ANAEROBIOS

Dra. Chrystal JulietLaboratorio Microbiología

Hospital del Salvador

Visión crítica en la práctica hospitalaria

Crecen en atmósfera reducidas de oxígeno.Crecen en ambientes ausentes de oxígeno, ya que éste es letal para ellasRequieren de un bajo potencial ox-redox

BACTERIAS ANAEROBIAS

Definición:

La mayoría carece de catalasa, pero la presencia en algunas de superóxido dismutasa las hace

aerotolerantes

Metodología de cultivo especial Medios enriquecidos y frescosCrecimiento lento (48 hrs - 7 días)Variabilidad al GramMetabólicamente poco activosProductos finales detectables por cromatografíaDemuestran tardíamente propiedades fenotípicas (pigmento)Cambios importantes taxonómicos usando biología molecularAlto costo de identificaciónLabilidad de la muestra

Siendo la identificación tan difícil¿Es útil y necesario cultivarlos ?

Dificultad diagnóstica

BACTERIAS ANAEROBIAS

SISTEMAS DE ANAEROBIOSIS

H2 + O2 H2O

Anaerobios : Variabilidad al Gram

NO ESPORULADOS

ESPORULADOS

COCACEAS BACILOS

Clostridium

(-)

PeptostreptococcusPeptococcus

(-)

FusobacteriumBacteroidesPrevotellaPorphyromonas

Veillonella

ActinomycesBifidobacteriumEubacterium

GRAM

(+)

GRAM

(+)

BACTERIAS ANAEROBIAS

NO ESPORULADOS

ESPORULADOSClostridium

COCACEAS BACILOS

(-)

(-)

Veillonella

GRAM

(+)

GRAM

(+)

PeptostreptococcusAnaerococcusPeptococcusFinegoldia magnaSchleiferellaPeptoniphilusMicromonas micros

FusobacteriumBacteroidesPrevotellaPorphyromonasBilophilaSutterellaLeptotrichia

ActinomycesPropionibacteriumEubacteriumBifidobacteriumActinobaculumMogibacteriumEggerthellaCollinsella

Cambios taxonómicos

BACTERIAS ANAEROBIAS

Song, Liu & Finegold. 2007 . J Clin Microbiol 45 : 512- 516

Endógenas :

- Penetración a sitios estériles desde piel y mucosas por:Procesos inflamatorios - Trauma - Cirugía

- Desequilibrio en la flora

Exógenas: Del ambiente: Esporas , toxinasTrauma - Cirugía - Mordeduras

BACTERIAS ANAEROBIAS

Tipos de infección

Abceso cerebral

Mastoiditis-SinusitisOtitis crónica-Inf.dentales

Abceso pulmonarNeumonia aspirativa-Empiema

Abceso hepático

Peritonitis -Abcesos retroperitoneales

Colitis pseudomembranosa

EndometritisAbceso tubo-ováricoBartonilitisVaginosis inespecífica

Fascitis necrotizanteGangrena

Osteomielitis

Pié Diabético

InfeccionesAnaerobias

Infección por Anaerobios

VENTAJAS

PARA EL

MICROBIÓLOGO

Necrotizantes

Localización cercana a mucosas

Presentan generalmente mal olor y gas

Patogenicidad dada por sinergismo por tanto:

Polimicrobianas con bacterias aerobias y microaerófilas

Etiologías y sensibilidad antibiótica predecibles

INFECCIONES ANAEROBIAS

Características

Sangre LíquidoPleural

AbcesoAbdominal

Inf.Gineco-obstétricas

Heridas

Nº cepas 115 122 786 975 468

Bacteroides fragilis 24 12 36 10 20

C. perfringens 32 6 21 1 35

Peptostreptococcus 4 16 9 28 19

Prevotella-Porphyromonas 4 19 10 30 12

B.Gram + No esporul 24 25 8 5 5

Clostridium sp 7 5 9 0.8 8

Fusobacterium 0.2 10 5 11 2

Veillonella 0 7 0.8 0 0

Anaerobios aislados de muestras clínicas ISP – Chile - 10 años

M.E. Valenzuela* Valores en %

B. fragilisNª 244

PrevotellaNª 100

FusobacteriumNª 60

PeptostreptococcusNª 158

Penicilina 92 54 10 9.8

Amoxi-Clavulánico 1.2 1 0 3.8

Imipenem 0 0 0 0

Cloranfenicol 0 0 0 0

Clindamicina 7.6 0 1.6 0

Metronidazol 0 0 0 0.6

% Resistencia Bacterias AnaerobiasISP - Chile

B. fragilis PrevotellaPorphyromonas

Fusobacterium Peptostreptococcus

Penicilina < 50 50 - 85 85 - 95 90 - 95

Amoxi-Clavulánico > 95 > 95 > 95 90

Ceftriaxona 50 - 70 > 95 85 - 95 > 90

Cloranfenicol > 95 > 95 > 95 > 95

Clindamicina 70 - 85 > 95 > 95 84

Metronidazol > 95 > 95 > 95 88

Imipenem > 95 > 95 > 95 > 95

Piperacilina-Tazobactam > 95 > 95 > 95 90 - 95

Moxifloxacina > 95 > 95 > 95 90 - 95

% Sensibilidad Bacterias AnaerobiasReferencias Internacionales

Cultivo de Anaerobios: ¿Cuándo?

ABCESO CEREBRALABCESO PULMONAR

ABCESOS ABDOMINALESPERITONITIS ESPONTANEAFASCITIS NECROTIZANTE

GANGRENAPIÉ DIABÉTICO

ACTINOMICOSIS

SIEMPRE EN:

Bacteroides fragilisClostridium sp (perfringens)

Peptostreptococcus

Actinomyces

PrevotellaPorphyromonasFusobacterium

ANAEROBIOS : ¿CUÁLES IDENTIFICAR?

LOS DE MAYOR PATOGENICIDAD y PREVALENCIA

Peritonitis

Calidad de Muestras para Cultivo de Anaerobios

ExpectoraciónOrina por micción

Flujo vaginalPus superficialesLíquido fístulas

Muestras contaminadas con floraTórulas sin medio de transporte anaerobio

Inaceptables

AceptablesAspirado de abcesos por punción

Material obtenido en cirugíaLíquido peritoneal - Bilis

Aspirado Fondo Saco DouglasOrina por punción suprapúbica

Tejidos

Tiempos de transporte en muestras anaerobias

Material aspirado

< 1ml ≤ 10 min1 ml ≤ 30 min

> 2 ml ≤ 2- 3 hrs

≤ 2 a 3 hrs

Tejidos ≤ 30 min≤ 2- 3 hrs

En contenedor estérilEn medio transporte anaerobio

TórulasEn caldo anaerobio En medio transporte anaerobio

En medio transporte anaerobio

En tubo ó jeringa

≤ 1 h≤ 2 a 3 hrs

MUESTRAS PARA ESTUDIO ANAEROBIO

LIQUIDOS PUS ABCESOS TEJIDOS

AS ANAE CO2

SIEMBRA

GRAM

con Bicarbonato de Sodio 1 %

K *

Tyo

* Optativo

Hemo anae

IMPORTANCIA DEL GRAM

Colonias características

Anaerobios : Diagnóstico de Género

KOH al 3% Discos diferenciales

Kanamicina-Vanco-Colistin

ORGANISMO KANAMICINA 1000ug

COLISTIN 10 ug

VANCOMICINA 5ug

KOH 3%

Grupo Bacteroides fragilis

Otros Bacteroides spp

Porphyromonas spp

Prevotella spp

Fusobacterium spp

Veillonella

Peptostreptococcus

Clostridium

R

R

R

R

RR

S

S

S

S

RS

R

RS

V

V

R

R

R

R

S R

V

+

V

+

+V

-

V

BACILOS ANAEROBIOS GRAM NEGATIVOS

CATALASA

BILIS AL 20%

ESCULINA

INDOL

C.FERRICO AMONIACAL

M. Eugenia Valenzuela

BACILOS ANAEROBIOS GRAM NEGATIVOS

BILIS 20%ORGANISMO CATALASA ESCULINA DACA

Bacteroides grupo fragilis

Prevotella heparinolytica

Bacteroides grupofragilis

Porphyromonas spp

Fusobacterium spp

P.intermedia

Prevotella spp

Bacteroides grupo fragilisFusobacterium spp

+

+

+-

+

+

I-

I--

-

+

+-

-

ES

ES

I

ES

V

I

V

M. Eugenia Valenzuela

Clostridium sp

Clostridium perfringens: Doble hemólisis

BACILOS ANAEROBIOS GRAM POSITIVOS ESPORULADOS

GELATINA

EYA

LIPASALECITINASA

BACILOS ANAEROBIOS GRAM POSITIVOS ESPORULADOS

G LI LE

+ - +

ORGANISMO

PROBABLEESPORA

NITRATO

LACTOSA

MANITOL

UREA L.R

C.bifermentansC.sordelliiC.perfringens

- - - C.difficile

ST

ST

NSE

ST

- -

+

-- - ++/-

+ -

- x

x

+ + - C.sporogenesC.botulinum

ST

ST

XX

G:Gelatina, Li : Lipasa, Le : Lecitinasa M. Eugenia Valenzuela

COCACEAS ANAEROBIAS

COLISTIN

S

R

NITRATO

+-

Veillonella

Peptostreptococcus

M. Eugenia Valenzuela

VANCO KANA

S S

R S

Mejor no me desespero tratando de identificar este

anaerobio,total, al clínico sólo le interesósaber que estaban presentes

CONCLUSIÓN del MICROBIÓLOGO

GRACIAS