un nuevo metodo para ver el adn

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V 22 V 22 2008 V 22 V 22 UN NUEVO METODO PARA UN NUEVO METODO PARA VER EL DNA VER EL DNA GLORIA ELENA LEON PAZ GLORIA ELENA LEON PAZ ENRIQUE RODRIGUEZ ENRIQUE RODRIGUEZ V V 2 2 2 2

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The history of an adventure on the research of a novel method to work with DNA using a optical microscope.

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V 22V 22VVVVVVVV

2008

V 22V 22

UN NUEVO METODO PARA UN NUEVO METODO PARA VER EL DNAVER EL DNA

GLORIA ELENA LEON PAZGLORIA ELENA LEON PAZENRIQUE RODRIGUEZENRIQUE RODRIGUEZ

VV 2222

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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V22V22 UN NUEVO METODO DE ANALISIS UN NUEVO METODO DE ANALISIS

DEL DNADEL DNA

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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V22V22UN NUEVO MÉTODO DE ANALISISUN NUEVO MÉTODO DE ANALISIS

DEL DNADEL DNA..

EL TRABAJO DE INVESTIGACIÓN QUE A CONTINUACIÓNEL TRABAJO DE INVESTIGACIÓN QUE A CONTINUACIÓN DESCRIBIREMOS ES EL RESULTADO DE UNA INTENSADESCRIBIREMOS ES EL RESULTADO DE UNA INTENSA EXPERIENCIA CIENTÍFICA, DE UNA BÚSQUEDA Y UNEXPERIENCIA CIENTÍFICA, DE UNA BÚSQUEDA Y UN DESCUBRIMIENTO QUE ES DE CIERTA MANERA UNDESCUBRIMIENTO QUE ES DE CIERTA MANERA UN ENCUENTRO ANTICIPADO CON EL FUTURO.ENCUENTRO ANTICIPADO CON EL FUTURO.

EL AÑO DE 1985 INICIAMOS LAS PRUEBAS PRELIMINARES DE UNAEL AÑO DE 1985 INICIAMOS LAS PRUEBAS PRELIMINARES DE UNA NUEVA INVESTIGACIÓN EN EL CENTRO DE INVESTIGACIONESNUEVA INVESTIGACIÓN EN EL CENTRO DE INVESTIGACIONES CIENTÍFICAS Y TECNOLÓGICAS DE LA UNIVERSIDAD DE SONORACIENTÍFICAS Y TECNOLÓGICAS DE LA UNIVERSIDAD DE SONORA (CICTUS) PARA POSTERIORMENTE CONTINUARLAS EN EL CENTRO(CICTUS) PARA POSTERIORMENTE CONTINUARLAS EN EL CENTRO DE INVESTIGACIÓN EN ALIMENTACIÓN Y DESARROLLO ( CIAD ) ENDE INVESTIGACIÓN EN ALIMENTACIÓN Y DESARROLLO ( CIAD ) EN HERMOSILLO SONORA, MÉXICO; INSTITUCIÓNES EN LA QUEHERMOSILLO SONORA, MÉXICO; INSTITUCIÓNES EN LA QUE TRABAJABA COMO INVESTIGADORA EN LAS DÉCADAS DE LOSTRABAJABA COMO INVESTIGADORA EN LAS DÉCADAS DE LOS SETENTAS Y LOS OCHENTAS.SETENTAS Y LOS OCHENTAS.

NUESTRO INTERÉS ESTABA ENFOCADO A REALIZAR VARIASNUESTRO INTERÉS ESTABA ENFOCADO A REALIZAR VARIAS PRUEBAS EXPERIMENTALES SUSTENTADAS EN NUMEROSASPRUEBAS EXPERIMENTALES SUSTENTADAS EN NUMEROSAS OBSERVACIONES Y REFLEXIONES TEÓRICAS E INVESTIGACIÓNOBSERVACIONES Y REFLEXIONES TEÓRICAS E INVESTIGACIÓN BIBLIOGRÁFICA, EL RESULTADO DE ESTAS PRUEBAS NOS LLEVARÍABIBLIOGRÁFICA, EL RESULTADO DE ESTAS PRUEBAS NOS LLEVARÍA POCO DESPUÉS A LA ELABORACIÓN DE UNA HIPÓTESIS QUE SERIAPOCO DESPUÉS A LA ELABORACIÓN DE UNA HIPÓTESIS QUE SERIA BASE Y PRINCIPIO DE UNA INVESTIGACIÓN MÁS PROFUNDA QUEBASE Y PRINCIPIO DE UNA INVESTIGACIÓN MÁS PROFUNDA QUE ROMPERÍA RADICALMENTE CON EL MÉTODO TRADICIONAL DEROMPERÍA RADICALMENTE CON EL MÉTODO TRADICIONAL DE ANÁLISIS DE DNA POR MEDIO DE ELECTROFORESIS.ANÁLISIS DE DNA POR MEDIO DE ELECTROFORESIS.

EL TRABAJO COTIDIANO QUE REALIZÁBAMOS EN EL LABORATORIOEL TRABAJO COTIDIANO QUE REALIZÁBAMOS EN EL LABORATORIO CON MUESTRAS DE ADN DE DISTINTOS ORÍGENES NOS LLEVO PASOCON MUESTRAS DE ADN DE DISTINTOS ORÍGENES NOS LLEVO PASO A PASO A LA DETERMINACIÓN DE QUE ERA NECESARIO ENCONTRARA PASO A LA DETERMINACIÓN DE QUE ERA NECESARIO ENCONTRAR UN CAMINO ALTERNO AL USO DEL MÉTODO DE ELECTROFORESIS,UN CAMINO ALTERNO AL USO DEL MÉTODO DE ELECTROFORESIS, NOS HICIMOS EL PROPÓSITO DENOS HICIMOS EL PROPÓSITO DE BUSCAR UNA TÉCNICA DEBUSCAR UNA TÉCNICA DE ANÁLISIS CON LA QUE PUDIÉRAMOS DESCARTAR O SUSTITUIR ELANÁLISIS CON LA QUE PUDIÉRAMOS DESCARTAR O SUSTITUIR EL USO DEL BROMURO DE ETIDIO Y LA LUZ ULTRAVIOLETA, ELUSO DEL BROMURO DE ETIDIO Y LA LUZ ULTRAVIOLETA, EL PRIMERO COMO COLORANTE DEL ADN Y EL SEGUNDO COMOPRIMERO COMO COLORANTE DEL ADN Y EL SEGUNDO COMO REVELADOR DE ADN.REVELADOR DE ADN.

PARA TODOS LOS INVESTIGADORES QUE NOS DEDICAMOS A LAPARA TODOS LOS INVESTIGADORES QUE NOS DEDICAMOS A LA BIOLOGÍA MOLECULAR TODA INVESTIGACIÓN CON ADN HA SIDO YBIOLOGÍA MOLECULAR TODA INVESTIGACIÓN CON ADN HA SIDO Y ES APASIONANTE, EL HORIZONTE ABIERTO POR LA GENÉTICA SEES APASIONANTE, EL HORIZONTE ABIERTO POR LA GENÉTICA SE PRESENTA COMO ALGO INFINITO Y MARAVILLOSO, SIN EMBARGOPRESENTA COMO ALGO INFINITO Y MARAVILLOSO, SIN EMBARGO EL RIESGO PROFESIONAL ES CONSTANTE Y PERMANENTE PARA LAEL RIESGO PROFESIONAL ES CONSTANTE Y PERMANENTE PARA LA

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SALUD DE LOS INVESTIGADORES AL ESTAR EXPUESTOSSALUD DE LOS INVESTIGADORES AL ESTAR EXPUESTOS COTIDIANAMENTE A LA MANIPULACIÓN DE MATERIALES TÓXICOS YCOTIDIANAMENTE A LA MANIPULACIÓN DE MATERIALES TÓXICOS Y CANCERÍGENOS.CANCERÍGENOS.ESA CIRCUNSTANCIA APARENTEMENTE FATAL, NOS LLEVO A TOMARESA CIRCUNSTANCIA APARENTEMENTE FATAL, NOS LLEVO A TOMAR LA DETERMINACIÓN DE BUSCAR UN SUSTITUTO AL BROMURO DELA DETERMINACIÓN DE BUSCAR UN SUSTITUTO AL BROMURO DE ETIDIO, UN NUEVO COLORANTE QUE FUERA BIODEGRADABLE, QUEETIDIO, UN NUEVO COLORANTE QUE FUERA BIODEGRADABLE, QUE SE ADHIRIERA A LA MOLÉCULA DE ADN Y QUE LO HICIERA VISIBLESE ADHIRIERA A LA MOLÉCULA DE ADN Y QUE LO HICIERA VISIBLE A LA LUZ NORMAL SIN NECESIDAD DE UTILIZAR LA LUZA LA LUZ NORMAL SIN NECESIDAD DE UTILIZAR LA LUZ ULTRAVIOLETA.ULTRAVIOLETA.

COMPARTIR CON USTEDES POR ESTE MEDIO, EL RESULTADO DECOMPARTIR CON USTEDES POR ESTE MEDIO, EL RESULTADO DE NUESTRAS INVESTIGACIONES , ES DARLE SENTIDO SOCIAL ANUESTRAS INVESTIGACIONES , ES DARLE SENTIDO SOCIAL A NUESTRO ESFUERZO, QUE HASTA AHORA ABARCA UN PERÍODO DENUESTRO ESFUERZO, QUE HASTA AHORA ABARCA UN PERÍODO DE 22 AÑOS Y QUE SIGNIFICA PARA NOSOTROS EL PRINCIPIO.22 AÑOS Y QUE SIGNIFICA PARA NOSOTROS EL PRINCIPIO.

HERMOSILLO, SONORAHERMOSILLO, SONORA

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GENESISGENESIS

INTRODUCCIONINTRODUCCION

Estado del ArteEstado del Arte

A partir de que el holandés Antonio Van Leeuwenhoek dió aA partir de que el holandés Antonio Van Leeuwenhoek dió a

conocer el resultado de sus observaciones realizadas con unconocer el resultado de sus observaciones realizadas con un

microscopio construido y perfeccionado por él mismo, antemicroscopio construido y perfeccionado por él mismo, ante

los científicos miembros de la Real Sociedad de Inglaterra,los científicos miembros de la Real Sociedad de Inglaterra,

entre los que se encontraban Robert Boyle, fundadorentre los que se encontraban Robert Boyle, fundador de la de la

química científica, Isaac Newton y Regnier de Graaf entrequímica científica, Isaac Newton y Regnier de Graaf entre

otros, el estudio de la naturaleza orgánica adquirió una nuevaotros, el estudio de la naturaleza orgánica adquirió una nueva

dimensión, un mundo microscópico desconocido para todos sedimensión, un mundo microscópico desconocido para todos se

reveló creando una gran conmoción en el mundo científico delreveló creando una gran conmoción en el mundo científico del

siglo XVII, en ese tiempo no se aceptaba que hubierasiglo XVII, en ese tiempo no se aceptaba que hubiera

organismos mas pequeños que los ácaros, pero el trabajo deorganismos mas pequeños que los ácaros, pero el trabajo de

observación minucioso y tenaz de Leeuwenhoek evidenció laobservación minucioso y tenaz de Leeuwenhoek evidenció la

existencia de organismos invisibles para los ojos humanos, enexistencia de organismos invisibles para los ojos humanos, en

un siglo en el que aun persistían supersticiones y atavismosun siglo en el que aun persistían supersticiones y atavismos

que dificultaban enormemente el trabajo de los hombres deque dificultaban enormemente el trabajo de los hombres de

ciencia, el descubrimiento de Leeuwenhoek tan importante yciencia, el descubrimiento de Leeuwenhoek tan importante y

trascendente como el descubrimiento del fuego o de la rueda,trascendente como el descubrimiento del fuego o de la rueda,

habría de convertirse en un impulsor del desarrollo científicohabría de convertirse en un impulsor del desarrollo científico

en los siglos siguientes, al igual que la teoría heliocéntrica deen los siglos siguientes, al igual que la teoría heliocéntrica de

Copérnico que recibió un apoyo determinante en el siglo XV11,Copérnico que recibió un apoyo determinante en el siglo XV11,

de otro sabio contemporáneo de Leeuwenhoek, Galileo Galileide otro sabio contemporáneo de Leeuwenhoek, Galileo Galilei

que se interesó por la fabricación de los primeros telescopios,que se interesó por la fabricación de los primeros telescopios,

el microcosmo y el macrocosmo revelando en formael microcosmo y el macrocosmo revelando en forma

dosificada, sus enigmas.dosificada, sus enigmas.

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La capacidad de poder ver organismos microscópicos se abrióLa capacidad de poder ver organismos microscópicos se abrió

paso en las ciencias biológicas aportando un elementopaso en las ciencias biológicas aportando un elemento

esencial de unidad enesencial de unidad en el estudio de los seres vivos e hizoel estudio de los seres vivos e hizo

posible analizar todos los organismos en sus dosposible analizar todos los organismos en sus dos

caracterizaciones, o bien como un sistema de células ocaracterizaciones, o bien como un sistema de células o

unicelulares, esto devino en la clasificación de los seres vivosunicelulares, esto devino en la clasificación de los seres vivos

en dos grupos bien definidos, el primero de ellos es el de losen dos grupos bien definidos, el primero de ellos es el de los

eucariotas con un núcleo que contiene los cromosomas coneucariotas con un núcleo que contiene los cromosomas con

mayor información genética, lo que los convierte enmayor información genética, lo que los convierte en

organismos mas complejos capaces de reproducirseorganismos mas complejos capaces de reproducirse

sexualmente y el segundo grupo al que pertenecen lossexualmente y el segundo grupo al que pertenecen los

procariotas que tienen su cromosoma o sus cromosomas en elprocariotas que tienen su cromosoma o sus cromosomas en el

citoplasma y que carecen de núcleo definido que caracteriza acitoplasma y que carecen de núcleo definido que caracteriza a

las bacterias unicelulares.las bacterias unicelulares.

A mediados del siglo XIX , dos investigadores aportaríanA mediados del siglo XIX , dos investigadores aportarían

nuevos elementos en el estudio de los organismos y de lanuevos elementos en el estudio de los organismos y de la

herencia genética, el inglés Charles Darwin y el austriacoherencia genética, el inglés Charles Darwin y el austriaco

Gregor Mendel. En 1859 aparece la revolucionaria tesis deGregor Mendel. En 1859 aparece la revolucionaria tesis de

Darwin al editarse “El Origen de las Especies”. DarwinDarwin al editarse “El Origen de las Especies”. Darwin

descubrió que la descendencia tenía pequeñas diferencias condescubrió que la descendencia tenía pequeñas diferencias con

sus progenitores, de tal manera que los hijos son casi igualessus progenitores, de tal manera que los hijos son casi iguales

a sus padres y ese “casi”, significa la nueva característica quea sus padres y ese “casi”, significa la nueva característica que

permite la evolución de las especies.permite la evolución de las especies.

Gregor Mendel era un monje austriaco que al interior de suGregor Mendel era un monje austriaco que al interior de su

convento realizóconvento realizó importantes experimentos de polinización deimportantes experimentos de polinización de

semillas de guisantes por medio de los cuales descubrió lassemillas de guisantes por medio de los cuales descubrió las

leyes de la herencia y acuñó términos aun vigentes comoleyes de la herencia y acuñó términos aun vigentes como

caracteres recesivos y caracteres dominantes y desarrolló lacaracteres recesivos y caracteres dominantes y desarrolló la

estadística rudimentaria al establecer ecuaciones deestadística rudimentaria al establecer ecuaciones de

predicción para la descendencia, conociendo laspredicción para la descendencia, conociendo las

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características de los progenitores. De hecho con Mendel secaracterísticas de los progenitores. De hecho con Mendel se

desarrollo en 1860 el concepto de gen, aunque sería hasta eldesarrollo en 1860 el concepto de gen, aunque sería hasta el

siglo siguiente que pasaría a formar parte del paradigmasiglo siguiente que pasaría a formar parte del paradigma

genético.genético.

No obstante, ellos nunca supieron que fueron los pioneros enNo obstante, ellos nunca supieron que fueron los pioneros en

el estudio del DNA, tampoco los científicos de su épocael estudio del DNA, tampoco los científicos de su época

reconocieron la importancia de los trabajos publicados y fuereconocieron la importancia de los trabajos publicados y fue

hasta principios del siglo XX, después de que ellos murieron,hasta principios del siglo XX, después de que ellos murieron,

cuando se retomaron y reconocieron los postulados de Darwincuando se retomaron y reconocieron los postulados de Darwin

y Mendel sobre la herencia y evolución . y Mendel sobre la herencia y evolución .

Un científico contemporáneo a Darwin y Mendel llamadoUn científico contemporáneo a Darwin y Mendel llamado

Fiedrich Miescher descubrió en 1869 que un material extraídoFiedrich Miescher descubrió en 1869 que un material extraído

de núcleos celulares y de célulasde núcleos celulares y de células del pus era diferente en sudel pus era diferente en su

composición química a las proteínas sentando las bases de lacomposición química a las proteínas sentando las bases de la

química genética y al descubrimiento del DNA. Miescher aislóquímica genética y al descubrimiento del DNA. Miescher aisló

un compuesto que denominó nucleína hoy conocido comoun compuesto que denominó nucleína hoy conocido como

ácidos nucleicos. ácidos nucleicos.

Un salto cualitativo muy importante y trascendente en laUn salto cualitativo muy importante y trascendente en la

biotecnología se produjo en 1937 cuando el bioquímico suecobiotecnología se produjo en 1937 cuando el bioquímico sueco

Arne Tiselius y el investigador P. Kônig inventaron el métodoArne Tiselius y el investigador P. Kônig inventaron el método

de la electroforesis cuya aplicación en el estudio de lade la electroforesis cuya aplicación en el estudio de la

genética y del genoma humano ha sido muy determinante.genética y del genoma humano ha sido muy determinante.

Otro avance notorio en el campo de la microbiología sucedióOtro avance notorio en el campo de la microbiología sucedió

en 1942 cuando el científico italiano Salvador Luria obtuvo laen 1942 cuando el científico italiano Salvador Luria obtuvo la

primera microfotografía de alta calidad de un bacteriófago.primera microfotografía de alta calidad de un bacteriófago.

<En 1944, el científico norteamericano Oswald Avery en<En 1944, el científico norteamericano Oswald Avery en

compañía de sus colaboradores Colin Macleod y Maclyncompañía de sus colaboradores Colin Macleod y Maclyn

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McCarty demostraron que las características hereditarias deMcCarty demostraron que las características hereditarias de

los seres vivos, se debían al DNA y no a las proteínas y lolos seres vivos, se debían al DNA y no a las proteínas y lo

comprobaron al transformar una bacteria inocua en patógena,comprobaron al transformar una bacteria inocua en patógena,

con material genético que extrajeron de otra bacteriacon material genético que extrajeron de otra bacteria

virulenta.virulenta.

Cuando Avery anunció a la comunidad científica suCuando Avery anunció a la comunidad científica su

descubrimiento, la reacción fue de burla y escepticismo , masdescubrimiento, la reacción fue de burla y escepticismo , mas

sin embargo, la curiosidad y la expectación creada propiciósin embargo, la curiosidad y la expectación creada propició

que se iniciara un gran número de líneas de investigación,que se iniciara un gran número de líneas de investigación,

entre ellas la búsqueda de tecnologías para la purificación delentre ellas la búsqueda de tecnologías para la purificación del

DNA y la definición de sus componentes químicos que dioDNA y la definición de sus componentes químicos que dio

elementos teóricos y experimentales suficientes paraelementos teóricos y experimentales suficientes para

establecer la unidad básica estructural del ADN. establecer la unidad básica estructural del ADN.

Max Delbruck, Salvador Luria y otros investigadores formaronMax Delbruck, Salvador Luria y otros investigadores formaron

en 1947 el grupo de “Los fagos” en los Estados Unidos deen 1947 el grupo de “Los fagos” en los Estados Unidos de

Norteamérica, sus investigaciones fueron ampliamenteNorteamérica, sus investigaciones fueron ampliamente

difundidas y tuvieron una gran influencia.difundidas y tuvieron una gran influencia.

La investigación de bacteriófagos realizada en 1952 porLa investigación de bacteriófagos realizada en 1952 por

Oswald Avery, Martha Chase y Alfred Hershey probó que elOswald Avery, Martha Chase y Alfred Hershey probó que el

DNA era el portador de la herencia genética y puso de relieveDNA era el portador de la herencia genética y puso de relieve

los factores químicos y moleculares de la composiciónlos factores químicos y moleculares de la composición

estructural del ADN.estructural del ADN.

Por su parte, la investigadora Rosalynd Franklin entre losPor su parte, la investigadora Rosalynd Franklin entre los

años 1953 a 1954, logro producir imágenes de rayos X de laaños 1953 a 1954, logro producir imágenes de rayos X de la

forma B de ADN.forma B de ADN.

En 1953 James Watson , Francis Crick, Maurice Wilkins yEn 1953 James Watson , Francis Crick, Maurice Wilkins y

Rosalynd Franklin descubrieron la estructura molecular delRosalynd Franklin descubrieron la estructura molecular del

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DNA lo que hoy se conoce como la doble hélice y lo publicaronDNA lo que hoy se conoce como la doble hélice y lo publicaron

en la revista Nature, con el titulo: “Una estructura para elen la revista Nature, con el titulo: “Una estructura para el

ácido desoxirribonucleico” J. Watson reconoce en su artículoácido desoxirribonucleico” J. Watson reconoce en su artículo

“La doble hélice” que el éxito de la propuesta se debió“La doble hélice” que el éxito de la propuesta se debió

también a Linus Pauling.también a Linus Pauling.

El modelo de Watson y Crick propone dos hélices enrolladasEl modelo de Watson y Crick propone dos hélices enrolladas

alrededor del mismo eje formada por residuos de D-alrededor del mismo eje formada por residuos de D-

deoxiribofuranosa unidos por enlaces fosfodiester (en lasdeoxiribofuranosa unidos por enlaces fosfodiester (en las

posiciones 3 y 5). En cada hélice las bases quedan en elposiciones 3 y 5). En cada hélice las bases quedan en el

interior y los grupos fosfatos en el exterior. Las dos hélices seinterior y los grupos fosfatos en el exterior. Las dos hélices se

mantienen unidas por enlaces de puente de hidrógeno entremantienen unidas por enlaces de puente de hidrógeno entre

las purinas de una cadena y las pirimidinas de la otra,las purinas de una cadena y las pirimidinas de la otra,

conforme quedan enfrentadas en pares (2 a 2).conforme quedan enfrentadas en pares (2 a 2).

En 1956 el investigador Arthur Kornberg descubrió la enzimaEn 1956 el investigador Arthur Kornberg descubrió la enzima

ADN polimerasa. La primera enzima de restricción fue aisladaADN polimerasa. La primera enzima de restricción fue aislada

en 1971 y en 1984, el investigador Kary Mullis inventa laen 1971 y en 1984, el investigador Kary Mullis inventa la

reacción de polimerasa en cadena PCR.reacción de polimerasa en cadena PCR.

Científicos más jóvenes que James Watson se opusieron enCientíficos más jóvenes que James Watson se opusieron en

1986 a la aprobación y financiamiento del “Proyecto Genoma1986 a la aprobación y financiamiento del “Proyecto Genoma

Humano”, por considerarlo aún sin las suficientes basesHumano”, por considerarlo aún sin las suficientes bases

científicas para su desarrollo, el objetivo de este proyecto eracientíficas para su desarrollo, el objetivo de este proyecto era

descifrar la secuencia completa del ADN del ser Humano.descifrar la secuencia completa del ADN del ser Humano.

Watson fue uno de sus más tenaces impulsores y logróWatson fue uno de sus más tenaces impulsores y logró

finalmente que se pusiera en marcha.finalmente que se pusiera en marcha.

Los Nuevos ParadigmasLos Nuevos Paradigmas

El epistemologo y filósofo norteamericano Thomas SamuelEl epistemologo y filósofo norteamericano Thomas Samuel

Kuhn (1922-1996) hizo en su obra preguntas fundamentalesKuhn (1922-1996) hizo en su obra preguntas fundamentales

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acerca del conocimiento científico, entre ellas las siguientes:acerca del conocimiento científico, entre ellas las siguientes:

¿Como se lleva a cabo la actividad científica?, ¿Es el¿Como se lleva a cabo la actividad científica?, ¿Es el

conocimiento científico acumulativo a lo largo de la historia?,conocimiento científico acumulativo a lo largo de la historia?,

las respuestas que da Kuhn a estas y otras preguntas en sulas respuestas que da Kuhn a estas y otras preguntas en su

libro “La estructura de las revoluciones científicas” (1962)libro “La estructura de las revoluciones científicas” (1962)

significaron un gran cambio en las posiciones filosóficassignificaron un gran cambio en las posiciones filosóficas

acerca de la ciencia, el modelo formalista que imperaba hastaacerca de la ciencia, el modelo formalista que imperaba hasta

entonces (Círculo de Viena) fue desafiado por el enfoqueentonces (Círculo de Viena) fue desafiado por el enfoque

historicista de T. S. Kuhn, según el cual la ciencia se desarrollahistoricista de T. S. Kuhn, según el cual la ciencia se desarrolla

siguiendo determinadas fases:siguiendo determinadas fases:

1.-Establecimiento de un paradigma1.-Establecimiento de un paradigma

2.-Ciencia normal2.-Ciencia normal

3.-Crisis3.-Crisis

4.-Revolución científica4.-Revolución científica

5.-Establecimiento de un nuevo paradigma5.-Establecimiento de un nuevo paradigma

Kuhn consideraba a los paradigmas como realizaciones delKuhn consideraba a los paradigmas como realizaciones del

conocimiento científico universalmente reconocidas queconocimiento científico universalmente reconocidas que

durante cierto tiempo proporcionan modelos de problemas ydurante cierto tiempo proporcionan modelos de problemas y

soluciones a una comunidad científica, los paradigmas son porsoluciones a una comunidad científica, los paradigmas son por

tanto la suma de teorías, conocimientos y prácticas que setanto la suma de teorías, conocimientos y prácticas que se

aceptan en forma universal por toda la comunidad científica yaceptan en forma universal por toda la comunidad científica y

a partir de las cuales se realiza una determinadaa partir de las cuales se realiza una determinada

investigación, a esta forma de investigación la llama Kuhninvestigación, a esta forma de investigación la llama Kuhn

“Ciencia Normal” que significa que una investigación esta“Ciencia Normal” que significa que una investigación esta

basada firmemente en realizaciones científicas pasadas,basada firmemente en realizaciones científicas pasadas,

mismas que una comunidad científica particular reconocemismas que una comunidad científica particular reconoce

durante cierto tiempo como fundamento valido para sudurante cierto tiempo como fundamento valido para su

práctica posterior. Esta fase del conocimiento científico ocupapráctica posterior. Esta fase del conocimiento científico ocupa

la mayor parte del tiempo, de los investigadores que realizanla mayor parte del tiempo, de los investigadores que realizan

trabajos rutinarios de comprobación de los conocimientos, quetrabajos rutinarios de comprobación de los conocimientos, que

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han adquirido para poner a prueba la solidez del paradigmahan adquirido para poner a prueba la solidez del paradigma

en que se basan, demostrar su amplio dominio sobre elen que se basan, demostrar su amplio dominio sobre el

mismo, pero sin atreverse a romper las concepciones de sumismo, pero sin atreverse a romper las concepciones de su

tiempo, como sí lo hicieron Galileo , Einstein y tantos otrostiempo, como sí lo hicieron Galileo , Einstein y tantos otros

investigadores.investigadores.

Para Kuhn, se produce una revolución científica, cuando unoPara Kuhn, se produce una revolución científica, cuando uno

de los nuevos paradigmas sustituye al tradicional, comode los nuevos paradigmas sustituye al tradicional, como

sucedió con la teoría heliocéntrica de Copérnico que sustituyósucedió con la teoría heliocéntrica de Copérnico que sustituyó

a la concepción geocéntrica de Tolomeo, o la teoría de laa la concepción geocéntrica de Tolomeo, o la teoría de la

relatividad de Albert Einstein, que cambió totalmente la visiónrelatividad de Albert Einstein, que cambió totalmente la visión

del universo propuesta por Isaac Newton, agrega Kuhn, “Lasdel universo propuesta por Isaac Newton, agrega Kuhn, “Las

revoluciones científicas se consideran aquí, como aquellosrevoluciones científicas se consideran aquí, como aquellos

episodios de desarrollo no acumulativo en el que un antiguoepisodios de desarrollo no acumulativo en el que un antiguo

paradigma es remplazado, completamente o en parte por otroparadigma es remplazado, completamente o en parte por otro

nuevo e incompatible, el progreso de la ciencia se producenuevo e incompatible, el progreso de la ciencia se produce

solo en las fases de ciencia normal, pero no se puede hablarsolo en las fases de ciencia normal, pero no se puede hablar

de un progreso continuo desde la época de los griegos hasta lade un progreso continuo desde la época de los griegos hasta la

actualidad porque las revoluciones científicas no son sinoactualidad porque las revoluciones científicas no son sino

rupturas de esa continuidad. Cada revolución científica marcarupturas de esa continuidad. Cada revolución científica marca

en cierto sentido un nuevo comienzo de la ciencia, un nuevoen cierto sentido un nuevo comienzo de la ciencia, un nuevo

paradigma”.paradigma”.

LA DOBLE HELICELA DOBLE HELICE

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QUE ES EL ADNQUE ES EL ADN

En términos del paradigma de laEn términos del paradigma de la

“Ciencia Normal” podemos definir el DNA como la molécula“Ciencia Normal” podemos definir el DNA como la molécula

que contiene y organiza la vida, se encuentra en el núcleoque contiene y organiza la vida, se encuentra en el núcleo

celular y está compuesta por 2 cadenas complementarias,celular y está compuesta por 2 cadenas complementarias,

unidas entre sí por los pares de bases nitrogenadas. Cadaunidas entre sí por los pares de bases nitrogenadas. Cada

cadena esta compuesta por unidades que se conocen comocadena esta compuesta por unidades que se conocen como

nucleótidos, que son como los eslabones de cualquier cadena.nucleótidos, que son como los eslabones de cualquier cadena.

Hasta la actualidad se han desarrollado diferentes Hasta la actualidad se han desarrollado diferentes

metodologías para el análisis y conocimiento del DNA, todasmetodologías para el análisis y conocimiento del DNA, todas

basadas en el principiobasadas en el principio de que: “El DNA no se puede ver”, sede que: “El DNA no se puede ver”, se

ha establecido este principio como un dogma indiscutible, unha establecido este principio como un dogma indiscutible, un

límite a la visión al igual que lo fueron los ácaros del siglolímite a la visión al igual que lo fueron los ácaros del siglo

XV11. La metodología de electroforesis utilizada actualmenteXV11. La metodología de electroforesis utilizada actualmente

en los laboratorios del mundo ha brindado conocimientosen los laboratorios del mundo ha brindado conocimientos

sobre el DNA muy importantes, sin embargo, sus resultadossobre el DNA muy importantes, sin embargo, sus resultados

siempre son de interpretación por ser indirectos, ya que nosiempre son de interpretación por ser indirectos, ya que no

ofrecen una imagen real y directa del DNA sino bandas, enofrecen una imagen real y directa del DNA sino bandas, en

todos los casos, independientemente del origen de lastodos los casos, independientemente del origen de las

muestras.muestras.

BIOFOOD KITS BIOFOOD KITS Cat. No. 91.122 BIOTOOLSBIOTOOLS M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 M: Visualización de fragmentos de RFLP correspondientes a 14 especiesdiferentes, tras digestion con la Enzima 1. M: 100-bp molecular ladder (Cat. No.31.006). Carriles 1 a 14: patrones de restricción de buffalo, conejo, caballo, gamo,vaca, cabra, ciervo, emu, canguro, avestruz, gato, perrro, ratón y humano.

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Del fenotipo al genotipoDel fenotipo al genotipo

“Los genetistas moleculares pensamos en “Los genetistas moleculares pensamos en Genes y genomas, casi en términos visuales. Genes y genomas, casi en términos visuales. Somos capaces de “Ver” con nuestros ojos Somos capaces de “Ver” con nuestros ojos Mentales el DNA y los esquemas de su Mentales el DNA y los esquemas de su Funcionamiento” Funcionamiento”

Maxine Singer y Paul Berg, 1993.Maxine Singer y Paul Berg, 1993.

En la investigación que durante 22 años hemos realizado,En la investigación que durante 22 años hemos realizado,

desarrollamos una metodología para aislar y extraer el DNA dedesarrollamos una metodología para aislar y extraer el DNA de

células sanguíneas, estas muestras de DNA forman patronescélulas sanguíneas, estas muestras de DNA forman patrones

perceptibles bajo un microscopio óptico. En el proceso deperceptibles bajo un microscopio óptico. En el proceso de

aplicación de la técnica, las células de la sangre son aisladasaplicación de la técnica, las células de la sangre son aisladas

de la muestra mediante el procedimiento de remover elde la muestra mediante el procedimiento de remover el

plasma, después las células aisladas, son tratadas conplasma, después las células aisladas, son tratadas con

reactivos orgánicos con alta solución salina, para liberar elreactivos orgánicos con alta solución salina, para liberar el

agregado de DNA sin perturbar su integridad, toda vez que losagregado de DNA sin perturbar su integridad, toda vez que los

glóbulos rojos no tienen núcleo, el agregado de DNA esglóbulos rojos no tienen núcleo, el agregado de DNA es

formado de los glóbulos blancos, una ultima fase delformado de los glóbulos blancos, una ultima fase del

procedimiento consiste en precipitar el agregado de DNA paraprocedimiento consiste en precipitar el agregado de DNA para

facilitar la formación de patrones visuales, después la muestrafacilitar la formación de patrones visuales, después la muestra

eses examinada en el microscopio.examinada en el microscopio.

Haber encontrado esta nueva tecnología para estudiar el DNA,Haber encontrado esta nueva tecnología para estudiar el DNA,

ha sido producto del trabajo experimental de muchos años.ha sido producto del trabajo experimental de muchos años.

Inicialmente solo quisimos cambiar el bromuro de etidio,Inicialmente solo quisimos cambiar el bromuro de etidio,

colorante utilizado en electroforesis, por otro que no fueracolorante utilizado en electroforesis, por otro que no fuera

perjudicial para la salud y el entorno ecológico y además queperjudicial para la salud y el entorno ecológico y además que

no necesitara de iluminación con luz ultravioleta para poderno necesitara de iluminación con luz ultravioleta para poder

ver las bandas de DNA. Buscando el colorante seguro y eficaz,ver las bandas de DNA. Buscando el colorante seguro y eficaz,

probamos algunos por electroforesis en corridas de muestrasprobamos algunos por electroforesis en corridas de muestras

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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de DNA de bacterias, en una ocasión por una omisión, elde DNA de bacterias, en una ocasión por una omisión, el

buffer de TRIZMA se utilizó sin diluir, ya que se preparababuffer de TRIZMA se utilizó sin diluir, ya que se preparaba 1010

veces concentrado (10 X), por lo que la muestra de DNA seveces concentrado (10 X), por lo que la muestra de DNA se

comportaba diferente, decidimos observarla al microscopio ycomportaba diferente, decidimos observarla al microscopio y

fue así como por vez primera, vimos la cadena de ADN.fue así como por vez primera, vimos la cadena de ADN.

El 16 de enero de1991, fecha inolvidable en la que porEl 16 de enero de1991, fecha inolvidable en la que por

primera ocasión observamos una imagen de ADN en elprimera ocasión observamos una imagen de ADN en el

microscopio óptico, se inició en Medio Oriente, la llamadamicroscopio óptico, se inició en Medio Oriente, la llamada

“Guerra del Golfo” o “Tormenta del Desierto”, no pudimos“Guerra del Golfo” o “Tormenta del Desierto”, no pudimos

evitar reflexionar en esos momentos, como lo hicieraevitar reflexionar en esos momentos, como lo hiciera

muchísimas décadas atrás, el escritor soviético Ilya Ehrenburgmuchísimas décadas atrás, el escritor soviético Ilya Ehrenburg

en tiempos similares, sobre esos dos polos extremos de laen tiempos similares, sobre esos dos polos extremos de la

existencia humana que son la vida y la muerte. Ante loexistencia humana que son la vida y la muerte. Ante lo

contrastante que resultaba el estar en el laboratoriocontrastante que resultaba el estar en el laboratorio

observando y analizandoobservando y analizando una muestra de DNA, origen yuna muestra de DNA, origen y

maravilla de la vida y por otra parte estar escuchandomaravilla de la vida y por otra parte estar escuchando

simultáneamente, de un televisor cercano, el estruendosimultáneamente, de un televisor cercano, el estruendo

mortífero de la destrucción de las bombas sobre Bagdad .mortífero de la destrucción de las bombas sobre Bagdad .

Pasada la fuerte emoción de la experiencia indescriptible, dePasada la fuerte emoción de la experiencia indescriptible, de

poder ver por primera vez de manera directa la imagen delpoder ver por primera vez de manera directa la imagen del

ADN en el microscopio óptico y constatar, que lo que estabaADN en el microscopio óptico y constatar, que lo que estaba

viendo no tenia ningún precedente visual morfológico conviendo no tenia ningún precedente visual morfológico con

microorganismo alguno, aun así entramos en duda sobre lomicroorganismo alguno, aun así entramos en duda sobre lo

que observaba, ya que fuimos los primeros escépticos,que observaba, ya que fuimos los primeros escépticos,

influenciados por elinfluenciados por el peso del dogma vigente, de que “El DNApeso del dogma vigente, de que “El DNA

no se puede ver”, aprendido desde los años estudiantiles deno se puede ver”, aprendido desde los años estudiantiles de

nuestra formación profesional. Pensamos que una posibilidadnuestra formación profesional. Pensamos que una posibilidad

era que la muestra de DNA, se pudo haber contaminadoera que la muestra de DNA, se pudo haber contaminado

durante su preparación y que lo que veíamos tenia ese origen,durante su preparación y que lo que veíamos tenia ese origen,

nos resistíamos a creer lo que veíamos en el portaobjeto delnos resistíamos a creer lo que veíamos en el portaobjeto del

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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microscopio, un hilo claro y casi transparente, diferente a todomicroscopio, un hilo claro y casi transparente, diferente a todo

lo antes visto a través de un microscopio, una imagenlo antes visto a través de un microscopio, una imagen

hermosa y apabullante por su importancia y por lo quehermosa y apabullante por su importancia y por lo que

significa en el ciclo vital de todos los organismos vivos.significa en el ciclo vital de todos los organismos vivos.

Repetimos por tanto el experimento una y otra vez desde elRepetimos por tanto el experimento una y otra vez desde el

principio, teniendo especial cuidado en la realización de cadaprincipio, teniendo especial cuidado en la realización de cada

paso del proceso, incluyendo la esterilización minuciosa depaso del proceso, incluyendo la esterilización minuciosa de

todo el material y el equipo utilizado, operacióntodo el material y el equipo utilizado, operación necesaria paranecesaria para

llevar a cabo las repeticiones necesarias siguiendo losllevar a cabo las repeticiones necesarias siguiendo los

siguientes pasos:siguientes pasos:

1)1) Cultivar la bacteriaCultivar la bacteria

2)2) Extraer el ADNExtraer el ADN

3)3) PurificarloPurificarlo

4)4) PrecipitarloPrecipitarlo

5)5) Observarlo al microscopio ópticoObservarlo al microscopio óptico

Repetimos varias veces las pruebas con el DNA de la cepaRepetimos varias veces las pruebas con el DNA de la cepa

de Escherichia. Coli, que fue la primera bacteria con la quede Escherichia. Coli, que fue la primera bacteria con la que

trabajamos, después con eltrabajamos, después con el DNA de otras cepas y luego conDNA de otras cepas y luego con

otras bacterias y el resultado siempre fue el mismo, perootras bacterias y el resultado siempre fue el mismo, pero

ya con la seguridad plena de que las muestras no estabanya con la seguridad plena de que las muestras no estaban

contaminadas, que la forma decontaminadas, que la forma de extracción era correcta yextracción era correcta y

de quede que efectivamente el DNA si se puede ver con unefectivamente el DNA si se puede ver con un

microscopio óptico.microscopio óptico.

Después de emplear varias semanas en repeticiones conDespués de emplear varias semanas en repeticiones con

diferentes cultivos de microorganismos y una vez que nosdiferentes cultivos de microorganismos y una vez que nos

convencimos totalmente que el ADN de bacterias se puedeconvencimos totalmente que el ADN de bacterias se puede

ver en un microscopio óptico, elaboramos una hipótesis yver en un microscopio óptico, elaboramos una hipótesis y

un protocolo que nadie quiso escuchar o conocer, porque elun protocolo que nadie quiso escuchar o conocer, porque el

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

1616

dogma científico afirma que era algo imposible ydogma científico afirma que era algo imposible y

descabellado afirmar que el DNA se puede ver.descabellado afirmar que el DNA se puede ver.

Para no frenar nuestro propósito de continuar con esa líneaPara no frenar nuestro propósito de continuar con esa línea

de investigación y poder avanzar con el proyecto dede investigación y poder avanzar con el proyecto de

desarrollar un nuevo método para analizar y estudiar eldesarrollar un nuevo método para analizar y estudiar el

DNA, solicitamos ingresar al doctorado en biologíaDNA, solicitamos ingresar al doctorado en biología

molecular, en el Instituto de Ingeniería Genética de lamolecular, en el Instituto de Ingeniería Genética de la

UNAM, que se encuentra en Cuernavaca Morelos.UNAM, que se encuentra en Cuernavaca Morelos.

En el departamento de biología molecular de esaEn el departamento de biología molecular de esa

institución, nos comunicaron que podía ingresar alinstitución, nos comunicaron que podía ingresar al

posgrado, pero no era admitido que los aspirantes alposgrado, pero no era admitido que los aspirantes al

doctorado llevaran su propio proyecto de investigación,doctorado llevaran su propio proyecto de investigación,

mas bien todos los estudiantes aceptados tenían quemas bien todos los estudiantes aceptados tenían que

adscribirse a un proyecto ya existente y con presupuestoadscribirse a un proyecto ya existente y con presupuesto

aprobado por tanto no estaba permitido desarrollar comoaprobado por tanto no estaba permitido desarrollar como

tesis doctoral nuestro proyecto.tesis doctoral nuestro proyecto.

Sin embargo el Director del área nos recibió y nos escuchóSin embargo el Director del área nos recibió y nos escuchó

con mucha gentileza y atención cuando le hablamos decon mucha gentileza y atención cuando le hablamos de

nuestra investigación y las pruebas realizadas hastanuestra investigación y las pruebas realizadas hasta

entonces, también vio minuciosamente nuestras primerasentonces, también vio minuciosamente nuestras primeras

fotografías del DNA de 4 bacterias que le mostramos.fotografías del DNA de 4 bacterias que le mostramos.

Nosotros escuchamos todas sus observaciones y tratamosNosotros escuchamos todas sus observaciones y tratamos

de responder a sus preguntas de la manera más explicita.de responder a sus preguntas de la manera más explicita.

Al final de la entrevista nos causó gran sorpresa cuando nosAl final de la entrevista nos causó gran sorpresa cuando nos

recomendó que por considerar que valía la pena desarrollarrecomendó que por considerar que valía la pena desarrollar

un esfuerzo para continuar la investigación, lo primero queun esfuerzo para continuar la investigación, lo primero que

teníamos que hacer es proteger la idea del nuevo métodoteníamos que hacer es proteger la idea del nuevo método

de análisis de DNA y patentarlo, en México y en Estadosde análisis de DNA y patentarlo, en México y en Estados

Unidos.Unidos.

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1717

Regresamos a Hermosillo felices y dispuestos a llevar aRegresamos a Hermosillo felices y dispuestos a llevar a

cabo la sugerencia, que nos hizo el entonces director decabo la sugerencia, que nos hizo el entonces director de

Biología Molecular de la Universidad Autónoma de MéxicoBiología Molecular de la Universidad Autónoma de México

(UNAM), que una personalidad científica de su nivel,(UNAM), que una personalidad científica de su nivel,

estimara nuestro trabajo adecuado para patentarlo, fue unestimara nuestro trabajo adecuado para patentarlo, fue un

estímulo absoluto para tratar de vencer todas lasestímulo absoluto para tratar de vencer todas las

dificultades que se presentaran.dificultades que se presentaran.

En octubre del mismo año (1991), solicitamos la patente enEn octubre del mismo año (1991), solicitamos la patente en

el IMPI (Instituto Mexicano de la Propiedad Industrial) enel IMPI (Instituto Mexicano de la Propiedad Industrial) en

la ciudad de México, y en diciembre del mismo año viajamosla ciudad de México, y en diciembre del mismo año viajamos

a Washington D,C, para solicitar la patente en Estadosa Washington D,C, para solicitar la patente en Estados

Unidos. Pasaron 5 años sin recibir ninguna comunicaciónUnidos. Pasaron 5 años sin recibir ninguna comunicación

del IMPI, y sin que decayera el animo y el entusiasmo por ladel IMPI, y sin que decayera el animo y el entusiasmo por la

investigación continuamos trabajando, pasando de uninvestigación continuamos trabajando, pasando de un

asombro a otro ante los resultados obtenidos en elasombro a otro ante los resultados obtenidos en el

laboratorio. En 1996 nos otorgaron la patente (182175) enlaboratorio. En 1996 nos otorgaron la patente (182175) en

México, D. F. titulada: “ Un Nuevo Colorante Para laMéxico, D. F. titulada: “ Un Nuevo Colorante Para la

Tinción del DNA ” (de Rodríguez León Paz Gloria ElenaTinción del DNA ” (de Rodríguez León Paz Gloria Elena

1996). La solicitud que realizamos en Washington no1996). La solicitud que realizamos en Washington no

prosperó en ese primer intento, porque ignorábamos enprosperó en ese primer intento, porque ignorábamos en

ese tiempo que en Estados Unidos, existen despachos deese tiempo que en Estados Unidos, existen despachos de

abogados autorizados legalmente para llevar a cabo esosabogados autorizados legalmente para llevar a cabo esos

trámites y además no tuvimos los recursos económicostrámites y además no tuvimos los recursos económicos

para contratar a los de abogados que nos llevaran el caso,para contratar a los de abogados que nos llevaran el caso,

le diera seguimiento y en su momento formulara lasle diera seguimiento y en su momento formulara las

reivindicaciones de la solicitud de patente. reivindicaciones de la solicitud de patente.

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1818

Los Polímeros NaturalesLos Polímeros Naturales

En 1966, 30 años antes de que nos concedieran el registro deEn 1966, 30 años antes de que nos concedieran el registro de

esa patente, presenté mi examen profesional en laesa patente, presenté mi examen profesional en la

Universidad de Sonora para recibir el titulo de QuímicaUniversidad de Sonora para recibir el titulo de Química

Industrial, con un trabajo de tesis titulado “Obtención deIndustrial, con un trabajo de tesis titulado “Obtención de

Extracto curtiente Libre de Almidón de la Cañagria (RumexExtracto curtiente Libre de Almidón de la Cañagria (Rumex

hymenosepalus)” por esta investigación me fue otorgada unahymenosepalus)” por esta investigación me fue otorgada una

mención honorífica por trabajo de tesis, y en 1980 obtuve lamención honorífica por trabajo de tesis, y en 1980 obtuve la

patente del Instituto de la Propiedad Industrial con el mismopatente del Instituto de la Propiedad Industrial con el mismo

trabajo., pero con el nuevo título de “Proceso Mejorado paratrabajo., pero con el nuevo título de “Proceso Mejorado para

Obtener Extracto Curtiente Libre de almidón a Partir de laObtener Extracto Curtiente Libre de almidón a Partir de la

Cañagria (Rumex Hymenosepalus)”, (Patente númeroCañagria (Rumex Hymenosepalus)”, (Patente número

142378, otorgada el 8 de octubre de 1980) cuyos derechos142378, otorgada el 8 de octubre de 1980) cuyos derechos

doné a la Comisión Nacional de Zonas Áridas, CONAZA.doné a la Comisión Nacional de Zonas Áridas, CONAZA.

Tuve mis primeras prácticas profesionales (1967)Tuve mis primeras prácticas profesionales (1967)

trabajando en el análisis de minerales de uranio en eltrabajando en el análisis de minerales de uranio en el

Estado de Sonora con la Comisión de Energía Nuclear yEstado de Sonora con la Comisión de Energía Nuclear y

tome un curso de actualización profesional en la UNAM entome un curso de actualización profesional en la UNAM en

1968. Durante dos semestres realicé estudios con la1968. Durante dos semestres realicé estudios con la

primera generación de la Maestría en Polímeros yprimera generación de la Maestría en Polímeros y

Materiales, en la Universidad de Sonora, esos estudios deMateriales, en la Universidad de Sonora, esos estudios de

posgrado los abandoné al enterarme que el plan de estudiosposgrado los abandoné al enterarme que el plan de estudios

no contemplaba el trabajo con polímeros naturales, tenia enno contemplaba el trabajo con polímeros naturales, tenia en

esa época un especial interés por esa clase de polímeros,esa época un especial interés por esa clase de polímeros,

puesto que el extracto de Cañagría con el que trabajé en mipuesto que el extracto de Cañagría con el que trabajé en mi

tesis, es un polímero natural. No sabia entesis, es un polímero natural. No sabia en esos años que elesos años que el

futuro me guardaba una sorpresa en relación a esosfuturo me guardaba una sorpresa en relación a esos

conocimientos.conocimientos.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

1919

Desarrollo de un MétodoDesarrollo de un Método para la Determinación para la Determinacióndel Perfil Plasmídico endel Perfil Plasmídico en

Escherichia coliEscherichia coli

En 1988, 22 años después de obtener mi licenciatura, meEn 1988, 22 años después de obtener mi licenciatura, me

titulé de la Maestría en Ciencias, con la tesis ”Desarrollo detitulé de la Maestría en Ciencias, con la tesis ”Desarrollo de

un Método para la Determinación del Perfil Plásmidico enun Método para la Determinación del Perfil Plásmidico en

Escherichia coli”, fue mi primer trabajo sistemático conEscherichia coli”, fue mi primer trabajo sistemático con

DNA y nació de la necesidad de tener un métodoDNA y nació de la necesidad de tener un método

reproducible para conocer el perfil plásmidico de bacterias.reproducible para conocer el perfil plásmidico de bacterias.

Al inicio del estudio, en la revisión bibliográfica, encontréAl inicio del estudio, en la revisión bibliográfica, encontré

una gran cantidad de metodologías propuestas y al trataruna gran cantidad de metodologías propuestas y al tratar

de aplicarlas en el laboratorio, observé que el perfilde aplicarlas en el laboratorio, observé que el perfil

bacteriano dependía del método utilizado, es decir, que unbacteriano dependía del método utilizado, es decir, que un

mismo microorganismo analizado para su perfil plásmidicomismo microorganismo analizado para su perfil plásmidico

por diferentes métodos presentaba resultados distintos. Porpor diferentes métodos presentaba resultados distintos. Por

ejemplo, la importancia del perfil plásmidico de unejemplo, la importancia del perfil plásmidico de un

microorganismo patógeno, que sea resistente amicroorganismo patógeno, que sea resistente a diferentesdiferentes

antibióticos, es debido a que los plásmidos se puedanantibióticos, es debido a que los plásmidos se puedan

correlacionar con el tipo de microorganismo que locorrelacionar con el tipo de microorganismo que lo

contiene, con diferentes toxinas producidas por él, con sucontiene, con diferentes toxinas producidas por él, con su

serotipo y también con la resistencia a antibióticos. Estoserotipo y también con la resistencia a antibióticos. Esto

hace pensar en la posibilidad, de poder sustituir lashace pensar en la posibilidad, de poder sustituir las

pruebas bioquímicas, por el perfil plásmidico parapruebas bioquímicas, por el perfil plásmidico para

caracterizar una cepa determinada, significando esto encaracterizar una cepa determinada, significando esto en

primer lugar, el ahorro de tiempo en el cual se podríaprimer lugar, el ahorro de tiempo en el cual se podría

detener una infección y hasta una epidemia. Otradetener una infección y hasta una epidemia. Otra

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

2020

observación hecha durante la experimentación, es queobservación hecha durante la experimentación, es que

algunas cepas independientemente de que presentenalgunas cepas independientemente de que presenten

resistencia a antibióticos, no es posible detectar en ellas laresistencia a antibióticos, no es posible detectar en ellas la

presencia de plásmidos.presencia de plásmidos.

Los trabajos de Poh y Col. (1988) y Tennet y Col, (1984)Los trabajos de Poh y Col. (1988) y Tennet y Col, (1984)

reportan respectivamente que únicamente al 20 y 30 % dereportan respectivamente que únicamente al 20 y 30 % de

la cepas con multiresistencia a antibióticos, se les detectóla cepas con multiresistencia a antibióticos, se les detectó

DNA plásmidico y en ambosDNA plásmidico y en ambos casos se concluye, quecasos se concluye, que

seguramente la resistencia esta codificada en el cromosomaseguramente la resistencia esta codificada en el cromosoma

bacteriano. Por otra parte, McClenaghan y Col. (1988)bacteriano. Por otra parte, McClenaghan y Col. (1988)

comentan que la técnica de teñido con bromuro de etidio encomentan que la técnica de teñido con bromuro de etidio en

gel de agarosa no es suficientemente sensible para detectargel de agarosa no es suficientemente sensible para detectar

plásmidos con bajo número de copias, así pues por loplásmidos con bajo número de copias, así pues por lo

reciente de esta nueva fase de la genética no se habíareciente de esta nueva fase de la genética no se había

madurado suficientemente una metodología para elmadurado suficientemente una metodología para el

establecimiento del perfil plásmidico, por tanto, el trabajoestablecimiento del perfil plásmidico, por tanto, el trabajo

que realicé tuvo como objetivo establecer un método deque realicé tuvo como objetivo establecer un método de

amplificación plásmidica que lleven genes que codifiquenamplificación plásmidica que lleven genes que codifiquen

resistencia a antibióticos, incluyendo a los de bajo númeroresistencia a antibióticos, incluyendo a los de bajo número

de copias. Estudié durante esa investigación 6 cepas dede copias. Estudié durante esa investigación 6 cepas de

Escherichia coli , 4 de ellas resistentes a tetraciclina y lasEscherichia coli , 4 de ellas resistentes a tetraciclina y las

otras 2 resistentes a tetraciclina y carbencilina, esasotras 2 resistentes a tetraciclina y carbencilina, esas

bacterias fueron aisladas de heces fecales de niñosbacterias fueron aisladas de heces fecales de niños

enfermos con diarrea internados en el Hospital Infantil delenfermos con diarrea internados en el Hospital Infantil del

Estado de Sonora en Hermosillo Sonora. El métodoEstado de Sonora en Hermosillo Sonora. El método

propuesto consiste en 5 etapas principales: propuesto consiste en 5 etapas principales:

1.- Cultivo de toda la noche de la cepa problema y de la1.- Cultivo de toda la noche de la cepa problema y de la

cepa E. coli jm 101 ya caracterizadacepa E. coli jm 101 ya caracterizada

2.- Extracción del ADN plásmidico de la cepa problema con2.- Extracción del ADN plásmidico de la cepa problema con

fenol-cloroformofenol-cloroformo

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

2121

3.-Transformación de E, coli jm 101 con el ADN de la cepa3.-Transformación de E, coli jm 101 con el ADN de la cepa

problemaproblema

4.- Cultivo y extracción del plásmido de transformadas4.- Cultivo y extracción del plásmido de transformadas

5.- Análisis del perfil por electroforesis.5.- Análisis del perfil por electroforesis.

El perfil de las transformadas demostró que el plásmido queEl perfil de las transformadas demostró que el plásmido que

codifica resistencia al antibiótico tetraciclina, se amplifica alcodifica resistencia al antibiótico tetraciclina, se amplifica al

transformar la E. coli jm101 y tiene un peso molecular detransformar la E. coli jm101 y tiene un peso molecular de

4.2 kb.4.2 kb.

En estas pruebas utilicé en repetidas veces la reacción deEn estas pruebas utilicé en repetidas veces la reacción de

polimerasa PCR. Descubierta por el investigador y Premiopolimerasa PCR. Descubierta por el investigador y Premio

Nobel norteamericano Kary Mullis. Nobel norteamericano Kary Mullis.

En septiembre de 1989 presentamos el trabajo deEn septiembre de 1989 presentamos el trabajo de

investigación “Obtención del Perfil Plásmidico deinvestigación “Obtención del Perfil Plásmidico de

Escherichia Coli, por Transformación” en el IIIEscherichia Coli, por Transformación” en el III CongresoCongreso

Nacional de Biotecnología y Bioingeniería, en MonterreyNacional de Biotecnología y Bioingeniería, en Monterrey

Nuevo León.Nuevo León.

El estudio del ADN a partir de este trabajo se convirtió enEl estudio del ADN a partir de este trabajo se convirtió en

el centro de todo mi interés como investigadora, sinel centro de todo mi interés como investigadora, sin

embargo y a pesar de los resultados tan satisfactoriosembargo y a pesar de los resultados tan satisfactorios

obtenidos con el método desarrollado, el enfoque y laobtenidos con el método desarrollado, el enfoque y la

dirección que tomarían mis futuros trabajos con ADN.dirección que tomarían mis futuros trabajos con ADN.

serían completamente distintos a los de esa inolvidableserían completamente distintos a los de esa inolvidable

experiencia.experiencia.

Al regresar de Monterrey, después de nuestra participaciónAl regresar de Monterrey, después de nuestra participación

en el III Congreso de Biotecnología y Bioingeniería,en el III Congreso de Biotecnología y Bioingeniería,

tuvimos la fortuna de encontrar una valiosa coincidencia,tuvimos la fortuna de encontrar una valiosa coincidencia,

que sería muy importante para nuestra investigación,que sería muy importante para nuestra investigación,

cuando al realizar el estudio bibliográfico de colorantes,cuando al realizar el estudio bibliográfico de colorantes,

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

2222

nos encontramos con publicaciones en donde se reportabanos encontramos con publicaciones en donde se reportaba

el uso de taninos, como colorantes de DNA (Stockert J.C.el uso de taninos, como colorantes de DNA (Stockert J.C.

1989), (Naguro T. et al 1990).1989), (Naguro T. et al 1990).

Conservaba aun una pequeña cantidad de extracto curtienteConservaba aun una pequeña cantidad de extracto curtiente

de cañagria (taninos), que guardaba de recuerdo delde cañagria (taninos), que guardaba de recuerdo del

trabajo de tesis de licenciatura, mismo que utilizamos paratrabajo de tesis de licenciatura, mismo que utilizamos para

probarlo como colorante de DNA. Así lo hicimos yprobarlo como colorante de DNA. Así lo hicimos y

establecimos la concentración más adecuada, obtuvimos deestablecimos la concentración más adecuada, obtuvimos de

esta manera el resultado esperado. En esta formaesta manera el resultado esperado. En esta forma

encontramos el nuevoencontramos el nuevo colorante para DNA tanto tiempocolorante para DNA tanto tiempo

buscado y estaba en casa.buscado y estaba en casa.

Al igual que el DNA, los taninos son polímeros, formadosAl igual que el DNA, los taninos son polímeros, formados

por unidades o eslabones.por unidades o eslabones.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

2323

TANINOSTANINOS

NUCLEOTIDOSNUCLEOTIDOS

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

2424

Primer Trabajo Experimental delPrimer Trabajo Experimental del Nuevo Método de Análisis de DNA.Nuevo Método de Análisis de DNA.

Iniciamos la experimentación, utilizando 4 cepas bacterianas:Iniciamos la experimentación, utilizando 4 cepas bacterianas:

A)A) Estafilococos Epidermidis, resistente a 4 antibióticos,Estafilococos Epidermidis, resistente a 4 antibióticos,

tetraciclina (Tc),tetraciclina (Tc),

penicilina (Pc), eritromicina (Em) y ampicilina (Am).penicilina (Pc), eritromicina (Em) y ampicilina (Am).

B) Escherichia coli con una resistencia a (Tc).B) Escherichia coli con una resistencia a (Tc).

C) Escherichia coli con una resistencia a (Tc)C) Escherichia coli con una resistencia a (Tc)

D) Escherichia coli con 2 resistencias a (Tc) y carbencilinaD) Escherichia coli con 2 resistencias a (Tc) y carbencilina

(Cb.).(Cb.).

Estas cepas se cultivaron y después se analizaron de laEstas cepas se cultivaron y después se analizaron de la

siguiente manera:siguiente manera:

1)1) Cultivo de toda la noche y centrifugar.Cultivo de toda la noche y centrifugar.

2)2) El precipitado se resuspendió en un bufferEl precipitado se resuspendió en un buffer

3)3) Se agregó fenol y cloroformoSe agregó fenol y cloroformo

4)4) Se centrifugóSe centrifugó

5)5) A la fase acuosa se le añadió alcohol etílico absoluto,A la fase acuosa se le añadió alcohol etílico absoluto,

para precipitar el DNA y se incubó a -40º C x 30 min. opara precipitar el DNA y se incubó a -40º C x 30 min. o

mas.mas.

6)6) Se centrifugó, se descartó el sobrenadante y se dejóSe centrifugó, se descartó el sobrenadante y se dejó

secar el precipitadosecar el precipitado

7)7) Al precipitado se le añadió colorante disuelto en buffer.Al precipitado se le añadió colorante disuelto en buffer.

8)8) El DNA teñido se precipitó con alcohol etílico absoluto, seEl DNA teñido se precipitó con alcohol etílico absoluto, se

centrifugó y se dejo secar a temperatura ambiente.centrifugó y se dejo secar a temperatura ambiente.

9)9) Se agregó buffer TESe agregó buffer TE

10)10) Se tomó una alícuota, se colocó en un portaobjetosSe tomó una alícuota, se colocó en un portaobjetos

y se dejo secar a temperatura ambiente.y se dejo secar a temperatura ambiente.

Se observó al microscopio. Se observó al microscopio.

11)11) Se tomó la fotografía al DNA de las 4 cepas..Se tomó la fotografía al DNA de las 4 cepas..

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

2525

Se anexan las fotografías de las 4 cepas analizadas (anexoSe anexan las fotografías de las 4 cepas analizadas (anexo

# 1), tomadas con el objetivo 4X. Las mismas muestras se# 1), tomadas con el objetivo 4X. Las mismas muestras se

analizaron por electroforesis, teñidas con bromuro deanalizaron por electroforesis, teñidas con bromuro de

etidio, se anexan también las fotografías correspondientes.etidio, se anexan también las fotografías correspondientes.

En los primeros años de la investigación de DNA, aplicandoEn los primeros años de la investigación de DNA, aplicando

nuestro Método V22 que permite verlo en el microscopio denuestro Método V22 que permite verlo en el microscopio de

luz, acostumbramos analizarlo, como decimosluz, acostumbramos analizarlo, como decimos

anteriormente, en forma paralela con el método deanteriormente, en forma paralela con el método de

electroforesis, esto con la finalidad de estar seguros que loelectroforesis, esto con la finalidad de estar seguros que lo

que observamos en el microscopio era realmente DNA.que observamos en el microscopio era realmente DNA.

Las diferencias que encontramos entre los 2 métodos sonLas diferencias que encontramos entre los 2 métodos son

significativos y radicalmente distintos, especialmente ensignificativos y radicalmente distintos, especialmente en

los resultados que se obtienen, mientras que con el métodolos resultados que se obtienen, mientras que con el método

de electroforesis lo que obtenemos invariablemente sonde electroforesis lo que obtenemos invariablemente son

bandas, independientemente del origen del DNA, ybandas, independientemente del origen del DNA, y

adicionalmente se deben realizar una serie de cálculos eadicionalmente se deben realizar una serie de cálculos e

interpretaciones para poder establecer los resultados. Eninterpretaciones para poder establecer los resultados. En

cambio con el Método V22, lo que obtenemos es unacambio con el Método V22, lo que obtenemos es una

imagen real con las características intrínsecas de cada DNAimagen real con las características intrínsecas de cada DNA

analizado, lo que permite al investigador cuando observaanalizado, lo que permite al investigador cuando observa

al microscopio la imagen del DNA de la muestra o bien laal microscopio la imagen del DNA de la muestra o bien la

foto obtenida de lafoto obtenida de la misma, saber a quien corresponde, comomisma, saber a quien corresponde, como

cuando observamos la foto de una persona o de algocuando observamos la foto de una persona o de algo

conocido, se reconoce al instante.conocido, se reconoce al instante.

Es importante mencionar, que con las cepas B y D, hicimosEs importante mencionar, que con las cepas B y D, hicimos

pruebas de transformación, durante mi trabajo de tesispruebas de transformación, durante mi trabajo de tesis

(León. Paz. G.E., 1988). En esas pruebas intentamos(León. Paz. G.E., 1988). En esas pruebas intentamos

transformar la bacteria E. coli JM 101, que es sensible atransformar la bacteria E. coli JM 101, que es sensible a

todos los antibióticos y está manipulada para ser receptoratodos los antibióticos y está manipulada para ser receptora

de DNA. Con la cepa B se realizo la transformación sinde DNA. Con la cepa B se realizo la transformación sin

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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ninguna dificultad. En cambio con la cepa D, no logramosninguna dificultad. En cambio con la cepa D, no logramos

transformar la E. coli JM101. En ese tiempo del trabajo detransformar la E. coli JM101. En ese tiempo del trabajo de

tesis de maestría no pudimos explicarnos con certeza latesis de maestría no pudimos explicarnos con certeza la

causa.causa. Con las fotos del DNA, se puede observar que el DNACon las fotos del DNA, se puede observar que el DNA

de la cepa D es muy grande y seguramente no pudo pasar ade la cepa D es muy grande y seguramente no pudo pasar a

la membrana de la JM101. En cambio el DNA de la cepa B,la membrana de la JM101. En cambio el DNA de la cepa B,

es muy pequeño y si pudo transformar a la JM 101 enes muy pequeño y si pudo transformar a la JM 101 en

resistente a TC.resistente a TC.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

2727

UNA INVESTIGACIONUNA INVESTIGACION INDEPENDIENTEINDEPENDIENTE

“No imité a los escépticos que dudan solo por dudar“No imité a los escépticos que dudan solo por dudar

y simulan estar siempre indecisos; al contrario,y simulan estar siempre indecisos; al contrario,

mi intención era llegar a una certeza y excavarmi intención era llegar a una certeza y excavar

el polvo y la arena hasta llegar a la arcilla de abajo “el polvo y la arena hasta llegar a la arcilla de abajo “

René DescartesRené Descartes

En 1991, renuncie a mi plaza de investigadora de tiempoEn 1991, renuncie a mi plaza de investigadora de tiempo

completo en el Centro de investigación en Alimentación ycompleto en el Centro de investigación en Alimentación y

Desarrollo CIAD en Hermosillo Sonora, para poder realizarDesarrollo CIAD en Hermosillo Sonora, para poder realizar

con plenitud nuestro proyecto sobre el nuevo Método decon plenitud nuestro proyecto sobre el nuevo Método de

Análisis de DNA. Al disponer de escasos recursosAnálisis de DNA. Al disponer de escasos recursos

económicos para iniciar la investigación por nuestra propiaeconómicos para iniciar la investigación por nuestra propia

cuenta, solicité asilo “científico” en el Laboratorio Estatalcuenta, solicité asilo “científico” en el Laboratorio Estatal

de Salud Publica del Estado de Sonora, mismo que me fuede Salud Publica del Estado de Sonora, mismo que me fue

concedido y en julio de 1992 , reinicié el estudio de DNA deconcedido y en julio de 1992 , reinicié el estudio de DNA de

bacterias, sin sueldo alguno, pero en condiciones óptimasbacterias, sin sueldo alguno, pero en condiciones óptimas

en cuanto. a la magnifica infraestructura del laboratorio y elen cuanto. a la magnifica infraestructura del laboratorio y el

apoyo de directivos e investigadores a mi trabajo, la únicaapoyo de directivos e investigadores a mi trabajo, la única

indicación fue que comprara misindicación fue que comprara mis propios reactivos ,propios reactivos ,

materiales e instrumentos de uso perecederos. materiales e instrumentos de uso perecederos.

Al reiniciar el trabajo de investigación, en el LaboratorioAl reiniciar el trabajo de investigación, en el Laboratorio

Estatal de Salud Pública del Estado de Sonora, iniciamosEstatal de Salud Pública del Estado de Sonora, iniciamos

una nueva etapa del proyecto, en el que no solamenteuna nueva etapa del proyecto, en el que no solamente

trabajaríamos con DNA extraído por nosotros mismos, detrabajaríamos con DNA extraído por nosotros mismos, de

muestras de sangre obtenidas por donaciones voluntarias omuestras de sangre obtenidas por donaciones voluntarias o

de microorganismos, de cepas cultivadas en el laboratorio,de microorganismos, de cepas cultivadas en el laboratorio,

sino que consideramos que era el momento para realizar ysino que consideramos que era el momento para realizar y

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

2828

probar a la par el método con muestras comerciales de DNAprobar a la par el método con muestras comerciales de DNA

purificado, por lo que adquirimos DNA purificado ypurificado, por lo que adquirimos DNA purificado y

liofilizado de virus lambda, del plásmido PBR322 y una cepaliofilizado de virus lambda, del plásmido PBR322 y una cepa

de Escherichia Coli liofilizada, con un peso molecular de 56de Escherichia Coli liofilizada, con un peso molecular de 56

kb y con tres resistencias a antibióticos, esta cepa lakb y con tres resistencias a antibióticos, esta cepa la

guardamos de manera especial para utilizarlaguardamos de manera especial para utilizarla

posteriormente.posteriormente.

Otra nueva fase de la investigación, la enfocamos a laOtra nueva fase de la investigación, la enfocamos a la

revisión del propio Nuevo Método de Análisis de DNA, querevisión del propio Nuevo Método de Análisis de DNA, que

estaba aplicando, variamos concentración y temperatura ,estaba aplicando, variamos concentración y temperatura ,

tiempos de aplicación de cada parte del proceso ytiempos de aplicación de cada parte del proceso y

fundamentalmente reactivos y componentes del bufferfundamentalmente reactivos y componentes del buffer

utilizado en la reacción y probamos muchas variables yutilizado en la reacción y probamos muchas variables y

combinaciones posibles.combinaciones posibles.

Por las pruebas que anteriormente había realizado, Por las pruebas que anteriormente había realizado,

pensaba entonces que los taninos integrados al buffer,pensaba entonces que los taninos integrados al buffer,

eran los que tornaban visible al DNA y para tenereran los que tornaban visible al DNA y para tener

totalmente esa certeza y no quedarnos con alguna dudatotalmente esa certeza y no quedarnos con alguna duda

realizamos nuevas pruebas de DNArealizamos nuevas pruebas de DNA con taninos y sin ellos.con taninos y sin ellos.

Resultó ser solamente el buffer (BF), el factor principal deResultó ser solamente el buffer (BF), el factor principal de

que el DNA se pueda ver. Sin embargo por el resultadoque el DNA se pueda ver. Sin embargo por el resultado

obtenido y observado en las imágenes de las muestras deobtenido y observado en las imágenes de las muestras de

DNA., cuando han sido procesadas estando integrados losDNA., cuando han sido procesadas estando integrados los

taninos en la reacción, decidimos continuar utilizándolostaninos en la reacción, decidimos continuar utilizándolos

porque hemos observado que el DNA teñido con losporque hemos observado que el DNA teñido con los

taninos, ofrece una imagen de mayor tamaño que resultataninos, ofrece una imagen de mayor tamaño que resulta

muy adecuada para determinados objetivos o casosmuy adecuada para determinados objetivos o casos

especiales de análisis del DNA. especiales de análisis del DNA.

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2929

Sabia desde que decidimos continuar con el trabajo deSabia desde que decidimos continuar con el trabajo de

investigación de nuestro proyecto que al afirmar que el DNAinvestigación de nuestro proyecto que al afirmar que el DNA

se puede ver con un microscopio óptico, lo que recibiríamosse puede ver con un microscopio óptico, lo que recibiríamos

serian pocos apoyos y muchasserian pocos apoyos y muchas criticas de parte decriticas de parte de

escépticos, que se dicen investigadores, que sin tenerescépticos, que se dicen investigadores, que sin tener

curiosidad por observar personalmente los resultados en elcuriosidad por observar personalmente los resultados en el

microscopio o preguntar en que consiste el nuevo método,microscopio o preguntar en que consiste el nuevo método,

simplemente negarían que eso pudiera ser posible, hubosimplemente negarían que eso pudiera ser posible, hubo

inclusive algunos casos en los que se recomendó que no seinclusive algunos casos en los que se recomendó que no se

nos apoyara y se vertieron criticas en la televisión y mediosnos apoyara y se vertieron criticas en la televisión y medios

periodísticos. Pero en una ocasión en un hospital, al final deperiodísticos. Pero en una ocasión en un hospital, al final de

una conferencia sobre nuestro trabajo, un medico amigouna conferencia sobre nuestro trabajo, un medico amigo

nuestro, inesperadamente alabó el papel de los escépticosnuestro, inesperadamente alabó el papel de los escépticos

en la historia de la ciencia, porque, al decir de él, “queen la historia de la ciencia, porque, al decir de él, “que

seria de la ciencia sin los escépticos, que son los queseria de la ciencia sin los escépticos, que son los que

obligan a los investigadores a tener certeza y ser muyobligan a los investigadores a tener certeza y ser muy

objetivos en lo que afirman”. Carl Sagan señaló en uno deobjetivos en lo que afirman”. Carl Sagan señaló en uno de

sus libros que el filosofo y matemático Rene Descartes,sus libros que el filosofo y matemático Rene Descartes,

propuso por primera vez consagrar la duda como una virtudpropuso por primera vez consagrar la duda como una virtud

principal de la mente inquisidora, pero también dejó claroprincipal de la mente inquisidora, pero también dejó claro

que la duda era una herramienta y no un fin en si misma. que la duda era una herramienta y no un fin en si misma.

Duda, escepticismo e intolerancia, indiferencia y fanatismo Duda, escepticismo e intolerancia, indiferencia y fanatismo

e inclusive intereses comerciales se han conjugado con ciertase inclusive intereses comerciales se han conjugado con ciertas

dosis de soberbia para crear los “dogmatismos científicos”dosis de soberbia para crear los “dogmatismos científicos”

actuales y pasados, seguramente delineados por lo queactuales y pasados, seguramente delineados por lo que

Thomas S. Kuhn llama “ciencia normal”, que pretenden y hanThomas S. Kuhn llama “ciencia normal”, que pretenden y han

pretendido señalar caminos y poner límites paradigmáticos apretendido señalar caminos y poner límites paradigmáticos a

la investigación y al desarrollo de la ciencia. En 1991 Thomasla investigación y al desarrollo de la ciencia. En 1991 Thomas

Lee en su libro “El Proyecto Genoma Humano” escribióLee en su libro “El Proyecto Genoma Humano” escribió

“Debemos dejar atrás el mundo de la visión para encontrar a“Debemos dejar atrás el mundo de la visión para encontrar a

los genes”los genes”

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3030

Mucho tiempo atrás, en 1871 Charles Darwin en su Mucho tiempo atrás, en 1871 Charles Darwin en su

introducción a “La descendencia del hombre” afirmó “Conintroducción a “La descendencia del hombre” afirmó “Con

frecuencia la ignorancia engendra mas confianza que elfrecuencia la ignorancia engendra mas confianza que el

conocimiento: Son los que saben poco y no los que sabenconocimiento: Son los que saben poco y no los que saben

mucho, los que aseveran tercamente que este o aquelmucho, los que aseveran tercamente que este o aquel

problema nunca será resuelto por la ciencia”problema nunca será resuelto por la ciencia”

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3131

UNA MODIFICACIÓN EN EL NUEVOUNA MODIFICACIÓN EN EL NUEVO METODOMETODO

DE ANÁLISIS DEL DNADE ANÁLISIS DEL DNA

El 5 de octubre de 1993, al regreso de un viaje a Panamá, miEl 5 de octubre de 1993, al regreso de un viaje a Panamá, mi

esposo me trajo de obsequio un libro sobre genética “Ouresposo me trajo de obsequio un libro sobre genética “Our

Uncertain Peritaje: Genetic & Human Diversity” (Hartl L.Uncertain Peritaje: Genetic & Human Diversity” (Hartl L.

Daniel, 1985), en el que entre otras cosas, se presenta unaDaniel, 1985), en el que entre otras cosas, se presenta una

técnica sobre como se obtiene el cariotipo de una persona. técnica sobre como se obtiene el cariotipo de una persona.

Me dediqué a estudiar muy bien esa metodología, porque no Me dediqué a estudiar muy bien esa metodología, porque no

estaba completamente satisfecha con los resultadosestaba completamente satisfecha con los resultados

obtenidos. En ese libro se indica que en el paso final delobtenidos. En ese libro se indica que en el paso final del

cariotipo, los cromosomas se precipitan con alcohol absolutocariotipo, los cromosomas se precipitan con alcohol absoluto

mezclado con ácido clorhídrico al 5%. Así que realicé nuevasmezclado con ácido clorhídrico al 5%. Así que realicé nuevas

pruebas,pruebas, precipitando el DNA de nuestras muestras con esaprecipitando el DNA de nuestras muestras con esa

misma mezcla, pero directamente en el portaobjetos,misma mezcla, pero directamente en el portaobjetos,

modifiqué el porcentaje de concentración de ácido, pero pormodifiqué el porcentaje de concentración de ácido, pero por

mas que lo reducía, las muestras no quedaban bien, pensémas que lo reducía, las muestras no quedaban bien, pensé

entonces que el ácido clorhídrico, era demasiado fuerte paraentonces que el ácido clorhídrico, era demasiado fuerte para

los resultados que procuraba obtener con nuestra técnica, porlos resultados que procuraba obtener con nuestra técnica, por

medio de la cual buscaba esencialmente conservar lamedio de la cual buscaba esencialmente conservar la

integridad del DNA. Decidí sustituirlo por ácido acético por serintegridad del DNA. Decidí sustituirlo por ácido acético por ser

un ácido débil. Lo probamos a diferentes concentraciones,un ácido débil. Lo probamos a diferentes concentraciones,

hasta que los resultados que logramos, fueron óptimos,hasta que los resultados que logramos, fueron óptimos,

repetitivos y a nuestra entera satisfacción.repetitivos y a nuestra entera satisfacción.

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3232

Así nació el nuevo Método de Análisis de DNA.Así nació el nuevo Método de Análisis de DNA. V22.V22.

A partir de esas pruebas y los siguientes estudios de DNA,A partir de esas pruebas y los siguientes estudios de DNA,

que realizamos con la nueva formula se inicia el Método que realizamos con la nueva formula se inicia el Método

V22, `por lo que las figuras que se presentan se numeran V22, `por lo que las figuras que se presentan se numeran

del numero 1 que corresponde a pBR322, en adelante. del numero 1 que corresponde a pBR322, en adelante.

DNA LIOFILIZADO DE VIRUSDNA LIOFILIZADO DE VIRUS LAMBDA Y pBR322LAMBDA Y pBR322,,

((de Rodríguez León Paz. G.E., 1998)de Rodríguez León Paz. G.E., 1998)

El Método V22, consta de los siguientes pasos:El Método V22, consta de los siguientes pasos:

1) 50 microgramos de DNA liofilizado1) 50 microgramos de DNA liofilizado

2) + 100 microlitros de buffer2) + 100 microlitros de buffer

3) Precipitar una alícuota (1-1.5 microlitros) + Alcohol-.Acido3) Precipitar una alícuota (1-1.5 microlitros) + Alcohol-.Acido

directamentedirectamente

en el Portaobjetos.en el Portaobjetos.

4) El portaobjetos se decanta y se deja secar a temperatura4) El portaobjetos se decanta y se deja secar a temperatura

ambiente.ambiente.

5) El DNA se analiza bajo el microscopio y se toman las5) El DNA se analiza bajo el microscopio y se toman las

fotografías.fotografías.

Se presentan las fotografías del DNA de virus lambda y el DNASe presentan las fotografías del DNA de virus lambda y el DNA

del plásmido pBR322.. En la figura # 1 vemos un dibujo deldel plásmido pBR322.. En la figura # 1 vemos un dibujo del

plásmido pBR322 ( Singer M. and Berg P. 1991). En dichoplásmido pBR322 ( Singer M. and Berg P. 1991). En dicho

diagrama se señalan 2 marcadores, uno es un gendiagrama se señalan 2 marcadores, uno es un gen

que codifica resistencia a Tc y el otro el gen que lo hace a Am.que codifica resistencia a Tc y el otro el gen que lo hace a Am.

En la figura # 2 observamos la foto del plásmido pBR322,En la figura # 2 observamos la foto del plásmido pBR322,

obtenida con nuestro Método V22, podemos apreciar 2obtenida con nuestro Método V22, podemos apreciar 2

salientes del circulo, que pueden corresponder a lossalientes del circulo, que pueden corresponder a los

marcadores Tc y Am.marcadores Tc y Am.

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3333

El trabajo experimental nos ha permitido conocer un poco másEl trabajo experimental nos ha permitido conocer un poco más

a fondo las propiedades del DNA, por ejemplo hemos logradoa fondo las propiedades del DNA, por ejemplo hemos logrado

extenderlo y compactarlo modificando las concentraciones.extenderlo y compactarlo modificando las concentraciones.

De virus lambda presentamos 3 fotos, laDe virus lambda presentamos 3 fotos, la figura # figura # 3 ( Singer M.3 ( Singer M.

and Berg P. 1991) es una micrografía electrónica de virusand Berg P. 1991) es una micrografía electrónica de virus

lambda, que tiene un parecido con la figura # 4 obtenida conlambda, que tiene un parecido con la figura # 4 obtenida con

el Método V22. Por observaciones personales, que solo seel Método V22. Por observaciones personales, que solo se

logran obtener cuando el trabajo del investigador, se realizalogran obtener cuando el trabajo del investigador, se realiza

de manera personal en todo el proceso y no se delega ade manera personal en todo el proceso y no se delega a

pasantes o ayudantes, porque es imposible analizarpasantes o ayudantes, porque es imposible analizar

objetivamente lo que no se ha visto con nuestros propiosobjetivamente lo que no se ha visto con nuestros propios

ojos. En una ocasión nos dimos cuenta que al precipitar conojos. En una ocasión nos dimos cuenta que al precipitar con

alcohol-ácido, el DNA se compacta en mayor o menor grado,alcohol-ácido, el DNA se compacta en mayor o menor grado,

en proporción directa al volumen utilizado.en proporción directa al volumen utilizado.

Dado que no existe aun bibliografía donde se pueda consultar,Dado que no existe aun bibliografía donde se pueda consultar,

debemos ir generando el conocimiento necesario, que nosdebemos ir generando el conocimiento necesario, que nos

permita ir aprendiendo poco a poco todo sobre el DNA, en estapermita ir aprendiendo poco a poco todo sobre el DNA, en esta

nueva fase visual de su forma, con ese objetivo realizamosnueva fase visual de su forma, con ese objetivo realizamos

pruebas de precipitación que nos llevaron a la conclusión depruebas de precipitación que nos llevaron a la conclusión de

que: si agregamos un volumen determinado de alcohol, vemosque: si agregamos un volumen determinado de alcohol, vemos

que se compacta completamente (figura # 6 lambda), y sique se compacta completamente (figura # 6 lambda), y si

usamos un volumen mayor, el DNA se fragmenta y lousamos un volumen mayor, el DNA se fragmenta y lo

perdemos. En cambio si el volumen es menor de lo necesario,perdemos. En cambio si el volumen es menor de lo necesario,

el DNA se observa difuso (figura # 5 lambda). Aprendimosel DNA se observa difuso (figura # 5 lambda). Aprendimos

que el DNA extendido es circular y cuando lo compactamosque el DNA extendido es circular y cuando lo compactamos

tiene una forma distintiva, dependiendo de su origen, lo quetiene una forma distintiva, dependiendo de su origen, lo que

pudiera ser importante para identificar el organismo al quepudiera ser importante para identificar el organismo al que

pertenece.pertenece.

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Fig.-5 fig.-6Fig.-5 fig.-6

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3535

DNA EXTRAIDO DE BACTERIASDNA EXTRAIDO DE BACTERIAS CULTIVADASCULTIVADASMETODO V22METODO V22

Fueron estudiadas 6 cepas bacterianas, cuyas imágenes seFueron estudiadas 6 cepas bacterianas, cuyas imágenes se

presentan en el cuadro # 1 presentan en el cuadro # 1 (de Rodríguez León Paz Gloria(de Rodríguez León Paz Gloria

Elena.1998).Elena.1998).

1)1) Todas las bacterias se inocularon, con una asada losTodas las bacterias se inocularon, con una asada los

cultivos líquidos y con una pizca los liofilizados, como escultivos líquidos y con una pizca los liofilizados, como es

el caso de BCG Y la bacteria E. Coli adquirida en ATCC,el caso de BCG Y la bacteria E. Coli adquirida en ATCC,

en el medio de cultivo TY, se incubaron a 37ª C toda laen el medio de cultivo TY, se incubaron a 37ª C toda la

noche, solo BCG se incubó por 15 días.noche, solo BCG se incubó por 15 días.

2)2) CentrifugarCentrifugar

3)3) Descartar el sobrenadante y resuspender el precipitadoDescartar el sobrenadante y resuspender el precipitado

en buffer BFen buffer BF

4)4) + fenol y cloroformo.+ fenol y cloroformo.

5)5) CentrifugarCentrifugar

6)6) Transferir la fase acuosa a un nuevo tubo, peraTransferir la fase acuosa a un nuevo tubo, pera

almacenar el extracto de DNA.almacenar el extracto de DNA.

7)7) Precipitar directamente en el portaobjetos, una alícuotaPrecipitar directamente en el portaobjetos, una alícuota

del extracto de DNA, con una mezcla de alcohol etílicodel extracto de DNA, con una mezcla de alcohol etílico

absoluto y ácido acético glacial.absoluto y ácido acético glacial.

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CUADRO # 1 CUADRO # 1

CEPA CEPA ORIGEN ORIGEN1) 1) Vibrio cholerae O1Vibrio cholerae O1 Aislado de un pacienteAislado de un paciente2) BCG (Bacilo de Calmette y Guerin)2) BCG (Bacilo de Calmette y Guerin) VacunaVacuna3) 3) Samonella tiphySamonella tiphy Aislado de un pacienteAislado de un paciente4) 4) Staphylococcus aureusStaphylococcus aureus Aislado de un pacienteAislado de un paciente5) 5) Escherichia coli,Escherichia coli, Tc, 4.2 KB Tc, 4.2 KB Aislado de un pacienteAislado de un paciente6) 6) Escherichia coliEscherichia coli Tc, Am, Km, 56 KB Tc, Am, Km, 56 KB ATCCATCC

8)8) Se analizan los DNA precipitados, bajo un microscopioSe analizan los DNA precipitados, bajo un microscopio

9)9) Se toman las fotosSe toman las fotos

Se presentan las fotos de los DNA de las 6 bacteriasSe presentan las fotos de los DNA de las 6 bacterias

estudiadas, por el Método V22. Son 2 fotos para cada cepa,estudiadas, por el Método V22. Son 2 fotos para cada cepa,

una de DNA extendido y la otra de DNA compactado.una de DNA extendido y la otra de DNA compactado.

En las figuras 7, 9, 11, 13, 15 y 17 se presenta el DNA de las 6En las figuras 7, 9, 11, 13, 15 y 17 se presenta el DNA de las 6

cepas extendido y de aspecto circular y de cierta manera secepas extendido y de aspecto circular y de cierta manera se

parecen entre si. En cambio las figuras 8, 10, 12, 14, 16 y 18,parecen entre si. En cambio las figuras 8, 10, 12, 14, 16 y 18,

podemos observar el DNA completamente compactado ypodemos observar el DNA completamente compactado y

fácilmente diferenciado uno de otro.fácilmente diferenciado uno de otro.

En la figura # 8 vemos que el DNA de Vibrio cholerae O1 esEn la figura # 8 vemos que el DNA de Vibrio cholerae O1 es

circular, mientras que el de BCG es lineal (figura # 10),circular, mientras que el de BCG es lineal (figura # 10),

coincidiendo esto con los reportes bibliográficos. En la figura.coincidiendo esto con los reportes bibliográficos. En la figura.

12 podemos ver que el DNA de Salmonella es lineal y en la12 podemos ver que el DNA de Salmonella es lineal y en la

figura 14 se observa un DNA circular de Estafilococcus.figura 14 se observa un DNA circular de Estafilococcus.

Estudiando las imágenes de los DNA, se aprecia paraEstudiando las imágenes de los DNA, se aprecia para

Estafilococcus un DNA más denso y pesado que el deEstafilococcus un DNA más denso y pesado que el de

Salmonella, que se observa este último muy delgado y ligero.Salmonella, que se observa este último muy delgado y ligero.

Esas mismas diferencias se manifiestan en las figuras 11 y 13,Esas mismas diferencias se manifiestan en las figuras 11 y 13,

de los DNA extendidos de Salmonella y estafilicoccusde los DNA extendidos de Salmonella y estafilicoccus

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

3737

respectivamente, aunque la bibliografía reporta que el DNA derespectivamente, aunque la bibliografía reporta que el DNA de

estafilococcus es menor (45 KB) que el de Salmonella (96 KB),estafilococcus es menor (45 KB) que el de Salmonella (96 KB),

calculados los pesos moleculares seguramentecalculados los pesos moleculares seguramente porpor

electroforesis. Es posible que realmente el DNA deelectroforesis. Es posible que realmente el DNA de

Estafilicoccus, sea de un peso molecular mayor que el deEstafilicoccus, sea de un peso molecular mayor que el de

Salmonella y que el cálculo por electroforesis, nos conduzca aSalmonella y que el cálculo por electroforesis, nos conduzca a

errores, porque desconocemos la imagen real del DNA yerrores, porque desconocemos la imagen real del DNA y

porque los pesos moleculares estimados por electroforesis,porque los pesos moleculares estimados por electroforesis,

son relativos a los pesos de los marcadores. Parece ser puesson relativos a los pesos de los marcadores. Parece ser pues

que los DNA lineales serán más pesados que los circularesque los DNA lineales serán más pesados que los circulares

utilizando el método de electroforesis, en cambio el Métodoutilizando el método de electroforesis, en cambio el Método

V22, nos acerca a una lectura mas apegada a la realidad.V22, nos acerca a una lectura mas apegada a la realidad.

Esta nueva tecnología V22, nos permite también estimar elEsta nueva tecnología V22, nos permite también estimar el

tamaño del DNA, como es el caso de las fig. 16 y 18, quetamaño del DNA, como es el caso de las fig. 16 y 18, que

corresponden a 2 cepas de Escherichia Coli, una aislada de uncorresponden a 2 cepas de Escherichia Coli, una aislada de un

niño enfermo y la otra adquirida en American Tissue Cultureniño enfermo y la otra adquirida en American Tissue Culture

Collection (ATCC). Es una cepa con resistencias a 3Collection (ATCC). Es una cepa con resistencias a 3

antibióticos, Tc, Am y Km. Su peso molecular indicado por elantibióticos, Tc, Am y Km. Su peso molecular indicado por el

proveedor es de 56 KB, el peso de la otra cepa lo calculamosproveedor es de 56 KB, el peso de la otra cepa lo calculamos

por electroforesis y fue de 4.2 KB. En las imágenes vemos quepor electroforesis y fue de 4.2 KB. En las imágenes vemos que

el DNA de la figura 18 es mucho mayor que el de la figura 16,el DNA de la figura 18 es mucho mayor que el de la figura 16,

el cual lo podíamos haber calculado, comparando las 2 figurasel cual lo podíamos haber calculado, comparando las 2 figuras..

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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4040

PRIMERAS IMÁGENES DE DNAPRIMERAS IMÁGENES DE DNA HUMANOHUMANO

((dede Rodríguez León Paz, Gloria Elena,1998) Rodríguez León Paz, Gloria Elena,1998)

Después de haber estudiado el DNA de bacterias y de virusDespués de haber estudiado el DNA de bacterias y de virus

lambda, nuestro siguiente objetivo fue el estudio del DNAlambda, nuestro siguiente objetivo fue el estudio del DNA

humano. Al iniciar los estudios de DNA humano establecimoshumano. Al iniciar los estudios de DNA humano establecimos

primero el método de extracción del mismo, de unprimero el método de extracción del mismo, de un

concentrado leucocitario siguiendo los pasos siguientes:concentrado leucocitario siguiendo los pasos siguientes:

1)1) 1.5 ml de concentrado leucocitario1.5 ml de concentrado leucocitario

2)2) CentrifugarCentrifugar

3)3) Resuspender el precipitado en buffer BF.Resuspender el precipitado en buffer BF.

4)4) + fenol y cloroformo y homogenizar en vortex.+ fenol y cloroformo y homogenizar en vortex.

5)5) CentrifugarCentrifugar

6)6) Transferir la fase acuosa a otro tubo y almacenar hastaTransferir la fase acuosa a otro tubo y almacenar hasta

su uso.su uso.

7)7) Precipitar una alícuota con alcohol-ácido, directamentePrecipitar una alícuota con alcohol-ácido, directamente

sobre el portaobjetos y secar a temperatura ambiente.sobre el portaobjetos y secar a temperatura ambiente.

8)8) Observar al microscopioObservar al microscopio

9)9) Tomar fotografía.Tomar fotografía.

Se presenta la foto que viene a ser la primera imagenSe presenta la foto que viene a ser la primera imagen

obtenida de DNA humano (fig.-19).obtenida de DNA humano (fig.-19).

Nuestro siguiente paso fue el de establecer un método deNuestro siguiente paso fue el de establecer un método de

extracción de DNA, lo más sencillo posible y para lograrlo lesextracción de DNA, lo más sencillo posible y para lograrlo les

pedimos a 4 voluntarios, una muestra de sangre y seguimospedimos a 4 voluntarios, una muestra de sangre y seguimos

los siguientes pasos:los siguientes pasos:

1)1) 8 ml de sangre periférica + EDTA como anticoagulante8 ml de sangre periférica + EDTA como anticoagulante

2)2) Se induce a que se separen los glóbulos rojosSe induce a que se separen los glóbulos rojos

3)3) Se toman 1.5 ml de plasmaSe toman 1.5 ml de plasma

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4)4) Se centrifugaSe centrifuga

5)5) Precipitado + buffer y vortexPrecipitado + buffer y vortex

6)6) + fenol y cloroformo+ fenol y cloroformo

7)7) CentrifugarCentrifugar

8)8) Transferir la fase acuosa a otro tuboTransferir la fase acuosa a otro tubo

9)9) Precipitar una alícuota de extracto de DNA con alcohol-Precipitar una alícuota de extracto de DNA con alcohol-

ácido.ácido.

10)10) Observar al microscopioObservar al microscopio

11)11) Tomar fotografía.Tomar fotografía.

Se presentan las 4 fotos del DNA de los voluntarios, son 2Se presentan las 4 fotos del DNA de los voluntarios, son 2

mujeres y 2 hombres, los 4 son jóvenes entre 25 y 32 añosmujeres y 2 hombres, los 4 son jóvenes entre 25 y 32 años

de edad y son saludables.de edad y son saludables.

En las 3 primeras fotos (fig.-20), (fig.-21), (fig.-22), el DNAEn las 3 primeras fotos (fig.-20), (fig.-21), (fig.-22), el DNA

se observa como una cadena o hilo limpio, sin replicaciones,se observa como una cadena o hilo limpio, sin replicaciones,

ni fragmentado. En cambio la foto (fig.-23), corresponde ani fragmentado. En cambio la foto (fig.-23), corresponde a

un hombre de 32 años, al que 8 días antes que nos donaraun hombre de 32 años, al que 8 días antes que nos donara

la muestra de sangre, le hicieron una vasectomía. Antes dela muestra de sangre, le hicieron una vasectomía. Antes de

saber de la cirugía, al ver en el microscopio esa imagen desaber de la cirugía, al ver en el microscopio esa imagen de

DNA, pensamosDNA, pensamos que había un error en la aplicación de laque había un error en la aplicación de la

técnica.técnica.

Repetimos nuevamente la extracción de DNA de esaRepetimos nuevamente la extracción de DNA de esa

muestra, y esta de nuevo presentaba esa imagen tanmuestra, y esta de nuevo presentaba esa imagen tan

diferente, tan replicada y tan grande, en comparación condiferente, tan replicada y tan grande, en comparación con

las imágenes de DNA. de los otros voluntarios. Despuéslas imágenes de DNA. de los otros voluntarios. Después

pensamos que el DNA se replico por la agresión al tejidopensamos que el DNA se replico por la agresión al tejido

recibida durante la operación. Estudiando el DNA en larecibida durante la operación. Estudiando el DNA en la

imagen de la foto y en el microscopio, deducimos que elimagen de la foto y en el microscopio, deducimos que el

DNA se replicó, para expresarse y reponer las proteínasDNA se replicó, para expresarse y reponer las proteínas

perdidas durante la cirugía, entre ellas, la hemoglobina, elperdidas durante la cirugía, entre ellas, la hemoglobina, el

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tejido que se encarga de reparar y cicatrizar y lostejido que se encarga de reparar y cicatrizar y los

anticuerpos contra infecciones. En conclusión seguramenteanticuerpos contra infecciones. En conclusión seguramente

la reacción del DNA fue saludable y busca el equilibrio dela reacción del DNA fue saludable y busca el equilibrio de

nuevo del organismo, ante las agresiones y las infeccionesnuevo del organismo, ante las agresiones y las infecciones

y la imagen del DNA que obtenemos refleja esos cambios.y la imagen del DNA que obtenemos refleja esos cambios.

Los resultados que obtuvimos, nos llevaron a reflexionarLos resultados que obtuvimos, nos llevaron a reflexionar

profundamente en las grandes expectativas, que podemosprofundamente en las grandes expectativas, que podemos

obtener si estudiamos el DNA humano y el de todos losobtener si estudiamos el DNA humano y el de todos los

seres vivos con el nuevo Método de Análisis de DNA V22.seres vivos con el nuevo Método de Análisis de DNA V22.

Pensamos que tal vez sea posible encontrar el lugar quePensamos que tal vez sea posible encontrar el lugar que

ocupan los genes en la cadena de DNA. Sí comparamos porocupan los genes en la cadena de DNA. Sí comparamos por

ejemplo, el DNA de una persona ciega o sorda, con el deejemplo, el DNA de una persona ciega o sorda, con el de

una persona sana, seguramente descubriremos algunauna persona sana, seguramente descubriremos alguna

señal (un marcador), una diferencia, o algo que nosseñal (un marcador), una diferencia, o algo que nos

indique el lugar, en el que debe estar ese gen o grupo deindique el lugar, en el que debe estar ese gen o grupo de

genes engenes en la cadena, que en la comparación encontremosla cadena, que en la comparación encontremos

alterada o distinta.alterada o distinta.

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4444

Pensando en esas posibilidades, solicitamos donaciones enPensando en esas posibilidades, solicitamos donaciones en

varios hospitales de la ciudad de muestras de sangre,varios hospitales de la ciudad de muestras de sangre,

extraída de pacientes con alguna enfermedad para ver yextraída de pacientes con alguna enfermedad para ver y

analizar la imagen del DNA. La experiencia y los resultadosanalizar la imagen del DNA. La experiencia y los resultados

que obtuvimos fueron magníficos por la forma tan singularque obtuvimos fueron magníficos por la forma tan singular

y diferenciada que se presenta entre una y otra imagen dey diferenciada que se presenta entre una y otra imagen de

DNA analizada. En la figura 24 podemos ver el DNA de unaDNA analizada. En la figura 24 podemos ver el DNA de una

adolescente con síndrome de Down. En la figura 25 el DNA,adolescente con síndrome de Down. En la figura 25 el DNA,

de un paciente con tuberculosis. En la figura 26 el DNA dede un paciente con tuberculosis. En la figura 26 el DNA de

un paciente con lupus eritematoso. En la figura 27 el DNAun paciente con lupus eritematoso. En la figura 27 el DNA

de una paciente con cáncer de mama. En la figura 28 el DNAde una paciente con cáncer de mama. En la figura 28 el DNA

de una paciente con Alzheimer y en la figura 29 el DNA dede una paciente con Alzheimer y en la figura 29 el DNA de

una paciente con artritis reumatoide. En las figuras 30 y 31,una paciente con artritis reumatoide. En las figuras 30 y 31,

se presentan el DNA de mujeres embarazadas, en donde sese presentan el DNA de mujeres embarazadas, en donde se

observa un DNA grande unido a uno pequeño queobserva un DNA grande unido a uno pequeño que

determinamos es el del bebé por nacer.determinamos es el del bebé por nacer.

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Todo ese trabajo desde la figura 1 hasta la 31, loTodo ese trabajo desde la figura 1 hasta la 31, lo

presentamos el 8 de enero de 1998, ante el IMPI, con unapresentamos el 8 de enero de 1998, ante el IMPI, con una

solicitud de trámite de patente en el PCT (Patentsolicitud de trámite de patente en el PCT (Patent

Cooperation Trade), en Ginebra Suiza. La fecha deCooperation Trade), en Ginebra Suiza. La fecha de

publicación internacional se realizo el 20 de agosto de esepublicación internacional se realizo el 20 de agosto de ese

mismo año. Se hizo del dominio público, porque no tuvimosmismo año. Se hizo del dominio público, porque no tuvimos

dinero para el pago de derechos respectivos, en los 20dinero para el pago de derechos respectivos, en los 20

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países en los que solicitamos la autorización para lapaíses en los que solicitamos la autorización para la

comercialización. De cualquier manera nos sentimoscomercialización. De cualquier manera nos sentimos

satisfechos porque nos protegieron los derechos de autor.satisfechos porque nos protegieron los derechos de autor.

Presentamos otras fotos de DNA, que no fueron incluidas enPresentamos otras fotos de DNA, que no fueron incluidas en

la solicitud dela solicitud de patente, pero que son de gran importancia enpatente, pero que son de gran importancia en

el avance del conocimiento del DNA.el avance del conocimiento del DNA.

La foto (fig.-32), es de un paciente con una infección en las La foto (fig.-32), es de un paciente con una infección en las

vías urinarias, estaba tan grande, que no cabía en el campovías urinarias, estaba tan grande, que no cabía en el campo

visual del microscopio. El paciente tenia 92 años de edad alvisual del microscopio. El paciente tenia 92 años de edad al

tomar la muestra y cuando vimos tal cantidad de DNA,tomar la muestra y cuando vimos tal cantidad de DNA,

pensamos que podríamos calcular la edad al ver esaspensamos que podríamos calcular la edad al ver esas

imágenes, pero el DNA no aumenta con la edad, pero si seimágenes, pero el DNA no aumenta con la edad, pero si se

transforma con algunas enfermedades y disminuye contransforma con algunas enfermedades y disminuye con

otras.otras.

FIG.-32FIG.-32DNA DE HOMBRE DE 92 AÑOSDNA DE HOMBRE DE 92 AÑOS

CON UNA INFECCION LEVECON UNA INFECCION LEVE

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EEstudiando y reflexionando sobre la edad y su relación con elstudiando y reflexionando sobre la edad y su relación con el

DNA, lo que nosotros hemos observado durante nuestraDNA, lo que nosotros hemos observado durante nuestra

investigación, es que el DNA pierde capacidad deinvestigación, es que el DNA pierde capacidad de

compactación, a medida que pasan los años. Con la edadcompactación, a medida que pasan los años. Con la edad

vamos perdiendo algo que tienen los organismos jóvenes, quevamos perdiendo algo que tienen los organismos jóvenes, que

permite a su DNA, que se compacte con facilidad. Ese algopermite a su DNA, que se compacte con facilidad. Ese algo

quizá sea la anhelada por muchos, “La fuente de la juventud”quizá sea la anhelada por muchos, “La fuente de la juventud”

y tal vez, metafóricamente hablando, sea “la piedra filosofal”y tal vez, metafóricamente hablando, sea “la piedra filosofal”

guardada en el núcleo de las células, que por tantos siglosguardada en el núcleo de las células, que por tantos siglos

buscaron sin éxito, Los Alquimistas.buscaron sin éxito, Los Alquimistas.

El tabaco daña indudablemente el DNA de los fumadores,El tabaco daña indudablemente el DNA de los fumadores,

como es el caso del DNA de una mujer que fumaba desde loscomo es el caso del DNA de una mujer que fumaba desde los

15 años, al momento de tomar la15 años, al momento de tomar la muestra tenia 42 años y sumuestra tenia 42 años y su

DNA presentó una gran cadena lateral (fig.-33).DNA presentó una gran cadena lateral (fig.-33).

FIG.- 33FIG.- 33DNA DE MUJER FUMADORADNA DE MUJER FUMADORA

42 AÑOS42 AÑOS

Cuando ella vio la fotografía de su DNA, se preocupó mucho,Cuando ella vio la fotografía de su DNA, se preocupó mucho,

nosotros le sugerimos que dejara de fumar unos 4 meses onosotros le sugerimos que dejara de fumar unos 4 meses o

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más y después regresara al laboratorio para una segundamás y después regresara al laboratorio para una segunda

prueba. Cabe la aclaración que la paciente de tabaquismo,prueba. Cabe la aclaración que la paciente de tabaquismo,

fumaba 2 o 3 cigarrillos diarios, muy poco comparado con lofumaba 2 o 3 cigarrillos diarios, muy poco comparado con lo

que fuman los grandes adictos. Ella regresó a los 6 meses deque fuman los grandes adictos. Ella regresó a los 6 meses de

que había dejado de fumar (fig.- 34).que había dejado de fumar (fig.- 34).

FIG.-34FIG.-34DNA MUJER RECUPERADADNA MUJER RECUPERADA

DE TABAQUISMODE TABAQUISMO

SSu aspecto era como de 10 años menor de la ultima vez que lau aspecto era como de 10 años menor de la ultima vez que la

vimos y cuando observó la nueva fotografía, se comprometióvimos y cuando observó la nueva fotografía, se comprometió

ante su familia a nunca volver a fumar.ante su familia a nunca volver a fumar.

Una de las drogas mas agresivas y que provoca los mayores Una de las drogas mas agresivas y que provoca los mayores

daños al ADN. es el alcohol (fig.-35), La fotografía, nosdaños al ADN. es el alcohol (fig.-35), La fotografía, nos

muestra el efecto ocasionado por el efecto de la bebida, al vermuestra el efecto ocasionado por el efecto de la bebida, al ver

esa imagen no se puede evitar la pregunta, ¿cuanto tiempoesa imagen no se puede evitar la pregunta, ¿cuanto tiempo

lleva la reparación del ADN.?, Sabemos que el alcohol por serlleva la reparación del ADN.?, Sabemos que el alcohol por ser

un compuesto formado con moléculas muy pequeñas, al serun compuesto formado con moléculas muy pequeñas, al ser

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ingerido no sigue los lineamientos del sistema digestivo, sinoingerido no sigue los lineamientos del sistema digestivo, sino

que instantáneamente invade alque instantáneamente invade al torrente sanguíneo, atraviesatorrente sanguíneo, atraviesa

las paredes de todos los órganos del cuerpo, llega al cerebro,las paredes de todos los órganos del cuerpo, llega al cerebro,

al corazón, a los riñones, al hígado, al bazo y a cada una deal corazón, a los riñones, al hígado, al bazo y a cada una de

nuestras células, por eso el efecto de euforia que se siente denuestras células, por eso el efecto de euforia que se siente de

inmediato al ingerirlo. Se calcula que el alcohol tarda en serinmediato al ingerirlo. Se calcula que el alcohol tarda en ser

eliminado de la sangre de 6 a 8 semanas, sin embargo hayeliminado de la sangre de 6 a 8 semanas, sin embargo hay

bebedores que lo ingieren a diario y otros con ciertabebedores que lo ingieren a diario y otros con cierta

periodicidad, de tal manera que la célula no tiene tiempo deperiodicidad, de tal manera que la célula no tiene tiempo de

concluir la reparación y antes de que pueda terminar su labor,concluir la reparación y antes de que pueda terminar su labor,

le llega más alcohol. Como todas las drogas, el alcohol creale llega más alcohol. Como todas las drogas, el alcohol crea

dependencia en el consumidor, pero lo mas grave es que esdependencia en el consumidor, pero lo mas grave es que es

capaz de modificar funciones vitales del organismo e inclusivecapaz de modificar funciones vitales del organismo e inclusive

provocar cambios a nivel celular, y si en el núcleo de la célula,provocar cambios a nivel celular, y si en el núcleo de la célula,

en el DNA se conserva la herencia genética de los organismos,en el DNA se conserva la herencia genética de los organismos,

el daño que un alcohólico puede provocar en su descendenciael daño que un alcohólico puede provocar en su descendencia

es muy grave.es muy grave.

FIG.- 35FIG.- 35DNA DE HOMBRE QUE INGIRIODNA DE HOMBRE QUE INGIRIO

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BEBIDAS ALCOHOLICASBEBIDAS ALCOHOLICAS

En nuestro recorrido por los hospitales y centros de salud deEn nuestro recorrido por los hospitales y centros de salud de

Hermosillo, recibimos y luego analizamos una gran cantidadHermosillo, recibimos y luego analizamos una gran cantidad

de muestras sanguíneas, de todo tipo de enfermedades y dede muestras sanguíneas, de todo tipo de enfermedades y de

pacientes de todas las edades, con ellas obtuvimos muchapacientes de todas las edades, con ellas obtuvimos mucha

información sobre el ADN, pero también nos percatamos queinformación sobre el ADN, pero también nos percatamos que

todo lo que hemos logrado saber es muy poco ante latodo lo que hemos logrado saber es muy poco ante la

inmensidad que nos falta por aprender del lenguaje deinmensidad que nos falta por aprender del lenguaje de

imágenes del ADN.imágenes del ADN.

Patente del Nuevo Método aprobada en MéxicoPatente del Nuevo Método aprobada en México

En 1996 nos llegó una carta del Instituto Mexicano de laEn 1996 nos llegó una carta del Instituto Mexicano de la

Propiedad Industrial IMPI, en la que nos informaron quePropiedad Industrial IMPI, en la que nos informaron que

nuestra solicitud de patente había sido aprobada. La emociónnuestra solicitud de patente había sido aprobada. La emoción

que sentimos fue indescriptible, porque era algo queque sentimos fue indescriptible, porque era algo que

deseábamos vehementemente obtener después de muchosdeseábamos vehementemente obtener después de muchos

años de trabajo. Esa tarde fuimos toda la familia, mi esposo,años de trabajo. Esa tarde fuimos toda la familia, mi esposo,

mis 2 hijas y yo, a un supermercado y casualmente nosmis 2 hijas y yo, a un supermercado y casualmente nos

encontramos a la periodista Emilse Valencia, amiga nuestra yencontramos a la periodista Emilse Valencia, amiga nuestra y

le platicamos la noticia recibida, hasta ese momento, nuncale platicamos la noticia recibida, hasta ese momento, nunca

habíamos comentado fuera del círculo familiar y de loshabíamos comentado fuera del círculo familiar y de los

compañeros de trabajo en el laboratorio sobre la investigacióncompañeros de trabajo en el laboratorio sobre la investigación

que realizaba. Ella trabajaba en una publicación de ampliaque realizaba. Ella trabajaba en una publicación de amplia

difusión que se llama “Revista ASI”, que fundo y dirige eldifusión que se llama “Revista ASI”, que fundo y dirige el

periodista Antonio Duarte García, nos hicieron una entrevistaperiodista Antonio Duarte García, nos hicieron una entrevista

y en la siguiente edición publicaron un amplio reportaje sobrey en la siguiente edición publicaron un amplio reportaje sobre

la investigación y la reciente aprobación en México de lala investigación y la reciente aprobación en México de la

patente, el artículo fechado el 15 de abril de 1996, suscitópatente, el artículo fechado el 15 de abril de 1996, suscitó

muchos comentarios unos a favor y otros en contra. Recibimosmuchos comentarios unos a favor y otros en contra. Recibimos

muchas llamadas telefónicas de políticos y de periodistas demuchas llamadas telefónicas de políticos y de periodistas de

otras publicaciones, de la televisión y de la radio, entre lasotras publicaciones, de la televisión y de la radio, entre las

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llamadas estuvo una del gobernador del Estado de Sonora,llamadas estuvo una del gobernador del Estado de Sonora,

que nos dio una citaque nos dio una cita para preguntarnos en que nos podíapara preguntarnos en que nos podía

ayudar y gracias a su generosidad pudimos pagar los derechosayudar y gracias a su generosidad pudimos pagar los derechos

de la patente por 20 años. de la patente por 20 años.

Después de la primera publicación en la revista ASI, muchaDespués de la primera publicación en la revista ASI, mucha

gente nos empezó a visitar en el Laboratorio, todos deseabangente nos empezó a visitar en el Laboratorio, todos deseaban

ver su DNA y el de sus familiares. Eso contribuyóver su DNA y el de sus familiares. Eso contribuyó

enormemente a que en el futuro inmediato obtuviera muchoenormemente a que en el futuro inmediato obtuviera mucho

material de investigación.material de investigación.

En la figura 36, vemos el DNA, de una paciente con Alzheimer: En la figura 36, vemos el DNA, de una paciente con Alzheimer:

FFigig.-36.-36DNA DE PACIENTE CON ALZHEIMER DNA DE PACIENTE CON ALZHEIMER

En este caso ( figura. 36) nosotros fuimos a domicilio, a tomarEn este caso ( figura. 36) nosotros fuimos a domicilio, a tomar

la muestra de sangre ya que la paciente, se encontrabala muestra de sangre ya que la paciente, se encontraba

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imposibilitada para salir de su casa. Nos ha tocado analizarimposibilitada para salir de su casa. Nos ha tocado analizar

varias personas con esta enfermedad y cuando vemos lasvarias personas con esta enfermedad y cuando vemos las

imágenes, nos da la impresión de que el DNA, esta en totalimágenes, nos da la impresión de que el DNA, esta en total

desorden (coloquialmente hablando parece despeinado). Perodesorden (coloquialmente hablando parece despeinado). Pero

si observamos en el microscopio con cuidado, podemos versi observamos en el microscopio con cuidado, podemos ver

que la cadena de DNA se encuentra envuelta con pequeñosque la cadena de DNA se encuentra envuelta con pequeños

hilos o fibras que pudieran pertenecer al DNA de unhilos o fibras que pudieran pertenecer al DNA de un

microorganismo, que poco a poco va impidiendo que el DNAmicroorganismo, que poco a poco va impidiendo que el DNA

de la paciente, funcione con normalidad, tal vez a eso se debade la paciente, funcione con normalidad, tal vez a eso se deba

el carácter progresivo pero irreversible de esta enfermedad.el carácter progresivo pero irreversible de esta enfermedad.

Algún día a través de terapia genética, puede intentarse elAlgún día a través de terapia genética, puede intentarse el

encontrar una forma de eliminar esos filamentos para que losencontrar una forma de eliminar esos filamentos para que los

pacientes con Alzheimer puedan recuperarse y mejor todavía,pacientes con Alzheimer puedan recuperarse y mejor todavía,

si la enfermedad pudiera ser diagnosticada antes de quesi la enfermedad pudiera ser diagnosticada antes de que

aparezcan los síntomas, las personas no se enfermaran,aparezcan los síntomas, las personas no se enfermaran,

cuando ya se haya encontrado la forma de prevenirla. Paracuando ya se haya encontrado la forma de prevenirla. Para

esto sabemos que hace falta mucha investigación del ADN.esto sabemos que hace falta mucha investigación del ADN.

especializada en esta patología.especializada en esta patología.

En la figura En la figura 37, 37, vemos el DNA de un paciente con lavemos el DNA de un paciente con la

enfermedad de Chagas (Tripanosomiasis americana) estaenfermedad de Chagas (Tripanosomiasis americana) esta

enfermedad la trasmite un insecto (Chinche) hematófago, yenfermedad la trasmite un insecto (Chinche) hematófago, y

provoca una infección, ocasionada por el Tripanosoma cruzi,provoca una infección, ocasionada por el Tripanosoma cruzi,

esa enfermedad afecta y afectaba mayormente a las claseesa enfermedad afecta y afectaba mayormente a las clase

social más pobre de la población, quizá por esa razón no se lesocial más pobre de la población, quizá por esa razón no se le

daba mayor importancia a su estudio y clasificación.daba mayor importancia a su estudio y clasificación.

Fue hasta 1960 que se empezó a poner la debida atención aFue hasta 1960 que se empezó a poner la debida atención a

esa patología que anualmente afecta entre 15 a18 millones deesa patología que anualmente afecta entre 15 a18 millones de

personas con una mortandad anual de 50 mil personas. Elpersonas con una mortandad anual de 50 mil personas. El

problema principal de la enfermedad, es que las personasproblema principal de la enfermedad, es que las personas

infectadas pueden no presentar síntomas en lapsos de 10 oinfectadas pueden no presentar síntomas en lapsos de 10 o

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15 años después de haberla contraído, por lo que su detección15 años después de haberla contraído, por lo que su detección

por sistemas convencionales se hace más difícil.por sistemas convencionales se hace más difícil.

FIG.-37FIG.-37DNA DE PACIENTE CON DNA DE PACIENTE CON

ENFERMEDAD DE CHAGASENFERMEDAD DE CHAGAS

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Fig.- 38:Fig.- 38:DNA DE PACIENTEDNA DE PACIENTECON CANCER OSEOCON CANCER OSEO

Pronostico del Sexo del BebéPronostico del Sexo del Bebé

En 1994 por la agenda de trabajo de investigación queEn 1994 por la agenda de trabajo de investigación que

planeamos desarrollar durante ese año, solicitamosplaneamos desarrollar durante ese año, solicitamos

inicialmente donación de sangre a 4 voluntarios, (dosinicialmente donación de sangre a 4 voluntarios, (dos

hombres y dos mujeres) una de ellas estaba embarazada yhombres y dos mujeres) una de ellas estaba embarazada y

ella no lo sabía aun, ni nosotros tampoco, al analizar laella no lo sabía aun, ni nosotros tampoco, al analizar la

imagen de su ADN. observamos una característica distinta aimagen de su ADN. observamos una característica distinta a

los ADN. hasta entonces estudiadoslos ADN. hasta entonces estudiados, , no era el de una personano era el de una persona

enferma, sin embargo era diferente en su estructura, ( figuraenferma, sin embargo era diferente en su estructura, ( figura

30), se puede observar un DNA, con una pequeña cadena30), se puede observar un DNA, con una pequeña cadena

adicional y cuando la vimos en el microscopio, pensamos en laadicional y cuando la vimos en el microscopio, pensamos en la

posibilidad de un embarazo y lo comentamos en familia, peroposibilidad de un embarazo y lo comentamos en familia, pero

como era la primera muestra observada con estacomo era la primera muestra observada con esta

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característica, sin punto de comparación, nada le dijimos acaracterística, sin punto de comparación, nada le dijimos a

ella, pero como bien dice la sabiduría popular “Ni el embarazo,ella, pero como bien dice la sabiduría popular “Ni el embarazo,

ni la alegría se pueden ocultar” y al poco tiempo, ella mismani la alegría se pueden ocultar” y al poco tiempo, ella misma

nos informó muy contenta su estado de gravidez. En esanos informó muy contenta su estado de gravidez. En esa

ocasión anotamos en la bitácora, las interesantesocasión anotamos en la bitácora, las interesantes

observaciones obtenidas del análisis de la primera muestra deobservaciones obtenidas del análisis de la primera muestra de

ADN. de un embarazoADN. de un embarazo que apenas se iniciaba. Pero fue hastaque apenas se iniciaba. Pero fue hasta

1995, cuando a partir de los resultados obtenidos y1995, cuando a partir de los resultados obtenidos y

estimulados por la fantástica posibilidad del pronóstico delestimulados por la fantástica posibilidad del pronóstico del

sexo del bebé, desde los primeros momentos de su gestación,sexo del bebé, desde los primeros momentos de su gestación,

iniciamos el estudio de mujeres embarazadas. Durante eliniciamos el estudio de mujeres embarazadas. Durante el

estudio realizado vimos y analizamos mas de 450 imágenes deestudio realizado vimos y analizamos mas de 450 imágenes de

DNA de mujeres en diferentes etapas de gestación, con ellasDNA de mujeres en diferentes etapas de gestación, con ellas

aprendimos que antes de las 11 semanas, el DNA de la madre,aprendimos que antes de las 11 semanas, el DNA de la madre,

se observa diferente si el sexo del bebé es niña (fig.-39)se observa diferente si el sexo del bebé es niña (fig.-39)

comparado a la imagen obtenidacomparado a la imagen obtenida cuando el sexo del bebé escuando el sexo del bebé es

de un niño. (figura,40) En los pronósticos del sexo del bebéde un niño. (figura,40) En los pronósticos del sexo del bebé

que realizamos , antes de la onceaba semana de gestión,que realizamos , antes de la onceaba semana de gestión,

erramos únicamente en 20 casos, algunas veces porque laerramos únicamente en 20 casos, algunas veces porque la

mamá estaba tomando medicamentos, otra porque tenia unamamá estaba tomando medicamentos, otra porque tenia una

infección, también por tener bajos los leucocitos. Nuestrainfección, también por tener bajos los leucocitos. Nuestra

observación es que cuando ciertas circunstancias, como losobservación es que cuando ciertas circunstancias, como los

jarabes o infecciones están presentes al momento del análisisjarabes o infecciones están presentes al momento del análisis

y el pronostico, el DNA se transforma y enmascara losy el pronostico, el DNA se transforma y enmascara los

resultados.resultados.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

5757

Fig.- 39Fig.- 39DNA DE MUJER CONDNA DE MUJER CON

7 SEMANAS DE EMBARAZO (NIÑA)7 SEMANAS DE EMBARAZO (NIÑA)

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

5858

En el caso de las niñas el DNA de la futura mamá, se presentaEn el caso de las niñas el DNA de la futura mamá, se presenta

como una sola cadena con un lazo adicional, esto antes de lascomo una sola cadena con un lazo adicional, esto antes de las

11 semanas, después es otra la imagen.11 semanas, después es otra la imagen.

Fig.- 40Fig.- 40DNA DE MUJER CON 9 SEMANASDNA DE MUJER CON 9 SEMANAS

DE EMBARAZO (NIÑO)DE EMBARAZO (NIÑO)

Los niños en cambio, se observan como 2 cadenas , el DNA deLos niños en cambio, se observan como 2 cadenas , el DNA de

la futura mamá y una cadenita adicional, esta imagen sela futura mamá y una cadenita adicional, esta imagen se

presenta hasta las 12 semanas, después cambia.presenta hasta las 12 semanas, después cambia.

PRUEBAS DE PATERNIDADPRUEBAS DE PATERNIDAD

En junio de 1998 un agente de investigaciones de laEn junio de 1998 un agente de investigaciones de la

Procuraduría de Justicia del Estado de Sonora, nos preguntóProcuraduría de Justicia del Estado de Sonora, nos preguntó

si era posible realizar una prueba de paternidad con nuestrosi era posible realizar una prueba de paternidad con nuestro

método, contestamos que seguramente si, solo que primerométodo, contestamos que seguramente si, solo que primero

era necesario establecer la técnica especifica para eseera necesario establecer la técnica especifica para ese

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análisis. El caso que necesitaban resolver, era el de un niñoanálisis. El caso que necesitaban resolver, era el de un niño

que 4 años atrás, estando recién nacido, había sidoque 4 años atrás, estando recién nacido, había sido

secuestrado y necesitaban saber cual de los 2 matrimoniossecuestrado y necesitaban saber cual de los 2 matrimonios

que reclamaban al niño como suyo, eran los verdaderosque reclamaban al niño como suyo, eran los verdaderos

padres.padres.

El caso en si era todo un drama, la señora que robo al niño,El caso en si era todo un drama, la señora que robo al niño,

estuvo en estado de embarazo casi al mismo tiempo que unaestuvo en estado de embarazo casi al mismo tiempo que una

vecina suya (la verdadera madre).vecina suya (la verdadera madre).

Pero al poco tiempo tuvo un aborto natural, que ocultó a suPero al poco tiempo tuvo un aborto natural, que ocultó a su

esposo que se encontraba trabajando en Estados Unidos, asíesposo que se encontraba trabajando en Estados Unidos, así

que fingió que su embarazo continuaba normalmente, peroque fingió que su embarazo continuaba normalmente, pero

cuando nació el niño de la vecina, ella lo sustrajo y se fue decuando nació el niño de la vecina, ella lo sustrajo y se fue de

Hermosillo a vivir a la ciudad de Tijuana, así que cuando suHermosillo a vivir a la ciudad de Tijuana, así que cuando su

esposo regresó de Estados Unidos, creyó realmente que elesposo regresó de Estados Unidos, creyó realmente que el

niño era suyo y lo trataron y cuidaron como si fueran susniño era suyo y lo trataron y cuidaron como si fueran sus

verdaderos padres en los 4 años siguientes.verdaderos padres en los 4 años siguientes.

Para establecer la prueba de paternidad con nuestro métodoPara establecer la prueba de paternidad con nuestro método

V22, les pedimos a 10 familias de amigos y parientes, que nosV22, les pedimos a 10 familias de amigos y parientes, que nos

dieran muestras de sangre, de los padres y de los hijos dedieran muestras de sangre, de los padres y de los hijos de

cada familia, a lo que todas ellas cooperaron y se unieron alcada familia, a lo que todas ellas cooperaron y se unieron al

estudio.estudio.

Iniciamos la investigación para establecer la técnica deIniciamos la investigación para establecer la técnica de

paternidad, tomando las muestras acudiendo a cada domiciliopaternidad, tomando las muestras acudiendo a cada domicilio

y obtuvimos las muestras de sangre de :y obtuvimos las muestras de sangre de :

-El Padre-El Padre

-La Madre-La Madre

-Los Hijos-Los Hijos

-Las Hijas-Las Hijas

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

6060

En un principio la premisa fue la de comparar los DNA, de losEn un principio la premisa fue la de comparar los DNA, de los

padres con el DNA de las hijas y los hijos. Creímos que lospadres con el DNA de las hijas y los hijos. Creímos que los

DNA de una familia, por lógica elemental, deberían parecerseDNA de una familia, por lógica elemental, deberían parecerse

tanto que los identificaríamos con cierta facilidad, pero no fuetanto que los identificaríamos con cierta facilidad, pero no fue

así. Las cadenas se parecían mucho entre los miembros de unaasí. Las cadenas se parecían mucho entre los miembros de una

familia, pero también se parecían a las de otra familia. Unos yfamilia, pero también se parecían a las de otra familia. Unos y

otros se confundían a simple vista, no fue posible laotros se confundían a simple vista, no fue posible la

identificación de los padres y los hijos de una familia de esaidentificación de los padres y los hijos de una familia de esa

manera, la broma que recibíamos en nuestra casa era que lamanera, la broma que recibíamos en nuestra casa era que la

confusión se debía a que todos los participantes en la pruebaconfusión se debía a que todos los participantes en la prueba

somos mexicanos. somos mexicanos.

Buscando una solución mas objetiva y determinante pensamosBuscando una solución mas objetiva y determinante pensamos

entonces que si uníamos directamente en la reacción lasentonces que si uníamos directamente en la reacción las

cadenas de ADN de todos los miembros de una familia, quecadenas de ADN de todos los miembros de una familia, que

sucedería. Así lo hicimos y esto fue lo que pasó:sucedería. Así lo hicimos y esto fue lo que pasó:

REACCIONES DE AFINIDADREACCIONES DE AFINIDAD

Las reacciones de afinidad de las proteínas, consisten en elLas reacciones de afinidad de las proteínas, consisten en el

reconocimiento de una molécula con otra, con unareconocimiento de una molécula con otra, con una

especificidad asombrosa. Este tipo de reacciones de afinidad,especificidad asombrosa. Este tipo de reacciones de afinidad,

se utilizan mayormente en una gran cantidad de análisisse utilizan mayormente en una gran cantidad de análisis

bioquímicos, como por ejemplo el uso de reacciones de ELISAbioquímicos, como por ejemplo el uso de reacciones de ELISA

(Ensyme Linked Inmunoassay) en virología. Lo mismo las(Ensyme Linked Inmunoassay) en virología. Lo mismo las

reacciones de afinidad entre las hormonas y sus receptores oreacciones de afinidad entre las hormonas y sus receptores o

las de las enzimas con sus sustratos.las de las enzimas con sus sustratos.

En la tecnología de PCR (Polymerase Chain Reaction), seEn la tecnología de PCR (Polymerase Chain Reaction), se

utiliza la reacción de afinidad del DNA entre los iniciadores outiliza la reacción de afinidad del DNA entre los iniciadores o

“primers” y el fragmento de DNA que se desea amplificar, por“primers” y el fragmento de DNA que se desea amplificar, por

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acción de la enzima DNA polimerasa. El requerimiento delacción de la enzima DNA polimerasa. El requerimiento del

iniciador es que su secuencia de bases. sea igual a lainiciador es que su secuencia de bases. sea igual a la

secuencia inicial de la cadena de DNA, que se desea replicar.secuencia inicial de la cadena de DNA, que se desea replicar.

Mezclamos las muestras de DNA, de los padres y los hijos o lasMezclamos las muestras de DNA, de los padres y los hijos o las

hijas y de los padres con los no hijos o no hijas, siguiendo loshijas y de los padres con los no hijos o no hijas, siguiendo los

siguientes pasos: En esta prueba participaron 5 personas 2siguientes pasos: En esta prueba participaron 5 personas 2

adultos y 3 niños: 1) El padre (fig.- 41), 2) La madre (fig.- 42),adultos y 3 niños: 1) El padre (fig.- 41), 2) La madre (fig.- 42),

3) La hija (fig.-43), 4) El no hijo (fig.- 44) y 5) La no hija (fig.-3) La hija (fig.-43), 4) El no hijo (fig.- 44) y 5) La no hija (fig.-

45).45).

1) Se tomó la muestra de sangre, con EDTA como1) Se tomó la muestra de sangre, con EDTA como

anticoagulante.anticoagulante.

22) Se centrifugó para separar el plasma y se descarta.) Se centrifugó para separar el plasma y se descarta.

3) Se adiciona buffer BF3) Se adiciona buffer BF

4) Se agrega fenol y cloroformo4) Se agrega fenol y cloroformo

5) Centrifugar5) Centrifugar

6) Volver a agregar fenol y cloroformo y centrifugar6) Volver a agregar fenol y cloroformo y centrifugar

7) Precipitar el DNA de las 5 muestras y se tomaron las7) Precipitar el DNA de las 5 muestras y se tomaron las

fotografías correspondientes fotografías correspondientes

8) Reacciones de afinidad del DNA: Se mezclaron los DNA de la8) Reacciones de afinidad del DNA: Se mezclaron los DNA de la

forma siguiente:forma siguiente:

a) a) EL PADRE + EL NO HIJO (fig.- 46)EL PADRE + EL NO HIJO (fig.- 46)

b) EL PADRE + LA NO HIJA (fig.- 47)b) EL PADRE + LA NO HIJA (fig.- 47)

c) EL PADRE + LA HIJA (fig.- 48)c) EL PADRE + LA HIJA (fig.- 48)

d) LA MADRE + EL NO HIJO (fig.- 49)d) LA MADRE + EL NO HIJO (fig.- 49)

e) LA MADRE + LA NO HIJA (fig.-50)e) LA MADRE + LA NO HIJA (fig.-50)

f) LA MADRE + LA HIJA (FIG.- 51)f) LA MADRE + LA HIJA (FIG.- 51)

g) EL PADRE+ LA MADRE + EL NO HIJO (fig.- 52)g) EL PADRE+ LA MADRE + EL NO HIJO (fig.- 52)

h) EL PADRE + LA MADRE + LA NO HIJA (fig.- 53)h) EL PADRE + LA MADRE + LA NO HIJA (fig.- 53)

i) EL PADRE + LA MADRE + LA HIJA (fig.- 54)j) EL PADRE + LAi) EL PADRE + LA MADRE + LA HIJA (fig.- 54)j) EL PADRE + LA

MADRE (fig.- 55):MADRE (fig.- 55):

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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FIG.- 41 FIG.- 41 EL PADRE EL PADRE

FIG.- 42 FIG.- 42 LA MADRE LA MADRE

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FIG.-43FIG.-43 LA HIJA LA HIJA

FIG.-44 FIG.-44 EL NO HIJO EL NO HIJO

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FIG.- 45 FIG.- 45 LA NO HIJA LA NO HIJA

FIG.-46 FIG.-46 EL PADRE + EL NO HIJO ( 2 CADENAS separadas) EL PADRE + EL NO HIJO ( 2 CADENAS separadas)

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FIG.- 47 FIG.- 47 EL PADRE + LA NO HIJA ( 2 CADENAS) EL PADRE + LA NO HIJA ( 2 CADENAS)

FIG.- 48 FIG.- 48 EL PADRE + LA HIJA ( 1 CADENA) EL PADRE + LA HIJA ( 1 CADENA)

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FIG.-49 FIG.-49 LA MADRE + EL NO HIJO ( 2 CADENAS) LA MADRE + EL NO HIJO ( 2 CADENAS)

FIG.-50FIG.-50 LA MADRE + LA NO HIJA ( 2 CADENAS) LA MADRE + LA NO HIJA ( 2 CADENAS)

FIG,. 51 FIG,. 51 LA MADRE + LA HIJA ( 1 CADENA) LA MADRE + LA HIJA ( 1 CADENA)

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FIG.-52FIG.-52 EL PADRE + LA MADRE + EL NO HIJO ( 3 CADENAS) EL PADRE + LA MADRE + EL NO HIJO ( 3 CADENAS)

FIG.-53 FIG.-53EL PADRE + LA MADRE + LA NO HIJA ( 3 CADENAS)EL PADRE + LA MADRE + LA NO HIJA ( 3 CADENAS)

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FIG.- 54 FIG.- 54 EL PADRE + LA MADRE + LA HIJA ( 1 GRANCADENA) EL PADRE + LA MADRE + LA HIJA ( 1 GRANCADENA)

FIG.- 55 FIG.- 55 EL PADRE + LA MADRE ( 2 CADENAS) EL PADRE + LA MADRE ( 2 CADENAS)

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Estos resultados obtenidos de la prueba de paternidad,Estos resultados obtenidos de la prueba de paternidad,

muestran uno de los alcances que puede ofrecer esta nuevamuestran uno de los alcances que puede ofrecer esta nueva

metodología V22.metodología V22.

Realmente fue para nosotros una sucesión de encuentros yRealmente fue para nosotros una sucesión de encuentros y

sorpresas, al ir viendo y analizando las imágenes que Íbamossorpresas, al ir viendo y analizando las imágenes que Íbamos

obteniendo en las combinaciones, de los padres y los hijos yobteniendo en las combinaciones, de los padres y los hijos y

los no hijos. Cuando vimos las dos cadenas al juntar el padre olos no hijos. Cuando vimos las dos cadenas al juntar el padre o

la madre con el no hijo o la no hija, de las figuras 46, 47, 49 yla madre con el no hijo o la no hija, de las figuras 46, 47, 49 y

50. Podemos afirmar que cuando mezclamos 2 cadenas de50. Podemos afirmar que cuando mezclamos 2 cadenas de

DNA,DNA, con secuencias distintas quedan separadas en lacon secuencias distintas quedan separadas en la

precipitación, seguramente porque no se reconocen. Enprecipitación, seguramente porque no se reconocen. En

cambio, cuando se unen 2 DNA de padres e hijos o hijas, lascambio, cuando se unen 2 DNA de padres e hijos o hijas, las

cadenas se reconocen en una reacción química de AFINIDAD,cadenas se reconocen en una reacción química de AFINIDAD,

formando una sola cadena, figuras 48 y 51.formando una sola cadena, figuras 48 y 51.

Al poder ver esto, nos pareció que era algo que otorga a la Al poder ver esto, nos pareció que era algo que otorga a la

ciencia su aureola mágica pero lógica y que la naturaleza y laciencia su aureola mágica pero lógica y que la naturaleza y la

vida está formada de acertijos y enigmas que habremos de irvida está formada de acertijos y enigmas que habremos de ir

descubriendo, con el trabajo experimental continuo, utilizandodescubriendo, con el trabajo experimental continuo, utilizando

y aplicando los conocimientos adquiridos con sentido crítico,y aplicando los conocimientos adquiridos con sentido crítico,

realizando lo que cada quien podemos y nos corresponderealizando lo que cada quien podemos y nos corresponde

hacer. hacer.

Todavía algo más sorprendente sucedió cuando unimos losTodavía algo más sorprendente sucedió cuando unimos los

DNA de los 3, los padres con los no hijos y con la hija. Con elDNA de los 3, los padres con los no hijos y con la hija. Con el

no hijo y con la no hija figuras 52 y 53, obtuvimos después deno hijo y con la no hija figuras 52 y 53, obtuvimos después de

la precipitación 3 cadenas separadas, debido a quela precipitación 3 cadenas separadas, debido a que no hayno hay

reconocimiento y por tanto no hay unión.reconocimiento y por tanto no hay unión.

Algo maravilloso sucede cuando se unen los padres con la hija,Algo maravilloso sucede cuando se unen los padres con la hija,

se obtiene una gran cadena, por una reacción de AFINIDAD,se obtiene una gran cadena, por una reacción de AFINIDAD,

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porque las cadenas de DNA tienen secuencias iguales figuraporque las cadenas de DNA tienen secuencias iguales figura

54. Tratando de comprender la reacción de afinidad entre los54. Tratando de comprender la reacción de afinidad entre los

padres y los hijos sería la siguiente: Los hijos sonpadres y los hijos sería la siguiente: Los hijos son

genéticamente hablando, la mitad exacta del padre y la mitadgenéticamente hablando, la mitad exacta del padre y la mitad

de la madre, cuando las cadenas se unen, el padre y la hija ode la madre, cuando las cadenas se unen, el padre y la hija o

la madre y la hija, se forma una cadena, aunque queda unla madre y la hija, se forma una cadena, aunque queda un

sobrante por el que falta. En cambio cuando se unen los 3, elsobrante por el que falta. En cambio cuando se unen los 3, el

padre, la madre y la hija o el hijo, obtenemos una enormepadre, la madre y la hija o el hijo, obtenemos una enorme

cadenacadena de DNA, porque el hijo o hija son la mitad de cada unode DNA, porque el hijo o hija son la mitad de cada uno

y al unirse los 3, la cadena queda completa al unirse lasy al unirse los 3, la cadena queda completa al unirse las

mitades faltantes, por ser DNA de secuencias iguales. Pormitades faltantes, por ser DNA de secuencias iguales. Por

último cuando se juntan los padres sin el hijo o la hija, seúltimo cuando se juntan los padres sin el hijo o la hija, se

obtienen 2 cadenas separadas figura 55, ya que falta el lazoobtienen 2 cadenas separadas figura 55, ya que falta el lazo

de unión, que son los hijos, a los que mucha gente llamade unión, que son los hijos, a los que mucha gente llama

intuitivamente pero atinadamente “LAZOS DE AMOR”.intuitivamente pero atinadamente “LAZOS DE AMOR”.

Para el analista será muy sencillo reconocer el resultado de lasPara el analista será muy sencillo reconocer el resultado de las

pruebas de paternidad, no tiene que interpretarpruebas de paternidad, no tiene que interpretar

subjetivamente nada, únicamente observar la reacción de lassubjetivamente nada, únicamente observar la reacción de las

cadenas de DNA , cadenas de DNA , si ve cadenas separadas reportarsi ve cadenas separadas reportar

negativo y si ve una sola cadena reportar positivo.negativo y si ve una sola cadena reportar positivo.

Nuestro reporte de prueba de paternidad del DNA, fueNuestro reporte de prueba de paternidad del DNA, fue

aceptado como prueba pericial por el juez calificador, yaceptado como prueba pericial por el juez calificador, y

coincidió plenamente con las otras pruebas (que nosotros nocoincidió plenamente con las otras pruebas (que nosotros no

conocíamos), realizadas por el cuerpo de investigadores delconocíamos), realizadas por el cuerpo de investigadores del

ministerio público, ante las evidencias, la señora que habíaministerio público, ante las evidencias, la señora que había

robado al infante confesó como sucedieron los hechos y elrobado al infante confesó como sucedieron los hechos y el

niño fue reintegrado a sus verdaderos padres.niño fue reintegrado a sus verdaderos padres.

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Hipótesis, Teorías y ExperienciaHipótesis, Teorías y Experiencia CientíficaCientífica

El filosofo y matemático Imre Lakatos consideraba que laEl filosofo y matemático Imre Lakatos consideraba que la

ciencia es incapaz de alcanzar la “verdad”, en otras palabrasciencia es incapaz de alcanzar la “verdad”, en otras palabras

pensaba que no hay verdades absolutas, pero en su obrapensaba que no hay verdades absolutas, pero en su obra

“Programa de investigación Científica” sugirió que “cada“Programa de investigación Científica” sugirió que “cada

nueva teoría deberá ser capaz de explicar mas cosas que lanueva teoría deberá ser capaz de explicar mas cosas que la

anterior y sobre todo ha predecir hechos nuevos que nadieanterior y sobre todo ha predecir hechos nuevos que nadie

antes se había planteado “. Su “Programa de Investigaciónantes se había planteado “. Su “Programa de Investigación

Científica”, consiste en una sucesión de teorías relacionadasCientífica”, consiste en una sucesión de teorías relacionadas

entre sí, de manera que unas se generan partiendo de lasentre sí, de manera que unas se generan partiendo de las

anteriores.anteriores.

Para Lakatos el desarrollo de la ciencia consiste en elPara Lakatos el desarrollo de la ciencia consiste en el

enfrentamiento de teorías rivales con la experiencia delenfrentamiento de teorías rivales con la experiencia del

investigador, bajo esa circunstancia una teoría es aceptada yinvestigador, bajo esa circunstancia una teoría es aceptada y

otra es refutada, generándose un proceso dialéctico continuootra es refutada, generándose un proceso dialéctico continuo

de afirmación- negación - afirmación, con este criterio Lakatosde afirmación- negación - afirmación, con este criterio Lakatos

parece estar de acuerdo con la teoría de su maestro Karlparece estar de acuerdo con la teoría de su maestro Karl

Popper que asegura que la ciencia esta en una constantePopper que asegura que la ciencia esta en una constante

“Revolución Científica”, lo que confronta la teoría de Thomas“Revolución Científica”, lo que confronta la teoría de Thomas

Kuhn, que afirma que antes de romperse un paradigmaKuhn, que afirma que antes de romperse un paradigma

científico existe un período de ”Ciencia Normal”, que precedecientífico existe un período de ”Ciencia Normal”, que precede

a la aparición de unaa la aparición de una “Revolución Científica” que significa en“Revolución Científica” que significa en

sí, una ruptura.sí, una ruptura.

En el método científico de las ciencias empíricas haEn el método científico de las ciencias empíricas ha

prevalecido la inducción como única manera de validación deprevalecido la inducción como única manera de validación de

las ciencias, con un sentido de verificación permanente de lalas ciencias, con un sentido de verificación permanente de la

suma de casos, pruebas y hechos que reafirmen y apoyen lassuma de casos, pruebas y hechos que reafirmen y apoyen las

tesis formuladas, lo que dificulta la validación de hechostesis formuladas, lo que dificulta la validación de hechos

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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científicos, que rompan y tengan un comportamiento ycientíficos, que rompan y tengan un comportamiento y

resultados diferentes, porque son analizados del punto deresultados diferentes, porque son analizados del punto de

vista de la ciencia y los paradigmas establecidos. En 1970,vista de la ciencia y los paradigmas establecidos. En 1970,

Thomas Kuhn hizo la siguiente observación “Cuando seThomas Kuhn hizo la siguiente observación “Cuando se

produce un cambio de paradigma, cambia la naturaleza mismaproduce un cambio de paradigma, cambia la naturaleza misma

de lo que importa como explicación. Las explicaciones bajode lo que importa como explicación. Las explicaciones bajo

dos paradigmas diferentes, no son solo disimiles; sondos paradigmas diferentes, no son solo disimiles; son

inconmensurables “. inconmensurables “.

Todo descubrimiento científico es parte de experiencias queTodo descubrimiento científico es parte de experiencias que

lo preceden, por línea directa, por ruptura o por contradicción,lo preceden, por línea directa, por ruptura o por contradicción,

entre la afirmación y la negaciónentre la afirmación y la negación media la objetividad de lamedia la objetividad de la

observación del investigador y la mente abierta a laobservación del investigador y la mente abierta a la

posibilidad de un nuevo paradigma. Cada experimentoposibilidad de un nuevo paradigma. Cada experimento

realizado en el laboratorio da origen a otro experimento,realizado en el laboratorio da origen a otro experimento,

negación y afirmación tienen igual validez e importancianegación y afirmación tienen igual validez e importancia

metodológica para el desarrollo o la innovación científica. Mimetodológica para el desarrollo o la innovación científica. Mi

maestro el Doctor en química orgánica Edward Berka, unmaestro el Doctor en química orgánica Edward Berka, un

científico alemán asilado en México, que en mi formacióncientífico alemán asilado en México, que en mi formación

profesional estimuló en mayor medida mi interés por laprofesional estimuló en mayor medida mi interés por la

investigación científica y el trabajo experimental,investigación científica y el trabajo experimental,

recomendaba constantemente que en los reportes orecomendaba constantemente que en los reportes o

anotaciones en la bitácora, se les concediera igual importanciaanotaciones en la bitácora, se les concediera igual importancia

y se registraran a detalle los resultados positivos y negativos.y se registraran a detalle los resultados positivos y negativos.

Para el Doctor Berka la observación y participación personal,Para el Doctor Berka la observación y participación personal,

“Con nuestros propios ojos y nuestras propias manos” en“Con nuestros propios ojos y nuestras propias manos” en

forma acuciosa y analítica en cada parte del proceso de unforma acuciosa y analítica en cada parte del proceso de un

experimento, es el material mas importante e invaluable paraexperimento, es el material mas importante e invaluable para

un investigador científico. un investigador científico.

Teoría y práctica se conjugan y complementan en laTeoría y práctica se conjugan y complementan en la

investigación pero indudablemente la mejor forma deinvestigación pero indudablemente la mejor forma de

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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confirmar o refutar una teoría es la empírica con un profundoconfirmar o refutar una teoría es la empírica con un profundo

sentido critico y autocrítico, por esa razón mi maestro Edwardsentido critico y autocrítico, por esa razón mi maestro Edward

Berka consideraba que un investigador debería estar siempreBerka consideraba que un investigador debería estar siempre

en el laboratorio, observando, analizando y comparando cadaen el laboratorio, observando, analizando y comparando cada

reacción y cada cambio ocurrido en los experimentos y estarreacción y cada cambio ocurrido en los experimentos y estar

presentes y atentos a cuanto se produzca y pueda abrir elpresentes y atentos a cuanto se produzca y pueda abrir el

camino a un descubrimiento.camino a un descubrimiento.

Decía el maestro Berka que un investigador debe tenerDecía el maestro Berka que un investigador debe tener

siempre las manos ocupadas por el trabajo cotidiano quesiempre las manos ocupadas por el trabajo cotidiano que

realiza y guardar oportunamente en el bolsillo de su bata unarealiza y guardar oportunamente en el bolsillo de su bata una

pequeña toalla para limpiar sus manos y saludar a eventualespequeña toalla para limpiar sus manos y saludar a eventuales

visitantes de su laboratorio.visitantes de su laboratorio.

EL FINANCIAMIENTO DEEL FINANCIAMIENTO DE PROYECTOSPROYECTOS

CIENTÍFICOS EN MÉXICOCIENTÍFICOS EN MÉXICO

En México la inversión en Ciencia y Tecnología no haEn México la inversión en Ciencia y Tecnología no ha

alcanzado los niveles de crecimiento necesarios para impulsaralcanzado los niveles de crecimiento necesarios para impulsar

el desarrollo de la investigación y la aplicación tecnológica, alel desarrollo de la investigación y la aplicación tecnológica, al

principio del sexenio correspondiente a los años, 2000- 2006,principio del sexenio correspondiente a los años, 2000- 2006,

fue de 0.40 % del PIB y no ha variado sustancialmente en losfue de 0.40 % del PIB y no ha variado sustancialmente en los

siguientes años, el porcentaje de participación del PIB en lasiguientes años, el porcentaje de participación del PIB en la

investigación científica de México esta muy por debajo de losinvestigación científica de México esta muy por debajo de los

países altamente industrializados, como Alemania, Estadospaíses altamente industrializados, como Alemania, Estados

Unidos, Canadá, Japón, etc . México ocupa el último lugar enUnidos, Canadá, Japón, etc . México ocupa el último lugar en

porcentaje del PIB invertido en investigación y desarrolloporcentaje del PIB invertido en investigación y desarrollo

entre los 30 países miembros de la OCDE. (Organización paraentre los 30 países miembros de la OCDE. (Organización para

la Cooperación y el Desarrollo Económico)la Cooperación y el Desarrollo Económico)

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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Es indudable que los proyectos científicos requieren deEs indudable que los proyectos científicos requieren de

recursos financieros que están muy lejos de la capacidadrecursos financieros que están muy lejos de la capacidad

económica del ciudadano promedio deeconómica del ciudadano promedio de nuestro país, de allí quenuestro país, de allí que

la mayor parte de la investigación científica y tecnológica sela mayor parte de la investigación científica y tecnológica se

realiza en instituciones oficiales y escasamente en el sectorrealiza en instituciones oficiales y escasamente en el sector

privado que condiciona su participación a que la investigaciónprivado que condiciona su participación a que la investigación

sea comercialmente muy redituable. Luego entonces hablar desea comercialmente muy redituable. Luego entonces hablar de

una investigación científica, independiente del sector oficial,una investigación científica, independiente del sector oficial,

como la nuestra, que aspiraba a desarrollar un proyecto decomo la nuestra, que aspiraba a desarrollar un proyecto de

investigación de ingeniería genética y que pretendíainvestigación de ingeniería genética y que pretendía

establecer un nuevo método de análisis del DNA, sonaba aestablecer un nuevo método de análisis del DNA, sonaba a

utopía de alta pureza o ingenuidad, y sin embargo, hay unautopía de alta pureza o ingenuidad, y sin embargo, hay una

razón de peso para ello, como bien señala el escritor Eduardorazón de peso para ello, como bien señala el escritor Eduardo

Galeano en su pregunta- respuesta : “¿Para que sirven lasGaleano en su pregunta- respuesta : “¿Para que sirven las

utopías?” y se responde -“Sirven para caminar, para abrirutopías?” y se responde -“Sirven para caminar, para abrir

caminos”-. Y en un país como el nuestro cuya inversión encaminos”-. Y en un país como el nuestro cuya inversión en

ciencia y tecnología no alcanza ni siquiera el promedio de lociencia y tecnología no alcanza ni siquiera el promedio de lo

queque se invierte en América Latina, había que abrir camino a lase invierte en América Latina, había que abrir camino a la

investigación independiente ante la indiferencia de lasinvestigación independiente ante la indiferencia de las

burocracias científicas oficiales de aquel tiempo en el queburocracias científicas oficiales de aquel tiempo en el que

iniciamos nuestra investigación, que dificultaban eliniciamos nuestra investigación, que dificultaban el

financiamiento aun para proyectos de investigaciónfinanciamiento aun para proyectos de investigación

enmarcados en lo que Thomas Kuhn llama “Ciencia normal”.enmarcados en lo que Thomas Kuhn llama “Ciencia normal”.

Y vaya que hemos caminado desde aquel día que dejamos laY vaya que hemos caminado desde aquel día que dejamos la

comodidad del cubículo y el cheque quincenal de aquel Centrocomodidad del cubículo y el cheque quincenal de aquel Centro

de Investigaciones, en el que trabajaba para emprender dede Investigaciones, en el que trabajaba para emprender de

manera independiente el camino de lo que era una bellamanera independiente el camino de lo que era una bella

utopía, sin mas recursos que el apoyo familiar y la voluntad yutopía, sin mas recursos que el apoyo familiar y la voluntad y

la tenacidad personal para tratar de lograr realizar nuestrola tenacidad personal para tratar de lograr realizar nuestro

proyecto de investigación. Desde entonces cada vez queproyecto de investigación. Desde entonces cada vez que

parece que caminando nos acercamos al horizonte de ese “Noparece que caminando nos acercamos al horizonte de ese “No

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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lugar” que define a las utopías, el horizonte de nuevo se alejalugar” que define a las utopías, el horizonte de nuevo se aleja

y nos obliga a seguir caminando.y nos obliga a seguir caminando.

LA ENFERMEDAD DE LAS VACASLA ENFERMEDAD DE LAS VACAS LOCASLOCAS

En 1996, el llamado síndrome de la “vacas locas” BSE (BovinEn 1996, el llamado síndrome de la “vacas locas” BSE (Bovin

Spongiform Encefalithy) en Inglaterra, fue motivo de laSpongiform Encefalithy) en Inglaterra, fue motivo de la

atención mundial, al conocerse que la detección de este mal seatención mundial, al conocerse que la detección de este mal se

realizaba cuando el estado de la enfermedad estaba en su faserealizaba cuando el estado de la enfermedad estaba en su fase

terminal o la res este muerta, esto llenó de temor a losterminal o la res este muerta, esto llenó de temor a los

consumidores de carne de res en el Reino Unido, en el resto deconsumidores de carne de res en el Reino Unido, en el resto de

Europa y otros países a los que Inglaterra exportabaEuropa y otros países a los que Inglaterra exportaba

productos cárnicos. La mayoría de estas naciones cerraron elproductos cárnicos. La mayoría de estas naciones cerraron el

mercado a las importaciones y establecieron cercos sanitariosmercado a las importaciones y establecieron cercos sanitarios

a la enfermedad.a la enfermedad.

Inglaterra estuvo obligada a sacrificar miles de vacas queInglaterra estuvo obligada a sacrificar miles de vacas que

manifestaban el principio de la enfermedad e inclusive tuvomanifestaban el principio de la enfermedad e inclusive tuvo

que eliminar a las reses aparentemente sanas pero queque eliminar a las reses aparentemente sanas pero que

formaban parte de los hatos ganaderos infectados.formaban parte de los hatos ganaderos infectados.

En el estado de Sonora que es una entidad ganadera, laEn el estado de Sonora que es una entidad ganadera, la

enfermedad de las vacas locas fue noticia de primera plana enenfermedad de las vacas locas fue noticia de primera plana en

todos los medios de comunicación.todos los medios de comunicación.

Un hermano nuestro, Fausto León Paz, atento a esas noticias yUn hermano nuestro, Fausto León Paz, atento a esas noticias y

enterado con todo detalle de las investigaciones que llevamosenterado con todo detalle de las investigaciones que llevamos

a cabo con el DNA, nos aconsejó que le escribiéramos ala cabo con el DNA, nos aconsejó que le escribiéramos al

Primer Ministro de Inglaterra John Major y le propusiéramosPrimer Ministro de Inglaterra John Major y le propusiéramos

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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nuestro método de análisis como una posible solución para lanuestro método de análisis como una posible solución para la

enfermedad de las vacas locas, pero al ver cierta indecisión deenfermedad de las vacas locas, pero al ver cierta indecisión de

nuestra parte nos dijo: “total si contesta que bueno y si no, nonuestra parte nos dijo: “total si contesta que bueno y si no, no

pasa nada”.pasa nada”.

Escribimos entonces a John Major al 10 Downing Street;Escribimos entonces a John Major al 10 Downing Street;

London Inglaterra, proponiendo nuestra técnica y cual seriaLondon Inglaterra, proponiendo nuestra técnica y cual seria

nuestra sorpresa, que en el lapso denuestra sorpresa, que en el lapso de dos semanas recibimosdos semanas recibimos

una carta de la oficina del Primer Ministro inglésuna carta de la oficina del Primer Ministro inglés

comunicándonos su interés por conocer mas detalles delcomunicándonos su interés por conocer mas detalles del

método, para esto nos informó que nos pondría enmétodo, para esto nos informó que nos pondría en

comunicación con el Ministerio de Agricultura, Pesca ycomunicación con el Ministerio de Agricultura, Pesca y

Alimentación de Gran Bretaña. MAFF. Alimentación de Gran Bretaña. MAFF.

A partir de abril de 1996 iniciamos una serie de intercambiosA partir de abril de 1996 iniciamos una serie de intercambios

de información epistolar con el departamento de BSE delde información epistolar con el departamento de BSE del

MAFF, creado especialmente para atender el problema de laMAFF, creado especialmente para atender el problema de la

“vacas locas” nuestra experiencia con DNA de ganado vacuno“vacas locas” nuestra experiencia con DNA de ganado vacuno

en ese tiempo se concretaba a un único caso de detección deen ese tiempo se concretaba a un único caso de detección de

brucelosis, sin embargo confiábamos plenamente quebrucelosis, sin embargo confiábamos plenamente que

podíamos establecer un método de diagnostico de lapodíamos establecer un método de diagnostico de la

Encefalitis Espongiforme, trabajando con un buen numero deEncefalitis Espongiforme, trabajando con un buen numero de

muestras de vacas sanas y enfermas. Para esto formulamosmuestras de vacas sanas y enfermas. Para esto formulamos

un plan de trabajo que incluía la extracción de DNA de laun plan de trabajo que incluía la extracción de DNA de la

sangre de las reses y su posterior análisis con nuestrosangre de las reses y su posterior análisis con nuestro

método.método.

Entregamos nuestra propuesta en la embajada de InglaterraEntregamos nuestra propuesta en la embajada de Inglaterra

en la ciudad deen la ciudad de México y se nos comunicó, que los documentosMéxico y se nos comunicó, que los documentos

serían enviados esa misma semana a Londres en la valijaserían enviados esa misma semana a Londres en la valija

diplomática y que ellos se comunicarían nuevamente condiplomática y que ellos se comunicarían nuevamente con

nosotros después de estudiar la propuesta.nosotros después de estudiar la propuesta.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

7777

Poco después, en 1997 se efectuaron elecciones en GranPoco después, en 1997 se efectuaron elecciones en Gran

Bretaña y el Primer Ministro John Major fue derrotado por elBretaña y el Primer Ministro John Major fue derrotado por el

miembro del partido laborista Tonymiembro del partido laborista Tony Blair. A partir del arribo deBlair. A partir del arribo de

la nueva administración perdimos todo contacto con el MAFFla nueva administración perdimos todo contacto con el MAFF

de Inglaterra, pero un año después recibimos unade Inglaterra, pero un año después recibimos una

comunicación de los nuevos funcionarios ingleses informandocomunicación de los nuevos funcionarios ingleses informando

de su interés por la propuesta que habíamos hecho a fines dede su interés por la propuesta que habíamos hecho a fines de

1996, la propuesta de ellos consistía que en la primera fase1996, la propuesta de ellos consistía que en la primera fase

del estudio recibiríamos en México (Hermosillo), muestrasdel estudio recibiríamos en México (Hermosillo), muestras

codificadas de DNA de vacas afectadas por la enfermedad,codificadas de DNA de vacas afectadas por la enfermedad,

para esto teníamos que contar con el permiso aduanalpara esto teníamos que contar con el permiso aduanal

mexicano del Departamento de Agricultura y Ganadería delmexicano del Departamento de Agricultura y Ganadería del

Gobierno Federal, hicimos los tramites respectivos ante elGobierno Federal, hicimos los tramites respectivos ante el

gobierno de México y simultáneamente comunicamos al MAFFgobierno de México y simultáneamente comunicamos al MAFF

que pronto enviaríamos el permiso aduanal respectivo.que pronto enviaríamos el permiso aduanal respectivo.

Pero pasaron los días y los meses y el acuse de recibo, elPero pasaron los días y los meses y el acuse de recibo, el

permiso o una notificación negativa jamás llegó, por tanto nospermiso o una notificación negativa jamás llegó, por tanto nos

olvidamos del asunto (usos y costumbres, dijimos por todoolvidamos del asunto (usos y costumbres, dijimos por todo

comentario) y casi un año después (1999) de haber realizadocomentario) y casi un año después (1999) de haber realizado

la solicitud, un funcionario federal nos llamó parala solicitud, un funcionario federal nos llamó para

comunicarnos que el permiso estaba listo y podíamos pasar acomunicarnos que el permiso estaba listo y podíamos pasar a

recogerlo.recogerlo.

Naturalmente que aquello quedo cómo una anécdota, de laNaturalmente que aquello quedo cómo una anécdota, de la

ineficiencia administrativa que nos privó de la oportunidad deineficiencia administrativa que nos privó de la oportunidad de

probar la metodología en un país del primer mundo, contandoprobar la metodología en un país del primer mundo, contando

con todos los recursos que hasta ese momento, no habíamoscon todos los recursos que hasta ese momento, no habíamos

dispuesto en México para desarrollar y aplicar nuestradispuesto en México para desarrollar y aplicar nuestra

investigación.investigación.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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MACROMOLECULAS HABANA 97MACROMOLECULAS HABANA 97INTERNACIONAL MEETING ON POLYMERSINTERNACIONAL MEETING ON POLYMERS

UNIVERSIDAD DE LA HABANA CUBAUNIVERSIDAD DE LA HABANA CUBA

En octubre de 1997 fuimos invitados a participar con nuestroEn octubre de 1997 fuimos invitados a participar con nuestro

trabajo de investigación “Desarrollo de un Nuevo Método paratrabajo de investigación “Desarrollo de un Nuevo Método para

Ver, Analizar y Manipular DNA Utilizando un MicroscopioVer, Analizar y Manipular DNA Utilizando un Microscopio

Óptico “, en el Congreso Internacional de Macromoléculas enÓptico “, en el Congreso Internacional de Macromoléculas en

la Habana Cuba, la sede del evento durante la semana del 1 alla Habana Cuba, la sede del evento durante la semana del 1 al

5 de diciembre del mismo año, fue la universidad de la capital5 de diciembre del mismo año, fue la universidad de la capital

de ese país. Previo ha nuestro registro remitimos a losde ese país. Previo ha nuestro registro remitimos a los

organizadores el resumen (abstract) de la investigación queorganizadores el resumen (abstract) de la investigación que

presentaríamos en Cuba. Fuimos aceptados y el problemapresentaríamos en Cuba. Fuimos aceptados y el problema

inicial fue gestionar en muy poco tiempo los recursosinicial fue gestionar en muy poco tiempo los recursos

necesarios para el viaje y estancia en Cuba. Afortunadamentenecesarios para el viaje y estancia en Cuba. Afortunadamente

el Secretario de Salud del Estado de Sonora, Doctor Manuelel Secretario de Salud del Estado de Sonora, Doctor Manuel

Robles Linares, conocía de tiempo atrás nuestra investigaciónRobles Linares, conocía de tiempo atrás nuestra investigación

y fue sensible a la necesidad económica que afrontábamosy fue sensible a la necesidad económica que afrontábamos

para poder asistir al congreso científico. Por lo que nos brindópara poder asistir al congreso científico. Por lo que nos brindó

boletos de viaje redondo México-la Habana, la Habana –boletos de viaje redondo México-la Habana, la Habana –

México,México, eso nos solucionó parcialmente el problema porqueeso nos solucionó parcialmente el problema porque

había que viajar primero de Hermosillo a México y de México ahabía que viajar primero de Hermosillo a México y de México a

Hermosillo de regreso, pero nuevamente la suerte estuvo deHermosillo de regreso, pero nuevamente la suerte estuvo de

nuestra parte y la generosidad de unos amigos periodistas, senuestra parte y la generosidad de unos amigos periodistas, se

hizo patente y lograron que un periódico local nos financiarahizo patente y lograron que un periódico local nos financiara

el viaje redondo, a la ciudad de México.el viaje redondo, a la ciudad de México.

La estancia en la ciudad de la Habana nos permitió conocer aLa estancia en la ciudad de la Habana nos permitió conocer a

investigadores europeos y latinoamericanos que con susinvestigadores europeos y latinoamericanos que con sus

trabajos de investigación concurrieron al Congreso científico,trabajos de investigación concurrieron al Congreso científico,

la diversificada aplicación de los polímeros en esos trabajos,la diversificada aplicación de los polímeros en esos trabajos,

desde el campo de la industria, la biotecnología y ladesde el campo de la industria, la biotecnología y la

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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odontología, revelo a plenitud ante nuestros ojos el uso de losodontología, revelo a plenitud ante nuestros ojos el uso de los

polímeros, como un factor o un elemento estructural muypolímeros, como un factor o un elemento estructural muy

importante de las sociedades modernas (o posmodernas) delimportante de las sociedades modernas (o posmodernas) del

siglo XX y de inicios del siglo XX1, de hecho es difícil imaginarsiglo XX y de inicios del siglo XX1, de hecho es difícil imaginar

la existencia de estas sociedades sin el uso de los polímeros.la existencia de estas sociedades sin el uso de los polímeros.

Su uso en todos los campos de la actividad humana, como enSu uso en todos los campos de la actividad humana, como en

las llantas para automóviles, mangueras, suelas de zapatos,las llantas para automóviles, mangueras, suelas de zapatos,

aislantes eléctricos, aparatos de radio, teléfonos, partes deaislantes eléctricos, aparatos de radio, teléfonos, partes de

televisores, pelotas de golf, etc. También en latelevisores, pelotas de golf, etc. También en la

nanobiotecnología la aplicación de nuevos polímerosnanobiotecnología la aplicación de nuevos polímeros

termoplásticos tiene un amplio campo de aplicación al igualtermoplásticos tiene un amplio campo de aplicación al igual

que en los sorprendentes procesos de nanoimpresión,que en los sorprendentes procesos de nanoimpresión,

nanoelectrónica, etc.. Naturalmente que para nosotros elnanoelectrónica, etc.. Naturalmente que para nosotros el

mayor interés estaba enfocado en el uso de los polímerosmayor interés estaba enfocado en el uso de los polímeros

naturales, de los que la mayor parte de ellos se obtienen pornaturales, de los que la mayor parte de ellos se obtienen por

reacciones de condensación o adición, algunos de esosreacciones de condensación o adición, algunos de esos

polímeros tienen contacto directo con el medio fisiológico ypolímeros tienen contacto directo con el medio fisiológico y

poseen la ventaja de que son biodegradables.poseen la ventaja de que son biodegradables.

El uso de las membranas de polímeros en la medicina, haEl uso de las membranas de polímeros en la medicina, ha

adquirido una enorme importancia en procesos de purificaciónadquirido una enorme importancia en procesos de purificación

sanguínea, en la diálisis y en las técnicas de ultrafiltraciónsanguínea, en la diálisis y en las técnicas de ultrafiltración

para la separación de microorganismos, las membranas depara la separación de microorganismos, las membranas de

separación ocupan un lugar muy destacado en la industriaseparación ocupan un lugar muy destacado en la industria

alimenticia, en la fabricación de quesos y de determinadasalimenticia, en la fabricación de quesos y de determinadas

bebidas como la cerveza, fermentados diversos, empaque debebidas como la cerveza, fermentados diversos, empaque de

alimentos par disminuir o evitar su oxidación en fin, laalimentos par disminuir o evitar su oxidación en fin, la

experiencia obtenida en el Congreso de macromoléculas en laexperiencia obtenida en el Congreso de macromoléculas en la

Habana, reafirmó nuestro interés por el uso de lo polímerosHabana, reafirmó nuestro interés por el uso de lo polímeros

naturales que de entonces (1997), a la fecha han adquiridonaturales que de entonces (1997), a la fecha han adquirido

una mayor importancia, quizá por eso quedaron grabadas enuna mayor importancia, quizá por eso quedaron grabadas en

nuestra mente las palabras de un investigador que dijo:nuestra mente las palabras de un investigador que dijo:

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“Los polímeros y su contribución invisible, tienen un éxito muy“Los polímeros y su contribución invisible, tienen un éxito muy

visible en el mundo moderno”visible en el mundo moderno”

OPTOGENETICS.INCOPTOGENETICS.INC

En agosto de 1998 nos invitaron del Periódico “El Imparcial”En agosto de 1998 nos invitaron del Periódico “El Imparcial”

de Hermosillo Sonora, a ofrecer una platica de presentación dede Hermosillo Sonora, a ofrecer una platica de presentación de

nuestro trabajo de investigación, dentro de un programa anualnuestro trabajo de investigación, dentro de un programa anual

de conferencias y actividades culturales que realizan yde conferencias y actividades culturales que realizan y

denominan “Charlas de Verano”. Después de la platica Eldenominan “Charlas de Verano”. Después de la platica El

Imparcial publicó un gran reportaje, que tituló “De HermosilloImparcial publicó un gran reportaje, que tituló “De Hermosillo

al Nobel” esto motivó a que unos empresarios mexicanos yal Nobel” esto motivó a que unos empresarios mexicanos y

norteamericanos, nos invitaran a presentar nuestranorteamericanos, nos invitaran a presentar nuestra

investigación en San José California, aceptamos y fue de estainvestigación en San José California, aceptamos y fue de esta

manera como el 22 de septiembre de 1998, ante la comunidadmanera como el 22 de septiembre de 1998, ante la comunidad

de científicos norteamericanos de Silicon Valley yde científicos norteamericanos de Silicon Valley y

empresarios, presentamos en esa ciudad californiana lasempresarios, presentamos en esa ciudad californiana las

experiencias en la investigación del DNA. Con nuestro nuevoexperiencias en la investigación del DNA. Con nuestro nuevo

método, mostramos además las fotografías obtenidas. Hubométodo, mostramos además las fotografías obtenidas. Hubo

mucha discusión y dudas, pero para nosotros lo significativomucha discusión y dudas, pero para nosotros lo significativo

de esa reunión era que por primera vez investigadoresde esa reunión era que por primera vez investigadores

científicos, se interesaban por escuchar los resultados de uncientíficos, se interesaban por escuchar los resultados de un

proyecto de investigación, que médicos e investigadoresproyecto de investigación, que médicos e investigadores

mexicanos de Hermosillo, habían calificado de descabelladomexicanos de Hermosillo, habían calificado de descabellado

sin siquiera conocerlo. Finalmente, científicos y empresariossin siquiera conocerlo. Finalmente, científicos y empresarios

mexicanos y norteamericanos decidieron formar una empresamexicanos y norteamericanos decidieron formar una empresa

de biotecnología a la que pusieron por nombre OPTOGENETICde biotecnología a la que pusieron por nombre OPTOGENETIC

INC. Partiendo del hecho de que la nueva técnica de análisisINC. Partiendo del hecho de que la nueva técnica de análisis

de DNA esta basada en un fenómeno óptico, que permite verlode DNA esta basada en un fenómeno óptico, que permite verlo

en el microscopio . En el lapso de gestión de los abogadosen el microscopio . En el lapso de gestión de los abogados

para el registro legal de la empresa en el Estado de California,para el registro legal de la empresa en el Estado de California,

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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la Doctora en Genética Xi Zhao, una connotada investigadorala Doctora en Genética Xi Zhao, una connotada investigadora

norteamericana de origen Chino, estuvo en Hermosillo pornorteamericana de origen Chino, estuvo en Hermosillo por

acuerdo y solicitud de los miembros de la nueva empresa de laacuerdo y solicitud de los miembros de la nueva empresa de la

que ella misma formaba parte, el objetivo de su visita era paraque ella misma formaba parte, el objetivo de su visita era para

presenciar de manera directa en el laboratorio la aplicación depresenciar de manera directa en el laboratorio la aplicación de

la nueva tecnología. Ella dio su aprobación e hizo interesantesla nueva tecnología. Ella dio su aprobación e hizo interesantes

observaciones sobre el método, pero lo que mas recuerdo fueobservaciones sobre el método, pero lo que mas recuerdo fue

que en ese primer contacto con el método, ella comentó que leque en ese primer contacto con el método, ella comentó que le

era difícil aceptar que estaba viendo el DNA y tal vez lo queera difícil aceptar que estaba viendo el DNA y tal vez lo que

veíamos era algo que nadie en el mundo se puede imaginarveíamos era algo que nadie en el mundo se puede imaginar

que existe. que existe.

El 2 de diciembre de 1998 se aprobó el registro legal de la El 2 de diciembre de 1998 se aprobó el registro legal de la

empresa de biotecnología Optogenetics Inc. en el Estado deempresa de biotecnología Optogenetics Inc. en el Estado de

California, con el número 2073727, firmada por el SecretarioCalifornia, con el número 2073727, firmada por el Secretario

de Estado del Estado de California Bill Jones, la dirección de lade Estado del Estado de California Bill Jones, la dirección de la

corporación quedó establecida en San José California, USA.corporación quedó establecida en San José California, USA.

Fundada por inversionistas mexicanos y norteamericanos. LaFundada por inversionistas mexicanos y norteamericanos. La

empresa recibió autorización para la emisión de 25.000.000empresa recibió autorización para la emisión de 25.000.000

de acciones de las cuales el 45 % serian para la autora de lade acciones de las cuales el 45 % serian para la autora de la

invención., mas US$100.000 dólares anuales por lainvención., mas US$100.000 dólares anuales por la

transferencia de tecnología de la patente mexicana (182175)transferencia de tecnología de la patente mexicana (182175)

y la patente en PCT (mx98/00003), la entrega de todos losy la patente en PCT (mx98/00003), la entrega de todos los

descubrimientos futuros y un convenio de no competencia condescubrimientos futuros y un convenio de no competencia con

los intereses de la compañía Optogenetic Inc. El capital iniciallos intereses de la compañía Optogenetic Inc. El capital inicial

fue fijado en US$1.500.000 dólares., Los abogados encargadosfue fijado en US$1.500.000 dólares., Los abogados encargados

fueron el despacho Wilson Sonsini Goodrich &Rosati de Palofueron el despacho Wilson Sonsini Goodrich &Rosati de Palo

Alto California.Alto California.

Desde el principio la compañía tuvo como Director Ejecutivo alDesde el principio la compañía tuvo como Director Ejecutivo al

Doctor Víctor Virpullat, científico norteamericano, miembro yDoctor Víctor Virpullat, científico norteamericano, miembro y

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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ex-presidente de la organización internacional que agrupa aex-presidente de la organización internacional que agrupa a

las personas de mas alto coeficiente intelectual (CI) en ellas personas de mas alto coeficiente intelectual (CI) en el

mundo (MENSA) y al que pertenecen la mayoría de losmundo (MENSA) y al que pertenecen la mayoría de los

científicos mascientíficos mas destacados de los Estados Unidos y de otrosdestacados de los Estados Unidos y de otros

países. A Optogenetic se incorporarían, además de la Doctorapaíses. A Optogenetic se incorporarían, además de la Doctora

Xi Zhao, el Doctor en Biología Celular Gin Wu y el promotor yXi Zhao, el Doctor en Biología Celular Gin Wu y el promotor y

asesor financiero Arthur Lipper III.asesor financiero Arthur Lipper III.

Después de que se formó la compañía Optogenetic, losDespués de que se formó la compañía Optogenetic, los

empresarios mexicanos hicieron gestiones en Hermosillo conempresarios mexicanos hicieron gestiones en Hermosillo con

la Secretaria de Salud para que nos concedieran un espaciola Secretaria de Salud para que nos concedieran un espacio

en el Hospital Oncológico del Estado de Sonora, en esaen el Hospital Oncológico del Estado de Sonora, en esa

institución de salud montamos un pequeño laboratorio, en elinstitución de salud montamos un pequeño laboratorio, en el

que empezamos a trabajar de nuevo, prácticamente en unque empezamos a trabajar de nuevo, prácticamente en un

nuevo “asilo científico”. Por otra parte, en California empiezanuevo “asilo científico”. Por otra parte, en California empieza

el proceso de solicitud de patente en los Estados Unidos. Lael proceso de solicitud de patente en los Estados Unidos. La

perspectiva muy atractiva para trabajar enperspectiva muy atractiva para trabajar en el Hospitalel Hospital

Oncológico fue que en ese lugar obtendríamos muestrasOncológico fue que en ese lugar obtendríamos muestras

sanguíneas de enfermos de cáncer recién diagnosticados, nossanguíneas de enfermos de cáncer recién diagnosticados, nos

interesaba particularmente empezar a estudiar el DNA deinteresaba particularmente empezar a estudiar el DNA de

pacientes con cualquier tipo de cáncer que no hubieranpacientes con cualquier tipo de cáncer que no hubieran

iniciado su tratamiento de quimioterapia y radioterapia,iniciado su tratamiento de quimioterapia y radioterapia,

enfermos de cáncer Cervico-uterino, cáncer de mama, cáncerenfermos de cáncer Cervico-uterino, cáncer de mama, cáncer

de próstata, cáncer óseo, cáncer de pulmón, etc.de próstata, cáncer óseo, cáncer de pulmón, etc.

La posibilidad de sustituir el examen papanicolau de cáncerLa posibilidad de sustituir el examen papanicolau de cáncer

Cervico-uterino, con la sencilla extracción de una muestra deCervico-uterino, con la sencilla extracción de una muestra de

sangre, como en cualquier biometría, haría que muchassangre, como en cualquier biometría, haría que muchas

mujeres que evitan el examen por pudor, cuestiones morales ,mujeres que evitan el examen por pudor, cuestiones morales ,

culturales o religiosas acudieran a hacerse las pruebas de DNAculturales o religiosas acudieran a hacerse las pruebas de DNA

de manera rutinaria y sobre todo con la posibilidad dede manera rutinaria y sobre todo con la posibilidad de

detección temprana. Todos los oncólogos saben que cuandodetección temprana. Todos los oncólogos saben que cuando

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

8383

un cáncer es detectado o manifiesta sus primeros síntomas, laun cáncer es detectado o manifiesta sus primeros síntomas, la

enfermedad ya tiene algunos años de haberse incubado, asíenfermedad ya tiene algunos años de haberse incubado, así

que si tomamos en consideración que en cualquierque si tomamos en consideración que en cualquier

enfermedad el primero que cambia es el DNA, al registrar laenfermedad el primero que cambia es el DNA, al registrar la

presencia de agentes patógenos, y los genes del sistemapresencia de agentes patógenos, y los genes del sistema

inmunológico se replican e inician la defensa del organismo,inmunológico se replican e inician la defensa del organismo,

un análisis del DNA, detectaría oportunamente esos cambios,un análisis del DNA, detectaría oportunamente esos cambios,

esa información en manos del oncólogo permitiría la terapiaesa información en manos del oncólogo permitiría la terapia

adecuada cuando la enfermedad apenas se inicia, con laadecuada cuando la enfermedad apenas se inicia, con la

ventaja adicional de que se le puede dar seguimiento al efectoventaja adicional de que se le puede dar seguimiento al efecto

de los medicamentos y los resultados de la terapia. de los medicamentos y los resultados de la terapia.

Años atrás, cuando la investigación la realizaba en elAños atrás, cuando la investigación la realizaba en el

Laboratorio Estatal de Salud Pública, hubo una ocasión queLaboratorio Estatal de Salud Pública, hubo una ocasión que

una de las muestras de DNA que analizaba y que pertenecía auna de las muestras de DNA que analizaba y que pertenecía a

una joven compañera del laboratorio, presentó un aspectouna joven compañera del laboratorio, presentó un aspecto

extraño muy diferente a las muestras de DNA que a ellaextraño muy diferente a las muestras de DNA que a ella

misma le habíamos realizado meses antes y diferente tambiénmisma le habíamos realizado meses antes y diferente también

a otras muestras de DNA hasta entonces estudiadas, noa otras muestras de DNA hasta entonces estudiadas, no

sabíamos de que se trataba pero por prevención se losabíamos de que se trataba pero por prevención se lo

comentamos a ella y entonces consultó a su medico, que muycomentamos a ella y entonces consultó a su medico, que muy

profesionalmente agotó todo tipo de pruebas y al hacer laprofesionalmente agotó todo tipo de pruebas y al hacer la

prueba de Papanicolau, le diagnosticaron cáncer cérvicoprueba de Papanicolau, le diagnosticaron cáncer cérvico

uterino incipiente, otras pruebas adicionales confirmaron eluterino incipiente, otras pruebas adicionales confirmaron el

diagnostico y el doctor inició en la paciente, una terapia condiagnostico y el doctor inició en la paciente, una terapia con

interferón. Terminado el tratamiento ella nos dio una nuevainterferón. Terminado el tratamiento ella nos dio una nueva

muestra sanguínea para extraer el DNA y repetir el análisis, lamuestra sanguínea para extraer el DNA y repetir el análisis, la

sorpresa fue que la imagen de su DNA había recuperado susorpresa fue que la imagen de su DNA había recuperado su

aspecto normal, ya sin el aspecto replicado y desordenado,aspecto normal, ya sin el aspecto replicado y desordenado,

que presentaba antes de su tratamiento.que presentaba antes de su tratamiento.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

8484

Con ese antecedente en mente, el iniciar un estudioCon ese antecedente en mente, el iniciar un estudio

sistemático de cáncer en el hospital al que acudíansistemático de cáncer en el hospital al que acudían

diariamente enfermos de todo el estado de Sonora, mediariamente enfermos de todo el estado de Sonora, me

parecía una gran oportunidad de consolidar una investigaciónparecía una gran oportunidad de consolidar una investigación

que ayudara a resolver la erradicación de esa terribleque ayudara a resolver la erradicación de esa terrible

enfermedad, por su parte, a la compañía Optogenetic lesenfermedad, por su parte, a la compañía Optogenetic les

pareció muy adecuado que iniciáramos con cáncer la nuevapareció muy adecuado que iniciáramos con cáncer la nueva

etapa de la investigación de DNA, considerando que solamenteetapa de la investigación de DNA, considerando que solamente

en Estados Unidos esa enfermedad provoca el mayor índice deen Estados Unidos esa enfermedad provoca el mayor índice de

decesos.decesos.

Hicimos un protocolo de investigación que entregamos alHicimos un protocolo de investigación que entregamos al

director del nosocomio, pero extrañamente las muestrasdirector del nosocomio, pero extrañamente las muestras

nunca llegaron a nuestro laboratorio, por cuestiones casualesnunca llegaron a nuestro laboratorio, por cuestiones casuales

obtuvimos dos o tres muestras de enfermos que eranobtuvimos dos o tres muestras de enfermos que eran

conocidos nuestros, ellos o sus familiares, y aunque algunosconocidos nuestros, ellos o sus familiares, y aunque algunos

médicos en lo personal nos prometieron amablementemédicos en lo personal nos prometieron amablemente

conseguirnos algunas muestras de los pacientes que ellosconseguirnos algunas muestras de los pacientes que ellos

trataban, estas tampoco nunca llegaron. La compañía decidiótrataban, estas tampoco nunca llegaron. La compañía decidió

entonces poner un anuncio de media página en un periódicoentonces poner un anuncio de media página en un periódico

local solicitando muestras voluntarias de enfermos de cáncerlocal solicitando muestras voluntarias de enfermos de cáncer

y por ese medio conseguimos otras tres muestras pero dey por ese medio conseguimos otras tres muestras pero de

enfermos que ya habían iniciado el tratamiento o estaban enenfermos que ya habían iniciado el tratamiento o estaban en

fase terminal.fase terminal.

Al no contar con el suficiente número de muestras que nosAl no contar con el suficiente número de muestras que nos

permitieran realizar repeticiones y comparaciones estadísticaspermitieran realizar repeticiones y comparaciones estadísticas

entre los diferentes tipos de cáncer y distintas etapas de suentre los diferentes tipos de cáncer y distintas etapas de su

evolución y al constatar que en México difícilmente podríamosevolución y al constatar que en México difícilmente podríamos

obtener las muestras necesarias para el proyecto deobtener las muestras necesarias para el proyecto de

investigación, recordamos la experiencias obtenidas cuandoinvestigación, recordamos la experiencias obtenidas cuando

establecimos el método para la obtención del perfil plásmidicoestablecimos el método para la obtención del perfil plásmidico

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de E. coli y las pruebas de paternidad por afinidad, de repentede E. coli y las pruebas de paternidad por afinidad, de repente

nos pareció que era lógico pensar que si poníamos dosnos pareció que era lógico pensar que si poníamos dos

muestras de DNA iguales , las cadenas se unirían por afinidad,muestras de DNA iguales , las cadenas se unirían por afinidad,

por ejemplo Cáncer de Mama (Cam.), con cáncer de mamapor ejemplo Cáncer de Mama (Cam.), con cáncer de mama

(Cam) y si reuníamos DNA de cáncer Cervico-uterino (Cacu)(Cam) y si reuníamos DNA de cáncer Cervico-uterino (Cacu)

y cáncer de mama (Cam) las cadenas permaneceríany cáncer de mama (Cam) las cadenas permanecerían

separadas, por ser dos tipos de cáncer con origen diferente,separadas, por ser dos tipos de cáncer con origen diferente,

entonces y siguiendo esta misma secuencia lógica, si uníamosentonces y siguiendo esta misma secuencia lógica, si uníamos

el DNA de una persona sana con el DNA de Cáncer de cualquierel DNA de una persona sana con el DNA de Cáncer de cualquier

tipo, las cadenas permanecerán separadas porque no haytipo, las cadenas permanecerán separadas porque no hay

afinidad, pero si el DNA de una persona aparentemente sana,afinidad, pero si el DNA de una persona aparentemente sana,

se une al DNA de cáncer con el que estamos realizando lase une al DNA de cáncer con el que estamos realizando la

prueba, seria evidencia que la enfermedad ha iniciado elprueba, seria evidencia que la enfermedad ha iniciado el

proceso de incubación .proceso de incubación .

Realizamos algunas pruebas con las escasas muestras deRealizamos algunas pruebas con las escasas muestras de

cáncer disponibles, hicimos todas las combinaciones posiblescáncer disponibles, hicimos todas las combinaciones posibles

con ellas y luego combinándolas concon ellas y luego combinándolas con DNA de personas sanas,DNA de personas sanas,

DNA de embarazadas, DNA de enfermos de Alzheimer, DNA deDNA de embarazadas, DNA de enfermos de Alzheimer, DNA de

tuberculosis (BCG), etc, y en todos los casos los resultadostuberculosis (BCG), etc, y en todos los casos los resultados

fueron como lo habíamos teorizado. Para agotar lasfueron como lo habíamos teorizado. Para agotar las

posibilidades de otro tipo de combinaciones, necesitaba deposibilidades de otro tipo de combinaciones, necesitaba de

cualquier forma obtener muchas muestras de DNA del mayorcualquier forma obtener muchas muestras de DNA del mayor

numero de tipos de cáncer, sobre todo los de mayor incidencianumero de tipos de cáncer, sobre todo los de mayor incidencia

y del mayor numero de otros tipos de enfermedades. A todoy del mayor numero de otros tipos de enfermedades. A todo

esto se une la necesidad de establecer control, sobre lasesto se une la necesidad de establecer control, sobre las

condiciones de extracción misma del DNA, tiempo decondiciones de extracción misma del DNA, tiempo de

realización de la prueba y diferencia con el tiempo derealización de la prueba y diferencia con el tiempo de

extracción del DNA, condiciones de conservación de laextracción del DNA, condiciones de conservación de la

muestra (congelada, liofilizada, a temperatura ambiente etc, ),muestra (congelada, liofilizada, a temperatura ambiente etc, ),

lugar de extracción de la muestra de DNA y lugar delugar de extracción de la muestra de DNA y lugar de

realización de la prueba, origen de la muestra de DNA, todorealización de la prueba, origen de la muestra de DNA, todo

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esto para establecer las adaptaciones necesarias a la técnica,esto para establecer las adaptaciones necesarias a la técnica,

observarobservar los resultados en cada caso hasta obtener resultadoslos resultados en cada caso hasta obtener resultados

óptimos. Esto implicaba además la necesidad de disponer deóptimos. Esto implicaba además la necesidad de disponer de

todas las muestras de DNA necesarias para las pruebas,todas las muestras de DNA necesarias para las pruebas,

disponer de un largo tiempo de investigación, de reactivos ydisponer de un largo tiempo de investigación, de reactivos y

equipo e instrumental adicional con el que no contábamos.equipo e instrumental adicional con el que no contábamos.

Por otra parte, no podíamos tampoco contratar ayudantesPor otra parte, no podíamos tampoco contratar ayudantes

porque según la compañía Optogenetic, todos los recursosporque según la compañía Optogenetic, todos los recursos

disponibles estaban enfocados a pagar a los abogados y losdisponibles estaban enfocados a pagar a los abogados y los

altos costos en la gestión de registro de patente en losaltos costos en la gestión de registro de patente en los

Estados Unidos y eso mismo limitaba el compartir el secretoEstados Unidos y eso mismo limitaba el compartir el secreto

de patente, con otras personas ajenas al proyecto.de patente, con otras personas ajenas al proyecto.

Financiamiento y ComercializaciónFinanciamiento y Comercialización

La compañía Optogenetic obtuvo inicialmente recursos para suLa compañía Optogenetic obtuvo inicialmente recursos para su

operación de la venta de acciones principalmente aoperación de la venta de acciones principalmente a

destacados empresarios de Sonora, de Nuevo León y de Sandestacados empresarios de Sonora, de Nuevo León y de San

Diego California, que veían, unos con cierta simpatía losDiego California, que veían, unos con cierta simpatía los

objetivos humanitarios de la investigación, otros porque elobjetivos humanitarios de la investigación, otros porque el

plan de negocios incluía el ingreso de la compañía a la bolsaplan de negocios incluía el ingreso de la compañía a la bolsa

de valores de Nueva York, por otra parte los estudios dede valores de Nueva York, por otra parte los estudios de

mercado realizados por el Dr. Jefrey Níkel (Executive VP) eranmercado realizados por el Dr. Jefrey Níkel (Executive VP) eran

muy optimistas en cuanto a las posibilidades demuy optimistas en cuanto a las posibilidades de

comercialización del descubrimiento, un elemento más quecomercialización del descubrimiento, un elemento más que

ayudó a consolidar la imagen de la compañía eran lasayudó a consolidar la imagen de la compañía eran las

personalidades del Presidente de Optogenetic Inc. Dr. Victorpersonalidades del Presidente de Optogenetic Inc. Dr. Victor

Vurpillat (CEO), Dr. XI Zhao (CTO), John Gorsich (CEO) BrendaVurpillat (CEO), Dr. XI Zhao (CTO), John Gorsich (CEO) Brenda

Fox (CIO), el Dr, Gin Wu como Presidente científico de laFox (CIO), el Dr, Gin Wu como Presidente científico de la

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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Compañía y el (Chairman) Arthur Lipper III como Director deCompañía y el (Chairman) Arthur Lipper III como Director de

las operaciones financieras de la compañía.las operaciones financieras de la compañía.

Arthur Lipper IIIArthur Lipper III (Chairman de British Far East Holding Ltd. (Chairman de British Far East Holding Ltd. YY

de Environmental Technologies Corporation of America ) es unde Environmental Technologies Corporation of America ) es un

destacado financiero , consultor y banquero, autor de variosdestacado financiero , consultor y banquero, autor de varios

libros, conferencista y columnista de varias publicaciones delibros, conferencista y columnista de varias publicaciones de

Estados Unidos, con amplias relaciones en el medio cultural,Estados Unidos, con amplias relaciones en el medio cultural,

educativo y científico, su colaboración en Optogenetic hizoeducativo y científico, su colaboración en Optogenetic hizo

posible la difusión en varias compañías y universidadesposible la difusión en varias compañías y universidades

norteamericanas la tecnología del nuevo método de análisisnorteamericanas la tecnología del nuevo método de análisis

del DNA.del DNA.

Para Arthur Lipper, una de las principales dificultades paraPara Arthur Lipper, una de las principales dificultades para

aceptar y aplicar la tecnología de Optogenetic en Estadosaceptar y aplicar la tecnología de Optogenetic en Estados

Unidos, aparte de ser un descubrimiento muy polémico porUnidos, aparte de ser un descubrimiento muy polémico por

retomar el campo de la visión en el estudio del ADN, camporetomar el campo de la visión en el estudio del ADN, campo

abandonado por los genetistas moleculares, es que elabandonado por los genetistas moleculares, es que el

descubrimiento procede de un país del tercer mundo (México),descubrimiento procede de un país del tercer mundo (México),

fue hecho en una provincia de ese país (Sonora) y lafue hecho en una provincia de ese país (Sonora) y la

investigadora es una mujer mexicana y agrega, “Si ella fuerainvestigadora es una mujer mexicana y agrega, “Si ella fuera

Noruega, inglesa o alemana hace mucho tiempo la atenciónNoruega, inglesa o alemana hace mucho tiempo la atención

del mundo científico estaría puesta en su descubrimiento,del mundo científico estaría puesta en su descubrimiento,

pero no es así, por lo que tenemos que ser doblementepero no es así, por lo que tenemos que ser doblemente

eficaces en la argumentación y comprobación de la ciencia,eficaces en la argumentación y comprobación de la ciencia,

que sustenta este descubrimiento“.que sustenta este descubrimiento“.

El Dr. V. Virpullat, presidente de la compañía OptogeneticEl Dr. V. Virpullat, presidente de la compañía Optogenetic

opinó:opinó: “Hace aproximadamente medio siglo, las ciencias“Hace aproximadamente medio siglo, las ciencias

química y bioquímica modernas empezaron desarrollos dequímica y bioquímica modernas empezaron desarrollos de

importancia. Los estudios del material genético fueron másimportancia. Los estudios del material genético fueron más

intensos y aceleraron descubrimientos genéticos nuevos. Losintensos y aceleraron descubrimientos genéticos nuevos. Los

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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investigadores se dieron cuenta que los genes se formaban deinvestigadores se dieron cuenta que los genes se formaban de

macromoléculas extremadamente largas y delgadas, llamadasmacromoléculas extremadamente largas y delgadas, llamadas

ahora ADN.ahora ADN.

Sin embargo, la visualización de los genes con el microscopioSin embargo, la visualización de los genes con el microscopio

óptico es virtualmente imposible. La investigación modernaóptico es virtualmente imposible. La investigación moderna

abandonó la idea de estudiar el ADN con microscopios ópticos,abandonó la idea de estudiar el ADN con microscopios ópticos,

hasta el descubrimiento de la Doctora Gloria Elena León Paz,hasta el descubrimiento de la Doctora Gloria Elena León Paz,

las investigaciones actuales enfocan la estructura lineal dellas investigaciones actuales enfocan la estructura lineal del

ADN por medio de métodos bioquímicos. Al inicio de laADN por medio de métodos bioquímicos. Al inicio de la

biología molecular moderna se empleó el microscopiobiología molecular moderna se empleó el microscopio

electrónico, para estudiar la estructuraelectrónico, para estudiar la estructura microscópica del ADN.microscópica del ADN.

Hace varios años habían fallado los intentos por ver los genesHace varios años habían fallado los intentos por ver los genes

individuales en las moléculas del ADN.individuales en las moléculas del ADN.

Hay muy pocos investigadores que estudian la estructuraHay muy pocos investigadores que estudian la estructura

topológica del ADN y estos son una minoría, entre lostopológica del ADN y estos son una minoría, entre los

investigadores genéticos. Sin embargo, en la actualidadinvestigadores genéticos. Sin embargo, en la actualidad

sabemos que el ADN funciona no solo mediante la estructurasabemos que el ADN funciona no solo mediante la estructura

lineal de sus genes, sino que se ve afectado por su estructuralineal de sus genes, sino que se ve afectado por su estructura

tridimensional. Debido a la complejidad extrema de sutridimensional. Debido a la complejidad extrema de su

estructura tridimensional y la limitación de la tecnologíaestructura tridimensional y la limitación de la tecnología

actual y además, debido a la técnica obsoleta del microscopioactual y además, debido a la técnica obsoleta del microscopio

óptico utilizando conceptos modernos, a excepción de laóptico utilizando conceptos modernos, a excepción de la

Doctora Gloria Elena León Paz.Doctora Gloria Elena León Paz.

El concepto muy importante de Optogenetic desarrollado porEl concepto muy importante de Optogenetic desarrollado por

la Doctora, en relación a la observación del ADN mediante ella Doctora, en relación a la observación del ADN mediante el

microscopio óptico, fue para establecer una comparación entremicroscopio óptico, fue para establecer una comparación entre

los cambios morfológicos de los agregados del ADN normal ylos cambios morfológicos de los agregados del ADN normal y

los agregados del ADN de pacientes. Esta tecnología no es conlos agregados del ADN de pacientes. Esta tecnología no es con

el propósito de estudiar el ADN normal. En otras palabras lael propósito de estudiar el ADN normal. En otras palabras la

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tecnología de Optogenetic, es una tecnología que enfoca lastecnología de Optogenetic, es una tecnología que enfoca las

aplicaciones médicas y no el estudio genético puro, aunqueaplicaciones médicas y no el estudio genético puro, aunque

podría ser una herramienta útil para el estudio genético en elpodría ser una herramienta útil para el estudio genético en el

futuro.futuro.

La Doctora León Paz encontró que mediante el procedimientoLa Doctora León Paz encontró que mediante el procedimiento

de extracción especial del ADN (o aislamiento), el ADNde extracción especial del ADN (o aislamiento), el ADN

agregado de los glóbulos blancos mostraba patronesagregado de los glóbulos blancos mostraba patrones

diferentes en la sangre normal y anormal (enfermedad,diferentes en la sangre normal y anormal (enfermedad,

incluso embarazo) de los pacientes. Usando esta tecnología,incluso embarazo) de los pacientes. Usando esta tecnología,

podía determinarse el sexo de un feto tan solo una semanapodía determinarse el sexo de un feto tan solo una semana

después de su concepción. La Doctora León, ha estudiadodespués de su concepción. La Doctora León, ha estudiado

unos cuantos cientos de especímenes casi con exactitudunos cuantos cientos de especímenes casi con exactitud

completa (debido a que no se tuvo un informe final despuéscompleta (debido a que no se tuvo un informe final después

del parto, a causa de la reubicación de los pacientes fuera deldel parto, a causa de la reubicación de los pacientes fuera del

área). Así mismo se observaron patrones entre las personasárea). Así mismo se observaron patrones entre las personas

normales y los pacientes con cáncer. Pero debe tenerse ennormales y los pacientes con cáncer. Pero debe tenerse en

mente que los cambios en el patrón de ADN en esta aplicaciónmente que los cambios en el patrón de ADN en esta aplicación

se basan en los cambios del sistema inmune.se basan en los cambios del sistema inmune. No se trata deNo se trata de

cambios en el feto o en las células cancerosas.cambios en el feto o en las células cancerosas.

En nuestra opinión, la idea de la Doctora Gloria Elena LeónEn nuestra opinión, la idea de la Doctora Gloria Elena León

Paz, creará una industria de diagnóstico médico, de granPaz, creará una industria de diagnóstico médico, de gran

importancia”.importancia”.

La investigación del ADN conLa investigación del ADN con OptogeneticOptogenetic

La relación de trabajo con la compañía Optogenetic tuvo unaLa relación de trabajo con la compañía Optogenetic tuvo una

motivación importante, en cuanto que estaba integrada pormotivación importante, en cuanto que estaba integrada por

personas ampliamente relacionadas con el mundo científico,personas ampliamente relacionadas con el mundo científico,

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de Estados Unidos y con promotores financieros de primerde Estados Unidos y con promotores financieros de primer

nivel de ese país, bastó con la promesa de que asumirían losnivel de ese país, bastó con la promesa de que asumirían los

gastos concernientes de la solicitud y registro de patente engastos concernientes de la solicitud y registro de patente en

los Estados Unidos del Nuevo Método de Análisis del ADN ylos Estados Unidos del Nuevo Método de Análisis del ADN y

la promoción a nivel mundial de la tecnología, parala promoción a nivel mundial de la tecnología, para

convencernos de asociarnos con esa compañíaconvencernos de asociarnos con esa compañía

norteamericana. El contrato que nos ofrecieron (Según elnorteamericana. El contrato que nos ofrecieron (Según el

agente que nos representaba), era el más ventajoso que hayaagente que nos representaba), era el más ventajoso que haya

sido propuesto asido propuesto a cualquier inventor en los Estados Unidos,cualquier inventor en los Estados Unidos,

aunque a cambio pidieron firmar un convenio de transferenciaaunque a cambio pidieron firmar un convenio de transferencia

total de la tecnología y de todos los descubrimientos futurostotal de la tecnología y de todos los descubrimientos futuros

que realizáramos en el campo de la genética. La propuestaque realizáramos en el campo de la genética. La propuesta

económica era deslumbrante y por lo tanto increíble (noeconómica era deslumbrante y por lo tanto increíble (no

creíble), sin embargo aceptamos firmar ese contrato porque locreíble), sin embargo aceptamos firmar ese contrato porque lo

que en realidad nos interesaba era poder continuar laque en realidad nos interesaba era poder continuar la

investigación y consolidar los resultados, difundirla yinvestigación y consolidar los resultados, difundirla y

promocionarla en todos los laboratorios y centros depromocionarla en todos los laboratorios y centros de

investigación del mundo, la posibilidad de que cientos o quizáinvestigación del mundo, la posibilidad de que cientos o quizá

miles de investigadores aplicaran el método en temasmiles de investigadores aplicaran el método en temas

específicos de la salud y encontraran formas de diagnostico yespecíficos de la salud y encontraran formas de diagnostico y

vacunas genéticas para cada enfermedad, desborda lavacunas genéticas para cada enfermedad, desborda la

imaginación.imaginación.

Todos los que nos dedicamos a la investigación científicaTodos los que nos dedicamos a la investigación científica

sabemos que los procesos de desarrollo de la ciencia rebasansabemos que los procesos de desarrollo de la ciencia rebasan

el corto lapso de vida productiva de un investigador y queel corto lapso de vida productiva de un investigador y que

únicamente cuando el conocimiento es compartido y se aplicaúnicamente cuando el conocimiento es compartido y se aplica

el ingenio y la creatividad de muchos investigadores, esel ingenio y la creatividad de muchos investigadores, es

cuando una generación puede ver y disfrutar de los resultadoscuando una generación puede ver y disfrutar de los resultados

de los descubrimientos científicos y cuando estos son en elde los descubrimientos científicos y cuando estos son en el

campo de la salud, difícilmente puedecampo de la salud, difícilmente puede ponerse precio a unponerse precio a un

valor que pertenece por derecho propio a toda la humanidad.valor que pertenece por derecho propio a toda la humanidad.

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Sí bien es cierto que un descubrimiento científico aunqueSí bien es cierto que un descubrimiento científico aunque

tenga un autor es producto de la inquietud, el esfuerzo y eltenga un autor es producto de la inquietud, el esfuerzo y el

conocimiento generado y trasmitido de generación enconocimiento generado y trasmitido de generación en

generación por miles de seres humanos, cuando se producegeneración por miles de seres humanos, cuando se produce

una “una “Revolución CientíficaRevolución Científica” como a la que se refiere” como a la que se refiere

Thomas Kuhn, se produce también un salto histórico, en elThomas Kuhn, se produce también un salto histórico, en el

cual un descubrimiento crea un nuevo eslabón en la cadenacual un descubrimiento crea un nuevo eslabón en la cadena

del desarrollo y transformación de la realidad, al igual de lasdel desarrollo y transformación de la realidad, al igual de las

sociedades humanas, que se transforman y renovan en lasociedades humanas, que se transforman y renovan en la

clausura de sus viejas instituciones y significaciones, esto esclausura de sus viejas instituciones y significaciones, esto es

de cierta manera, similar al fenómeno de replicación de unade cierta manera, similar al fenómeno de replicación de una

célula, cuando la cadena se abre para encontrar sus nuevoscélula, cuando la cadena se abre para encontrar sus nuevos

pares y crear una nueva unidad de vida, así es el conocimientopares y crear una nueva unidad de vida, así es el conocimiento

científico y difícilmente puedecientífico y difícilmente puede tener un equivalente en eltener un equivalente en el

mundo del dinero.mundo del dinero.

Nuestro trabajo tuvo con Optogenetic, una expectativa nuncaNuestro trabajo tuvo con Optogenetic, una expectativa nunca

imaginada, después de muchos años de investigación solitariaimaginada, después de muchos años de investigación solitaria

en la que en muchas ocasiones se vio interrumpida por faltaen la que en muchas ocasiones se vio interrumpida por falta

de reactivos o laboratorio en el cual realizar nuestro trabajo yde reactivos o laboratorio en el cual realizar nuestro trabajo y

de una gran cantidad de cartas, dirigidas a presidentes de lade una gran cantidad de cartas, dirigidas a presidentes de la

república, diputados y senadores de varios sexenios, rectoresrepública, diputados y senadores de varios sexenios, rectores

de universidades y gobernadores tuvo como respuesta lade universidades y gobernadores tuvo como respuesta la

indiferencia, a excepción de un gobernador (que nos apoyóindiferencia, a excepción de un gobernador (que nos apoyó

para realizar el pago de derechos de la patente en México) ypara realizar el pago de derechos de la patente en México) y

de un Rector de la UNAM que amablemente contestó nuestrade un Rector de la UNAM que amablemente contestó nuestra

carta.carta.

Siempre deseamos que el derecho de explotación de laSiempre deseamos que el derecho de explotación de la

patente perteneciera a nuestro país, pero el hecho de nopatente perteneciera a nuestro país, pero el hecho de no

pertenecer al Sistema Nacional de Investigadores (SNI) y depertenecer al Sistema Nacional de Investigadores (SNI) y de

no pertenecer a alguna de las instituciones oficiales deno pertenecer a alguna de las instituciones oficiales de

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investigación, limitó nuestras posibilidades de publicar y deinvestigación, limitó nuestras posibilidades de publicar y de

recibir financiamiento de CONACYT, así que cuando la empresarecibir financiamiento de CONACYT, así que cuando la empresa

norteamericana, nos propuso el año 2004, realizar unanorteamericana, nos propuso el año 2004, realizar una

validación de la metodología, en el estado de Arizona de losvalidación de la metodología, en el estado de Arizona de los

Estados Unidos, consistente en pruebas ciegas de muestrasEstados Unidos, consistente en pruebas ciegas de muestras

de ADN, que serian extraídas y congeladas en el Arrowheadde ADN, que serian extraídas y congeladas en el Arrowhead

Regional Medical Center, en Colto California yRegional Medical Center, en Colto California y

posteriormente empacadas y enviadas por avión y víaposteriormente empacadas y enviadas por avión y vía

terrestre al laboratorio instalado en el Holy Cross Hospital enterrestre al laboratorio instalado en el Holy Cross Hospital en

Nogales Arizona, cambiando por completo el protocolo con elNogales Arizona, cambiando por completo el protocolo con el

cual habíamos obtenido buenos resultados en México, procesocual habíamos obtenido buenos resultados en México, proceso

en el cual aplicando personalmente nuestro método y en unen el cual aplicando personalmente nuestro método y en un

tiempo preciso de realización, extraíamos el ADN, lotiempo preciso de realización, extraíamos el ADN, lo

congelábamos a determinada temperatura y aplicábamos elcongelábamos a determinada temperatura y aplicábamos el

método que hace posible verlo en el microscopio óptico, sinmétodo que hace posible verlo en el microscopio óptico, sin

embargo aceptamos porque no teníamos otra alternativa, anteembargo aceptamos porque no teníamos otra alternativa, ante

el argumento esgrimido por el consejo científico de lael argumento esgrimido por el consejo científico de la

compañía, de que el ADN no se altera ante variables decompañía, de que el ADN no se altera ante variables de

temperatura, tiempo de conservación o traslados a grandestemperatura, tiempo de conservación o traslados a grandes

distancias. Con todo y nuestras dudas, durante 10 mesesdistancias. Con todo y nuestras dudas, durante 10 meses

realizamos pruebas ciegas de cáncer Cervico-uterino, cáncerrealizamos pruebas ciegas de cáncer Cervico-uterino, cáncer

de mama y de mujeres embarazadas.de mama y de mujeres embarazadas.

Teníamos que acertar y decir que muestras de ADN,Teníamos que acertar y decir que muestras de ADN,

pertenecían a mujeres sanas o afectadas por un tipo de cáncerpertenecían a mujeres sanas o afectadas por un tipo de cáncer

determinado, en el caso de lo embarazos se trataba dedeterminado, en el caso de lo embarazos se trataba de

predecir con exactitud el sexo del bebé, sin mayor informaciónpredecir con exactitud el sexo del bebé, sin mayor información

que el que proporcionara la muestra marcada con una clave.que el que proporcionara la muestra marcada con una clave.

A pesar de esas circunstancias (En calificación del 10 al 100 )A pesar de esas circunstancias (En calificación del 10 al 100 )

los resultados alcanzados en aciertos fueron 70 que la hacelos resultados alcanzados en aciertos fueron 70 que la hace

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una tecnología viable, pero sin alcanzar el mínimo deseable deuna tecnología viable, pero sin alcanzar el mínimo deseable de

85, que la convierte en comercializable.85, que la convierte en comercializable.

El Doctor Raymond Cestero, uno de los doctores que participó El Doctor Raymond Cestero, uno de los doctores que participó

en la prueba, marcando las claves de cada muestra y en laen la prueba, marcando las claves de cada muestra y en la

extracción del ADN en California, opinó que en Estados Unidosextracción del ADN en California, opinó que en Estados Unidos

regularmente la validación de un medicamento, oregularmente la validación de un medicamento, o

descubrimiento generalmente pasa por varios intentos dedescubrimiento generalmente pasa por varios intentos de

validación, antes de obtener su aprobación y que en nuestrovalidación, antes de obtener su aprobación y que en nuestro

caso se trataba de volver a la mesa de diseño, revisar loscaso se trataba de volver a la mesa de diseño, revisar los

factores que impidieron el total de aciertos, invertir un pocofactores que impidieron el total de aciertos, invertir un poco

mas en investigación y volver a intentarlo hasta lograr elmas en investigación y volver a intentarlo hasta lograr el

objetivo.objetivo.

Resultó obvio que la forma de extracción, el congelamiento aResultó obvio que la forma de extracción, el congelamiento a

una temperatura distinta a la empleada en nuestro método yuna temperatura distinta a la empleada en nuestro método y

el desplazamiento a grandes distancias, afectó seriamente losel desplazamiento a grandes distancias, afectó seriamente los

resultados, posteriormente nos enteramos que muchas de lasresultados, posteriormente nos enteramos que muchas de las

muestras estuvieron varios años guardadas en congelación, almuestras estuvieron varios años guardadas en congelación, al

contrario de las pruebas realizadas en Hermosillo en las quecontrario de las pruebas realizadas en Hermosillo en las que

siempre trabajamos con muestras nuevas y realizando todo elsiempre trabajamos con muestras nuevas y realizando todo el

proceso en el mismo lugar de manera continua.proceso en el mismo lugar de manera continua.

Sin embargo el trabajo realizado en Arizona, tuvo unaSin embargo el trabajo realizado en Arizona, tuvo una

aportación importante en el largo proceso de investigación,aportación importante en el largo proceso de investigación,

logramos elaborar una valiosa tabla de concentraciones delogramos elaborar una valiosa tabla de concentraciones de

ADN para lograr en menor tiempo, determinados procesos enADN para lograr en menor tiempo, determinados procesos en

el análisis del DNA, esta tabla será en el futuro un elementoel análisis del DNA, esta tabla será en el futuro un elemento

muy importante para los investigadores que no tendrán quemuy importante para los investigadores que no tendrán que

hacer determinados cálculos para obtener la concentraciónhacer determinados cálculos para obtener la concentración

adecuada de ADN, esto les permitirá poder estudiar un mayoradecuada de ADN, esto les permitirá poder estudiar un mayor

número de muestras en una jornada o servirá de base para lanúmero de muestras en una jornada o servirá de base para la

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

9494

automatización del método, que seria uno de los pasosautomatización del método, que seria uno de los pasos

siguientes por hacer. siguientes por hacer.

Desarrollar un nuevo proyecto de investigación en base a laDesarrollar un nuevo proyecto de investigación en base a la

experiencia vivida en Arizona seria el camino a seguir si seexperiencia vivida en Arizona seria el camino a seguir si se

quiere aprovechar la información positiva y negativa obtenida,quiere aprovechar la información positiva y negativa obtenida,

el estudiar las múltiples variables de temperatura a la queel estudiar las múltiples variables de temperatura a la que

puede estar expuesta una muestra de ADN, el tiempo depuede estar expuesta una muestra de ADN, el tiempo de

antigüedad de la extracción del mismo, si fue empacado enantigüedad de la extracción del mismo, si fue empacado en

forma adecuada y recorrió determinadas distancias por víaforma adecuada y recorrió determinadas distancias por vía

aérea o terrestre y poder establecer los ajustes necesarios enaérea o terrestre y poder establecer los ajustes necesarios en

el método de análisis para obtener el control sobre losel método de análisis para obtener el control sobre los

resultados, y responder las preguntas siguientes : ¿Qué tantoresultados, y responder las preguntas siguientes : ¿Qué tanto

cambia el ADNcambia el ADN bajo determinadas condiciones como lasbajo determinadas condiciones como las

mencionadas?, ¿Qué tanto varia la imagen de una muestra demencionadas?, ¿Qué tanto varia la imagen de una muestra de

ADN en condiciones variables?. Es indudable que así comoADN en condiciones variables?. Es indudable que así como

reacciona de inmediato el ADN ante cualquier agente o factorreacciona de inmediato el ADN ante cualquier agente o factor

que perturbe el sistema inmunológico, así mismo es sensible aque perturbe el sistema inmunológico, así mismo es sensible a

cambios a los que es sometido.cambios a los que es sometido.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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La Patente en Estados UnidosLa Patente en Estados Unidos

Entre el largo período de la búsqueda de comercialización yEntre el largo período de la búsqueda de comercialización y

alianzas estratégicas de Optogenetic con grandes compañíasalianzas estratégicas de Optogenetic con grandes compañías

de biotecnología en Estados Unidos, hubo algo afortunado, lade biotecnología en Estados Unidos, hubo algo afortunado, la

solicitud de patente realizada el 17 de enero del 2001 ensolicitud de patente realizada el 17 de enero del 2001 en

Estados Unidos, fue aprobada y otorgada el 16 de agosto deEstados Unidos, fue aprobada y otorgada el 16 de agosto de

2005 con la modalidad de expediente abierto, es decir que de2005 con la modalidad de expediente abierto, es decir que de

presentarse un nuevo descubrimiento se anexa al ya aprobadopresentarse un nuevo descubrimiento se anexa al ya aprobado

sin mayor trámite.sin mayor trámite.

El titulo de la patenteEl titulo de la patente aprobada es: “METHOD FOR aprobada es: “METHOD FOR

PROCESSING BLOOD SAMPLES IN ORDER TO PRODUCE DNAPROCESSING BLOOD SAMPLES IN ORDER TO PRODUCE DNA

COMPLEX PATTERNS FOR DIAGNOSTIC APPLICATIONS”.COMPLEX PATTERNS FOR DIAGNOSTIC APPLICATIONS”.

PATENT No. US 6,929,908 B1PATENT No. US 6,929,908 B1

INVENTORS: Gloria Elena León Paz de RodríguezINVENTORS: Gloria Elena León Paz de Rodríguez

And Gin Wu, San José Ca. And Gin Wu, San José Ca. (US).(US).

Una importante compañía farmacéutica de Nueva YorkUna importante compañía farmacéutica de Nueva York

consultada, calculó un precio de salida de la patente alconsultada, calculó un precio de salida de la patente al

mercado entre un millón a dos millones de dólares.mercado entre un millón a dos millones de dólares.

Después del trabajo realizado en Arizona, la compañíaDespués del trabajo realizado en Arizona, la compañía

Optogenetic nos comunicó que estaba descapitalizada y que elOptogenetic nos comunicó que estaba descapitalizada y que el

consejo de administración estaba estudiando vender laconsejo de administración estaba estudiando vender la

patente para compensar a los inversionistas, ignoramos quepatente para compensar a los inversionistas, ignoramos que

decisión tomaron, desde el año 2004 dejaron de pagarnos ladecisión tomaron, desde el año 2004 dejaron de pagarnos la

mensualidad de tres mil dólares mensuales que recibíamos,mensualidad de tres mil dólares mensuales que recibíamos,

(tres veces menor a lo convenido en el contrato de(tres veces menor a lo convenido en el contrato de

transferencia de tecnología). Las anualidades pactadastransferencia de tecnología). Las anualidades pactadas

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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tampoco fueron cubiertas y el único pago realizado fue detampoco fueron cubiertas y el único pago realizado fue de

$50.000 dólares por la firma del contrato.$50.000 dólares por la firma del contrato.

A fines del año 2007 recibimos comunicación de la compañíaA fines del año 2007 recibimos comunicación de la compañía

Optogenetic de que el Doctor Mark Talamini especialista enOptogenetic de que el Doctor Mark Talamini especialista en

cáncer de la Universidad de San Diego California, estabacáncer de la Universidad de San Diego California, estaba

interesado para que en los laboratorios de esa institución seinteresado para que en los laboratorios de esa institución se

realizara un nuevo protocolo, para un segundo intento derealizara un nuevo protocolo, para un segundo intento de

validación de la técnica, con algunos tipos de cáncer que sonvalidación de la técnica, con algunos tipos de cáncer que son

su especialidad como oncólogo, y que se estaba gestionandosu especialidad como oncólogo, y que se estaba gestionando

con la institución, los aspectos referentes a nuestra estanciacon la institución, los aspectos referentes a nuestra estancia

en esa Universidad.en esa Universidad.

Pero después se hizo el silencio de nuevo.Pero después se hizo el silencio de nuevo.

El equipo de laboratorio con el que realizamos las pruebasEl equipo de laboratorio con el que realizamos las pruebas

ciegas en Arizona, quedó depositado en una bodega de eseciegas en Arizona, quedó depositado en una bodega de ese

estado, por lo que no hemos podido regresar a trabajar alestado, por lo que no hemos podido regresar a trabajar al

laboratorio y continuar con la investigación del DNA,laboratorio y continuar con la investigación del DNA,

temporalmente trabajamos como docentes en unatemporalmente trabajamos como docentes en una

Universidad local, en el lapso que hicimos una solicitud ante laUniversidad local, en el lapso que hicimos una solicitud ante la

Secretaria de Economía del Gobierno Federal para laSecretaria de Economía del Gobierno Federal para la

formación de una empresa de biotecnología y nos remitieron aformación de una empresa de biotecnología y nos remitieron a

la incubadora de empresas Tx- Tec en la Universidad dela incubadora de empresas Tx- Tec en la Universidad de

Sonora, después de una serie de requisitos, consultas ySonora, después de una serie de requisitos, consultas y

entrevistas nuestro proyecto fue considerado viable yentrevistas nuestro proyecto fue considerado viable y

recomendable para invertir en él, pero sabemos que hasta elrecomendable para invertir en él, pero sabemos que hasta el

momento en México ninguno de los grandes empresariosmomento en México ninguno de los grandes empresarios

mexicanos (exceptuando a Ignacio Romo de Monterrey y Juanmexicanos (exceptuando a Ignacio Romo de Monterrey y Juan

Enríquez Cabot, en Boston), se han atrevido a invertir enEnríquez Cabot, en Boston), se han atrevido a invertir en

biotecnología . En palabras del Doctor René Druker Colín,biotecnología . En palabras del Doctor René Druker Colín,

Maestro Emérito y ex coordinador de investigación en laMaestro Emérito y ex coordinador de investigación en la

UNAM, los investigadores mexicanos no reciben de CONACYTUNAM, los investigadores mexicanos no reciben de CONACYT

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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el apoyo económico adecuado para el desarrollo de grandesel apoyo económico adecuado para el desarrollo de grandes

proyectos de investigación que contribuyan al desarrollo delproyectos de investigación que contribuyan al desarrollo del

país . Lo poco que se invierte esta destinado a salarios y si sepaís . Lo poco que se invierte esta destinado a salarios y si se

apoyan proyectos de investigación están condicionados aapoyan proyectos de investigación están condicionados a

resultados rápidos y publicables como artículos científicos,resultados rápidos y publicables como artículos científicos,

adecuados para obtener estímulos académicos en laadecuados para obtener estímulos académicos en la

instituciones de Educación Superior. instituciones de Educación Superior.

Es de conocimiento público que los países miembros de laEs de conocimiento público que los países miembros de la

Organización para la Cooperación y el Desarrollo EconómicoOrganización para la Cooperación y el Desarrollo Económico

OCDE, son dueños del 97% de la patentes y lasOCDE, son dueños del 97% de la patentes y las

corporaciones globales poseen 90% de toda la tecnología y loscorporaciones globales poseen 90% de toda la tecnología y los

productos patentados. Nuestro trabajo de investigación delproductos patentados. Nuestro trabajo de investigación del

DNA, desarrollado totalmente en México y patentado en losDNA, desarrollado totalmente en México y patentado en los

Estados Unidos y en el PCT esta dentro de esa categoría, por laEstados Unidos y en el PCT esta dentro de esa categoría, por la

indiferencia y la falta de apoyo al trabajo que podemosindiferencia y la falta de apoyo al trabajo que podemos

desarrollar los investigadores mexicanos.desarrollar los investigadores mexicanos.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

9898

AQUELLOS QUE PIENSAN QUE LAAQUELLOS QUE PIENSAN QUE LA TIERRA ES PLANATIERRA ES PLANA

DEBEN QUEDARSE EN LA ORILLADEBEN QUEDARSE EN LA ORILLA PERO NO DISUADIRPERO NO DISUADIR

A OTROS DE NAVEGAR.A OTROS DE NAVEGAR.Arthur Lipper IIIArthur Lipper III

A lo largo de la historia del conocimiento humano y delA lo largo de la historia del conocimiento humano y del

desarrollo de la ciencia, todas aquellas personas que handesarrollo de la ciencia, todas aquellas personas que han

dedicado sus esfuerzos a buscar respuestas sobre ladedicado sus esfuerzos a buscar respuestas sobre la

naturaleza y el mundo físico y social que percibimos, han sidonaturaleza y el mundo físico y social que percibimos, han sido

confrontados y poco comprendidos por personas que porconfrontados y poco comprendidos por personas que por

temor a lo desconocido prefieren evitar que se produzcan lostemor a lo desconocido prefieren evitar que se produzcan los

cambios, sin embargo, la estructura misma de todo el universocambios, sin embargo, la estructura misma de todo el universo

conocido y todo lo que este contiene, esta en un procesoconocido y todo lo que este contiene, esta en un proceso

permanente de transformación y cambio, la misma naturalezapermanente de transformación y cambio, la misma naturaleza

del ser humano a partir del momento en el que se unieron losdel ser humano a partir del momento en el que se unieron los

genes que le dieron vida, esta en un proceso de cambiogenes que le dieron vida, esta en un proceso de cambio

permanente, y así como un organismo que esta desnutrido sepermanente, y así como un organismo que esta desnutrido se

ve afectado en su desarrollo pleno , así , de la misma manera,ve afectado en su desarrollo pleno , así , de la misma manera,

las sociedades que permanecen al margen del desarrollolas sociedades que permanecen al margen del desarrollo

científico y tecnológico, son sociedades desnutridas decientífico y tecnológico, son sociedades desnutridas de

conocimientos y de los cambios que estos generan.conocimientos y de los cambios que estos generan.

Un investigador científico, es una persona que ha logradoUn investigador científico, es una persona que ha logrado

preservar para sí la curiosidad y el interés primigenio por elpreservar para sí la curiosidad y el interés primigenio por el

mundo que lo rodea y nada puede calmar su inquietud, masmundo que lo rodea y nada puede calmar su inquietud, mas

que encontrar las respuestas a los muchos enigmas que aúnque encontrar las respuestas a los muchos enigmas que aún

guarda la naturaleza pues sabe que más allá de la naturalezaguarda la naturaleza pues sabe que más allá de la naturaleza

esta la propia naturaleza y lo que ignoramos de ella.esta la propia naturaleza y lo que ignoramos de ella.

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La decisión de investigar territorios inexplorados llevo a losLa decisión de investigar territorios inexplorados llevo a los

navegantes a descubrir nuevos mundos, los territoriosnavegantes a descubrir nuevos mundos, los territorios

estaban allí desde siempre, pero ellos y sus sociedades no losestaban allí desde siempre, pero ellos y sus sociedades no los

conocían, fue necesario convencer a los escépticos y vencer elconocían, fue necesario convencer a los escépticos y vencer el

temor y las dificultades para llegar a la otra orilla.temor y las dificultades para llegar a la otra orilla.

Las mentes cerradas siempre han existido, en países pobres yLas mentes cerradas siempre han existido, en países pobres y

en países ricos y son esas mentes las que frenan el desarrolloen países ricos y son esas mentes las que frenan el desarrollo

y obstaculizan la investigación y frustran la curiosidad infantily obstaculizan la investigación y frustran la curiosidad infantil

por el conocimiento con programas educativos que imponen lapor el conocimiento con programas educativos que imponen la

disciplina y la obediencia como factores para lograr ladisciplina y la obediencia como factores para lograr la

eficiencia productiva, sin importar el aprender, usar laeficiencia productiva, sin importar el aprender, usar la

imaginación y aportar algo nuevo.imaginación y aportar algo nuevo.

La investigación científica como profesión y motivo de vida esLa investigación científica como profesión y motivo de vida es

una experiencia excepcional que nos da acceso de manerauna experiencia excepcional que nos da acceso de manera

privilegiada al conocimiento y privilegiada al conocimiento y realizar investigación delrealizar investigación del

DNA es como abrir una puerta al futuro DNA es como abrir una puerta al futuro y vislumbrary vislumbrar

que todo esfuerzo que realicemos valdrá la pena a pesar deque todo esfuerzo que realicemos valdrá la pena a pesar de

cualquier dificultad que hayamos encontrado en el camino.cualquier dificultad que hayamos encontrado en el camino.

El trabajo de investigación que hemos realizado a lo largo deEl trabajo de investigación que hemos realizado a lo largo de

varios años y que ahora hemos presentado tiene la intenciónvarios años y que ahora hemos presentado tiene la intención

de que todos los que tengan acceso a él y lo lean compartande que todos los que tengan acceso a él y lo lean compartan

la emoción de poder ver por vez primera las imágenes del DNAla emoción de poder ver por vez primera las imágenes del DNA

y valorar y agradecer el esfuerzo de mucha gente quey valorar y agradecer el esfuerzo de mucha gente que

generosamente ha colaborado para que esto haya sidogenerosamente ha colaborado para que esto haya sido

posible. Familiares, amigos, enfermeras, químicos biólogos,posible. Familiares, amigos, enfermeras, químicos biólogos,

médicos, señoras embarazadas, enfermos y personas sanas,médicos, señoras embarazadas, enfermos y personas sanas,

empresarios mexicanos y norteamericanos, periodistas,empresarios mexicanos y norteamericanos, periodistas,

maestros y jóvenes estudiantes que nos han comunicado susmaestros y jóvenes estudiantes que nos han comunicado sus

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deseos de ser investigadores después de escuchar nuestrasdeseos de ser investigadores después de escuchar nuestras

pláticas.pláticas.

Del DNA hemos aprendido que el equilibrio de susDel DNA hemos aprendido que el equilibrio de sus

componentes, en sus múltiples posibilidades de combinación,componentes, en sus múltiples posibilidades de combinación,

es lo que define su perfección, cada DNA de cada ser vivo eses lo que define su perfección, cada DNA de cada ser vivo es

igual a otros DNA, pero también es diferente. comparte genesigual a otros DNA, pero también es diferente. comparte genes

con otros individuos, pero posee otros que le confieren sucon otros individuos, pero posee otros que le confieren su

singularidad. Es como la historia de la cultura de lasingularidad. Es como la historia de la cultura de la

humanidad, de la que bien sabemos todos que su riqueza y suhumanidad, de la que bien sabemos todos que su riqueza y su

universalidad radica en su diversidad. La aportación de cadauniversalidad radica en su diversidad. La aportación de cada

persona, de cada cultura para alcanzar el progreso ypersona, de cada cultura para alcanzar el progreso y

desarrollo, sin desigualdades sociales es lo que puede hacerdesarrollo, sin desigualdades sociales es lo que puede hacer

posible que el conocimiento científico pueda encontrarposible que el conocimiento científico pueda encontrar

condiciones adecuadas, para dar y proporcionar las respuestascondiciones adecuadas, para dar y proporcionar las respuestas

y soluciones a las necesidades de todos los seres humanos. y soluciones a las necesidades de todos los seres humanos.

Nuestro deseo es continuar investigando, por ahora noNuestro deseo es continuar investigando, por ahora no

tenemos laboratorio, ni patrocinadores, ni sueldo, ni recursos,tenemos laboratorio, ni patrocinadores, ni sueldo, ni recursos,

pero intentaremos seguir investigando, tenemos de capitalpero intentaremos seguir investigando, tenemos de capital

para empezar de nuevo, la autoría de 4 patentes que nos hanpara empezar de nuevo, la autoría de 4 patentes que nos han

aportado la mayor riqueza a la que puede aspirar un seraportado la mayor riqueza a la que puede aspirar un ser

humano, que es el conocimiento mismo.humano, que es el conocimiento mismo.

FINFIN

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Posdata Iconográfica Posdata Iconográfica

Mostraremos a continuación unas fotografías del DNA, de unaMostraremos a continuación unas fotografías del DNA, de una

familia que acudió al Laboratorio por iniciativa de la abuelafamilia que acudió al Laboratorio por iniciativa de la abuela

Ramona, que al enterarse del estudio que estaba realizando,Ramona, que al enterarse del estudio que estaba realizando,

convocó con todo entusiasmo a 3 de sus nietas a sumarse aconvocó con todo entusiasmo a 3 de sus nietas a sumarse a

nuestro esfuerzo y cooperar en el conocimiento del DNA.nuestro esfuerzo y cooperar en el conocimiento del DNA.

Fig.- 56Fig.- 56

En la figura 56 se presenta la fotografía del DNA, de la abuela,En la figura 56 se presenta la fotografía del DNA, de la abuela,

la señora Ramona de 83 años. Podemos ver un DNA difícil dela señora Ramona de 83 años. Podemos ver un DNA difícil de

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compactar, aunque ella esta saludable y muy emocionada decompactar, aunque ella esta saludable y muy emocionada de

poder participar en el estudio. Para nosotros todos estospoder participar en el estudio. Para nosotros todos estos

gestos de solidaridad es uno de los factores más importantesgestos de solidaridad es uno de los factores más importantes

para mantenernos cautivos, dentro de este proyecto.para mantenernos cautivos, dentro de este proyecto.

Las figuras 57, 58 y 59, corresponden a 3 nietas de la señoraLas figuras 57, 58 y 59, corresponden a 3 nietas de la señora

Ramona, ellasRamona, ellas son primas entre si.son primas entre si.

Fig.- 57Fig.- 57

En la fig 57 vemos el DNA de Clara, una estudiante de artesEn la fig 57 vemos el DNA de Clara, una estudiante de artes

plásticas en la Universidad de Sonora , ella fue la que le contóplásticas en la Universidad de Sonora , ella fue la que le contó

a su abuela Ramona lo que su maestro , mi esposo, les platicóa su abuela Ramona lo que su maestro , mi esposo, les platicó

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acerca del proyecto del DNA. Clara tiene 35 años y su DNA seacerca del proyecto del DNA. Clara tiene 35 años y su DNA se

ve normal y bien compactado.ve normal y bien compactado.

Fig.- 58Fig.- 58

En esta fotografía figura-58, vemos el DNA de Bricia, esEn esta fotografía figura-58, vemos el DNA de Bricia, es

también nieta de la señora Ramona. Ella tiene lupustambién nieta de la señora Ramona. Ella tiene lupus

eritematoso y su DNA casi no lo podíamos ver de tan delgadoeritematoso y su DNA casi no lo podíamos ver de tan delgado

que estaba, por lo que decidimos agregar taninos (polímeros )que estaba, por lo que decidimos agregar taninos (polímeros )

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al buffer de extracción de DNA y como se observa, el DNA deal buffer de extracción de DNA y como se observa, el DNA de

Bricia se reveló y se puede estudiar la cadena con todaBricia se reveló y se puede estudiar la cadena con toda

comodidad. Creemos que el uso de taninos, deberá sercomodidad. Creemos que el uso de taninos, deberá ser

esencial en las aplicaciones de esta tecnología V22.esencial en las aplicaciones de esta tecnología V22.

Fig.- 59Fig.- 59

La fig.- 59 nos presenta el DNA de Carolina, la otra nieta de laLa fig.- 59 nos presenta el DNA de Carolina, la otra nieta de la

señora Ramona , ella tiene 20 años y esta saludable. De ciertaseñora Ramona , ella tiene 20 años y esta saludable. De cierta

manera los DNA de Carolina y Clara se parecen entre si,manera los DNA de Carolina y Clara se parecen entre si,

probablemente sean del mismo tipo sanguíneo o por serprobablemente sean del mismo tipo sanguíneo o por ser

primas seguramente tienen genes en común.primas seguramente tienen genes en común.

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Otras fotografías de DNA que se tomaron estudiando laOtras fotografías de DNA que se tomaron estudiando la

compactación del DNA, se presentan a continuación:compactación del DNA, se presentan a continuación:

MARTHA C DNA. EXTENDIDOMARTHA C DNA. EXTENDIDO

FIG.-60FIG.-60

En la fig 60 vemos el DNA extendido de Martha Cecilia, unaEn la fig 60 vemos el DNA extendido de Martha Cecilia, una

joven voluntaria y en la fig.- 61 el mismo DNA, solo quejoven voluntaria y en la fig.- 61 el mismo DNA, solo que

compactado.compactado.

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FIG.- 61 DNA COMPACTADOFIG.- 61 DNA COMPACTADO

EEn la fig.- 62 se nos presenta el ADN extendido de Mirna, unan la fig.- 62 se nos presenta el ADN extendido de Mirna, una

joven voluntariajoven voluntaria

FIG 62 DNA EXTENDIDOFIG 62 DNA EXTENDIDO

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FIG.- 63 DNA COMPACTADOFIG.- 63 DNA COMPACTADO

EEl estar estudiando el DNA, nos ha ofrecido sorpresa trasl estar estudiando el DNA, nos ha ofrecido sorpresa tras

sorpresa, Mirna es gemela monocigoto, su DNA extendido losorpresa, Mirna es gemela monocigoto, su DNA extendido lo

vemos muy grande, figura 62, comparado con el de Marthavemos muy grande, figura 62, comparado con el de Martha

Cecilia, figura 60. Al compactar el DNA de Mirna, se observanCecilia, figura 60. Al compactar el DNA de Mirna, se observan

2 “ovillos” figura 63, en lugar de uno solo como el de Martha2 “ovillos” figura 63, en lugar de uno solo como el de Martha

Cecilia, figura 61. Así que estamos seguros, que cuandoCecilia, figura 61. Así que estamos seguros, que cuando

aprendamos el idioma de imágenes del DNA, con solo verloaprendamos el idioma de imágenes del DNA, con solo verlo

directo al microscopio o estudiando su fotografía,directo al microscopio o estudiando su fotografía,

inmediatamente conoceremos el origen de ese DNA y todasinmediatamente conoceremos el origen de ese DNA y todas

sus características. sus características.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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Ya por ultimo les ofrecemos una prueba de compactación deYa por ultimo les ofrecemos una prueba de compactación de

DNA de un señor de 56 años:DNA de un señor de 56 años:

Fig.- 64 DNA EXTENDIDOFig.- 64 DNA EXTENDIDO

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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FIG.-65 DNA COMPACTADOFIG.-65 DNA COMPACTADO

En la figura 65, se observa una compactación incompleta, nosEn la figura 65, se observa una compactación incompleta, nos

aventuramos a decir que el DNA está perdiendo ya suaventuramos a decir que el DNA está perdiendo ya su

capacidad de compactarse, son deducciones que vienen acapacidad de compactarse, son deducciones que vienen a

nuestra mente, cuando estamos estudiando lasnuestra mente, cuando estamos estudiando las imágenes delimágenes del

DNA.DNA.

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ANEXO # 2ANEXO # 2

VISION22VISION22AGRADECIMIENTOS AGRADECIMIENTOS

A MI AMADO ESPOSO ENRIQUE, POR DARNOS TANTA FELICIDAD AA MI AMADO ESPOSO ENRIQUE, POR DARNOS TANTA FELICIDAD A MI Y A NUESTRAS HIJAS.MI Y A NUESTRAS HIJAS.A MIS ADORADAS HIJAS ERICKA Y SU ESPOSO RAMÓN Y AA MIS ADORADAS HIJAS ERICKA Y SU ESPOSO RAMÓN Y A NUESTROS NIETOS FELIPE, ALEJANDRO Y MARCOS, A MI ADORADANUESTROS NIETOS FELIPE, ALEJANDRO Y MARCOS, A MI ADORADA CRISTY Y SU ESPOSO ROBERTO Y A SU DESCENDENCIA POR VENIR.CRISTY Y SU ESPOSO ROBERTO Y A SU DESCENDENCIA POR VENIR.A MIS AMADOS PADRES JUAN Y CLOTILDE, POR LA FELIZ INFANCIAA MIS AMADOS PADRES JUAN Y CLOTILDE, POR LA FELIZ INFANCIA QUE NOS DIERON.QUE NOS DIERON.A MIS QUERIDOS HERMANOS Y HERMANAS: FAUSTO, YOLANDA,A MIS QUERIDOS HERMANOS Y HERMANAS: FAUSTO, YOLANDA, JESÚS, ADELIZA, JUAN, ROSA MARIA, MARTHA, JESÚS MATIAS,JESÚS, ADELIZA, JUAN, ROSA MARIA, MARTHA, JESÚS MATIAS, SILVIA,SILVIA, RENE, PEPE Y A TODOS MIS QUERIDOS SOBRINOS YRENE, PEPE Y A TODOS MIS QUERIDOS SOBRINOS Y SOBRINAS.SOBRINAS.A MIS QUERIDOS SUEGROS: IGNACIO Y HERLINDA Y QUERIDASA MIS QUERIDOS SUEGROS: IGNACIO Y HERLINDA Y QUERIDAS CUÑADAS Y CUÑADO, MARIA DEL CARMEN, OLIVIA Y OSCAR.CUÑADAS Y CUÑADO, MARIA DEL CARMEN, OLIVIA Y OSCAR.A MI ADMIRADO Y QUERIDO SOBRINO JESÚS Y SU ESPOSA LLUVIAA MI ADMIRADO Y QUERIDO SOBRINO JESÚS Y SU ESPOSA LLUVIA Y SU BEBITA.Y SU BEBITA.A MIS QUERIDAS TÍAS Y TIOS: LUCILA, GUILLERMO, ROSA, JOSÉA MIS QUERIDAS TÍAS Y TIOS: LUCILA, GUILLERMO, ROSA, JOSÉ MARIA, ADELA, ARMANDO, QUELITA, RENE Y A TODOS MISMARIA, ADELA, ARMANDO, QUELITA, RENE Y A TODOS MIS QUERIDOS PRIMOS Y PRIMAS.QUERIDOS PRIMOS Y PRIMAS.

A MIS INOLVIDABLES MAESTROS: ARMIDA MACALPIN, FERNANDOA MIS INOLVIDABLES MAESTROS: ARMIDA MACALPIN, FERNANDO ARAGÓN, ERNESTO LÒPEZ RIESGO, ALEJANDRO DUEÑAS, LUISARAGÓN, ERNESTO LÒPEZ RIESGO, ALEJANDRO DUEÑAS, LUIS GOMEZ DEL CAMPO, VIRGILIO RÍOS AGUILERA, GILBERTOGOMEZ DEL CAMPO, VIRGILIO RÍOS AGUILERA, GILBERTO GUTÍERREZ QUIROZ, CARLOS ENRIQUE PEÑA LIMÓN, RAÚLGUTÍERREZ QUIROZ, CARLOS ENRIQUE PEÑA LIMÓN, RAÚL PETERSON, CARLOS ROMBOLD, MANUEL PUEBLA PERALTA YPETERSON, CARLOS ROMBOLD, MANUEL PUEBLA PERALTA Y EDWARD BERKA,EDWARD BERKA,

A MIS AMIGAS DE SIEMPRE: MARISSA , MELIDA, MARTHA ELISA,A MIS AMIGAS DE SIEMPRE: MARISSA , MELIDA, MARTHA ELISA, MARIA ANTONIETA, MARIA JESUS, PUPI MARTINEZ, CHEPIMARIA ANTONIETA, MARIA JESUS, PUPI MARTINEZ, CHEPI OCHOA, CHAYO ORTEGA, CARMEN ALICIA.OCHOA, CHAYO ORTEGA, CARMEN ALICIA.

A LA DRA. LUZ VÁZQUEZ MORENO, POR SU IMPORTANTE Y VALIOSAA LA DRA. LUZ VÁZQUEZ MORENO, POR SU IMPORTANTE Y VALIOSA ASESORÍA EN MI TESIS DE MAESTRÍA.ASESORÍA EN MI TESIS DE MAESTRÍA.

A NUESTRO ADMIRADO Y GRAN AMIGO ALBERTO HIJAR SERRANO.A NUESTRO ADMIRADO Y GRAN AMIGO ALBERTO HIJAR SERRANO.A LA DRA. IFIGENIA MARTÌNEZ POR SU APOYO SOLIDARIO.A LA DRA. IFIGENIA MARTÌNEZ POR SU APOYO SOLIDARIO.AL LIC. ANDRES MANUEL LOPEZ OBRADOR CON RESPETO YAL LIC. ANDRES MANUEL LOPEZ OBRADOR CON RESPETO Y ADMIRACION.ADMIRACION.

NUESTRO PROFUNDO AGRADECIMIENTO A NUESTROS AMIGOSNUESTRO PROFUNDO AGRADECIMIENTO A NUESTROS AMIGOS ROSA MARÍA Y ALAN SOTELO CRUZ, POR SU SABIDURÍA Y SUROSA MARÍA Y ALAN SOTELO CRUZ, POR SU SABIDURÍA Y SU VALIOSA ASESORÍA.VALIOSA ASESORÍA.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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A NUESTROS BUENOS AMIGOS, MARTÍN CRUZ ALONSO, SOCORROA NUESTROS BUENOS AMIGOS, MARTÍN CRUZ ALONSO, SOCORRO TRUJILLO MORENO Y GUSTAVO OZUNA GONZÁLEZ , NUESTROTRUJILLO MORENO Y GUSTAVO OZUNA GONZÁLEZ , NUESTRO AGRADECIMIENTO POR SU AMISTAD SOLIDARIA.AGRADECIMIENTO POR SU AMISTAD SOLIDARIA.

AL LIC. MANLIO FABIO BELTRONES RIVERA, AL ING. VERNONAL LIC. MANLIO FABIO BELTRONES RIVERA, AL ING. VERNON PEREZ RUBIO, AL DR. JOSÉ LUIS NAVARRO HELSEN,ALPEREZ RUBIO, AL DR. JOSÉ LUIS NAVARRO HELSEN,AL DR.FILIBERTO PERÉZ DUARTE, AL LIC. MIGUEL QUIROS, AL LIC.DR.FILIBERTO PERÉZ DUARTE, AL LIC. MIGUEL QUIROS, AL LIC. ALVARO OBREGÓN Y DORA LUZ OBREGÓN Y A SUS HIJAS CLAUDIA YALVARO OBREGÓN Y DORA LUZ OBREGÓN Y A SUS HIJAS CLAUDIA Y DORA LUZ, POR SU IMPORTANTE Y VALIOSO APOYO.DORA LUZ, POR SU IMPORTANTE Y VALIOSO APOYO.

ASI MISMO QUEREMOS AGRADECER LAS GENTILEZAS DE LOSASI MISMO QUEREMOS AGRADECER LAS GENTILEZAS DE LOS DESTACADOS PERIODISTAS Y COMUNICADORES QUE NOS HANDESTACADOS PERIODISTAS Y COMUNICADORES QUE NOS HAN BRINDADO SU VALIOSA ATENCIÓN , EMILSE VALENCIA, ANTONIOBRINDADO SU VALIOSA ATENCIÓN , EMILSE VALENCIA, ANTONIO DUARTE GARCIA, FAUSTO SOTO SILVA, MARTHA OBESO, MARTINDUARTE GARCIA, FAUSTO SOTO SILVA, MARTHA OBESO, MARTIN OLGUIN, CARMEN ALICIA ESPINOZA ORTEGA, GILDA VALENZUELAOLGUIN, CARMEN ALICIA ESPINOZA ORTEGA, GILDA VALENZUELA PICOS, LUPITA PEREZ RIOS, ELSA NUÑEZ ESQUER, SILVIAPICOS, LUPITA PEREZ RIOS, ELSA NUÑEZ ESQUER, SILVIA MANRIQUEZ, NOHEMI GONZÁLEZ, SILVIA DUARTE, RICARDO ACEDOMANRIQUEZ, NOHEMI GONZÁLEZ, SILVIA DUARTE, RICARDO ACEDO SAMANIEGO, CRISTINA PACHECO, JOSÉ GUTÍERREZ VIVÓ, FORTINOSAMANIEGO, CRISTINA PACHECO, JOSÉ GUTÍERREZ VIVÓ, FORTINO LEÓN ALMADA, AMALIA ESCOBAR, ROGELIO MORENO COTA,LEÓN ALMADA, AMALIA ESCOBAR, ROGELIO MORENO COTA, EDUARDO GÓMEZ TORRES, RUBÉN PARODI, MANUEL BORBÓNEDUARDO GÓMEZ TORRES, RUBÉN PARODI, MANUEL BORBÓN MONTAÑO, SONIA DOMÍNGUEZ J.,RAFAEL RENTERÍA ROSALES,MONTAÑO, SONIA DOMÍNGUEZ J.,RAFAEL RENTERÍA ROSALES, ROCÍO BANDA, MARÍA JESÚS ROMERO, AZUCENA MEZA, PATRICIAROCÍO BANDA, MARÍA JESÚS ROMERO, AZUCENA MEZA, PATRICIA ANTILLÓN, GUADALUPE CENTENO, MARIO MUNGUÍA, CARMENANTILLÓN, GUADALUPE CENTENO, MARIO MUNGUÍA, CARMEN CHÁVEZ MADA, ALMA AYÓN LÓPEZ, LOURDES SARRACINO, CINTHYACHÁVEZ MADA, ALMA AYÓN LÓPEZ, LOURDES SARRACINO, CINTHYA DEL VILLAR, NORMA ALICIA PIMIENTA, SOLEDAD DURAZO, ANADEL VILLAR, NORMA ALICIA PIMIENTA, SOLEDAD DURAZO, ANA LUISA PACHECO, JESUS RUIZ, BETTY ESTRADA Y LOSLUISA PACHECO, JESUS RUIZ, BETTY ESTRADA Y LOS DISTINGUIDOS MIEMBROS DE “ AMIGOS DE LA RADIO”.DISTINGUIDOS MIEMBROS DE “ AMIGOS DE LA RADIO”.

A TODAS LAS EMBARAZADAS QUE FUERON AL LABORATORIO, PORA TODAS LAS EMBARAZADAS QUE FUERON AL LABORATORIO, POR EL PRÓNOSTICO DEL SEXO DE SU BEBÉ. EL PRÓNOSTICO DEL SEXO DE SU BEBÉ.

A TODA LAS PERSONAS QUE TUVIERON LA GENTILEZA, DE DARNOSA TODA LAS PERSONAS QUE TUVIERON LA GENTILEZA, DE DARNOS UNA MUESTRA DE SU SANGRE, PARA TENER LA FOTOGRAFÍA DE SUUNA MUESTRA DE SU SANGRE, PARA TENER LA FOTOGRAFÍA DE SU DNA.DNA.

A LAS FAMILIAS QUE NOS APOYARON EN EL ESTUDIO PARAA LAS FAMILIAS QUE NOS APOYARON EN EL ESTUDIO PARA ESTABLECER EL MÉTODO DE PATERNIDAD:ESTABLECER EL MÉTODO DE PATERNIDAD:1) FAMILIA CÁZAREZ LEÓN, 2) FAMILIA ANDRADE LEÓN, 3)1) FAMILIA CÁZAREZ LEÓN, 2) FAMILIA ANDRADE LEÓN, 3) FAMILIA LEÓN CERVANTES, 4) FAMILIA SILVA PALOMARES, 5)FAMILIA LEÓN CERVANTES, 4) FAMILIA SILVA PALOMARES, 5) FAMILIA BURGOS CALLEJA, 6) FAMILIA MORENO QUINTANA, 7)FAMILIA BURGOS CALLEJA, 6) FAMILIA MORENO QUINTANA, 7) FAMILIA PARADA LOAIZA, 8) FAMILIA GIL GARZA, 9) FAMILIAFAMILIA PARADA LOAIZA, 8) FAMILIA GIL GARZA, 9) FAMILIA AYALA LENDO, 10) FAMILIA GÓMEZ FRANCO, 11) FAMILIA RAMÍREZAYALA LENDO, 10) FAMILIA GÓMEZ FRANCO, 11) FAMILIA RAMÍREZ VALDEZ, MUCHAS GRACIAS A TODOS.VALDEZ, MUCHAS GRACIAS A TODOS.

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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ANEXO # 3ANEXO # 3PERSONAS VOLUNTARIAS QUE HAN PARTICIPADOPERSONAS VOLUNTARIAS QUE HAN PARTICIPADO

EN EL DESARROLLO DE ESTA NUEVAEN EL DESARROLLO DE ESTA NUEVA TECNOLOGIA V22, NUESTRO PROFUNDOTECNOLOGIA V22, NUESTRO PROFUNDO AGRADECIMIENTO A TODAS ELLAS.AGRADECIMIENTO A TODAS ELLAS.

199419941)1) MARTHA BEATRIZ MATY ORTEGAMARTHA BEATRIZ MATY ORTEGA2)2) ALMA ROSA BOJORQUEZ V.ALMA ROSA BOJORQUEZ V.3)3) COYITO BLANCOCOYITO BLANCO4)4) GRACIELA LIMÓN O. GRACIELA LIMÓN O.5)5) DRA. SAGUCHIDRA. SAGUCHI6)6) ALBERTO RAMIREZALBERTO RAMIREZ7)7) LUIS F. PLATALUIS F. PLATA8)8) MARTIN R. ZAMUDIOMARTIN R. ZAMUDIO9)9) MANUEL LOPEZ E.MANUEL LOPEZ E.10)10) EMA DELIA VEGAEMA DELIA VEGA11)11) LUPITA DEL VALLELUPITA DEL VALLE12)12) DANIEL ARIASDANIEL ARIAS13)13) RITA A. YAÑEZRITA A. YAÑEZ14)14) EDUARDO BERNAL EDUARDO BERNAL 15)15) DRA. NAVARRODRA. NAVARRO

1995199516)16) RUTH CHAPARRO PEÑARUTH CHAPARRO PEÑA17)17) AIDA CHAPARRO PEÑAAIDA CHAPARRO PEÑA18)18) JOSEFINA MARQUEZJOSEFINA MARQUEZ

1997199719)19) ANGELITA GARCIA BALDENEGROANGELITA GARCIA BALDENEGRO20)20) YOLANDA DE CARLONYOLANDA DE CARLON21)21) MARIA ISABEL CAZARES DE ACOSTAMARIA ISABEL CAZARES DE ACOSTA22)22) IRENE DE LEONIRENE DE LEON23)23) FAUSTO RICARDO LEON C.FAUSTO RICARDO LEON C.24)24) CLARA ZAMBRANO GILCLARA ZAMBRANO GIL25)25) ERICKA RODRIGUEZ LEONERICKA RODRIGUEZ LEON26)26) RAMON IÑIGUEZ P.RAMON IÑIGUEZ P.27)27) ROSALINDA GIL TORRESROSALINDA GIL TORRES28)28) MIRNA GIL TORRESMIRNA GIL TORRES

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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29)29) ELISA GIL TORRESELISA GIL TORRES30)30) RAMONA TORRES D.RAMONA TORRES D.31)31) BRICIA OSUNABRICIA OSUNA32)32) LUIS FRANCISCO ROMERO URBALEJOLUIS FRANCISCO ROMERO URBALEJO33)33) LUIS FRANCISCO ROMERO MUNGUIALUIS FRANCISCO ROMERO MUNGUIA34)34) ALINE MIRAZOALINE MIRAZO35)35) MONICA MIRAZOMONICA MIRAZO36)36) MOISES MIRAZOMOISES MIRAZO37)37) MAVY ETHEL SANCHEZMAVY ETHEL SANCHEZ38)38) CAROLINA BURGOS CALLEJACAROLINA BURGOS CALLEJA39)39) PANCHITA CALLEJA DE BURGOSPANCHITA CALLEJA DE BURGOS40)40) CLAUDIA IÑIGUEZ P.CLAUDIA IÑIGUEZ P.41)41) JEAN MCLAURINJEAN MCLAURIN42)42) YOLANDA GARCIAYOLANDA GARCIA43)43) PINA CAMPAPINA CAMPA44)44) ANA GLORIA CAZARES LEONANA GLORIA CAZARES LEON45)45) MATIAS LIMON CAZARESMATIAS LIMON CAZARES46)46) MAGDA IÑIGUEZ P.MAGDA IÑIGUEZ P.47)47) AGUSTIN MANINGAGUSTIN MANING48)48) JUAN ALVARADOJUAN ALVARADO49)49) PAULINA MIRANDA CAZARESPAULINA MIRANDA CAZARES50)50) CELIA MORENO D.CELIA MORENO D.51)51) SORAYA PLATT LLITERASSORAYA PLATT LLITERAS52)52) GUILLERMO DIAZ BORCHARDTGUILLERMO DIAZ BORCHARDT53)53) DALILA GARCIA V.DALILA GARCIA V.54)54) GUILLERMO DIAZ MELOGUILLERMO DIAZ MELO55)55) ANGELINA BORCHARDT DE DIAZANGELINA BORCHARDT DE DIAZ56)56) EVA ALICIA ACOSTA R.EVA ALICIA ACOSTA R.57)57) MA. MERCEDES ESCARCEGA VILLEGASMA. MERCEDES ESCARCEGA VILLEGAS58)58) BRICIA OSUNA GILBRICIA OSUNA GIL59)59) MARIO SANTANAMARIO SANTANA60)60) ANA CRISTINA RODRIGUEZ LEONANA CRISTINA RODRIGUEZ LEON61)61) LINELBA GIL TORRESLINELBA GIL TORRES62)62) MA. SOLEDAD MARTINEZMA. SOLEDAD MARTINEZ63)63) BERTHA ALICIA STEMPLESCA V.BERTHA ALICIA STEMPLESCA V.64)64) SANDRA MARTINEZSANDRA MARTINEZ65)65) MARTHA CECILIA SIQUEIROS T.MARTHA CECILIA SIQUEIROS T.66)66) MIRNA ANABEL MORENO G.MIRNA ANABEL MORENO G.67)67) JUAN MORENTESJUAN MORENTES68)68) MA. EMA SANTILLANEZMA. EMA SANTILLANEZ69)69) ADOLFO ENRIQUE LANDAVAZOADOLFO ENRIQUE LANDAVAZO70)70) CARMEN GUADALUPE GODINEZ V.CARMEN GUADALUPE GODINEZ V.71)71) ADOLFO RIVERAADOLFO RIVERA

1998199872)72) GEMA VERONICA PARADA L.GEMA VERONICA PARADA L.73)73) EDUARDO FLORESEDUARDO FLORES

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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74)74) DOLORES VELAZCODOLORES VELAZCO75)75) TANIA GIL GARZATANIA GIL GARZA76)76) CARMEN LETICIA SORIACARMEN LETICIA SORIA77)77) MA. ELENA GIL ALCANTARMA. ELENA GIL ALCANTAR78)78) VELIA VEGA GILVELIA VEGA GIL79)79) LARISSA VEGA GILLARISSA VEGA GIL80)80) FERNANDA GARZA ORTEGAFERNANDA GARZA ORTEGA81)81) MA. HORTENCIA GARZA ORTEGAMA. HORTENCIA GARZA ORTEGA82)82) ALBERTO OROZCO GARZAALBERTO OROZCO GARZA83)83) LUZ OTILIA GRIJALVA T. LUZ OTILIA GRIJALVA T. 84)84) MAGDA BALLESTROS RAMIREZMAGDA BALLESTROS RAMIREZ85)85) MELISSA JASSO ESPINOZAMELISSA JASSO ESPINOZA86)86) CARMEN ALICIA ESPINOZA ORTEGACARMEN ALICIA ESPINOZA ORTEGA87)87) MARINA ZAZUETA NORIEGAMARINA ZAZUETA NORIEGA88)88) CONSUELO ROSAS ELIZALDECONSUELO ROSAS ELIZALDE89)89) ARNULFO OCHOAARNULFO OCHOA90)90) LETICIA INDARTLETICIA INDART91)91) LUIS TERANLUIS TERAN92)92) RAQUEL TIRADO ALVAREZRAQUEL TIRADO ALVAREZ93)93) MARINA NORIEGA DE ZAZUETAMARINA NORIEGA DE ZAZUETA94)94) EDUARDO SILVA PEÑUÑURIEDUARDO SILVA PEÑUÑURI95)95) ELDA CAZARES SALCIDOELDA CAZARES SALCIDO96)96) ELDITA MURRAY CAZARESELDITA MURRAY CAZARES97)97) JUAN PABLO MURRAY CAZARESJUAN PABLO MURRAY CAZARES98)98) ROMAN FELIX NAVARROROMAN FELIX NAVARRO99)99) EDITH RUBIOEDITH RUBIO

100) MARIA CORDOVA QUIROZ 100) MARIA CORDOVA QUIROZ 101) ZOILA BERNAL 101) ZOILA BERNAL 102) MARTHA PIÑA ANDRADE 102) MARTHA PIÑA ANDRADE 103) ELVIA MARINA MUNGUIA 103) ELVIA MARINA MUNGUIA 104) CAROLA ALCARAZ 104) CAROLA ALCARAZ 105) RICARDO RODRIGUEZ 105) RICARDO RODRIGUEZ 106) IVONNE CANDIANI 106) IVONNE CANDIANI 107) JOEL GOMEZ 107) JOEL GOMEZ 108) ANA CATALINA 108) ANA CATALINA 109) JULIO DIEGO DAVILA 109) JULIO DIEGO DAVILA 110) ROCIO GUADALUPE MARTINEZ PALOMARES 110) ROCIO GUADALUPE MARTINEZ PALOMARES 111) 111) GIBRAN JALL VALENZUELAGIBRAN JALL VALENZUELA 112) MIRIAM GUADALUPE BARNETT MEZA 112) MIRIAM GUADALUPE BARNETT MEZA 113) FERNANDA FRAIJO 113) FERNANDA FRAIJO 114) OLGA LILIA FELIX SOTO 114) OLGA LILIA FELIX SOTO 115) ANGELICA LOPEZ DE CARRANZA 115) ANGELICA LOPEZ DE CARRANZA 116) ANA IRMA RASCON 116) ANA IRMA RASCON 117) ALMA BELIA RASCON DURAN 117) ALMA BELIA RASCON DURAN 118) ROSA ELENA DURAN ENCINAS 118) ROSA ELENA DURAN ENCINAS 119) ALMA DELIA DURAN DE RASCON 119) ALMA DELIA DURAN DE RASCON 120) MARGARITA LOPEZ CRUZ 120) MARGARITA LOPEZ CRUZ

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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121) 121) MONICA MARTINEZMONICA MARTINEZ 122) TERE DURAN TELLEZ 122) TERE DURAN TELLEZ 123) ADRIANA CASTELO DE PARADA 123) ADRIANA CASTELO DE PARADA 124) CAROLINA MORALES DE GARCIA 124) CAROLINA MORALES DE GARCIA 125) JESSICA CRUZ QUINTERO 125) JESSICA CRUZ QUINTERO 126) MARIA JESUS ROMERO 126) MARIA JESUS ROMERO 127) LAURA ELENA DURAZO DE LEON 127) LAURA ELENA DURAZO DE LEON 128) MARIA EVA DURAZO ARMENTA 128) MARIA EVA DURAZO ARMENTA 129) LORENIA RIOS GONZALEZ 129) LORENIA RIOS GONZALEZ 130) DORA GUADALUPE RIOS 130) DORA GUADALUPE RIOS 131) IMELDA VAZQUEZ MEZA 131) IMELDA VAZQUEZ MEZA 132) CARMEN MEZA HERRERA 132) CARMEN MEZA HERRERA 133) OTILIA ALMAZAN 133) OTILIA ALMAZAN 134) JESUS ARMANDO CONTRERAS 134) JESUS ARMANDO CONTRERAS135) JESUS RUIZ ROMERO135) JESUS RUIZ ROMERO136) SOLEDAD R. DE CARRANZA136) SOLEDAD R. DE CARRANZA137) ANGELICA LOPEZ DE CARRANZA137) ANGELICA LOPEZ DE CARRANZA138) JAVIER R. IRACHETA138) JAVIER R. IRACHETA139) ANA MARIA VAZQUEZ MEZA139) ANA MARIA VAZQUEZ MEZA140) EDGARDO LOPEZ VAZQUEZ140) EDGARDO LOPEZ VAZQUEZ141) ANGELICA MOLINA DE AYALA141) ANGELICA MOLINA DE AYALA142) RAFAEL BURRUEL MONTIJO142) RAFAEL BURRUEL MONTIJO143) RUTH BURRUEL143) RUTH BURRUEL144) MARIBEL ROMERO PABLOS144) MARIBEL ROMERO PABLOS145) JESUS ANTONIO RAMIREZ VALDEZ145) JESUS ANTONIO RAMIREZ VALDEZ146) JESUS RAMIREZ OZUNA146) JESUS RAMIREZ OZUNA147) ROSA ARMIDA RAMIREZ VALDEZ147) ROSA ARMIDA RAMIREZ VALDEZ148) 148) CLARA RAMIREZ VALDEZCLARA RAMIREZ VALDEZ149) BRENDA PATRICIA VAZQUEZ149) BRENDA PATRICIA VAZQUEZ150) MARTIN VAZQUEZ RAMIREZ150) MARTIN VAZQUEZ RAMIREZ151) MA. ERNESTINA RAMIREZ VALDEZ151) MA. ERNESTINA RAMIREZ VALDEZ152) JOSE ANTONIO GARCIA GUERRERO152) JOSE ANTONIO GARCIA GUERRERO153) MARIA DORA FIGUEROA153) MARIA DORA FIGUEROA154) DORA MARIA BURRUEL FIGUEROA154) DORA MARIA BURRUEL FIGUEROA155) ANA CAROLINA BURRUEL FIGUEROA155) ANA CAROLINA BURRUEL FIGUEROA156) PEDRO RAMIREZ VALDEZ156) PEDRO RAMIREZ VALDEZ157) DULCE MARIA RAMIREZ LORETO157) DULCE MARIA RAMIREZ LORETO158) LILIAN OFELIA RAMIREZ LORETO158) LILIAN OFELIA RAMIREZ LORETO159) FERNANDO RAMIREZ LORETO159) FERNANDO RAMIREZ LORETO160) ABELINO HERNANDEZ160) ABELINO HERNANDEZ161) KARLA LOZANO161) KARLA LOZANO162) CECILIA NENINGER162) CECILIA NENINGER163) MARTHA NAVARRO163) MARTHA NAVARRO164) LOURDES CAMPILLO164) LOURDES CAMPILLO165) MARIA ESTER MORENO SARABIA165) MARIA ESTER MORENO SARABIA166) LUZ ARACELI MOLINA GALINDO166) LUZ ARACELI MOLINA GALINDO167) BEATRIZ GOMEZ FRANCO167) BEATRIZ GOMEZ FRANCO

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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168) ALFONSO TIRADO OCHOA168) ALFONSO TIRADO OCHOA169) FRANCISCO RAMIREZ VALDEZ169) FRANCISCO RAMIREZ VALDEZ170) JOSE LAURO RAMIREZ VALDEZ170) JOSE LAURO RAMIREZ VALDEZ171) JUAN BOSCO RAMIREZ171) JUAN BOSCO RAMIREZ172) MARTHA CRISTINA RAMIREZ VALDEZ172) MARTHA CRISTINA RAMIREZ VALDEZ173) IVAN RAMIREZ VILLA173) IVAN RAMIREZ VILLA174) 174) SERGIO RAMIREZ VILLASERGIO RAMIREZ VILLA175) MARICELA VAZQUEZ RAMIREZ175) MARICELA VAZQUEZ RAMIREZ176) ISRAEL RAMIREZ DUARTE176) ISRAEL RAMIREZ DUARTE177) ABRAHAM RAMIREZ DUARTE177) ABRAHAM RAMIREZ DUARTE178) SARAHI RAMIREZ DUARTE178) SARAHI RAMIREZ DUARTE179) LUZ IMELDA RAMIREZ DUARTE179) LUZ IMELDA RAMIREZ DUARTE180) ERICKA ALEJANDRA RAMIREZ ALATORRE180) ERICKA ALEJANDRA RAMIREZ ALATORRE181) KAREN GUADALUPE RAMIREZ ALATORRE181) KAREN GUADALUPE RAMIREZ ALATORRE182) EDNA ROSARIO RAMIREZ ALATORRE182) EDNA ROSARIO RAMIREZ ALATORRE183) TANIA BERENICE RAMIREZ ALATORRE183) TANIA BERENICE RAMIREZ ALATORRE184) THELMA EUNICE RAMIREZ ALATORRE184) THELMA EUNICE RAMIREZ ALATORRE185) MARTIN R. RIVERA MARTINEZ185) MARTIN R. RIVERA MARTINEZ186) JUAN BOSCO RAMIREZ LOPEZ186) JUAN BOSCO RAMIREZ LOPEZ187) GERALDINE RIVERA RAMIREZ187) GERALDINE RIVERA RAMIREZ188) MARIA DE LOS ANGELES RAMIREZ LOPEZ188) MARIA DE LOS ANGELES RAMIREZ LOPEZ189) VERONICA ARNOLD189) VERONICA ARNOLD190) KENA RAMIREZ DE MARTINEZ190) KENA RAMIREZ DE MARTINEZ191) MOISES MIRAZO GARCIA191) MOISES MIRAZO GARCIA192) DIANA BUSTAMANTE192) DIANA BUSTAMANTE193) 193) GLORIA MOSQUEIRAGLORIA MOSQUEIRA194) CLAUDIA ZEPEDA194) CLAUDIA ZEPEDA195) LUZ MERCEDES DUARTE DE RAMIREZ195) LUZ MERCEDES DUARTE DE RAMIREZ196) OFELIA LORETO DE RAMIREZ196) OFELIA LORETO DE RAMIREZ197) MARIA DE LOS ANGELES LOPEZ DE RAMIREZ197) MARIA DE LOS ANGELES LOPEZ DE RAMIREZ198) JULIO CESAR RAMIREZ LORETO198) JULIO CESAR RAMIREZ LORETO199) CINTHYA DEL VILLAR199) CINTHYA DEL VILLAR200) GREGORIO RAMIREZ200) GREGORIO RAMIREZ201) LUCIA GUADALUPE ARTEAGA201) LUCIA GUADALUPE ARTEAGA202) J. GREGORIO RAMIREZ202) J. GREGORIO RAMIREZ203) JONATHAN RAMIREZ A.203) JONATHAN RAMIREZ A.204) JONATHAN MARIO RAMIREZ204) JONATHAN MARIO RAMIREZ205) ADAN GUTIERREZ205) ADAN GUTIERREZ206) GUADALUPE CORDOVA MORALES206) GUADALUPE CORDOVA MORALES207) REBECA LEYVA GARCIA207) REBECA LEYVA GARCIA208) FLORENTINO SERRANO208) FLORENTINO SERRANO209) JUAN ALDECOA ACOSTA209) JUAN ALDECOA ACOSTA210) JOAQUIN LOZANO CORONA210) JOAQUIN LOZANO CORONA211) MARISSA SOTO ZAVALA211) MARISSA SOTO ZAVALA212) NOHEMI AGUIRRE212) NOHEMI AGUIRRE213) SONIA CORDOVA CORRAL213) SONIA CORDOVA CORRAL214) LUZ ELBA PEREZ214) LUZ ELBA PEREZ

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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215) AMELIA ARAQUE215) AMELIA ARAQUE216) FRANCIS RODRIGUEZ ENRIQUEZ216) FRANCIS RODRIGUEZ ENRIQUEZ217) OCTAVIANO ROJAS GUTIERREZ217) OCTAVIANO ROJAS GUTIERREZ218) DORA CELIA MORENO218) DORA CELIA MORENO219) LUZ ELENA RAMIREZ CORDOVA 219) LUZ ELENA RAMIREZ CORDOVA 220) RAMON OZUNA220) RAMON OZUNA

19991999221) SILVIA AGUILAR221) SILVIA AGUILAR222) JUAN CASANOVA222) JUAN CASANOVA223) SANDRA URBALEJO223) SANDRA URBALEJO224) ROSARIO VALDEZ ORTEGA224) ROSARIO VALDEZ ORTEGA225) ANA CECILIA BUJANDA225) ANA CECILIA BUJANDA226) ANA CECILIA DE BUSTILLO226) ANA CECILIA DE BUSTILLO227) DOLORES VELAZCO OLMOS227) DOLORES VELAZCO OLMOS228) LUZ DEL CARMEN RODRIGUEZ228) LUZ DEL CARMEN RODRIGUEZ229) IRENE HERNANDEZ229) IRENE HERNANDEZ230) LIDIA DE MANCILLAS230) LIDIA DE MANCILLAS231) MARIA DE LOS ANGELES CAMPOY231) MARIA DE LOS ANGELES CAMPOY232) ALMA GUTIERREZ DE DURAZO232) ALMA GUTIERREZ DE DURAZO233) FRANCISCO SILVA233) FRANCISCO SILVA234) ADRIANA VALDEZ234) ADRIANA VALDEZ235) EDITH MORALES235) EDITH MORALES236) CLAUDIA MIRANDA236) CLAUDIA MIRANDA237) ELSA RINCON DE ZEPEDA237) ELSA RINCON DE ZEPEDA238) LILIAN BUJANDA238) LILIAN BUJANDA239) HUGO FIMBRES G. 239) HUGO FIMBRES G. 240) MARIA TERESA VAZQUEZ DE OCHOA240) MARIA TERESA VAZQUEZ DE OCHOA241) PATRICIA ARAIZA241) PATRICIA ARAIZA242) ELSA SANCHEZ242) ELSA SANCHEZ243) CARLA NAVARRO243) CARLA NAVARRO244) XOCHITL RODRIGUEZ244) XOCHITL RODRIGUEZ245) KITTY GUTIERREZ245) KITTY GUTIERREZ246) GILBERTO CAÑEZ246) GILBERTO CAÑEZ247) MARIA REFUGIO GRACIA DE CAÑEZ247) MARIA REFUGIO GRACIA DE CAÑEZ248) MARCOS ALAN MIRANDA CAZAREZ248) MARCOS ALAN MIRANDA CAZAREZ249) MARTHA CECILIA CAZARES249) MARTHA CECILIA CAZARES250) ANA ELSA ALVIDREZ250) ANA ELSA ALVIDREZ251) MARIA DOLORES MARTINEZ DE TAPIA251) MARIA DOLORES MARTINEZ DE TAPIA252) ROSA ELENA FIEL PRADO252) ROSA ELENA FIEL PRADO253) MARIA ELSA GUTIERREZ FONTES253) MARIA ELSA GUTIERREZ FONTES254) BRENDA FRAGOSO254) BRENDA FRAGOSO255) ISABEL CHAVEZ255) ISABEL CHAVEZ256) KAREN DENISSE SIQUEIROS AVILA256) KAREN DENISSE SIQUEIROS AVILA257) MARIA ANTONIETA MATUS257) MARIA ANTONIETA MATUS258) EMA DELIA VEGA258) EMA DELIA VEGA259) CAROLINA ANDRADE LEON259) CAROLINA ANDRADE LEON

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

119119

260) 260) RAFAEL C.RAFAEL C.261) PERLA RODRIGUEZ QUIÑONEZ261) PERLA RODRIGUEZ QUIÑONEZ262) ROSA MARIA GARCIA262) ROSA MARIA GARCIA263) DIANA PLATT263) DIANA PLATT264) MONICA MORALES PARADA264) MONICA MORALES PARADA265) SOFIA CARRANZA DE LLAMAS265) SOFIA CARRANZA DE LLAMAS266) VLADIMIR LEON DURAZO266) VLADIMIR LEON DURAZO267) MARIA DEL CARMEN RODRIGUEZ ZAZUETA267) MARIA DEL CARMEN RODRIGUEZ ZAZUETA268) EDGAR ARAIZA CASTRO268) EDGAR ARAIZA CASTRO269) SOFIA VAZQUEZ269) SOFIA VAZQUEZ270) ROSALIA PLATT ORTEGA270) ROSALIA PLATT ORTEGA271) LISSETTE DE GUTIERREZ271) LISSETTE DE GUTIERREZ272) MA TERESA VAZQUEZ272) MA TERESA VAZQUEZ273) SANDRA SALAZAR273) SANDRA SALAZAR274) JANETTE PUJOL274) JANETTE PUJOL275) GUILLERMINA DE ALLEGRE275) GUILLERMINA DE ALLEGRE276) FRANCISCA MONGE276) FRANCISCA MONGE277) FEDERICO AGUSTIN VARELA M.277) FEDERICO AGUSTIN VARELA M.278) ANA CRISTINA RODRIGUEZ LEON278) ANA CRISTINA RODRIGUEZ LEON279) RAQUEL TORRES PERALTA279) RAQUEL TORRES PERALTA280) RITA ELIA CORONADO280) RITA ELIA CORONADO281) ANITZA PERALTA DE ARAIZA281) ANITZA PERALTA DE ARAIZA282) SANDRA MARTINEZ MOLINA282) SANDRA MARTINEZ MOLINA283) ALMA DE CRUZ283) ALMA DE CRUZ284) EVANGELINA CUEVAS284) EVANGELINA CUEVAS285) IRMA LAURA M. DE CARDENAS285) IRMA LAURA M. DE CARDENAS286) ABEL CARDENAS286) ABEL CARDENAS287) GRACIELA PEREZ RAMIREZ287) GRACIELA PEREZ RAMIREZ288) PATRICIA ROMERO ORTIZ288) PATRICIA ROMERO ORTIZ289) ADRIANA SANTELIZ289) ADRIANA SANTELIZ290) 290) VERONICA NORIEGA DE HERNANDEZVERONICA NORIEGA DE HERNANDEZ291) ROSY BERNAL291) ROSY BERNAL292) BEATRIZ FRAGOSO292) BEATRIZ FRAGOSO293) PATRICIA RUBIO DE QUIHUI293) PATRICIA RUBIO DE QUIHUI294) SANDRA GOEHRINGEK DE AYALA294) SANDRA GOEHRINGEK DE AYALA

20002000295) 295) ALMA IRENE SALAZARALMA IRENE SALAZAR296) ELIA VERONICA SILVA296) ELIA VERONICA SILVA297) LORD EMI CAMACHO MURILLO297) LORD EMI CAMACHO MURILLO298) MARTIN FRANCISCO CORDOVA MENDOZA298) MARTIN FRANCISCO CORDOVA MENDOZA299) ANA VENCY AVENA SOTO299) ANA VENCY AVENA SOTO300) ERICKA JIMENEZ CRUZ300) ERICKA JIMENEZ CRUZ301) ANITA AHUMADA TANORI301) ANITA AHUMADA TANORI302) JORGE CORDON302) JORGE CORDON303) EFRAIN VEGA303) EFRAIN VEGA304) ANTONIO TEON GUTIERREZ304) ANTONIO TEON GUTIERREZ

Page 120: Un Nuevo Metodo Para Ver El ADN

V22

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

120120

305) MARIA DEL CARMEN GOMEZ C.305) MARIA DEL CARMEN GOMEZ C.306) JULIETA GALVEZ LOPEZ306) JULIETA GALVEZ LOPEZ307) RAMON ANTONIO PARRA ALVAREZ307) RAMON ANTONIO PARRA ALVAREZ308) KARLA JULIETA MUÑOZ MADRID308) KARLA JULIETA MUÑOZ MADRID309) YOLANDA GARCIA MORALES309) YOLANDA GARCIA MORALES310) SONIA PATRICIA MENDOZA R.310) SONIA PATRICIA MENDOZA R.311) PATRICIA PEÑA ALARCON311) PATRICIA PEÑA ALARCON312312) PAOLA OTHON ONTIVEROS) PAOLA OTHON ONTIVEROS313) RAMONA PEREZ ALVAREZ313) RAMONA PEREZ ALVAREZ314) FRANCIS MARQUEZ314) FRANCIS MARQUEZ315) RUTH ELIZABETH FAVELA315) RUTH ELIZABETH FAVELA316) JUAN ANTONIO MALDONADO316) JUAN ANTONIO MALDONADO317) MARTHA BEATRIZ ANTUNEZ DOMINGUEZ317) MARTHA BEATRIZ ANTUNEZ DOMINGUEZ318) INEZ CORTEZ LARA318) INEZ CORTEZ LARA319) LAURA MIRANDA LEYVA319) LAURA MIRANDA LEYVA320) ERITZEL LEON NUÑEZ320) ERITZEL LEON NUÑEZ321) ATZIN LEON NUÑEZ321) ATZIN LEON NUÑEZ322) ANA ELSA NUÑEZ DE LEON322) ANA ELSA NUÑEZ DE LEON323) ALMA CANDELARIA HERNANDEZ323) ALMA CANDELARIA HERNANDEZ324) ANA MELISSA VALENZUELA FLORES324) ANA MELISSA VALENZUELA FLORES325) MARIA DE LOURDES FEDERICO325) MARIA DE LOURDES FEDERICO326) MARTHA TELLEZ MONTAÑO326) MARTHA TELLEZ MONTAÑO327) ALTAGRACIA BURGOIN327) ALTAGRACIA BURGOIN328) ADRIANA ORTIZ GONZALEZ328) ADRIANA ORTIZ GONZALEZ329) SINDY VILLAREAL GARCIA329) SINDY VILLAREAL GARCIA330) MARIA DOLORES MORENO VAZQUEZ330) MARIA DOLORES MORENO VAZQUEZ331) MARIO CARVAJAL VILLA331) MARIO CARVAJAL VILLA332) ROSA GUADALUPE QUINTANA DE MORALES332) ROSA GUADALUPE QUINTANA DE MORALES333) MARIA DE LOS ANGELES SALLARD SOLIS333) MARIA DE LOS ANGELES SALLARD SOLIS334) YOLANDA SALLARD SOLIS334) YOLANDA SALLARD SOLIS335) JOSE FELIX DIAZ DE LEON335) JOSE FELIX DIAZ DE LEON336) AMADA DEL CARMEN GUTIERREZ CASTRO336) AMADA DEL CARMEN GUTIERREZ CASTRO337) KARLA ANTUNEZ DOMINGUEZ337) KARLA ANTUNEZ DOMINGUEZ338) 338) FRANCISCO JAVIER ANTUNEZ DOMINGUEZFRANCISCO JAVIER ANTUNEZ DOMINGUEZ339) MARIO YADIR RENDON SALLARD339) MARIO YADIR RENDON SALLARD340) TANIA RENDON SALLARD340) TANIA RENDON SALLARD341) MANUELITA GOMEZ CAMOU341) MANUELITA GOMEZ CAMOU342) AURORA HERRERA LUJAN342) AURORA HERRERA LUJAN343) FRANCISCO JAVIER RUIZ OCHOA343) FRANCISCO JAVIER RUIZ OCHOA344) GUADALUPE HERNANDEZ GONZALEZ344) GUADALUPE HERNANDEZ GONZALEZ345) ROSARIO GARCIA AGUILAR345) ROSARIO GARCIA AGUILAR346) JORGE GALINDO PLACENCIA346) JORGE GALINDO PLACENCIA347) MARIA DE LA LUZ LOPEZ C.347) MARIA DE LA LUZ LOPEZ C.348) GLORIA OCHOA SANCHEZ348) GLORIA OCHOA SANCHEZ349) MARIA DOLORES ESCOBEDO O.349) MARIA DOLORES ESCOBEDO O.350) MANUELA GUADALUPE FLORES D.350) MANUELA GUADALUPE FLORES D.351) SILVIA DUARTE DE SODI351) SILVIA DUARTE DE SODI352) CARMEN GLORIA DUARTE GAMBOA352) CARMEN GLORIA DUARTE GAMBOA353) IRENE DE LEON353) IRENE DE LEON

Page 121: Un Nuevo Metodo Para Ver El ADN

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

121121

354) BERTHA ELVIA LOPEZ354) BERTHA ELVIA LOPEZ355) GABRIELA SALLARD SOLIS355) GABRIELA SALLARD SOLIS356) BLANCA LIDIA SALLARD SOLIS356) BLANCA LIDIA SALLARD SOLIS357) MERCEDES DE PANTOJA357) MERCEDES DE PANTOJA358) MARIA DEL CARMEN MELLADO DE NUÑEZ358) MARIA DEL CARMEN MELLADO DE NUÑEZ359) MARIA TRINIDAD PICOS BELTRAN359) MARIA TRINIDAD PICOS BELTRAN360) ARACELI LOPEZ DIAZ360) ARACELI LOPEZ DIAZ361) MARIA LUISA NAVARRO 361) MARIA LUISA NAVARRO 362) FILIBERTO VERDUGO LUCERO362) FILIBERTO VERDUGO LUCERO363) RAMONA ALCANTAR MEDINA363) RAMONA ALCANTAR MEDINA364) ESTER LUCINA PACHECO RODRIGUEZ364) ESTER LUCINA PACHECO RODRIGUEZ365) ALMA ESTELA RAMIREZ ARMENDARIZ365) ALMA ESTELA RAMIREZ ARMENDARIZ366) JESUS `PLACENCIA366) JESUS `PLACENCIA367) ANA KARINA FELIX PICOS367) ANA KARINA FELIX PICOS368) LAURA ELNA ZUBIA M.368) LAURA ELNA ZUBIA M.369) CLARISA VALENZUELA DE VAZQUEZ369) CLARISA VALENZUELA DE VAZQUEZ370) EDUVIGES LUZANIA LOPEZ370) EDUVIGES LUZANIA LOPEZ371) MARGARITA QUIHUIS LOPEZ371) MARGARITA QUIHUIS LOPEZ372) ALEJANDRO HERRERA MONGE372) ALEJANDRO HERRERA MONGE373) BEATRIZ PONCE DE LEON DE GOMEZ373) BEATRIZ PONCE DE LEON DE GOMEZ374) YOLANDA SARABIA DE ZUBIA374) YOLANDA SARABIA DE ZUBIA375) ALMA ROSA SOSA LOPEZ375) ALMA ROSA SOSA LOPEZ376) MANUELITA SOSA LOPEZ376) MANUELITA SOSA LOPEZ377) PATRICIA DURAZO MOSQUEDA377) PATRICIA DURAZO MOSQUEDA378) MARCO ANTONIO MENDIVIL VEGA378) MARCO ANTONIO MENDIVIL VEGA379) MARGARITA ANDRADE LEON379) MARGARITA ANDRADE LEON380) KARINA JACOBO380) KARINA JACOBO381) PALOMA ACOSTA DE SUAREZ381) PALOMA ACOSTA DE SUAREZ382) HECTOR FIGUEROA382) HECTOR FIGUEROA383) CONSUELO GARCIA YAÑEZ383) CONSUELO GARCIA YAÑEZ384) PENINA JIMENEZ GARCIA384) PENINA JIMENEZ GARCIA385) JESUS FEDERICO MARTINEZ385) JESUS FEDERICO MARTINEZ386) GUADALUPE MIRANDA VALENZUELA386) GUADALUPE MIRANDA VALENZUELA387) MARIA LOURDES GOMEZ TERAN387) MARIA LOURDES GOMEZ TERAN388) FRANCISCO BENITO RUIZ MARQUEZ388) FRANCISCO BENITO RUIZ MARQUEZ389) MARIA ELENA JAIME VALENZUELA389) MARIA ELENA JAIME VALENZUELA390) GUADALUPE JAIME VALENZUELA390) GUADALUPE JAIME VALENZUELA391) NORMA GLORIA CABALLERO DE OCEGUERA391) NORMA GLORIA CABALLERO DE OCEGUERA392) MARCELA OCEGUERA CABALLERO392) MARCELA OCEGUERA CABALLERO393) ZARINA MORENO VALENZUELA393) ZARINA MORENO VALENZUELA394) MARIA TERESA POMPOSO BANDA394) MARIA TERESA POMPOSO BANDA395) MARIA CANDELARIA LOPEZ DE MORENO395) MARIA CANDELARIA LOPEZ DE MORENO

20012001396) 396) RAMIRO CRUZ VERGARARAMIRO CRUZ VERGARA397) ALMA DELIA LOPEZ NAVARRO397) ALMA DELIA LOPEZ NAVARRO398) JANETTE ZUBIA DE ANAYA398) JANETTE ZUBIA DE ANAYA399) GUADALUPE ALCARAZ FELIX399) GUADALUPE ALCARAZ FELIX400) YESENIA GALAZ400) YESENIA GALAZ401) NADIA ARREDONDO401) NADIA ARREDONDO

Page 122: Un Nuevo Metodo Para Ver El ADN

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

122122

402) GRACIELA MIRANDA DE MARTINEZ402) GRACIELA MIRANDA DE MARTINEZ403) HECTOR E. LOZANO CARVAJAL403) HECTOR E. LOZANO CARVAJAL404) MARIA JESUS CARVAJAL DE LOZANO404) MARIA JESUS CARVAJAL DE LOZANO405) MARCELA GARCIA405) MARCELA GARCIA406) ABAD NAVARRO406) ABAD NAVARRO407) MIRIAM RAMONET BUSTILLO407) MIRIAM RAMONET BUSTILLO408) ANGEL BUSTAMANTE408) ANGEL BUSTAMANTE409) IGNACIO MALDONADO409) IGNACIO MALDONADO410) KARLA MARGARITA SORIA URQUIDEZ410) KARLA MARGARITA SORIA URQUIDEZ411) RAFAEL LEON MONGE411) RAFAEL LEON MONGE412) CLAUDINA GONZALEZ412) CLAUDINA GONZALEZ413) ELIA SILVA413) ELIA SILVA414) ANA MARIA BERNAL CAÑEZ414) ANA MARIA BERNAL CAÑEZ415) MARIA TERESA CHON GOMEZ415) MARIA TERESA CHON GOMEZ416) MARINA DE LEON416) MARINA DE LEON417) ANA ALICIA DE BERNAL417) ANA ALICIA DE BERNAL418) ANA MARIA GARCIA BUSTILLOS418) ANA MARIA GARCIA BUSTILLOS419) LUIS MIGUEL DUARTE BUSTILLOS419) LUIS MIGUEL DUARTE BUSTILLOS420) MARIA ESTELA BUSTILLOS DE DUARTE420) MARIA ESTELA BUSTILLOS DE DUARTE421) RAUL PLASENCIA CAMACHO421) RAUL PLASENCIA CAMACHO422) SANTOS ALCARAZ NOGALES422) SANTOS ALCARAZ NOGALES423) MARIA FLORES DUARTE423) MARIA FLORES DUARTE424) BENIGNO ALCARAZ FLORES424) BENIGNO ALCARAZ FLORES425) MARIA AMPARO ALCARAZ FLORES425) MARIA AMPARO ALCARAZ FLORES426) AMANDA ALCARAZ FLORES426) AMANDA ALCARAZ FLORES427) FACUNDO ALCARAZ FLORES427) FACUNDO ALCARAZ FLORES428) CALITA ALCARAZ FLORES428) CALITA ALCARAZ FLORES429) CLAUDIA GONZALEZ429) CLAUDIA GONZALEZ430) MARIA ESTELA SALLARD LOPEZ430) MARIA ESTELA SALLARD LOPEZ431) BERTHA SALLARD LOPEZ431) BERTHA SALLARD LOPEZ432) BERTHA P. ALDANA BARRON432) BERTHA P. ALDANA BARRON433) 433) EMA LOURDES CAMPILLO ROMOEMA LOURDES CAMPILLO ROMO434) ANA LILIA VARELA434) ANA LILIA VARELA435) EVANGELINA SALLARD LOPEZ435) EVANGELINA SALLARD LOPEZ436) ABIGAIL SALLARD436) ABIGAIL SALLARD437) IMELDA GONZALEZ DE CORONA437) IMELDA GONZALEZ DE CORONA438) OMAR CORONA438) OMAR CORONA439) EDGAR GIL GARZA439) EDGAR GIL GARZA440) SANDRO DE LA FUENTE440) SANDRO DE LA FUENTE441) YADIRA FELIX441) YADIRA FELIX442) VICTOR FELIX LEYVA442) VICTOR FELIX LEYVA443) MARIA DOLORES CABALLERO 443) MARIA DOLORES CABALLERO 444) ALMA LORENA ECHAVE444) ALMA LORENA ECHAVE445) TADEO RAMIREZ LANDAVAZO445) TADEO RAMIREZ LANDAVAZO446) JOSE GERARDO RAMIREZ LANDAVAZO446) JOSE GERARDO RAMIREZ LANDAVAZO447) JORGE MORENO SCOTT447) JORGE MORENO SCOTT448) JOSE MARTIN SERRANO SANTIAGO448) JOSE MARTIN SERRANO SANTIAGO

Page 123: Un Nuevo Metodo Para Ver El ADN

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

123123

449) ILDEBRANDO BARRIOS GARCIA449) ILDEBRANDO BARRIOS GARCIA450) BLANCA ESTELA LEYVA VELAZQUEZ450) BLANCA ESTELA LEYVA VELAZQUEZ451) SERGIO ALBERTO PAZ SMITH451) SERGIO ALBERTO PAZ SMITH452) LUPITA BURGOIN HERNANDEZ452) LUPITA BURGOIN HERNANDEZ453) ALICIA ORTIZ SEGUNDO453) ALICIA ORTIZ SEGUNDO454) CECILIA CASTELO DE CARDENAS454) CECILIA CASTELO DE CARDENAS455) FERNANDA OSIO DE ESCALANTE455) FERNANDA OSIO DE ESCALANTE456) RAUL PLASCENCIA CAMACHO456) RAUL PLASCENCIA CAMACHO457) VENUS RICO DE CASTELLANOS457) VENUS RICO DE CASTELLANOS458) MIGUEL ANGEL CASTELLANOS458) MIGUEL ANGEL CASTELLANOS459) RUTH GUERRERO VALENZUELA459) RUTH GUERRERO VALENZUELA460) OMAR ROBERTO MARTINEZ VALENZUELA460) OMAR ROBERTO MARTINEZ VALENZUELA461) FABIOLA GODOY RIOS461) FABIOLA GODOY RIOS462) ISABEL CRISTINA SALAZAR LOPEZ462) ISABEL CRISTINA SALAZAR LOPEZ463) MARIA ELENA RODRIGUEZ MIRANDA463) MARIA ELENA RODRIGUEZ MIRANDA464) SILVIA SOTO MARIN464) SILVIA SOTO MARIN465) MARIA MAGDALENA SALAZAR465) MARIA MAGDALENA SALAZAR466) ALMA LIDIA HUGUEZ CANIZALES466) ALMA LIDIA HUGUEZ CANIZALES467) LISETTE SALCIDO DE GUTIERREZ467) LISETTE SALCIDO DE GUTIERREZ468) JOSEFINA GONZALEZ GALLEGO468) JOSEFINA GONZALEZ GALLEGO469) IRMA EMILIA ARAMBULA CHON469) IRMA EMILIA ARAMBULA CHON470) JUAN FRANCISCO ESPINOZA GRACIA470) JUAN FRANCISCO ESPINOZA GRACIA471) SANDRA LUCIA VELASCO JIMENEZ471) SANDRA LUCIA VELASCO JIMENEZ472) RUTH GUERRERO472) RUTH GUERRERO473) KARLA FERNANDA VILLAESCUSA473) KARLA FERNANDA VILLAESCUSA

474) LORENA GUADALUPE NORIEGA474) LORENA GUADALUPE NORIEGA475) LIRIO ELIZABETH NAVARRETE475) LIRIO ELIZABETH NAVARRETE476) ALAN MONTOYA476) ALAN MONTOYA477) BERTA ELVIA LOPEZ MORENO477) BERTA ELVIA LOPEZ MORENO478) LAURA LOPEZ478) LAURA LOPEZ479) JAVIER ANDRADE479) JAVIER ANDRADE480) 480) MARIA DEL CARMEN ROMERO LLAMASMARIA DEL CARMEN ROMERO LLAMAS481) SANDRA DE LA FUENTE BECERRIL481) SANDRA DE LA FUENTE BECERRIL482) EDGAR GIL GARZA482) EDGAR GIL GARZA483) CLUDIA CERVANTES DE PEINADO483) CLUDIA CERVANTES DE PEINADO484) BERENICE JOHNSTON DEL TORO484) BERENICE JOHNSTON DEL TORO485) CRISTINA MARTINEZ MARTINEZ485) CRISTINA MARTINEZ MARTINEZ486) JOSEFINA GONZALEZ486) JOSEFINA GONZALEZ487) LUPITA MARIN RODRIGUEZ487) LUPITA MARIN RODRIGUEZ488) MARIBEL ESQUER QUIÑONEZ488) MARIBEL ESQUER QUIÑONEZ489) SELENE ESTRADA DE CORONA489) SELENE ESTRADA DE CORONA490) CLAUDIA VALDEZ CONTRERAS490) CLAUDIA VALDEZ CONTRERAS491) GUADALUPE ALVAREZ VAZQUEZ491) GUADALUPE ALVAREZ VAZQUEZ492) JUANA MARIA RODRIGUEZ ARMENDARIZ492) JUANA MARIA RODRIGUEZ ARMENDARIZ493) MAGDALENA PEREZ MORENO493) MAGDALENA PEREZ MORENO494) ROSALVA SUAREZ M.494) ROSALVA SUAREZ M.

Page 124: Un Nuevo Metodo Para Ver El ADN

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

124124

495) JORGE FRANCISCO RUIBAL COCKER495) JORGE FRANCISCO RUIBAL COCKER496) MILDRED GUADALUPE NUBES ROMO496) MILDRED GUADALUPE NUBES ROMO497) DHARMA RUIBAL NUBES497) DHARMA RUIBAL NUBES498) LUAN LUIS VARGAS MAGOS498) LUAN LUIS VARGAS MAGOS499) CESAR JAVIER PRECIADO499) CESAR JAVIER PRECIADO500) RAMIRO CAMPA CAMPA500) RAMIRO CAMPA CAMPA501) OMAR DAVID SOTO MARIN501) OMAR DAVID SOTO MARIN502) ROBERTO ESTRELLA GIL502) ROBERTO ESTRELLA GIL

20022002503) 503) MAGALY DELGADO DE GUILLOTHMAGALY DELGADO DE GUILLOTH504) MAYRA SALAZAR504) MAYRA SALAZAR505) ANA ESQUER505) ANA ESQUER506) MARIA TERESA RAMIREZ506) MARIA TERESA RAMIREZ507) OSCAR GUSTAVO VALDEZ507) OSCAR GUSTAVO VALDEZ508) MARIA EULALIA CORRAL LEON508) MARIA EULALIA CORRAL LEON509) RAFAELA CORRAL LEON509) RAFAELA CORRAL LEON510) VICTOR VIRPULLAT510) VICTOR VIRPULLAT511) ARTHUR LIPER III511) ARTHUR LIPER III512) GIN WU512) GIN WU513) MARIA DE LOURDES GARCIA DE MARTINEZ513) MARIA DE LOURDES GARCIA DE MARTINEZ544) JOSE FERNANDO TAPIA C.544) JOSE FERNANDO TAPIA C.545) ARMANDO RODRIGUEZ MOLINA545) ARMANDO RODRIGUEZ MOLINA546) KARLA SOFIA HERAS546) KARLA SOFIA HERAS547) ANA LUGO RIVERA547) ANA LUGO RIVERA548) SOCORRO FRIAS548) SOCORRO FRIAS549) TANIA FRAGOSO549) TANIA FRAGOSO550) LOREMI CAMACHO MURILLO550) LOREMI CAMACHO MURILLO551) DIANA SOSA551) DIANA SOSA552) FERNANDO RIOS552) FERNANDO RIOS553) SANDRA VILLALOBOS DE HERRERA553) SANDRA VILLALOBOS DE HERRERA554) SILVIA VILLALOBOS PEÑA554) SILVIA VILLALOBOS PEÑA555) MARTHA ALMADA DE ASTIAZARAN555) MARTHA ALMADA DE ASTIAZARAN556) PAOLA VALENCIA556) PAOLA VALENCIA557) LUPITA SUASTEGUI557) LUPITA SUASTEGUI558) FATIMA FLORES558) FATIMA FLORES559) LUISA LOURDES RODELO GOMEZ559) LUISA LOURDES RODELO GOMEZ560) ELVIA SALAZAR 560) ELVIA SALAZAR 561) DORA LUZ OBREGON PINTO561) DORA LUZ OBREGON PINTO562) YOLANDA GARCIA BALDENEGRO562) YOLANDA GARCIA BALDENEGRO563) GABRIELA MIRAZO GARCIA563) GABRIELA MIRAZO GARCIA564) CASANDRA AELLO GARCIA564) CASANDRA AELLO GARCIA565) MONICA ALEJANDRA MIRAZO GARCIA565) MONICA ALEJANDRA MIRAZO GARCIA566) AMANDA VALENZUELA DE SALAZAR566) AMANDA VALENZUELA DE SALAZAR567) CARMEN ROMO CONTRERAS567) CARMEN ROMO CONTRERAS

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

125125

568) CLAUDIA CORDOVA VALDEZ568) CLAUDIA CORDOVA VALDEZ569) MARTHA LOPEZ MILLAN569) MARTHA LOPEZ MILLAN570) PATRICIA POSADA CASTILLO570) PATRICIA POSADA CASTILLO571) MIRIAM FELIX DE SOTELO571) MIRIAM FELIX DE SOTELO572) ANDRES SOTELO572) ANDRES SOTELO573) MARTHA LILIA MUNGUIA573) MARTHA LILIA MUNGUIA574) MARTHA RIVAS SALAZAR574) MARTHA RIVAS SALAZAR575) 575) MARIA DOLORES TAPIA MARTINEZMARIA DOLORES TAPIA MARTINEZ576) ROSINA MORENO576) ROSINA MORENO577) KARLA PAZ Y PUENTE577) KARLA PAZ Y PUENTE578) MARIA JESUS ESPINOZA578) MARIA JESUS ESPINOZA579) CLAUDIA MARIA MENDOZA MONTAÑO579) CLAUDIA MARIA MENDOZA MONTAÑO580) ADRIANA SANCHEZ SOTO580) ADRIANA SANCHEZ SOTO581) JOSEFINA DEWAR VALENZUELA581) JOSEFINA DEWAR VALENZUELA582) SANDRA CONSILION VILLA582) SANDRA CONSILION VILLA583) ADRIANA CARREÑO QUIJADA583) ADRIANA CARREÑO QUIJADA584) MARTHA VERONICA MARTINEZ584) MARTHA VERONICA MARTINEZ585) MONICA ISABEL GAMEZ LEON585) MONICA ISABEL GAMEZ LEON586) NORMA CAMPOY ROSS586) NORMA CAMPOY ROSS587) MAYRA LETICIA ARELLANO FELIX587) MAYRA LETICIA ARELLANO FELIX588) DORA CELIA ROSS ARGUELLES588) DORA CELIA ROSS ARGUELLES589) MARTHA ELENA CONSILION589) MARTHA ELENA CONSILION590) KARINA LEDGAR590) KARINA LEDGAR591) PATRICIA FELIX591) PATRICIA FELIX592) ANA LOURDES MOLINA592) ANA LOURDES MOLINA593) ELIA SILVA B.593) ELIA SILVA B.594) KARLA LIDIA PRECIADO594) KARLA LIDIA PRECIADO595) AURORA HERRERA595) AURORA HERRERA596) RODRIGO MEXIA LEAL596) RODRIGO MEXIA LEAL597) OMAR SILVA CARLON597) OMAR SILVA CARLON598) EDGAR IVAN ENCINAS VELARDE598) EDGAR IVAN ENCINAS VELARDE599) MANUELITA GAMEZ599) MANUELITA GAMEZ600) MARIA LUISA DELGADO MORENO600) MARIA LUISA DELGADO MORENO601) SILVIA CAROLINA MOLINA DELGADO601) SILVIA CAROLINA MOLINA DELGADO602) GABRIELA PERALTA MORALES602) GABRIELA PERALTA MORALES603) JOSE ALFREDO MURILLO603) JOSE ALFREDO MURILLO604) DANIEL LOPEZ PERALTA604) DANIEL LOPEZ PERALTA605) LUPITA NUÑEZ NAVARRO605) LUPITA NUÑEZ NAVARRO606) MIGUEL SALAZAR606) MIGUEL SALAZAR607) ADELA BALLESTEROS607) ADELA BALLESTEROS608) ANNI LIPPER608) ANNI LIPPER609) BRADLEY MONK609) BRADLEY MONK610) RAY CESTERO610) RAY CESTERO611) LIDIA RODRIGUEZ GONZALEZ611) LIDIA RODRIGUEZ GONZALEZ612) 612) GUADALUPE GOMEZ RODRIGUEZGUADALUPE GOMEZ RODRIGUEZ613) MARIA GUADALUPE GARCIA TANORI613) MARIA GUADALUPE GARCIA TANORI614) LUZ DEL CARMEN JUAREZ RAZO614) LUZ DEL CARMEN JUAREZ RAZO

Page 126: Un Nuevo Metodo Para Ver El ADN

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

126126

615) FRANCISCO ALBERTO OTHON CONTRERAS615) FRANCISCO ALBERTO OTHON CONTRERAS616) RAQUEL ROBLES PACHECO616) RAQUEL ROBLES PACHECO617) JESUS MANUEL COSIO RIVAS617) JESUS MANUEL COSIO RIVAS618) MARINA BERENICE OCHOA CASTRO618) MARINA BERENICE OCHOA CASTRO619) CONSUELO GALLARDO619) CONSUELO GALLARDO620) ROSA MARIA VALENZUELA620) ROSA MARIA VALENZUELA621) LORENA VALENZUELA621) LORENA VALENZUELA622) ROCIO ACEVEDO622) ROCIO ACEVEDO623) ARLENE HIGUERA623) ARLENE HIGUERA624) GUADALUPE ARACELI NAVARRO624) GUADALUPE ARACELI NAVARRO625) ARMANDO RODRIGUEZ MOLINA625) ARMANDO RODRIGUEZ MOLINA626) MARCO ANTONIO RODRIGUEZ MOLINA626) MARCO ANTONIO RODRIGUEZ MOLINA627) ANA CRISTINA MOLINA627) ANA CRISTINA MOLINA628) DINORA MALDONADO RICARDEZ628) DINORA MALDONADO RICARDEZ629) VERONICA HERNANDEZ629) VERONICA HERNANDEZ630) VICTOR HUGO MARTINEZ630) VICTOR HUGO MARTINEZ631) GABRIELA GARCIA631) GABRIELA GARCIA632) BERTHA ALCARAZ632) BERTHA ALCARAZ633) ELIZABETH LEAL OJEDA633) ELIZABETH LEAL OJEDA634) PATRICIA FRANCO AZUNA634) PATRICIA FRANCO AZUNA635) MARIA JESUS VAZQUEZ635) MARIA JESUS VAZQUEZ636) SOCORRO DE RIOS636) SOCORRO DE RIOS637) ANA ALICIA GARCIA CAMPA637) ANA ALICIA GARCIA CAMPA638) MIGUEL PESQUEIRA LOPEZ638) MIGUEL PESQUEIRA LOPEZ639) DALIA ACOSTA639) DALIA ACOSTA640) SOCORRO VAZQUEZ640) SOCORRO VAZQUEZ641) NORMA ALICIA CONTRERAS641) NORMA ALICIA CONTRERAS642) BELEM CAÑIZALEZ642) BELEM CAÑIZALEZ643) EVA AMAYA GARCIA643) EVA AMAYA GARCIA644) DIANA CONTRERAS AMAYA644) DIANA CONTRERAS AMAYA645) AIDA GIL CORDOVA645) AIDA GIL CORDOVA646) 646) AIDA VAZQUEZ GILAIDA VAZQUEZ GIL647) FLORA DE DIAZ647) FLORA DE DIAZ648) MIGDALIA MATUS648) MIGDALIA MATUS649) CINTHYA MARIA FELIX GARCIA649) CINTHYA MARIA FELIX GARCIA650) PABLO JOSE NAVARRO ARAGON650) PABLO JOSE NAVARRO ARAGON651) CLAUDIA GARCIA651) CLAUDIA GARCIA652) SIMONA GARCIA652) SIMONA GARCIA653) ROMAN GASCA653) ROMAN GASCA654) BERNARDETTE BONNASOUX ALCARAZ654) BERNARDETTE BONNASOUX ALCARAZ655) MARCO ANTONIO TRUJILLO SILVA655) MARCO ANTONIO TRUJILLO SILVA656) GLORIA MARIA QUIROZ QUIJADA656) GLORIA MARIA QUIROZ QUIJADA657) RAQUEL DEWAR657) RAQUEL DEWAR658) MARCO ANTONIO CASTILLO658) MARCO ANTONIO CASTILLO659) DAVID RODRIGUEZ659) DAVID RODRIGUEZ660) ESPERANZA BENITEZ660) ESPERANZA BENITEZ661) HECTOR VILLASEÑOR661) HECTOR VILLASEÑOR

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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662) MONICA RAMIREZ 662) MONICA RAMIREZ 663) MARCO ANTONIO RIVERA663) MARCO ANTONIO RIVERA664) SOLEDAD DURAZO664) SOLEDAD DURAZO665) ANGELICA NAVA ANDRADE665) ANGELICA NAVA ANDRADE666) JOSE ALBERTO GONZALEZ666) JOSE ALBERTO GONZALEZ667) ALIDA MARIANA BECERRA667) ALIDA MARIANA BECERRA668) EDNA MARIA JIMENEZ DE DIAZ668) EDNA MARIA JIMENEZ DE DIAZ669) CONCEPCION VALDENEGRO LOPEZ669) CONCEPCION VALDENEGRO LOPEZ670) NORMA NEGRETE MUÑOZ670) NORMA NEGRETE MUÑOZ

20032003671) CARLOS GUTIERREZ FELIX671) CARLOS GUTIERREZ FELIX672) LUIS MENDOZA ARREOLA672) LUIS MENDOZA ARREOLA673) MARICELA MUNGUIA FLORES673) MARICELA MUNGUIA FLORES674) MARIA DE LOURDES HERRERA SANCHEZ674) MARIA DE LOURDES HERRERA SANCHEZ675) NANCY LEON BLANCO675) NANCY LEON BLANCO676) LAURA ANGELICA GONZALEZ676) LAURA ANGELICA GONZALEZ677) ANY TORRES677) ANY TORRES678) LUZ DEL CARMEN PACHECO GALINDO678) LUZ DEL CARMEN PACHECO GALINDO679) IRMA MOLINA MUNGUIA679) IRMA MOLINA MUNGUIA680) CLAUDIA RAMOS680) CLAUDIA RAMOS681) MARIANA MENDOZA LUNA681) MARIANA MENDOZA LUNA682) WENDY ELLIS MENDOZA682) WENDY ELLIS MENDOZA683) LETICIA SABIÑON683) LETICIA SABIÑON684) AIDA QUIROZ CHAPARRO684) AIDA QUIROZ CHAPARRO685) EMILIANO MARTINEZ VILLALOBOS685) EMILIANO MARTINEZ VILLALOBOS686) MARIAN ELLIS MENDOZA686) MARIAN ELLIS MENDOZA687) PATRICIA RAMOS C.687) PATRICIA RAMOS C.688) BRIGIDA ANTUNEZ ORTEGA688) BRIGIDA ANTUNEZ ORTEGA689) MARIANA MEDINA ANTUNEZ689) MARIANA MEDINA ANTUNEZ690) MARIA DE LOS ANGELES CANEVETT690) MARIA DE LOS ANGELES CANEVETT691) ALEJANDRA RAMOS691) ALEJANDRA RAMOS692) MARIA ROSARIO CUEVAS692) MARIA ROSARIO CUEVAS693) MARIA MEDRANO GUTIERREZ693) MARIA MEDRANO GUTIERREZ694) MARIA DEL ROSARIO TRUJILLO GARCIA694) MARIA DEL ROSARIO TRUJILLO GARCIA695) ANA MARIA CRUZ DE ESTRELLA695) ANA MARIA CRUZ DE ESTRELLA696) LAURA PATRICIA SANCHEZ NAVARRO696) LAURA PATRICIA SANCHEZ NAVARRO697) PAULA GONZALEZ PALACIOS697) PAULA GONZALEZ PALACIOS698) FERNANDO LEAL698) FERNANDO LEAL699) BLANCA SUSANA ROBLES DE GARCIA699) BLANCA SUSANA ROBLES DE GARCIA700) MARTHA ALICIA GASTELUM VALENCIA700) MARTHA ALICIA GASTELUM VALENCIA701) VICTORIANO SALCIDO VALENZUELA701) VICTORIANO SALCIDO VALENZUELA702) MARIA DEL CARMEN MARTINEZ PAZ702) MARIA DEL CARMEN MARTINEZ PAZ703) MARICELA SANCHEZ VALENCIA703) MARICELA SANCHEZ VALENCIA704) ROBERTO TORRES704) ROBERTO TORRES

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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705) ROBERTO ELLIS MUÑOZ 705) ROBERTO ELLIS MUÑOZ 706) LISETTE RODRIGUEZ706) LISETTE RODRIGUEZ707) LIDIA CAMOU707) LIDIA CAMOU708) GABRIELA PAULA DUARTE GONZALEZ708) GABRIELA PAULA DUARTE GONZALEZ709) IRIS PAULINA DUARTE GONZALEZ709) IRIS PAULINA DUARTE GONZALEZ710) 710) ANABELLA AVILA QUIROZANABELLA AVILA QUIROZ711) ARCELIA QUIROZ711) ARCELIA QUIROZ712) LETICIA MARTINEZ P.712) LETICIA MARTINEZ P.713) MELISA RUIZ DE PADILLA713) MELISA RUIZ DE PADILLA714) MARIA ZEPEDA ROMO714) MARIA ZEPEDA ROMO715) PATRICIA SANCHEZ715) PATRICIA SANCHEZ716) ALMA ALICIA CORONADO E.716) ALMA ALICIA CORONADO E.717) PATRICIA SORTILLON717) PATRICIA SORTILLON718) ALEJANDRO MORALES VILLALOBOS718) ALEJANDRO MORALES VILLALOBOS719) CARMEN JULIA DE HERRERA719) CARMEN JULIA DE HERRERA720) ENEDINA BAUTISTA GONZALEZ720) ENEDINA BAUTISTA GONZALEZ721) ALMA ROSA CAZARES721) ALMA ROSA CAZARES722) ELSA VALENCIA722) ELSA VALENCIA723) MARGARITA ANDRADE CAÑEZ723) MARGARITA ANDRADE CAÑEZ724) JUAN CORRALES724) JUAN CORRALES725) DIANA MIRANDA725) DIANA MIRANDA726) ENRIQUE RODRIGUEZ726) ENRIQUE RODRIGUEZ727) CAROLINA QUIROZ727) CAROLINA QUIROZ728) MIGUEL RODRIGUEZ728) MIGUEL RODRIGUEZ729) BETTINA PESQUEIRA DE ESCALANTE729) BETTINA PESQUEIRA DE ESCALANTE730) GLORIA MAGDALENA MENDOZA RUIZ730) GLORIA MAGDALENA MENDOZA RUIZ731) ROBERTO CALVO RUIZ731) ROBERTO CALVO RUIZ732) MARGARITA CASTRO VALENCIA732) MARGARITA CASTRO VALENCIA733) BLANCA SOSA AGUILAR733) BLANCA SOSA AGUILAR733) VIRGINIA PALACIOS HUIZAR733) VIRGINIA PALACIOS HUIZAR734) CLAUDIA OBREGON734) CLAUDIA OBREGON735) BRENDA DINORA DURAZO QUIJADA735) BRENDA DINORA DURAZO QUIJADA736) MARIA TERESA FLORES DE OROZCO736) MARIA TERESA FLORES DE OROZCO737) ALBERTO OROZCO GARZA737) ALBERTO OROZCO GARZA738) ERICKA JIMENEZ CRUZ738) ERICKA JIMENEZ CRUZ739) OSWALDO SILVA PALOMARES739) OSWALDO SILVA PALOMARES740) BLANCA ROSA GASTELUM MENDEZ740) BLANCA ROSA GASTELUM MENDEZ741) SAGRARIO GALLARDO DE GAMEZ741) SAGRARIO GALLARDO DE GAMEZ742) HIPOLITA PINEDA FELIX742) HIPOLITA PINEDA FELIX743) MARIA AMPARO TAPIA DE IBARRA.743) MARIA AMPARO TAPIA DE IBARRA.

2000 (CONTINUACION)2000 (CONTINUACION)744) 744) IRMA VILLEGAS DE CANSECOIRMA VILLEGAS DE CANSECO745) JAVIER EDUARDO CANSECO GIRON745) JAVIER EDUARDO CANSECO GIRON746) KARLA MURGUIA DE FONTES746) KARLA MURGUIA DE FONTES747) ANA JULIA CAMPILLO747) ANA JULIA CAMPILLO

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GLORIA ELENA LEÓN PAZGLORIA ELENA LEÓN PAZENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETAENRIQUE RODRÍGUEZ ZAZUETA

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748) MARIA GUILLERMINA CASTILLO VILLEGAS748) MARIA GUILLERMINA CASTILLO VILLEGAS749) LOURDES URUCHURTU749) LOURDES URUCHURTU750) CARMELITA QUEVEDO750) CARMELITA QUEVEDO751) JIM HUISH751) JIM HUISH752) ANGELICA OROZCO DE PERALES752) ANGELICA OROZCO DE PERALES753) ANA JULIA LOPEZ CAMPILLO753) ANA JULIA LOPEZ CAMPILLO754) BERENICE LIZARDI DE DUARTE754) BERENICE LIZARDI DE DUARTE755) ALMA LORENA BUSTAMANTE755) ALMA LORENA BUSTAMANTE756) ANA LORENA CASTILLON BARRAZA756) ANA LORENA CASTILLON BARRAZA757) LIDIA DE MANCILLAS757) LIDIA DE MANCILLAS758) MARCELA DIAZ FIGUEROA758) MARCELA DIAZ FIGUEROA759) MARIA LUISA SEPULVEDA MENDEZ759) MARIA LUISA SEPULVEDA MENDEZ760) CLARISA VALENZUELA DE VAZQUEZ760) CLARISA VALENZUELA DE VAZQUEZ761) IRENE GARCIA DE LEON761) IRENE GARCIA DE LEON

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BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIA

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