Aislamiento y evaluación de la susceptibilidad

del protozoo Giardia lamblia a metronidazol, a

partir de heces humana en el municipio de

Armenia QuindíoSantiago Mora Martínez

PROGRAMA DE MEDICINA.

SEMILLERO de investigación en Microbiología y Biología Molecular

Contenido de la presentación

1. Introducción. 1. Marco teórico y planteamiento.

2. Justificación.

2. Objetivos1. General.

2. Especifico

3. Metodología.

4. Resultados 1. Discusión.

2. Conclusiones.

5. Bibliografía y agradecimientos.

Introducción Objetivos Metodología Resultados Bibliografía

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https://www.ride.org.mx/index.php/RIDE/article/view/18/76

Jean-François Millet, 'La muerte y el leñador', 1859

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https://microbiologia2.files.wordpress.com/2014/11/protozoa4.jpg

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metronidazol G. lamblia

PFOR

BRIS/ 83/

HEPU106-

2ID10

Nitroreductaza 1

Nitroreductoza

2

https://microbiologia2.files.wordpress.com/2014/11/protozoa4.jpg

Introducción Objetivos Metodología Resultados Bibliografía

General

Aislar, Identificar y evaluar a partir de muestras coprológicas humanas la susceptibilidad al metronidazol del protozoo G. lamblia.

Específicos

• Obtener aislados clínicos de G. lamblia.

• Estandarizar los requerimientos óptimos para el crecimiento in vitro de G. lamblia.

• Determinar la susceptibilidad de G. lamblia al antibiótico y antiparasitario metronidazol.

Ingredientes:

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Resultados: Miércoles nueve de agosto de 2017

Presentar los resultados de forma coherente clara, acorde con los objetivos.

Se pueden presentar en esta sección la discusión de los resultados y los impactos del proyecto.

Se presentan las conclusiones si las hay.

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Resultados: Miércoles nueve de agosto de 2017

Presentar los resultados de forma coherente clara, acorde con los objetivos.

Se pueden presentar en esta sección la discusión de los resultados y los impactos del proyecto.

Se presentan las conclusiones si las hay.

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Resultados Viernes 11 y sábado 12 de agosto de

2017:

• Los quistes fueron observados en un microscopio invertido sin

mostrar ninguna exquistación. Tras ello fueron almacenados.

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Resultados: Miércoles seis de septiembre de 2017

Se elaboró el siguiente protocolo con dos muestras obtenidas en pacientes con Giardia asintomáticos y sintomáticos, ambos niños:

1-Diluir la muestra 1:12 (v/v) en H2O destilada.2-Tomar 20 ml vortex 5 min. 3-Filtrar.4-5 ml del filtrado con 10 ml de sucrosa 1M en tubo de 50 ml.5-Centrifugar a 450 x g 5 minutos, tomar sobrenadante y almacenar.6-Diluir el sobrenadante en H20 a 50 ml y centrifugar a 450 xg por cinco minutos.7-Decantar y descartar el líquido. Resuspender el pellet en 2,5 ml de H2O.8-a 10 ml de sucrosa 0,5 m agregar los 2,5 ml de pellet resuspendido (en tubo de 15 ml).9-Centrifugar a 450xg por cinco minutos.10-Con una pipeta Pasteur, remover 1 ml del fondo del líquido y poner en un tubo de 15 ml.11-Examinar este material para la presencia de quistes de Giardia.12-Diluirlo a 10 ml con H2O y centrifugar a 450xg en cinco minutos.13-Resuspender el pellet y usar para el cultivo.14-Inactivar el suero fetal bovino a 56 grados centígrados por 30 min.

Se puso en la incubadora con un 95 % de CO2. Adaptando las condiciones ambientales para la G. lamblia.

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Resultados: Miércoles seis de septiembre de 2017

Se elaboró el siguiente protocolo con dos muestras obtenidas en pacientes con Giardia asintomáticos y sintomáticos, ambos niños:

1-Diluir la muestra 1:12 (v/v) en H2O destilada.2-Tomar 20 ml vortex 5 min. 3-Filtrar.4-5 ml del filtrado con 10 ml de sucrosa 1M en tubo de 50 ml.5-Centrifugar a 450 x g 5 minutos, tomar sobrenadante y almacenar.6-Diluir el sobrenadante en H20 a 50 ml y centrifugar a 450 xg por cinco minutos.7-Decantar y descartar el líquido. Resuspender el pellet en 2,5 ml de H2O.8-a 10 ml de sucrosa 0,5 m agregar los 2,5 ml de pellet resuspendido (en tubo de 15 ml).9-Centrifugar a 450xg por cinco minutos.10-Con una pipeta Pasteur, remover 1 ml del fondo del líquido y poner en un tubo de 15 ml.11-Examinar este material para la presencia de quistes de Giardia.12-Diluirlo a 10 ml con H2O y centrifugar a 450xg en cinco minutos.13-Resuspender el pellet y usar para el cultivo.14-Inactivar el suero fetal bovino a 56 grados centígrados por 30 min.

Se puso en la incubadora con un 95 % de CO2. Adaptando las condiciones ambientales para la G. lamblia.

Introducción Objetivos Metodología Resultados Bibliografía

Resultados: Miércoles seis de septiembre de 2017

Introducción Objetivos Metodología Resultados Bibliografía

Introducción Objetivos Metodología Resultados Bibliografía

• 1. Gilman RH, Marquis GS, Miranda E, et al: Rapid reinfection by Giardia lamblia after treatment in a hyperendemic Third World community. Lancet 1:343-345, 1988.

• 2. Granot E, Spira DT, Fraser D, et al: Immunologic response to infection with Giardia lamblia in children: Effect of different clinical settings. J Trop Pediatr 44:241-246, 1998

• 3. Lopez CE, Dykes AC, Juranek DD, et al: Waterborne giardiasis: A communitywide outbreak of disease and a high rate of asymptomatic infection. Am J Epidemiol v112:495-507, 1980

• 4. Marshall MM, Naumovitz D, Ortega Y, et al: Waterborne protozoan pathogens. Clin Microbiol Rev 10:67-85, 1997

• 5. Black RE, Dykes AC, Sinclair SP, et al: Giardiasis in day-care centers: Evidence of person-to-person transmission. Pediatrics60:486-491, 1977

• 6. Pickering LK, Woodward WE, DuPont HL, et al: Occurrence of Giardia lamblia in children in day care centers. J Pediatr 104:522-

• 526, 1984

• 7. Thompson SC: Giardia lamblia in children and the child care setting: A review of the literature. J Paediatr Child Health 30:202-209, 1994

• 8. Porter JD, Ragazzoni HP, Buchanon JD, et al: Giardia transmission in a swimming pool. Am J Public Health 78:659-662, 1988

• 9. Barbour AG, Nichols CR, Fukushima T: An outbreak of giardiasisin a group of campers. Am J Trop Med Hyg 25:384-389, 1976

• 10. Kappus KD, Lundgren RG Jr, Juranek DD, et al: Intestinal parasitism in the United States: Update on a continuing problem.Am J Trop Med Hyg 50:705-713, 1994

Discusión

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¡Gracias!