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Laboratorio de Microbiologa I- Materiales de Laboratorio: Reconocimiento, Utilidad y Limpieza

I.- OBJETIVOS Que el alumno conozca parte del material necesario en un laboratorio de microbiologa y parasitologa. Que el alumno aprenda a manejar el material utilizado en un laboratorio de microbiologa y parasitologa.

II.- MARCO TEORICOAlgunos de los instrumentos ms utilizados en los laboratorios, son elaborados de vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dixido de silicio, bajo lcali, xido brico y vestigios de otros xidos, lo que condiciona su escaso coeficiente de dilatacin, teniendo una gran aplicacin en la fabricacin de materiales de laboratorio, uno de los mas conocidos es .el vidrio PYREX. As como los elaborados de distintos metales pesados como platino,' mercurio, aluminio, cobre que les otorgan caractersticas como buenos conductores del calor o por que al medio ambiente son muy manejables sin alterar su composicin.

Instrumentos de vidrio como la probeta, la pipeta o el tubo de ensayo, y otros como el mechero Bunsen, son de los ms comunes en la mayora de los laboratorios cientficos.


MATERIAL DE VIDRIO

Constituye una de las principales herramientas para los fines que se persigue en el laboratorio. Los requisitos necesarios para que un material sea un "buen material", son: 1. Ser de buena calidad; es decir que no sean fcil de quebrarse. 2. Ser de color neutro. 3. Poseer resistencia a las acciones mecnicas y a las variaciones de temperatura as como tambin a los lcali-libre (no se raje). 4. Poseer bajo coeficiente de dilatacin (que no pierda su forma). Tubos de Ensayo: Se emplean como recipientes de medios de cultivo. Tubos de prueba Deben ser de vidrio neutro, paredes gruesas y equilibradas, de preferencia sin rebordes para facilitar el taponamiento. De 16 x 150 mm De 15 x 125 mm De 13 x 100 mm para estudio de fermentacin trabajos mecnicos De 10 x 75 mm pruebas, estudios serologicos. Tubos de Roux Con escotadura de 4 cm. de fondo, de 25 x 200 mm para Tubos de centrfuga De vidrio, pueden ser cnicos o cilndricos, siempre de paredes gruesas, De paredes gruesas, por estar inmersos rotando a alta velocidad. De polietileno, se utiliza para centrifugaciones a altas velocidades, de medidas semejantes a los anteriores.

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Cpsulas o Placas Petri: Cajas cilndricas, se emplean como recipientes de medios de cultivo para el cultivo y aislamiento de microorganismos. Las ms usadas son las de 10, 15 20 mm x 100 mm.

Cultivos bacterianos Colonias de bacterias Escherichia coli (ms grande, rosa) y Proteus vulgaris (ms pequea, de color castao) que crecen juntas en una placa Petri. En circunstancias normales estas bacterias son inofensivas y habitan en el intestino humano favoreciendo la digestin, si bien pueden convertirse en patgenas y producir infecciones del tracto urinario. Los cientficos y mdicos llevan a cabo cultivos bacterianos y estudian sus caractersticas con el fin de adquirir conocimientos respecto a las enfermedades bacterianas y su prevencin. Placas Brewer: Para el cultivo y aislamiento de microorganismos anaerbicos. Son idnticas a las anteriores, con excepcin de las tapas que adems de ser mas pesadas estn adaptadas para crear anaerobiosis. Pipetas: Tubos cilndricos delgados terminados en punta, graduados al dcimo o al centsimo de mI. Se emplean en la medicin de pequeas cantidades de lquidos. Pueden ser: Serolgicas: son terminales y con capacidad de 0.1 a 25 ml. Volumtricas, se reconocen por presentar una dilatacin bulbosa central con unas marcas de aforamiento conocida, en el extremo proximal angosto de la pipeta, se les llama tambin pipetas de bola, las medidas ms conocidas son de 10, 25, 50 y 100 ml.

Pipetas Pasteur: Confeccionados de varillas de vidrio de dimetro de 4 x 20mm de 30 40cm de longitud. La calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la accin directa de la llama del mechero, para conseguir por estiramiento la capilaridad deseada. Se emplea para la toma de pequeos inculos de siembra.


. Matraces y Erlenmeyers: Recipientes de forma cnica y cuello corto, volumtricos tiles para la preparacin y almacenamiento de soluciones, colorantes, reactivos, medios de cultivos, etc.

Matraces Aforados o Fiolas: Recipientes de forma esfrica y base plana. Estn calibr4ados a medidas exactas mediante un foro en la parte media del cuello del recipiente en el que se indica la medida. Se emplean para la preparacin de reactivos de preferencia solucin buffer.

Los matraces Erlenmeyer son recipientes de vidrio de forma troncocnica que se utilizan en el laboratorio para medir o contener lquidos. Kitasato: Son frascos muy parecidos a los Erlenmeyers, se caracterizan por sus paredes gruesas y por una tubuladura lateral en el cuello, la misma que sirve de tabulacin lateral para hacer el vaco. Se utiliza


Probetas: Recipientes graduados de forma cilndrica y capacidad variable, con base para la esterilidad. Pueden estar graduada.

Vasos de Precipitacin o Beacker: Recipientes cilndricos y cortos, con una depresin en el margen de la bocadura. Su utilidad es amplia. El vidrio debe ser resistente al calor.

Frascos viales para Hemocultivos, vacunas, Cultivos de Tejido: Son de vidrio neutro, resistentes al calor, transparentes y con tapas de rosca, Con capacidad para 50ml y 100ml blancos o de color mbar pueden utilizarse para la reserva de soluciones y medios de cultivo en stock, previamente taponados con algodn esterilizados, Perlas de Vidrio Neutro: Se emplean para desfibrilar sangre y para recoger cosechas microbianas en la preparacin de antgenos, De 4 a 6 mm. Varilla: de Vidrio Macizo

MATERIAL DE OTRA NATURALEZAVstago de metal con una cubierta de ebonita aislante del calor y en el extremo proximal una tuerca para insertar el alambre de plstico o necron, Asa de Kolle Varillas metlicas o de vidrio que llevan en un extremo alambre de platino; cuando el alambre es recto se llama Necrn y cuando el alambre forma un anillo de dimetro variable en su extremidad toma el nombre de asa. Esptulas de Metal con mango de madera Estuches cilndricos o Cubculares Mecheros de Bunsen Canastillas o Cestos de Metal Soportes Universales Trpodes


EQUIPOS DE LABORATORIOPotencimetro: Miden el pH de los medios de cultivo y de las solucione buffer. Constituido de un par de electrodos sensible a concentraciones de hidrogeniones, conectados a un potencimetro que indique las mediciones, Los potencimetros emplean un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estndar.

Centrfugas: Se utiliza en la separacin de slidos suspendidos en lquidos. Hay centrfugas de tamao y velocidades variables, la velocidad, se mide en revoluciones por minuto, La velocidad a la cual sedimentaran las partculas en un lquido dependen de varios factores: Tamao de la partcula. El peso de la partcula. La viscosidad del lquido. La fuerza gravitacional.

Ultra centrifugacin; para obtener alteraciones elevadas (mayor o igual a 100 000 g), pueden ser: Ultracentrifugacin analtica: para determinacin de caractersticas fsicas de protenas o de cido nucleicos. Ultracentrifugacin preparativa: permite la separacin de organelos (mitocondrias, etc.), la separacin se debe efectuar en gradiente de densidad.


Incubadoras y Hornos Los hornos son capaces de mantener t mas de 100c y las incubadoras menos de 100 c .Los hornos no tienen salida de aire, las incubadoras si.

Baos de agua Tambin llamados BAO MARIA tienen salida de aire presentan un termostato que regula la temperatura del agua presenta un piso para colocar los materiales que se desea.


Refrigeradoras y congeladoras Son incubadoras de temperatura fra menor de cero grados y los frigideres de dos a siete grados.

Filtracin Sirve para separar materiales lquidos de slidos un ejemplo los FITROS DE MEMBRANA.

Espectrofotmetro Se puede observar los colores de los alimentos con una intensidad que el aparto brinda.


Autoclave Funciona por las presiones que se dar a una mayor temperatura logrando su esterilizacin como por ejemplo las conservas.

Horno Pasteur Es como una mufla que tiene tres paredes y la cubierta es de asbesto sirve para la esterilizacin por el calor seco. Estufas de aire caliente Al igual que el anterior es utilizado en la esterilizacin por el calor seco. Tienen solo dos paredes y son de forma cbica.

Aparato de arnolo koch Es un tipo de esterilizador con calor hmedo de forma cilndrica.


III.-MATEIAL PARA LA PRCTICA Pipetas de diferentes graduaciones. Asas Bacteriolgicas de aro y punta. Caja de Petri. Tubos de ensayo con tapn de rosca y tapn de algodn. Probeta. Matraz Erlenmeyer. Vaso de precipitado. Mechero Bunsen. Torundas de algodn.

IV. EXPERIMENTOSiga cada uno de los pasos como lo indica su Profesor, Tcnico o instructor. 1. 2. 3. 4. 5. 6. Encienda el Mechero. Esterilice su asa en el mechero hasta que este al rojo vivo y enfre en el rea de seguridad. Abra su caja de Petri dentro del rea de esterilidad hasta que aprenda a hacerla correctamente. Tome una pipeta estril, brala y pipetee la cantidad exacta de agua de acuerdo a la graduacin de la pipeta. Tome un tubo de ensayo de rosca o liso y bralo dentro del campo de esterilidad hasta que aprenda a hacerla correctamente. Tome la probeta y vierta un poco de agua hasta alguna cantidad exacta.


V.- RESULTADOObviamente, hay unos ciertos tipos de experimentaciones que realizamos o determinamos con mas frecuencia que otras. Sin embargo, el personal del Laboratorio esta siempre dispuesto a considerar nuevos retos. No pretendemos ser capaces de realizar cualquier tipo de determinacin, pero prometemos considerar, desde nuestra experiencia, todas las posibles alternativas es por eso lo imprescindible de reconocer todos los materiales, su utilidad y su debida limpiezapara cumplir con nuestros propsitos.


VI.- CONCLUSIONES Es muy importante haber reconocido todos los materiales a utilizar en el laboratorio y saber su utilidad para la prctica. Tambin era necesario para prevenir cualquier accidente no provocado y no lamentar consecuencias. Una de las conclusiones es haber reconocido algunos reactivos que se debe tener cuidado y cogerlo con los guantes para prevenir algn tipo de contaminacin. Haber reconocido los equipos a utilizar como la centrifuga, el potencimetro y la estufa de aire caliente. Conocer la calidad de las principales herramientas a utilizar como los tubos de ensayo, las pipetas, las placas petri, los matraces, etc. Saber desinfectar las placas cuando se encuentren con algunas bacterias u hongos o cidos, tambin saber desinfectar las manos y los materiales a utilizar.

VII.- RECOMENDACIONES Tener el mandil siempre puesto para evitar contaminacin en la ropa cuando se encuentre en el laboratorio. Cuando se utilice la pipeta utilizar la bombilla para prevenir cualquier accidente a menos que se utilice agua en ese instante. Tener los guantes puestos cuando se trabaje en cultivos de hongos o bacterias en las placas o tubos a utilizar. Antes de empezar cualquier experimento desinfectar la zona donde se trabajara. No poner cuadernos grandes sobre la zona donde se trabaje ni meter los lapiceros en la boca para prevenir algn tipo de infeccin.


VIII.- CUESTIONARIO1. Para que sirve una caja de Petri? Son utilizadas en bioqumica para llevar a cabo cultivos de microorganismos.

2. Cul es la finalidad de utilizar materiales estriles en el laboratorio? El propsito del proceso de esterilizacin es destruir la contaminacin microbiana de los productos no estriles. La destruccin microbiana mediante agentes fsicos o qumicos sigue una ley exponencial, que nos permite calcular la probabilidad de supervivencia de un microorganismo a partir de la dosis suministrada en el tratamiento. La probabilidad de supervivencia est en funcin del nmero y tipos de microorganismos (carga biolgica), de la letalidad del proceso de esterilizacin y en algunos casos, del medio ambiente en el que se encuentren los microorganismos durante la esterilizacin. 3. De que esta formada el asa bacteriolgica? Son varillas metlicas o de vidrio que llevan de un extremo alambre de platino; cuando El alambre es recto se llama aguja y cuando el alambre forma un anillo de dimetro variable en su extremidad tmale nombre de asa.

4.- Utilidad del mechero Bunsen? Dispositivo que se utiliza mucho en los laboratorios debido a que proporciona una llama caliente, constante y sin humo. Debe su nombre a Robert Bunsen el que lo creo. Los mecheros Bunsen constan de un tubo vertical, enroscado en su parte baja a un pie por donde entra el gas.Mediante un aro metlico mvil se regula la entrada de aire. La mezcla se enciende por la parte superior.


Biblioteca de consulta Encarta 2004.

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