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8/19/2019 Trabajo Práctico de Laboratorio N1 y 2fiinal.pdf

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Trabajo Práctico Nº 1 y 2Jacqueline Chanaday, Yanina Mazzocco, Marianela Rodriguez

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Trabajo Práctico de Laboratorio N° y !

TOMA Y TRATAMIENTO DE MUESTRAS – RESONANCIA MAGNÉTICA NUCLEAR CUANTITATIVA (qRMN)

En el siguiente informe de laboratorio se utilizó la resonancia magnética nuclear (RMN) para determinar la presencia de urbiprofeno en un extracto procedente de uncomprimido comercial, Clinadol Forte, cuyo procedimiento de extracción se diagramópor los alumnos. or otro lado, se empleó la t!cnica de resonancia magnética nuclear cuantitativa (qRMN) para cuanti"car glifosato presente en tres diferentes muestras(suelo contaminado, #erbicida comercial


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$isolución de un comprimido en acetato de etilo

%onicado

Extracción

%ecado

&iltrado

E'aporación del sol'ente


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Parte I: EXTRACCIÓN DE F !R"I#R$FEN$ DE%DE !NAF$RM! ACIÓN C$MERCIA

1) Objetivos

• $iagramar un procedimiento experimental para la extracción de uribuprofeno enun comprimido comercial.

• nalizar el espectro *+ del producto "nal de extracción.• -omparar resultados con otros procedimientos experimentales.

2) P o!e"i#ie$to E%&e i#e$t'

El rocedimiento Experimental se diagramó por los alumnos ue presentan el siguienteinforme, el cual se muestra en el siguiente diagrama de &u'o

Figura 1: Diagrama de &u'o del (rocedimiento e)(erimental im(licado en la e)tracci*nde &ur+i(ro eno a (artir de un com(rimido comercial-


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nicialmente se tomó un comprimido comercial del medicamento Clinadol Forte de(2,3214 ± 2,222 ) g de masa y se lo sumergió, aproximadamente, en 122 m5 de acetatode etilo. 5uego, se realizo una sonicación por 16 minutos para facilitar la disolución delcomprimido en el sol'ente. continuación, con el ob7eti'o de eliminar todos losexcipientes como talco, almidón o dem s, se #icieron 0 extracciones en donde para laprimera se utilizó aproximadamente 122 m5 de agua (a los cuales se le agrego a-lpara e'itar la formación de emulsiones, y de esta forma facilitar la extracción) y en lasdos "nales 9-l (preparado a partir de 9-l 0:;, #aciendo una solución 1/12


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• En la "gura = se encuentra el espectro de correlación #omonulear (9,9, ->%D).En donde se comprobó ue existe correlación entre los protones met?licos y losmet?nicos. ero, dado ue los protones arom ticos pertenecen a otro sistema deesp?n, los mismos, no se correlacionan con ningAn otro.

• En la "gura : se obser'a el espectro 9+ -, el cual es un espectro decorrelación #eteronuclear a larga distancia entre protones y carbonos de lamol!cula. $ic#a correlación a largo alcance puede llegar #asta dos o tresenlaces, saltea #eteroatomos, y presenta di"cultades en su an lisis ya ueposee restricciones geom!tricas, ue pueden permitir o no ue la correlaciónocurra. %e e'idencian las mismas correlaciones ue para el caso anterior.

• En la "gura 8, se presenta el espectro 9%F- (Espectroscop?a de -orrelación9eteronuclear de un Gnico -uanto), el cual muestra los carbonos directamenteconectados.

• En la "gura 4 se presenta el espectro 14& *+ del extracto de urbiprofeno ue

obtu'o otro grupo de estudiantes ue ya se estaba analizando en los anterioresespectros. El cual es muy limpio, entonces esto indica ue las impurezas uepresenta la muestra no contienen Aor. or lo cual, si se le #ubiera agregado unest ndar a la muestra, se #ubiera podido medir la cantidad de urbiprofeno uese extra7o.

@ras estos an lisis, reci!n se puede asegurar ue en el extracto se e'idenció lapresencia del compuesto de inter!s, el urbiprofeno.


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Parte II: C!ANTIFICACIÓN #$R qRMN

A1- EXTRACCI$N DE 2 IF$%AT$ DE %!E $

1) Objetivos

• $eterminar la concentración de glifosato de una muestra de suelo real,aplicando un procedimiento utilizado en laboratorios anal?ticos certi"cados.

• @raba7ar la muestra de la misma manera ue un laboratorio anal?tico de calidad.• nalizar el espectro *+ de cada muestra, y cuanti"car el glifosato presente

en cada una.

*) C'"e$' "e ! sto"i'

En la siguiente imagen se muestra la cadena de custodia elaborada para elan lisis de la muestra de tierra


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3) Res t'"os

$ebido a un error experimental de los operadores, se realizo solamente elprocedimiento experimental planteado en la gu?a de Tra+a'os #r0cticos N3. para lamuestra de tierra control , la cual no estaba contaminada con el pesticida de inter!s, el

glifosato.

-omo se obser'a en la Figura .4 del Ane)o , solo esta presente en el espectro de(zgpg 02) 01 *+ la seBal correspondiente al est ndar ue se empleó ( a 0 >3.1 9 >).

or lo cual, segAn el resultado #allado, la matr?z (el suelo) no estar?a aportandofosfatos, o no al menos una cantidad lo su"cientemente signi"cati'a como para uesea detectada por dic#a t!cnica empleada.

"1-M!E%TRA DE /ER"ICIDA C$MERCIA , 5

C1-DE 2 IF$%AT$ DE 2RAD$ T6CNIC$

+) Objetivos

• nalizar el espectro *+ de cada muestra, y cuanti"car el glifosato presenteen cada una.

*) P o!e"i#ie$to e%&e i#e$t'

El procedimiento experimental no se detalla, ya ue este se encuentra explicado en la#o7a de traba7os pr cticos de la materia.

,) Res t'"os

l igual ue en el caso anterior, correspondiente a la HE )tracci*n de gli osato delsuelo7 , solo se analizaron los espectros desacoplados en fósforo, la aclaracióncorrespondiente se encuenta en el EI>.

Muestra de herbicida comercial:

@ras el an lisis de los datos experimentales, para lo cual se aplico un programa decomputadora llamado MestRe , se obtu'o el siguiente resultado


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Glifosato de grado técnico:

@ras el an lisis de los datos experimentales, para lo cual se aplico un programa decomputadora llamado Manova , se obtu'o el siguiente resultado


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CONCLUSIONES

En el presente informe de laboratorio se mostraron los resultados obtenidos al aplicarla t!cnica de resonancia magn!tica nuclear para la identi"cación de compuestos, comoas? tambi!n para la cuanti"cación.

En una primera parte, se lo aplica para determinar la presencia de urbiprofeno,compuesto de inter!s, en un extracto ue se obtu'o de un un comprimido comercialdel medicamento Clinadol Forte . El procedimiento experimental aplicado fuediagramado por los alumnos. @ras el an lisis de los resultados se concluye, respecto aesta primera etapa experimental, lo siguiente

• El extracto presenta impurezas, ya ue en el espectro de la 8gura 9 :Es(ectro ;g


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• En la segunda, se determino la cantidad de glifosato presenta en un #erbicidacomercial, 2laco)an . El 'alor #allado fue de 13,0 g 100m! , mientras ue el'alor ue se informa en el producto es de "3,# g 100m!$ Esta diferencia de'alores puede deberse a un error experimental, ( ue el operador #aya cometidoalgAn error experimental como por e7emplo colocar menos cantidad del#erbicida ue la re uerida segAn el procedimiento experimental, mal pipeteo,etc) o puede deberse a un error en el an lisis de los datos al aplicar el programacomputacional MestRe .

• or Altimo, se identi"có y cuanti"có glifosato de grado t!cnico. En donde el'alor #allado fue del ",%#&'$

Esta Altima etapa no presenta grandes di"cultades en cuanto a las t!cnica empleadasen el laboratorio, ya ue por un lado los procedimientos experimentales ya estabanestablecidos, y adem s estos eran de f cil aplicación.


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Figura ": Estructura del &ur+i(ro eno-

Figura *: Estructura del talato 0cido de (otasio-

ara el urbiprofeno, compuesto cuya estructura se obser'a en la "gura 3, se obser'antres tipos de seBales a grandes rasgos

1. -orrespondiente a los protones arom ticos. 9ay cuatro tipo de protonesarom ticos, los cuales se marcaron en la "gura 3, esto se debe a ue paraalgunos grupos de protones sus entornos u?micos resultan similares, entoncesoriginar?an corrimientos u?micos similares. $ada su naturaleza de serarom ticos, es de esperar ue sus corrimientos u?micos sean altos, entre :


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( ue originan cuatro seBales distintas ya ue sus entornos u?micos no sone ui'alentes) son arom ticos (dos de ellos integran para un solo protón y se obser'ancomo un dobleteC y los otros dos integran para un solo protón pero se obser'an comotripletes ya ue tienen dos protones 'ecinos) y el otro protón al ser cido, dependiendode las condiciones experimentales es si puede llegar a obser'arse o no.

ero dado ue se obser'an un gran nAmero de seBales en el espectro presentado en la"gura tres, no se les asigno un grupo de picos espec?"co a cada seBal ue se nombroanteriormente para ambos compuestos, ya ue para #acer esto con certeza deber?acontarse con un espectro de ambos compuestos puros, analizados ba7o las mismascondiciones experimentales.

continuación se presenta el espectro ; . / RMN del e)tracto de &ur+i(ro eno, q ue seobtu'o a partir del procedimiento experimental ue aplicaron otros alumnos.

Figura *: Es(ectro ;g


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Figura %: Es(ectro C$% del e)tracto de &ur+i(ro eno, que o+tuvo otro gru(o de estudiantes,los cuales a(licaron un (rocedimiento e)(erimental di erente-

Figura +: Es(ectro /M"C del e)tracto de &ur+i(ro eno, que o+tuvo otro gru(o de estudiantes,los cuales a(licaron un (rocedimiento e)(erimental di erente-


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Figura#: Es(ectro /%BC del e)tracto de &ur+i(ro eno, que o+tuvo otro gru(o de estudiantes,los cuales a(licaron un (rocedimiento e)(erimental di erente-


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Figura &: Es(ectro . F RMN del e)tracto de &ur+i(ro eno, que o+tuvo otro gru(o de estudiantes,los cuales a(licaron un (rocedimiento e)(erimental di erente-

Parte II: C!ANTIFICACIÓN #$R qRMN

C!ANTIFICACIÓN #$R qRMN DE !NA M!E%TRA DE %!E $ C$NTAMINAD$ C$N2 IF$%AT$, /ER"ICIDA C$MERCIA , DE 2 IF$%AT$ DE 2RAD$ T6CNIC$

ara la cuanti"cación se empleó la siguiente relación matem tica en ambos casos

Entonces, dado ue tras el an lisis de los espectros, se toma el rea del est ndar iguala uno, y ya ue la cantidad de fósforos presentes en ambas mol!culas es igual a uno,se llega a la siguiente expresión "nal


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• Muestra de suelo control:

Figura 10: Es(ectro ;g(g


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Figura11: Es(ectro os *ro desaco(lado (ara la muestra de er+icida comercial, tras el (rocesado de

los datos- %e muestra el (ico corres(ondiente al gli osato-

n lisis de los 'alores #allados

Glifosato de grado técnico:


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Figura12:

Es(ectro os *ro desaco(lado (ara la muestra de gli osato de grado técnico, tras el (rocesado delos datos- %e muestra el (ico corres(ondiente al gli osato-

n lisis de los 'alores #allados

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