virosis-apicolakarina_antunez
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Ministerio de Educación y Cultura - Uruguay
Instituto de Investigaciones Biológicas
Clemente Estable
www.iibce.edu.uy
Superficie: 176,214 km2
URUGUAY
La actividad apícola involucra a más de 3.000 productores, quienes
poseen unas 500.000 colmenas.
Se exporta aproximadamente un 90% de la miel producida en el
país, particularmente a Alemania (más del 80 %) seguida por España
(alrededor de un 10 %)
ANUARIO 2009 - OPYPA
Exportaciones
PATÓGENOS QUE AFECTAN A LAS ABEJAS
comunal, las abejas melíferas son blanco de una
Dadas sus condiciones de vida y cuidado
comunal, las abejas melíferas son blanco de una
gran variedad de patógenos, entre ellos:
archive.ermanz.govt.nz
news.bbc.co.uk
Ácaros: Varroa destructor
welshhoney.com
Es un ectoparásito
hematófago, que se encuentra
distribuido en todo el mundo
(excepto en Australia).
Ácaros: Acarapis woodi
sel.barc.usda.gov
Hongos: Nosema ceranae (A) y Nosema apis (B)
Fries et al., 2006. Journal of Apicultural Research 45: 230-233
Distribución:
Ambas tienen distribución mundial, aunque N. ceranae tiene una
prevalencia mucho mayor.
Virulencia
N. ceranae es más virulento que N. apis.
Rango de hospedador:
N. ceranae: A. mellifera, A. cerana, A. florea, A. dorsata, Bombus spp.
N. apis: A. mellifera & A.cerana
Efecto de la temperatura en su crecimiento:
Ambas crecen a 33ºC
N. ceranae también puede crecer a menores y mayores temperaturas
Hongos: N.ceranae y N. apis
Respuesta inmune:
N. apis: el sistema inmune de la abeja rápidamente
activa mecanismos de defensa, para aliminar al
agente patógeno.
Antúnez et al., 2009
N. ceranae: pasa desapercibido, la respuesta
inmune es suprimida.
Diagnóstico mediante PCR
Método de Martin Hernandez et al., 2007. Applied and Environmental Microbiology.73:3321-6338
N. ceranae N. apis
Método disponible
en el IIBCE
Es posible detectar rápidamente la presencia de N. apis y N.
ceranae en abejas, mediante PCR.
Bacterias: Paenibacillus larvae(Loque Americana)
www.iibce.edu.uy
www.iibce.edu.uy
Es una de las más serias enfermedades
que afecta a las larvas de las abejas.
Se encuentra distribuida mundialmente.
Aislamientos en la región:
Argentina (1992)
Uruguay (2000)
Brasil (2004)
Chile (2005)
Ocasiona la disminución de la población de abejas y por lo tanto
merma la producción de miel.
El uso preventivo o terapéutico de antibióticos genera residuos en
la miel y favorece la emergencia de cepas resistentes.
Las esporas pueden persistir viables en los materiales de las
colmenas y en el ambiente por décadas.
Diagnóstico en el campo
Síntomas clínicos:
- panal de cría con celdillas vacías alternadas con celdas
operculadas, opérculos hundidos, oscuros.
- larvas de color marrón y aspecto gomoso.
stevesullam.com
Aislamientos de los diferentes
departamentos
1)6 (Paysandú)
2)14 (Maldonado)
3)16 (Flores)
4)26 (Tacuarembó)
5)37 (Colonia)
6)44 (Durazno)
7)46 (T. y Tres)
8)73 (Río Negro)
M
1Kb 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
700 pb
9) 83 (Florida)
10)87(Canelones)
11)92 (San José)
12)99 (Lavalleja)
13)106 (Salto)
14)M3 (Soriano)
15)control negativo
16)control positivo
700 pb
1)P.l. pulvifaciens
2)P. alvei
3)P. macerans
4)B. subtilis
5)B. cereus
6)B. brevis
7)B. megaterium
8)B. licheniformis
9)C. propinquum
10)P. larvae
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
M
1Kb
Plus
Especificidad
Diagnóstico mediante PCR
Método disponible
en el IIBCE
Es posible detectar rápidamente la presencia de P. larvae mediante PCR.
Estrategias para prevenir la aparición de brotes:
- reemplazo regular de los panales de la cámara de cría,
- desinfección de materiales,
- retiro de las colonias enfermas de los apiarios,
- destrucción mediante fuego.
No erradican la bacteria pero controlan el nº de esporas.
Antibióticos: no efectivos contra esporas, generan resistencia
bacteriana y pueden quedar residuos en la miel.
Alternativas naturales ???
Prevención
Producto natural producido por las
abejas a partir de la recolección de
resinas de árboles y plantas.
Es utilizado para sellar las paredes y la
entrada de las
colmenas, constituyendo una defensa
contra infecciones de diversa índole.
PropóleosPropóleos
Actividad
antibacteriana del
EXTRACTO
ETANÓLICO DE
PROPÓLEOS
en laboratorio.
No resultó tóxico para las abejas.
Evaluación de la toxicidad del EEP en abejas
Actividad antibacteriana del propóleos en el campo
Apiario con antecedentes de
Loque Americana.
División de las colmenas en grupos y aplicación de tratamientos.
El tratamiento de colmenas
infectadas con esporas de P. larvae
con EEP mediante asperjado o
alimentador, determinan una
disminución del nº de esporas en
miel.
EEP alimento EEP asperjador
Muestreo preliminar de miel
para determinar el nº de
esporas de P. larvae.
Este tratamiento se recomienda en Uruguay como medida
"complementaria" a las recomendadas por el MGAP:
- vigilancia para obtener un diagnóstico precóz
- eliminación de las colonias que presenten síntomas
- aislamiento de colmenas y materiales que tuvieron contactos
con las colmenas eliminadas
- esterilización de material
- no alimentación con miel
- lavado de la palanca entre el manejo de una colmena y otra
Se han descrito y caracterizado más de dieciocho virus que afectan a las abejas melíferas.
Virus ARN
Uno de los virus más estudiados y que ocasiona mayores inconvenientes.
Afecta a las abejas adultas.
Causa parálisis de las abejas, las que tiemblan y dejan de volar.
Olivier et al., 2008. Veterinary Research 132: 59-68
Virus de la parálisis crónica (CBPV)
Algunas veces se encuentran abejas negras, brillosas, sin
pelo, rondando la entrada de la colmena.
Ribiere et al., 2010. Journal of Invertebrate Pathology 103: S120-S131
Los brotes de este virus se relacionan con el confinamiento de las
abejas ocasionado por malas condiciones climáticas y con el
aumento en la densidad de colmenas en un área geográfica
determinada.
B. Ball
Virus de la parálisis aguda (ABPV)
Las abejas infectadas en el laboratorio
desarrollan síntomas de forma más rápida
que el virus de la parálisis crónica,
de ahí su nombre.
A pesar de que está ampliamente distribuido en las colmenas, no
ocasiona por si mismo mayor daño en el campo. Sin embargo, al co-
infectar colmenas con V. destructor su virulencia aumenta.
Se ha visto que V. destructor juega un papel
esencial en la diseminación del virus entre
colmenas así como para desencadenar la
multiplicación del mismo.
B. Ball
news.bbc.co.uk
Virus de la parálisis aguda Israeli (IABPV) y Kashmir (KBV)
Ambos virus, junto con el virus de la parálisis aguda forma un complejo de
virus relacionados que afectan sólo a las abejas adultas, causando su
rápida muerte.
Pueden estar presentes en las colmenas en bajos títulos sin causar mayores
inconvenientes, pero cuando aumenta el título viral se tornan
extremadamente virulentos.
Este aumento se debe también a la presencia
de V. destructor, quien actúa como vector
y como activador de la replicación.
www.beeologics.com
news.bbc.co.uk
Virus de las alas deformadas - DWV
www.ars.usda.gov
Causa una enfermedad bien
definida, caracterizada por la
presencia de alas
deformadas, atrofiadas o
ausencia de las mismas.
A pesar de afectar a las
abejas adultas, se ha
detectado en huevos, larvas y
pupas.
Este virus también se ha vinculado con la presencia de V. destructor,
siendo la coexistencia entre estos dos patógenos una de las probables
causas del colapso de colmenas.news.bbc.co.uk
Genersch et al., 2006. The Veterinary Journal 169: 121-123
Virus de la cría ensacada (SBV)
www.ars.usda.gov
Afecta a las larvas de las abejas.
Las larvas infectadas cambian su
color, tornándose amarillas, y el fluido
se acumula bajo su piel formando una
bolsa, síntoma que es claramente
reconocible en el campo.
También se detecta en abejas adultas
aunque no desarrollan síntomas.
www.ent.uga.edu
Afecta a las larvas y prepupas de reinas, las cuáles se tornan
amarronadas. También afecta a las larvas y pupas de las abejas
obreras, aunque no desarrolla los síntomas típicos.
Se detecta en abejas adultas, pero no desarrollan síntomas.
Virus de la celda real negra (BQCV)
www.vcely.sk
Benjeddu et al., 2002. Journal of General Virology 83, 3139-3146.
Chen and Siede, 2007. Advances in Virus Research 70.
Rutas de transmisión de los virus
T. venérea
Transmisión
vertical
T. horizontal
Vectores,
alimento,
fecal-oral
Si bien muchos de estos virus pueden
presentar síntomas característicos, pueden
existir o incluso coexistir en una misma abeja o
colonia, sin provocar la aparición de
síntomas, en colmenas aparentemente sanas.
SBV DWV BQCV ABPV CBPV
Detección de los virus mediante RT-PCR:
Muestras de abejas de diferentes regiones geográficas de Uruguay.
Antúnez et al., 2005; 2006
IMPORTANTE: Toma de muestra para análisis de virus
Chen et al, 2007. Journal of Apicultural Research 46: 81-87.
4ºC (heladera)
-20ºC (freezer)
-80ºC (freezer)
RNA later
alcohol
Ej. Amplificación de virus Kashmir
Recuperación de ARN total
Las abejas se deben tomar vivas y mantener vivas hasta llegar al
laboratorio, o mantenerse refrigeradas o en nitrógeno líquido.
Detección y cuantificación de los virus mediante
PCR en tiempo real:
Curva de amplificación: Curva de desnaturalización:
Esta herramienta permite
detectar y cuantificar la carga
de cada virus presente en una
muestra.
Método disponible
en el IIBCE
La importancia de los virus en la salud de las abejas ha llamado la
atención durante los últimos años, especialmente debido a los
problemas de pérdidas de colmenas que están ocurriendo en países
del hemisferio norte, especialmente en Estados Unidos y Europa.
Definición: progresiva despoblación de colonias que no son capacesde desarrollarse normalmente y que acaban muriendo sin síntomasasociables a alguna patología en particular.
Collony Colapse Disorder
Características:
Rápida pérdida de la población adulta de una colmena
No se encuentran abejas muertas
Presencia de celdas operculadas
Presencia de reservas (miel y polen)
La abeja reina está presente, y rodeada de abejas jóvenes
En Estados Unidos, se lo ha relacionado ha la presencia del virus de la parálisis Israeli.
Por otro lado, también se lo ha relacionado a la presencia de Nosema ceranae en conjunto con virus.
El CCD es sólo uno de los motivos de la pérdida de colmenas. En diferentes países las pérdidas se colmenas se deben a diferentes factores.
Mapa de la despoblación de colmenas
Neumann y Carreck, 2010.
Neumann y Carreck, 2010.
Despoblación de
colmenas de Europa
Desnutrición?
Pesticidas y funguicidas?
Antibioticos?
Inmunodepresión del
sistema inmune?
Movimiento de
colmenas?
Patógenos?
POSIBLES CAUSAS
Organismos genéticamente
modificados?
Situación en Uruguay, 2006
Análisis de 20 muestras de diferentes zonas
Antúnez et al., 2005; Antúnez et al., 2006
SíntomasABPV
BQCV-SBV-DWV
CBPV
100% Infectadas
Relación entre la presencia de virus y síntomas de mortalidad de colmenas
% de colmenas infectadas
. La especie de Nosema spp. más prevalente en Uruguay es N. ceranae *La especie de Nosema spp. más prevalente en Uruguay es N. ceranae *
0,0
10,0
20,0
30,0
40,0
50,0
60,0
70,0
80,0
90,0
100,0
OTOÑO INVIERNO PRIMAVERA VERANO
Nosema spp.
0,0
10,0
20,0
30,0
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50,0
60,0
70,0
80,0
90,0
100,0
OTOÑO INVIERNO PRIMAVERA VERANO
% de colmenas infectadas
V. destructor
Relación entre la presencia de virus y la presencia de otros patógenos
BQCV
% de colmenas infectadas
0
10
20
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40
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OTOÑO INVIERNO PRIMAVERA VERANO
% de colmenas infectadas
0
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OTOÑO INVIERNO PRIMAVERA VERANO
SBV
0
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OTOÑO INVIERNO PRIMAVERA VERANO
% de colmenas infectadas % de colmenas infectadas
0
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70
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90
100
OTOÑO INVIERNO PRIMAVERA VERANO
ABPV DWV
Los virus IAPV y KBV no se detectaron en estos
apiarios el
momento, en
Sudamérica
Los virus IAPV y KBV no se detectaron en estos
apiarios, no existiendo reportes, hasta el
momento, de su presencia en el país ni en
Sudamérica.
La presencia y co-existencia de los diferentes patógenos
probablemente y
en
La presencia y co-existencia de los diferentes patógenos
probablemente esté involucrado en las pérdidas de colmenas y
en la disminución de la producción reportadas en Uruguay.
PROYECTOS EN CURSO:
Microbiología, IIBCEKarina Antúnez
Matilde Anido
Belén Branchiccela
Pablo Zunino
Apicultura, DILAVEJorge Harriet
Juan Campá
Etología, F. CIENCIAS
Ciro Invernizzi
Si bien no se han registrado episodios masivos de despoblación de
colmenas similares a los reportados en Estados Unidos, España u
otros países de Europa, se han detectado episodios puntuales
donde la mortalidad es mayor a la esperada.
Despoblación de colmenas: determinación de
sus causas en Uruguay (2009-2011)
Financiado por INIA (Uruguay)
El objetivo es valuar la prevalencia y distribución estacional de
patógenos de importancia apícola en apiarios con antecedentes de
pérdidas de colmenas, en Uruguay.
Microbiología, IIBCEMatilde Anido
Karina Antúnez
Belén Branchiccela
Pablo Zunino
Apicultura, DILAVEJorge Harriet
Juan Campá
El objetivo general del trabajo de tesis es estudiar la prevalencia y
distribución en Uruguay de los principales patógenos apícolas a
partir de muestras recolectadas de todo el país.
Tesis de Maestria de Lic. Matilde Anido
Centro Agrario de MarchamaloMariano Higes
Raquel Martin Hernández
Epidemiología de los principales patógenos de
interés apícola (2011-2012)
Financiado por ANII(Uruguay)
Microbiología, IIBCEKarina Antúnez
Apicultura, INIAYamandú Mendoza
El presente proyecto pretende estudiar la posibilidad de
incrementar la resistencia de las abejas a la nosemosis.
Para tal fin se propone:
a) estudiar si existe un componente genético
asociado a la tolerancia de las abejas a la Nosemosis;
b) analizar la respuesta del sistema inmune de las abejas en
colonias con distinto grado de susceptibilidad a la enfermedad;
c) determinar si hay virus asociados a la nosemosis.
Tesis de Maestría de Ing. Agr. Yamandú Mendoza
Etología, F. CIENCIAS
Ciro Invernizzi
Resistencia de las abejas melíferas al micorsporidio
Nosema ceranae (2011-2012)
Financiado por ANII (Uruguay)
El objetivo de este trabajo es determinar la presencia de N.
ceranae, N. apis y N. bombi están presentes en las especies de
abejorros nativos de Uruguay: Bombus atratus and Bombus
bellicosus.
Tesis de Maestria de Lic. Natalia Arbulo
Microbiología, IIBCEKarina Antúnez
Etología, F. CIENCIAS
N. Arbulo
E. Santos
S. Salvarrey
C. Invernizzi
Centro Agrario de MarchamaloMariano Higes
Detección de Nosema ceranae en Bombus spp.
El objetivo de este trabajo es determinar la prevalencia de virus ARN
en abejas de España.
Microbiología, IIBCEKarina Antúnez
Matilde Anido
Pablo Zunino
Centro Agrario de Marchamalo
Raquel Martín-Hernández
Encarna Garrido-Bailón
Cristina Botías
Amparo Martínez-Salvador
Mariano Higesb
Detección de virus de las abejas en España
Tesis de Doctorado de Ing. Agr. Marta Rodriguez
Microbiología, IIBCEKarina Antúnez
Universidad de ConcepciónMarta Rodríguez
UNIVERSIDAD DE CONCEPCION
PROGRAMA DE DOCTORADO EN CIENCIAS AGRARIAS
CAMPUS CHILLÁN
Detección de virus de las abejas y su asociación con
otras patologías apícolas en Chile
Grupo de Investigación en Sanidad Apícola,
Departamento de Microbiología, IIBCE
Dr. Pablo Zunino
Jefe del Departamento
Dra. Karina Antúnez
Investigadora Gdo. 2
Lic. Matilde Anido
Investigadora Gdo.1
Estudiante de maestría
Lic. Daniela Arredondo
Colaboradora honoraria
Bach. Belén Branchiccela
Becaria
Argentina
Facultad de Ciencias Veterinarias,
Tandil.
Universidad Nacional de Mar del Plata,
Mar del Plata
Uruguay
Microbiología, IIBCE
Apicultura, MGAP
Facultad de Ciencias, UdelaR
Sección Apicultura, INIA
Brasil
APTA-Secretaria Agricultura
do Estado de São Paulo.
EspañaCentro Agrario de Marchamalo
Red Iberoamericana para el estudio de la Sanidad Apícola???
MUCHAS GRACIAS