Trombocitopatías

Iván Palomo G.

Universidad de TalcaFacultad de Ciencias de la Salud

Depto.de Bioquímica Clínica e Inmunohematología

Patologías de las plaquetas Del número (Trombocitopenias)

producción destrucción

Inmune (Auto y AloAc)

De la función (Trombocitopatías) adhesión agregación secreción

Glicoproteína de membrana plaquetariaGlicoproteína PM Ligando Reconoce (kDa) RGD

Ia/IIa 167/157 colágeno –Ic/IIa 134,27/157 fibronectina +Ic´/IIa laminina –

IIb/IIIa 132,23/90 fibrinógeno + Fibronectina Vitronectina Colágeno y FvWVnRa/IIIa Vitronectina Fibrinógeno y FvW –Ib/IX 143,23/17-22 FvWIV (IIIB) colágeno trombospondinaV 82 sustrato de trombina

Alteraciones funcionales de las plaquetas

Hereditarias

Adquiridas

Patologías hereditarias de la hemostasia primaria

Alteraciones plaquetariasAlteraciones plaquetarias Adhesión Enf. de Bernard Soulier Agregación Enf. de Glanzmann Secreción Síndrome de las plaquetas grises

Alteración metabol. Ac. araquidónicoDefecto actividad procoagulante plaquet.

Alteraciones plasmáticas Enf. de Von Willebrand Afibrinogenemia

Alteración de la pared vascular

Clasificación de las Trombocitopatías congénitas

Alteraciones en la adhesión Síndrome de Bernard-Soulier (SBS): Defecto en GPIb-IX-VEnfermedad de seudo von Willebrand : Defecto en GPIb-IX-VDeficiencia en la interacción con colágeno: Defecto en GPIa-IIa o GPVI

Defectos de la agregación Tromboastenia de Glanzmann: Defecto en GPIIb-IIIa

Deficiencias de los gránulos plaquetarios y/o secreciónDeficiencia de los gránulos (pool de almacenamiento): α: Síndrome de plaqueta gris δ (Gr. densos) α y δSíndrome de Quebec

Alteraciones en la transmisión de señales de activaciónDeficiencias de receptores de agonistasDefectos en proteínas GDefectos en enzimas efectoras (fosfolipasas, nucleotido ciclasas)Defectos de la movilización de segundos mensajeros (IP3, calcio, etc.)Defectos específicos en la vía metabólica del ácido araquidónico

Defectos de la actividad procoagulante de las plaquetasSíndrome de Scott; Síndrome de Stormorken

Otros defectosSíndrome de Wiskott-AldrichSíndrome de Down, macrotrombocitopenias constitucionales

Enf. de Bernard Soulier

Genotipo Mutación Fenotipo Alteración proteica

GPIb

Homocigosis 103Adel Deleción Lys19Arg codón 21 codón stop

HeterocigosisTransm. dominante

259CT Mutación puntual Leu57PheGPIb muy sensible a proteasas

Doble heterocigosis T283C Mutación puntual Cys65ArgProteína que no liga FVW

Homocigosis T317del Deleción Leu76ArgCodón 125stop

HomocigosisDoble heterocigosis

476TC Mutación puntual Leu129Pro129Unión deficiente de FVW

HomocigosisDoble heterocigosis

C557T Mutación puntual Ala156Val Variante Bolzano, unión anormal de FVW, normal de trombina

Doble heterocigosis A595-A630del Deleción múltiple Glu181LysProteína no funcional

Homocigosis C625-C627del Deleción Leu179delVariante Nancy I, pérdida de función.

Homocigosis 715TA Mutación puntual Cys209Ser209GPIb no se une a GPIb

Doble heterocigosis 805AG Mutación puntual Met239ValMayor afinidad por FVW

Enfermedad seudo-von Willebrand

Homocigosis T972-G975del Deleción Thr294stop

Doble heterocigosis G1119A Mutación sin sentido Trp343stop

Doble heterocigosis T1418ins Inserción Cambio de fase, terminación prematura

Homocigosis C1421A Mutación sin sentido Ser444stop

HomocigosisDoble heterocigosis

A1438del Deleción Cambio de fase, Terminación prematura

HomocigosisDoble heterocigosis

A1565-T1566del Deleción Cambio de fase en Tyr492, terminación prematura, síntesis de porción citosólica de GPIb

Homocigosis G1584A Mutación sin sentido Trp498stop

GPIb

Doble heterocigosis C133G Mutación puntual Cambio del sitio de unión de GAA en el promotor

Homocigosis G159A Mutación puntual Trp21stop

Doble heterocigosis C336del Deleción Terminación prematuraDeleción de un alelo

Doble heterocigosis A360G Mutación puntual Tyr88Cys, GPIb no asociada a GPIb

Doble heterocigosis G419C Mutación puntual Ala108ProGPIb no asociada a GPIb

GPIX

Homocigosis T37G Mutación puntual Cys8Arg

Doble heterocigosis A77G Mutación puntual Asp21Gly

HomocigosisHeterocigosis

A143G Mutación puntual Asn45Ser

Homocigosis T179C Mutación puntual Phe55ser

Homocigosis G233A Mutación puntual Cys73Tyr

Homocigosis G305A Mutación puntual Cys97Tyr

Homocigosis G393A Mutación sin sentido Trp126stop

Sínd. Bernard-Soulier

Alteraciones moleculares

Enfermedad de Glanzmann

Genotipo Exon Mutación Fenotipo Alteracion proteica

Homocigoto 2 IVS2(+1)GT Deleción fuera de lectura Terminación prematura

Homocigoto 4 563CT Mutación puntual Ser188Leu(Ser162Leu)

Homocigoto 9 IVS9ins3-4kb Inserción fuera de lectura Sin transcripción

Homocigoto 5 718CT Mutación puntual Arg240WTrp(Arg214Trp)

Homocigoto 4 433GT Mutación puntual Asp145Tyr(Asp119Tyr)

Homocigoto 9 1199GA Mutación puntual Cys400Tyr(Cys374Tyr)

Homocigoto 5 719GA Mutación puntual Arg240Gln(Arg214 Gln)

Homocigoto 3 262CT Mutación sin sentido Arg88X(Arg62X)

Heterocigoto Doble 1 IVS1-5Aluinv15kb + IVS1del11kb

Inversión/Deleción Sin transcripción

5 IVS5(+1)GA Deleción/Inserción fuera de lectura Terminación prematura

Heterocigoto Doble 6 917AC Mutación puntual His306Pro(His280Pro)

11 1757GT Mutación puntual Cys586Phe(Cys560Phe)

Homocigoto 8 1053-1058del Deleción/Inserción, en lectura 351-353del Met351ins

Homocigoto 11 1702TC Mutación puntual Cys568Arg(Cys542Arg)

Homocigoto 13 2031-2041del Deleción fuera de lectura Terminación prematura

Homocigoto 9 IVS9Alu-2163 o 2166del11.2kb Deleción fuera de lectura Terminación prematura

Heterocigoto Doble 6 847delGC Deleción fuera de lectura Terminación prematura

6 863TC Mutación puntual Leu288Pro(Leu262Pro)

Homocigoto 4 428TG Mutación puntual Leu143Trp(Leu117Trp)

Homocigoto 11 1758 TC Mutación puntual Cys586Arg (Cys560Arg)

Homocigoto 4 433GA Mutación puntual Asp145Asn(Asp119Asn)

Homocigoto 6 917AC Mutación puntual Hys306Pro(Hys280Pro)

Heterocigoto Doble 15 2332TC Mutación puntual Ser778Pro(Ser752Pro)

Desconocido Desconocido

Heterocigoto Doble 11 1791delT Deleción fuera de lectura Sin transcripción

15 2248CT Mutación sin sentido Arg750X(Arg724X)

Homocigoto 9 1260G-A+1143C A Deleción/Inserción, en lectura Lys(350)-Ser(396)del/Val(350)Ser(351)ins

Homocigoto 5 725GA Mutación puntual Arg242Gln(Arg216Gln)

Homocigoto 12 1924GT Mutación sin sentido Gln642X(Gln616X)

Homocigoto 5 718CT Mutación puntual Arg240Trp(Arg214Trp)

Heterocigoto Doble 6 917AC Mutación puntual Hys306Pro(Hys280Pro)

11 1813GA Mutación puntual Gly605Ser(Gly579Ser)

Enf. de Glanzmann

Mutaciones de GPIIIa

de GPIIb

Asociadas a enfermedades sistémicasUremiaInsuficiencia hepáticaAnticuerpos antiplaquetariosCirugía con circulación extracorpóreaLeucemias y mielodisplasias Disproteinemias

Por drogas, alimentos, especies y vitaminas

Trombocitopatías adquiridas

Uremia: Alteraciones de la función plaquetaria

Defecto de agregación plaquetaria

Defecto de secreción plaquetaria

Aumento de actividad de adenilciclasa, de cAMP y cGMP plaquetarios

Disminución de ADP, ATP y serotonina granulares

Defecto en la liberación de calcio intraplaquetario

Defecto en metabolismo del araquidonato, con síntesis disminuida de TxA2

Defecto de GPs Ib y IIb-IIIa

Drogas y otras sustancias que inhiben la función plaquetariaAntiinflamatorios no esteroidalesAspirinaIndometacina, naproxeno, ibuprofeno, diclofenaco, fenilbutazona, otrosSustancias desarrolladas primariamente como drogas antiplaquetariasInhibidores del receptor de ADP: ticlopidina, clopidogrelAntagonistas de GPIIb-IIIa: anticuerpos monoclonales (abciximab), peptidos cíclicos (epitifibatide), peptidomiméticos (tirofiban, lamifiban)Antibióticos-lactámicos: penicilinas, cefalosporinas.Otros: nitrofurantoínas, miconazoleDrogas que afectan la hemostasia: anticoagulantes, fibrinolíticos, antifibrinolíticos.HeparinaEstreptoquinasa, activador tisular del plasminógeno, uroquinasa Otros: sulfato de protamina, ácido ε-aminocaproicoDrogas que aumentan el cAMP y cGMP plaquetariosDipiridamole, prostaciclina y análogosNitroglicerina y símiles, nitroprusiatoOtras drogas usadas en enfermedades cardiovascularesDiltiazem, nifedipino, nimodipino, verapamil, quinidinaExpandidores de volumenDextrano, hidroxietil-almidónDrogas psicotrópicasAmitriptilina, imipramina, nortriptalina, clorpromazina, flufenazina, prometazina, trifluoperazina, haloperidolAnestésicosLocales: procaína, tetracaína, cocaína, butacaína, dibucaína, otras...Generales: halotanoDrogas oncológicasDaunorrubicina, mitramicina, BCNU, quimioterapia combinada, vincristina, otrosAntihistamínicosClorfeniramina, difenilhidramina, otros.Medios de contrasteIopamidol, iotalamato, ioxalato, diatrizoatoEtanolAlimentos, especies y vitaminasÁcidos grasos omega-3, extracto de cebolla, ajoene, cúrcuma, comino, vitaminas E y C, otros.

Métodos de estudio

Tiempo de sangría

Agregación plaquetaria

Citometría de flujo

Secreción plaquetaria

Tiempo de sangría

Platelet Function AnalyserPFA-100

AGREGACIÓN PLAQUETARIA

*Paciente sin fármacos

Luz

PRP* 2,5x105

citrat.Fibrin.Ca 2+

Agonista

barra magn.

1 Detector

minutos

% lu

z tr

ansm

itida

CD61-PE

ESTUDIO SECRECIÓN PLAQUETARIA (Método : Secreción de 14C 5-HT)

14C 5-HT

PRP

Agonistas

AGREGÓMETRO

Formald.,EDTA

Centrif.

Formald.,EDTA

Centrif.

37ºC 4ºC

S. fisiol.T

A-SFT-SF

x 100

6000* - 1000*

10000* - 1000*

= 55,6%

* cpm

x100

PPPSF

PPPSFA

SF

PPP

PPP

PRP