera, el aporte dietario de los metales

bajo estudio.

La corvina rubia, especie de hábitos estuariales y con una distribución

costera, presentó diferentes concentraciones al compararla con la merluza. En

el caso de mercurio y cadmio los valores estuvieron dentro del mismo rango,

las de cinc fueron menores y las de cobre mayores que los datos obtenidos en

merluza. Esto se debe principalmente a los ítems que constituyen la dieta de

cada especie. La corvina es una especie que se alimenta de organismos del

fondo, los cuales se caracterizan por acumular metales (24,25,26), mientras

que la merluza es omnívora, se alimenta de una amplia variedad de especies

con distintas posiciones tróficas que la expone a diversos niveles de metales.

Por esta razón, no se han encontrado diferencias entre las concentraciones de

los metales no esenciales, ya que ambas tienen la posibilidad de incorporarlos

via alimento.

Para analizar cada estadio de la corvina en particular, se presenta en el

Cuadro 15 las concentraciones de los metales pesados estudiados en los

juveniles de corvina rubia (sin diferenciar sexos).


Cuadro 15: Concentración (µg/g ph) de los metales estudiados en ejemplares juveniles de corvina rubia.

Este estadio presentó la misma situación encontrada en merluza, donde

las concentraciones de cadmio fueron no detectables sólo en el músculo,

mientras que las más altas se encontraron en el contenido estomacal. Estas

elevadas concentraciones responden a la importancia que tienen los moluscos

y sedimentos en el tracto digestivo, acumuladores por excelencia de metales

pesados (25, 28,29). Este patrón de distribución de los metales estudiados

dentro de cada estadio también se presentó en los adultos de ambos sexos

(Cuadro 16).

Corvina (Juveniles)

0.0

5.0

10.0

15.0

20.0

25.0

M ercurio 0.18 0.90 1.36

C admio 0.00 0.21 2.70

C inc 15.64 18.65 23.07

C o bre 2.08 3.25 4.85

M úsculo Hígado C .Es to macal


Cuadro 16: Concentración (µg/g ph) de los metales estudiados en ejemplares juveniles de corvina rubia.

Al evaluar la situación dentro de cada metal (Cuadro 17) se encontraron

patrones de acumulación diferentes de acuerdo al sexo y al tejido/órgano

analizado, si bien es general el aumento de concentración de juvenil a adulto.

Corvina (Machos Adultos)

0.0

5.0

10.0

15.0

20.0

25.0

30.0

35.0

M ercurio 0.30 1.38 1.47

C admio 0.00 1.87 3.10

C inc 16.08 27.08 30.84

C o bre 2.66 4.10 3.99


Corvina (Hembras Adultas)

0.0

5.0

10.0

15.0

20.0

25.0

30.0

M ercurio 0.25 1.27 1.67

C admio 0.00 1.25 1.94

C inc 14.17 24.33 18.11

C o bre 3.11 4.68 5.33



Cuadro 17: Distribución de las concentraciones de metales pesados (µg/g ph) en músculo e hígado de juveniles y adultos de la merluza

En el caso del cinc dicho aumento es más evidente en el hígado y lo

mismo ocurre con el cobre, esto significa un ingreso dietario de estos metales

esenciales incrementando los niveles naturales de los mismos. Los metales no

esenciales también evidenciaron una acumulación en este tejido y en músculo

solamente mercurio y de manera atenuada.

En el contenido estomacal es donde se encontraron las concentraciones

más altas, lo cual evidencia un aporte directo de los cuatro metales, siendo

más elevadas que las encontradas en el hígado y el músculo. Con esta

evaluación podríamos decir que los metales estudiados no han manifestado

procesos de magnificación, ya que sus presas presentaban concentraciones

superiores.

Mercurio

0 . 0

0 . 5

1 . 0

1 . 5

2 . 0

Músc ulo 0.18 0.30 0.25

Hí gado 0.90 1.38 1.27

C .Est omac a l 1.36 1.47 1.67

J uv enile s Mac hos A dult os Hembras A dult as

Cadmio

0 . 0

1 . 0

2 . 0

3 . 0

4 . 0

Músc ulo 0.00 0.00 0.00

Hí gado 0.21 1.87 1.25

C .Est omac a l 2.70 3.10 1.94

J uv enile s Mac hos A dult os Hembras A dult as

Cinc

0 . 0

1 0 . 0

2 0 . 0

3 0 . 0

4 0 . 0

Músc ulo 15.64 16.08 14.17

Hí gado 18.65 27.08 24.33

C .Est oma c a l 23.07 30.84 18.11

J uv eniles Mac hos A dult osHembras

A dult as

Cobre

0 . 0

2 . 0

4 . 0

6 . 0

Músc ulo 2.08 2.66 3.11

Hí g a do 3.25 4.10 4.68

C .Est o ma c a l 4.85 3.99 5.33

J uv eni les Ma c ho s A dult os He mbra s A dult a s


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