25.08.11quimica forense en la investigacion del delito

QUIMICA FORENSE EN LA INVESTIGACION DEL DELITO

QUIMICA FORENSE

EN LA INVESTIGACION

DEL DELITO


Myriam Antonia Fernndez Barrientos


MYRIAM ANTONIA FERNNDEZ BARRIENTOS

DEPARTAMENTO DE PUBLICACIONES POLICIA NACIONAL ASUNCIN PARAGUAY

AO 2006



QUIMICA FORENSE EN LA INVESTIGACION DEL DELITO Myriam Antonia Fernndez Barrientos Registro N 5644, Libro A, Foja 07. Direccin Nacional de Derecho de Autor Ministerio de Industria y Comercio Diseo, Dibujos, Compaginacin, Impresin y Encuadernacin: La autora y Personal Tcnico del Departamento de Publicaciones de la Polica Nacional. Fotografas, colaboracin de Oscar Migdonio Aguayo Viera, Perito en Accidentologa Vial y Documentologa Departamento de Publicaciones de la Polica Nacional Jefe: Ediciones: Imprenta: Direccin: FOTOCOPIAR ES DELITO. Todos los derechos son reservados. No se permite la reproduccin total o parcial de este libro, as como tampoco su incorporacin a un sistema informtico, ni su transmisin en cualquier forma o por cualquier medio, sea este electrnico, mecnico, por fotocopia, por grabacin u otros mtodos sin permiso escrito de la autora y el editor.



DEDICADO

A mis hijos Victor Manuel, Alejandro Rafael y Lucas Daniel.

por el tiempo cedido y la paciencia de esperar a mam; a ellos

como legado de esfuerzo y testimonio de superacin.

AGRADECIDA ETERNAMENTE

A mis padres Rafael y Juanita por sus

ejemplos, enseanzas y apoyo de siempre.

A mi esposo Arsenio, por su comprensin y apoyo

constante para alcanzar mis anhelos.

A mis compaeros y compaeras de la

Polica Nacional, por las experiencias compartidas;

que me fortalecieron profesionalmente.

Myriam Antonia



PROLOGO

Prologar un libro cientfico, sea tal vez, la ms difcil tarea que hasta la fecha me ha presentado la docencia, preferira corregir una pila de exmenes. Sin embargo lo que la Dra. Myriam Fernndez me pide con verdadera modestia, me llena no slo de satisfaccin y orgullo, por tratarse ella de una de mis primeras seguidoras en el mbito forense, sino que fundamentalmente, me coloca ante un gran compromiso: evaluar un trabajo que a simple vista refleja su gran

dedicacin y esmero y luego tener que presentarlo. La obra presenta un triple propsito, dirigida principalmente al estudiante de las Ciencias Criminalsticas, con el fin de proporcionarle los temas desde la perspectiva del peritaje qumico-legal; por otro lado al jurista, a quien proporciona informacin valiosa acerca de lo que el peritaje puede brindarle para extraer el mximo provecho a los medios de prueba y por ltimo a cualquier estudioso de las Ciencias Forenses ya que aborda con verdadera exhaustividad las ms variadas problemticas sobre los diferentes temas desarrollados, basados fundamentalmente en la experiencia de la autora y colaboradores. Se hace muy difcil destacar alguno de sus captulos en particular, pues en realidad todos estn relacionados directa o indirectamente con las llamadas Ciencias Penales; antes bien el conjunto constituye un inmejorable aporte a la investigacin cientfica del delito, expuesto con mucha calidad didctica, unido a un extremado rigor cientfico que caracterizan a su autora, quien me ha honrado, sin duda, al permitirme suscribir este breve prlogo.

Dra. Marta Oviedo de Duarte Catedrtica de Qumica Forense

Facultad Ciencias Qumicas U.N.A; U.C.A y UNINORTE



NDICE

DEDICATORIA Y AGRADECIMIENTOS................................Pg. 2

PROLOGO................ Pg. 3

INTRODUCCIN............................ Pg. 6

PARTE GENERAL

ASPECTOS LEGALES Y METODOLOGA GENERAL

CAPITULO I EJERCICIO LEGAL DEL PERITO QUMICO............................................... Pg. 8 CAPITULO II A. LUGAR DEL HECHO - TRABAJO DE CAMPO. Pg. 13 B. LABORATORIO FORENSE - METODOLOGA . Pg. 16

PARTE ESPECIAL

INDICIOS MS FRECUENTES. AREAS ESPECFICAS DE LA QUMICA FORENSE.

EL LABORATORIO Y LA TOXICOLOGA FORENSE.

CAPITULO I SANGRE............................................................................................................ Pg. 25 CAPITULO II SEMEN....................................................................................................................... Pg. 41

CAPTULO III PELOS......................................................................................................... ........................... Pg. 48

CAPTULO IV MATERIALES DIVERSOS........................................................................... ....................... Pg. 59

CAPTULO V PINTURAS............................................................................................................................ Pg. 72



CAPITULO VI A- QUMICA BALSTICA (RESIDUOS DEL DISPARO)............................................. Pg. 75 B EXPLOSIVOS.................................................................................................................... Pg. 84

CAPITULO VII QUMICA DOCUMENTOLGICA.................................................................................... Pg. 90

CAPITULO VIII QUMICA PAPILOSCOPICA........... Pg.109 CAPTULO IX EL LABORATORIO Y LA TOXICOLOGA FORENSE............. Pg. 118

ANEXOS 1. ADN EN EL CAMPO FORENSE................................. Pg. 131

2. DOCUMENTACIN E INFORMES TIPOS................................... Pg. 135 Solicitud de Pericia............ Pg. 136 Recepcin y Registro de Muestras............... Pg. 138 Acta Para Extraccin de Muestras. ............. Pg. 139 Informe Pericial (modelos varios)................ Pg. 140

BIBLIOGRAFA DE REFERENCIA.......Pg. 146



INTRODUCCIN

Es innegable que la Qumica Analtica, en la especialidad conocida como QUMICA FORENSE; se ha constituido en uno de los pilares fundamentales para el esclarecimiento de hechos delictivos. Su esencia como ciencia, y la aplicacin de mtodos y tcnicas analticas le permite aportar importantes datos sobre la naturaleza de indicios hallados en la escena de un delito o con relacin a l; determinar la presencia de sustancias especficas; establecer parmetros de identidad o individualizacin de personas, sirviendo adems de apoyo a las innumerables tcnicas de investigacin utilizadas en las disciplinas de Criminalstica, como ser Balstica Forense, Documentologa, Papiloscopa, etc. En el Paraguay, la vigencia de la Qumica Forense aplicada a la investigacin del delito, es relativamente nueva y se dieron sus albores con el LABORATORIO FORENSE de la Polica Nacional, inaugurado el 30 de agosto de 1989, de la mano de la Dra. Marta Oviedo de Duarte, a quin agradezco particularmente sus primeras enseanzas y l haberme guiado en esta rea tan profunda y fascinante de la qumica, que he abrazado con pasin profesional. Si bien es cierto que hemos comenzado y nos falta mucho an por recorrer y aprender; mi funcin como docente de la Facultad de Ciencias Qumicas (UNA), la Escuela Superior Politcnica de la Polica Nacional y de otras instituciones privadas, en las que trato de transmitir conocimientos y experiencias adquiridas en estos 15 aos de servicio en el Laboratorio de Criminalstica, me ha puesto en la necesidad y ms que nada ante un COMPROMISO; para con los alumnos y toda persona interesada en este campo, de elaborar para ellos un material bibliogrfico de apoyo; que sirva al colega qumico como gua de trabajo en el laboratorio y al mismo tiempo como fuente de consulta, con un lenguaje no muy tcnico y de fcil comprensin para los que no sean qumicos, pero que deseen conocer o aplicar en su labor profesional esta rama tan especfica de la qumica.



LA QUMICA FORENSE EN LA INVESTIGACIN DEL DELITO, es un material en el que he recopilado informacin de bibliografa extranjera sobre el tema, las que fueron y son nuestra fuente de consulta de siempre en el trabajo cotidiano del laboratorio. As mismo, me he permitido plasmar en l, experiencias propias, an con las limitaciones de nuestro medio; las que dieron paso a innovaciones y ajustes de tcnicas extranjeras, como fruto del trabajo y deseo de realizar estudios analticos que sirvan para aportar a los investigadores policiales el mayor nmero de datos posibles. Se incluye adems a ttulo de informacin un anexo; por gentileza y colaboracin de la Dra. Marta Oviedo de Duarte, que trata sobre la tan avanzada temtica del ADN aplicado en el campo forense. Es por tanto una satisfaccin personal; entregar este material, con el especial deseo de que sea provechoso y de utilidad para todas las personas interesadas en la Qumica Forense.

La autora

Asuncin, Marzo 2006



CAPTULO I PARTE GENERAL

EJERCICIO LEGAL DEL PERITO QUMICO

(BASADO EN EL CDIGO PROCESAL PENAL)

Si bien es cierto que el ejercicio profesional del qumico en el campo forense, no se halla an instaurado como gremio especfico y reconocido en nuestro pas; tal como es el caso los profesionales mdicos en ejercicio de la Medicina Forense; es si conocida la situacin de que a la fecha se cuenta con aproximadamente una veintena de profesionales qumicos, entre bioqumicos, ingenieros qumicos y analistas qumicos, que ejercen funciones profesionales en las distintas reas de la Divisin Criminalstica de la Polica Nacional, en el relativamente nuevo y difcil campo de la Qumica Forense, apoyando la tarea de investigadores policiales y judiciales.

La complejidad de los delitos de la actualidad, hace que este campo, da a

da se extienda, haciendo necesaria la concurrencia de otros qumicos sean estos de entes pblicos y/o privados. Tales situaciones hacen necesario que los profesionales qumicos, dispongan de su propio declogo y normativas bsicas para el Ejercicio Legal de sta rea en particular, lo que desde ya propongo como meta en conjunto a los queridos colegas qumicos, ya que en la actualidad nos ceimos al Declogo Mdico y sus principios bsicos de actuacin.

Sin embargo, la naturaleza de sta labor profesional y su alcance socio-

jurdico enmarcan, el ejercicio de ella en los principios bsicos de la PERICIA, contemplados en los artculos de la ley N 1286 Cdigo Procesal Penal- de la Repblica del Paraguay; sin olvidar lo regulado en el Cdigo Sanitario, en lo que respecta al ejercicio de la profesin del qumico.

As, en el LIBRO TERCERO (Primera Parte) del Cdigo Procesal Penal, que trata sobre los Medios de Prueba, en su Ttulo IV, define los artculos referentes a toda Pericia; la que en nuestro caso sera la PERICIA QUMICA; los artculos siguientes enuncian: Artculo 214. PERICIA. Se podr ordenar una pericia cuando para descubrir o valorar un elemento de prueba sea necesario poseer conocimientos especiales en alguna ciencia, arte o tcnica. La prueba pericial deber ser practicada por expertos imparciales, objetivos e independientes.



Artculo 215. CALIDAD HABILITANTE. Los Peritos debern ser expertos y tener ttulo habilitante en la materia relativa al punto sobre el que dictaminarn, siempre que la ciencia, arte o tcnica estn reglamentadas. En caso contrario deber designarse a persona idoneidad manifiesta. No regirn las reglas de la prueba pericial para quien declare sobre hechos o circunstancias que conoci directamente aunque para informar las aptitudes especiales que posee en una ciencia arte o tcnica. En este caso regirn las reglas de la prueba testimonial. Artculo 216. INCAPACIDAD. No podrn actuar como peritos:

1) quienes por insuficiencia o alteracin de sus facultades mentales, o por inmadurez, no comprendan el significado del acto;

2) quienes deban abstenerse de declarar como testigos; 3) quienes hayan sido testigos del hecho objeto del procedimiento; y 4) los inhabilitados

Artculo 217. ORDEN PARA LA PERICIA. Los peritos sern seleccionados y designados por el juez o por el Ministerio Pblico durante la etapa preparatoria, siempre que no se trate de un anticipo jurisdiccional de prueba. El nmero de peritos ser determinado segn la complejidad de las cuestiones a plantear, considerando las sugerencias de las partes. Se podr nombrar un solo perito cuando la cuestin no sea compleja. As mismo, se fijarn con precisin los temas de la pericia y el plazo para la presentacin de los dictmenes.

Artculo 218. NOTIFICACIN. Antes de comenzar las operaciones periciales el juez notificar a las partes la orden de practicar una pericia. Artculo 219. FACULTAD DE LAS PARTES. Dentro del plazo que establezca el juez, cualquiera de las partes podr proponer otro perito en reemplazo del ya designado, o para que dictamine conjuntamente con l, cuando las circunstancias particulares del caso, resulte conveniente su participacin, por su experiencia o idoneidad especial. Las partes podrn proponer fundadamente temas para la pericia y objetar los admitidos o propuestos por otra de las partes. Artculo 220. INHIBICIN Y RECUSACIN. Sern causas legales de inhibicin y recusacin de los peritos las establecidas para los jueces. Artculo 50. - Captulo IV - MOTIVOS DE EXCUSACIN Y RECUSACIN. Los motivos de separacin de los jueces sern los siguientes:



1) ser cnyuge, conviviente o pariente dentro del cuarto grado de consanguinidad o por adopcin, o segundo de afinidad, de alguna de las partes o de su representante legal o convencional;

2) ser acreedor, deudor o garante, l, su cnyuge o conviviente, de alguna de las partes, salvo cuando lo sea de las entidades del sector pblico, de las instituciones bancarias, financieras o aseguradoras. Habr lugar a la inhibicin o recusacin establecida en este numeral slo cuando conste el crdito por documento pblico o privado, reconocido o inscripto, con fecha anterior al inicio del procedimiento;

3) tener l, su cnyuge o conviviente, o sus parientes dentro de los grados expresados en el inciso 1 de ste artculo, procedimiento pendiente con alguna de las partes o haberlo tenido dentro de los dos aos precedentes si el procedimiento ha sido civil y dentro de los cinco aos si ha sido penal. No ser motivo de inhibicin ni de recusacin la demanda civil o la querella, que no sean anteriores al procedimiento penal que conoce;

4) tener inters personal en la causa por tratarse de sus negocios o de las personas mencionadas en el inciso 1;

5) ser contratante, donatario, empleador o socio de alguna de las partes; 6) haber intervenido anteriormente, de cualquier modo, o en otra funcin o en

otra instancia en la misma causa; 7) haber dictado una resolucin posteriormente anulada por un tribunal

superior; 8) haber intervenido en el procedimiento como parte, representante legal,

apoderado, defensor, perito o testigo; 9) haber sido condenado en costas, en virtud del procedimiento que conoce; 10) haber emitido opinin o consejo sobre el procedimiento que conste por

escrito o por cualquier medio de registro; 11) tener amistad que se manifieste por gran familiaridad o frecuencia de trato; 12) tener enemistad, odio o resentimiento que resulte de hechos conocidos; y 13) cualquier otra causa, fundada en motivos graves, que afecten su

imparcialidad o independencia. Artculo 221. CITACIN Y ACEPTACIN DEL CARGO. Los peritos sern citados en la misma forma que los testigos; tendrn el deber de comparecer y de desempear el cargo para el cual fueron designados. Si no son idneos, estn comprendidos en algunas de las incapacidades citadas, presentan un motivo que habilite su recusacin o sufran un impedimento grave, lo manifestarn al comparecer, acompaando los elementos de prueba necesarios para justificar su afirmacin



Artculo 222. EJECUCIN. El juez resolver todas las cuestiones que se planteen durante las operaciones periciales. Los peritos practicarn juntos el examen, siempre que sea posible; las partes y sus consultores tcnicos podrn asistir a l y solicitar las aclaraciones pertinentes, debiendo retirarse cuando los peritos comiencen la deliberacin. Si algn perito no concurre a realizar las operaciones periciales dentro del plazo otorgado, por negligencia, por alguna causa grave o simplemente desempea mal su funcin, el juez ordenar la sustitucin. Artculo 223. DICTAMEN PERICIAL. El dictamen ser fundado y contendr una relacin detallada de las operaciones practicadas y sus resultados, las observaciones de las partes o de sus consultores tcnicos y las conclusiones que se formulen respecto de cada tema estudiado, de manera clara y precisa. Los peritos podrn dictaminar por separado cuando exista diversidad de opiniones entre ellos. El dictamen se presentar por escrito firmado y fechado, sin perjuicio del informe oral en las audiencias. Artculo 224. PERITOS NUEVOS. Cuando los informes son dudosos, insuficientes o contradictorios, el juez o el Ministerio Pblico podr nombrar uno o ms peritos nuevos, segn la importancia del caso, para que lo examinen y amplen o, si es factible y necesario, realicen otra vez la pericia. De igual modo podrn actuar los peritos propuestos por las partes, cuando hayan sido nombrados despus de efectuada la pericia. Artculo 225. AUXILIO JUDICIAL. Se podr ordenar la presentacin o el secuestro de cosas y documentos, y la comparecencia de personas, si es necesario para llevar a cabo las operaciones periciales. Tambin se podr requerir al imputado y a otras personas que confeccionen un cuerpo de escritura, graben su voz o lleven a cabo operaciones semejantes. Cuando la operacin slo pueda ser ejecutada voluntariamente por la persona requerida y ella rehse colaborar, se dejar constancia de su negativa y se dispondr lo necesario para suplir esa falta de colaboracin.

LIBRO PRIMERO (Segunda Parte) del Cdigo Procesal Penal, en sus Ttulos I (Captulo IV Actos de Investigacin) y III (Captulo II Sustanciacin del Juicio)

Artculo 320. ANTICIPO JURISDICCIONAL DE PRUEBA. Cuando sea necesario practicar un reconocimiento, reconstruccin, inspeccin o pericia, que por su naturaleza y caractersticas deben ser considerados como actos definitivos e irreproducibles, o cuando deba recibirse una declaracin que, por algn obstculo



difcil de superar, se presuma que no podr hacerse durante el juicio, el Ministerio Pblico o cualquiera de las partes podr requerir al juez que lo realice. El juez practicar el acto, si lo considera admisible, citando a todas las partes, quienes tendrn derecho de asistir, con las facultades y obligaciones previstas por este cdigo. Si el juez rechaza el requerimiento, se podr acudir directamente al tribunal de apelacin, que deber resolver sin ms trmite y de inmediato, ordenando la realizacin del acto si lo considera admisible. Artculo 388. DICTAMEN PERICIAL. El presidente ordenar la lectura de los dictmenes periciales. Si los peritos han sido citados, respondern a las preguntas que les formulen las partes, los consultores tcnicos y los miembros del tribunal, en ese orden y comenzando por quienes ofrecieron el medio de prueba. Si es posible, el tribunal ordenar que se realicen las operaciones periciales en la audiencia. El perito tendr la facultad de consultar documentos, notas escritas y publicaciones durante su declaracin. Los artculos transcriptos del Cdigo Procesal Penal, normalizan la forma,

designacin de responsables y tiempo para la Pericia, a los efectos de que la misma sea considerada como prueba de valor; sin embargo es importante aclarar a los colegas qumicos, que el Ministerio Pblico muchas veces ofrece la Pericia Qumica o mejor dicho al Perito Qumico, durante el juicio oral y cuando no se ha cumplido con el art. 320 del Anticipo Jurisdiccional; en calidad de testigo, quien basar su testimonio en su pericia o informe como medio de prueba presentado.



CAPTULO II A PARTE GENERAL

LUGAR DEL HECHO (TRABAJO DE CAMPO)

La mayora de las veces el perito qumico recibir las muestras a las cuales dedicar su atencin profesional, en el laboratorio; pero es importante que el mismo conozca del trabajo bsico a realizar en el campo o lugar del hecho para la bsqueda y levantamiento de indicios a ser analizados posteriormente; ya que estas primeras acciones pueden aportarle valiosos datos a su trabajo analtico o, en el peor de los casos si no se han realizado correctamente los pasos bsicos pueden causarle serios inconvenientes. Puede adems, requerirse la presencia del Perito Qumico in situ, para levantar los posibles indicios o muestras testigos que l considere oportuno para sus estudios. A. METODOLOGA GENERAL DE INVESTIGACIN EN EL LUGAR DE LOS HECHOS

Bsicamente la importancia del lugar del hecho, y que da origen al llamado trabajo de campo, es el Principio de Intercambio de Indicios. Un indicio es definido como: Todo objeto, instrumento, huella, marca, rastro, seal o vestigio que se usa y/o se produce en la comisin de un hecho presuntamente delictuoso

El Principio de Intercambio de Indicios pregona que: No existe delincuente que a su paso por el lugar del hecho y en su contacto con la vctima, no deje tras de s o lleve consigo alguna huella aprovechable. Por lo tanto si no se recogen evidencias tiles, aunque sea en el largo plazo de una investigacin, probablemente ser por no haberlas sabido buscar.

En el lugar del hecho se aplican cinco pasos, sistemtica y cronolgicamente ordenados:

1) Proteccin del lugar de los hechos 2) Observacin del lugar 3) Fijacin del lugar 4) Coleccin de indicios 5) Suministro al laboratorio



1) Proteccin del lugar de los hechos: Antes de la intervencin del Ministerio Pblico, la Polica y de los peritos, se har la proteccin, acordonamiento o aislamiento del lugar, recordando seleccionar las reas por donde se caminar en el lugar de los hechos, para no alterar o borrar indicios y no tocar o mover nada, hasta que no haya sido fijado todo el lugar y lo que en l hubiere. 2) Observacin del lugar: Consiste primeramente en la observacin, directa y macroscpica del lugar de los hechos, atendiendo a todo lo que en l se encuentre. Est observacin tiene principalmente por objeto, la bsqueda y localizacin de indicios Una vez determinado los lugares y/u objetos que guardasen estrecha relacin con el hecho se puede continuar la observacin con fuentes luminosa especiales (luz blanca de alta potencia, ultravioleta, infrarroja, etc.) y/o elementos de aumento como la lupa a fin de examinar particularidades de los mismos. 2.1. Mtodos para la bsqueda y localizacin de indicios: 2.1.1. En lugares abiertos: Se dirige la vista de la periferia al centro, en forma de

espiral hasta llegar al centro del lugar de los hechos o viceversa. 2.1.2. En lugares cerrados: Se dirige la vista en forma paralela de muro a muro, o

de la periferia al centro, comenzando por la entrada principal, despus se sigue con los muros, muebles, escaleras y se concluye finalmente con el techo.

Tener siempre presente antes, durante la bsqueda y localizacin de indicios,

los siguientes aspectos: a) El tipo de hecho investigado; b) Los indicios encontrados y los que deberan encontrarse segn la forma y tipo

de hecho; as como c) La metodologa especfica para el tratamiento de los indicios, pues estos son

testigos mudos de la verdad.

Finalmente el xito en la localizacin de los indicios, depender bsicamente de la intuicin y capacidad de observacin del perito, as como de su criterio para seleccionar los verdaderamente importantes y tiles para el esclarecimiento del hecho investigado. 3) Fijacin del lugar: Rige para el lugar de los hechos y los indicios que guarden relacin con el hecho investigado. Se pueden utilizar las siguientes tcnicas: a) descripcin escrita, b) fotografa forense, c) planimetra forense, d) filmacin y e) moldeado.



4) Coleccin de indicios: Se realiza indefectiblemente una vez que el indicio se haya fijado, por al menos una de las tcnicas de fijacin arriba mencionadas. Se proceder para al levantamiento de ellos; aplicando la tcnica adecuada para cada indicio conforme a su naturaleza y estado en que se lo encuentre. La coleccin de indicios se efecta cumpliendo en orden y correctamente las siguientes acciones: 1. levantamiento, 2. embalaje y 3. etiquetado: en el que bsicamente se harn constar: el tipo de indicio, caso, lugar, hora, fecha y personal que lo levant.

5) Suministro de indicios al laboratorio: Se har conforme a las necesidades y sugerencias del perito criminalista, del investigador policial o fiscal. En cada caso; el indicio correctamente identificado deber estar acompaado de su pedido de pericia o anlisis; atendiendo al cumplimiento estricto de la CADENA DE CUSTODIA, normativa jurdica que tiene por objeto garantizar la integridad, conservacin e inalterabilidad de los indicios; desde el momento en que son encontrados en el lugar de los hechos, estudiados y analizados, hasta su presentacin en el juicio oral, como MEDIOS DE PRUEBA.

Para el cumplimiento de la cadena de custodia se recomienda: a) Labrar acta, en la misma se har constar: - El detalle de todos los indicios

coleccionados, - el lugar de su hallazgo, - el pedido de pericia, - el personal interviniente en el levantamiento, fecha y hora correspondientes con la firma de representantes del Ministerio Pblico, peritos y/o intervinientes, testigos y defensores si los hubiere.

b) Lacrar los contenedores de los indicios: Para ello existen recipientes con

precintas especiales que aseguran su apertura por nica vez. Una prctica frecuente para subsanar la falta de estos recipientes especiales es el uso de cintas de embalajes con papeles que contengan la firma de todas las personas que participaron del levantamiento, dispuestos de tal manera que aseguren una sola apertura.

c) Registrar por medio de actas, registro y archivo y/o notas de remisin, los

lugares y personas que tienen acceso a los indicios a ser estudiados y una vez estudiado. Estos lugares y personas debern ser los estrictamente necesarios y los habilitados jurdicamente.



CAPTULO II B PARTE GENERAL

METODOLOGA - LABORATORIO FORENSE

Es por todos conocido que la QUMICA; es la ciencia que se encarga del

estudio de la materia y las transformaciones que de ella se derivan. Este concepto amplio, justifica la utilizacin y aplicacin de la Qumica al estudio fsico qumico de indicios u objetos relacionados con la comisin de un hecho punible, en la bsqueda del esclarecimiento y justo juzgamiento del mismo, conocindose est rama de la qumica bajo el nombre de QUMICA FORENSE.

A. FINALIDAD DE LA QUMICA FORENSE Proporcionar al investigador, datos obtenidos a travs del anlisis de los

indicios que puedan orientar la investigacin. Estos datos ayudan a determinar el mecanismo del hecho o a establecer relaciones entre muestras, personas y/o lugares.

Aportar pruebas cientficas para el esclarecimiento del hecho punible

investigado; con resultados obtenidos en los diferentes trabajos periciales y en cumplimento del objeto de pericia.

B. OBJETIVOS GENERALES DE LA PERICIA EN UN LABORATORIO QUMICO FORENSE

Obtener resultados que certifiquen naturaleza de los indicios (sangre, orina,

pelos, etc.). Obtener resultados que establezcan semejanza o diferencia entre testigos

indubitados y los indicios (pelos, pintura, tinta, etc.). Investigar la presencia de sustancias especficas o grupos de ellas (drogas de

abuso, residuos del disparo, semen, alcohol, etc.). Los resultados obtenidos en su mayora tienen valor analtico de certeza,

aunque para la investigacin pueden resultar de carcter orientativo.



C. MTODOS UTILIZADOS

El avance tecnolgico de hoy da permite la utilizacin de un sin nmero de

mtodos con aparatos simples, hasta los de muy alta sofisticacin. Entre los utilizados ms utilizados en nuestro medio, se pueden citar: Fsicos: Basados en la observacin y determinacin de propiedades fsicas

como el peso, color, forma, tamao, puntos de fusin, ebullicin, etc. Qumicos: Involucran reacciones qumicas de todo tipo, que responden a las

propiedades qumicas de la materia; siendo las ms comunes las reacciones colorimtricas, enzimticas y de formacin de cristales.

Inmunolgicos: De gran utilidad en la identificacin de sustancias, mediante

la tpica reaccin antgeno-anticuerpo (cada antgeno reacciona con su anticuerpo especfico). En este mtodo de hace mencin a la variedad de tcnicas aplicables con el fundamento ms arriba mencionado, como ser el RIA (Radio-inmuno-ensayo), que utiliza anticuerpos marcados con radioactividad.

Combinados: La utilizacin de tcnicas especficas de anlisis con mtodos

combinados, resulta de gran utilidad en la investigacin rpida de sustancias particulares, por ejemplo en la investigacin de drogas de abuso en orina por inmunocromatografa.

Instrumentales: Se hace referencia de algunos de los mtodos

instrumentales aplicados en nuestro medio, con la salvedad de que toda la tecnologa al servicio de la ciencia puede utilizarse en el campo forense, por lo que abordarlos todos en este material no ser el objetivo. - pticos: Desde la utilizacin de la lupa simple hasta los diferentes

microscopios, pasando por el microscopio Standard, el de comparacin forense, y el de barrido electrnico.

- Cromatogrficos: Incluye los diferentes cromatgrafos, HPLC, de gas, y las combinaciones de stos para aumentar su especificidad y sensibilidad como la del cromatgrafo gaseoso con detector FID.

- Espectrofotometra: Basados en la medicin del espectro de luz o emisin de energa caracterstica para cada sustancia, segn la tcnica especfica de dicha medicin; entre los ms comunes: -Espectrofotometra Ultravioleta Visible, Espectrofotometra de Absorcin Atmica.



Finalmente es importante mencionar que la metodologa general para el estudio de los indicios se basa en la COMPARACIN, por lo que se deduce que deben disponerse de dos tipos de muestras como mnimo, en este contexto, hablamos de:

Testigo, Patrn o Indubitado: cuando se trata de una muestra de naturaleza

conocida o inequvoca, por lo que servir de Standard o control. Indicio, material, muestra o dubitado: Es la sustancia, materia u objeto

levantado con relacin al hecho investigado, de cuya naturaleza no se tiene certeza.

Diferencia entre indicio y evidencia, en nuestro vocabulario jurdico policial paraguayo:

Indicio: Seal o indicacin de algo en particular.

Evidencia: Indicio que una vez estudiado, cuya naturaleza ha sido comprobada; y en caso de establecer su relacin con los hechos, se convierte en Prueba.

D. MUESTRAS PARA ESTUDIO

En general cualquier objeto o sustancia puede ser importante en el esclarecimiento de un hecho, la decisin sobre la importancia de stos quedar a cargo de la objetividad pericial y criterio de asociacin del perito, como ya se mencionara. A efectos de englobar los mismos en un listado, se establece una clasificacin de acuerdo a su naturaleza.

Fsicos: Armas de todo tipo (blancas, de fuego, contundentes, etc.), pigmentos

(pintura, tintas etc.), papel, vidrio, prendas de vestir, etc. Qumicos: Sustancias qumicas en general, medicamentos, drogas de abuso,

polvos, lquidos, etc. Biolgicos: Fluidos biolgicos que provengan de seres vivos o cadveres

(humor vtreo, semen, saliva, leche, sangre, orina, heces, calostro, meconio, unto sebceo, etc.) y tejidos en general (huesos, pelos, piel, etc.). Se incluyen tambin aqu, los materiales provenientes de otros animales y de los seres del reino vegetal. Los fluidos pueden presentarse de dos formas: - Seca o mancha: Entindase por mancha toda modificacin de una superficie,

sea por alteracin de color o por depsito de sustancia extraa a la misma.



- Lquida: Cuando se encuentra los fluidos en su forma natural o tal como se los encuentra en el ser vivo.

E. BSQUEDA Y LOCALIZACIN DE INDICIOS

A ms de utilizar las tcnicas generales de bsqueda de indicios en el lugar del hecho (descritas en el captulo anterior), resulta de gran utilidad; sobre todo en el laboratorio el uso de elementos auxiliares de magnificencia como lupas o lmparas de luz blanca potente o las de diferentes longitudes de onda, entre ellas la luz ultravioleta o lmpara de Wood, ya que ante stas, muchas sustancias pueden reaccionar con una fluorescencia particular, que si bien no tiene carcter identificatorio, la diferencia de fluorescencia con el resto del soporte ayuda a localizar la zona de mayor probabilidad de encontrar un determinado indicio F. CUIDADOS GENERALES CON LOS INDICIOS

Dada la naturaleza qumica o biolgica de los indicios, el manipuleo de los mismos debe ser cuidadoso, a fin de: - resguardar la salud del personal y evitar contaminaciones con materiales forneos que conduzcan a resultados errneos de laboratorio. Por lo tanto, aplicar las siguientes normas en el lugar de los hechos o en el laboratorio es de vital importancia:

Utilizar los elementos bsicos de bioseguridad: guardapolvos, guantes de

ltex con o sin proteccin de malla metlica, gafas, cofia y zapatos especiales.

Fijar los indicios por mtodos adecuados. Examinar el cadver, o los indicios utilizando guantes y/o pinzas con las

puntas envueltas en algodn si fuese necesario. Anotar los detalles relacionados al o los indicios como ser cantidad, forma,

tamao, etc. Levantar cada indicio, segn la tcnica adecuada al tipo, estado en que se

encuentran y al objeto de la pericia a solicitar. Embalar cada indicio por separado y segn tcnica apropiada. Rotular los indicios levantados, anotando fecha, hora, caso, vctima, lugar

del levantamiento y personal interviniente. Si se tratan de indicios fsicos que contengan otros de naturaleza biolgica,

antes de embalarlos deben ser secados al aire libre, sin exponerlos al sol, como por ejemplo en el caso prendas de vestir.



Si se trata de sangre, orina u otros indicios biolgicos en su estado natural, es imprescindible su refrigeracin antes y durante su remisin al laboratorio, si la misma va exceder 1 hora

Si los indicios biolgicos sern transportados largas distancias, cuidar el punto anterior referente a prendas y en caso de sangre, orina, vsceras, etc., enviarlas en frasco de boca ancha, preferentemente de vidrio, con tapa sellada y sin el agregado de ningn conservante, colocndolos luego en un recipiente trmico con hielo.

Remitir al laboratorio con el correspondiente pedido de pericia y la atencin de la cadena de custodia.

G. SOLICITUD DE PERICIA

La solicitud de pericia es el punto de inicio para el trabajo del perito, pues en ella se har constar el objeto especfico de la pericia y por lo tanto ser la que demarque el contexto del trabajo qumico pericial. Es importante distinguir y asentar en ella las siguientes partes: Datos generales: - Relacionados al hecho investigado (vctima, victimario, fecha,

hora, lugar, etc.) y el solicitante de la pericia con sus datos personales que n caso de ser una figura pblica como por ejemplo el Ministerio Pblico, bastar con la identificacin pertinente.

Detalle de indicios: En este punto, se hace referencia a los objetos y/o

materiales remitidos, que sern el objeto de la pericia, detallando brevemente sus caractersticas fsicas

Objeto de la pericia: Puntualizar especficamente lo que se requiere de la pericia

qumica forense. Distinguir claramente diferentes objetivos aunque se traten de una misma muestra. La definicin del objeto de pericia se har conforme a la naturaleza de las muestras, y su importancia para el hecho investigado.

Otros datos de inters: En los que se refieren situaciones particulares que

pueden resultar de inters para la orientacin del trabajo de laboratorio y posterior cotejo de resultados, como ser: - circunstancias del hecho, caractersticas sintomatolgicas observadas en personas vivas o muertas de quienes se hayan colectado muestras (estado de nimo depresivo o excitado, coloraciones especficas de la piel, etc.)



H. EL PERITAJE DE LOS INDICIOS

La pericia qumica se inicia cuando el personal que proceder al anlisis, recibe la muestra, (RECORDAR QUE TODA LA DOCUMENTACIN DE INGRESO O RECEPCIN AL LABORATORIO DEBE REALIZARSE CORRECTA Y EFICIENTEMENTE A FIN DE CUMPLIR CON EL RGIMEN DE LA CADENA DE CUSTODIA). El trabajo de peritaje qumico forense se puede resumir en los siguientes pasos:

Descripcin detallada del indicio o muestra para estudio. Dejar constancia del

color, olor, tamao, volumen, dimensiones y seas particulares (como logotipos de marcas, diseos, adherencias, manchas con sus caractersticas propias, orificios, desgarraduras, etc.) indicando la posicin exacta de ellas en el soporte investigado.

Identificacin de la porcin o parte del indicio que ser sometido a estudio. Tomar una parte de la muestra, dejando: - Una porcin para eventuales

repeticiones o confirmacin interna de resultados (lo que significa utilizacin de la muestra a corto plazo), y - otra porcin, para un eventual contra peritaje, siempre y cuando el medio del laboratorio lo permita, pues como la mayora de las muestras son de carcter biolgico (por ejemplo viseras, sangre lquida, vmitos etc.), para guardarlas es necesario contar con un refrigerador especial, tipo freezer. Resulta algo ms fcil guardar prendas que contengan fluidos corporales como sangre, semen, orina u otros, pues basta con secarlas segn las indicaciones realizadas en el punto anterior, y guardarlas en su totalidad o solamente una pequea porcin.

Preparar la muestra para el estudio correspondiente. Las preparaciones bsicas,

sin entrar en tcnicas o procedimientos especficos, comprenden: -Macerado, que consiste en colocar una porcin de soporte que contenga una determinada mancha o depsito de sustancia, en una alcuota de solucin salina, que no deber ser excesiva para no diluir la muestra en demasa. Del macerado resultante se puede proceder al centrifugado cuando se trata de buscar clulas en el pellet obtenido o trabajar con el sobrenadante.

- Montaje, sobre lminas para observar la muestra al microscopio, este montaje puede ser directo, con colorantes u otros, segn la muestra y estudio a realizar. Es el caso de pelos, fibras, vegetales y otros.

-Contacto y Extraccin, con solventes orgnicos a partir de muestras biolgicas en las que se realizarn investigacin de txicos, o fsicas como en el caso de tintas y pinturas.



Aplicar las tcnicas y procedimientos especficos a las preparaciones

correspondientes o sobre el material directo conforme a la solicitud de pericia qumica requerida y en el marco del hecho investigado.

Siempre que sea posible, guardar todos los indicios estudiados, incluyendo los

soportes sobre los cuales se encontraban las muestras; cuidar de que tengan la identificacin respectiva y utilizar bolsas con presillas o sobres de papel. El sobrante de los macerados estudiados puede guardarse seco, sobre trozos de tela de algodn blanca, seca y esterilizada; los extractos con solventes pueden guardarse en frasquitos de vidrio con tapa hermtica.

Confrontar los resultados, haciendo relacin con el hecho investigado, agotar

todas las medidas de confirmacin. Elaborar el informe laboratorial.

I. INFORME LABORATORIAL

El informe laboratorial, es la presentacin final de los resultados obtenidos y confrontados. Para su elaboracin es importante tener en cuenta, que la mayora de las veces, este informe est dirigido a profesionales y personas no relacionadas con las ciencias qumicas. Por ello es necesario que l mismo sea: - Claro: al exponer los resultados obtenidos; - Concreto: para responder especficamente sobre los puntos de pericia; y - Conciso: para no divagar la atencin de la persona que tratar de entender y extraer datos de su inters, por ejemplo, no extremar los detalles de una descripcin, no explayarse sobre mtodos y tcnicas utilizadas pues esto ms bien confunde al tener tanto vocabulario y fundamentos tcnicos.

Bsicamente el informe debe contener los siguientes puntos:

Datos generales: Para la identificacin del hecho o la causa investigada, a los

fines de facilitar la entrega y recepcin del informe al lugar de su destino, sobre todo cuando se tratan de causas y hechos de intervencin pblica.

Indicios recibidos: Detalle de todo lo recibido para la pericia, asegurando

adems de sta manera, la cadena de Custodia. Muestras para estudio: Identificar claramente la porcin o parte del indicio que

ser sometido a anlisis, designando para ello, nomenclaturas especficas.



Objeto de la pericia: Transcribir el objeto de pericia que motivo el anlisis de los

indicios, para dejar claramente asentado, a qu se dio respuesta analtica. Estudios realizados y resultados obtenidos: En este punto se asientan los

estudios realizados (si fue observacin, reaccin qumica, determinacin de peso, cromatografa, etc.), haciendo referencia del mtodo y/o tcnica utilizada, de tal manera que se puedan interpretar el valor analtico, el valor pericial para la investigacin y/o las limitaciones de ellos. En cada estudio mencionado, se har constar el resultado obtenido.

Conclusiones: En las conclusiones, se dar respuesta a las interrogantes u

objeto de pericia, relacionando los resultados obtenidos con las interrogantes especficas.

J. VALOR DEL ANALISIS

Obviamente que la tarea del qumico es realizar el anlisis y quedar en manos de la justicia dar una valoracin de los dictmenes periciales, en el marco jurdico de un hecho investigado. Sin embargo es importante aclarar los diferentes valores a los que se puede hacer referencia en el contexto de una pericia qumica. Valor legal: Se refiere al valor otorgado por los procedimientos procesales

legales, que marcan las normas jurdicas, tal como se hiciera mencin en el captulo I -. Parte General de ste material.

Valor analtico: Es el valor otorgado por la tcnica de anlisis utilizada. Valor pericial: Es el valor de apreciacin en relacin al tipo de hecho investigado.

Los dos ltimos valores mencionados pueden ser de carcter: - orientativo

(cuando los resultados obtenidos no dan una relacin de identidad, naturaleza especfica) o certeza (cuando los resultados obtenidos determinan una identidad, naturaleza especfica o establece una relacin inequvoca con el tipo de hecho investigado.

A modo de ejemplo, la determinacin de plomo (con la tcnica utilizada por

la autora) en la investigacin de los residuos del disparo, tiene un valor analtico de certeza porque identifica plenamente a ste metal, pero sin embargo tiene una valor pericial de orientacin puesto que el metal no exclusivamente puede provenir del mixto fulminante o iniciador del fenmeno del disparo.



CAPTULO I PARTE ESPECIAL

SANGRE

La sangre es un tejido lquido, caracterstico de los animales vertebrados, cuya principal funcin en ellos, es el transporte de oxgeno y de los nutrientes a todo el organismo.

Est constituida por una parte lquida, llamada plasma sanguneo y una parte slida; formada por las clulas sanguneas, las que se diferencian en: Glbulos rojos, hemates eritrocitos: son las clulas que se encuentran en

mayor cantidad, de 3.000.000 a 5.000.000 por milmetro cbico de sangre, las mismas contienen en su interior varias sustancias, siendo la principal de ellas el pigmento que da el color rojo a la sangre, llamado hemoglobina.

Glbulos blancos o leucocitos: son las clulas cuya principal funcin es la defensa del organismo frente a invasores como bacterias, virus u otras partculas extraas, existen cinco tipos diferentes: neutrfilos, linfocitos, monocitos, eosinfilos y basfilos los mismos se encuentran al alrededor de 5.000 a 10.000 por milmetro cbico de sangre.

Plaquetas: son minsculos discos formados de sustancias qumicas que actan en la coagulacin de la sangre y en la oclusin de roturas de los vasos sanguneos.

El examen pericial de sangre asiste a la investigacin de un hecho punible

de la siguiente manera: - Localizando la escena del crimen: al identificar el mismo tipo de sangre de la

vctima en un lugar determinado. - Para descubrir un delito: al identificar sangre humana en la acera, un balcn,

en un vehculo, etc., pues es el primer indicio de que un hecho violento se ha cometido.

- Puede identificar el arma utilizada: la sangre encontrada en un bastn, cuchillo o un martillo puede ser considerada de valor evidenciario.

- Puede probar o desmentir la coartada de un sospechoso: la identificacin de sangre humana en un objeto que pertenece a un sospechoso y alega que la sangre en el objeto pertenece a un animal, desmiente su coartada.

- Orienta a la eliminacin de sospechosos: al determinar que la sangre encontrada en un objeto pertenece al sospechoso, y no a la vctima.



1. MUESTRAS PARA ESTUDIO DE SANGRE 1.1. PRESENTACIN DE LAS MUESTRAS DE SANGRE

Las muestras de sangre pueden encontrarse en el lugar del hecho, sobre prendas de vestir y de cama, en el cadver o soportes varios; en diferentes formas: a) Lquidas: Cuando la sangre se encuentra an en su estado natural, su color es rojo vivo si procede de las arterias o rojo oscuro cuando es venosa. Puede ser hallada as en heridas recientes de vctimas con lesiones de tipo cortante, perforante, punzante, contuso-cortantes, que hayan afectado grandes vasos sanguneos, igual en cadveres recientes con las mimas lesiones, o en lugares prximos a ellos, siempre que se llegue al lugar del hecho en forma inmediata. b) Parcialmente lquidas: Cuando la sangre se halla parcialmente coagulada, encontrndose una parte slida (cogulo) y una parte lquida, con la coloracin caracterstica segn su procedencia ms arriba citada. Puede ser hallada en este estado, en lugares en donde hubo mucho derramamiento de sangre, y ha transcurrido un cierto tiempo (horas) o en prendas que han tenido contacto con mucha prdida de sangre, o en las heridas de la vctima. c) Coaguladas: Cuando la sangre ya ha coagulado por completo y solo es posible distinguir el coagulo sanguneo, generalmente ya de un color rojo ms oscuro por los cambios cromticos producidos a consecuencia de la exposicin de la hemoglobina al aire. Se encuentra as en las grandes heridas, ropas en contacto con mucha sangre y lugares en donde hubieron gran derramamiento de sangre. La coagulacin se inicia dentro los 3 a 5 minutos del inicio del derramamiento de sangre, pero se deben considerar el tiempo que debe transcurrir para que toda la cantidad de sangre derramada coagule, y los siguientes factores: tipo de vasos sanguneos lesionados, nmero de heridas, signos de vida entre otros. d) Seca o Mancha: Es importante recordar el concepto del trmino mancha-, desde el punto de vista forense como: Toda modificacin de color, depsito o adherencia de material extrao, sobre un soporte determinado. En el caso de la sangre, cuando sta se encuentra totalmente seca y se deposita sobre soportes absorbentes deja una sensacin tctil de almidonado y color marrn achocolatado; si el soporte es no absorbente la mancha seca se deposita en forma de costras de color marrn, fcilmente desprendibles. La coloracin en ambos casos puede pasar desapercibida cuando el soporte es oscuro.



1.2. BSQUEDA Y LOCALIZACIN La bsqueda de muestras posibles de sangre se debe focalizar en: a) El cadver, y en su entorno inmediato (prendas de vestir) y mediato (lugar del

hecho y alrededor). b) El lugar del hecho inmediato (centro de la escena del crimen) y todo objeto que

en l se encuentre y en el lugar del hecho mediato (zona de los alrededores de la escena del crimen).

c) El sospechoso o victimario: Teniendo en cuenta su entorno inmediato (prendas de vestir del momento) y entorno mediato (pertenencias y domicilio).

Utilizar la tcnica de la inspeccin ocular macroscpica, con luz artificial variando el ngulo de incidencia, buscando la coloracin caracterstica de cada caso y la palpacin de soportes absorbentes. Es recomendable tambin la utilizacin de la lmpara de Wood o luz ultravioleta, sobre todo cuando se trata de inspeccionar soportes de color oscuro. Un caso extremo, sobre todo cuando existen referencias de que las muestras pudiesen haber sido lavadas, es utilizar el reactivo luminol (3- amino-ftalhidracina), que ante la presencia de sangre reacciona con fluorescencia lilcea y no interfiere en posteriores reacciones analticas. (Ver foto al final del captulo) 1.3. DATOS OBTENIDOS DE LAS MUESTRAS Las caractersticas que presentan las muestras de sangre pueden aportar datos de inters para la investigacin, por lo que el perito qumico no debe desentenderse de la observacin de los aspectos morfolgicos de ellas, estos aspectos son: Color: El color observado en las muestras puede orientar sobre: a) El Origen: - La sangre arterial es roja y brillante, sale a chorro y es impulsada a cierta distancia. - La sangre venosa es ms oscura, de aspecto ms denso y sale en forma de baba acumulndose cerca de la vctima, formando charcos o regueros. b) El tiempo transcurrido: entre el hecho y el hallazgo de las muestras, aunque esto no resulte muy exacto considerando que las mismas estn sujetas a condiciones climticas y de conservacin, el color rojo indica que el hecho es reciente (horas), luego a medida que el tiempo transcurre la muestra va oscurecindose, pasando por las diversas tonalidades del marrn, hasta llegar a un color verdoso si la mancha no se conserva en buen estado, lo que es entonces signo de putrefaccin o



descomposicin de la misma, este proceso indica que ha transcurrido un tiempo considerable (das). Forma, dimensiones y otros datos: Las formas ms comunes que suelen observarse son: a) Charco: gran volumen de sangre producido por cada desde un foco inmvil, prximo a la vctima. b) Chorro: salpicaduras proyectadas por arteria. c) Escurrimientos: formados por regueros y rebabas, indican desplazamiento de la fuente que origina la sangre que sigue siempre la ley de la gravedad, pueden indicar cambio en la posicin final o lugar del cadver; desplazamiento de la vctima moribunda. d) Salpicaduras: Cuando la sangre cae a una superficie, desde una cierta altura, da lugar a: - Gotas Circulares : cuando la cada es perpendicular al suelo, y a medida que aumenta la altura el dimetro de la gota es superior y sus bordes festoneados o con denticulaciones hasta llegar a pequeas gotas satlites; - Signo ortogrfico de admiracin : en sentido de la direccin del movimiento cuando la cada es oblicua, el mayor o menor alargamiento depender del ngulo de incidencia, la velocidad de proyeccin y el volumen de la sangre; - Gota en movimiento : cuando la sangre es proyectada en movimiento tiene forma de signo de admiracin con la ventaja de que indican el sentido del movimiento, la punta de la mancha corresponde al extremo adelantado; - Gotas mltiples : pueden indicar que ha habido un mecanismo de accin muy violento que motiva una proyeccin considerable de sangre a alta velocidad. En el punto del estudio de estas salpicaduras, es posible tambin obtener otros datos de inters, como ser la determinacin del punto de convergencia de las gotas que determina el lugar desde donde han sido proyectadas. (Ver N 1, 2, 3, 4 fotos al final del captulo) Cantidad: La cantidad hallada en el lugar del hecho puede orientar: a) Sobre el nmero de personas intervinientes en la comisin del hecho y el modo en que ocurri el mismo; observando el nmero de heridas en la vctima y su relacin con la cantidad y distribucin de las muestras de sangre halladas en el lugar; b) Respecto al lugar del hecho y el hallazgo del cadver; relacionando la cantidad de sangre encontrada en la escena del crimen y el nmero o posicin de la o las heridas en la vctima y su entorno mediato. 1.4. LEVANTAMIENTO Y TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS El manejo de muestras sanguneas se rige por las condiciones generales del tratamiento de indicios, extremando al mximo los cuidados requeridos por tratarse de un indicio biolgico. El levantamiento de ellas, est sujeto a dos factores: a) La forma o estado en que se encuentran y b) El objeto de pericia o estudio a solicitar de las mismas.



La tcnica correcta de levantamiento, se aplicar segn la forma en que se

encuentran las muestras. En el cuadro siguiente, se describen las diferentes tcnicas de levantamiento.

1.5. OBJETO DE LA PERICIA QUMICA FORENSE

Conforme a la presentacin de las posibles muestras de sangre en el lugar del hecho; en el cuadro siguiente, se establecen los objetos de la pericia qumica.

Presentacin Tcnica de levantamiento Objeto de pericia

LIQ

UID

AS

LQ

UID

AS

A. Extraccin desde el interior del cuerpo, por distintos medios de puncin (cardiaca, venosa, arterial) (Ver foto N 6 al final del captulo)

Alcoholemia: 2 a 3 ml, con o sin anticoagulante (segn tcnica analtica disponible) Txicos: 10 ml preferentemente sin anticoagulante, en caso de necesidad se recomienda el fluoruro de sodio. Tipificacin: 1 ml, preferentemente con anticoagulante tipo E.D.T.A

B. Levantamiento desde el interior del cuerpo o del lugar, con jeringas, goteros o pipetas tipo Pasteur. (Ver foto N 5 al final del captulo)

Naturaleza, especie y tipificacin: 1 ml con suero fisiolgico.

PA

RC

IAL

ME

NT

E

LIQ

UID

AS

Se colecta la parte de la sangre entera todava lquida o el cogulo mismo, por medio de una pipeta, gotero o esptula, colocndolos en tubos de ensayo limpios y secos. Agregar suero fisiolgico doblando el volumen de la muestra para evitar que se seque.

Naturaleza, especie y tipificacin *Resulta intil la investigacin de alcohol y txicos en este tipo de muestras, pues no se tiene certeza de: el tiempo transcurrido, ni las condiciones de conservacin de ellas.



Presentacin Tcnica de levantamiento Objeto de pericia

CO

AG

UL

AD

AS

Colectar el cogulo y guardarlo en un tubo de ensayo limpio y seco. Agregar suero fisiolgico para mantenerlo fresco.

Naturaleza, especie y

tipificacin.

SE

CA

O M

AN

CH

A

1. RASPADO: de muestras depositadas sobre soportes no absorbentes de superficie lisa, mediante algn instrumento con filo, tipo bistur o lanceta. Las escaras obtenidas se colocan en tubos limpios y secos o sobres de papel.

2. FROTACIN: de la mancha con hisopo, embebido en suero fisiolgico depositada en soportes absorbentes de superficie porosa y no absorvente *En circunstancias extremas pueden utilizarse agua de canilla, pozo o lluvia, reemplazando inclusive el hisopo por gasa o tela de algodn, preferentemente sin color. (Ver foto N 7 al final del captulo)

3. CORTE: de la muestra en casos en que el soporte sea de traslado dificultoso. Solicitar la autorizacin pertinente y prever el corte de un blanco (porcin del mismo soporte libre de mancha). Tener en cuenta que es mejor remitir el soporte en su totalidad para profundizar en detalles.

4. REMISION: siempre que sea factible, remitir las muestras sobre el soporte original ntegro, lo que permitir realizar observaciones de inters.

Naturaleza, especie y

tipificacin.

PR

EN

DA

S

DE

VE

ST

IR

O D

E

CA

MA

Remitir las prendas, preferentemente en bolsas de papel. Si la remisin no va a ser inmediata proceder al secado de las mismas al aire libre, NO al sol.

Naturaleza,

especie y tipificacin.



2. ESTUDIOS REALIZADOS A LAS MUESTRAS Y PROCEDIMIENTO ANALITICO

2.1. DIAGNSTICO GENRICO (Determinacin de la naturaleza): Aunque la muestra en estudio sea de naturaleza inminentemente sangunea, es necesario realizar su diagnstico genrico par darle un valor legal y excluir aquellas que siendo muy similares a la sangre no lo son. En este sentido es posible realizar dos grupos de reacciones: 2.1.1. Reacciones de Orientacin o de Campo: Son aquellas reacciones que pueden realizarse inclusive en el lugar del hecho. Necesitan poca cantidad de muestra, son rpidas y econmicas, sin necesidad de instrumental sofisticado, ni conocimientos profundos de la qumica para su interpretacin. Sin embargo carecen de especificidad por lo que su valor analtico es de orientacin, aunque el valor pericial de las mismas est en que sirven para descartar muestras cuando la reaccin de stas, arroja resultado negativo. Constituyen un grupo de reacciones qumicas de coloracin, que buscan las peroxidadas de la sangre, la falta de especificidad radica en que stas mismas enzimas se encuentran presentes en los jugos de ciertas frutas y otras secreciones biolgicas como pus; inclusive agentes fuertemente oxidantes como el cobre y sus sales pueden arrojar resultados falsos positivos.

Procedimiento Analtico: Colocar sobre la muestra (directa o macerado) una gota de los reactivos en el orden indicado, esperar la reaccin no ms de 2 minutos, pasado este tiempo toda aparicin de color no tendr significado vlido alguno.

Reactivos ms comnmente utilizados

Reactivo Reaccin Esperada o Positiva

Muestra + (1 gota) agua Oxigenada al 3 % + (1 gota) de reactivo A: 2 gr. de fenolftalena + 30 gr de potasa anhidra + 100 cc de agua destilada + 20 gr de polvo de zinc. Sensibilidad 1:1.000.000 (Reaccin de Kastle-Meyer)

Color fucsia



Reactivo Reaccin Esperada o Positiva

Muestra + (1 gota) de reactivo: 1 gr. de leucoverde de malaquita disuelto en 100 cc de cido actico + 150 cc de agua destilada. Sensibilidad 1:1.500.000 (Reaccin de Medinger

Color verde azulado

(1 gota) Luminol + Muestra Sensibilidad 1:5.000.000

Aparicin fugaz de fluorescencia lilcea, persistente cuando se pulveriza sobre una superficie y se ilumina con luz

ultravioleta (Ver foto N 8 al final del captulo)

1 cc de macerado de la muestra + 1 cc de tintura de guayaco + gotas de esencia de trementina. Sensibilidad 1:20.000 (Reaccin de Van Deen)

Color verde plido que vira al azul

Agua oxigenada + muestra Se producen burbujas

Accin del Amonaco La solucin sangunea no se altera, pero si no lo es aparecen

coloraciones diversas. 2.1.2. Reacciones de Confirmacin o de Certeza: Son reacciones basadas en mtodos fsicos, qumicos e instrumentales, que tiene por objeto confirmar la existencia de sangre, al evidenciar componentes especficos y exclusivos de la misma. Necesitan de conocimientos ms profundos, manejo de materiales y equipos de laboratorio. Algunos de los mtodos aplicables son: Mtodo ptico (Tcnicas microscpicas): Consiste en la observacin directa de los macerados de las manchas obtenidas por raspado, frotacin en caso de que la mancha sea reciente, e inclusive hilos de los tejidos, en la bsqueda de los elementos celulares de la sangre. Los preparados pueden teirse o no, con las clsicas tinciones de Giemsa o May Grnwald - Giemsa.

Procedimiento analtico: Preparar el macerado de la muestra, cogulo, lquido o porciones de 1 cm2 de prendas u otros con solucin salina, evitando diluir la muestra en exceso. Colocar una a dos gotas del macerado sobre lminas y observar al microscopio.



Mtodo Qumico (Tcnicas microcristalogrficas): Fundadas en la formacin de cristales, derivados de la hemoglobina en reaccin con reactivos qumicos especficos, como cristales de Clorhidrato de hematina o Teichman: obtenidos por reaccin en caliente del macerado con cido actico glacial, en presencia de una sal halogenada en este caso cloro. Si se utiliza una sal de bromo, o yodo, se formarn los correspondientes cristales de bromhidrato o yodhidrato de hematina.

Procedimiento Analtico: - Cristales de Teichman 1. Macerar la mancha en agua hasta obtener una solucin visiblemente coloreada 2. Concentrar el macerado gota a gota sobre un portaobjetos colocado sobre

plancha caliente a 60 C. Evitar el calentamiento excesivo. 3. Cubrir con cubreobjeto y aadir por capilaridad unas gotas de cido actico

glacial. 4. Calentar el preparado a la llama hasta que se inicie la formacin de burbujas,

retirar dejar enfriar y aadir de nuevo gotas de cido actico glacial. 5. Repetir la maniobra por lo menos tres veces. Observar al microscopio los

cristales en forma de prismas alargados aislados o agrupados de color amarillo o pardo

- Cristales de Yodhidrato de hematina: Utiliza la misma tcnica pero en vez de cido actico utilizar el siguiente reactivo (Acido yohdrico (2 a 3 gotas), Acido actico glacial (1cc), Alcohol de 95 (1 cc), Agua destilada (1cc). Se observar en caso positivo cristales rombodricos de color castao, tendiendo a negro. - Cristales de bromhidrato de hematina: El procedimiento es similar a los anteriores, se introduce solucin bromurada entre el porta y cubre objeto y se calienta sin llegar a la ebullicin y agregar una solucin en partes iguales de alcohol, cido actico, glacial y dejar evaporar. En caso positivo se observar cristales similares a los de Teichman pero de mayor tamao y color rojo ms oscuro. - Cristales de Hemocromgeno: Obtenidos por reaccin del macerado de la muestra frente el reactivo de TAKAYAMA (Hidrxido de sodio al 10 % -3 ml -, Solucin saturada de glucosa 3 ml -, Piridina 3ml- y agua destilada 10 ml -. La tcnica es similar a la descrita anteriormente y los cristales obtenidos en caso positivo son romboidales, a veces fusiformes o en forma de hojas de helecho, pero todos de un color rosa intenso o rojo anaranjado caracterstico.



Mtodos Fsico Qumicos (Tcnicas cromatogrficas): Se procede a la identificacin de la hemoglobina por corrida cromatogrfica, en placa delgada.

Procedimiento Analtico: Se realiza la corrida cromatogrfica en papel Whatman N 1 o sobre capa fina de silicagel, utilizando: -un macerado de sangre hemolizada como testigo, -como solvente: Metanol, cido Actico y Agua, en la proporcin 90:3:7 y como revelador: -Primero, una solucin actica de bencidina, (no debe aparecer coloracin alguna); luego de unos minutos pulverizar con una solucin al 3 % de agua oxigenada, de reciente preparacin. La hemoglobina testigo aparecer de color azul, confrontar la coloracin con la mancha en estudio y la relacin de frente que deber ser la misma.

Mtodo Instrumental (Tcnicas Espectroscpicas): Se puede tambin identificar la sangre a travs del espectro de absorcin de la hemoglobina y de alguno de sus derivados, pues como es sabido, la longitud de onda y la intensidad de las bandas de absorcin de los espectros respectivos caracterizan las sustancias. Los principales espectros a investigar son los de la Oxihemoglobina, Hemoglobina, carboxihemoglobina, Hematina alcalina y Hemocromgeno. 2.2. DIAGNSTICO ESPECFICO (Determinacin de la Especie):

Confirmada la naturaleza sangunea de la mancha, se podr con el diagnstico especfico establecer si la sangre es humana o no lo es. Varios son los mtodos y tcnicas que pueden ser aplicadas para responder esta interrogante pericial. Mtodo inmunolgico, basado en la tpica reaccin antgeno-anticuerpo. - Antgeno: Es toda sustancia que introducida en un organismo vivo origina anticuerpos.

- Anticuerpo: Es la sustancia producida por el organismo vivo, en respuesta al antgeno y que reacciona exclusivamente con

l. Por lo que basta conocer uno de ellos para identificar al otro.

a) Tcnica de inhibicin de la antiglobulina humana: Se aplica la reaccin de Coombs, a las manchas de sangre, para demostrar la presencia de anticuerpos bloqueantes. La no aglutinacin indica sangre humana. Fundamento: Los hemates O Rh POSITIVO, sensibilizados con los anticuerpos bloqueantes (Anti-D), se aglutinan al aadirles suero antiglobulina humana o suero de Coombs, pero si este anticuerpo se ha puesto en contacto antes con una protena humana ha agotado su capacidad de reaccin y ya no es capaz de aglutinar a los hemates.



Procedimiento Analtico: I) Tcnica para Sensibilizacin de Hemates O Rh POSITIVOS: 1. Lavar los glbulos rojos O Rh POSITIVOS, (se puede utilizar un pool), con solucin salina hasta obtener sobrenadante lmpido. 2. Tomar 0,5 ml de paquete globular lavado y diluir con 1ml de Anti-D (1:4 en solucin salina), llevar a Bao Mara por una hora. 3. Lavar la solucin anterior, tres veces con solucin salina. 4. Diluir los glbulos rojos sensibilizados, al 5 % en solucin salina. II) Tcnica de Inhibicin de la Antiglobulina Humana: 1. Colocar 4 gotas del macerado (en solucin salina) de la muestra a analizar, agregar 1 gota de suero de Coombs 1:4 (en solucin salina). 2. Incubar en Bao Mara de 37C por 30 minutos. 3. Agregar 1 gota de glbulos rojos sensibilizados al 5% y volver a incubar a BM 37C por 15 minutos. 4. Centrifugar 2 minutos a 1000 r.p.m. y leer los resultados. GR AGLUTINADOS= Test de Coombs Positivo, se interpreta como ausencia de Globulina Humana GR NO ALUTINADOS= Test de Coombs Negativo, se interpreta como presencia de Globulina Humana, que indica presencia de sangre humana. Recomendacin: Hacer controles de reaccin, utilizando: - Solo GR sensibilizados como blanco, -sangre humana y sangre animal conocidos.

b) Test de Outcherlony: Se utiliza una placa de vidrio cubierta de agar-gel en solucin salina o, en tampn veronal en solucin salina ms unas gotas de mertiolate. Se realizan en la misma unos hoyos para que contengan el anticuerpo y los antgenos (antgeno problema y los sueros de control: sueros de animal y extracto del soporte no manchado). Si se produce una correspondencia antgeno: anticuerpo se detecta una precipitacin entre el hoyo que contiene el problema y el del antisuero humano.

Con stas tcnicas inmunolgicas se diferencia la sangre humana de la animal; tambin es factible hacer la diferenciacin del gnero animal, utilizando los antisueros especficos (bovino, equino, vacuno, etc.), lo que constituira de mucha utilidad, como dato o prueba cientfica en hechos de abigeato. Mtodo ptico: Consiste en la observacin directa de la mancha, en la bsqueda

de las clulas propias de la sangre, las que por su morfologa y tamao caractersticos aportarn datos identificatorios. En referencia se acota que, en



los mamferos los hemates carecen de ncleo y se establecen diferencia de tamao entre las diferentes especies, en las aves, reptiles y batracios son nucleados y de forma elptica.

2.3. DIAGNOSTICO INDIVIDUAL (Determinacin del Grupo Sanguneo):

Confirmado el origen humano de la muestra sangunea, la etapa final de un anlisis de rutina de sangre, en un laboratorio forense o criminalstico, consiste en individualizar dicha muestra para establecer la relacin entre los protagonistas y el hecho. Aunque considerando a vctimas y victimarios, si existe similitud de grupo sanguneo entre ellos no se podrn establecer conclusiones ni nexos valederos.

La individualizacin e identificacin de una mancha de sangre, puede hacerse aplicando los siguientes mtodos: Mtodo Inmunolgico: Varios son los aglutingenos de la sangre de una persona, que permiten la clasificacin de ellos en los diferentes sistemas. El sistema ABO, universalmente conocido es el de mayor utilidad a la hora de buscar estos aglutingenos en sangre fresca y en manchas sanguneas, dada su mayor estabilidad. -Aglutingenos: Son protenas presentes en las membranas de los hemates y son los que determinan el grupo sanguneo de

las personas.

-Aglutinina: Son los anticuerpos que existen en el plasma de las personas, distintos a los aglutingenos presentes en sus

hemates.

a) Tipificacin Directa: El mtodo habitual para la determinacin del grupo sanguneo es aplicable a muestras de sangre lquidas, parcialmente coaguladas y/o el cogulo fresco.

Procedimiento Analtico: Es por todos los profesionales bioqumicos y tcnicos de laboratorio clnico, el procedimiento especfico a realizar y que consiste en el agregado de una gota de antisuero (A, B) respectivamente a una gota de la muestra problema; la interpretacin del grupo O se har por descarte y la

reaccin a observar es la aglutinacin. Segn el siguiente esquema: Anti A Anti B Resultado aglutina no aglutina Grupo A no aglutina aglutina Grupo B aglutina aglutina Grupo AB no aglutina no aglutina Grupo O



En esta determinacin se puede, con el mismo procedimiento y el antisuero

correspondiente (Anti D) investigar el Factor Rhesus (Rh). b) Tcnica de Absorcin Elusin: De mayor prctica por la autora y sus colaboradores. Consiste en la identificacin de los aglutingenos presentes en la mancha, con los respectivos antisueros (A, B, H*), empleando hemates testigos (portadores de aglutingenos conocidos), para la lectura final, tras la ruptura del complejo realizada a 56 Celsius. Por cuestiones de disponibilidad, en la rutina del trabajo, la interpretacin del grupo O se hace tambin por descarte, y la

interpretacin igual que en la tabla ms arriba descrita.

Procedimiento Analtico: 1) Colocar en dos tubos marcados A y B respectivamente, telas manchadas con el macerado de la muestra sangunea a analizar. 2) Adicionar a cada tubo dos a tres gotas de solucin salina fisiolgica fra (4C) y una gota de antisuero A y B respectivamente a los tubos marcados. 3) Dejar en reposo los tubos durante 10 a 12 horas en frigorfico. 4) Retirar la solucin salina y el exceso de antisuero, lavar la mancha de los tubos con solucin salina fra por cinco a seis veces, dejando reposar cada lavado por 20 minutos en el frigorfico. 5) Despus del ltimo lavado retirar toda la solucin salina. 6) Aadir nuevamente solucin salina fra de dos a tres gotas. 7) Colocar los tubos a Bao mara de 56 C, durante 15 minutos, agitando de tanto en tanto. En este paso se rompe la unin antgeno-anticuerpo que pudiera establecerse durante el paso 3ro. 8) Sacar el soporte de la mancha (tela) de los tubos. 9) Agregar a cada tubo, una gota de solucin al 5 % de glbulos rojos A y B en solucin salina, a cada tubo respectivo y dejar en el refrigerador por espacio de 1 hora. 10) Sacar los tubos de la heladera y centrifugar a 1500 r.p.m. por espacio de tres minutos. 11) Observar los resultados de aglutinacin directamente y al microscopio. La interpretacin es la misma que en la tcnica directa.

Esta tcnica es aplicable a los aglutingenos (*) de los dems sistemas;

disponiendo de los antisueros respectivos; pero considerando la mayor fragilidad de esos antgenos, el sistema ABO es de utilidad difundida en el campo forense. (*) No todos los sistemas pueden ser utilizados en el campo forense, debido a la extremada fragilidad de algunos.



Mtodos Bioqumicos: Consisten en tcnicas aplicables a la bsqueda de protenas polimorfas especficas que existen en una determinada especie, as como de isoenzimas (protenas enzimticas que cumplen funciones de regulacin en los diferentes procesos bioqumicos de los organismos.) 3. LIMITACIONES DE LA PERICIA DE SANGRE Con la sola pericia de sangre, no se puede determinar lo siguiente: Tiempo de exposicin de la mancha de sangre Raza de la persona de quien proviene la sangre No es posible identificar si la sangre proviene de un individuo especfico. (**) (**) Estudios genticos del ADN, permitirn identificar especficamente a un individuo.



FOTOS CAPITULO I - SANGRE

FOTO N 1: Chorro, salpicaduras producidas FOTO N 2: Gota circular (derecha) por lesin de arterias Movimiento de la fuente de sangre

FOTO N 3: Mltiples gotas y gotas en forma de FOTO N 4: Determinacin del punto de Signo de admiracin convergencia



FOTO N 5: Levantamiento con pipeta Pasteur FOTO N 6: Extraccin por punsin venosa

FOTO N 7: Tcnica de frotacin para manchas en soportes no absorbente



a. b.

FOTO N 8: a. Manchas lavadas, no visibles a simple vista b. Manchas visibles por accin del reactivo luminol



CAPTULO II PARTE ESPECIAL

SEMEN

Llamado tambin esperma o lquido seminal, es el producto de secrecin del aparato genital masculino, que aparece en el hombre despus de la madurez sexual.

Recin emitido, es un lquido filante, cremoso, de color opalino que tiende a

amarillo verdoso y de olor caracterstico. Est compuesto por los espermatozoides que son las clulas del semen, y el plasma seminal, que constituye el lquido en el cual se mueven los espermatozoides (de 200 a 400 millones en una eyaculacin normal); el plasma seminal contiene diversas sustancias que se hallan disueltas en l, como electrolitos, glucosa, urea, etc., y algunas de ellas en cantidades importantes como la enzima fosfatasa cida, otras sustancias fosforadas como la espermina y la colina, entre otras que resultan tiles para la investigacin de semen como veremos ms adelante.

El semen es un elemento probatorio decisivo en los delitos contra la libertad

sexual de las personas y su hallazgo: - En la vagina, es un dato confirmado para establecer diagnstico de cpula,

facilitando luego la tipificacin del hecho. - En manchas encontradas en la ropa de la vctima pueden ayudar a corroborar

la acusacin.

1. MUESTRAS PARA ESTUDIO 1.1. CARACTERSTICAS Muestras depositadas sobre soportes varios, sospechosos de contener semen, presentan ciertas caractersticas, segn la naturaleza del soporte que las contenga. a) Si el soporte es absorbente, las manchas se presenta de un color grisceo- amarillento, y si el soporte es flexible como en el caso de las telas, estas se vuelven acartonadas o apergaminadas al tacto.



b) En soportes no absorbentes o impermeables, cuando la superficie es: - Rugosa: el semen al secarse, deja costras o escamas ms o menos grandes de color blanquecino transparente; - Lisa: El esperma se extiende en una mancha grande, delgada, transparente y poco visible sobre fondo oscuro. 1.2. BSQUEDA Y LOCALIZACIN En hechos punibles que atentan contra la autonoma sexual de las personas, se buscarn las muestras, a ms de en la vctima, sobre los ms diversos tipos de soportes hallados en el lugar de los hechos, como por ejemplo, alfombras, prendas de vestir, ropas de cama, tapizados, pisos, etc. La localizacin de muestras, se facilitar utilizando luz ultravioleta sobre superficies varias del lugar del hecho; cuando estas superficies son examinadas bajo la accin de ella y siempre que no sean de fondo fosforescente, es posible observar que muestras sospechosas fluorescen ante esta luz, con una fluorescencia amarillo verdosa; que aunque no resulta especfica, ayuda a seleccionar las zonas para estudio. En tanto que en la vctima, comnmente se localiza en su forma lquida en la cavidad vaginal o anal, aunque pueden tambin ser localizadas en otras partes del cuerpo, como la boca buscando en la mucosa gingival y yugal, o localizarlas en forma de mancha blanquecina, principalmente en la regin pbica y cara interna de los muslos. 1.3. LEVANTAMIENTO Y TRATAMIENTO Las muestras se recogen de acuerdo a como se las encuentran y el lugar de su localizacin, atendiendo tambin a los cuidados generales del tratamiento de los indicios, as entonces: a) En el caso de soportes flexibles y absorbentes: como prendas de vestir, ropas de cama, toallas, etc.; es preferible remitir las mismas como tal y en caso de que ellas se encuentren hmedas, secarlas en corriente de aire sin exponerlas al sol, si el soporte es muy grande y no puede ser transportado hasta el laboratorio, se recomienda (previa autorizacin pertinente) remitir un corte de por lo menos 4 cm2, de la parte afectada y otra de la no afectada con las mismas dimensiones. b) Si el soporte es no absorbente: se proceder a levantar las caractersticas escamas, por medio de la tcnica del raspado, colectando las mismas en tubos de ensayo limpios.



c) En el caso de extraccin de muestras a vctimas de delitos sexuales: sta debe ser realizada por personal idneo, utilizando para ello preferentemente hisopos secos y estriles. Si el material deber ser sometido posteriormente a estudio gentico, es preferible tomar dos muestras y colocar los hisopos una vez seco, cada uno por separado en un tubo limpio, seco y estril. Pueden tambin ser tiles, lminas de vidrio con extendidos de exudados vaginales o anales. Cuando se trata de tomar muestras de otras partes del cuerpo, utilizar un hisopo embebido en solucin salina y proceder a frotar la mcula. 1.4. OBJETIVOS DE LA PERICIA QUMICA FORENSE

Los objetivos del anlisis de stas muestras, podrn ser los siguientes:

a) Investigar la presencia de semen. b) Determinar especie de la muestra.

2. ESTUDIOS REALIZADOS A LAS MUESTRAS Y PROCEDIMIENTO ANALTICO

Cuando las muestras se encuentran secas o sobre soportes absorbentes, se proceder a la maceracin o extraccin del soporte. Se sugieren como mtodos de extraccin: a) Maceracin simple con solucin salina. b) Destruccin del soporte con cido sulfrico al 80 % (destruye el soporte pero no los espermatozoides). 2.1. DIAGNSTICO GENRICO (Para determinar naturaleza):

En la investigacin de la presencia de semen, es necesario confirmar su naturaleza. Para ello se pueden emplear, los siguientes mtodos: Mtodo ptico: El hallazgo de al menos un espermatozoide, otorga un valor analtico de certeza absoluta para naturaleza; la muestra se trata de semen, pues ste es el nico fluido que los contiene. En cuanto al valor pericial, estar sujeto al tipo de hecho investigado, sin embargo cabe consignar que el hallazgo del espermatozoide es signo de eyaculacin, pero no con lleva a que sta, se halle relacionada con un acto violento.



Procedimiento analtico: Colocar una gota del macerado de las muestras sobre lmina, cubrir con cubre objetos y observar al microscopio (x10 y x45). Los preparados pueden ser directos o sometido a previa tincin con Hematoxilina-eosina, azul de metileno, eritrosina amoniacal, etc. Se puede tambin concentrar la cantidad de espermatozoides sobre todo en macerados provenientes de prendas y otros soportes, centrifugando el mismo para observar el pellet al microscopio. En caso de muestras contaminadas con hongos, resulta de gran utilidad la tincin con Anaranjado de Acridina, pues los hongos ricos en ARN fluorescen de color rojo ante la luz ultravioleta del microscopio, en tanto que las cabezas sueltas de espermatozoides ricas en ADN, fluorescen con coloracin amarillo verdosa

Por otro lado la imposibilidad de visualizar un espermatozoide, no significa

que en la muestra no se encuentre semen, pues esta circunstancia puede deberse a causas clnicas del supuesto autor, como ser: - la azoospermia en donde el semen eyaculado carece de espermatozoides, por enfermedades congnitas o adquiridas e incluso una vasectoma y - la oligospermia, cuando el semen eyaculado contiene menos nmero de espermatozoides que lo normal. Tambin puede influir para el hallazgo de espermatozoides; la higienizacin de la vctima, el tiempo transcurrido entre la toma de muestra y el hecho, as como los espermatozoides destruidos: por deshidratacin de la muestra. La alternativa para todos estos casos descritos es el hallazgo de sustancias disueltas en el plasma seminal, centrando la bsqueda en aquellas que caractericen de algn modo al semen. Se describen a continuacin los mtodos utilizados ms frecuentemente por la autora y colaboradores. Mtodos qumicos: Basados en la bsqueda de los componentes del plasma seminal, mediante reacciones de tipo enzimticas y de formacin de cristales. a) Reacciones Enzimticas: Consiste en la identificacin de la fosfatasa cida del plasma seminal, cuya concentracin en l, es de 40 a 400 veces ms que en otros lquidos biolgicos. El valor analtico de certeza para la prueba, se lograra cuando se cuantifica la reaccin, a razn de la concentracin de fosfatasa ms arriba citada. Un anlisis cualitativo no implica certeza de naturaleza. A modo de informacin, se conoce que existen tcnicas complejas aplicables tambin al estudio de la espermina y la colina.



Procedimiento Analtico: Utilizar el macerado en solucin salina de las muestras en estudio. Seguir la tcnica analtica correspondiente a reactivos disponibles en el mercado, y basados en su mayora en la medicin de la actividad de dicha enzima sobre un sustrato que contiene fsforo.

b) Reacciones Microcristalogrficas: Basadas en la obtencin de cristales especficos de las bases colina y espermina, componentes del plasma seminal, que se originan con los reactivos cido pcrico e Yoduro, obtenindose cristales de picrato de espermina e yoduro de colina, con formas y coloracin caractersticas. Actualmente es una tcnica poco utilizada, debido a la gran variedad de muestras distintas al semen que contienen en su composicin las mencionadas bases.

Procedimiento Analtico: La reaccin se realiza sobre lmina de vidrio. 1. Colocar una gota del macerado. 2. Cubrir con cubre objeto. 3. Agregar el reactivo especfico (*) para cada caso entre lmina y cubre objetos

para que corra por capilaridad. 4. Observar al microscopio. 5. Ver cuadro de referencia relativo a las caractersticas de los cristales a observar.

Reactivo Se forman cristales de: Son sus caractersticas: Florence: Yodo metlico (2,54 g) Yoduro de potasio (1,56 g) Agua destilada (30 ml)

Yoduro de colina

Lminas romboidales de color pardo

Barberio: Solucin saturada de cido pcrico.

Picrato de espermina

Cristales fusiformes, refringentes de color amarillo.

Se mencionan tambin otras tcnicas que resultan, de mayor especificidad, pero poco accesibles en nuestro medio; ellas se basan en la bsqueda de sustancias especficas del plasma seminal: - Determinacin de la Protena P30, (Protena exclusiva del semen) que puede ser aislada por mtodos electroforticos, y la - Determinacin de PAS (Antgeno Prosttico Especfico), en su mayora por mtodos inmunolgicos combinados; ste ltimo es segregado por la prstata en el comnmente conocido como lquido lubricante, por lo que su hallazgo resulta an positivo en aquellos atentados en los que no se ha llegado a la cpula o eyaculacin.



2.2. DIAGNSTICO ESPECFICO (Para determinar especie)

La mayora de las veces no es un problema del investigador determinar la especie a la que pertenece una muestra de semen, pero en caso de tal necesidad la respuesta analtica estar en aplicar los siguientes mtodos: Mtodo ptico: En la misma metodologa ms arriba descrita, es imprescindible ahora detenernos en la morfologa y dimensiones de los espermatozoides, ya que existen diferencias entre los espermatozoides del espcimen macho de cada especie animal. Se consigna una tcnica basada en la tincin de los espermatozoides que permite diferenciar espermatozoides de distintas especies animales entre s y del humano, los colorantes utilizados son la doble coloracin de azul de metileno-eosina y hematoxilina-eosina, obtenindose as la diferencia en las zonas de tincin en cuanto a las partes del espermatozoide, a lo que podemos sumar las diferencias morfolgicas y dimensionales propias de cada especie.

Procedimiento Analtico: Coloracin con Hematoxilina eosina. 1. Realizar un preparado para microscopa. 2. Cubrir con hematoxilina eosina por 5 a 10 minutos y luego lavar con agua

destilada. 3. Cubrir con eosina durante 1 minuto y lavar la preparacin con agua corriente.

Algunos ejemplos son:

Forma del espermatozoide

Dimensiones Caractersticas observadas con hematoxilina eosina

Hombre

Longitud total: 40 a 50 micrones. Espesor de la cabeza: 4 micrones

Cabeza prpura intenso en la base, apenas oval, no se observa el cuello.

Perro

Longitud total: 60 micrones. Espesor de la cabeza: 4 micrones

Cabeza con escasa diferenciacin de sus zonas, no es visible el cuello.

Gato

Longitud total: 50 micrones. Espesor de la cabeza: 3 micrones

Cabeza en forma de bala, con pequea zona nuclear l

25.08.11quimica forense en la investigacion del delito

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