universidad de guayaquil facultad de ciencias...
TRANSCRIPT
UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA DE QUÍMICA Y FARMACIA
TEMA:
“Evaluación de actividad antimicrobiana en extractos metanólico, etanólico
en semilla, hoja de noni (Morinda citrifolia L.),Staphylococcus aureus,
Escherichia coli, Cándida albicans.”
AUTORES:
Solange Alarcón Bustamante
Nicole Velarde Rodríguez
TUTORA:
QF. Marianita Rendón Mariscal, MSc.
LÍNEA DE INVESTIGACIÓN:
Ciencias básicas, Bioconocimiento y Desarrollo industrial.
SUBLÍNEA DE INVESTIGACIÓN:
Ciencia y Tecnología Farmacéutica.
GUAYAQUIL-ECUADOR
2019
xii
Dedicatoria
El presente trabajo investigativo se lo dedico antes
que nada a Dios por darme la fuerza para continuar
en este proceso difícil pero no imposible para así obtener uno de los anhelos
más deseados.
A mis padres y abuelitos, por su amor, apoyo incondicional y sacrificio en
todo este tiempo, sin ustedes no hubiera podido llegar hasta aquí y
convertirme en lo que soy, qué orgullo ser su hija y nieta, son los mejores
padres y abuelitos.
A mi hermana por siempre estar para mí, por ayudarme en todo y por tus
consejos, qué lindo poder compartir toda una vida contigo.
A mis primos y tíos por siempre estar presente dándome apoyo moral a lo
largo de esta etapa, sin ustedes se hubiera hecho todo el proceso un poco
más largo.
A todos mis amigos, principalmente a Ivanna Roggiero, Ian Villagómez,
Romina Reyna, Betsy Sócola, Melissa Espinoza, Polet Sanmartin, Carlos
Morán, Francisco Romero y Christopher Perez-Borroto, por cada ayuda
brindada y ya que sin ustedes hubiera sido un camino no tan divertido.
Por último, pero no menos importante a mi amiga y compañera de tesis
Solange Alarcón por las mil risas en toda la carrera y todo el estrés que
vivimos hasta conseguir llegar hasta aquí juntas.
Att: Nicole Velarde Rodríguez
xiii
Agradecimiento
Agradezco a Dios por bendecirme, guiarme en
cada paso que he dado y por darme fortaleza en
momento de dificultad.
Gracias a mis padres Liz Rodríguez y Mauricio Velarde, a mis abuelitos
Clemente Rodríguez y Carmen Antepara por creer y confiar en mí, por sus
consejos, principios y valores inculcados.
Agradezco a todos mis docentes a lo largo de la carrera principalmente a mi
tutora QF. Marianita Rendón Mariscal, MSc por brindarme sus conocimientos
y por su paciencia durante todo el trabajo de titulación.
Att: Nicole Velarde Rodríguez
xiv
Dedicatoria
Este trabajo de carácter investigativo va dedicado
primero a Dios por ser la guía durante este arduo, pero no imposible camino.
A mi hijo Santiago Ezequiel Perero Alarcón por las horas sacrificadas fuera
de casa y por el amor que día a día me demuestra, a mis padres y hermanos
por el amor incondicional, esfuerzo y mucho apoyo en este tiempo, sin sus
consejos, ayuda y paciencia nada de esto hubiese pasado, me siento
orgullosa de tenerlos cómo padres ejemplares a lo largo de mi vida.
A mis tíos Geovanny Delgado Bustamante y Martha Cujilán de Delgado por
siempre estar presentes y sin dudar ofrecer su apoyo más sincero.
A todos mis compañeros de la carrera y a aquellos que con el tiempo se
fueron convirtiendo en grandes amigos, por los momentos vividos, las
enseñanzas y cada experiencia que hace única esta vivencia en la carrera
universitaria.
Y a mi buena amiga y compañera de tesis Nicole Velarde, por su ayuda y su
paciencia a lo largo de este trabajo investigativo, por las largas horas de
trabajo y esfuerzo para lograr que esto sea posible, sin importar el cansancio
o aquellos días agotadores siempre estuvo motivándome a lograrlo.
Att: Solange Alarcón Bustamante
xv
Agradecimiento
Agradezco a Dios, a mis padres Richard
Tayron Alarcón Garcés y Amalia Isabel Bustamante Herrera por sus
palabras y apoyo en momentos buenos y malos, a mi hijo por su amor
eternamente incondicional, por esperarme horas y hora hasta que finalmente
llegaba a casa.
Mis más sinceros agradecimientos a cada docente que a lo largo de la
carrera forjaron nuevos valores e inculcaron conocimientos en mí, a mi tutora
Dra. Marianita Rendón Mariscal, por guiar y otorgar sus conocimientos que
sirvieron de mucho para el desarrollo y finalización de este trabajó de
titulación.
Att: Solange Alarcón Bustamante
xvi
ÍNDICE RESUMEN ........................................................................................................xxi
ABSTRACT ......................................................................................................xxii
INTRODUCCIÓN ............................................................................................ 1
CAPÍTULO I PROBLEMA .............................................................................. 2
I.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .......................................................... 2
PROBLEMA ................................................................................................... 2
I.2 JUSTIFICACION E IMPORTANCIA ............................................................. 3
I.3. HIPÓTESIS .................................................................................................. 4
I.4. OBJETIVOS: ................................................................................................ 4
I.4.1. Objetivo General: ................................................................................. 4
I.4.2. Objetivos Específicos .......................................................................... 4
I.5. OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES: ....................................... 5
MARCO TEÓRICO ............................................................................................ 6
Descripción Botánica ....................................................................................... 6
Características del fruto. .............................................................................. 7
Distribución geográfica ................................................................................ 8
Rendimiento .................................................................................................. 8
Componentes del noni. ................................................................................ 8
PROPIEDADES REPORTADAS EN LA LITERATURA ................................ 9
ACTIVIDAD BIOLÓGICA DE LOS DERIVADOS DEL NONI ACTIVIDAD
ANTIBACTERIANA ........................................................................................ 9
USOS ............................................................................................................ 10
CONSTITUCIÓN QUÍMICA DE LA HOJA .................................................... 10
SEMILLAS .................................................................................................... 10
Enterobacterias. .......................................................................................... 13
Género Escherichia: ................................................................................... 15
EPIDEMIOLOGÍA ......................................................................................... 16
xvii
Tipos de cepas ............................................................................................ 16
Enfermedades causadas por S. aureus .................................................... 23
Factores de virulencia de Staphylococcus auerus .................................. 24
Enzimas. ...................................................................................................... 25
Levaduras .................................................................................................... 27
Como identificar las levaduras .................................................................. 27
Género Cándida .......................................................................................... 28
Factores etiopatogénicos ........................................................................... 29
Aspectos terapéuticos ................................................................................ 29
Resistencia a métodos comerciales .......................................................... 31
MATERIALES Y MÉTODOS ........................................................................ 33
3.1 Tipo de Investigación ........................................................................... 33
3.1.2 Campo ................................................................................................. 34
3.1.3 Experimental ....................................................................................... 34
3.2 Equipos Aparatos, Materiales y Reactivos ......................................... 34
3.3 Muestra .................................................................................................. 36
3.4 Metodología Experimental.................................................................... 36
3.4.1 Método de recolección ...................................................................... 36
ANÁLISIS DE LA SEMILLA Y HOJA DE NONI ........................................... 36
Procedimiento del preparado de la hoja y semilla de Noni para continuar
con su extracción metanólico y etanólico ................................................ 38
Dilución de los extractos etanólico y metanólico de la semilla y hoja de
Noni (Morinda Citrifolia L.) en diferentes concentraciones. ................... 39
3.4.2 Análisis en el laboratorio .................................................................. 40
Análisis microbiológico .............................................................................. 40
Evaluación de la actividad antimicrobiana por el método de Kirby-Bauer
...................................................................................................................... 40
Preparación del inoculo ............................................................................. 40
xviii
Siembra por el método de la escobilladura .............................................. 41
CAPÍTULO IV ............................................................................................... 42
4.1 Resultados ............................................................................................. 42
CAPITULO V ................................................................................................ 51
5.1 Discusiones ........................................................................................... 51
5.1.1 Conclusiones ...................................................................................... 52
5.1.2 Recomendaciones ............................................................................. 54
Referencias ...................................................................................................... 55
GLOSARIO ................................................................................................... 59
ANEXOS .......................................................................................................... 61
xix
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla I. Operacionalización de variables ...................................................................... 5
Tabla II. Componentes de la hoja y semilla ................................................................ 11
Tabla III. Taxonomía del género cándida.................................................................... 28
Tabla IV. Prromedios de actividad del extracto etanólico de la semilla de noni frente al
s. aureus……………………………………………………………………………………….41
Tabla V. Promedios de extracto etanólico de la semilla de noni frente al e. coli ........ 42
Tabla VI. Actividad del extracto etanólico de la semilla de noni frente a
cándida……….42
Tabla VII. Promedio de la actividad del extracto etanólico de la hoja de noni frente a s.
aureus………………………………………………………………………………....……….42
Tabla VIII. Promedios de extracto etanolico de la hoja de noni frente a e. coli ........... 43
Tabla IX. Promedios de la actividad del extracto etanólico de la hoja de noni frente a
cándida…………………………………………………………………………………………43
Tabla X. Promedios de la actividad del extracto metanólico de la semilla de noni frente
al s. aureus ................................................................................................................. 44
Tabla XI. Promedios de la actividad del extracto metanólico de la semilla de noni frente
a e. coli…………………………………………………………………………………………44
Tabla XII. Actividad del extracto metanolico de la semilla de noni frente a cándida .... 45
Tabla XIII. Promedios de la actividad del extracto metanólico de la hoja de noni frente
a s. aureus .................................................................................................................. 45
Tabla XIV. Promedios de la actividad del extracto metanólico de la hoja de noni frente
a la e. coli ................................................................................................................... 46
Tabla XV. Actividad del extracto metanólico de la hoja de noni frente a cándida ....... 46
Tabla XVI.Comparación de extractos etanólicos de la semilla y hoja de noni frente al s.
aureus ........................................................................................................................ 47
Tabla XVII. Comparación de extractos etanólico de la semilla y hoja de noni frente a e.
coli .............................................................................................................................. 47
Tabla XVIII. Comparación de extractos etanólicos de la semilla y hoja de noni frente a
cándida ....................................................................................................................... 48
Tabla XIX. Comparación de extractos metanólicos de la semilla y hoja de noni frente a
s. aureus ..................................................................................................................... 48
Tabla XX. Comparación de extractos metanólicos de la semilla y hoja de noni frente a
e. coli .......................................................................................................................... 49
Tabla XXI. Comparación de extractos metanólicos de la semilla y hoja de noni frente a
cándida ....................................................................................................................... 49
xx
ÍNDICE DE ANEXOS
Anexo A. Recolección de la muestra (Frutos de noni) ...................................................... 58
Anexo B. Recolección de la muestra (Hojas de noni) ...................................................... 58
Anexo C. Filtración de los extractos etanólicos y metanólicos ......................................... 58
Anexo D. Antibiograma de extracto metanólico de la hoja de noni frente a e.coli ........ 58
Anexo E. Antibiograma del extracto metanólico de la hoja de noni frente al s. aureus
.................................................................................................................................................... .59
Anexo F. Antibiograma del extracto metanólico de la hoja de noni frente a la Cándida
..................................................................................................................................................... 59
Anexo G. Antibiograma del extracto metanólico de la semilla de noni frente al s.
aureus......................................................................................................................................... 59
Anexo H. Antibiograma del extracto metanólico de la semilla de noni frente a la e. coli
..................................................................................................................................................... 59
Anexo I. Antibiograma del extracto metanólico de la semilla de noni frente a la cándida
..................................................................................................................................................... 63
Anexo J. Antibiograma del extracto etanólico de la hoja de noni frente al s. aureus ... 63
Anexo K. Antibiograma del extracto etanólico de la hoja de noni frente a la cándida .. 63
Anexo L. Antibiograma del extracto etanólico de la semilla de noni frente a la e. coli . 64
Anexo M. Antibiograma del extracto etanólico de la semilla de noni frente al s. aureus
..................................................................................................................................................... 61
Anexo N. Antibiograma del extracto etanólico de la semilla de noni frente a la cándida,
repetición 3 ................................................................................................................................ 61
xxi
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA
UNIDAD DE TITULACIÓN
“EVALUACIÓN DE ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA EN EXTRACTOS
METANÓLICO, ETANÓLICO EN SEMILLA, HOJA DE NONI (Morinda
citrifolia L.), Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Cándida albicans”
Autor (es): SOLANGE ISBEL ALARCÓN BUSTAMANTE.
NICOLE ALEXANDRA VELARDE RODRÍGUEZ.
Tutor: Q.F MARIANITA DE JESÚS RENDÓN MARISCAL MSc.
Co-Tutor: Q.F GLENDA MARCELA SARMIENTO TOMALÁ.
RESUMEN
Los antibióticos son usados estrictamente para tratar infecciones bacterianas, cuando se
administran de manera incorrecta se adquieren resistencias a estos medicamentos, hoy en
día existe gran resistencia a los antibióticos comerciales por su mala administración o por la
incorrecta ingesta de dichos medicamentos, de manera que se pretende determinar si las
plantas poseen actividad antimicrobiana para así tener una alternativa a los antibióticos de
manera natural donde se llevó a cabo este trabajo investigativo en el que se realizó un
estudio de la actividad antimicrobiana de dos extractos alcohólicos (etanólico y metanólico)
en las semillas y hojas de Noni (Morinda Citrifolia L.) en las concentraciones de 100%, 75%,
50% y 25% con 3 repeticiones cada una, se utilizaron 3 cepas diferentes, dos de ellas de
microorganismos tales como Staphylococcus aureus y Escherichia coli y la levadura Cándida
albicans mediante el método de Kirby Bauer. Los resultados obtenidos indican una
actividad antibacteriana alta en los dos microorganismos, sin embargo, en la levadura se
observó baja o nula dicha actividad.
Palabras Claves: Antibióticos, Morinda Citrifolia, Kirby Bauer, actividad
antimicrobiana.
xxii
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA QUÍMICA Y FARMACIA
UNIDAD DE TITULACIÓN
“EVALUATION OF ANTIMICROBIAL ACTIVITY IN METANOLIC,
ETHANOLIC EXTRACTS IN SEED, NONI SHEET (Morinda citrifolia
L.), Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Candida albicans”
Autor (es): SOLANGE ISBEL ALARCÓN BUSTAMANTE.
NICOLE ALEXANDRA VELARDE RODRÍGUEZ.
Tutor: Q.F MARIANITA DE JESÚS RENDÓN MARISCAL MSc.
Co-Tutor: Q.F GLENDA MARCELA SARMIENTO TOMALÁ.
Abstract
Antibiotics are used strictly to treat bacterial infections. When antibiotics are administered
incorrectly, they develop a resistance to these medicines. Today there is a great resistance to
comercial antibiotics for their poor administration or for the incorrect intake of such medicine
in a way that there is a way to determine whether plants have antimicrobial activity in order to
have an alternative to antibiotics in a natural way. This research was carried out in which a
study of two alcoholic extracts (Ethanolic and methanol) in the seeds and leaves of the Noni
plant (Morinda Citrifolia L.) at concentrations of 100%, 75%, 50%, 25%, with 3 trials each, 3
different strains were used. Two of the strains used were from microorganisms such as
staphylococcus aureus and Escherichia coli and the Candida Yeast through Kirby Bauer’s
method. The results obtained indicate a high antibacterial activity in the two microorganisms;
however, in yeast it was observed a low or zero mentioned activity.
Keywords: Antibiotics, Morinda Citrifolia, Kirby Bauer, Microorganisms.
1
INTRODUCCIÓN
En la actualidad el interés por la búsqueda de propiedades naturales en
frutos o plantas ha crecido significativamente incluyendo el Noni (Morinda
citrifolia L.). El consumo es promocionado debido a las propiedades
funcionales que dice poseer, además se ha utilizado como suplemento
dietético o alimenticio por sus bondades nutricionales desde la antigüedad
principalmente en la Islas Japonesas, recalcando el aumento de la
resistencia a ciertos tipos de antibióticos que incrementa a diario
ocasionando que los tratamientos en cuestión no sé desarrollen de la
manera correcta debido a factores cómo la falta de conocimiento, la
automedicación y otros factores que ponen en riesgo el correcto
funcionamiento de los antibióticos , debido a esto se ha llevado a cabo el
desarrollo de este trabajo investigativo con el fin de evaluar la existencia o
no de actividad antimicrobiana en distintas parte del Noni cómo lo son la hoja
y su semilla frente a 3 microorganismos determinados (Torres, 2014).
De esta manera se puede corroborar si la información encontrada en la
literatura acerca de los posibles efectos que brinda el Noni es correcta o no y
a su vez proponer alternativas que sirvan cómo una solución eficaz y natural
para el tratamiento de aquellas infecciones que necesitan de manera
obligatoria la administración o aplicación de un antibiótico que si no es usado
de la manera adecuada desencadena procesos que ocasionan que los
microorganismos tiendan a mutar y adquieren gran resistencia a este tipo de
medicamentos logrando un resultado o mejoría ineficaz del tratamiento en
cuestión .
2
CAPÍTULO I PROBLEMA
I.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Los antibióticos se consideran medicamentos usados para tratar infecciones
de tipo bacteriana siempre y cuando se usen de manera correcta, cabe
recalcar que existe un problema creciente cómo es la resistencia a ciertos
antibióticos, esto se da debido a la administración de manera incorrecta de
los fármacos ocasionando que las bacterias muten y a su vez adquieran
resistencia a los efectos que brinda el medicamento (Ulloa, 2012).
El uso de sustancias naturales para tratamiento de diferentes enfermedades
en la actualidad se considera un desafío en la medicina, especialmente en
aquellas plantas que poseen efectos antibacterianos servirían como una
alternativa a la resistencia que se está dando en los antibióticos comerciales.
De tal manera que la propuesta de este trabajo investigativo está basada en
evaluar si existe o no actividad antimicrobiana proveniente del extracto
realizado a partes del fruto Noni (Morinda Citrifolia L.) cómo la semilla y la
hoja, con el fin de proponer como alternativa el uso de antibióticos naturales
que podrían ser usados para el tratamiento de infecciones ligeras y de esta
manera evitar acudir al uso de otros antibióticos que por su mal uso generan
resistencia innecesaria en la persona (Torres, 2014).
PROBLEMA
¿Cuál extracto posee efecto antimicrobiano frente a cepas de
Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Cándida albicans?
3
I.2 JUSTIFICACION E IMPORTANCIA
Nuestros antepasados encontraron en la naturaleza variedad de plantas que
de manera empírica hacían frente a muchas enfermedades, en la actualidad
la ciencia ha demostrado la efectividad de ciertos componentes fitoquímicos
presentes en las plantas capaces de inhibir algunos microorganismos
patógenos. La OMS (Organización Mundial De Salud) estima que el 80% de
los más de 4.000 millones de habitantes de la tierra confían en las medicinas
tradicionales para combatir sus principales necesidades de salud. Así como
el 80% de los habitantes de los países en vía de desarrollo (Ulloa, 2012).
Investigaciones indican que los extractos acuosos, oleosos y alcohólicos del
Noni presentan un efecto inhibitorio sobre ciertos microorganismos como
Staphylococcus aureus, Escherichia coli, y Cándida albicans. El contenido
de la semilla y hojas de Morinda Citrifolia L. poseen propiedades fitoquímicas
que otorgan beneficios tanto nutritivas, preventivas, farmacológicas y
antimicrobianas (Rivas, 2016).
Debido a la descripción de estos antecedentes en el presente trabajo
investigativo se determinará el efecto antimicrobiano del extracto metanólico
de la semilla y hojas de Morinda Citrifolia L. en distintas concentraciones
frente a cepas de Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Cándida
albicans (Hernandez, 2005).
4
I.3. HIPÓTESIS
Los extractos metanólico y etanólico de la semilla y hoja de Noni (Morinda
Citrifolia L.) poseen una actividad antimicrobiana mayor frente a: Escherichia
Coli, Staphylococcus aureus y Cándida albicans.
I.4. OBJETIVOS:
I.4.1. Objetivo General:
Evaluar la actividad antimicrobiana del extracto metanólico de la semilla y hoja
de Noni (Morinda Citrifolia L.) frente a cepas de Staphylococcus aureus,
Escherichia coli y Cándida Albicans.
I.4.2. Objetivos Específicos
1. Evaluar la actividad antimicrobiana del extracto metanólico de la semilla y
hoja de Noni (Morinda Citrifolia L.) mediante el método de Kirby Bauer.
2. Determinar a qué concentración los extractos obtenido de la semilla y hoja
de Noni (Morinda Citrifolia L.) se presenta mayor actividad antimicrobiana frente
a cepas de Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Cándida albicans.
3. Comparar los resultados de la actividad microbiana obtenida de las
diferentes concentraciones de los extractos de la semilla y hojas de Noni
(Morinda Citrifolia L.) frente a antibióticos comerciales relacionando las tres
cepas de microorganismos
5
I.5. OPERACIONALIZACIÓN DE LAS VARIABLES:
TABLA 1 OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES
TIPO VARIABLES CONCEPTUALIZACIÓN INDICADOR
DEPENDIENTE Actividad
antimicrobiana
Sustancia que elimina o
inhibe el crecimiento de
microorganismos, tales
como bacterias, hongos
o parásitos.
Milímetros en
halos de
inhibición.
INDEPENDIENTE Extracto
etanólico y
metanólico de
hoja y semilla
de Noni
Sustancia muy
concentrada que se
obtiene de una planta,
semilla u otra cosa por
diversos
procedimientos.
Concentraciones
100 g/ml, 75 g/ml,
50 g/ml y 25 g/ml.
Elaborada por Autores.
6
CAPITULO II
MARCO TEÓRICO
Los productos descritos cómo naturales se utilizan durante mucho tiempo en
muchas culturas a nivel mundial. Los científicos del área medicinal muestran un
gran interés en el campo de la medicina natural, reconociendo los verdaderos
beneficios que estos productos otorgan a la salud. Los compuestos
antioxidantes, que se encuentran presentes en forma natural en los alimentos,
cada día cobran mayor importancia debido al papel que desempeñan en la
salud, previenen y se encargan en eliminar aquellas sustancias potencialmente
generadoras de desórdenes y enfermedades en el ser humano. Existen frutas y
verduras que otorgan una gran acción contra muchas enfermedades por sus
propiedades y por su alto contenido de antioxidantes. (Hernandez, 2005)
Aquellos procesos conocidos como degenerativos se relacionan con la acción
de especies reactivas de oxígeno (EROS) que se encargan de dañar los
componentes celulares. Una de estas especies de plantas es la Morinda
citrifolia L. (noni), árbol de la familia Rubiácea. Investigaciones recientes
demuestran que el fruto del noni es el órgano de la planta que más se utiliza
como antiinflamatorio, antiséptico, antibacteriano, antiviral; antifúngico,
antitumoral, antihelmíntico, analgésico, hipotensor e
inmunoestimulante. Estudios que se han realizado en Cuba por el Centro de
Investigaciones y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM), demostraron que el
fruto presenta actividad antiinflamatoria y analgésica. (Ulloa, 2012)
Descripción Botánica
La planta de noni es un arbusto, que se compone de un tallo principal del
mismo que se desprenden cuatro ramas angulares y glabras. Las ramas
secundarias poseen nudos separados de donde emergen los racimos florales.
El tamaño máximo de crecimiento y desarrollo del árbol de noni se da en
aquellas zonas del país donde las temperaturas diurnas oscilan entre 25 y
30°C. (Torres, 2014)
7
De acuerdo con las características de las hojas son grandes de color verde
oscuro, son elípticas, ovaladas opuestas entre sí de 15 a 25 cm. de longitud, el
florecimiento y fructificación del noni se da de manera continua a lo largo de
todo el año. (Torres, 2014)
Características del fruto.
Los frutos de Morinda citrifolia L. se forman de flores independientes; es decir,
de una formación considerada múltiple de masa compacta, blanda y jugoso, es
de color verde en su etapa de formación y blanquecino o amarillo pálido
cuando alcanza la maduración, su longitud fluctúa de 4 a 8 cm. y el diámetro de
5 a 7 cm.(López, 2012)
El fruto presenta una cáscara que se encuentra cubierta por pequeñas
protuberancias, en cada una se encuentran semillas contenidas. Existe
documentación que describe el consumo de esta fruta cómo la fuente de
alimentación precedente al siglo XX. El Capitán James Cook, de la Armada
Británica, señaló a finales de la década de 1700 que la fruta se consumía de
manera abundante en Tahití. (Rivas, 2016)
En la antigüedad decían que el noni era muy diferentes a los otros frutos,
debido a esto fue traído a la nueva tierra por la capacidad de ayudar contra la
mayoría de las enfermedades. El conocimiento de cómo usar los
medicamentos herbarios se basaba en las historias y canciones de ciertas
familias, y era transferido de generación en generación. (Ulloa, 2012).
El noni mantiene un registro amplio en la historia medicinal de la población, sus
usos amplios como analgésico y antiinflamatorios nos permite guiar este fruto
como un posible medicamento herbario en uso definitivo para nuevas
generaciones. El noni como medicación herbaria tiene una base científica, por
lo cual, emplearlo en la actualidad para disminuir el consumo químico masivo
en la población con respecto a medicaciones como AINEs (fármacos
antiinflamatorios no esteroideos) tendría un mayor impacto positivo para la
salud y un menor riesgo de posibles efectos secundarios (López, 2012).
8
Distribución geográfica
Se la considera una planta nativa del suroeste de Asia y de las islas del
Pacífico. En Costa Rica la planta ha sido introducida en años recientes como
cultivo. Se tiene referencia que la planta crece con facilidad en zonas costeras
con alta humedad. Posee una enorme capacidad para sobrevivir en los
ambientes de condiciones desfavorables, por su extremada resistencia a los
suelos salinos. Además, da frutos durante todo el año con un tamaño
semejante al de una papa, de apariencia grumosa, con una cáscara serosa y
traslúcida, su color puede variar desde verde hasta negro, dependiendo de su
estado de madurez. (Hernandez, 2005)
Rendimiento
Normalmente se encuentran frutos en diferentes estados de madurez sobre la
misma planta y al mismo tiempo, esta especie generalmente se encuentra a
400 m de altitud sobre el nivel del mar, sin embargo, se adapta mejor a las
regiones costeras. (Foster, 2002)
Componentes del noni.
Ulloa (2012) afirma que:
Aproximadamente 160 compuestos fitoquímicos se han identificado en la
planta de noni, de los cuales los principales son compuestos fenólicos,
ácidos orgánicos y alcaloides, entre los compuestos fenólicos más
importantes están las antraquinonas, acubina, ácido asperulósido y
escopoletina; los principales ácidos orgánicos: caproico y caprilico
mientras que el principal alcaloide reportado es la xeronina, sin embargo,
la composición química varía grandemente dependiendo de la parte de la
planta que se analice.
9
PROPIEDADES REPORTADAS EN LA LITERATURA
Algunos estudios etnobotánicos realizados en comunidades campesinas no
indígenas que han establecido interrelación con su ambiente natural usando
plantas catalogan al Noni como un fruto con propiedades digestivas, tónicas,
estimulantes, nutritivas, proliferante celular, regulador endocrino, analgésico,
antiinflamatorio, antioxidante, vasodilatador, desintoxicante, antibacteriano.
La actividad biológica del noni se ha comprobado por sus diferentes efectos
antimicrobiano, antioxidante, antiinflamatorio, incluso hay evidencias de que
la Morinda Citrifolia L inhibe el crecimiento de bacterias como la Escherichia
coli, Shigella, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilus, es probable que este
efecto antimicrobiano se debe a compuestos fenólicos como escopoletina,
alizarina y otras antraquinonas, (Hernandez, 1996)
ACTIVIDAD BIOLÓGICA DE LOS DERIVADOS DEL NONI ACTIVIDAD
ANTIBACTERIANA
La xeronina en el noni
“El bioquímico Ralph Heinicke, plantea que la fruta del Noni contiene un
precursor natural para la Xeronina que denominó Proxeronina y que se
convierte en el cuerpo en el alcaloide Xeronina, debido a la acción de una
enzima llamada por él Proxeroninasa” (Torres, 2014).
Algunos autores han distinguido algunos grados de actividad antibacteriana
en las diferentes partes del noni, algunos de estos componentes como la
acubina o el L- asperulósido, han demostrado contener actividad
antibacteriana frente a diferentes cepas, como Proteus morgaii,
Staphylococcus aureus, Salmonella, Escherichia coli, Shigella y Bacillus
subtilus. (Hernandez, 1996)
10
USOS
Hernández (2009) indica que:
El noni está compuesto por dos sustancias muy importantes como la
xeronina, la cual es importante en el fortalecimiento físico y mental, los
polinesios utilizaron toda la planta en varias combinaciones como remedio
herbolario: las hojas las utilizan como desinflamante natural para la tos; las
raíces las utilizan para reducir la presión sanguínea; la corteza la utilizan
para tratar la malaria; las semillas por su acción purgante; las flores para
curar la vista, y sin embargo el fruto es el más importante porque con él se
curan innumerables enfermedades.
CONSTITUCIÓN QUÍMICA DE LA HOJA
Básicamente las hojas de la Morinda Citrifolia L está compuesta por
isoleucina, alanina, histidina, fenilalanina, metionina, triptófano, ácido
glutámico, tirosina, serina y a lo largo del tiempo se comprobó también la
existencia de antraquinonas, resinas, componentes fenólicos y glicósidos.
(Scheter, 1999)
SEMILLAS
“Las semillas del noni son autosuficientes, y es que germinan mejor cuando
no reciben una atención especial. De la noche a la mañana, un brote se
convierte en un gran racimo” (Montalvan, 2018).
Algunos reportes realizados en trabajos de estudio en Guatamela confirman
la existencia de metabolitos en la semilla de noni que inhiben algunos
microorganismos como Bacillus, Shigella, Staphylococcus aures, Escherichia
coli, estas evidencias se han dado por presencia de compuestos fenólicos
como la escopoletina, acubina y otras antraquinonas. (Torres, 2014)
11
TABLA 2 COMPONENTES DE LA HOJA Y SEMILLA
PRINCIPIO ACTIVO BENEFICIO HUMANO
Acubina, L-asperulósido y alizarina Antibacterianos contra Pseudomonas
aeruginosa, Proteus morgaii,
Staphylococcus aeureus, Baciilis
subtilis, Escherichia coli, Salmonella y
Shigella
Adriamicina Anticanceroso.
Varias aplicaciones clínicas del Noni
como agente complementario para el
tratamiento del cáncer
Asahina Efectos anticancerosos; inhiben la
producción del factor de necrosis
tumoral alfa (factor endógeno que
promueve el crecimiento tumoral)
Antraquinonasa Antibacteriano; contiene sustancias
amargas que ayudan a la digestión,
Actúa contra infecciones producidas
por la Shigella y los Staphylococcus
Ácido caproico Insecticida
Ácido urónico Contiene ácido glucurónico que es
sintetizado en el hígado para la
desintoxicación
Alimemacina Bloqueador del receptor de la
histamina H1 (neuroléptico),
antitóxico
Ácido caprilico Antimicótico
Flavonoides Hepatoprotector; aliado eficaz contra
los perjudiciales radicales libres,
responsables del envejecimiento
prematuro y degeneración de las
células
12
Cisplatino Efecto anticanceroso
Cistina Hematopoyético; ayuda en casos de
anemia perniciosa, daños debidos a
carencia de proteínas, enfermedades
que afectan a la piel, afecciones
hepáticas
Damnacantal Anticanceroso. En la medida en que
el damnacantal detiene el crecimiento
de los tejidos malignos, la xeronina va
reparando el tejido, hasta controlar el
desfase en el proceso reproductivo
de las células y estimulando al
sistema inmunológico para acelerar el
proceso de leucocito génesis
(formación de nuevos leucocitos)
Escopoletina Dilata los vasos sanguíneos, se une a
la serotonina contribuyendo a llevar la
tensión arterial a su nivel normal,
pero no a un nivel inferior, a la vez
que mejora la circulación y la
oxigenación
Ácido etanólico Antiparasitario. Potente contra
Ascaris lumbricoides
Fenilalanina Aminoácido. Muy importante para
todo el metabolismo. Está presente
en casi todas las proteínas.
Glicina Portador de la estructura del
colágeno; controla, juntamente con
GABA, el neurotransmisor inhibidor
más importante de la motricidad;
curación de heridas.
Glicósidos Efectivos inhibiendo la transformación
celular inducida por Activador Tisular
13
del Plasminógeno (TPA) o Factor de
crecimiento epidérmico. (EGF)
Histamina A través de los receptores (histamina)
(H1) regula la contracción de la
musculatura lisa del intestino, del
útero, de los bronquios.
Morindadiol Efecto anticancerígeno; algunas
evidencias sugieren su uso clínico
Oligoelementos Importantes para el mantenimiento de
lo biosíntesis. Intervienen en casi
todas las reacciones bioquímicas
Óxido nítrico Vasodilatador, protector de mucosa
del sistema digestivo y respiratorio
Alanina Aminoácido, importante para el
metabolismo de los azúcares y de los
ácidos orgánicos, dietética; terapia
del hígado
Proxeronina Forma parte del punto de partida en
la biosíntesis de la Xeronina,
ayudando en la catálisis y actuando
con ayuda de la Proxeronasa se
convierte junto a la serotonina en
Xeronina
Elaborada por (Cabrera, 2012)
Enterobacterias.
“La familia Enterobacteriaceae se cataloga cómo grupo numeroso y
heterogéneo de bacilos gramnegativos, se encuentran principalmente en el
suelo, vegetación o agua; algunos a su vez forman parte de la flora intestinal
del hombre y la mayoría de los animales” (Barranco, 2007). Existen
miembros de esta familia que son considerados cómo patógenos primarios,
ya que siempre se asocian a enfermedades cuando son aislados en
muestras clínicas.
14
Dentro de los microorganismos considerados más problemáticos y que a su
vez forman parte del diario vivir en los hospitales se encuentran de manera
muy habitual las enterobacterias.
“Las enterobacterias hacen parte de los microorganismos más importantes
desde el punto de vista médico ya que causan diversas enfermedades y
posen betalactamasas, que se encargan de inactivar algunos
antimicrobianos” (Barranco, 2007)
Este tipo de bacterias se caracterizan partiendo del punto de vista
microbiológico cómo bacterias no esporuladas con crecimiento en
condiciones de aerobiosis y anaerobiosis o sea, son anaerobios facultativos;
que potencialmente reducen los nitratos a nitritos, a la vez existen algunas
excepciones; que se encargan de fermentar la glucosa ya sea con o sin
formación de gas; demuestran negatividad a la prueba de la oxidasa; no
aumentaran su crecimiento en un medio hipertónico y pueden llegar a ser
móviles, todo depende de la presencia o no de flagelos o si se trata de
microorganismos inmóviles. (Arenas, 1993)
De manera que este grupo es clasificado cómo las responsables de las
bacteriemias, gastroenteritis y en menor porcentaje aquellas infecciones a
nivel del tracto urinario. (Barranco, 2007)
Eisentein & Zaleznik (2000) afirman que:
Consideran que las enterobacterias se catalogan una familia heterogénea
y muy amplia del grupo de bacilos gran negativos que de manera usual
son residentes en el colon del hombre sin causar enfermedades, aunque
de manera frecuentes son las principales causantes de enfermedades de
tipo infecciosas, ya sea en pacientes que presenten inmunidad
conservada cómo en aquellos catalogados cómo inmunodeprimidos.
Las enterobacterias, de manera especial aquellas que se encargan de
producir BLEE, son las que a nivel mundial ocasionan problemas más
graves, que a su vez en conjunto con otros grupos presentan resistencia
antimicrobiana, de manera que se incluyen las quinolonas, aminoglucósidos
entre otros, lo que deja como causa principal la morbilidad de los pacientes,
15
el aumento masivo de costos y la creciente estadía intrahospitalaria.
(Farmer, 1995).
Martínez & Calvo (2010) consideran que:
A finales de los años noventa en gran parte la mayoría de BLEE. Eran
aisladas en cepas de K. pneumoniae qué se encontraban relacionadas en
brotes de tipo nosocomial, actualmente la atención se centra en el cambio
epidemiológico que se está produciendo en cuanto a los tipos de BLEE más
prevalentes y su distribución, con mayor presencia en Escherichia coli
procedente del medio extrahospitalario (principalmente en aislamientos de
muestras urinarias)
Las infecciones que se producen por bacteriemia son muy similares unas de
otras.
Eisentein & Zaleznik (2000) afirman que:
En la bacteriemia por enterobacterias puede producirse tanto leucocitosis
como leucopenia, que casi siempre cursa con trombopenia, la aparición
de shock conduce a la insuficiencia renal por necrosis tubular, los
estudios de hemo química traducirán afectación en cada órgano
disfuncional o en falla, como aumento de bilirrubina sérica y de las
enzimas hepáticas, trastornos hidroelectrolíticos y del equilibrio acido/
base, evidencia de injuria pulmonar en la gasometría, entre otras. De
manera que, si la infección aumenta de manera agresiva, llegara a causar
daños considerados irreversibles en los órganos afectados por la
diseminación de la bacteria.
Género Escherichia:
“Es una bacteria de tipo anaerobia facultativa “Escherichia coli es
considerado un bacilo gramnegativo, perteneciente a la familia
Enterobacteriaceae, tribu Escherichia, esta bacteria coloniza el intestino del
16
hombre pocas horas después del nacimiento” (Farmer, 1995, pág. 440).De
tal manera que es considerado como un microorganismo de flora intestinal
normal, pero cabe recalcar que existen cepas que pueden llegar a ser
patógenas.
Existe una respectiva clasificación de las cepas de E. coli.
“Con base en su mecanismo de patogenicidad y cuadro clínico, las cepas
de E. coli causantes de diarrea se clasifican en seis grupos:(ETEC), (EHEC
o VTEC o STEC), (EIEC), (EPEC), (EAEC) (DAEC)” (Nataro & Karper, 1998,
pág. 145).
EPIDEMIOLOGÍA
Lavilla et al. (2008) Afirma que:
Se considera cómo reservorio de E. coli con BLEE (Betalactamasas de
espectro extendido) al tracto digestivo, y su transmisión se da con mayor
rapidez por el contacto existente a través de las manos, habiéndose
descrito transmisión plasmídica y bacteriana de estas enzimas entre
personas en contacto estrecho, también se ha considerado que ciertos
alimentos de origen animal, principalmente en relación con las aves de
corral, podrían ser fuente principal de transmisión de enzimas BLEE al
hombre.
Tipos de cepas
E. coli enterotoxigénica
Epidemiología
Frecuente en países subdesarrollados, de manera general son casos de
diarrea en viajeros.
Factor de virulencia.
17
Las ETEC se encargan de colonizar la mucosa del intestino delgado
mediante el pilis o fimbrias que constan de diversas formas, siendo su
principal mecanismo de patogenicidad.
Nataro & Carper (1998) deducen que:
Las ETEC son importantes en lactantes, principalmente en niños
menores de dos años, y en particular durante los primeros seis meses
de vida, la frecuencia de aislamiento de este grupo patógeno de E.
coli en niños con diarrea es de 10 a 30%, en los niños en edad escolar y
en adultos puede ser asintomática y poco frecuente o producir la diarrea
del viajero, la enfermedad tiene un periodo de incubación de 14 a 50 el
cuadro clínico se caracteriza por diarrea aguda, generalmente sin
sangre, sin moco, sin pus y en pocos casos se presentan fiebre y vómito.
E. coli enterohemorrágica
Epidemiología.
Frecuente en países desarrollados.
Clínica
“El aspecto clínico se relaciona con brotes caracterizados por dolor abdominal,
diarrea acuosa con sangre y poco o nada de fiebre, cuadro al que se le llamó
colitis hemorrágica (CH) y que era debido a la ingestión de carne cruda o mal
cocida” (Konowalchuk, Speirs, & Stavirc, 1997).
Factor de Virulencia
O'Brien & Holmes (1987) Consideran:
Es necesario que la cepa adquiera una capacidad toxigénica necesaria
para que el paciente desarrolle anomalías cómo colitis hemorrágica y
18
diarrea con sangre, la citotoxina STX es el principal mecanismo de
patogenicidad de EHEC y su síntesis está relacionada con la presencia
del bacteriófago STX, la STX actúa a nivel de síntesis de proteínas ya que
se une a la subunidad 60S de los ribosomas de las células intestinales o
renales del hospedero.
De manera que la genética juega un papel fundamental en la acción de estas
cepas desencadenando factores patogénicos graves.
E. coli entero invasiva
Epidemiología
Frecuente en países que son subdesarrollados, de manera general son casos
de diarrea del viajero 0 de origen alimentario por alimentos importados.
Clínica
Diarrea sanguinolenta febril, síndrome hemolítico urémico.
Factor de Virulencia
Este tipo de cepa se lo relaciona con la genética y la bioquímica, de manera
que son consideradas cómo descarboxilasas negativas que a su vez son no
móviles.
Croxen (2013) afirma que:
Las cepas EIEC se internalizan y reproducen dentro del citoplasma de las
células epiteliales, a las que destruyen, también penetran a los macrófagos,
estas cepas pertenecen a un grupo reducido de serotipos que se parecen
bioquímica y antigénicamente al género Shigella, diversos estudios han
concluido que además de genes cromosómicos involucrados en la virulencia,
EIEC porta un plásmido de 140 mega dáltones (mDa) indispensable para
conferir el fenotipo invasivo a estos microorganismos.
“Las cepas EIEC se asocian más con brotes que con casos aislados, en los
cuales la transmisión es de persona a persona, por ingestión de alimentos y
agua contaminada, convirtiéndose en un patógeno importante en niños
mayores de seis meses” (Farmer, 1995).
19
De tal manera que se recomienda el mayor cuidado y precaución al momento
de adquirir alimentos que no hayan pasado por un proceso de lavado o de
ingesta de agua que está catalogada de no consumo humado debido a los
factores que se asocian a la presencia de esta cepa, cómo puede ser la
adquisión de agua de pozos, ríos o estanques.
E. coli enteropatógeno
Epidemiología
Frecuente en países desarrollados, a su vez se encuentra en niños menores a
2 años.
Clínica
Presencia de diarrea líquida con moco, fiebre y vómitos.
Factor de Virulencia
Knutton, Lloyd, & Neish (1987) concuerdan que:
Este fue el primer grupo que se identificó de manera serológica, y se la
relaciono en los casos de diarrea en infante, el proceso de adherencia
íntima entre la bacteria y la membrana de las células del epitelio intestinal,
seguida de la destrucción de la microvellosidad, con polimerización de
actina, que lleva a la alteración del cito esqueleto en el sitio de la unión de
la bacteria, debido al aumento de los niveles de calcio intracelular.
El desarrollo excesivo de ciertas anomalías viene de la mano con el incremento
de infecciones debido al alto porcentaje de resistencia antimicrobiana existente
Se considera que las enfermedades de tipo infecciosa influyen de manera
determinante en la evolución de la historia del hombre, ya que hoy en día son
la principal causa directa del incremento de la morbilidad a nivel mundial, pese
a que diariamente se descubren agentes de tipo antimicrobianos más efectivos
y potentes para el tratamiento de estas anomalías.
20
Este tipo de infecciones se enlista cómo el principal problema que se presenta
en el paciente que se encuentran en estado crítico, mientras que seguido de
esto una cuarta parte de las infecciones que se presentan de los hospitales
ocurren en el área de terapia intensiva de manera más agresiva que en otros
pacientes alojados en otras áreas.
Según el Ministerio de Salud Pública (MINSAP, 1998) “El laboratorio de
Microbiología juega un papel importante a la hora de informar el diagnóstico
respectivo, a su vez ayudar y orientar con la terapéutica indiada basándose en
los estudios que reflejan los patrones de aquellas cepas que presentan
resistencia”.
Livermore (2003) Considera:
Que los Perfiles de Sensibilidad y los Mecanismos de Resistencia difieren
de las Naciones Unidas Lugar un Otro; es más, dentro de un mismo
hospital la distribución de la resistencia cambia entre los diferentes
servicios, clasificando cómo las principales causas del desarrollo de
enfermedades infectocontagiosas: inmunosupresión, previa
hospitalización, excesos en los días de estancia en los hospitales.
Familia Microcaceae:
Se los considera de tipo Gram positivos, a su vez no formadores de esporas
y principalmente viven de manera libre, sus formas van desde esferoidales,
esféricas.
Harris, Foster, & Richards (2002) determinan que:
Los estafilococos fueron clasificados en un inicio en un género común en
la familia Micrococacea además de los géneros Micrococcus,
Stomacoccus y Planococcus, sin embargo, en estudios recientes se
observaron diferencias con estos géneros, siendo una de las principales
la cantidad de guanina-citocina (G+C de 30 a 39%), mientras que los
Micrococcus tienen un contenido mayor de G+C de 63 a 73%, siendo esta
la principal característica para marcar diferencia en estos géneros.
Fox et.al (20017) establecen que:
21
Su principal característica se basa en cómo se dividen sus agrupaciones,
las cuales asemejan racimos de uva y, a la fecha, se han reportado 35
especies conocidas con 17 subespecies en el género Staphylococcus.
Este género cuenta con una gran capacidad de adaptación, por lo que
afectan directamente a todas las especies conocidas de mamíferos. De
manera que se propaga fácilmente, y su transmisión es frecuente de una
especie a otra, causando el aumento de la incidencia bacteriana.
Principalmente se localizan en los humanos, algunas forman parte normal del
microbiota de la piel y mucosas, y otras se encuentran entre la flora de otros
mamíferos y distintivos tipos aves. Estas especies son patógenas cuando
existe predisposición o inmunosupresión en el huésped o por la presencia de
cuerpos extraños. De manera general, cada especie tiende a ocupar una
localización específica para el huésped que coloniza.
Moreillon, Que, & Glauser (2005) Señalan:
Que las de mayor importancia clínica son: S. aureus y Staphylococcus
lugdunensis; en tanto que en animales se encuentra además de S. aureus
a Staphylococcus intermedius, el Staphylococcus epidermidis y el
Staphylococcus saprophyticus son comúnmente responsables de
infecciones relacionadas con dispositivos e infecciones del tracto urinario,
siendo estos menos infecciosos que S. aureus.
Género: Staphylococcus aureus
Es considerado como un microorganismo que se encuentra mayormente
distribuido en el ambiente, y a su vez posee características particulares tanto
de virulencia y resistencia contra antibióticos.
Harris et.al (2002) afirman:
Representa un grave problema de salud, esto es, gracias a que su
distribución se extiende a nivel mundial y el impacto en la morbimortalidad
es considerable a nivel comunitario e intrahospitalario. Se ha descrito que
en los humanos es causante de enfermedades infecciosas ocasionando
22
alta resistencia en algunas ocasiones.La incidencia bacteriana en estos
últimos años ha aumentado progresivamente debido a que una especie
en especial aumenta su frecuencia de aparición y desarrollo de
enfermedades.
Rasmussen, Fowler, Skov, & Bruun, (2011) manifiestan
Que Staphylococcus aureus, se ha convertido en la principal causa de
infecciones en el torrente circulatorio (BSI) e intoxicaciones ocasionadas
por alimentos, estos brotes están surgiendo de manera alarmante en la
mayoría de los países. Lo que deja cómo consecuencia principal la fácil
diseminación de esta bacteria.
Bustos, Hamdan, & Gutiérrez (2006) indican:
Que, de manera general, que los componentes del microbio son
peptidoglicanos y ácidos teicoicos, además de la proteína A, así pues, la
patogenia provocada por este microorganismo surge cuando se produce
la combinación de los factores de virulencia con la disminución de las
defensas del huésped; estas condiciones propician que Staphylococcus
aureus posea características de virulencia y daño bastante particulares.
Esta bacteria es considerada una de las más importantes, no sólo por que
desencadena enfermedades infectocontagiosas, sino porque a su vez es la
principal causante de las ETA, enfermedades trasmitidas por los alimentos
(Tibadizco, Rodriguez, Silva, Cuervo, & Cortés, 2007) Refieren:
Que lo preocupante del caso es que estas se encuentran presentes en el
aire, la leche, el agua potable, las aguas residuales y, desde luego, la
comida o en el equipo donde los alimentos han sido elaborados; así
pues y aunado a esto, a partir de la década de los 80, se ha
incrementado el número de bacteriemias producidas por Staphylococcus
aureus, por lo tanto, es fácil adquirirla en la comunidad o en el ámbito
hospitalario.
23
Epidemiología
Lowy (2003) precisa que:
S. aureus se considera uno de los patógenos más importantes a nivel mundial,
se trata de una bacteria oportunista que forma parte de la microflora humana
normal: poco después del nacimiento, los neonatos son colonizados por S.
aureus, los sitios de colonización incluyen el muñón del cordón umbilical, el
área perineal, la piel y, a veces, el tracto gastrointestinal, se trata de una
bacteria que está presente desde el nacimiento, y puede llegar a expandirse
ocasionando infección en el sitio que coloniza. (Arenas, 1993)
La colonización más frecuente por S. aureus se da en la mucosa nasal, el
principal reservorio lo constituye el hombre enfermo o el portador de la bacteria.
Es más frecuente la colonización en el hospital, en pacientes que se hagan
hemodiálisis, pacientes diabéticos tipo 1, pacientes que presenten lesiones
cutáneas, sujetos infectados con VIH y adictos a las drogas. (Bustos, Hamdan,
& Gutiérrez , 2006)
Enfermedades causadas por S. aureus
Las infecciones que son ocasionadas por S. aureus se producen por la
presencia de lesiones cutáneas, traumáticas o quirúrgicas que ayudan a la
penetración de la bacteria desde la piel a los tejidos profundos. Las infecciones
por S. aureus son supurativas y tienden a generar abscesos.
Moreillon, Que, & Glauser, (2005) identifican a este tipo de bacteria por
ser potentes formadoras de: bacteriemia, infecciones del sistema nervioso
central, osteomielitis, infecciones del tracto respiratorio, infecciones del
tracto urinario y el síndrome de choque tóxico, así como infecciones
gastrointestinales, las infecciones de la piel y tejidos blandos se
caracterizan por la formación de vesículas
Las neumonías que se originan por presencia de S. aureus son poco
frecuentes, pero se consideran graves, se puede generan por aspiración de
24
secreciones orales o por diseminación hematógena. La neumonía por
aspiración de adquisición comunitaria es producida por complicación de
cuadros virales, y la nosocomial es más frecuente en pacientes con ventilación
mecánica. La complicación más frecuente de la neumonía es el empiema.
(Baca, Drexler, & Cullen, 2001)
Factores de virulencia de Staphylococcus auerus
La bacteria Staphylococcus aureus es considerada actualmente la principal
responsable de la mayoría de las enfermedades estafilocócicas. Supone un
problema grave de salud por su capacidad destructora y su resistencia a
múltiples antimicrobianos. En el proceso de infección, son claves los factores
de virulencia que presenta esta bacteria. Por lo tanto, es fundamental conocer
estos factores y las enfermedades que pueden provocar. (Cornaglia, 2004)
Los seres humanos constituyen el principal reservorio en la naturaleza cuando
las defensas del hospedador se ven comprometidas o presenta defensas bajas.
Estas infecciones causadas por esta bacteria son principalmente endógenas, la
colonización del hospedador desempeña un papel básico en su epidemiología
Pérez (2006) considera:
S. aureus forma parte del microbiota normal de la piel, pero, a su vez,
supone uno de los motivos principales de preocupación en salud pública
por su capacidad destructora y resistente a toda clase de antimicrobianos,
esta bacteria es el agente causal de la mayoría de las infecciones
estafilococales y está asociada a enfermedades tanto nosocomiales como
extra hospitalarias, las infecciones causadas por esta bacteria incluyen
osteomielitis, neumonía, sepsis, endocarditis, cerebritis, meningitis,
síndrome de la piel escaldada.
“Los individuos sanos muchas veces transmisores de enfermedades a
individuos inmunodeprimidos, las infecciones estafilocócicas graves ocurren
cuando la resistencia del hospedador es baja debido a enfermedades
debilitantes, heridas o tratamientos con esteroides u otros fármacos que
comprometen el sistema inmunitario” (Madigan, 2009, págs. 491-1171).
25
“Los factores de virulencia son moléculas producidas por bacterias que tienen
la capacidad de provocar enfermedades, S. aureus produce factores de
virulencia, como proteasas, factores inmunomoduladores y toxinas tales como
hemolisinas, enterotoxinas, leucocidinas, toxinas exfoliativas y adhesinas”
(Foster, 2005, págs. 948-958).
Las toxinas dañan directamente los tejidos o poner en marcha actividades
biológicas destructivas, estas actividades están producidas por componentes
de la pared celular, por enzimas degradativas producen la lisis de células y por
células que se unen a receptores específicos (Murray, 2003). Esto puede
desencadenar reacciones que se consideran tóxicas en un tejido diana
específico.
Enzimas.
S. aureus produce un número significativo de exoenzimas, proteínas de
membranas activas (hemolisinas y leucocidinas), también toxinas involucradas
en las enfermedades.
“Existen proteínas, cómo se mencionó anteriormente, que se unen a la capa
externa del peptidoglicano con la ayuda de enlaces covalentes que ayudan a la
adhesión del microorganismo como la proteína fijadora al colágeno, proteína
fijadora de fibronectina” (Roche, Massey, & Peacock, 2003)
Toxinas.
Algunas cepas de S. aureus sintetizan proteínas extracelulares adicionales que
van a producir su acción en zonas distantes del foco infeccioso. Su expresión
se regula por el gen accesorio regulador de proteínas agr, que son codificadas
por DNA cromosómico o por plásmidos. Entre las más importantes se
encuentran:
Las hemolisinas. “Se identifican cuatro hemolisinas como: alfa, beta, gamma,
delta, que sintetizadas por la mayoría de las cepas de S. aureus, tienen
capacidad hemolítica y citolítica, actuando sobre determinadas células” (Roche,
Massey, & Peacock, 2003).
Diagnóstico
26
Livermore (2003) asegura:
Que entre dichas muestras se encuentra en la sangre, tejidos, líquidos
normalmente estériles, aspirados de abscesos, las cuales al ser teñidas
con la tinción de Gram permiten observar la forma y agrupación, así como
una respuesta inflamatoria con la presencia de leucocitos
polimorfonucleares
Medios de aislamiento
En los medios de cultivo la mayoría de las especies tienden a crecer después
de incubarse durante 18-24 horas, forman colonias de 0.5-1.5 mm de diámetro.
Las colonias de S. aureus se presenta lisas, brillantes, elevadas y con
bordes enteros.
Hamell & Boyce (2010) consideran que:
S. aureus crece bien en medios de cultivos no selectivos, como el agar
sangre, agar chocolate, cerebro corazón infusión agar (BHI, por sus siglas
en inglés) y medios líquidos para hemocultivo donde se recupera
fácilmente, se debe usar un medio selectivo en muestras clínicas donde
hay bacterias Gram negativas junto con S. aureus.
En la actualidad han sido desarrollados distintos medios de cultivo que
contiene agar base cromogénico específico para la detección de S. aureus
resistentes a la penicilina de muestras clínicas; en presencia de enzimas
específicas, los sustratos se modifican y los cromógenos van a teñir
específicamente las colonias, permitiendo la identificación directa de S.
aureus. (Bustos, Hamdan, & Gutiérrez , 2006)
“Estas variantes de colonias pequeñas de S. aureus se aíslan con mayor
frecuencia en muestras clínicas de pacientes con infecciones como fibrosis
quística y osteomielitis crónica en pacientes con prótesis pacientes con
tratamientos prolongados con aminoglucósidos y trimetoprimsulfametoxazol”
(Compernolle, Verscheraegen, & Claeys, 2007).
27
Levaduras
Levadura se refiere básicamente al grupo de hongos cuya forma es
unicelular, donde las hifas y/o pseudohifas pueden o no estar presentes, su
fase sexual es teleomorfa o perfecta, cabe recalcar que aquellas levaduras a
las que no se le conoce su fase sexual, pero si la fase anaforma, son
denominadas cómo formas semejantes a las levaduras, las mismas que
tienen una reproducción que se basa en la gemación. (Cruz, 2014)
En lo que se refiere a la ubicación taxonómica, el último grupo se lo ubica en
la división correspondiente a Deuteromycotap también conocidos como
hongos anamorfos, de la clase Blastomycetes o levaduras. En lo que
corresponde al grupo teleomorfo, es decir que la célula haploide de la
levadura va a conjugarse y dará origen a asco con sus ascosporas, se
incluyen en la división Ascomycota, de la clase Ascomycetes. (Cruz, 2014)
Como identificar las levaduras
“En la actualidad se cuenta con diversos métodos, los cuales varían en
tiempo, especificidad, sensibilidad, costos, etc. De esta manera, cada
laboratorio puede adoptar los más acordes a su capacidad y disponibilidad”
(Freydiere & Guinet, 1997). Pero cabe recalcar que es un requisito
indispensable para utilizar estas técnicas se basa el personal bien
capacitado para la aplicación e interpretación de los resultados.
Las técnicas de identificación pueden ser agrupadas en:
1. Estudio morfológico
2. Estudio fisiológico y bioquímico
3. Métodos automatizados
4. Medios diferenciales o de identificación directa
5. Métodos inmunológicos
6. Biología molecular, y otros como son estudios quimio taxonómicos
(Freydiere & Guinet, 1997).
28
Las dos primeras técnicas comprenden a diversos ensayos, los mismos que
se conocen por lo general como pruebas convencionales para la
identificación.
Género Cándida
“En cuanto a hongos patógenos en humanos, existen cerca de 200 especies
que han sido reconocidas; de estas, alrededor de 30 son levaduras de
interés médico” (Fisher & Cook, 1998).
Desde el punto de vista clínico, siguen siendo relevantes las del género
Cándida, las mismas que forman parte de la flora normal del organismo. Se
consideran agentes causales de candidiasis micosis oportunista, aguda,
subaguda o crónica, de alta incidencia en nuestro medio y a nivel mundial;
afectando a individuos de cualquier edad, raza o sexo, siendo estos los
mismos factores predisponentes del huésped, los que favorecen el
desarrollo de la infección. (Tortora, 2007)
TABLA 3 TAXONOMÍA DEL GÉNERO CÁNDIDA
Reino Fungi
División Ascomycota
Clase Ascomycetes
Orden Saccharomycetales
Familia Saccharomycetaceae
Elaborada por (Fisher & Cook, 1998)
“En cuanto a la incidencia, en los últimos 20 a 30 años se ha elevado el
número de casos de candidiasis, siendo hasta el presente Cándida albicans
el principal agente causal, encontrándose entre un 60-70% de los
aislamientos clínicos” (Fisher & Cook, 1998).
Arenas (1993) considera que:
En nuestro medio se reportó un 36% de muestras positivas para levaduras,
un 25% de casos de micosis superficiales, entre 4-18% de casos en recién
29
nacidos, 20-30% de casos de vulvovaginitis, 15-17% en embarazadas, y
entre 80-90% de casos en enfermos con SIDA.
Mendoza, Russian, Villanueva, Torres, & Abonorz (1992) afirman que:
En función de sus características antigénicas, C. albicans ha sido
clasificada en dos serotipos, A y B, por ensayos de aglutinación con
sueros de pacientes de candidiasis, siendo el serotipo A el más frecuente
a nivel mundial, en nuestro medio y en pacientes con SIDA.
Las especies de Cándidas son descritas cómo obicuas dentro de ellas se
encuentra la cándida que es la que comúnmente produce infecciones de tipo
oral.
Factores etiopatogénicos
La presencia de Cándida en la cavidad bucal se da de manera frecuente y
varía entre el 20 % y 70% según indican algunos estudios, siendo cándida
albicans la especie más aislada de manera específica. La aparición de
candidiasis se da por la invasión de toda la superficie de la mucosa por el
hongo. En este caso es Cándida albicans el germen que se aísla con mayor
frecuencia, junto a otras especies como Cándida glabrata, Cándida
parapsilosisy Cándida krusei. La existencia de dos o más especies de
Candida en la misma muestra tampoco es un hecho infrecuente en un
10%de todos los casos. (Rivas, 2016)
La patogénesis de la candidiasis oral se conoce cómo compleja e implica
diferentes factores y mecanismos usados por los hongos y el hospedador.
La posibilidad de que Cándida empiece a colonizar las superficies orales
depende de factores cómo la efectividad de los mecanismos de defensa del
hospedador, cómo de la capacidad de adhesión que posee el hongo y del
poder de crecimiento. (Fisher & Cook, 1998)
Aspectos terapéuticos
Según (Livermore, 2003):
30
El tratamiento efectivo para la candidiasis está basado en 4 pilares
fundamentales:
•Realización de un diagnóstico certero de la infección.
• Corrección de los factores facilitadores o de las enfermedades
subyacentes.
• Determinar tipo de infección candidiásica.
• Uso de fármacos antifúngicos apropiados.
“Se ha utilizado algunos productos considerados clásicos en el tratamiento
de las candidiasis orales como la tintura de violeta de genciana, que no
tienen hoy en día una indicación y su uso es muy engorroso e incluso
peligroso” (Baca, Drexler, & Cullen, 2001).
“En las candidiasis orales el tratamiento farmacológico debe ser inicialmente
tópico y en casos graves o resistentes la terapia debe ser combinada
sistémica y tópica, los grupos principales de antifúngicos, polifónicos y
azólicos, son útiles para tratar estas infecciones” (Quindós, Ribacoba,
Contreras, & Aguirre, 1996).
Resistencia a los antibióticos
Hoy en día uno de los temas con más interés científico es el desarrollo
creciente de la resistencia que presentan distintos microorganismos al
momento de ser tratados.
Cornaglia (2004) refiere:
La resistencia a los antibióticos se ha convertido en un importante
problema de potencia mundial, las infecciones causadas por
enterobacterias son resistentes a múltiples antibióticos, de manera que a
menudo el mal uso que se le brinda a los antibióticos, la falta de
conocimiento y la automedicación por parte de las personas ha sido el
factor principal para desencadenar el aumento a la resistencia de estos,
ocasionando problemas de salud crecientes a nivel mundial
31
En la actualidad la alta concentración bacteriana y a la vez el uso abusivo de
antibióticos convierte al ambiente hospitalario en un lugar propicio para que
se desencadene la resistencia, de manera que no resulta extraño tratar
cepas consideras endémicas que demuestren multiresistencia.
Resistencia a métodos comerciales
Ingraham (1998) refiere que:
La patogénesis es la capacidad que posee un microorganismo para
causar una determinada enfermedad, dicha capacidad depende de que la
bacteria pueda superar los obstáculos que pone de manifiesto el
hospedador para evitar o impedir el proceso de infección, para combatir la
invasión por dichos microorganismos al hospedador se le administran
sustancias químicas que tienen un efecto inhibitorio o letal en las
bacterias que provocan dicha infección, dichas sustancias son conocidas
como antimicrobianos.
Los antimicrobianos actúan como bactericidas según la clase de
antimicrobiano, así como la sensibilidad que el microorganismo presente
ante dicho compuesto. En términos de sensibilidad podemos encontrarnos
con antibióticos que no causan efectos en los microorganismos, es decir que
la bacteria es resistente a dicho antimicrobiano. De esta manera, teniendo
en cuenta el patrón de sensibilidad o resistencia que presenten, se pueden
clasificar en compuestos de amplio espectro o espectro reducido. (Martínez
M. , 1995)
Las resistencias que presentan las bacterias a los distintos antibióticos se
pueden dividir en naturales (o innatas) y adquiridas por variación genética.
La resistencia natural a determinados agentes antimicrobianos es una
propiedad exclusiva de una especie concreta. Sin embargo, las resistencias
adquiridas son propiedad de una o varias cepas individuales dentro de una
especie. Estas son debidas a alteraciones genéticas que pueden transmitirse
de una generación a otra de cepas microbianas. (Ingraham, 1998)
Ingraham (1998) deduce que:
32
La resistencia natural que las bacterias pueden presentar a los agentes
antimicrobianos es: que su célula diana haya sido alterada por lo que no
puede ser atacada por el antimicrobiano, o que dicho antibiótico no pueda
unirse a la pared del hospedador por cambios conformacionales en las
proteínas de unión, o a la inactivación del fármaco utilizado.
Un mecanismo bastante común de resistencia es la producción de enzimas
que destruyen los antibióticos. Por ejemplo, la enzima bacteriana β-
lactamasa rompe el anillo de los agentes β-lactámicos, dando lugar a
productos inactivos desde el punto de vista microbiológico. (Bryan, 2015)
Las resistencias adquiridas que presentan los agentes antimicrobianos
pueden estar codificadas en genes cromosómicos o contenidos en
plásmidos. La resistencia codificada por el cromosoma se adquiere mediante
mutaciones en su genoma. Esto da lugar a microorganismos que tienen una
mayor probabilidad de sobrevivir en ambientes donde exista un
antimicrobiano. (Roche, Massey, & Peacock, 2003)
La resistencia codificada por plásmidos puede transferirse fácilmente de una
cepa a otra, incluso de una especie a otra, mediante conjugación. A los
plásmidos que portan genes de resistencia a antibacterianos se les llama
factores R, estos pueden tener distintos genes que codifiquen resistencia a
antibióticos diferentes (Ingraham, 1998, págs. 486-511)
Las pruebas de sensibilidad bacteriana se llevan a cabo mediante el
antibiograma que se utiliza para medir la sensibilidad de una cepa bacteriana
a uno o varios antibióticos. La clave utilizada para conocer la información de
dicha sensibilidad es la siguiente:
Sensible (S): si existe un halo de inhibición inferior al estipulado por la
Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica
para el estudio antibiótico de la especie S. aureus y E. coli. El tamaño de
dicho halo dependerá del antibiótico que se estudie.
Intermedio (I): si el halo de inhibición se encuentra en una posición
intermedia entre la sensibilidad y la resistencia.
33
Resistente (R): si el halo de inhibición supera el estipulado por la Sociedad
Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica para el
estudio antibiótico de la especie S. aureus y E. coli. El tamaño de dicho halo
dependerá del antibiótico que se estudie.
El método utilizado en este trabajo para la determinación de la sensibilidad al
extracto metanólico del noni (Morinda Citrifolia L.) es el de Kirby-Bauer.
CAPITULO III
MATERIALES Y MÉTODOS
En este trabajo se determinará la actividad antimicrobiana del noni (Morinda
Citrifolia L.) para buscar alternativas a los antibióticos convencionales que por
mala administración o poco conocimiento respecto a la adecuada ingesta de
antibióticos, los seres humanos se vuelven resistentes y de esta manera tomar
acciones para elaborar antibióticos de forma más natural, por lo tanto este
trabajo es de investigación aplicada que se basa en fuentes documentales y la
información obtenida en el campo experimental.
3.1 Tipo de Investigación
3.1.1 Documental
Basados en la experiencia de otros estudios de investigación sobre la actividad
antimicrobiana en el Noni (Morinda Citrifolia L.) se ha demostrado la existencia
de compuestos antimicrobianos presentes en el fruto.
Uno de los principios activos encontrados en el Noni es la acubina,
asperulósido y alizarina que actúa como antibacteriano contra Pseudomonas
aeruginosa, Proteus morgaii, Staphylococcus auerus, Bacillus subtilis,
Escherichia coli, Salmonella y Shigella; otro principio activo presente en la
Morinda Citrifolia es la antraquinonasa, actúa como antimicrobiano, contiene
34
sustancias amargas que ayudan a la digestión y actúa contra infecciones
producidas por la Shigella y los Staphylococcus (Cabrera, 2012).
3.1.2 Campo
El estudio de campo comprendió la toma de muestra del fruto.
3.1.3 Experimental
Mediante experimentación en campo y laboratorio se obtuvieron resultados de
la actividad antimicrobiana presente en la hoja y semillas del Noni (Morinda
Citrifolia L.)
3.2 Equipos Aparatos, Materiales y Reactivos
Equipos:
Estufa
Balanza analítica
Reverbero
Triturador Ninja Professional
Refrigeradora e Incubadora
Medios de Cultivo:
Reactivos:
Metanol
Etanol
Dimetil Sulfóxido
Agar MuellerHinton
Caldo de Soja Tripticasa
Agar MacConkey
Agar Manitol salado
Materiales:
Papel periódico
Agua clorada
Mortero y pistilo
Cristalizador
35
Cernidor
Fiolas
Matraz
Papel aluminio
Espátula
Papel filtro
Agua destilada
Stickers
Marcador
Lápiz graso
Cajas de Petri
Discos para antibiograma en
blanco
Discos comerciales
Pinzas e hisopos estériles
36
3.3 Muestra
Área del jardín del Bioterio de la facultad de Ciencias Químicas de la
Universidad de Guayaquil.
3.4 Metodología Experimental
3.4.1 Método de recolección
Se realizó un muestreo en el mes de mayo del 2019, la recolección del fruto se
la realizó en la tarde. Se identificó el punto de investigación, planta de Noni
(Morinda Citrifolia L.) ubicada en el área del jardín del Bioterio de la Facultad de
Ciencias Químicas, en ella se tomó la muestra del fruto.
La toma de muestra del fruto se realizó de forma manual, cogiendo las hojas y
los frutos más maduros, guardándolos en bolsas plásticas para su respectiva
limpieza.
ANÁLISIS DE LA SEMILLA Y HOJA DE NONI
Recepción.- En este caso el futo fue recogido en estado de madurez y las
hojas que no estén rotas.
Lavado.- Se procedió a lavar el fruto con agua potable para eliminar residuos o
impurezas y las hojas se las lavó con agua clorada, una por una para su
correcta limpieza.
Amasado.- Solo el fruto se amasó hasta quitar la mayoría de pulpa presente y
obtener las semillas.
Inmersión.- Las semillas obtenidas fueron sumergidas en agua para que de
esta manera desprenda la pulpa restante que se encontraba adherida en ellas.
Secado.- Las muestras de semillas y hojas de Noni se las dejó secar en una
superficie plana sobre pliegos de papel periódico al ambiente durante 5 días,
luego se realizó un secado en la estufa a 45° por 30 minutos.
37
Triturado y tamizado.-Una vez seca las muestras de semillas y hojas de Noni
se procedió a triturarlas con mortero y pistilo, se terminó de triturar con ayuda
de un triturador Ninja Professional luego se tamizó 2 veces con un cernidor
metálico para una perfecta granulometría.
Pesaje y mezcla.- Con ayuda de una balanza analítica se pesaron 40g de la
hoja y semilla ya pulverizada, a la que se agregó 100 ml de metanol y se
pesaron 40g más de hoja y semilla pulverizada donde se añadió 100ml de
etanol, ambos se mezclaron por separado para que se disuelvan.
Maceración y filtración.-En fiolas cubiertas con papel aluminio se dejaron
macerando las muestras durante 4 días y luego con papel filtro, embudo y
fiolas, se filtraron las muestras, este proceso se realizó con ambas muestras.
Evaporación.- Se colocó la maceración de semillas y hojas en cristalizadores
para evaporar en Baño María, antes de esto se pesan los cristalizadores
vacíos, luego de la evaporación se vuelven a pesar los cristalizadores para
obtener diferencias de peso en seco.
Obtención del peso en seco:
Para la obtención del peso en seco, se procedió a pesar los cristalizadores
vacíos, una vez que se obtuvo el extracto, el mismo pasa a baño María, en
donde se evaporó gran parte del extracto, el contenido restante se deja secar a
temperatura ambiente una vez seco, se vuelven a pesar los cristalizadores,
estos dos resultados se restarán lo que por respuesta nos quedará el peso en
seco.
38
Procedimiento del preparado de la hoja y semilla de Noni para
continuar con su extracción metanólico y etanólico
Recepción de la hoja y fruto de noni
Limpieza de la hoja y fruto
Secado de hojas y semillas
Trituración y pulverización de hojas y semillas
Tamizaje de semillas y hojas
Pesaje de polvo de hojas y semillas, mezcla con
el solvente
Dejar macerando 4 días y filtrar
Evaporación en Baño María y obtención de peso en
seco
Amasado de la pulpa del
fruto
Mezclar el polvo de las muestras
con el solvente
Preparación de las diluciones
Concentración
100 %
Concentración
75 %
Concentración
50 %
Concentración
25 %
39
Dilución de los extractos etanólico y metanólico de la semilla y hoja de
Noni (Morinda Citrifolia L.) en diferentes concentraciones.
Concentración 100%: Se obtuvo de las diferencias tanto del peso del
cristalizador vacío y el cristalizador con el extracto luego de colocarlo a Baño
María, para colocar la cantidad respectiva de Dimetil Sulfóxido.
Concentración 75%: se agregó750 ul ml de extracto de concentrado de hoja y
semilla de Noni y 250 ul de Dimetil Sulfóxido.
Concentración 50 %: se agregó 500ul de extracto concentrado de semilla y
hoja de noni y 500ul de Dimetil Sulfóxido.
Concentración 25%: se agregó 25ul de extracto concentrado de semilla y hoja
de noni y 750ul de Dimetil Sulfóxido.
40
3.4.2 Análisis en el laboratorio
En el laboratorio PROGECA de la facultad de Ciencias Químicas se logró
realizar la primera parte del experimento donde se obtuvieron los extractos de
las semillas y hojas de Noni (Morinda Citrifolia L.)
El laboratorio de Microbiología I ayudó con el proceso de siembra y colocación
de los discos con los respectivos extractos, se dejó incubando durante 24 horas
para la primera lectura y la segunda lectura se dio a las 48 horas.
Análisis microbiológico
Cepas ATTC
Staphylococcus aureus (1)
Escherichia coli (1)
Cándida albicans. (1)
Evaluación de la actividad antimicrobiana por el método de Kirby-Bauer
Se trata de una prueba eficaz reproducible y rápida donde se usan
procedimientos de diluciones en caldo o en agar para determinar la
concentración inhibitoria en un rango mínimo de los antimicrobianos usados, en
este caso los extractos de hoja y semilla de Noni obtenidos
Básicamente es un método que se denomina un antibiograma o también una
prueba de susceptibilidad bacteriana frente antibióticos específicos.
Preparación del inoculo
Se seleccionó la colonia del microorganismo, de preferencia se trabaja con un
cultivo que se encuentre puro o haya sido obtenido de un aislamiento primario.
Se recomienda no usar cultivos que sobrepasen las 24 horas.
Se transfirió las colonias tocando la parte de superior de cada una con la ayuda
de un asa bacteriológica, introduciendo el asa a un tubo que contenía de 3 a 5
c-c de caldo estéril de Tripticasa-soya.
41
Mezclar de manera que se pueda distribuir homogéneamente, posterior a esto
se compara estableciendo su viabilidad según la turbidez obtenida de 0.5
MacFarland (1.5 × 108 UFC/ ml).
Siembra por el método de la escobilladura
Se procedió a sembrar con la ayuda de un hisopo estéril diferente para cada
microrganismo, se inoculó la muestra que se encuentra estéril sobre cada
extremo de la placa de manera que se formen estrías sin espacio sobe la
superficie, se debe sembrar en varios sentidos, de manera que la colonia se
multiplique formando colonias independientes.
Se realizaron siembras de cada una de las cepas, St aureus, E. coli y Candida
albicans por triplicado y a cada una de las cajas se les agregó los 4 discos
correspondientes a las 4 concentraciones, de 100%,75%,50% y 25 %. Se
realizó el mismo procedimiento en los dos extractos etanólico y metanólico
Para la comparación entre los resultados obtenidos de los extractos con los
antibióticos comerciales se sembraron 3 cajas Petri con cada una de las
bacterias por el mismo método de Kirby Bauer y posteriormente se colocaron
cada uno de los discos para la bacteria correspondiente.
El disco comercial de antibiótico usado para Staphylococcus aureus fue
sulfatrimetropin, para Escherichia coli se usó cefazolina y para Cándida
albicans se usó Nistatina.
Usándose un total de 39 cajas Petri con Agar Mueller Hinton, con un total de 3
repeticiones para cada microorganismo.
Se dejó incubando durante 24 horas para la primera lectura y la segunda
lectura se dio a las 48 horas.
42
CAPÍTULO IV
4.1 Resultados
Extracto etanólico de la semilla de noni frente a las diferentes cepas:
TABLA 4 PROMEDIOS DE ACTIVIDAD DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA SEMILLA DE NONI
FRENTE AL S. AUREUS
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 24mm 26mm
75% 22mm 24mm
50% 20mm 22mm
25% 19mm 21mm
Cefazolina 26mm
Trimetoprim sulfametoxazol 26mm
Elaborada por Autores.
De acuerdo con lo que se observa en la tabla, el extracto etanólico de la semilla
de Noni frente al microorganismo Staphylococcus aureus presentó actividad
antimicrobiana en las 4 concentraciones, pero siendo la mayor el halo de
inhibición en la concentración del 100% con un halo de 24mm a las 24 horas
con un ligero aumento de 26mm a las 48 horas.
Relacionado con los halos de los antibióticos comerciales, se puede observar
que existe un valor muy similar, lo que demuestra que en la concentración de
100% extracto etanólico del noni presenta una gran actividad antimicrobiana.
TABLA 5 PROMEDIOS DE LA ACTIVIDAD DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA SEMILLA DE
NONI FRENTE A E. COLI
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 29 mm 30mm
75% 29mm 30mm
50% 27mm 29mm
25% 26mm 29mm
Cefazolina 28mm
Trimetoprim sulfametoxazol 29mm
Elaborada por Autores.
Analizando y comparando cada resultado se logró determinar que en el
extracto etanólico de la semilla de Noni frente al microorganismo Escherichia
coli presentó actividad antimicrobiana en sus 4 concentraciones, pero
mayoritariamente en la concentración de 100% y 75% presentando un halo de
29 mm a las 24 horas aumentando a 30 mm a las 48 horas.
Al comparar los resultados del extracto etanólico con el halo de inhibición
presentado con los antibióticos comerciales Trimetoprim sulfametoxazol 29 mm
y Cefazolina 28mm que tienen un valor que se asemeja al encontrado en la
concentración de 100 % el extracto etanólico de la semilla del noni.
43
TABLA 6 ACTIVIDAD DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA SEMILLA DE NONI FRENTE A
CÁNDIDA
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 0mm 0mm
75% 0mm 0mm
50% 0mm 0mm
25% 0mm 0mm
Elaborada por Autores.
Como se observa en los resultados el extracto etanólico de la semilla de Noni
frente al microorganismo Cándida albicans no presenta actividad
antimicrobiana en ninguna de las concentraciones, tanto a las 24 horas cómo a
las 48 horas.
Extracto etanólico de la hoja de noni frente a las diferentes cepas:
TABLA 7 PROMEDIOS DE LA ACTIVIDAD DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA HOJA DE NONI
FRENTE AL S. AUREUS
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 20mm 21mm
75% 19mm 20mm
50% 17mm 18mm
25% 16mm 16mm
Cefazolina 26mm
Trimetoprim sulfametoxazol 26mm
Elaborada por Autores.
Con la observación de la medida de los halos se puede determinar que existe
una alta actividad antimicrobiana en el extracto etanólico de la hoja de noni
frente al microorganismo S. aureus, existiendo un ligero incremento a las 48
horas de haber sido incubado presentando un halo de 21mm, recalcando que
en la concentración del 100% es donde existe mayor actividad antimicrobiana.
Mediante el análisis respectivo de los resultados en comparación con el halo de
inhibición presentado con los antibióticos comerciales Trimetoprim
sulfametoxazol 26 mm y Cefazolina 26mm presentan un valor cercano lo que
demuestra que en la concentración de 100 % el extracto etanólico del noni
presenta actividad antimicrobiana.
44
TABLA 8 PROMEDIOS DE LA ACTIVIDAD DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA HOJA DE NONI
FRENTE A E. COLI
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 30mm 31mm
75% 29mm 31mm
50% 27mm 30mm
25% 27mm 29mm
Cefazolina 28mm
Trimetoprim sulfametoxazol 29mm
Elaborada por Autores.
Realizando la comparación de resultados se logró determinar que en el
extracto etanólico de la hoja de Noni frente al microorganismo Escherichia coli
existe actividad antimicrobiana en las 4 concentraciones, pero de mayor
manera la concentración de 75% con un halo de 31 mm a las 48 horas y la
concentración de 100 % con una medida de halo de 30 mm a las 24 horas
existiendo un ligero incremento de 31mm a las 48 horas
Los resultados permiten observar que en comparación con el halo de inhibición
presentado con los antibióticos comerciales Trimetoprim sulfametoxazol 29 mm
y Cefazolina 28 mm presentan un valor muy alto que en el caso de la
concentración del 100% a las 24 y 48 horas presentan un diámetro mayor que
el del antibiótico comercial.
TABLA 9 PROMEDIOS DE LA ACTIVIDAD DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA HOJA DE NONI
FRENTE A CÁNDIDA
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 25mm 27mm
75% 25mm 27mm
50% 24mm 26mm
25% 24mm 26mm
Nistatina 26mm
Elaborada por Autores.
Comparando los resultados del extracto en las diferentes concentraciones se
pudo observar que junto con el halo de inhibición presentado con el antibiótico
comercial Nistatina 26 mm, presenta un valor cercano a la concentración del
100 % en las 24 horas y un valor mayor en las 48 horas.
45
Extracto metanólico de la semilla de noni frente a las diferentes cepas:
TABLA 10 PROMEDIOS DE LA ACTIVIDAD DEL EXTRACTO METANÓLICO DE LA SEMILLA DE
NONI FRENTE AL S. AUREUS
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 26mm 27mm
75% 25mm 26mm
50% 24mm 25mm
25% 24mm 24mm
Cefazolina 26mm
Trimetoprim sulfametoxazol 26mm
Elaborada por Autores.
Se realizó el análisis de resultados pudiendo determinar que en el extracto
metanólico de la hoja de Noni frente al microorganismo Staphylococcus aureus
existe actividad antimicrobiana en las 4 concentraciones, pero siendo la mayor
la concentración de 100% con una medida de halo de 26 mm a las 24 horas
existiendo un ligero incremento de 27 mm a las 48 horas.
Relacionando los resultados en comparación con el halo de inhibición
presentado con los antibióticos comerciales Trimetoprim sulfametoxazol 26 mm
y Cefazolina 26 mm presentan un valor muy similar lo que demuestra que en la
concentración de 100 % el extracto metanólico de la semilla del noni presenta
una gran actividad antimicrobiana.
TABLA 11 PROMEDIOS DE LA ACTIVIDAD DEL EXTRACTO METANÓLICO DE LA SEMILLA DE
NONI FRENTE A E. COLI
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 30mm 35mm
75% 29mm 33mm
50% 29mm 33mm
25% 28mm 31mm
Cefazolina 28mm
Trimetoprim sulfametoxazol 29mm
Elaborada por Autores.
Se pudo determinar que en el extracto metanólico de la semilla de Noni frente
al microorganismo Escherichia coli presentó actividad antimicrobiana en las 4
concentraciones, pero siendo la mayor la concentración de 100% con un halo
de 30 mm a las 24 horas con un aumento de 35mm a las 48 horas.
Mediante la comparación los resultados en relación con el halo de inhibición
presentado con los antibióticos comerciales Trimetoprim sulfametoxazol 29 mm
y Cefazolina 28 mm se evidencia un valor cercano lo que demuestra que en la
concentración de 100 % el extracto metanólico de la semilla del noni presenta
una gran actividad antimicrobiana.
46
TABLA 12 ACTIVIDAD DEL EXTRACTO METANÓLICO DE LA SEMILLA DE NONI FRENTE A
CÁNDIDA
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 0mm 0mm
75% 0mm 0mm
50% 0mm 0mm
25% 0mm 0mm
Elaborada por Autores.
Como se observa en los resultados el extracto etanólico de la semilla de Noni
frente al microorganismo Cándida albicans no presenta actividad
antimicrobiana en ninguna de las concentraciones, tanto a las 24 horas cómo a
las 48 horas.
Extracto metanólico de la hoja de noni frente a las diferentes cepas:
TABLA 13 PROMEDIOS DE LA ACTIVIDAD DEL EXTRACTO METANÓLICO DE LA HOJA DE
NONI FRENTE AL S. AUREUS
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 26mm 27mm
75% 23mm 25mm
50% 23mm 23mm
25% 20mm 22mm
Cefazolina 26mm
Trimetropim sulfametoxazol 26mm
Elaborada por Autores.
Con la obtención de resultados se determinó que el extracto metanólico de la
hoja de noni frente a S. aureus si presenta actividad antimicrobiana en las 4
concentraciones, pero de mayor manera en la concentración del 100 % con un
halo de inhibición de 26 mm a las 24 horas presentando un ligero aumento de
27mm a las 48 horas.
Al relacionar de los resultados obtenidos del extracto en sus distintas
concentraciones se puede ver que en comparación con el halo de inhibición
presentado con los antibióticos comerciales Trimetoprim sulfametoxazol 26 mm
y Cefazolina 26mm presentan un valor muy similar lo que demuestra que en la
concentración de 100 % el extracto etanólico del noni presenta una gran
actividad antimicrobiana.
47
TABLA 14 PROMEDIOS DE LA ACTIVIDAD DEL EXTRACTO METANÓLICO DE LA HOJA DE
NONI FRENTE A E. COLI
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 31mm 36mm
75% 30mm 33mm
50% 29mm 33mm
25% 29mm 32mm
Cefazolina 28mm
Trimetoprim sulfametoxazol 29mm
Elaborada por Autores.
Se determinó que el extracto metanólico de la hoja de Noni frente al
microorganismo Escherichia coli presenta actividad antimicrobiana en sus 4
concentraciones, pero de mayor manera en la concentración de 100% con un
halo de 31 mm a las 24 horas con un aumento a 36 mm a las 48 horas.
Relacionando los resultados obtenidos del extracto se determinó que en
comparación con el halo de inhibición presentado con los antibióticos
comerciales Trimetoprim sulfametoxazol 29 mm y Cefazolina 28 mm existe un
valor muy similar lo que demuestra que en la concentración de 100 % el
extracto metanólico de la semilla del noni presenta una gran actividad
antimicrobiana.
TABLA 15 ACTIVIDAD DEL EXTRACTO METANÓLICO DE LA HOJA DE NONI FRENTE A
CÁNDIDA
Concentración
24 HORAS 48 HORAS
PROMEDIO PROMEDIO
100 % 0mm 0mm
75% 0mm 0mm
50% 0mm 0mm
25% 0mm 0mm
Elaborada por Autores.
Como se observa en los resultados el extracto etanólico de la semilla de Noni
frente al microorganismo Cándida albicans no presenta actividad
antimicrobiana en ninguna de las concentraciones, tanto a las 24 horas cómo a
las 48 horas.
48
Comparación de extractos etanólicos en los diferentes
microorganismos en 24 horas:
TABLA 16 COMPARACIÓN DE EXTRACTOS ETANÓLICOS DE LA SEMILLA Y HOJA DE NONI
FRENTE A S. AUREUS
EXTRACTO ETANÓLICO DE LA SEMILLA DE NONI FRENTE A S. AUREUS
EXTRACTO ETANÓLICO DE LA HOJA DE NONI FRENTE A S. AUREUS
Concentración Promedio 24h Concentración Promedio 24h
100% 24mm 100% 20mm
75% 22mm 75% 19mm
50% 20mm 50% 17mm
25% 19mm 25% 16mm Elaborada por Autores.
Se realizó el análisis de resultado entre el extracto etanólico de la semilla y hoja
de Noni frente al microorganismo S. aureus determinando que la mayor
actividad antimicrobiana se ve reflejada en el extracto de la semilla.
TABLA 17 COMPARACIÓN DE EXTRACTOS ETANÓLICOS DE LA SEMILLA Y HOJA DE NONI
FRENTE A E. COLI
EXTRACTO ETANÓLICO DE LA SEMILLA DE NONI FRENTE A E. COLI
EXTRACTO ETANÓLICO DE LA HOJA DE NONI FRENTE A E.COLI
Concentración Promedio 24h Concentración Promedio 24h
100% 29mm 100% 30mm
75% 29mm 75% 29mm
50% 27mm 50% 27mm
25% 26 25% 27mm Elaborada por Autores.
Realizando la comparación del extracto etanólico de la semilla y hoja de Noni
frente al microorganismo E. coli se comprobó que existe mayor actividad
antimicrobiana en el extracto de la hoja.
49
TABLA 18 COMPARACIÓN DE EXTRACTOS ETANÓLICOS DE LA SEMILLA Y HOJA DE NONI
FRENTE A CÁNDIDA
EXTRACTO ETANÓLICO DE LA SEMILLA DE NONI FRENTE A CÁNDIDA
EXTRACTO ETANÓLICO DE LA HOJA DE NONI FRENTE A CÁNDIDA
Concentración Promedio 24h Concentración Promedio 24h
100% 0mm 100% 25mm
75% 0mm 75% 25mm
50% 0mm 50% 24mm
25% 0mm 25% 24mm Elaborada por Autores.
Analizando los valores obtenidos de los halos entre el extracto etanólico de la
semilla y hoja de Noni frente al microorganismo Cándida albicans se evidencia
que existe ligera actividad antimicrobiana en el extracto de la hoja en sus 4
concentraciones.
Comparación de extractos metanólicos en los diferentes
microorganismos en 24 horas:
TABLA 19 COMPARACIÓN DE EXTRACTOS METANÓLICOS DE LA SEMILLA Y HOJA DE NONI
FRENTE A S. AUREUS
EXTRACTO METANÓLICO DE LA SEMILLA DE NONI FRENTE A S. AUREUS
EXTRACTO METANÓLICO DE LA HOJA DE NONI FRENTE A S. AUREUS
Concentración Promedio 24h Concentración Promedio 24h
100% 26mm 100% 26mm
75% 25mm 75% 23mm
50% 24mm 50% 22mm
25% 24mm 25% 20mm Elaborada por Autores.
Con la obtención de los resultados se comparó el extracto metanólico de la
semilla y hoja de Noni frente al microorganismo S aureus determinando que
ambos extractos presentan actividad antimicrobiana.
50
TABLA 20 COMPARACIÓN DE EXTRACTOS METANÓLICOS DE LA SEMILLA Y HOJA DE NONI
FRENTE A E. COLI
EXTRACTO METANÓLICO DE LA SEMILLA DE NONI FRENTE A E. COLI
EXTRACTO METANÓLICO DE LA HOJA DE NONI FRENTE A E.COLI
Concentración Promedio 24h Concentración Promedio 24h
100% 30mm 100% 30mm
75% 29mm 75% 29mm
50% 27mm 50% 27mm
25% 27mm 25% 27mm Elaborada por Autores.
Comparando entre el extracto metanólico de la semilla y hoja de Noni frente al
microorganismo Escherichia coli se determinó que existe igual actividad
antimicrobiana en el extracto de la hoja.
TABLA 21 COMPARACIÓN DE EXTRACTOS METANÓLICOS DE LA SEMILLA Y HOJA DE NONI
FRENTE A CÁNDIDA
EXTRACTO METANÓLICO DE LA SEMILLA DE NONI FRENTE A CÁNDIDA
EXTRACTO METANÓLICO DE LA HOJA DE NONI FRENTE A CÁNDIDA
Concentración Promedio 24h Concentración Promedio 24h
100% 0mm 100% 0mm
75% 0mm 75% 0mm
50% 0mm 50% 0mm
25% 0mm 25% 0mm Elaborada por Autores.
Se realizó el análisis de resultado donde se pudo determinar que no existe
actividad antimicrobiana en las 4 concentraciones en los extractos metanólico
de hoja y semilla frente a Cándida albicans.
51
CAPITULO V
5.1 Discusiones
Se realizó un estudio acerca de la actividad antibacteriana del Noni usando
partes cómo la semilla y la hoja, demostrando que tanto en el extracto
metanólico y etanólico de ambas partes se presentó actividad frente a
microorganismos como E. coli y S. aureus, en las 4 concentraciones,
recalcando que no se evidencio actividad antimicrobiana frente a Cándida
albicans.
Recalcando que la concentración al 100 % es donde se evidencia la
presencia de mayor halo de inhibición frente a los microorganismos, tanto a
las 24 como a las 48 horas.
Los resultados obtenidos de los extractos fueron a su vez comparados con
resultados de antibióticos comerciales para establecer la cercanía o lejanía
de sus valores para poder realizar una comparación, misma que nos permitió
concluir que los extractos de la semilla y hoja de Noni tanto etanólico como
metanólico si poseen una muy buena actividad antimicrobiana frente a los ya
nombrados microorganismos, presentando valores en sus medidas de halo
de inhibición similares a aquellos antibióticos comerciales usados para
combatir infecciones.
En los estudios de (Rodrìguez & Zeballos, 2014) se confirma que se
presentó actividad antibacteriana sobre Staphylococcus aureus con un
promedio de halo de inhibición de 10.76 mm, comparando con el promedio
del presente estudio las medidas varían entre 20 mm a 25 mm, la diferencia
de los valores puede deberse al uso de distintas parte del Noni de manera
que puede existir un incremento o disminución de la actividad.
La variación entre los valores obtenidos en ambos estudios demuestra la
importancia del uso ciertas partes del Noni donde puede existir mayor o
menor cantidad de metabolitos los mismos que se encargan de aumentar la
concentración del extracto y potenciar su efecto inhibitorio.
52
Barani et.al (2014) en su estudio demuestra que el extracto de Morinda
Citrifolia (noni) manifiesta efectos antifúngicos frente Cándida albicans, cuyo
efecto varía según su concentración. Indica que a concentraciones menores
de 0.1% el extracto de noni es efectivo para Cándida albicans.
Realizando la comparación con el presente estudio se puede determinar que
no existe coincidencia entre los valores obtenidos, ya que tanto en el
extracto etanólico como metanólico de semilla y hoja de noni no se evidenció
actividad antimicrobiana en las 4 concentraciones para Cándida albicans.
5.1.1 Conclusiones
Mediante el análisis de los resultados se logró determinar que los
extractos etanólico de la semilla de noni frente a 2 microorganismos S.
aureus y E. coli si presentan actividad antimicrobiana en sus 4
concentraciones de manera que la concentración al 100 % es dónde se
evidencia mayor actividad antimicrobiana aumentando a las 48 horas de
haber sido incubado.
El extracto etanólico de la semilla de noni en sus 4 concentraciones no
presenta actividad antimicrobiana frente a la Cándida albicans, no hubo
presencia de halo de inhibición a las 24 y 48 horas de haber sido
incubada la muestra.
Interpretando los resultados se llegó a la conclusión que los extractos
etanólico de la hoja de noni frente a 2 microorganismos S. aureus y E.
coli si poseen actividad antimicrobiana en las 4 concentraciones siendo
la concentración al 100 % donde se evidencia actividad
mayoritariamente, existiendo un incremento de esta a las 48 horas de
haber sido incubado.
Sin embargo, el extracto etanólico de la hoja de noni presentó actividad
antimicrobiana frente a Cándida albicans, recalcando que se obtuvieron
resultados en las 4 concentraciones.
53
Los resultados reflejan que el extracto metanólico de la semilla de noni si
presenta actividad antimicrobiana en las 4 concentraciones y de manera
mayoritaria en la concentración al 100% frente a los microorganismos S.
aureus y E. coli, sin embrago frente Cándida albicans no existió actividad
antimicrobiana en las 4 concentraciones a las 24 horas y 48 horas de
haber sido incubado.
A su vez el extracto metanólico de la hoja también presento actividad
antimicrobiana frente a los 2 microorganismos en las 4 concentraciones
siendo la del 100 % la que posee medidas de halo mayor, sin embargo,
este extracto no presenta actividad antimicrobiana frente a Cándida
albicans en ninguna de sus 4 concentraciones a las 24 y 48 horas.
De manera general el extracto que tiene mayor actividad antimicrobiana
frente al S. aureus es el extracto etanólico de la semilla a una
concentración de 100%, frente a E. coli el extracto etanólico de la hoja
posee mayor actividad al 100%, mientras que en la cándida existe una
leve presencia de actividad antimicrobiana en el extracto etanólico de la
hoja, sin embargo, al momento de la lectura los halos de inhibición
tenían presencia de microorganismos dentro de ellos.
En lo correspondiente a extractos metanólico de semilla y hoja, frente al
microorganismos S. aureus el extracto metanólico de la semilla presenta
mayor actividad antimicrobiana a una concentración de 100%, mientras
que el extracto de la hoja al 100% presenta mayor actividad frente al
microorganismo E. coli, y se pudo evidenciar que ambos extractos no
presentan actividad antimicrobiana frente a Cándida albicans.
Una vez analizados los resultados y realizando la comparación frente a
antibióticos comerciales se pudo determinar que los valores en lo que
corresponde a medida de halos de inhibición son valores similares a
excepción de la Cándida que no representa actividad, sin embargo, se
puede describir que los extractos tanto etanólico como metanólico de la
54
hoja y semilla frente a estos microorganismos presentan una muy buena
actividad antimicrobiana.
Mediante la comparación con la ayuda de la tabla de Kirby Bauer se
determina que existe sensibilidad frente al microorganismo S. aureus
cuando las medidas de el halo de inhibición son mayores o igual a 20,
para E. coli las medidas deben ser mayor o igual a 20, mientras que
para Cándida albicans las medidas del halo de inhibición que
demuestran sensibilidad deben tener un valor mayor o igual a 18.
5.1.2 Recomendaciones
Se recomienda orientar y desarrollar nuevos proyectos donde estos
extractos sean estudiados y analizados a fondo de tal manera que sea
posible proponer nuevas alternativas que sirvan y sean eficaces a
tratamientos contra infecciones de tipo bacterianas.
Realizar investigaciones de los extractos de hoja y semilla de Noni cómo
posible potenciador de medicamentos antimicrobianos ya existentes.
Comparar la actividad antibacteriana de los extractos de semilla y hoja de
Noni frente a más medicamentos utilizados para el tratamiento de
infecciones.
Se podría analizar el efecto inhibitorio de los extractos (semilla y hoja) como
agentes antimicrobianos frente a otro tipo de bacterias causantes de otras
patologías.
55
Referencias Arenas, R. (1993). Micología Médica Ilustrad. En McGraw-Hill.
Baca, D., Drexler, C., & Cullen, E. (2001). Obstructive laryngotracheitis secondary to gentian
violet exposure. Clin Pediatr, 233-235.
Barani, K., Prabu, D., Preethi, A., Sunayana, M., & Jeevika , C. (2014). Actividad antihongos de
Morinda Citrofilia(Noni) ftrente a Candida albicans: Estudio in vitro. Indian Journal of
Dental Research.
Barranco, L. (2007). Infecciones de vias urinarias en el Hospital Universidad del Norte. Salud
Uninorte, 1, 9-18.
Bryan, Y. I. (2015). Shiga Toxin Producing Escherichia coli. Clinical Laboratory Medical, 247-272.
Bustos, J., Hamdan, A., & Gutiérrez , M. (Oct-Dic de 2006). Staphylococcus aureus: la
reemergencia de un patógeno en la comunidad. Rev Biomed, 17(4), 287-305.
Cabrera, L. F. (2012). Evaluación de Extracto de Noni Morinda Citrifolia, en el comportamiento
productivode la tilapia nilótica. Guatemala. Obtenido de
http://glifos.concyt.gob.gt/digital/fodecyt/fodecyt%202009.44.pdf
Cantón, R., Valdezate, S., & Mir , N. (1999). Resistencia a los antimicrobianos. Sociedad
Española de Quimioterapia, 41-7.
Compernolle, V., Verscheraegen, G., & Claeys, G. (2007). Combined Use of Pastorex staph-plus
and either of two new chromogenic agars, MRSA ID and chromagar MRSA for
detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus. J Clin Microbiol(45), 154-158.
Cornaglia, W. (2004). Eruopean recommendations for microbial resistance surveiilance .
Clinical Microbiology and Infection, 10(4), 394-83.
Croxen, M. A. (2013). Recent Advances in Understanding Enteric Pathogenic Escherichia coli.
Clin. Microbiol, 822-880.
Cruz. (2014). Actividad inhibidora de Morinda citrofilia acerca Streptococcus mutans y Cándida
albicans.
Eisentein, B., & Zaleznik, D. (2000). Priciples and Pratice of Infectious Diseases , 2294-310.
56
Esclava, C., Navarro, F., Czezullin, J., Henderson, I., Cravioto, A., & Nataro, J. (1998). Pet an
autotransporter enterotoxin from enteroaggregative Escherichia coli. . Infect
Immun(66), 3155-3163.
Farmer, J. (1995). Enterobacteriaceae: Introduction and identification. Manual of clinical
microbiology, 6, 440.
Fisher, F., & Cook, N. (1998). Fundamental of Diagnostic Mycology. WB Saunders Company.
Foster. (2002). Poder de la planta de noni en. Mejor Nutrición, 36-40.
Foster. (2005). Inmune evasión by staphylococci. Microbiology, 948-958.
Fox, J., Barthold, S., Davisson, M., Newcomer, C., Quimby, F., & Smith, A. (20017). The Mouse
in Biomed Research. Diseases, 2.
Freydiere, A., & Guinet, R. (1997). Rapid methods for identification of the most frequent
clinical yeasts. Rev Iberoam Micol , 85-89.
Hamell, N., & Boyce, J. (2010). Evolution of new selective medium BD, BBl, Chromagar MRSA II,
for detection of methillicin resistance Staphylococcus aureus. J Clin Microbiol(48),
2223-2227.
Harris, L., Foster, S., & Richards, R. (2002). An introduction to Saphylococcus aureus, and
tecniques for identifying and quantifyings S.aureus adhesin in relation to adhesion to
biomaterials. Review. Eur Cells Mater, 2, 30-60.
Hernandez. (1996). El maravilloso mundo de las plantas medicinales . Editorial de la.
Hernandez, A. (2005). Fitoterapia. Bases Cientificas y Legales para su aplicación. Boletín
Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas. 4(4), 71-74.
Hernández, S. (2009). Usos medicinales del Noni. México. Obtenido de
http://www.tlahui.com/medic/medic29/noni_gro.htm
Ingraham. (1998). Farmacología antimicrobiana, Introducción a la Microbiología. Barcelona,
España: Reverté.
Knutton, S., Lloyd, D., & Neish, A. (1987). Adhesion of enteropathogenic Escherichia coli to
human intestinal enterocytes and cultured human intestinal mucosa. Infect
Immun(55), 69-77.
Konowalchuk, J., Speirs, J., & Stavirc, S. (1997). Vero response to a cytotoxin of Escherichia coli.
Infect Immun(18), 775-779.
57
Lavillla, S., González, J., Miró, E., Domínguez, A., Llagostera, M., & Bartolomé RM, e. a. (2008).
Dissemination of extended- spectrum betalactamase-producing bacteria: the food-
borne outbreak lesson. J Antimicrob Chemother(61), 1244-51.
Livermore, D. (2003). Bacterial resistance: Oringins, epidemiology, and impact. Clin Infects Dis
Off Publ Infects Dis Soc Am., 36(1), 11-23.
López, M. (2012). Manual de plantas medicinales para Guinea Ecuatorial España: Fundación de
Religiosos para la Salud.
Lowy, F. (2003). Antimicrobial resistance: The example of Staphylococcus aureus. .J Clin
Infect(11), 1265-1273.
Madigan. (2009). Biología de los Microorganismos. España: Pearson.
Martínez, L., & Calvo, J. (2010). The growing problem of antibiotic resistance in clinically Gram-
negative bacteria: current situation. Enferm Infecc Microbiol Clin, 2, 25-31.
Martínez, M. (1995). Biologia molecular en la patogenia de Shigella sp y Escherichia coli
enteroinvasiva. Rev Latioam Microbiol(37), 367-385.
Mendoza, M., Russian, E., Villanueva, E., Torres, E., & Abonorz, M. (1992). Serotipificación de
48 aislados de Candida albicans: predominio del Serotipo A sobre el B en Venezuela.
Invest Clin, 33-37.
MINSAP. (1998). Programa Nacional de prevención y control de la infección Intrahospitalaria.
Normas Ramales de Microbiología, 26-28.
Montalvan, R. (2018). GoodNoni. Obtenido de GoodNoni: https://www.zumononi.com/que-es-
el-noni/
Moreillon, P., Que, Y., & Glauser, M. (2005). Staphylococcus aureus. Principles and practice of
infectious diseases. , 6a.
Murray. (2003). Microbiología Médica.
Nataro, J., & Karper, J. (1998). Diarrheagenic Escherichia coli. . Clin Microbiol Rev , 11, 142-201.
O'Brien, A., & Holmes, R. (1987). Shiga and shiga-like toxins. Microbiol Revs(51), 206-220.
Pérez. (2006). : tipificación molecular y transferencia génica. Staphylococcus aureus resistentes
a la meticilina. España.
Quindós, G., Ribacoba, L., Contreras, I., & Aguirre, J. (1996). Tratamiento de las candidiasis
orofaríngeas. Rev Iberoam Micol, 11-15.
58
Rasmussen, R., Fowler, V., Skov, R., & Bruun, N. (enero de 2011). Feature challenges and
treatement of Sthapylococcus aureus bacteremia with emphasis in the MRSA. Future
Microbiol, 1, 43-56.
Rivas, C. (2016). Investigación en plantas de importancia médica. Omnia Science.
Roche, F., Massey, R., & Peacock, S. (2003). Characterization of novel LPXTG-containing
proteins of Staphylococcus aureus identified from genome sequences.
Microbiology(149), 643-654.
Rodrìguez, A., & Zeballos, R. (2014). Determinacion de actividad antimicrobiana en extracto
etanolico de semilla frente a S. aureus.
Scheter. (1999). Nonu—Nature’s true adaptogen from the South Pacific Total Health. 21(2), 40-
41.
Tibadizco, D., Rodriguez, J., Silva, E., Cuervo, S., & Cortés, J. (2007). Enfoque terapéutico de la
bacteriemia por Staphylococcus aureus. Biomedica, 2, 294-307.
Torres, A. (2014). Antecedentes y estado actual de investigaciones sobre la utilidad médica de
la Morinda Citrifolia. Cuba. Obtenido de
http://www.cocmed.sld.cu/no134/pdf/no134rev1.pdf
Tortora. (2007). Introducción a la Microbiología Buenos Aires.
Ulloa, A. (2012). El noni: Propiedades, usos y aplicaciones potenciales. Revista UAN, 46.
Obtenido de http://fuente.uan.edu.mx/publicaciones/04-10/5.pdf
59
GLOSARIO
Aglutinación: Proceso por el cual las células que están en suspensión en un
líquido se agrupan entre sí por reacción de un antígeno del cual son
portadoras con el anticuerpo correspondiente.
Antimicrobianos: Sustancia que elimina o inhibe el crecimiento de
microorganismos, tales como bacterias, hongos o parásitos
Antioxidantes: Sustancia que impide la formación de óxidos.
Bacteriemia: Presencia de bacterias en el torrente sanguíneo
Bactericidas: Sustancia que tiene la capacidad de matar bacterias,
microorganismos unicelulares u otros organismos.
Brotes: Es una clasificación usada en la epidemiología para referirse a la
aparición repentina de una enfermedad debida a la presencia de
microorganismos.
Citotoxina: Sustancias elaboradas por microorganismos, plantas o animales
que son específicamente tóxicas para las células individuales.
Colonización: Es el establecimiento de los microorganismos en la piel o
mucosas del huésped y su multiplicación en grado suficiente para mantener
su tiempo de vida.
Endógenas: Se forma o engendra en el interior de algo, como la célula que
se forma en el interior de otra.
Estudios etnobotánicos: Estudia la relación entre los hombres y las plantas.
El rol que las plantas cumplen en los grupos humanos, éstas se han ...
Exoenzimas: Enzimas secretadas por células. La mayoría de las exoenzimas
que tienen una función digestiva están sometidas por represión catabólica.
60
Glabras: son denominaciones dadas a organismos, o a sus partes, que no
presentan pelos, tricomas o estructuras similares en su superficie externa.
Inmunodeprimidos: Cuando el cuerpo no puede producir una respuesta
inmunitaria adecuada
Lisis: proceso de ruptura de la membrana celular de células o bacterias que
produce la salida del material intracelular, provocado por lisinas
Métodos inmunológicos: Técnicas para detectar proteínas o anticuerpos
específicos en muestras.
Microflora: Conjunto de bacterias que viven en el intestino, en una relación de
simbiosis tanto de tipo comensal como de mutualismo.
Morbilidad: Cantidad de personas que enferman en un lugar y un período de
tiempo determinados en relación con el total de la población.
Patogenicidad: Mecanismos bioquímicos por medio de los cuales los
microorganismos causan enfermedad y virulencia.
Virulencia: Capacidad de un microorganismo de causar daño a su anfitrión.
61
ANEXOS
ILUSTRACIÓN 1 RECOLECCIÓN DE
LA MUESTRA (FRUTOS DE NONI)
AUTORES
ILUSTRACIÓN 2 RECOLECCIÓN DE
LA MUESTRA (HOJAS DE NONI)
AUTORES
ILUSTRACIÓN 3 FILTRACIÓN DE LOS
EXTRACTOS ETANÓLICOS Y
METANÓLICOS
62
AUTORES
ILUSTRACIÓN 4 ANTIBIOGRAMA DE
EXTRACTO METANÓLICO DE LA HOJA
DE NONI FRENTE A E.COLI
AUTORES
ILUSTRACIÓN 5 ANTIBIOGRAMA DEL
EXTRACTO METANÓLICO DE LA HOJA
DE NONI FRENTE AL S. AUREUS
AUTORES
ILUSTRACIÓN 6 ANTIBIOGRAMA DEL
EXTRACTO METANÓLICO DE LA HOJA
DE NONI FRENTE A LA CÁNDIDA
AUTORES
ILUSTRACIÓN 7 ANTIBIOGRAMA DEL
EXTRACTO METANÓLICO DE LA
SEMILLA DE NONI FRENTE AL S. AUREUS
AUTORES
63
ILUSTRACIÓN 8 ANTIBIOGRAMA DEL
EXTRACTO METANÓLICO DE LA
SEMILLA DE NONI FRENTE A LA E. COLI
AUTORES
ILUSTRACIÓN 9 ANTIBIOGRAMA DEL
EXTRACTO METANÓLICO DE LA
SEMILLA DE NONI FRENTE A LA
CÁNDIDA
AUTORES
ILUSTRACIÓN 10 ANTIBIOGRAMA
DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA
HOJA DE NONI FRENTE AL S. AUREUS
AUTORES
ILUSTRACIÓN 11 ANTIBIOGRAMA
DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA
HOJA DE NONI FRENTE A LA
CÁNDIDA
AUTORES
64
ILUSTRACIÓN 12 ANTIBIOGRAMA
DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA
SEMILLA DE NONI FRENTE A LA E. COLI
AUTORES
ILUSTRACIÓN 13 ANTIBIOGRAMA
DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA
SEMILLA DE NONI FRENTE AL S. AUREUS
AUTORES
ILUSTRACIÓN 14 ANTIBIOGRAMA
DEL EXTRACTO ETANÓLICO DE LA
SEMILLA DE NONI FRENTE A LA
CÁNDIDA, REPETICIÓN 3
AUTORES