técnicas randox

OF 3

ALBUMINA (ALB) Verde de Bromocresol

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

La determinación cuantitativa in vitro de albúmina en suero y

plasma. Este producto es adecuado para su utilización de forma

manual y en el analizador Rx Monza.

Cat. No.

AB 362 R1. BCG Concentrado 6 x 13.5 ml

6 x 100 ml CAL Patrón 1 x 5.5 ml

SIGNIFICADO CLINICO (1)

La albúmina es la proteína sérica más abundante representando

el 55-65% de las proteinas totales. Se sintetiza en el hígado y

tiene una vida media de 2 a 3 semanas. Las principales funciones biológicas de la albúmina son mantener

el equilibrio de agua en suero y plasma, transportar y almacenar

una amplia variedad de ligandos ej: acidos

grasos,calcio,bilirrubina y hormonas como tiroxina. La albúmina

también es una fuente endógena de aminoácidos.

La hipoalbuminemia está asociada con las siguientes condiciones

:analbuminemia; sintesis deteriorada de albúmina en el higado;

enfermedades hepaticas; malnutrición o malabsorción; shock

generalizado; quemaduras o dermatitis; enfermedades renales e

intestinales .La hiperalbuminemia tiene poca relevancia

diagnóstica excepto tal vez en deshidratación.

PRINCIPIO(2)

La medición de albúmina en suero se basa en su unión

cuantitativa con el indicador 3,3',5,5'-tetrabromo-m cresol

sulfontaleina (verde de bromocresol BCG). El complejo

albúmina-verde de bromocresol presenta una absorción máxima

a 578 nm, siendo la absorbancia directamente proporcional a la

concentración de albúmina en la muestra.

PREPARACION Y EXTRACCION DE LA MUESTRA

Suero, plasma heparinizado o plasma con EDTA. Se pueden

utilizar los procedimientos normales de recogida y

almacenamiento del suero para las muestras que se vayan a

analizar con este método. El suero es estable durante 3 días a

una temperatura de entre 2 y 8 C, o durante 6 meses a -20C.

COMPOSICIÓN DEL REACTIVO

Componentes Concentración inicial de las soluciones

R1. Verde de Bromocresol (BCG) concentrado

Tampón succinato 75 mmol/l, pH 4.2

Verde de bromocresol (BCG) 0.15 mmol/l

Brij 35

Conservante

CAL Patrón Especifico para cada lote

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD

Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar

las precauciones normales necesarias, que se requieren al

manejar reactivos de laboratorio.

Atención: Patrón

El material de origen humano del que se deriva este producto ha

sido analizado a nivel de donante para el anticuerpo del Virus de

Inmunodeficiencia Humano (HIV 1, HIV 2), el Antígeno de

Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y el anticuerpo del Virus de

Hepatitis C (HCV) y se ha encontrado que es NO-REACTIVO.

Los métodos utilizadon están aprobados por FDA.

Sin embargo, dado que ningún método puede ofrecer una

seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este

material y todas las muestras de pacientes se deberán manejar

como posibles transmisores de enfermedades infecciosas y

eliminar apropiadamente.

Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se desean.

Los reactivos deben utilizarse solamente para su

propósito por personal de laboratorio cualificado, y bajo

condiciones de laboratorio apropiadas.

ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO Y

DEL PATRON

R1. Concentrado BCG

Diluya el contenido de una botella con 87 ml de agua

destilada. Estable durante 3 meses si se conserva entre

+15 y +25C.

CAL. Estandard

Contenido listo para su uso. Etable hasta la fecha de

caducidad si se conserva entre +15 y +25C.

MATERIALES SUMINISTRADOS

Concentrado BCG

Patron Albumina

MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS

Pipetas para dispensar volumenes 10 l y 3,0 ml.

Cronómetro y baño de agua o bloque de calentamiento para

mantener la temperatura entre 20 - 25ºC.

Espectrófotómetro con una capacidad de longitud de onda de

600 a 650 nm

Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y Nivel

3 (No. Cat. HE 1532)

Sérum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351).

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL AB 362

PROCEDIMIENTO(2)

Utilice H2O de doble destilación para realizar una nueva

calibración de la ganancia en el modo cubeta. Seleccione ALB en

la pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a cabo un blanco de

agua de la forma indicada.

Pipetee en una cubeta:

Blanco de reactivo S0 Patrón S1 Muestra

H2O de doble destilación 3 μl - -

Patrón - 3 μl -

Muestra - - 3 μl

Reactivo 1000 μl 1000 μl 1000 μl

Mézclelo e incúbelo durante 20 minutos a 20-25 oC o durante

10 minutos a 37 oC.

Introdúzcalo en el soporte de la celda de flujo de RX Monza y

pulse Read (Leer) en un plazo de 60 minutos.

CALIBRACIÓN PARA RX MONZA

Se recomienda llevar a cabo una calibración diaria mediante el

patrón CAL que se proporciona en el kit o mediante el suero de

calibración de nivel 3 de Randox.

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 578 nm o 623 nm

Espectrofotómetro: 630 nm (600 - 650 nm)

Cubeta: 1 cm de espesor

Temperatura de incubación: 20 - 25C

Medición: Frente al blanco de reactivo

Pipetear en tubos de ensayo:

Reactivo Patrón Muestra

H2O destilada 0,01 ml --- ---

Patrón (CAL) --- 0,01 ml ---

Suero o Plasma --- --- 0,01 ml

Reactivo de BCG (R1) 3,00 ml 3,00 ml 3,00 ml

Mezclar e incubar durante 5 min entre +20 y +25C. Medir la

absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón

(Apatrón) frente al blanco de reactivo

CÁLCULO MANUAL

La concentración de albúmina en la muestra puede

calcularse utilizando la fórmula siguiente:

Conc. de albúmina (g/l o g/dl)

Amuestra

= x Concentración

Apatrón del patrón

NORMALIZACIÓN

El suero de calibración de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en

el material de referencia DA470 de la albúmina (IFCC).

CONTROL DE CALIDAD

Se recomienda para el control de calidad diario Multisueros

Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deberá de analizar dos

niveles de controles al menos una vez al día. Los valores

obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si

los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye

error, se deberán seguir los siguientes pasos:

1. Comprobar programación del instrumento y el origen de luz.

2. Comprobar que todo material está limpio.

3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento de

bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados.

4. Comprobar la temperatura de reacción

5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes.

6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de

los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28

94422413.

INTERFERENCIA

Se analizaron los siguientes analitos hasta los siguientes niveles y se encontró que no interfieren:

Bilirrubina 500 mol/l

Intralípido® 1,2%

Triglicéridos 22,75 mmol/l

Hemoglobina 6 g/l

VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO(2)

Adultos 38 - 44 g/l (3,8 – 4,4 g/dl)

Recién nacidos 38 - 42 g/l (3.8 - 4.2 g/dl)

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango

de referencia para considerar las diferencias en edad, sexo, dieta

y localización geográfica.

CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE

FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante

el analizador Rx Monza a una temperatura de 37 oC.

LINEALIDAD

Este método es lineal hasta 7,55 g/dl. Si la concentración

sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 1 con una

solución del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de nuevo.

Multiplique el resultado por 2.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de albúmina con un nivel

aceptable de precisión se ha determinado en

0,287 g/dl.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL AB 362

PRECISION (Suero)

Análisis (Intra)

Nivel 1 Nivel 2

Media (g/dl) 2,86 4,36

DE 0,036 0,031

CV (%) 1,28 0,71

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 1 Nivel 2

Media (g/dl) 2,86 4,36

DE 0,129 0,174

CV (%) 4,52 3,99

n 20 20

CORRELACION

Se comparó el método Randox (Y) con un método comercial

disponible (X). Se analizaron 51 muestras con valores

abarcando un rango de 22 a 46 g/l en un analizador Hitachi 747. El análisis de regresión lineal de los datos resultó en la siguiente

ecuación:

Y = 1,073 X + 0,204

con un coeficiente de correlación r = 0.9910

Se analizaron 40 muestras con valores de entre 1,66 y 4,51 g/dl.

REFERENCIAS

1. Grant G.H., et al Amino Acids and Proteins; Fundamentals of

Clinical Chemistry, Tietz N.W. Editor, Third Edition, WB

Saunders Company Philadelphia USA, 328-329, 1987

2. Doumas, B.T., Watson, W.A., Biggs, H.G., Clin. Chim. Acta.

1971; 31: 87.

Revised 10 Sep 10 bm

Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

FOSFATASA ACIDA

(ACP) Método Colorimétrico

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de Fosfatasa Acida en el suero.

Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador

Rx Monza.

No. Cat.

AC 1011 R1. Tampón 1 x 70 ml

20 x 3 ml R2. Sustrato 20 x 3 ml

R3. Tartrato 10 frascos

SAM STAB Estabilizador 1 frasco

METODO COLORIMETRICO

PRINCIPIO(1)

fosfatasa ácida

1-naftil-fosfato + H2O fosfato + 1-naftol

1-naftol+sal de 4-cloro-2-metilfenildiazonio*

colorante azo

* = Sal TR Fast Rojo

PREPARACION DE LA MUESTRA

Suero. La muestra puede ser estabilizado mediante la adición de

1 gota de ácido acético estabilizador (STAB SAM) a 1 ml de

suero. Estable durante 3 días a +2 y +8C ó 24 horas a +15 y

+25C.

Suero. La muestra se estabiliza añadiendo una gota de ácido

acético (estabilizador 4) a 1 ml de suero. Es estable durante 3

días entre +2 y +8C ó 24 horas entre +15 y +25C.

COMPOSICION DEL REACTIVO

Componentes Concentraciones en la prueba

R1 Tampón

Tampón citrato 75 mmol/l, pH 5,2

R2. Sustrato

1-naftilfosfato 10 mmol/l

Sal TR Fast Rojo 2,5 mmol/l

R3. Tartrato

Tartrato sódico 135 mmol/l

SAM STAB Estabilizador

Acido acético 3 mmol/l


Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar

las precauciones normales requeridas para el manejo de

reactivos de laboratorio.


Los reactivos deben ser utilizados sólo para los

propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de

laboratorio.

ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE REACTIVOS

R1. Bufer

Contenios listos para su uso. Estable hasta la fecha de

caducidad si se conserva entre +2 to +8C.

Para la Fosfatasa ácida total:

R2. Substrato (R2A) Disuelva el contenido de 1 botella de sustrato R2 en 3 ml

de tampón R1. Estable durante 5 días si se conserva entre

+2 y +8C o 24 horas entre +15 to +25C, Conservese

protegido de la luz.

Para la Fosfatasa ácida no prostática:

R2. Substrato (R2B)

Disuelva el contenido de 1 botella de sustrato R2 en 3 ml

de tampón R1. A continuación, transfiera el contenido a un

vial de tartrato R3. Estable durante 5 días si se conserva

entre +2 to +8C o 24 horas entre +15 y +25C,

Conservese protegido de la luz.

MATERIALES SUMINISTRADOS Tampón

Sustrato

Tartrato Estabilizador


Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y

Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)


PRPROCEDIMIENTO

FOSFATASA ÁCIDA TOTAL

Seleccione ACP en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a

cabo un blanco de agua de la forma indicada.

Pipetee en un tubo de ensayo:

Muestra 0,05 ml

Reactivo 0,5 ml

Mézclelo, incúbelo durante exactamente 5 minutos a 37 °C o

durante 10 minutos a 20-25 °C y aspírelo en Rx Monza.

FOSFATASA ÁCIDA NO PROSTÁTICA

Seleccione NACP en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y

lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.


Muestra 0,05 ml

Reactivo 0,5 ml

Mézclelo, incúbelo durante exactamente 5 minutos a 37 °C o

durante 10 minutos a 20-25 °C y aspírelo en Rx Monza.


Se recomienda el uso de suero fisiológico y suero de calibración

de nivel 3 de Randox para la calibración. Es aconsejable cambiar

el lote del reactivo para la calibración o seguir lo indicado por los

procedimientos de control de calidad.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA AC 1011

FOR MANUAL USE

Longitud de onda: Hg 405 nm


Temperatura: 30/37C

Medición: frente al aire


Macro Semi Micro

Muestra 0,20 ml 0,10 ml

Solución de reactivo R2 2,00 ml 1,00 ml

Mezclar, verter en la cubeta e incubar durante 5 min a 30/37C.

Leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar el tiempo

simultáneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min.

CÁLCULO MANUAL

Para calcular la actividad de la fosfatasa ácida en la muestra

utilizar las fórmulas siguientes:

Fosfatasa ácida total:

U/l = 743 x ΔAsol.2a/min Fosfatasa prostática:

U/l = 743 x (ΔAsol.2a/min - ΔAsol.2b/min)

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel

3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de

controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán

encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se

encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se

deberán seguir los siguientes pasos:

1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara


3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados.


5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los

Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.

INTERFERENCIA

Sueros hemolíticos e ictéricos (bilirrubina > 3 mg/dl) interfieren

en la prueba.

VALORES NORMALES EN SUERO (2)

30C 37C

Fosfatasa ácida total

Hombre Hasta 4,2 U/l Hasta 4,7 U/l

Mujer Hasta 3,0 U/l Hasta 3,7 U/l

Fosfatasa ácida

prostática Hasta 1,5 U/l Hasta 1,6 U/l


de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad

geográfica de la población.

CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un analizador RX monza. FOSFATASA ÁCIDA TOTAL LINEALIDAD El método es lineal hasta una concentración de 159 U/I. Si la concentración sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 4 con una solución del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5. SENSIBILIDAD La concentración detectable mínima de fosfatasa ácida con un nivel aceptable de precisión se determinó en 2,53 U/l. PRECISION Intraensayo Nivel 2 Nivel 3 Media (U/l) 15.9 43.6 DE 0.717 1.90 CV(%) 4.51 4.35 n 20 20 Interensayo Nivel 2 Nivel 3 Media (U/l) 15.9 43.6 DE 1.05 3.04 CV(%) 6.59 6.98 N 20 20 CORRELACIÓN Se comparó este método (Y) con otro método comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión lineal: Y = 0.9723 X + 0.5527 y un coeficiente de correlación de r = 0,9925 se analizaron 42 muestras de pacientes abarcando un rango de 2,5 a 93,9 U/l. FOSFATASA ÁCIDA NO PROSTÁTICA LINEALIDAD El método es lineal hasta una concentración de 80,8 U/I. Si la concentración sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 4 con una solución del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5. SENSIBILIDAD La concentración detectable mínima de fosfatasa ácida con un nivel aceptable de precisión se determinó en 1,76 U/l. PRECISION Intraensayo Nivel 1 Nivel 2 Media (U/l) 6.65 17.8 DE 0.289 0.765 CV(%) 4.34 4.30 n 20 20 Interensayo Nivel 1 Nivel 2 Media (U/l) 6.65 17.8 DE 0.295 0.892 CV(%) 4.43 5.01 n 20 20

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA AC 1011

CORRELATION

Se comparó este método (Y) con otro método comercial

disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión

lineal:

Y = 0.9653 X + 0.1849

y un coeficiente de correlación de r = 0,9971.

se analizaron 40 muestras de pacientes abarcando un rango de

2,1 a 80,2 U/l.

REFERENCIAS

1. Hillmann, G.J., Clin. Chem. Clin. Biochem. 1971; 9: 273.

2. Silver, D., et al., J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21: 519.

Revisado 05 Sep 11 bm

Rev. 002

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

ALDOLASA (ALS) Fructosa-1,6-difosfato aldolasa

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de Aldolasa en suero y plasma.

Este producto es adecuado para su utilización de forma Manual y

en el analizador RX monza.

No. Cat.

AD 189 R1. Tampón/Sustrato 5 x 20 ml

5 x 20 ml R2. NADH 2 x 1 ml

R3. GDH/TIM/LDH 1 vial

PRINCIPIO

La aldolasa convierte la fructosa-1,6-difosfato (F-1,6-DP) en gliceraldehído-3-fosfato (GAP) y dihidroxiacetona fosfato (DAP).

La adición de triosafosfato isomerasa (TIM), glicerolfosfato

deshidrogenada (GDH) y NADH convierte la dihidroxiacetona

fosfato en glicerol-1-fosfato. El grado de la reacción de la aldolasa

se mide por la disminución de la absorbancia a 340 nm como

consecuencia de la conversión de NADH en NAD+.

aldolasa

F-1,6-DP GAP + DAP

TIM

GAP DAP

GDH

2DAP + 2NADH + 2H+ 2Glicerol-1-P + 2 NAD+

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma.


Componentes Concentración en la prueba

R1. Tampón/Sustrato

Tampón colidina 51 mmol/l, pH 7,4

Monoyodoacetato 0,27 mmol/l

F-1,6-DP 2,7 mmol/l

R2. NADH 0,23 mmol/l

R3. GDH/TIM/LDH

GDH ≥ 326 mU/ml

TIM ≥ 4,35 U/ml

LDH ≥ 616 mU/ml

Ammonium Sulphate > 35%


Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca.

Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren

al manejar reactivos de laboratorio.

Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se

desean.




PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y ESTABILIDAD

R1. Tampón/Sustrato

Reconstituir un vial de Tampón/Sustrato 1 con 20 ml

e agua bidestilada. Es estable durante 2 semanas si se

conserva entre +2 y +8C.

R2. NADH Reconstituir un vial de NADH 2 con 1 ml de agua

bidestilada. Es estable durante 4 semanas entre +2 y +8C.

R3. GDH/TIM/LDH

Componentes listos para su uso. Es estable hasta la

fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8C.

ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DEL REACTIVO EN

FUNCIONAMIENTO PARA RX MONZA

Prepare el reactivo en funcionamiento como se indica en la tabla

siguiente:-

Tampón/Sustrato NADH GDH/TIM/LDH

R1 R2 R3

2.5ml 0.05ml 0.01ml

5.0ml 0.1ml 0.02ml

10.0ml 0.2ml 0.04ml

Estable durante 8 horas entre +2 y +8ºC.

MATERIALES SUMINISTRADOS Tampón/Sustrato

NADH

GDH/TIM/LDH


Calibrador de aldolasa de Randox (No. Cat. AD 5000)

Control de Aldolasa Randox Nivel 2 (Cat. No. AD 5001) y Nivel

3 (Cat. No. AD 5002)

0.9% Solución NaCl.

PROCEDIMIENTO

Seleccione ALS en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a

cabo un blanco de agua de la forma indicada.


SO* Patrón Muestra

S1

H2O de doble destilación 35µl --- ---

ALS CAL --- 35 µl ---

Muestra --- --- 35 µl

Reactivo en funcionamiento 450 µl 450 µl 450 µl

Mézclelo, incúbelo durante 5 minutos a 37ºC o 10 minutos a 20-

25ºC y aspírelo en RX monza.

*blanco de reactivo


El uso de solución salina y Randox Aldolasa sérica de calibración

se recomienda para la calibración. LA calibración se recomienda

a los cambios en el lote del reactivo como se indica en los


GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

MANUAL/ RX MONZA AD 189

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 340 nm (Hg 365 nm o Hg 334 nm)


Temperatura: 37C

Medición: frente a muestra blanco


Muestra Blanco Calibrador Muestra

Muestra 0,2 ml 0,2 ml 0,2 ml

Tampón/Sustrato (R1 - 2,50 ml 2,50 ml

Solución NaCl 0,9% 2,50 ml - -

NADH (R2) - 0,05 ml 0,05 ml

GDH/TIM/LDH (R3) - 0.01 ml 0,01 ml

Mezclar la muestra, R1, R2 y R3 y se incuba durante 5 minutos a

37C y leer la absorbancia A1 contra el blanco de muestra.

Dejar reposar a 37C durante exactamente 20 minutos. después

de la primera lectura y entonces medir la absorbancia A2 frente

al blanco.

* Si A1 es < 0,95 diluir 1+1 con NaCl al 0,9% y repetir el test.

Multiplicar el resultado por 2.

MANUAL DE CÁLCULO

Para calcular la actividad aldolase utilizar la siguiente fórmula:

(A1 - A2) Muestra

x Conc. de calibrador

(A1 - A2) Calibrador

CONTROL DE CALIDAD

Los controles de Aldolasa Randox Niveles 2 y 3 se recomiendand

para el control de calidad diario. Se deberían procesar 2 niveles de

control al menos una vez por día. Los valores que se obtengan

deberían entrar dentro de un rango específico. Si los valores no estan dentro de este rango, y la repetición excluye el error, se

deberían lleva a cabo los siguientes pasos:

1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara.


3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento bacteriano

puede contribuir a la inexactitud de los resultados.



6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los


INTERFERENCIA

La hemólisis interfiere en la prueba.

VALORES DE REFERENCIA(1)

Suero: Hasta 7,6 U/l (37C)




CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO ESPECÍFICAS

Se obtuvieron las siguientes características de rendimiento

mediante un analizador RX monza y un modo de célula de flujo

a 37ºC.

LINEALIDAD

El método es lineal hasta una concentración de 106 U/l. Si la

concentración sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir

1+4 con una solución de NaCl del 0,9% y debe someterse a

ensayo de nuevo. Multiplique el resultado por 5.

SENSIBILIDAD La concentración detectable mínima de Aldolasa con un nivel aceptable de precisión se determinó en 1,73 U/l.

PRECISION Precisión intraensayo Nivel 2 Nivel 3 Media (U/l) 6.36 19.1 DE 0.295 0.854 CV(%) 4.64 4.47 n 20 20 Precisión interensayo Nivel 2 Nivel 3 Media (U/l) 6.36 19.1 DE 0.402 1.35 CV(%) 6.32 7.09

n 20 20

CORRELACIÓN

El método de Randox (Y) se comparó con otro método

comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de

regresión lineal:

Y = 0,9815 X + 0,183

y un coeficiente de correlación r = 0,9917.

Se analizaron 42 muestras con valores de entre 2,46 y 89,86 U/l.

REFERENCIA

1. Feissli, S., et al., (1966). Klin. Wschr. 44: 390.

Revisado el 15 de Sep 2010 bm

Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

ALT Alanina Aminotransferasa

IFCC

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de Alanina

Aminotransferasa en el suero y plasma. Este producto es

adecuado para un uso manual o en el analizador Rx Monza.

No. Cat.

AL 1200 R1a. Tampón/Substrato 1 x 70 ml

20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/

-oxoglutarato 20 x 2 ml

AL 1205 R1a. Tampón/Substrato 1 x105 ml









METODO UV

Este es un método estandard optimizado de acuerdo con las

concentraciones recomendadas por la IFCC.

PRINCIPIO

ALT

-oxoglutarato + L-alanina L-glutamato + piruvato

LD

piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+

MUESTRA

Suero, plasma heparinizada o plasma EDTA.


Componentes Concentración en la Prueba

R1a. Tampón/Substrato

Tampón Tris 100 mmol/l, pH 7,5

L-alanina 0,6 mol/l

R1b. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato

-oxoglutarato 15 mmol/l

LD ≥1,2 U/ml

NADH 0,18 mmol/l


Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca.

Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo

de reactivos de laboratorio.

La solución R1a contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el

contacto con la piel o las membranes mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante

agua. En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar

atención médica inmediatamente.

La Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las

cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando

se desechen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes

de agua para evitar la formación de ácidos. Las superficies

metálicas expuestas, deberán limpiarse con hidróxido de sodio

al 10%.

Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles


propósito por personal de laboratorio cualificado, y

bajo condiciones de laboratorio apropiadas.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS Y

ESTABILIDAD


Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad

cuando se conserva entre +2 y+8C


Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/

-oxoglutarato R1b con el volumen apropiado de

Tampón/Substrato R1a:

2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AL 1200)

10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AL 1205) 20 ml para el kit de 5 x 20 ml (AL 1268)

Estable durante 14 días entre +2 y+8C e ó 24 horas

entre+15 y +25C.

Cat. No. AL 2360 5 x 100 ml

Reconstituir un vial of Enzima/Coenzima/-oxoglutarato

R1b con una parte de Tampón/Substrato R1a y después

transferir todo el contenido a la botella R1a, enjuagando la

botella R1b varias veces. Estable durante 14 días entre +2

y+8C e ó 24 horas entre+15 y +25C.

R1 = Bufer/Substrato/Enzima/Coenzima/-oxoglutarato

R2 = Ninguno


Tampón/Substrato

Enzima/Coenzima/-oxoglutarato




Sueros de Calibración Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

Salino RX series (Cat. No. SA 3854)

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

MANUAL AL 1200

PROCEDIMIENTO Aspire H2O de doble destilación y realice una nueva calibración de la ganancia en el modo de célula de flujo. Seleccione ALT en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada. Pipetee en un tubo de ensayo: Muestra 0,05 ml Reactivo 0,5 ml Mézclelo y aspírelo en Rx Monza.

CALIBRACIÓN PARA RX MONZA Se recomienda el uso de suero fisiológico y suero de calibración de nivel 3 de Randox para la calibración. Es aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibración o seguir lo indicado por los procedimientos de control de calidad. PARA USO MANUAL Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm o Hg 365 nm) Cubeta: 1 cm de espesor

Temperatura: 30/37C Medición: frente al aire Pipetear en la Cubeta: Macro Micro Muestra 0,2 ml 0,1 ml R1. Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2,0 ml 1,0 ml Mezclar. Leer la absorbancia inicial después de 1 minuto. Leer de nuevo tras 1, 2 y 3 minutos. Observar si el cambio de absorbancia por minuto está entre 0,11 y 0,16 a 340 nm/Hg 334 nm 0,06 y 0,08 a Hg 365 nm usar sólo los valores para los 2 primeros minutos del cálculo. CÁLCULO MANUAL Para calcular la actividad de la ALT utilizar la siguiente fórmula: U/l = 1746 x A 340 nm/min U/l = 1780 x A Hg 334 nm/min U/l = 3235 x A Hg 365 nm/min NORMALIZACIÓN El suero de calibración de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en el material de referencia JSCC TS01 de ALT. CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara. 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento


4. Comprobar la temperatura de reacción 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de

los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

INTERFERENCIA

Evitar la hemólisis ya que interfiere con el análisis.

VALORES DE NORMALIDAD EN SUERO(1)

25C 30C 37C

Hombres hasta 22 U/l hasta 29 U/l hasta 40 U/l

Mujeres hasta 17 U/l hasta 22 U/l hasta 31 U/l

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio

rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad


CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante

un analizador Rx Monza en funcionamiento a 37 ºC.

SENSIBILIDAD La concentración detectable mínima de ALT con un nivel

aceptable de precisión se determinó en 7,99 U/l.

LINEALIDAD

Este método es lineal hasta 500 U/l. Si la concentración

sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + x con una solución del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de

nuevo. Multiplique el resultado por x + 1.

PRECISION

Análisis (Intra) Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 38.9 134

DE 1.79 1.59

CV(%) 4.61 1.19

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 38.9 134

DE 1.78 5.22

CV(%) 4.58 3.90

n 20 20

CORRELACIÓN

Este método (Y) se comparó con otro método comercial


lineal:

Y = 0,99 X + 17,2

y un coeficiente de correlación r = 0,9935

Se analizaron 47 muestras de pacientes con valores de entre

18 y 522 U/l.

REFERENCIAS

1. International Federation of Clinical Chemistry, Scientific

Committee. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1980; 18:

521-534.

Revisado el 04 Apr 11, bm

Rev. 004

GAAMSA

www.gaamsa.com

AMONIACO (NH3) Método Enzimático - UV

MANUAL

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de Amoníaco en plasma.

Este producto es adecuado para su utilización en Manual.

No. Cat.

AM 1054 R1a. Reactivo 20 x 3 ml

20 x 3 ml R1b. Tampón 70 ml

R2. GLDH 1,0 ml

CAL. Patrón 5,5 ml

RELEVANCIA CLÍNICA

La mayor fuente de amoniaco en circulación es el tracto

gastrointestinal. En condiciones normales, el amoniaco se

metaboliza a la urea por las enzimas hepáticas. Muchas

enfermedades, tanto heredadas como adquiridas, causan un

incremento en los niveles de amoniaco (hiperamonemia). Las

deficiencias heredadas de las enzimas del ciclo de la urea son la mayor causa de hiperamonemia en niños. La hiperamonemia

adquirida está provocadas por una enfermedad hepática,

insuficiencia renal o el síndrome de Reye. Un nivel de amoniaco

elevado resulta tóxico para el sistema nervioso central.

PRINCIPIO(1)

GLDH

-oxoglutarato + NH3 + NADH glutamato + NAD+

El amoníaco se combina con -oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD

+. La correspondiente disminución

de la absorbancia a 340 nm es proporcional a la concentración de amoníaco en plasma.

(1)

MUESTRA(2)

Plasma heparinizado o EDTA plasma.

Se obtiene sangre venosa sin estancar y se conserva en un baño

de hielo. El plasma se separa dentro de 30 min. El ensayo de

amoníaco debería llevarse a cabo inmediatamente. El plasma

puede conservarse durante 2 horas a +4C.



R1a. Reactivo

NADH 0,16 mmol/l


R1b. Tampón

Trietanolamina 0,15 mol/l, pH 8,6

R2. GLDH 1200 U/ml

CAL. Patrón See lot specific insert





Las soluciones R1b, R2 y CAL contienen azida sódica. Evitar su

ingestión o contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto

con la piel, lavar inmediatamente el área afectada con agua

abundante. En caso de ingestión o contacto con los ojos llamar

inmediatamente a un médico.

La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las tuberías,

lo que podría producir azidas explosivas. Cuando se desheche

este reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la

formación de estas azidas. Las superficies metálicas que hayan

sido puestas en contacto con la azida sódica deben ser lavadas

con hidróxido sódico al 10%.


desean.

Por favor, desechar todos los materials Biológicos y Químicos de acuerdo a las pautas locales.

Los reactivos deben ser utilizados solo para los

propósitos indicados por personal adecuado cualificado

de laboratorio bajo condiciones apropiadas de

laboratorio

ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS

R1a. Reactivo

Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo R1a con

3 ml de Tampón R1b. Es estable 24 horas entre +15 y

+25C ó 2 días entre +2 y +8C.

R1b. Tampón


especificada cuando se conserva entre +2 y +8C.

R2. GLDH



CAL. Patrón



R1 = Reactivo/Tampón

R2 = GLDH


Reactivo

Tampón

GLDH

Patrón

MATERIALES REQUERIDOS PERO NO

PROPORCIONADOS

Controles Randox de Amonio Etanol:

NIvel 1 (Cat. No. EA 1366)

Nivel 2 (Cat. No. EA 1367)

Nivel 3 (Cat. No. EA 1368)

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL - AMONIACO - AM 1054 PAGINA 2 DE 2

PROCEDIMIENTO

Longitud de onda: 340 nm


Temperatura: 25/30/37C

Medición: Frente al aire

Procedimiento Macro

Pipetear en la cubeta:

Blanco de Patrón Muestra

Reactivo

Muestra --- --- 0,2 ml

Agua destilada 0,2 ml --- ---

Patrón --- 0,2 ml ---

Reactivo (R1) 3,0 ml 3,0 ml 3,0 ml

Mezclar, dejar reposar durante 5 min. Leer la absorbancia inicial

de la muestra y del blanco (A1).

GLDH (R2) 0,02 ml 0,02 ml 0,02 ml

Mezclar e incubar durante 5 min. Leer la absorbancia final de la

muestra y del blanco (A2).

Procedimiento Semi Micro

Pipetear en la cubeta: Blanco de Patrón Muestra

Reactivo Muestra --- --- 0,1 ml Agua destilada 0,1 ml --- ---

Patrón --- 0,1 ml --- Reactivo (R1) 1,5 ml 1,5 ml 1,5 ml Mezclar, y dejar reposar durante 5 min. Leer la absorbancia inicial

de la muestra y del blanco (A1). GLDH (R2) 0,01 ml 0,01 ml 0,01 ml

Mezclar e incubar durante 5 min. Leer la absorbancia final de la muestra y del blanco (A2). CONTROL DE CALIDAD

Los controles Randox de Amonio Etanol Nivel 1, Nivel 2 y

Nivel 3 se recomiendan para el control diario de calidad Deberían

utilizarse como mínimo dos niveles de controles una vez al día. Los

valores obtenidos deberían entrar dentro de un rango determinado.

Si estos valores se salen de ese rango aun habiéndolo repetido, se

deben seguir los siguientes pasos:

1. Comprobar los ajustes del instrumento y el foco de luz.

2. Comprobar la limpieza de todo el equipo.

3. Comprobar el agua y la presencia del algún posible agente

contaminante que pueda interferir en los resultados.

4. Comprobar la temperatura de reacción.

5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y los componentes del

mismo.

6. Contactar con el Servicio Técnico de Laboratorios Randox.

Irlanda del Norte (028) 94422413.

CÁLCULOS

Ablanco = Blanco A1 - Blanco A2

Amuestra = Muestra A1 - Muestra A2

Utilizando un patrón:

Amuestra - Ablanco

Conc. de x Patrón de conc.

Amoníaco = Apatrón - Ablanco

INTERFERENCIA

La hemólisis interfiere con el análisis.

En muestras normales se observa un pequeño cambio de

absorbancia. Esto puede ser aumentado añadiendo 0,3 ml de

muestra en vez de 0,2 ml. para el procedimiento macro y 0,15 ml

de muestra en vez de 0,1 ml para el procedimiento semi micro.

Para utilizar un método completamente automatizado de

amoníaco recomendamos No. Cat. AM 1015.

VALORES NORMALES (2)

Amoníaco en plasma: 10 - 47 mol/l

0,17 -0,80 g/ml


que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de la

población.

LINEALIDAD

El método es lineal hasta 1180 µmol/l (20 µg/ml).

REFERENCIAS

1. Dewan J.G., Biochem J., 1938; 32: 1378.

2. Mondzac A., Ehrlich G.E., Seegmiller J.E., J Lab Clin. Med.,

1965; 66: 526.

Revisado el 26 Abril 2010 bm

Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

DE 3

ANTITROMBINA III (AT III) SEMIAUTOMÁTICO

INDICACIONES Determinación cuantitativa in vitro de la antitrombina III (AT III) en plasma humano mediante el método cromogénico. El producto es adecuado para uso con métodos manuales o semiautomáticos.

Núm. cat. ANT 2754 R1a. Reactivo de trombina 4 x 2 ml 26 ml R1b. Tampón 1 x 10 ml R2. Sustrato 4 x 2 ml

RELEVANCIA CLÍNICA La antitrombina III es un inhibidor de las proteasas plasmáticas del tipo serina. Una función importante de la antitrombina III es inhibir la actividad de la trombina. Por lo general, la velocidad de inhibición de la trombina causada por la antitrombina III es lenta (actividad antitrombina progresiva). Sin embargo, dicha velocidad puede aumentar miles de veces en presencia de heparina (actividad cofactor de la heparina). Tolefsen y Blank(1) han descubierto otro inhibidor rápido de la trombina que depende de la heparina, el cofactor II de la heparina, en el plasma humano. Esta proteína puede interferir en las mediciones de antitrombina III, especialmente a concentraciones de heparina elevadas (2 unidades/ml USP).

PRINCIPIO En este método de dos fases(2) se añade trombina a la solución diluida de plasma que contiene antitrombina III en presencia de exceso de heparina. Tras un período de incubación inicial (fase 1) la actividad residual de la trombina se determina con un sustrato cromogénico específico de la trombina (fase 2). La actividad residual de la trombina es inversamente proporcional a la concentración de antitrombina III. Con el fin de conferir especificidad para la antitrombina III, este sistema de ensayo utiliza un concentración final de heparina más baja, en la cual la inactivación de la trombina aumentada por heparina, debida al cofactor II de la heparina, es desdeñable. Además, el cofactor II de la heparina humana reacciona más fácilmente con la trombina humana que con la bovina(3). Así, este sistema de ensayo presenta mayor especificidad para la antitrombina III al utilizar trombina bovina.

MUESTRA Plasma citrado. Plasma diluido 1+40 en NaCl al 0,9%.

RECOGIDA DE MUESTRAS Y PREPARACIÓN (4) Mezcle nueve partes de sangre recién extraída con una parte de citrato trisódico al 3,2% (0,109 mol/l). Evite la hemólisis y la contaminación de la muestra sanguínea con fluidos corporales. Se deben rechazar las muestras que contengan menos del 90% del volumen previsto de llenado. Centrifugue la sangre durante 15 minutos a 1500 g. Realice el análisis en un lapso de 4 horas, si las muestras se conservan entre 20 y 25°C. Si la prueba no se realiza antes de las 4 horas, el plasma puede mantenerse congelado a -20°C hasta 2 semanas, o a -70°C durante un máximo de 6 meses. Para obtener más detalles sobre la recogida de muestras consulte el documento NCCLS H21-A3.

No postergue el mezclado de la sangre con el anticoagulante.

Evite la formación de espuma en la muestra. Utilice exclusivamente recipientes de plástico o de vidrio

siliconado. Las muestras turbias, ictéricas, lipémicas y hemolizadas

pueden generar resultados erróneos. La congelación y consiguiente descongelación de

muestras de plasma que contengan células residuales podría generar membranas celulares dañadas que pueden afectar a los resultados.

El las muestras de plasma con un hematocrito fuera del intervalo del 20 al 55% puede que la concentración de anticoagulante errónea, por lo que debe ajustarse el anticoagulante según proceda.


Contenido Concentración inicial

de las soluciones

R1a. Reactivo de trombina

Trombina bovina liofilizada 8 UI/ml

R1b. Tampón

Tampón tris 90 mmol/l, pH 8,2

R2. Sustrato

Tosyl-Gly-Pro-Arg-4-nitranilida

acetato 2,5 mmol/l

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DE

SEGURIDAD

Solo para uso diagnóstico in vitro. No pipetee con la boca.

Aplique las precauciones habituales necesarias para la

manipulación de reactivos de laboratorio.

El reactivo tampón de la antitrombina III (R1b) contiene acida

sódica. Evite la ingestión o el contacto con la piel o las

mucosas. En caso de contacto con la piel, lave el área

afectada con abundante agua. En caso de contacto con los

ojos o ingestión, busque atención médica de inmediato.

La acida sódica reacciona con las tuberías de plomo y cobre,

con el consiguiente riesgo de generación de acidas explosivas.

Al eliminar estos reactivos, hágalo con gran cantidad de agua

para evitar la acumulación de acidas. Las superficies

expuestas de metal deben limpiase con hidróxido sódico al

10%.

Están disponibles, previa petición, las fichas técnicas de salud

y seguridad.

Los reactivos deben utilizarse solo para la finalidad

prevista y por personal de laboratorio

adecuadamente cualificado, en unas condiciones de

laboratorio apropiadas.

GAAMSA

www.gaamsa.com

DE 3

MANUAL ANT 2754

ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS

REACTIVOS

R1a. Reactivo de trombina

Reconstituya un vial de reactivo de trombina (R1a) con

2 ml de tampón (R1b).

Estable durante 2 días entre +15 y +25°C; 14 días

entre +2 y +8°C; 30 días a -20°C.

R1b. Tampón

Contenido listo para su uso. Estable hasta la fecha de

caducidad cuando se almacena a una temperatura entre

+2 y +8°C.

R2. Sustrato

Reconstituya un vial de sustrato (R2) con 2 ml

de agua desionizada.

Estable durante 8 días entre +15 y +25°C; 14 días

entre +2 y +8°C; 90 días a -20°C.

Precaliente las partes alícuotas de reactivo de

trombina (R1a) y sustrato (R2) a +37°C antes de

utilizarlas.


Reactivo de trombina

Tampón

Sustrato


Calibrador de coagulación Randox (N.º cat. CG5037)

Controles de coagulación Randox de nivel 1, 2 y 3 (N.º cat.

CG5021, CG5022 y CG 5023)

Micropipetas

Micropuntas

Analizador de coagulación foto-óptico

Temporizador

PROCEDIMIENTO

Pipetear en una cubeta

Muestra diluida/control/calibrador 100 µl

Reactivo de trombina (R1) 100 µl

Mezclar bien e incubar a +37°C durante 3 minutos, añadir

sustrato (R2) 100 µl

Mezclar bien y tras 5 segundos leer la absorbancia inicial a

405 nm. Volver a leer la absorbancia transcurridos 30

segundos.

Determinar la velocidad de cambio de absorbancia

(∆Abs/min)

Siga las instrucciones del fabricante del instrumento

para realizar la prueba.

CALIBRACIÓN

Para la calibración se recomienda el calibrador de coagulación

Randox (valor específico de lote). Use salino como calibrador

del 0%, con el calibrador de coagulación Randox como 50% y

100%. Se recomienda calibrar cambiando el lote de reactivo o

tal como indican los procedimientos de control de calidad.

CÁLCULO DE LOS RESULTADOS

Trace el gráfico de la ∆Abs/min obtenida con cada calibrador

de antitrombina III frente al % de antitrombina III

correspondiente en papel de escala lineal.

La antitrombina III en las muestras de plasma del paciente se

puede determinar mediante la interpolación de la curva de

calibración.

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los controles de coagulación Randox de nivel

1, 2 y 3 para el control de calidad diario. Deben analizarse

tres niveles de controles al menos una vez al día. Los valores

obtenidos deben situarse dentro de un intervalo

determinado. Si estos valores están fuera del intervalo y la

repetición excluye un posible error, debe procederse como

sigue:

1. Comprobar los parámetros del instrumento.

2. Comprobar que todo el equipo utilizado esté limpio.

3. Comprobar los contaminantes, como un crecimiento

bacteriano, que pueden contribuir a la obtención de

resultados imprecisos.

4. Comprobar la temperatura de la reacción.

5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y su contenido.

6. Póngase en contacto con el servicio técnico de atención

al cliente de Randox Laboratories, llamando al teléfono

+44 (0) 28 9442 2413 (Irlanda del Norte).

VALORES PREVISTOS

Los valores normales con el reactivo Randox AT III están

comprendidos dentro del 75 y 125%.


rango de referencia, ya que pueden existir diferencias entre

instrumentos, laboratorios y poblaciones locales.

INTERFERENCIA

Evite utilizar muestras fuertemente hemolizadas y lipémicas,

ya que pueden interferir con el ensayo.

Se comprobaron los siguientes analitos, hasta los niveles que

se indican, sin encontrar interferencias:

Bilirrubina conjugada 12 mg/dl

Bilirrubina libre 12 mg/dl

Intralípidos 300 mg/dl

Triglicéridos 320 mg/dl

Hemoglobina 140 mg/dl

CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO

Se han obtenido los siguientes datos de rendimiento

mediante un coagulómetro semiautomático a +37ºC.

SENSIBILIDAD

La actividad mínima detectable de la antitrombina III se

determina como 30,0%.

LINEALIDAD

Este método es lineal hasta un 130% de actividad de la

antitrombina III. Si la muestra excede este valor, diluya las

muestras previamente diluidas (1+40) de plasma aún más 1+1

con salino al 0,9% y repita el análisis. Multiplique el resultado

por 2.

GAAMSA

www.gaamsa.com

DE 3

MANUAL ANT 2754

PRECISIÓN

Intraensayo

Normal Patológica

Media (%) 102 65,5

DE 1.89 2,35

CV (%) 1.86 3,59

n 20 20

Interensayo

Normal Patológica

Media (%) 85.0 59.4

DE 1.86 2.24

CV (%) 2.19 3.77

n 20 20

CORRELACIÓN

Este método (Y) se ha comparado con otro método

disponible en el mercado (X) y se ha obtenido la siguiente

ecuación de regresión lineal:

Y = 1,00X + 0,22

y un coeficiente de correlación de 1,00

Se analizaron 40 muestras de pacientes que abarcaron un

rango del 38,3 al 113,7%

REFERENCIAS

1. Tolefsen DM and Blank MK, J. Clin. Invest. 68: 589-596,

1981.

2. Odegard OR, Lie M and Abildgaard U: Thromb Res. 6:

287-294, 1975.

3. Friberger P, Egberg N, Holmer E, Hellgren M and

Blomback M, Thromb. Res. 25: 433-436, 1982.

4. Rosemary Biggs, Human blood Coagulation,

Haemostasis and Thrombosis, Blackwell Scientific

Publications, Oxford, England, 1972.

Revisado 25 may 12 rw

Rev. 002

GAAMSA

www.gaamsa.com

ALP Fosfatasa Alcalina

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de la Fosfatasa Alcalina

(ALP) en suero yl plasma. Este producto es adecuado para un

uso manual o en el analizador Rx Monza.

No. Cat.

AP 542 R1a. Tampón 1 x 70 ml

20 x 3 ml R1b. Substrato 20 x 3 ml

AP 307 R1a. Tampón 1 x 105 ml


METODO COLORIMETRICO (1)

Este es una método estándar optimizado de acuerdo a las

recomendaciones del Deutsche Gesellschaft für Klinische

Chemie.

PRINCIPIO

ALP

p-nitrofenilfosfato + H2O fosfato + p-nitrofenol

MUESTRA(2)

Suero o plasma heparinizado.

Las muestras son estables durante 5 días cuando se conservan

entre +2 y +8C.


Componentes Concentraciones en la Prueba

R1a. Tampón

Tampón Dietanolamina 1 mol/l, pH 9,8

MgCl2 0,5 mmol/l

R1b. Substrato

p-nitrofenilfosfato 10 mmol/l






contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante





se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes



al 10%.

La Solución R1a contiene dietanolamina que puede dañar

seriamente los ojos y que es dañino si se traga. Evitar la

ingestión y llevar protección adecuada para los ojos.



propósito por personal de laboratorio cualificado, y


ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS

REACTIVOS

R1a. Tampón


cuando se conserva entre +2 y +8C.

R1b. Substrato

Reconstituir un frasco de Substrato R1b con el

volumen apropiado de Tampón R1a:-

3 ml para el kit de 20 x 3 ml (AP 542) 10 ml para el kit de 10 x 10 ml (AP 307)

Estable durante 30 días entre +2 y +8C ó 3 días entre

+15 y +25C.


Tampón

Substrato

MATERIALES NECESARIOS PERO NO

SUMINISTRADOS




Salino (Cat. No. SA 3854)

PROCEDIMIENTO

Aspire H2O de doble destilación y realice una nueva

calibración de la ganancia en el modo de célula de flujo.

Seleccione ALP en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y



Muestra 0,01 ml

Reactivo 0,5 ml

Mézclelo y aspírelo en Rx Monza.

CALIBRACIÓN PARA RX MONZA Se recomienda el uso de suero fisiológico y suero de calibración de nivel 3 de Randox para la calibración. Es aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibración o seguir lo indicado por los procedimientos de control de calidad.

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: Hg 405 nm


Temperatura: 25C, 30C, 37C


Pipetear en la cubeta: Macro Semi- Micro

Micro

Muestra 0,05 ml 0,02 ml 0,01 ml

Reactivo (25C, 30C, 37C) 3,00 ml 1,00 ml 0,50 ml

Mezclar, leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar

simultáneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 minutos.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL / RX MONZA - ALP - FOSFATASA ALCALINA - AP542 / AP 307 PAGINA 2 OF 2

MANUAL CALCULO

Utilizar la siguiente formula para calcular la actividad

de ALP:

U/l = 3300 x A 405 nm/min MACRO

U/l = 2760 x A 405 nm/min SEMI-MICRO

U/l = 2760 x A 405 nm/min MICRO

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y

Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los valores




1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara



bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los

resultados.




los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte (028) 94422413.

INTERFERENCIA

Evitar la hemólisis ya que interfiere con el análisis. Los

siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y

se encontró que no interfieren:

Bilirrubina 300 mol/l (17 mg/dl)

Intralípidos® 2%

Triglicéridos 22,75 mmol/l (2010 mg/dl)

Hemoglobina 1 g/l (100 mg/dl)

VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO

25C 30C 37C

Hombres/Mujeres 60-170 U/l 73-207 U/l 98-279 U/l




CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA Los siguientes datos de rendimiento se obtuvieron mediante el

analizador Rx Monza a una temperatura de 37 oC.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de ALP con un nivel

aceptable de precisión se ha determinado en 49,9 U/l

LINEALIDAD

El método es lineal hasta 1609 U/l. Si la concentración

sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 + 9 con una

solución del 0,9% de NaCI y debe someterse a ensayo de

nuevo. Multiplicar el resultado por 10.

PRECISION

Análisis Intra

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 262 486

DE 8.11 9.49

CV(%) 3.10 1.95

n 20 20

Análisis Inter

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 262 486 DE 11.59 17.01

CV(%) 4.43 3.50

n 20 20

CORRELATION

Este método (Y) se comparó con otro método disponible en

el mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión

lineal:

Y = 1.076X - 14.5

y un coeficiente de correlación de r = 0.9975

se hicieron análisis a 43 pacientes abarcando un rango de 52 a 965 U/l.

REFERENCIAS

1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1972;

10: 182.

2. Englehardt A., et al, Aerztl Labor 1970 16 42.

Revisado el 10 Sep 2010 bm

Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

AST Aspartato Aminotransferasa IFCC MANUAL PARA SU USO Para el análisis cuantitativo in vitro de aspartato aminotransferasa (AST) en suero y plasma. Este producto es adecuado para su utilización de forma manual y en el analizador Rx Monza. Cat. No. AS 1202 R1a. Tampón/Sustrato 1 x 70 ml 20 x 2 ml R1b. Enzima/Coenzima/ 20 x 2 ml -oxoglutarato AS 1204 R1a Tampón/Sustrato 1 x 105 ml 10 x 10 ml R1b Enzima/Coenzima/ 10 x 10 ml -oxoglutarato AS 1267 R1a Tampón/Sustrato 1 x 105 ml 5 x 20 ml R1b Enzima/Coenzima/ 5 x 20 ml -oxoglutarato AS 2359 R1a Tampón/Sustrato 5 x 100 ml 5 x 100 ml R1b Enzima/Coenzima/ 5 x 100 ml -oxoglutarato METODO UV Este es un método estándar optimizado según las concentraciones recomendadas por la IFCC. SIGNIFICADO CLINICO(1,2,3,4)

Las aminotransferasas son un grupo de enzimas que catalizan las

inter conversiones de aminoácidos y -oxoácidos por medio de la transferencia de grupos amino. La GOT (aspartato aminotransferasa o transaminasa de oxaloacetato glutamato) se ha encontrado en el citoplasma y mitocondrias de las células estudiadas. En caso de un ligero daño del tejido como por ej. el hígado, la forma predominante de la GOT en suero es la del citoplasma, con una cantidad más pequeña proviniente de las mitocondrias. Un daño más severo del tejido dará como resultado una mayor liberación de enzima mitocondrial. Los niveles elevados de AST pueden ser una señal de infarto de miocardio, enfermedad hepática, distrofia muscular y daño de órganos. Los músculos del corazón son los que muestran más actividad de ésta enzima, sin embargo también se ha encontrado en el cerebro, hígado, mucosa gástrica, tejido adiposo y riñones humanos. La IFCC recomienda actualmente (1980) procedimientos estandarizados para los análisis de GOT incluyendo:- 1. optimización de las concentraciones de substrato. 2. Empleo de tampones Tris (en lugar de fosfato, el cual se ha

demostrado que inhibe la recombinación de la apoenzima con el fosfato piridoxal).

3. Preincubación de suero y tampón combinado para permitir que tengan lugar posibles reacciones con NADH.

4. Substrato de inicio (-oxoglutarato) 5. Activación de fosfato piridoxal opcional. Este es un método estándar optimizado de acuerdo a las

recomendaciones de la IFCC. PRINCIPIO

El -oxoglutarato reacciona con la L-aspartato en presencia de GOT para formar L-glutamato mas oxaloacetato. La reacción indicadora utiliza el oxaloacetato para la determinación cinética del consumo de NADH.

AST -oxoglutarato + L-aspartato L-glutamato + oxaloacetato

MDH oxaloacetato + NADH + H+ L-malato + NAD+

EXTRACCION Y PREPARACION DE MUESTRAS (5)

Suero:- Use serum free from hemolysis.

Plasma:- Se puede utilizar EDTA o heparina como anticoagulante.

El plasma se degerá separar de las células durante la

hora siguiente a su extracción. Las muestras se deberán

refrigerar si no se utilizan inmediatamente:-

Las muestras que se almacenen durante más de 3 días se

deberán congelar a -20C.



R1a. Tampón/Sustrato


L-aspartato 240 mmol/l



MDH ≥ 420 U/l

LD ≥ 600 U/l

NADH 0,18 mmol/l





La solución R1a contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o

contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel,

lavar inmediatamente el área afectada con agua abundante. En

caso de ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente

a un médico.

La Azida Sódica reacciona con el cobre y el plomo de las

tuberías, lo que podría producir azidas explosivas. Cuando se

deseche este reactivo enjuagar abundantemente con agua para

evitar la formación de estas azidas explosivas. Las superficies

metálicas que hayan sido puestas en contacto con la azida sódica

deben ser lavadas con hidróxido sódico al 10%.

Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si

se desean.




laboratorio.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/RX MONZA - AST - AS 1202/ AS 1204/ AS 1267/ AS 2359 PAGE 2 OF 3


R1a. Tampón/Sustrato

Listo para su uso. Estables hasta la fecha de caducidad

cuando se conservan entre +2 y +8C.


Reconstituir un vial de Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2

con el volumen adecuado de Tampón/Sustrato 1:

2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AS1202)



Es estable durante 14 días conservado entre +2 y +8C ó

24 horas entre +15 y +25C

Cat. No. AS 2359 5 x 100 ml

Disolver el contenido de una botella de Enzima/

Coenzima/-oxoglutarato 2 con un pequeño volumen de

Tampón/Sustrato 1 y luego transferir el contenido a la botella 1, enjuagando varias veces la botella 2. Es estable

durante 14 días cuando se conserva entre +2 y +8oC ó 24

horas entre +15 y +25oC.

MATERIALES SUMINISTRADOS Tampón/Sustrato

Enzima/Coenzima/-oxoglutarato



Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) Sueros de Calibración Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

Salino (Cat. No. SA 3854)

PROCEDIMIENTO

Aspire H2O de doble destilación y realice una nueva calibración

de la ganancia en el modo de célula de flujo. Seleccione AST en la

pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a cabo un blanco de

agua de la forma indicada.


Muestra 0.05 ml

Reactivo 0.5 ml

Mix and aspirate into the Rx Monza.






PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm ó Hg 365 nm)


Temperatura: 25/30/37C


Pipetear en cubeta: Macro Micro


Enzima/Coenzima/-oxoglutarato 2 2,0 ml 1,0 ml

Mezclar, leer la absorbancia inicial al cabo de 1 min. Leer de

nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min. Observar si la variación de la

absorbancia por minuto se sitúa entre

0,11 y 0,16 a 340/Hg 334 nm

0,06 y 0,08 a Hg 365 nm

para el cálculo usar sólo los valores obtenidos durante los 2

primeros minutos.

MANUAL CALCULOS

Para calcular la actividad de la GOT utilizar las fórmulas

siguientes:

U/l = 1746 x A 340 nm/min

U/l = 1780 x A Hg 334 nm/min

U/l = 3235 x A Hg 365 nm/min

NORMALIZACIÓN


el material de referencia JSCC TS01 de AST.

CONTROL DE CALIDAD














Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413.

ESPECIFICIDAD/INTERFERENCIA(6,7)

La hemólisis bruta producirá falsos resultados elevados.

Se deberá tomar en consideración los efectos de varios fármacos

en la actividad de La GOT en los casos de pacientes que estén

recibiendo grandes dosis de fármacos.

Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y

se encontró que no interfieren:

Hemoglobina 250 mg/dl

Bilirrubina libre 25 mg/dl)

Bilirrubina conjugada 25 mg/dl)

Triglicéridos 1000 mg/dl)

Intralipid® 200 mg/dl

Young et cols y Friedman et cols dan una lista de sustancias y

condiciones que se conoce que afectan a la actividad in vivo de La

GOT . La integridad de esta lista y la exactitud de la información

que en ella se suministra no representa necesariamente la

opinión de Randox Laboratories, Ltd.

VALORES NORMALES EN SUERO(8,9)

25C 30C 37C

Hombre: Hasta 18 U/l Hasta 25 U/l Hasta 37 U/l

Mujer : Hasta 15 U/l Hasta 21 U/l Hasta 31 U/l



población.

CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE

FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA


el analizador Rx Monza a una temperatura de 37oC.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/RX MONZA - AST - AS 1202/ AS 1204/ AS 1267/ AS 2359 PAGE 3 OF 3

LINEALIDAD

Este método es lineal hasta una concentración de 562 U/l. Si la

concentración sobrepasa este valor, la muestra se debe diluir 1 +

9 con una solución de NaCl del 0,9% y debe someterse a ensayo

de nuevo. Multiplicar el resultado por 10.

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de AST con un nivel


PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 35.6 153

DE 1.66 1.47

CV(%) 4.65 4.63

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 35.6 153

DE 1.77 7.10 CV(%) 4.86 4.63

n 20 20

CORRELATION

Este método (Y) se comparó con otro método disponible en el

mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión

lineal:

Y = 1.07X + 4.9

y un coeficiente de correlación de r = 0.9975

se hicieron análisis a 43 pacientes abarcando un rango de 28 a

559 U/l.

REFERENCIAS

1. Wroblewski F, La Due J.S: Ann Intern Med. 1956; 45: 801.

2. Wroblewski F, La Due J.S: Proc Soc Exp Biol Med 1956;

91: 569.

3. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: Clin Chem 1977; 23:

887.

4. Bergmeyer HU, Bowers GN Jr, et al: J.Clin Chem Clin

Biochem 1980; 18: 521-534.

5. Tietz N W: Fundamentals of Clinical Chemistry ed 3.

Philadelphia, WB Saunders Co. 1987, pg 372.

6. Young D S, et al: Clin Chem 1975, 21; No5.

7. Friedman RB, et al: Clin Chem 1980, 26; No4.

8. Wallnofer H, Schmidt.E, Schmidt FW, eds: Synopsis der

Leberkrankheiten Stuttgart, Georg Thieme Verlag, 1974.

9. Thefeld W, et al: Dtsch Med Wschr 1974; 99: 343.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

AMILASA (AMY) Etilideno Bloqueado-pNPG7

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de la Amilasa en el

suero y orina. Este producto es adecuado para su utilización

de forma manual y en el analizador Rx Monza.

No. Cat.

AY 2751 R1a. Tampón 1 x 50 ml


AY 1580 R1a. Tampón 1 x 105 ml


AY 1582 R1a. Tampón 2 x 105 ml 9 x 20 ml R1b. Substrato 9 x 20 ml

METODO COLORIMETRICO(1,2)

El método utiliza etilideno bloqueado

p-nitrofenil-maltoeptaosida como substrato. También se utiliza

en este método el indicador enzima glucosidasa, utilizado para

liberar el p-nitrofenol. La glucosa terminal del sustrato se

bloquea químicamente, previniendo la división por el enzima

indicador.

-amilasa

etilideno-G7 pNP etilideno -Gx + Gx-pNP

-glucosidase

Gx-pNP glucosa + pNP-glucosido

- glucosidasa

pNP-glucosido glucosa + pNP

G = glucosa

pNP = paranitrofenol

x = 2 to 5

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado u orina.

Diluir la orina 1+2 con NaCl al 0,9%. Multiplicar el resultado

por 3.


Componentes Concentración Inicial de los Reactivos

R1a. Tampón

Tampón Pipes 50 mmol/l, pH 7.0

Cloruro de Calcio 5.0 mmol/l

Cloruro Sódico 50 mmol/l

R1b. Substrato

Tampón Pipes 12.5 mmol/l, pH 7.0

etilideno-G7 pNP 1.0 mmol/l

-glucosidasa ≥12 U/ml





La Solución R1a contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el

contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de

contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante








al 10%.

Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles. Los reactivos deben utilizarse solamente para su propósito por personal de laboratorio cualificado, y bajo condiciones de laboratorio apropiadas. ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO Reconstituir el contenido de un frasco de Substrato R1b con el volumen apropiado de Tampón R1a:- 2 ml para el kit de 20 x 2 ml (AY 2751)

5 ml para el kit de 20 x 5 ml (AY 1580)

20 ml para el kit de 9 x 20 ml (AY 1582) Estable durante 21 días entre +2 y + 8oC.


Tampón

Substrato

MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS


Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) Suero de Calibración Randox Nivel 3 (No. Cat. CAL 2351).

NOTA

Evitar la hemólisis ya que puede disminuir los resultados.

Evitar la contaminación del reactivo, muestras y material de

cristal por medio de la saliva o sudor, dado que poseen altos

contenidos de amilasa. No pipetear con la boca.

PROCEDIMIENTO

Seleccione AMY en la pantalla de prueba de funcionamiento y

lleve a cabo un blanco de agua según las instrucciones.


Muestra 0.01 ml

Reactivo 0.5 ml

Mezclar y aspirar en el Monza RX


Se recomienda el uso de Calibración Randox nivel 3 para la

calibración. Se recomienda calibrar cada cambio de lote del

reactivo o como se indica en los procedimientos de control

de calidad.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

MANUAL/ RX MONZA AY 2751

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 405 nm (400-420 nm)


Temperatura: 37C



Muestra 0.02 ml

Reactivo 1.0 ml

Mezclar, leer la absorbancia inicial después de 60 segundos y al

mismo tiempo iniciar el temporizador. Leer de nuevo pasados

1, 2 y 3 minutos.

CÁLCULO MANUAL

Para calcular la actividad de la amilasa utilizar la siguiente

fórmula:

U/l = 4712 x A 405 nm/min

NORMALIZACIÓN

El suero de Calibración Randox nivel 3 es trazable a los

materiales de referencia amilasa IFCC456 y BCR476.

CONTROL DE CALIDAD


Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deberá de analizar

dos niveles de controles al menos una vez al día. Los valores









5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus

componentes.



94422413.

VALORES NORMALES

Suero: hasta 95 U / l (37°C)

Orina: Aleatorias hasta 490 U / l (37°C)

24 horas de orina hasta 450 U/24 horas (37°C)


rango de referencia para considerar las diferencias en edad,

sexo, dieta y localización geográfica.


FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de Rx

Monza en el modo de flujo de células a 37C.

LINEARIDAD

El método es lineal hasta una concentración de 880 U / l.

Diluir las muestras con mayor concentración en 1 + 9 con

0,9% de Solución NaCl y repetir el test. Multiplique el

resultado por 10.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de la amilasa con un nivel

aceptable de precisión ha sido determinada en 17.9 U/l.

PRECISION

Intraensayo

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 72.1 251

DE 3.17 7.35

CV (%) 4.39 2.93

n 20 20

Interensayo

Nivel 2 Nivel 3

Media (U/l) 72.1 251

DE 3.97 8.81

CV (%) 5.50 3.51

n 20 20

CORRELACION



lineal:

Y = 1.077 X - 8.548



28 - 838 U/l.

REFERENCIAS

1. Ranscher, E. et al (1986) Fresenius Z. Analyt. Chem. 324:

304.

2. Kruse - Jarres, J.D. et al (1989). J. Clin. Chem. Clin.

Biochem. 27: 103.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

DE 3

CALCIO (Ca) Método Colorimétrico

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de Calcio en el suero, plasma y

orina. Este producto es adecuado para un uso manual o en el

analizador RX monza.

No. Cat.

CA 590 CAL. Patrón 5.5 ml

200 ml R1. Tampón 1 x 100 ml

R2. Cromógeno 1 x 100 ml

R3. EDTA 10 ml

METODO COLORIMETRICO(1)

O-cresolftaleína complexona sin desproteinización.

PRINCIPIO Los iones calcio forman un complejo violeta con la

o-cresolftaleína complexona en medio alcalino.

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado u orina. Diluir la orina

1 + 1 en NaCl 0,9%. Multiplicar el resultado por 2.


Componentes Concentraciones iniciales

de las soluciones

CAL. Patrón

Calcio Vedi inserto lotto-specifico

R1. Tampón

2-amino-2-metil-

propan-1-ol 3.5 mol/l, pH 10,7

R2. Cromógeno

o-Cresolftaleína 0,16 mmol/l

complexona

8-hidroxiquinolina 6,89 mmol/l

Acido clorhídrico 60 mmol/l

R3. EDTA 150 mmol/l



Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren



desean.




laboratorio.


Todas las soluciones están listas para su uso. Mantener las botellas cerradas después de utilizarlas. Estables hasta la fecha de

caducidad cuando se conservan entre +15 y +25°C.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS DE TRABAJO Y

ESTABILIDAD

Mezclar volúmenes iguales de las soluciones R1 y R2 en cantidad

suficiente para el número de muestras que se vayan a ensayar.

Estable durante 7 días cuando se conserve entre +2 y +8°C ó 3

días entre +15 y +25°C.


Patrón

Tampón

Cromógeno

EDTA




Sérum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

PROCEDIMIENTO DE NOTA

Si la muestra tiene un color fuerte intrínseca (hemoglobina: >

200 mg/dl, bilirrubina> 20 mg/dl, o lipemia marcada), un blanco de muestra se debe ejecutar. (Ver abajo)

Esta prueba es muy sensible, por lo tanto el uso de material

desechable es aconsejable. Recipientes de vidrio deberán lavarse

con ácido clorhídrico diluido y luego enjuagar con agua destilada

antes de su uso.

PROCEDIMIENTO

Seleccione Calcio CPC en la pantalla de Ejecución de prueba y

llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones.



ddH20 12.5 µl - -

Muestra - - 12.5 µl

Patrón - 12.5 µl -

Reactivo 500 µl 500 µl 500 µl

Mezclar, incubar por 5 min a +25, +30 o +37C Inserte la cubeta

en el porta-RX monza celda de flujo y pulse Leer.

Para ejecutar un blanco de muestra:

Después de medir la absorbancia de la muestra de acuerdo con

el procedimiento de ensayo, añadir una gota de solución R3

(EDTA) a la muestra y la solución del reactivo. Cuando las

muestras han convertido incoloro (después de aproximadamente

10 segundos) insertar la cubeta en el porta-RX monza celda de flujo y pulse leer. Este resultado debe ser manualmente resta de

la muestra para obtener el valor corregido de calcio.


Recomendó el uso de CAL Patrón proporcionado en el kit. La

calibración se recomienda con un cambio en la cantidad de

reactivo o como se indica por procudures de control de calidad.

GAAMSA

www.gaamsa.com

DE 3

MANUAL/ RX MONZA CA 590

PARA USO MANUAL Longitud de onda: Hg 578 nm (550-590 nm) Espectrofotómetro: 570 nm Cubeta: 1 cm de espesor Medición: frente a blanco de reactivo sólo se requiere un blanco por serie Temperatura: +20 y +25°C/+37°C 1. Para ensayos individuales Pipetear en tubos de ensayo: Blanco de Reactivo Patrón Muestra Muestra --- --- 25 µl Agua destilada 25 µl --- --- CAL --- 25 µl --- Solución R1 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml Solución R2 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco al cabo de 5 a 50 min. 2. Para ensayos en serie Pipetear en tubos de ensayo: Blanco de Reactivo Patrón Muestra Muestra --- --- 25 µl Agua destilada 25 µl --- --- Patrón --- 25 µl --- Reactivo de trabajo 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml Mezclar, leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco al cabo de 5 a 50 min. Aunque la absorbancia se puede leer durante los 5 a 50 minutos siguientes, el tiempo de intervalo desde la adición de la muestra a la lectura deberá ser exactamente el mismo para el Patrón/Control y Muestra. Para ejecutar un blanco de muestra: Después de medir la absorbancia de la muestra de acuerdo con el procedimiento de ensayo, añadir una gota de solución R3 (EDTA) a la muestra y la solución del reactivo. Cuando las muestras han convertido incoloro (después de aproximadamente 10 segundos) insertar la cubeta en el porta-RX monza celda de flujo y pulse leer. Este resultado debe ser manualmente resta de la muestra para obtener el valor corregido de calcio. CALCULOS Amuestra Concentración = x Concentración del patrón (mmol/l) Apatrón (mmol/l) Amuestra Concentración = x Concentración del patrón (mg/dl) Apatrón (mg/dl)

STANDARDISATION

Randox Calibration Serum Level 3 is traceable to Calcium

reference material NIST 909b and NIST 956b.

CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 4. Comprobar la temperatura de reacción 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los

Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413. INTERFERENCIA/LIMITACIONES Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y se encontró que no interfieren: Bilirrubina 500 mol/l (29 mg/dl) Intralipid® 2% Triglicérido 22,75 mmol/l (2010 mg/dl) Hemoglobina 6 g/l (600 mg/dl) Gadodiamida (OMNISCAN: se utiliza en la RM) interfiere con el calcio sérico causando que los niveles bajos (3). VALORES NORMALES(2) Suero: 2,02 -2,60 mmol/l (8,10-10,4 mg/dl) Orina: 2,5 -6,2 mmol/24hrs (100 - 249 mg/24 hrs) Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de la población. CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE FUNCIONAMIENTO Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron mediante el analizador RX monza en el modo de cubeta a +37ºC. SUERO LINEALIDAD El método es lineal hasta 5,67 mmol / l (22,7 mg/dl). Las muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 +1 con el 0,9% de NaCl y volver a ensayar, multiplicar el resultado por 2. SENSIBILIDAD La concentración mínima detectable de calcio con un nivel aceptable de precisión se determinó como 1,16 mg/dl (0,290 mmol/l). PRECISION Intra Assay Nivel 1 Nivel 2 Mean (mg/dl) 9.02 12.4 SD 0.220 0.249 CV(%) 2.44 2.01 n 20 20 Inter Assay Nivel 1 Nivel 2 Mean (mg/dl) 9.02 12.4 SD 0.352 0.317 CV(%) 3.91 2.56 n 20 20

GAAMSA

www.gaamsa.com


PÁGINA 3 DE 3

CORRELACION

Este método (Y) se comparó con otro método disponible en el

mercado (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión

lineal:

Y=0.9914 X -0.089


Se analizaron 42 muestras con valores de entre 4,1 y 16,5 mg/dl.

ORINA

LINEALIDAD El método es lineal hasta 7,13 mmol / l (28,6 mg / dl). Las muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 +1 con el 0,9% de NaCl y volver a ensayar, multiplicar el resultado por 2.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de calcio con un nivel

aceptable de precisión se determinó como 1,29 mg/dl

(0,321 mmol/l).

REFERENCIAS

1. Ray Sarkar,B.C., and U.P.S. Chauhan., Anal Biochem. 1967;

20: 155.

2. Barnett, R.N., et al. (1973) Amer. J. Clin. Path. 59: 836.

3. Prince et al, Radiology 2003; 227: 639-646

Revisado 17 nov 11 rw Rev. 002

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

CALCIO (Ca) ARSENAZO III Método Colorimétrico MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO Para la determinación cuantitativa in vitro de Calcio en suero,

plasma u orina. Este producto es adecuado para su utilización de

forma manual y en el analizador RX monza.

No. Cat.

CA 2390 R1. Reactivo Arsenazo 6 x 100 ml

SIGNIFICADO CLINICO(1) El calcio es el quinto elemento más abundante en el cuerpo. La

mayor parte del calcio en el adulto humano es extracelular y el

99% existe como hidroxiapatita cristalina en los huesos y los

dientes donde confiere rigidez. El calcio en el suero existe en

tres formas: unido a proteínas (45%); ionizado (45%) y un 10%

forma un complejo con pequeños ligantes difusibles tales como

citrato, lactato, fosfato y bicarbonato. El calcio juega un papel

importante en los mecanismos de transmisión del impulso

nervioso, la contracción muscular y la coagulación sanguínea. El

calcio también participa en la regulación de la actividad de la

adenilato ciclasa y fosfodiesterasa a través de la combinación

reversible con la calmodulina. La secreción de las glándulas

paratiroides, células tiroideas C y las células pancreáticas B está

controlada por la concentración de calcio ionizado extracelular

en la superficie celular.

Los niveles elevados de calcio en suero se encuentran en los

casos de hiperparatiroidismo, los carcinomas, sobredosis de

vitamina D y son de valor diagnóstico en la detección de la

enfermedad renal crónica y enfermedad pancreática aguda. Los

bajos niveles de calcio sérico se asocian con hipoparatiroidismo,

deficiencia de vitamina D y la insuficiencia renal. PRINCIPIO Arsenazo III se une específicamente al calcio formando un

complejo coloreado que puede medirse a 650 nm.

Ca++ + Arsenazo III Complejo Coloreado

La cantidad de calcio presente en la muestra es directamente proporcional a la intensidad del complejo coloreado. MUESTRA(4) Suero/Plasma: NO USAR oxalato sódico, EDTA (Lithium heparinzed) fluoruro sódico como anticoagulantes,

ya que interfieren. El suero es estable durante 8 horas a temperatura ambiente o 24 horas cuando se conservan entre +2 y +8C

Orina: Se recomienda realizar un ensayo sobre la orina dentro de las dos horas posteriores a la recolección.

COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Componentes Concentración Inicial de las soluciones

R1. Reactivo Arsenazo III

Acetato Sódico 54.2 mmol/l, pH 5.9

Arsenazo approx. 250 mol/l

Estabilizadores No reactivos

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo de reactivos de laboratorio. Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se desean. Por favor, desechar todos los materiales Biológicos y Químicos según las pautes locales. Los reactivos deben ser utilizados sólo para los propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de laboratorio. ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Reactivo listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad

cuando se conservan entre +15 y +25C. MATERIALES SUMINISTRADOS Reactivo Arsenazo MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS Pipetear el dispositivo para suministrar 5 µl y 1 ml. Sincronizar el dispositivo y el lavado de agua o el bloque

calefactor para mantener la temperatura a 25, 30 ó 37C. Espectrofotómetro con capacidad de longitud de onda de 640 a 660 nm. Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) Suero de Calibración Randox Nivel 3 (No. Cat. CAL 2351). PROCEDIMIENTO Seleccione Ca en la pantalla Ejecutar prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones. Pipetee en una cubeta: Blanco de reactivo/ S0 Patrón S1 Muestra ddH2O 7.5 l - - Muestra - - 7.5 l Calibrador - 7.5 l - Reactivo 500 l 500 l 500 l Mezclar, incubar por 5 min a 25ºC, 30ºC o 37ºC. Inserte la cubeta en el soporte de la célula de flujo del Rx Monza y pulse Leer. PARA USO MANUAL Longitud de onda: 650 nm (640 nm - 660 nm) Cubeta: 1 cm light path

Temperatura 25/30/37C Medición: against air Pipetee en una cubeta: Blanco de reactivo Calibrador Muestra Agua destilada 15 l - - Muestra - - 15 l Calibrador - 15 l - Reactivo 1 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml Mezclar y leer la absorbencia de la muestra (Amuestra) y calibrador (Acalibrador) contra el blanco de reactivo después de 5 minutos.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2


CÁLCULO MANUAL

Amuestra

Concentración = ────── x calibrador de valor

Acalibrador

CALIBRACIÓN

Se recomienda el uso de solución salina y Suero de Calibración

Randox Nivel 3 para la calibración. La calibración se recomienda

en los cambios de lote del reactivo o como se indica en los


CONTROL DE CALIDAD


Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3. Se deberá de analizar dos

niveles de controles al menos una vez al día. Los valores

obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los

valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error,

se deberán seguir los siguientes pasos:









94422413.

INTERFERENCIAS / LIMITACIONES (5)

Gadodiamida (OMNISCAN: usado en el RM imagin) interfiere

con el calcio sérico causando niveles bajos.

VALORES NORMALES(3)

Suero: 2.02 - 2.60 mmol/l ( 8.10 - 10.4 mg/dl )

Orina: 2.5 - 6.2 mmol/24 hrs (100 - 249 mg/24 hrs)


de referencia para considerar las diferencias en edad, sexo, dieta



FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador Rx

Monza funcionando a una temperatura de 37ºC.

SUERO

LINEALIDAD

Este método es lineal hasta 14,4 mg / dl. Diluir las muestras por

encima de esta concentración a 1 +1 con el 0,9% de NaCl y

repetir el test. Multiplique el resultado por 2.

SENSIBILIDAD

El nivel mínimo detectable de calcio con un nivel aceptable de

precisión ha sido determinada como 0,54 mg / dl.

PRECISION

Precisión Dentro del Análisis

Muestra Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 10.1 12.8

DE 0.337 0.392

CV (%) 3.34 3.07

n 20 20

Precisión Total

Muestra Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 10.1 12.8

DE 0.424 0.371

CV (%) 4.20 2.90

n 20 20

METHOD COMPARISON

El método Randox (Y) se comparó con un método alternativo

disponible comercialmente (X). Cuarenta muestras de los pacientes con valores que abarca el rango de 1,7 a 12.1mg/dl se

pusieron a prueba. El análisis de regresión lineal resultó en la

siguiente ecuación:

Y = 0.961 X + 0.4


ORINA

LINEARIDAD

Este método es lineal hasta 14,5 mg / dl. Diluir las muestras por

encima de esta concentración a 1+1 con el 0,9% de NaCl y

repetir el test. Multiplique el resultado por 2.

SENSIBILIDAD

El nivel mínimo detectable de calcio con un nivel aceptable de

precisión ha sido determinada como 0,78 mg / dl.

REFERENCIAS

1. Tietz, N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry 2nd Edition

W.B. Saunders Co., Philadelphia (1976)

2. Michaylova, V., and IIIkova, P., Anal Chem Acta, 53: 194

(1971).

3. Barnett, R.N., et al. (1973) Amer. J. Clin. Path. 59: 836.

4. Young, D. Pestaner L., Clin Chem. 21: 5 (1975).

5. Prince et al, Radiology 2003; 227: 639-646.

Revised 17 Nov 11 bm

Rev. 002

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

CO2 TOTAL (CO2) 340 nm

Manual

PARA SU USO

Determinación cuantitativa in vitro de dióxido de carbono en

suero y plasma. Este producto es adecuado para su utilización en

Manual.

No. Cat.

CD 127 R1a. Tampón 1 x 105 ml

10 x 10 ml R1b. Reactivo CO2 10 x 10 ml

CAL. Standard 1 x 5.5 ml

CD 129 R1a. Tampón 10 x 50 ml

10 x 50 ml R1b. Reactivo CO2 10 x 50 ml

CAL. Standard 1 x 5.5 ml

SIGNIFICADO CLÍNICO(1)

El incremento de CO2 sanguíneo (hipercapnia) provoca una

acidosis respiratoria. El CO2 aumenta cuando la ventilación

alveolar está disminuida en patologías pulmonares o bronquiales,

o también al respirar aire con niveles elevados de CO2. La

depresión de la capacidad pulmonar total provocada por algunos

medicamentos puede conllevar una retención de CO2.

PRINCIPIO(2,3)

PEPC

Fosfoenolpiruvato + HCO3- oxaloacetato + H2P04-

MDH

oxaloacetato + NADH + H+ malato + NAD+

La disminución de la absorbancia a 340 nm provocada por la

oxidación del NADH es directamente proporcional a la

concentración de bicarbonato en la muestra.

RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS(4)


No deben usarse como anticoagulantes EDTA, oxalato ó citrato,

ya que podrían afectar a los resultados. Sumergir la muestra en

hielo y analizarla en la hora que sigue. Las muestras se deberán

conservar cerradas herméticamente, ya que el CO2 se difunde de

la muestra, causando valores erróneos (hasta 6 mmol/hr)

COMPOSICIÓN DE LOS REACTIVOS

Contents Concentration in the Test

R1a. Tampón

Tampón Tris 25 mmol/l, pH 6.5

R1b. Reactivo CO2

Fosfoenolpiruvato (PEP) 6.3 mmol/l

NADH 0.45 mmol/l

Fosfoenolpiruvato Carboxilasa (PEPC) 200 U/l

Malato Deshidrogenasa (MDH) 600 U/l

Mg2+ 8.0 mmol/l

CAL. Patrón Vedi inserto lotto-specifico

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Y CONSEJOS


las precauciones normales requeridas para la manipulación de


La solución R1a contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el


contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua

durante 10 minutos. En caso de contacto con los ojos o

ingestión, buscar atención médica inmediatamente.

La azida sódica reacciona con el plomo y el cobre de las cañerías,

formando azidas potencialmente explosivas. Cuando se eliminen

dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes de agua para

evitar la formación de azidas. Las superfcies metálicas expuestas

deberán limpiarse con hidróxido de sodio al 10%.

Existen hojas sanitarias y de seguridad disponibles previa

solicitud.

Los reactivos deben ser utilizados solamente para su

propósito por personal de laboratorio cualificado y bajo


ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE REACTIVOS

R1a. Tampón


cuando se conserva entre +2 y +8oC.

R1b. Reactivo CO2

CD 127

Reconstituir 1 vial de CO2 R1b con 10 ml de tampón

R1a. Estable durante 15 días entre +2 y +8C, en su

frasco original sellado, 70 horas entre +2 y +8C o 25

horas entre +15 y +25C expuesto a la atmósfera cuando se almacena en el recipiente original o en un

recipiente con un cuello estrecho. Véase la nota 4.

CD 129

Reconstituir el contenido de un vial de CO2 R1b con

una parte de tampón R1a. Transferir todo el

contenido de la botella de tampón 1, enjuagando el

vial 2 varias veces. Estable durante 15 días entre +2 y

+8C, en su frasco original sellado, 70 horas entre +2

y +8C o 25 horas entre +15 y +25C expuesto a la atmósfera cuando está en su envase original o en en

un recipiente con un cuello estrecho. Véase la nota 4.

NOTA: No agitar el reactivo cuando se

reconstituya, ya que esto puede causar una absorción

de CO2 excesiva. Es suficiente con invertir el frasco

con cuidado una vez.

CAL. Patrón


cuando se conserva entre +2 y +8oC.

MATERIAL SUMINISTRADO

Tampón

Reactivo CO2

Patrón

MATERIAL NECESARIO PERO NO SUMINISTRADO

Randox Assayed Multisera, Nivel 2, No. Cat. HN1530 y Nivel 3,

No. Cat. HE1532.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL CD 127

PAGE 2 OF 2

NOTAS DE PROCEDIMIENTO

1. Para permitir que el reactivo para alcanzar el equilibrio, se

recomienda que se reconstituye preferiblemente la noche

antes, pero por lo menos 4 horas antes de su uso. El reactivo

es entonces estable durante 15 días entre +2 y +8C en su

vial original sellado o 70 horas entre +2 y +8C expuesto a la atmósfera.

2. No exponer el reactivo al aire más de lo necesario y

almacenarlo cerrado herméticamente.

3. No pipetear con la boca.

4. No agitar el reactivo vigorosamente ya que se podría

producir una absorción excesiva de CO2 .

PROCEDIMIENTO


Cuveta: 1 cm de espesor

Temperatura: 37C

Medición: frente a agua destilada


Test Blanco Patrón

Muestra 5 l -- -- Agua bidestilada -- 5 l --

Patrón -- -- 5 l

Reactivo 1000 l 1000 l 1000 l

Incubar durante 5 min. a 37oC y medir la absorbancia del patrón

(Apatrón), de la muestra (Amuestra), y del reactivo blanco (Ablanco).

CACULO

Amuestra = Ablanco - Amuestra Amuestra

CO2 Total = ──── x conc. de patrón

(mmol/l) Apatrón

CALIBRACIÓN

Se recomienda para la calibración el patrón CO2 Randox

suministrado con el kit. El patrón está preparado

gravimétricamente utilizando bicarbonato sódico grado A.C.S. Se

recomienda recalibrar para cada serie de muestras analizadas.

CONTROL DE CALIDAD

Se aconseja Randox Assayed Multisera, Nivel 2 y Nivel 3 para un

control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de control

como mínimo una vez al día. Los valores obtenidos deben

encontrarse dentro de un rango específico. Si los valores se

encuentran fuera del rango y su repetición excluye el error, se


1. Comprobar los parámetros del instrumento y la lámpara.

2. Comprobar que todo el material esté limpio.

3. Comprobar el agua y la contaminación (el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados). 4. Comprobar la temperatura de reacción.

5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y de sus componentes.


Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442

2413.

SUSTANCIAS QUE INTERFIEREN(4)

La mayor interferencia en este ensayo la constituye el CO2 del

aire o del aliento del analista. Existen otros medicamentos y

sustancias que modifican los niveles de CO2 sanguíneo. La

hemoglobina no afecta en el ensayo hasta una concentración de 2

g/l.

VALORES NORMALES EN SUERO(5)

Adultos : Arterial 21 - 28 mmol/l

Venoso 22 -29 mmol/l

Arterial Recién nacidos 17,2 -23,6 mmol/l

Niños pequeños 19,0 -23,9 mmol/l


de referencia para referirse a la edad, el sexo, la dieta y la

situación geográfica de la población.

LINEALIDAD Este método es lineal hasta una concentración de 50 mmol/l. Las

muestras con concentraciones superiores deberán diluirse 1+1

con solución NaCl al 0,9% y multiplicar el resultado por 2.

SENSIBILIDAD


se sensibilidad, ya que está limitada por el espectrofotómetro

utilizado. Bajo las condiciones del análisis, un cambio de la

absorbancia de 0,001 unidades es equivalente a 0,8 mmol/l.

REFERENCIAS

1. Tietz, N. N., et al "Textbook of Clinical Chemistry" W. B.

Saunders Co., 1986; 1172-1253.

2. Jacobs, N., et al "Laboratory Test Handbook" 2nd. ed.,

Williams and Wilkins 1990.

3. Forrester, R.L., Wataji, L.J., Silverman, D.A., Pierre K.J., Clin,

Chem. 1976; 22/2: 243-245.

4. Young D.S., Effects of Drugs on Chemical Laboratory Tests,

3rd ed., AACC Press 1990.

5. Norris, K.A., Atkinson, A.R., Smith, W.G., Clin. Chem. 1975;

21/8: 1093 - 1101.

Revised 01 Feb 11 bm

Rev. 002

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

COLESTEROL (CHOL) Método Enzimático de Punto Final

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de Colesterol en suero y

plasma. Este producto es adecuado para su utilización de forma

manual y en el analizador Rx Monza.

Cat. No.

CH 200 R1. Reactivo 6 x 30 ml

6 x 30 ml CAL. Patrón 1 x 5.5 ml





UTILIDAD CLÍNICA(1,2,3)

El análisis de Colesterol és utilizado para el diagnóstico y

tratamiento de dislipemias y desórdenes metabólicos.

Los lípidos representan un importante papel en el cuerpo

humano: ya sea cómo homonas o precursores hormonales,

ayuda a la digestión, fuente o almacén de recursos energéticos,

componentes estructurales y funcionales de membranas

biológicas, o funcionando como aislantes para prevenir pérdidas

de calor y permitir la conducción nerviosa

En Química Clínica, los lípidos han sido asociado durante la

última década con el metabolismo de las lipoproteínas y la

ateriosclerosis

El método descrito por Abell y cols (1952) se refiere a la

extracción del colesterol con disolventes orgánicos y una

posterior hidrólisis alcalina de los ésteres de colesterol.

La reacción és altamente específica, pero la metodología es

laboriosa y requiere reactivos corrosivos, siendo por tanto

impracticable en la rutina diaria del laboratorio

Richmond (1973) describió el método de la colesterol oxidasa,

trás la saponificación de la muestra. Este método fué el primer

paso hacia un procedimiento totalmente enzimático. Allain y cols

junto con Roeschaw y cols publicaron en 1974 el primer

procedimiento completamente enzimático para determinar

colesterol, reemplazando así la saponificación química por la

saponificación enzimática.

PRINCIPIO(4)

El colesterol se determina tras una hidrólisis enzimática y una

oxidación. El indicador quinoneimina se forma a partir de

peróxido de hidrógeno y 4-aminoantipirina en presencia de fenol

y peroxidasa.

colesterol

Ester de colesterol + H2O colesterol + Acidos grasos

esterasa

colesterol

Colesterol + O2 Colesten-3-ona + H2O2

oxidasa peroxidasa

2H2O2+fenol+4-aminoantipirina quinoneimina + H2O

RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS(5)

Suero: Puede ser utilizado. Plasma: Tratado con EDTA (1 mg/ml) o heparina (up to 75 U/ml) No utilizar citrato, oxalato o fluor. Las muestras de Plasma y Suero pueden almacenarse durante 4 días +4°C. COMPOSICION DEL REACTIVO Componentes Concentración inicial de la solución R1. Reactivo 4-aminoantipirina 0,30 mmol/l Fenol 6 mmol/l Peroxidasa ≥0,5ml Colesterol esterasa ≥0,15 U/ml Colesterol oxidasa ≥0,1 U/ml Tampón Pipes 80 mmol/l;pH 6,8 CAL. Patrón Vedi inserto lotto-specifico PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren al manejar reactivos de laboratorio. La solución R1 contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar inmediatamente el área afectada con agua abundante. En caso de ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un médico. La azida sódica reacciona con el cobre y plomo de las tuberías, lo que podría producir azidas explosivas. Cuando se deseche este reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la formación de estas azidas. Las superficies metálicas que hayan sido puestas en contacto con la azida sódica deben ser lavadas con hidróxido sódico al 10%. Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se desean. Por favor, desechar todos los materiales Biológicos y Químicos según las pautas locales. Los reactivos deben ser utilizados solo para los propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de laboratorio. ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS (R1) Reactivo Listo para su uso. Es estable hasta la fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8°C en ausencia de contaminación y protegido de la luz. (CAL.) Patrón Listo para su uso. Es estable hasta la fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8°C. MATERIALES SUMINISTRADOS Reactivo Patrón MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y



GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA CH 200

PAGE 2 OF 3

PROCEDIMIENTO

Utilice H2O de doble destilación para realizar una nueva

calibración de la ganancia en el modo cubeta. Seleccione CHOL

en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y lleve a cabo un blanco

de agua de la forma indicada.

Pipetear en tubos de ensayo: Blanco de reactivo S0 Patrón S1 Muestra ddH2O 5 l - - Patrón - 5 l - Muestra - - 5 l Reactivo 500 l 500 l 0.5 ml

Mézclelo e incúbelo durante 10 minutos a 20-25C o durante 5

minutos a 37C.

Introdúzcalo en el soporte de la celda de flujo de RX Monza y

pulse Read (Leer) en un plazo de 60 minutos. CALIBRACIÓN PARA RX MONZA

Recomendó el uso de CAL estándar en el kit de calibración o de

suero Randox Nivel 3. La calibración se recomienda con un

cambio en la cantidad de reactivo o como se indica por los


PARA USO MANUAL

Longitud de onda 500 nm, Hg 546 nm

Cubeta 1 cm de espesor

Temperatura 20-25°C, 37°C

Medición frente a reactivo blanco


Reactivo Blanco (l) Patrón (l) Muestra (l)

Agua Destilada 10 --- ---

Patrón --- 10 ---

Muestra --- --- 10

Reactivo 1000 1000 1000

Mezclar, incubar durante 10 min. a 20-25°C ó 5 min. a 37°C.

Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) frente al blanco

antes de 60 min.

CÁLCULO MANUAL

1. Utilizando un patrón:

Amuestra

Conc. de colesterol = x Conc. de patrón

en la muestra Apatrón

2. Utilizando un factor:

Longitud de onda mmol/l mg/dl

Hg 546 nm 21,7 x A 840 x A

500 nm 14,3 x A 553 x A

NORMALIZACIÓN


el material de referencia NIST 909b and NIST 1952a de la

Colesterol.

CONTROL DE CALIDAD







1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara








INTERFERENCIA

Valores de hemoglobina hasta 200 mg/dl y de bilirrubina hasta 5

mg/dl y de triglicérido hasta 4,64 mmol/l, no interfieren en la

prueba.

VALORES NORMALES EN SUERO/PLASMA(6)

Niveles de riesgo

Valor Interpretación

< 5,17 mmol/l (200 mg/dl) Colesterol en sangre deseado

5,17 - 6,18 mmol/l (200-239 mg/dl) Colesterol en sangre

límite-alto

≥ 6,20 mmol/l (240 mg/dl) Colesterol en sangre alto



población.

CARACTERÍSTICAS ESPECIFICAS DE

FUNCIONAMIENTO



LINEALIDAD

El método es lineal hasta una concentración de colesterol de 656

mmol/l (17.0 mg/dl). Las muestras con concentraciones de

colesterol superiores a ésta, deben ser diluidas 1+2 con NaCl al

0,9%. Multiplicar el resultado por 3. SENSIBILIDAD La concentración detectable mínima de Colesterol con un nivel aceptable de precisión se determinó en 13,7 mg/dl (0,354 mmol/l). PRECISION Análisis (Intra) Nivel 2 Nivel 3 Media (mg/dl) 3.65 7.18 DE 0.100 0.088 CV(%) 2.74 1.23 n 20 20 Análisis (Inter) Nivel 2 Nivel 3 Media (mg/dl) 3.65 7.18 DE 0.143 0.333 CV(%) 3.92 4.64 n 20 20

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA CH 200

PAGE 3 OF 3

CORRELACION



lineal:

Y = 0.963 X - 0.157


Se analizaron 44 muestras de pacientes con valores de entre 0,42

y 15,85 mmol/l.

REFERENCIAS

1. Abell, L.L, Levey, B.B., Brodie B.B., et al, J. Biol Chem 195 :

357, 1952

2. Richmond, N., Clin Chem 19 : 1350 - 1356, 1973

3. Roeschlau, P., Bernt, E. and Gruber, J.W., Clin Chem Clin

Biochem. 12 : 403, 1974

4. Trinder, P., Ann clin Biochem 6 : 24, 1969.

5. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st Edition (1998) p169;

Lothar Thomas ed. TH-Books Verlagsgesellschaft mbH,

Frankfurt/Main, Germany

6. Third Report of the National Cholesterol Education

Programme (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation

and treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult

Treatment Panel III). JAMA Publication, Vol 285, No. 19,

P2486 - 2497; 2001.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

CK-NAC-activada Creatina Quinasa

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de Creatina Quinasa en

suero y plasma. Este producto es adecuado para un uso manual o


No. Cat.

CK 110 R1a. Tampón/Glucosa 1 x 70 ml

20 x 2,5 ml R1b. Enzimas/Coenzimas/ 20 x 2,5 ml

Sustrato


20 x 3,0 ml R1b. Enzimas/Coenzimas/ 20 x 3,0 ml

Sustrato


10 x 10 ml R1b. Enzimas/Coenzimas/ 10 x 10 ml

Sustrato


6 x 30 ml R1b. Enzimas/Coenzimas/ 6 x 30 ml

Sustrato

SIGNIFICADO CLINICO(3)

La Creatina Quinasa (CK) se encuentra principalmente en el

músculo estriado, el cerebro y los tejidos musculares. El análisis

de la actividad de la CK en plasma o suero, provee un marcardor

sensible para la detección de enfermedades del tejido muscular

esesquelético. Por ej. En la distrofia muscular del tipo Duchenne

se pueden encontrar niveles de CK hasta 50 veces superior al

límite de normalidad establecido. En el caso de la distrofia

muscular progresiva la actividad máxima de ésta enzima se

observa en niños y lactantes

La actividad de la CK es también útil en el diagnóstico del infarto

de miocardio y acidentes cerebrovasculares.

La determinación de la CK utilizando creatina fosfato y adenosin-

5’-difosfato (ADP) como substratos en lugar de creatina y

adenosin-5’-trifosfato (ATP), tiene varias ventajas en el

funcionamiento del test ya que permite un valor de reacción más

rápido resultando en una sensibilidad mayor. Se utilizan

cantidades de muestra pequeñas y no se necesitan los blancos de

muestra.

Debido a la oxidación de los grupos sulfidril en la zona activa de

la creatina quinasa, la enzima es muy inestable. Sin embargo, el

enzima se reactiva añadiendo compuestos tiol.

Por este motivo se incluye N-acetil-L-cisteina (NAC) en el test.

También se incluyen en el sistema del test adenosin-5'-

monofosfato (AMP) y diadenosin pentafosfato, para inhibir la

actividad mioquinasa la cual interfiere. En este sistema de test no

existen sulfatos ya que alteran la reacción ,

METODO UV(1)

Este es un método estándar optimizado según las

recomendaciones de la Deutschen Gesellschaft für Klinische

Chemie.

PRINCIPIO

CK

Fosfato de creatina + ADP Creatina + ATP

HK

Glucosa + ATP Glucosa-6-P + ADP

G-6-PDH

Glucosa-6-P + NADP+ Gluconato-6-P + NADPH + H+

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado o EDTA plasma.



R1a. Tampón/Glucosa

Tampón Imidazol 0,10 mol/l, pH 6,7

Glucosa 20 mmol/l

Mg-Acetato 10 mmol/l

EDTA 2,0 mmol/l

R1b. Enzimas/Coenzimas/Sustrato

ADP 2,0 mmol/l

AMP 5,0 mmol/l

Pentafosfato de diadenosina 10 mol/l

NADP 2,0 mmol/l

HK ≥ 2,5 U/ml

G-6-PDH ≥ 1,5 U/ml

N-Acetilcisteina 20 mmol/l

Fosfato de creatina 30 mmol/l









a un médico.

La azida sódica reacciona con el cobre y plomo de las tuberías, lo

que podría producir azidas explosivas. Cuando se deseche este

reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la



con hidróxido sódico al 10%


desean.


propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de

laboratorio.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3


R1a. Tampón/Glucosa

Listo para usar. Estables hasta la fecha de caducidad


R1b. Enzimas/Coenzimas/Sustrato

Reconstituir un vial de Enzimas/Coenzimas/Sustrato R1b con el volumen adecuado de Tampón/Glucosa R1a:

2,5 ml para el kit de 20 x 2,5 ml (CK 110)


10 ml para el kit de 10 x 10 ml (CK 522)


Estables durante 3 semanas entre +2 y +8C ó 3 días

entre +15 y +25C.


Tampón/Glucosa

Enzimas/Coenzimas/Sustrato




Randox Calibration Serum Level 3 (Cat. No. CAL 2351).

PROCEDIMIENTO PARA RX MONZA

Aspirar ddH2O fresco y realizar una nueva calibración de

ganancia en el modo de flujo de células. Seleccione la NAC en la

pantalla de Ejecución de prueba y llevar a cabo un blanco de agua

según las instrucciones


Muestra 10 µl

Reactivo 500 µl

Mezclar y aspirar a la RX monza.






MANUAL PROCEDURE

Longitud de onda: 340 nm, Hg 365 nm o Hg 334 nm


Temperatura: 25C/30C/37C



25/30C 37C

Macro Semi Micro Macro Semi Micro

Enzimas/Coenzimas/

Sustrato 2,5 ml 1,0 ml 2,5 ml 1,0 ml

Muestra 0,1 ml 0,04 ml 0,05 ml 0,02 ml

Mezclar, incubar durante: 3 min a 25C

2 min a 30C

1 min a 37C

Leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar el tiempo

simultáneamente. Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min.

CALCULOS

Para calcular la actividad de la CK utilizar las fórmulas siguientes:

25/30C 37C

U/l = 4127 x ∆A340 nm/min U/l = 8095 x ∆A340 nm/min U/l = 4207 x ∆A Hg 334 nm/min U/l = 8252 x ∆A Hg 334 nm/min U/l = 7429 x ∆A Hg 365 nm/min U/l = 14571 x ∆A Hg 365 nm/min

NORMALIZACIÓN


el material de referencia AD455 (IFCC) de la CK-NAC.

CONTROL DE CALIDAD















INTERFERENCIA

Evitar la hemólisis ya que interfiere con el ensayo.

VALORES NORMALES EN SUERO(2,3)

25C 30C 37C

Hombre 10 - 80 U/l 15 - 130 U/l 24 - 195 U/l

Mujer 10 - 70 U/l 15 - 110 U/l 24 - 170 U/l



población.


FUNCIONAMIENTO


el analizador RX monza en el modo de flujo de células a 37C.

LINEARIDAD

Este método es lineal hasta 2804 U / l. Si la concentración de la

muestra supera este valor, diluir la muestra 1 +9 con el 0,9% de

NaCl y repetir el test. Multiplique el resultado por 9 +1.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de la Creatina Quinasa con

un nivel aceptable de precisión se determinó como 21,7 U/l.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 1 Nivel 2

Media (U/l) 215 549

DE 4.97 8.51

CV(%) 2.31 1.55 n 20 20 Análisis (Inter) Nivel 1 Nivel 2 Media (U/l) 215 549 DE 8.41 18.4 CV(%) 3.91 3.35 n 20 20 CORRELACION



lineal:

Y = 0.9538 X + 7.5746 con un coeficiente de correlación r = 0.9988

Se analizaron 47 muestras con valores de entre 37 y 2755 U/l.

REFERENCIAS

1. Rec. GSCC (DGKC); J. Clin. Chem. Clin. Biochem 1977; 15:

255.

2. Stein, W. (1985), Med. Welt 36: 572.

3. Szasz, G., et al. Clin. Chem 1976; 22: 650.

Revisado 15 Sep 10 bm Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

CK-MB (NAC-act.) Método UV

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de CK-MB en suero y plasma.

Este producto es adecuado para su utilización de forma manual y


No. Cat.

CK 1296 R1a. CK NAC/CK-MB Tampón/Glucosa 1 x 70 ml

19 x 2.5 ml R1b. Enzima/Coenzimas/

Substrato/Anticuerpo 19 x 2.5 ml

CONTROL 1 x 2 ml

CK 1553 R1a. CK NAC/CK-MB Tampón/Glucosa 1 x 105 ml

5 x 20 ml R1b. Enzima/Coenzimas/ Substrato/Anticuerpo 5 x 20 ml

CONTROL 2 x 2 ml


La Creatina Kinasa (CK) está aceptada internacionalmente como

un indicador sensitivo y específico del infarto de miocardio agudo

(AMI). Existen 3 tipos de iso-enzimas CK, CK-MM, CK-MB y

CK-BB. El CK-BB lo produce el cerebro a partir del tejido del

esqueleto y el corazón y el CK-MB se produce a partir del

músculo del corazón. En la mayoría de los casos la actividad de

CK aumenta durante las 6 horas posteriores a un infarto agudo.

Los valores máximos se observan al cabo de unas 20 horas. La

actividad de CK normalmente vuelve a su normalidad durante el

cuarto o quinto día posterior al infarto.

PRINCIPIO(3)

Análisis de Inmunoinhibición: Se incorpora un anticuerpo en el

reactivo CK. Este anticuerpo se unirá e inhibirá la actividad de la

subunidad M de CK-MB. Esto significa que sólo se mide la

actividad de la subunidad B en el suero. Si la actividad se

multiplica por el factor 2, nos dará la actividad de la CK-MB en

suero.

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado o EDTA



R1a. CK NAC/CK-MB Tampón/Glucosa

Tampón Imidazola 0.10 mol/l, pH 6.7

Glucosa 20 mmol/l

Mg-acetato 10 mmol/l

EDTA 2.0 mmol/l

R1b. Enzima/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo

ADP 2.0 mmol/l

AMP 5.0 mmol/l

Pentafosfato de Diadenosina 10 μmol/l

NADP 2.0 mmol/l

HK ≥ 2.5 U/ml G-6-PDH ≥ 1.5 U/ml

N-acetilcisteina 20 mmol/l

Fosfato de Creatina 30 mmol/l

Antibody to CK-M

CONTROL





La solución R1a contiene Azida Sódicas. Evitar su ingestión o el


contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua.

En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar atención

médica inmediatamente.

Las azidas sódicas reaccionan con el plomo y cobre de las

cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando se

eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes de agua

para evitar la formación de ácidos. Las superficies metálicas

expuestas, deberán limpiarse con hidróxido sódico al 10%.

Atención: Suero de Control

El material de origen humano del que se deriva este producto ha sido analizado a nivel de donante para el anticuerpo del Virus de

Inmunodeficiencia Humano (HIV 1, HIV 2), el Antígeno de

Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y el anticuerpo del Virus de

Hepatitis C (HCV) y se ha encontrado que es NO-REACTIVO.

Sin embargo, dado que ningún método puede ofrecer una

seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este

material y todas las muestras de pacientes se deberán manejar

como posibles transmisores de enfermedades infecciosas.

Hojas de Salud y Seguridad están disponibles si se desean.

Por favor, desechar todos los materiales Biológicos y Químicos

según las pautes locales.




ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS

R1a. CK NAC/CK-MB Tampón/Glucosa



R1b. Enzima/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo

Reconstituir un frasco de Enzimas/Coenzimas/

Substrato/Anticuerpo R1b con el volumen adecuado de

Tampón/Glucosa R1a:



Estable durante 21 días entre +2 y +8C y 3 días entre

+15 y +25C.

CONTROL

Abrir un frasco de suero de control cuidadosamente,

evitando la pérdida de material, y reconstituir en

exactamente 2 ml de agua doblemente destilada. Cerrar el

frasco y dejar reposar durante 15 minutos, disolver el

contenido completamente agitando o rotando suavemente.

La CK-MB es estable en suero durante 5 días entre +2 y +

8C, 8 horas a +25C y 4 semanas a -20C cuando se congela sólo una vez.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA CK 1296


CK NAC/CK-MB Buffer/Glucose

Enzimas/Coenzimas/Substrato/Anticuerpo

Suero de control

MATERIALES NECESARIO NO SUMINISTRADOS

Control CKMB Randox No. (Cat. CK 1212)

Control Cardíaco de Tres Niveles Randox, No. (Cat.

CQ 3100 Nivel y Nivel 3)

Randox CK-MB Calibración (Cat. No. CK 2393)

NOTA DE PROCEDIMIENTO(4)

La Macro-CK es una forma atípica de CK y se compone de

complejos de Inmunoglobulina de Isonenzimas normales. Esta

forma migra entre MM y MB y se observa principalmente en

mujeres ancianas. Esto no tiene significación clínica, pero su

presencia puede causar resultados falsamente elevados. Si se

sospecha la contribución de Macro-CK se deberá confirmar su

presencia por medio de electroforésis.

PROCEDIMIENTO

Antes de llevar a cabo el análisis para medir la actividad de la CK-

MB en suero, es necesario medir la actividad de la CK total

utilizando el método NAC activado.

PARA RX MONZA

Seleccione CK-MB en la pantalla ejecutar prueba y lleve a cabo

un blanco de agua según las instrucciones.


Blanc Patrón Muestra

Reactivo S0 S1

Salino 50 µl - -

Patrón - 50 µl -

Muestra - - 50 µl

Reactivo 500 µl 500 µl 500 µl

Mezclar y aspirar en la Rx Monza.


Se recomienda el uso de solución salina y el Calibrador Randox

CKMB para calibración.

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 340 nm, Hg 334 nm o Hg 365 nm


Temperatura: 25C, 30C y 37C



Semi-micro Macro


Enzimas/Coenzimas/ Substrato/Anticuerpo 1,0 ml 2,5 ml

Mezclar, y dejar reposar a la temperatura apropiada durante 10

minutos. Después añadir a la cubeta, y leer la absorbancia A1.

Leer la absorbancia A2 exactamente 5 minutos más tarde.

∆A = A2 - A1

CÁLCULO MANUAL

Long. de onda CK-B (U/l) CK-MB (U/l)

340 nm 825 x ∆A 1651 x ∆A

Hg 334 nm 841 x ∆A 1683 x ∆A

Hg 365 nm 1486 x ∆A 2972 x ∆A

El cambio de absorbancia por minuto (∆A/min) también se puede

medir y la media de las 5 mediciones de deberá utilizar en el

cálculo.

Los factores a utilizar entonces serán:-

Longitud de onda CK-B (U/l) CK-MB (U/l)

∆A 340 nm/min 4127 8254

∆A Hg 334 nm/min 4207 8414

∆A Hg 365 nm/min 7429 14858

CONTROL DE CALIDAD

Se recomienda para el control de calidad diario el Control de

CKMB Randox o el Control Cardíaco de Tres Niveles Randox.

Se deberán analizar dos niveles de controles al menos una vez al

día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango

especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su

repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos:

1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara. 2. Comprobar que todo material está limpio.







INTERFERENCIAS

La hemólisis interfiere con el análisis.

RANGO DE REFERENCIA

Infarto de Miocardio(MI)

La probabilidad de daño del miocardio es elevado cuando se

presentan los siguientes 3 factores:-

Temperatura

25C 30C 37C

1 CKhombres >80 U/l1 >130 U/l2 >195 U/l*

CKmujeres >70 U/l1 >110 U/l2 >170 U/l*

2 CK-MB >10 U/l1 > 16 U/l2 > 25 U/l*

3 una actividad de CK-MB entre 6 y 25% de la actividad CK

total

*Valores calculados

Se puede sospechar un MI aunque los valores obtenidos sean

inferiores a los límites especificados. Para confirmar si ha

ocurrido un infarto reciente, el test se deberá repetir al cabo de

4 horas.


de referencia para reflejar la edad, sexo, dieta y localidad


GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA CK 1296


FUNCIONAMIENTO


el analizador RX monza.

LINEARIDAD

El Anticuerpo inhibe hasta 2000 U/l de CK-MM.

Este ensayo es linear hasta 2044 U/l de actividad CKMB.

SENSIBILIDAD La concentración mínima detectable de CKMB con un nivel de precisión aceptable se determinó como 23,5 U/l.

PRECISION


Nivel 1 Nivel 1

Mean (U/l) 136 161

SD 4.89 7.03

CV(%) 3.61 4.37

n 20 20

Precisión Total

Nivel 1 Nivel 2

Mean (U/l) 136 161

SD 6.83 6.56 CV(%) 5.04 4.08

n 20 20

CORRELACION



lineal:

Y = 1.0756 X - 18.799


Se analizaron 43 muestras con valores de entre 34,4 y 1733 U/l.

REFERENCIAS

1. Stein, W., Med. Weit 1985; 36: 572.

2. Szasz, G., and E. W. Busch. Paper presented at 3rd Eur. Congr.

Clin. Chem., Brighton/England, June 1979; 3 - 8 (abstract).

3. Wurburg, U., et al., Clin. Chem. 1976; 54: 357.

4. Jacobs et al, The Laboratory Test Handbook, 2nd edition

Revisado 29 July 11 bm

Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 4

CREATININA (CREA) MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de Creatinina en suero

plasma u orina. Este producto es adecuado para su utilización de

forma manual y en el analizador Rx Monza.

Cat. No.

CR 510 CAL. Patrón 1 x 5.5 ml

200 ml R1a. Acido pícrico 1 x 100 ml

R1b. Hidróxido sódico 1 x 100 ml

CR 524 CAL. Patrón 1 x 30 ml

6 x 500 ml R1a. Acido pícrico 3 x 500 ml

R1b. Hidróxido sódico 3 x 500 ml

SIGNIFICADO CLINICO

La creatinina se deriva de la creatina y la creatina fosfato en

tejido muscular y puede ser definida como un producto de

desecho del nitrógeno.La creatinina no es reutilizada pero es

excretada por el cuerpo en la orina via renal. La creatinina es

producida y excretada con un ratio constante ,el cual es

proporcional a la masa muscular del cuerpo.Como consecuencia

de la forma en que la creatinina es excretada por el riñon, la

determinación de creatinina se utiliza principalmente para

diagnosticar el funcionamiento del riñon.La creatinina es

considerada como el marcador endógeno más útil en el

diagnostico y tratamiento de enfermedades renales.

La creatinina se mide principalmente para valorar el funcionamiento del riñon y tiene ciertas ventajas sobre la

determinación de urea.Los niveles de creatinina en plasma son

relativamente independientes de la ingesta proteica, de agua

,ratio de producción de orina y del ejercicio.Siendo su ratio de

producción constante,una elevación de creatinina en plasma es

un indicativo de infraexcreción sugiriendo un mal funcionamiento

de riñon.Los niveles bajos de creatinina en plasma son raros y

no son clinicamente significativos.


PRINCIPIO

La creatinina en solución alcalina reacciona con ácido pícrico para

formar un complejo coloreado. La cantidad del complejo

formado es directamente proporcional a la concentración de

creatinina.

EXTRACCION Y PREPARACION DE LA MUESTRA

Suero, plasma heparinizado o EDTA-plasma. Estable durante 7

días cuando se conserva entre +2 y +8C.

Orina: extraer la orina sin aditivos. Diluir 1+49 con agua

bidestilada. Estable durante 4 días cuando se conserva entre +2 y

+8C.


Componentes Concentraciones iniciales

de las soluciones


R1a. Acido pícrico 35 mmol/l

Surfactante

R1b. Hidróxido sódico 0,32 mol/l





La solución R1a contiene ácido pícrico que es tóxico.

La sólucion R1b contiene hidróxido sódico que es cáustico.


desean.


según las pautas locales.




laboratorio.


CAL. Patrón


cuando se conservan entre +2 y +25°C.

R1a. Acido pícrico



R1b. Hidróxido sódico



ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO DE

TRABAJO

Mezclar volúmenes iguales de Soluciones R1a y R1b. Estable

durante 3 días cuando se conserva entre +15 y +25C.


Patrón

Acido pícrico

Hidróxido sódico

MATERIAL REQUERIDO PERO NO SUMINISTRADO

Pipetas apropiadas para suministrar 50 l, 100 l, 200 l, 1 ml y

2 ml.

Material para cronometrar y bloque de calentamiento o baño de

agua para mantener temperaturas de 25, 30 ó 37°C.

Espectrofotómetro con longitud de onda de 490 - 510 nm.



Sérum de calibration Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

NOTAS

El grado de reacción y la absorbancia del producto de la reacción

son muy sensibles a la temperatura. La temperatura especificada

debe ser por lo tanto mantenida.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 4

MANUAL/ RX MONZA CR 510

PROCEDIMIENTO Usando ddH2O realizar una nueva calibración de ganancia nueva en el modo de cubeta. Seleccione CREA en la pantalla de Ejecución de prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones. Pipetee en una cubeta: Blanco de reactivo S0 Patrón S1 Muestra ddH2O 50 l - - Patrón - 50 l - Muestra - - 50 l Reactivo de Trabajo 500 l 500 l 500 l Mezclar, inserte en el soporte de Rx Monza celda de flujo y oprima Leer. PARA USO MANUAL Longitud de onda: 492 (490-510 nm) Cubeta: 1 cm de espesor Temperatura: 25/30/37°C Medición: Frente al aire Pipetear en la cubeta: Patrón Muestra Macro Semi Macro Semi Micro Micro Reactivo de trabajo 2.0 ml 1.0 ml 2.0 ml 1.0 ml Solución Patrón 0.2 ml 0.1 ml - - Muestra - - 0.2 ml 0.1 ml Mezclar, leer la absorbancia A1 del patrón y de la muestra al cabo de 30 segundos. Exactamente 2 min después leer la absorbancia A2 del patrón y de la muestra. CALIBRACIÓN PARA RX MONZA Recomendaciones sobre el cambio de lote del reactivo o como se indica en los procedimientos de control de calidad, utilizando suministrado Standard CAL en el kit de calibración o de suero Randox Nivel 3. CÁLCULO MANUAL A2 - A1 = Amuestra ó Apatrón Concentración de creatinina en suero o plasma: Amuestra x 177 = mol/l Apatrón Amuestra x 2 = mg/dl Apatrón Concentración de creatinina en orina: Amuestra x 8,85 = mmol/l Apatrón Amuestra x 100 = mg/dl Apatrón mg creatinina/dl orina Aclaramiento x ml orina 24 hrs. de creatinina = [ml/min] mg creatinina/dl suero x 1440

NORMALIZACIÓN

Randox Nivel de calibración Suero 3 es atribuible a la creatinina

materiales de referencia NIST y 909b del NIST 967.

CONTROL DE CALIDAD















INTERFERENCIA

La hemólisis interfiere en la prueba. No usar sueros lipémicos. El

método es susceptible a interferencias por altos niveles de

sustancias reductoras. Hervir la orina antes de la prueba puede

ayudar a reducir estas interferencias.

VALORES NORMALES(2)

Suero: Hombre 53 - 97 mol/l(0,6 - 1,1 mg/dl)

Mujer 44 - 80 mol/l (0,5 - 0,9 mg/dl)

Orina: 8,84 - 13,3 mmol/24 hrs

1 - 1,5 g/24 hrs


de referencia reflejando edad, sexo, dieta y localización

geográfica de la población

CARACTERÍSTICAS ESPECIFICAS DE

FUNCIONAMIENTO



SUERO

LINEALIDAD

Si la concentración excede 2168 mol/l (24.5 mg/dl) en suero,

diluir suero, plasma u orina diluida 1+4 con NaCl al 0,9% y

repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 5.

SENSIBILIDAD La concentración mínima detectable de Creatinina con un nivel aceptable de precisión se ha determinado en 14.0 mol/l (0.158 mg/dl).

PRECISION

Análisis (Intra) Nivel 2 Nivel 3 Media (mg/dl) 1.46 4.19 DE 0.040 0.068 CV(%) 2.75 1.63 n 20 20 Análisis (Inter) Nivel 2 Nivel 3 Media (mg/dl) 1.46 4.19 DE 0.042 0.122 CV(%) 2.86 2.91

n 20 20

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 4


CORRELACION



lineal:

Y = 1.098 X - 0.27


Se analizaron 47 muestras con valores de entre 0,24 y 15,3 mg/dl.

ORINA

LINEALIDAD

Si la concentración excede 85309 mol / l (963 mg / dl) en la

orina, diluir la orina 1 +4 con agua destilada y repetir el ensayo.


SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de Creatinina con un nivel

aceptable de precisión se ha determinado en 2221 mol/l

(25.1 mg/dl).

REFERENCIAS

1. Bartels, H., Bohmer, M., (1972) Clin. Chem. Acta 37: 193.

2. Schirmeister, J., H. Willmann, and H. Kiefer. (1964). Dtsch.

Med. Wschr. 89: 1018.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 4


GAAMSA

www.gaamsa.com

DE 3

NEFA Acidos Grasos No Esterificados

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de Acidos Grasos No

Esterificados (NEFA) en suero y plasma. Este producto es

adecuado para su utilización de forma manual y en el

analizador RX monza.

Cat. No.

FA 115 R1a. Tampón 1 x 70 ml

3 x 10 ml R1b. Enzima/Coenzimas 3 x 10 ml

R2a. Diluyente de la Enzima 3 x 20 ml

R2b. Maleimida 3 x 20 ml

R2c. Reactivo Enzima 3 x 20 ml CAL Patrón 1 x 5.5 ml

METODO COLORIMETRICO

PRINCIPIO(3,5,6)

Acetil CoA Sintetasa

NEFA+ATP+CoA Acil CoA+AMP+PPi

Acetil CoA Oxidasa

Acil CoA + O2 2,3 trans-enoil-CoA + H2O2

Peroxidasa

2H2O2 + TOOS + 4-AAP Aducto Púrpura + 4H2O

4-AAP = 4-Aminoantipirina

TOOS = N-etil-N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-m-toluidina

MUESTRA(1)

Suero, plasma.

No usar plasma heparinizado, ya que la heparina interfiere en

el análisis. Los anticoagulantes adecuados son los siguientes:

EDTA

Citrato de Sodio

Fluoruro de Sodio

Oxalato de Amoníaco


Componentes Concentración inicial de las Soluciones

R1a. Tampón

Tampón fosfato 0,04 mol/l, pH 6,9

Cloruro de magnesio 3 mmol/l

Surfactante

R1b. Enzima/Coenzimas

Acil Coenzima A Sintetasa ≥ 0,3 U/ml

Ascorbato oxidasa ≥ 1,5 U/ml

Coenzima A 0,9 mmol/l

ATP 5,0 mmol/l

4-amino antipirina 1,5 mmol/l

R2a. Diluyente del Enzima

Fenoxietanol 0,3% (w/v) Surfactante

R2b. Maleimida 10,6 mmol/l

R2c. Enzima reactivo

Acil coenzima A oxidasa ≥ 10 U/ml

Peroxidasa 7,5 U/ml

TOOS 1,2 mmol/l

CAL Patrón Vedi inserto lotto specifico


Unicamente para diagnóstico in vitro, no pipetear con la boca.

Respetar las precauciones normales necesarias, que se

requieren al manejar reactivos de laboratorio.

Por favor, desechar todos los materiales Biológicos y

Químicos según las pautas locales.


se desean.


propósitos indicados por personal adecuado

cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas

de laboratorio.


REACTIVOS

R1a. Tampón Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad



Reconstituir un vial de Enzima/Coenzimas R1b con

10 ml de Tampón R1a. Estable durante 5 días entre

+2 y +8C. No congelar. Proteger de la luz.

R2a. Diluyente del Enzima


conservado entre +2 y +8C.

R2b. Maleimida

Reconstituir el contenido de una botella de

Maleimida R2b con el contenido entero de una

botella de diluyente del Enzima R2a. Asegurarse de

que la Maleimida está completamente disuelta. Usar

inmediatamente para reconstituir la botella R2c.

R2c. Reactivo Enzima

Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo

Enzima R2c con una botella de Solución R2b

reconstituida. Estable durante 5 días entre +2 y

+8C. No congelar. Proteger de la luz.

CAL Patrón



R1= Tampón / Enzima/ Coenzimas

R2 = Diluyente del Enzima / Maleimida / Enzima

Reactivo


Tampón

Enzima/Coenzimas

Diluyente del Enzima

Maleimida

Reactivo Enzima

Patrón


Multisueros Valorados Randox Nivel 2

(No. Cat. HN 1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532).

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUEL FA 115

PÁGINA 2 DE 3

NOTAS(1,7)

1. Muestras visiblemente lipémicas requieren una muestra

blanco.

2. Muestras con niveles de bilirrubina o hemoglobina

superiores a los indicados a continuación, requieren una

muestra blanco:

Nivel Máximo Efecto sobre

permitido para el resultado

pruebas de exactitud

Bilirrubina 10 mg/dl Disminuido

Hemoglobina 100 mg/dl Aumentado

Estas muestras necesitarán un blanco de muestra* para llevarse

a cabo (Ablanco de muestra). En el caso de un procedimiento

manual, la concentración de NEFA se calculará de la siguiente

manera:-

Amuestra - Amuestra blanco

mmol/l = x Conc. de patrón

Apatrón

En el caso del RX monza, la concentración de NEFA se

calculará de la siguiente manera:

Muestra - Muestra Blanco = Muestra Concentration (mmol/l)

3. Durante la recuperación de los materiales de control de

calidad se puede observar al leer monocromático. Para

corregir este tomar lecturas adicionales para Amuestra y

APatrón a 700 nm, y la resta de las lecturas de longitud de

onda principales.

4. La muestra que va a ser analizada no debe heparinizarse, ya

que esto estimularía la actividad de la lipoproteín-lipasa,

provocando la liberación de NEFA de los triglicéridos

asociados a las lipoproteínas sanguíneas. En consecuencia, la sangre extraida de pacientes que están recibiendo

tratamiento terapéutico con heparina, o sangre recogida

en envases con heparina no es adecuada para esta prueba.

5. Debido a la incorporación de ascorbato oxidasa en el

Reactivo Enzima 4, niveles de ácido ascórbico superiores a

20 mg/dl (es decir > 10 veces el valor normal) no

interfieren en la prueba.

6. Las determinaciones de NEFA deben llevarse a cabo con

suero obtenido de individuos en ayunas, de lo contrario los

resultados no pueden ser directamente comparados con

los rangos normales de controles en ayunas.

7. Si la muestra de suero permanece a temperatura ambiente

durante un tiempo considerable, el nivel de NEFA aumenta

debido a la acción enzimática. Por tanto, si el análisis no es

inmediato, las muestras de suero pueden congelarse

a -20C durante un máximo de 24 horas.

8. Si Apatrón - Areactivo blanco es < 0,180 repetir la prueba con

reactivo fresco.

RX MONZA PROCEDURE

Seleccione NEFA en la pantalla Run Test (Realizar análisis) y



Reactivo Patrón Muestra *

Muestra

Blanc S0 S1 Blank

dd H2O 10 µl - - -

Patrón - 10 µl - -

Muestra - - 10 µl -

Reactivo 1 200 µl 200 µl 200 µl 200 µl

Mézclelo, incúbelo durante 5 minutos a +37°C.

Reactivo 2 400 µl 400 µl 400 µl 400 µl

Muestra - - - 10 µl

Mézclelo, incúbelo durante 5 minutos a +37°C.

Introduzca la cubeta en el soporte de la celda de flujo del

RX monza y pulse Read (Leer).

* Consulte las notes 1 y 2.

MANUAL PROCEDIMIENTO(6)



Temperatura: +37C

Medición: Frente al reactivo blanco


React. Patrón Muestra *Muestra

blanco blanco

Agua destilada 50 l --- --- ---

Patrón --- 50 l --- ---

Muestra --- --- 50 l ---

Solución R1 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml

Mezclar e incubar a +37C durante 10 minutos.


Muestra --- --- --- 50 l

Mezclar e incubar a +37C durante 10 min. Leer la

absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón)

frente a reactivo blanco a 550 nm.

* Consulte las notes 1, 2 y 3.

N.B.: Tiempo de lectura debe ser exactamente

10 min.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUEL FA 115

PÁGINA 3 DE 3

CALCULOS

1. Utilizando una curva de calibración

La curva de calibración debe ser confirmada para cada

nuevo lote de reactivos de la forma siguiente:

No. de Tubo 1 2 3 4

Nombre Blanco Patrón Patrón Patrón

bajo normal elevado

NEFA Patrón --- 25 l 50 l 100 l

Agua 50 l 25 l --- ---


Mezclar e incubar a +37C durante 10 min. Solución R2 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml

Mezclar e incubar a +37C durante 10 min. Abs 0,000 (leer) (leer) (leer) *valores estandares 0,000 valores estandares x 0,250 x 0,500 x 1,000 * Se puede encontrar valores estandares en la insercion especifica del lote, incluido en el kit. Representar absorbancias (A550 nm) frente a concentraciones de NEFA (mmol/l). Debe ser una línea recta, ya que sigue la Ley de Beer y es lineal entre 0.0 y 2.0 mmol/l. 2. Utilizando un patrón La concentración de NEFA en una muestra puede ser

determinada por medio de la siguiente ecuación. Amuestra

mmol/l = x Concentración de patrón Apatrón

CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y

Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles

distintos de controles al menos una vez al día. Los valores







bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los

resultados.




los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte + 44 (0) 28

9442 2413.

RANGO NORMAL(2,8)

En ayunas: 0,1 - 0,9 mmol/l.


rango que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de

la población.

INTERFERENCIA

Si se realiza la técnica de los NEFA de forma automática, el

reactivo no debería colocarse en el instrumento tras los

triglicéridos

CARACTERÍSTICAS ESPECIFICAS DE FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos de funcionamiento se obtuvieron

mediante el analizador RX monza a una temperatura de

+37ºC.

LINEALIDAD

El método es lineal hasta 2,24 mmol/l. Para muestras con

concentraciones superiores, diluir 1+3 con agua bidestilada y

repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 4.

SENSIBILIDAD

El nivel mínimo detectable con una precisión aceptable se ha

determinado en 0,072 mmol/l

PRECISION


Nivel 1 Nivel 2

Media (mmol/l) 1.73 1.20

DE 0.082 0.058

CV(%) 4.74 4.81

n 20 20

Ensayo total

Nivel 1 Nivel 2


DE 0.078 0.052

CV(%) 4.51 4.32

n 20 20

CORRELATION

This method (Y) was compared with another commercially

available method (X) and the following linear regression

equation obtained:

Y = 1.0372 X + 0.0457

and a correlation coefficient of r = 0.9855

49 patient samples were analysed spanning the range

0.09 to 2.08 mmol/l.

REFERENCIAS

1. DeVries, G.H., Mamunes, P., Miller, C.D. and Hayward,

D.M., Analytical Biochem. 1976; 70: 156-166.

2. Henry, R. J., Clinical Chemistry, Principles and Techniques,

2nd Edition, Harper and Row, 1974;

p. 1451.

3. Matsubara, C., Neshikawa, Y., Yoshida, Y., and Tateamura,

K. Analytical Biochem. 1983; 130: 128-133.

4. Mulder. C. J., Clin. Chem. Clin. Biochem. 1983; 21:

823-827.

5. Hosaka, K., Kiteucki, T., Mitsukida, N., and Kawagucki, A.

J., Biochem. 1981;89: 1799-1803.

6. Shimizu, S., Tani, Y., Yamada, H., Tabata, M., and Murachi, T., Analytical Biochem. 1980; 107: 193-198.

7. Okabe, H., Uji, Y., Nagaehima, K. and Noma, A. Clin,

Chem. 1980; 26111: 1540-1543.

8. Duncombe, W.G., Biochem. J. 1963; 88: 7.

Revisado 31 oct 12 rw

Rev. 005

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

GLUCOSA (GLUC-PAP) GOD/PAP

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de Glucosa en suero,

plasma y orina. Este producto es adecuado para un uso manual o

en el analizador Rx Monza.

Cat. No.

GL 364 R1a. Tampón 10 x 100 ml

10 x 100 ml R1b. Reactivo GOD-PAP 10 x 100 ml

CAL. Patrón 1 x 5.5 ml







PRINCIPIO

La glucosa se determina después de una oxidación enzimática en

presencia de glucosa oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado

reacciona, catalizado por la peroxidasa, con fenol y

4-aminofenazona para formar un indicador de quinoneimina

rojo-violeta.

PRINCIPIO DE LA REACCION(1)

GOD

Glucosa + O2 + H2O Acido glucónico + H2O2

POD 2H2O2+ 4-aminofenazona + fenol quinoneimina + 4H2O

RECOGIDA DE MUESTRAS Y ALMACENAMIENTO

La glucosa es estable durante 24 horas entre +2 y +8°C si el

suero se prepara a los 30 minutos después de la recolección.

Mediante la adición de un inhibidor de la glicólisis (NaF, KF), la

muestra se pueden almacenar hasta 24 horas entre +15 y +25°C

o 3 días entre +2 y +8ºC. Para el almacenamiento a largo plazo

las muestras se deben colocar en envases sellados y congelarse a

-20°C. Las muestras hemolizadas no deben utilizarse, ya que la hemólisis

interfiere con esta prueba.

Plasma: se permite el uso de heparina de litio como un

anticoagulante.

Orina: orina de 24 horas se debe recoger en un frasco oscuro y

mantener en hielo.

Orina al azar – se debe usar una muestra fresca. La muestra debe

ser almacenada entre +2 y +8°C si no se utiliza inmediatamente.



R1a. Tampón

Tampón fosfato 0,1 mol/l, pH 7,0

Fenol 11 mmol/l

R1b. Reactivo GOD-PAP

4-Aminofenazona 0,77 mmol/l

Glucosa oxidasa ≥ 1,5 kU/l

Peroxidasa ≥ 1,5 kU/l

CAL. Patrón

Glucosa Ver inserto del lote específico





R1a contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el contacto con la

piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar

inmediatamente el área afectada con agua abundante. En caso de

ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un

médico.


que podría producir azidas explosivas. Cuando se tire este






desean.




laboratorio.


R1a. Tampón


cuando se conserva entre +2 y +8C

R1b. Reactivo GOD-PAP Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo R1b con

un pequeño volumen de Tampón R1a y transferir el

contenido entero a la botella R1a, enjuagando varias

veces la botella R1b. El reactivo de trabajo es estable

durante 3 meses entre +2 y +8C ó 5 días entre +15 y

+25C.

CAL. Patrón


entre +2 y +8C.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL GL 364


Tampón

Reactivo GOD-PAP

Patrón





PROCEDIMIENTO

Usando ddH2O realizar una nueva calibración de ganancia en el

modo de cubeta. Seleccione GLU en la pantalla de Ejecución de

prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones.

Pipetear en la Cubeta:

Patrón S1 or Muestra Reactivo Blanco S0

Muestra/Patrón 5 l 0 l

Reactivo 1 500 l 500 l

Mezclar, incubar durante 25 min a 15-25C ó 10 min a 37C.

Insertar en el soporte de flujo de célula de Rx Monza y oprima

Leer dentro de los 60 minutos.


Se recomienda el uso de glucosa estándar Randox

proporcionado o Suero de calibración Randox Nivel 3. Es aconsejable cambiar el lote del reactivo para la calibración o

seguir lo indicado por los procedimientos de control de calidad.

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 500 nm, Hg 546 nm


Temperatura: 15-25oC ó 37oC

Medición: frente a reactivo blanco


Macro Semi-Micro

Patrón o Reactivo Patrón o Reactivo

Muestra Blanco Muestra Blanco

Patrón o muestra 20 l --- 10 l --- Reactivo 2000 l 2000 l 1000 l 1000 l

Mezclar, incubar durante 25 min a 15-25C ó 10 min a 37C y

medir la absorbancia del patrón (Apatrón) y de la muestra (AMuestra)

frente al reactivo blanco antes de 60 min.

CÁLCULO MANUAL

AMuestra Patrón conc.

Concentración de glucosa (mmol/l) = x (mmol/l)

APatrón

Amuestra Patrón conc.

(mg/dl) = x (mg/dl)

APatrón

NORMALIZACIÓN


el material de referencia NIST 917b y NIST 965a de Glucosa.

CONTROL DE CALIDAD















INTERFERENCIAS

Esta prueba no se ve afectada por el ácido úrico, ácido ascórbico,

glutatión, anticoagulantes, bilirrubina y creatinina a concentraciones fisiológicas.

VALORES NORMALES(2)

Suero,plasma (en ayuno) 4,2-6,4 mmol/l ó 75-115 mg/dl



población.



Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante un

analizador Rx Monza en funcionamiento a 37C.

SUERO

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de Glucosa con un nivel

aceptable de precisión se determinó en 0,343 mmol/l (6.18

mg/dl).

LINEALIDAD

El método es lineal hasta una concentración de glucosa de 32,1

mmol/l (578 mg/dl). Para muestras con valores superiores a

dichas concentraciones diluir 1+2 con NaCl al 0,9% y multiplicar

el resultado por 3.

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 2 Nivel 3


DE 0.203 0.640

CV(%) 3.11 4.26

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3


DE 0.269 0.774

CV(%) 4.11 5.15

n 20 20

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL GL 364

CORRELACIÓN



lineal:

Y = 0.9091 X + 0.5645


Se analizaron 40 muestras de pacientes con valores de entre 0.39

y 21.3 mmol/l.

ORINA

LINEALIDAD

El ensayo es lineal hasta una concentración de glucosa de

30,6 mmol/l (551 mg/dl). Para muestras con valores superiores a

dichas concentraciones diluir 1+2 con NaCl al 0,9% y multiplicar

el resultado por 3.

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de Glucosa con un nivel

aceptable de precisión se determinó en 0,295 mmol/l (5,32

mg/dl).

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 2 Nivel 3


DE 0.073 0.723

CV% 2.71 4.59

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3


DE 0.068 0.738

CV% 2.53 4.68

n 20 20

REFERENCIAS

1. Barham, D, and Trinder, P. Analyst 1972; 97: 142.

2. Teuscher, A. and Richterich, P. Schweiz Med. Wschr. 1971;

101: 345 and 390.

3. Tietz, N.W. Clinical Guide to laboratory tests. 2nd edition.

Philadelphia, Pa: WB Saunders Co.; 1990: 246-250


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

GLUTAMATO DESHIDROGENASA (GLDH) MANUAL RX MONZA PARA SU USO Para el análisis cuantitativo in vitro de Glutamato Deshidrogenasa (GLDH) en el suero. Este producto es adecuado para su utilización de forma manual y en el analizador RX monza. No. Cat. GL 441 R1a. Tampón/Substrato 1 x 70 ml 8 x 6 ml R1b. Enzima/Coenzima 8 x 6 ml R2. -oxoglutarato 2 x 10 ml GL 442 R1a. Tampón/Substrato 5 x 100 ml 5 x 100 ml R1b. Enzima/Coenzima 5 x 100 ml R2. -oxoglutarato 2 x 20 ml Este es un método estándar optimizado de acuerdo a las recomendaciones del Deutsche Gesellschaft für Klinische Chemie. Este procedimiento mide la reacción de arrastre no específica. PRINCIPIO(1) GLDH

-oxoglutarato + NADH + NH4+ glutamato+NAD++H2O MUESTRA Suero. Los sueros hemolíticos y lipémicos interfieren con el análisis. COMPOSICION DEL REACTIVO Componentes Concentraciones en la Prueba R1a. Tampón/Substrato Tampón Trietanolamina 50 mmol/l, pH 8,0 Acetato de Amoniaco 100 mmol/l EDTA 2,5 mmol/l R1b. Enzima/Coenzima ADP 1,0 mmol/l NADH 0,2 mmol/l LD ≥ 2 U/ml R2. -oxoglutarato 7 mmol/l PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo de reactivos de laboratorio. Las soluciones R1a y R2 contienen Azida Sódica. Evitar su ingestión o el contacto con la piel o las membranes mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua. En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar atención médica inmediatamente. La Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes de agua para evitar la formación de ácidos. Las superficies metálicas expuestas, deberán limpiarse con hidróxido de sodio al 10%. Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se desean. Los reactivos deben ser utilizados sólo para los propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de laboratorio.






No. Cat. GL 441

Reconstituir el contenido de una botella de Enzima/

Coenzima 2 con 6 ml de Tampón/Substrato 1. Estable

durante 1 semana entre +2 y +8°C.

No. Cat. GL 442

Reconstituir el contenido de un frasco de Enzima/

Coenzima 2 con una parte de Tampón/Substrato 1 y

transferir todo el contenido a la botella 1 enjuagando el

frasco 2 varias veces. Estable durante 1 semana entre +2

y +8°C.

R2. -oxoglutarato

Reconstituir el contenido de un frasco de

-oxoglutarato 3 con el volumen apropiado de agua

doblemente destilada:-

10 ml para el kit de 8 x 6 ml (GL 441)

20 ml para el kit de 5 x 100 ml (GL 442)

Estable durante 8 semanas entre +2 y +8°C ó 7 días entre

+15 y +25°C.

Nota: Si utiliza este ensayo en un sistema automatizado, por favor

consulte la hoja de procedimiento de ese sistema, según las

instrucciones de reconstitución puede ser diferente.

MATERIALES SUMINISTRADOS Tampón/Substrato

Enzima/Coenzima

-oxoglutarato


SUMINISTRADOS




Salino RX series (No. Cat. SA 3854)

PROCEDIMIENTO

Seleccione GLDH en la pantalla de ejecución y llevar a cabo un

blanco de agua según las instrucciones.


Sample 0.10 ml

Reactivo R1 0.50 ml

Mezclar e incubar durante exactamente 5 minutos a 37°C o 10

minutos a 20-25°C

Reactivo R2 0.02 ml

Mezclar y aspirar en el Monza Rx inmediatamente.

RX MONZA CALIBRACIÓN El uso de solución salina y la calibración Randox Nivel 3 en suero

se recomienda para la calibración. La calibración se recomienda a

los cambios en el lote del reactivo o como se indica en los


GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

MANUAL/ RX MONZA GL 441

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm or Hg 365 nm)

cubeta: 1 cm de paso de la luz

Temperatura: 25°C

Medición: contra el aire

Introducir en una cubeta: Macro Semi Micro

Enzima/Coenzima (25°C) (R1) 2.5 ml 1.0 ml

Suero 0.5 ml 0.2 ml

Mezcle bien y deje reposar a 25 ° C durante 3 minutos, luego

medir la absorbancia A1, deje reposar durante exactamente 5

minutos y leer absorbancia A2 (no específica de reacción lenta).

-oxoglutarato (R2) 0.1 ml 0.04 ml

Mezclar bien y leer la absorbancia A3, deje reposar durante

exactamente 5 minutos a 25 ° C y leer la absorbancia A4.

(A3-A4) - (A1-A2) = A / 5 minutos

MANUAL DE CÁLCULO

Para calcular la actividad de la GLDH utilizar la siguiente fórmula:

U/l (25°C) = 197 x A 340 nm / 5 min.

U/l (25°C) = 365 x A Hg365 nm / 5 min.

U/l (25°C) = 201 x A Hg334 nm / 5 min.

CONTROL DE CALIDAD







1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara.








INTERFERENCIAS NO ESPECIFICAS

Se ha observado una interferencia no específica con la medición

de la actividad del glutamato deshidrogenasa en el 60% de los

sueros. En una actividad normal del glutamato deshidrogensa

equivale a 0,4 U/l por regla general y en ocasiones excede 1 U/l.

Para tener en cuenta la interferencia no específica es necesario

estimar un blanco de suero con -oxoglutarato.

VALORES DE NORMALIDAD EN EL SUERO(2,3)

25°C 37°C

Hombres: < 4,0 U/l <7,0 U/l

Mujeres: < 3,0 U/l <5,0 U/l



población.




analizador RX monza en funcionamiento a 37ºC.

LINEALIDAD

El método es lineal hasta una concentración de 77,3 U/l. Si la

concentración de la muestra supera este valor, diluir la muestra

1 +4 con el 0,9% de NaCl y repetir el test. Multiplique el

resultado por 5.

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de Glutamato

Deshidrogenasa con un nivel aceptable de precisión se

determinó en 2,90 U/l.

PRECISION


Nivel 1 Nivel 2

Media (U/l) 13.5 28.3

DE 0.562 0.985

CV(%) 4.16 3.48

n 20 20

Precisión Entre Análisis

Nivel 1 Nivel 2

Media (U/l) 13.5 28.3

DE 0.764 1.56

CV(%) 5.66 5.53

n 20 20

CORRELACIÓN


disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión lineal:

Y = 0.9585 X +0.1913

y un coeficiente de correlación r = 0,9944.


3,13 a 58,06 g/l.

REFERENCIAS

1. Schmidt, E. and Schmidt, F.W. In: Method of Enzymatic

Analysis, 3rd ed. H.K. Bergmeyer, J. Bergmeyer, and M.

Grosse, Eds. Weirheim, Verlag Chemie, 1983, 3: 216-227.

2. In: Clinical Guide to Laboratory Tests 2nd ed. N. W. Tietz,

Eds. W.B. Saunders Company. Philadelphia 1990 p.260.

3. Schmidt, E. et al (1992) Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 30

pp 493-502.

Revisado 12 Aug 11 bm

Rev. 002

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

GLUCOSE GOD/PAP

(LIQUIDO)

MANUAL

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de Glucosa en el sangre, suero,

plasma y orina. Este producto es adecuado para uso Manual.

Cat. No.

GL 2623 R1. Glucosa Reactivo 6 x 100 ml


GL 2614 R1. Glucosa Reactivo 2 x 500 ml


SIGNIFICADO CLINICO

La medición exacta de la glucosa en suero o plasma es

importante en el diagnóstico y el tratamiento de trastornos del

metabolismo de hidratos de carbono tales como diabetes mellitus, hipoglucemia neonatal, hipoglucemia idiopática y de

carcinoma de células de islotes pancreáticos. La glucosa se mide a

menudo en colaboración con diversas pruebas de tolerancia tras

la administración de dosis de la leucina, la insulina, el glucagón o

glucosa.

PRINCIPIO

La glucosa se determina después de una oxidación enzimática en

presencia de glucosa oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado

reacciona, catalizado por la peroxidasa, con fenol y

4-aminofenazona para formar un indicador de quinoneimina

rojo-violeta.

PRINCIPIO DE LA REACCION(1)

GOD

Glucosa + O2 + H2O Acido glucónico + H2O2

POD

2H2O2+ 4-aminofenazona + fenol quinoneimina + 4H2O

RECOGIDA DE MUESTRAS Y ALMACENAMIENTO

Suero, plasma de litio y orina. Si es posible, los componentes

celulares separados de suero o plasma de inmediato, ya más

tardar una hora después de recoger la muestra de sangre.

Mediante la adición de un inhibidor de la glicólisis (NaF, KF), las

muestras se pueden almacenar hasta 24 horas entre +15 y +25 °

C o hasta 7 días a 4 ° C. La orina: orina de 24 horas se debe

recoger en un frasco oscuro y se mantuvieron en hielo. Orina al

azar - una muestra fresca debe ser utilizado. La muestra debe ser

almacenado entre +2 y +8 ° C si no se utiliza inmediatamente.



R1. Glucosa Reactivo

Tampón fosfato 50 mmol/l, pH 7,0

Tampón MOPS 50 mmol/l, pH 7,0

Fenol mmol/l


Glucosa oxidasa ≥ 1,5 kU/l Peroxidasa ≥ 1,5 kU/l

CAL. Patrón

Glucosa Vedi inserto lotto-specifico





Reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el contacto

con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar

inmediatamente el área afectada con agua abundante. En caso de

ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un

médico.








desean.






laboratorio.


R1. Glucose Reactivo


entre +2 y +8°C.

CAL. Patrón


entre +2 y +8°C.


Glucosea Reactivo

Patrón




Uranil Acetato 0,16% (Cat. No. DP 647 2 x 500 ml)

NOTAS

Es normal que este reactivo sea de un color rosa pálido que se

oscurezca con el tiempo. Este hecho no afecta al funcionamiento

del mismo.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

MANUAL GL 2623

PROCEDIMIENTO PARA EL ENSAYO DE GLUCOSA

GOD-PAP SIN DESPROTEINIZACION



Temperatura: 15-25°C ó 37°C



Macro Semi-Micro

Patrón o Reactivo Patrón o Reactivo

Muestra Blanco Muestra Blanco

Patrón o muestra 20 l --- 10 l ---

Reactivo 2000 l 2000 l 1000 l 1000 l

Mezclar, incubar durante 25 min a 15-25°C ó 10 min a 37°C y

medir la absorbancia del patrón (Apatrón) y de la muestra (AMuestra)

frente al reactivo blanco antes de 60 min. Aunque la absorbancia

se puede leer en cualquier momento durante un período de

hasta 60 minutos después del tiempo especificado de incubación,

el intervalo entre la adición de la muestra y la lectura debe de ser

exactamente el mismo que para el Patrón/Control y la Muestra. CALCULOS AMuestra Concentración de glucosa (mmol/l) = x Patrón conc. APatrón (mmol/l) Amuestra

(mg/dl) = x Patrón conc. APatrón (mmol/l) CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara. 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento


Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44 28 94422413. INTERFERENCIAS Se analizaron los siguientes analitos hasta los niveles indicados y

se encontró que no interfieren: Haemoglobin 1000 mg/dl Free Bilirubin 25 mg/dl Conjugate Bilirubin 25 mg/dl Triglycerides 1000 mg/dl Intralipid 400 mg/dl

VALORES NORMALES(3,4) Suero,plasma 4.2-6.4 mmol/l (75-115 mg/dl) Orina al azar 0.1 – 0.8 mmol/l (1 – 15 mg/dl) Orina de 24 horas <2.78 mmol/d (<0.5 g/d) Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de la población. LINEALIDAD El método es lineal hasta una concentración de glucosa de 22,2 mmol/l (400 mg/dl). Para muestras con valores superiores a dichas concentraciones diluir 1+2 con agua destilada y multiplicar el resultado por 3. SENSIBILIDAD Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio intervalo de sensibilidad ya que esto está limitado por la sensibilidad del espectrofotómetro utilizado. Bajo las condiciones del ensayo un cambio de 0,01 unidades de absorbancia es equivalente a 0,013 mmol/l (0,23 mg/dl). REFERENCIAS 1. Barham, D, and Trinder, P. Analyst 1972; 97: 142. 2. Clinical Chemistry Principles and Techniques, Second Edition,

R.J. Henry, D.C. Cannon and J.W. Winkelman Editors, Harper and Row, Maryland, USA, 1288, 1974.

3. Teuscher, A. and Richterich, P. Schweiz Med. Wschr. 1971; 101: 345 and 390.

4. Tietz, N.W. Clinical Guide to laboratory tests. 2nd edition. Philadelphia, Pa: WB Saunders Co.; 1990: 246-250.

Revisado 13 Nov 08, bm Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

GLUTATION

REDUCTASA (GLUT RED) MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de Glutation Reductasa en el

suero, el plasma y los eritrocitos. Este producto es adecuado

para su utilización de forma manual y en el analizador Rx Monza.

No. Cat.

GR 2368 R1a. Tampón 1 x 70 ml


R2. NADPH 5 x 3 ml

SIGNIFICADO CLINICO

El análisis de Glutation Reductasa se ha utilizado en la detección

de enfermedades hepáticas y malignas, en la valoración de la

nutrición (estado de la riboflavina) y la detección de estados de

deficiencia determinados genéticamente.

Nota: Asegurarse de que los estados aparentes de deficiencia

enzimática no son debidos a la reducción de la riboflavina.

Principio del Análisis (1)

El Glutation reductasa cataliza la reducción de glutation (GSSG)

en presencia de NADPH, el cual se oxida a NADP+. La

disminución en la absorbancia se mide a

340 nm.

GR

NADPH + H+ + GSSG NADP+ + 2 GSH

(GSH = Glutation Reducido)


Suero, Plasma o Eritrocitos.

Preparación del Eritrocito.

Centrifugar 0,5 ml de sangre entera durante 5 min a

2000 rpm. Eliminar el plasma y la capa de color de ante,

asegurandose de que no se quiten demasiados eritrocitos,

arriesgando así un muestreo de células no representativo. Lavar

los eritrocitos tres veces volviendo a suspenderlo en NaCl al

0,9%, y centrifugando durante 5 min a 2000 rpm después de cada

lavado.

Lisar las células volviendo a suspenderlas en H20 bidestilada fría,

guardar hasta 0.5 ml. Dejar reposar durante 10 min entre +2 -

+8°C. Centrifugar el lisado durante 5 min a 2000 rpm para

eliminar el estroma. Diluir 100 l de lisado con 1,9 ml de

solución NaCl al 0,9% para el análisis.



R1a. Tampón

Fosfato Potásico 250 mmol/l pH 7,3

EDTA 0,5 mmol/l

R1b. Substrato

GSSG 2,2 mmol/l

R2. NADPH 0,17 mmol/l









laboratorio.


R1a. Tampón


cuando se conserva entre +2 y +8°C.

R1b. Substrato

Reconstituir el contenido de un frasco de Substrato 2

con 5 ml de Tampón 1. Estable durante 2 días cuando

se conserva entre +2 y +8°C.

R2. NADPH

Reconstituir un frasco de NADPH 3 con 3 ml de H20

bidestilada. Estable durante 2 días cuando se conserva

entre +2 y +8°C.


Tampón

Substrato

NADPH


SUMINISTRADOS

Suero de Control de Glutation Reductasa Randox GR 2608

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA GR 2368

PAGE 2 OF 3

PROCEDIMENTO

Seleccione GR en la pantalla de Ejecución de prueba y llevar a

cabo un blanco de agua según las instrucciones.


Reagent Blank Patrón Muestra

S0 S1

ddH2O 20 µl - -

Patrón - 20 µl -

Muestra - - 20 µl

R1 500 µl 500 µl 500 µl

Mezclar bien

R2 100 µl 100 µl 100 µl

Mezclar y aspirar en el Monza RX.


Se recomienda para la calibración el uso de solución salina y

suero de calibración Randox glutatión reductasa. La calibración

se recomienda con el cambio de lote o como se indica por los


PARA USO MANUAL



Temperatura: 37°C.


Pipetear en la cubeta

Lisado Diluido 40 l

Substrato (R1) 1000 l

Mezclar bien

NADPH (R2) 200 l

Mezclar, y empezar a cronometrar simultáneamente. Leer la

absorbancia inicial al cabo de 1 minuto. Leer de nuevo al cabo

de 2, 3, 4 y 5 minutos.

CÁLCULO MANUAL

La actividad del Glutation Reductasa se puede calcular a partir de

la siguiente fórmula:

a) U/l sangre entera = 4983 x ∆A 340 nm/min x Factor de

Dilución (20)

b) Convirtiendo a u/g Hemoglobina

ejemplo

Una muestra contiene un nivel de hemoglobina de

16 g/dl ó 160 g/l.

Valor de Glutation Reductasa: 1488 U/l.

Por lo tanto el valor de la muestra = 1488

─── = 9,3 u/gHb

160

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Sueros de Control de Glutation Reductasa

para el control de calidad diario. Analizar el control al menos una

vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del

rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y

su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos:









ESPECIFICIDAD

El Glutation Reductasa es altamente específico para

Glutation(GSSG).

RANGO DE REFERENCIA(2)

Plasma/Suero 33 - 73 U/l

Eritrocitos 4,7 –13,2 U/gHb


de normalidad, ya que pueden darse variaciones regionales.


FUNCIONAMIENTO


el analizador RX monza a una temperatura de 37oC, con el

volumen de aspiración fijado en 500 µl.

LINEARIDAD

El ensayo es lineal hasta 387 U/. Las muestras mayores que este

debe ser diluido con 1 +9 0,9% de solución de NaCl y re-ensayó.


SENSIBILIDAD

Se deberá de considerar como el límite de detección un valor de

9.69 U/l.

PRECISION

Within run precision

Level 2 Level 3

Mean (U/l) 42.0 86.9

SD 2.03 2.24

CV (%) 4.84 2.58

n 20 20

Total precision

Level 2 Level 3

Mean (U/l) 42.0 86.9

SD 2.75 3.75

CV (%) 6.55 4.32

n 20 20

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA GR 2368

PAGE 3 OF 3

CORRELACION

El método de Randox (Y) se comparó con otro método

comercial disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de

regresión lineal:

Y = 1.017 X + 1.54

con un coeficiente de correlación r = 0.9888.

Se analizaron 42 muestras con valores de entre 14 y 309 U/l.

REFERENCIAS

1. Goldberg D.M. & Spooner RJ (1983) in Methods of

Enzymatic Analysis (Bergmeyen, H.V. Ed.) 3rd edn.

vol 3, pp 258-265, Verlog Chemie, Deerfield Beach,

Fl.

2. Melissinos, K.G.,Delidov, A.Z., Varsov, A.G., Begietti, S.S.,

Drivas, G.J., Nephron, 28: 76-79, (1981).


Rev 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

IgA IMMUNOTURBIDIMETRIC ASSAY FOR IgA

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de IgA en el suero y el plasma.



No. Cat.

IA 2447 R1. Tampón Ensayo 1 x 60 ml

R2. Reactivo Anticuerpo 1 x 5 ml

PRINCIPIO

La muestra que contiene IgA humano se diluye adecuadamente y

después se reacciona con antisuero específico para formar un

precipitante que se mide turbidimétricamente a 340 nm. Se puede determinar la concentración de IgA en la muestra

construyendo una curva estándar a partir de las absorbancias de

los patrones.

EXTRACCION Y CONSERVACION DE LA MUESTRA

Se puede utilizar el suero, plasma heparinizado o plasma EDTA.

El IgA es estable durante 3 días entre +15 y +25°C, 7 días entre

+2 y +8°C, o 6 meses a -20°C.


Componentes Concentraciones Iniciales

en la Prueba

R1. Tampón de Ensayo

Glicol de Polietileno máximo 6%

Tampón Tris/HCl 20 mmol/l, pH 7,4


R2. Reactivo Anticuerpo

Anti IgA (humano)





Los Reactivos R1 y R2 contienen Azida Sódica. Evitar su ingestión

o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de




El Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las cañerías,

formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen


evitar la formación de ácidos. Las superficies metálicas expuestas,






laboratorio.


R1. Tampón Ensayo

Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando






Tampón Ensayo

Reactivo Anticuerpo


SUMINISTRADOS

Calibrador de Proteína Específica Valorado Líquido Randox para

análisis de muestras diluídas, No. Cat IT 2692

Controles de Proteína Específica Valorados Líquidos Randox

Nivel 1 No. Cat. PS 2682 Nivel 2 No. Cat. PS 2683

Nivel 3 No. Cat. PS 2684

Solución de NaCl al 0,9%

PROCEDIMIENTO (Análisis Manual)

Diluir las muestras 1+20 con solución de NaCl al 0,9%.

Se recomienda que todos los reactivos y muestras de suero se

equilibren a temperatura ambiente antes de usar. Se deberá

preparar una curva estándar para cada análisis que se realice y se

recomienda que las muestras se analicen en duplicado junto con

controles apropiados. Experiencia con el kit podría permitir al

operador realizar el análisis un cierto número de veces sin re-

calibración con tal que se utilizen el mismo reactivo de trabajo,

espectrofotómetro, cubeta y condiciones del análisis tales como

la temperatura.

En caso de elegir esta alternativa se deberá prestar especial

consideración a los resultados del control.

Seleccone la IgA en la pantalla de Ejecución de prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones. Pipetear en la Cubeta: S0 SO* S1 S1 Muestra Muestra Blanco Blanco Blanco

ddH2O 50 l 50 l --- --- --- --- Diluido CAL Patrón --- --- 50 l 50 µl --- ---

Diluido

Muestra --- --- --- --- 50 µl 50µl Tampón

Ensayo (R1) 500 µl 500 µl 500 µl 500 µl 500 µl 500 µl

Mezclar bien y se incuba a 25ºC fuera del analizador durante 10 minutos Reactivo

Anticuerpo (R2) --- 50 µl --- 50 µl --- 50 µl

Mezclar bien y se incuba a 25˚C fuera del analizador durante 30 minutos. Inserte en el soporte de RX monza celda de flujo y pulse leer. *Blanco de Reactivo

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA IA 2447

PAGE 2 OF 3

PARA USO MANUAL



Temperatura: 25°C


Pipetear en la cubeta apropiada:

Patrones Muestra

Patrones Diluidos 100 l de cada -

Muestra Diluida - 100 l Tampón de Ensayo R1 1,0 ml 1,0 ml

Mezclar bien, medir la A1 al cabo de 10 mins.


Reactivo Anticuerpo R2 100 l 100 l

Mezclar bien, medir la A2 al cabo de 30 mins.

CÁLCULO MANUAL

Calcular el cambio en absorbancia para cada patrón y muestra.

ei. A = A2 - A1

Después trazar la media de las concentraciones estándar frente a

los valores A correspondientes utilizando papel gráfico.

[Utilizar un programa de ordenador apropiado para curva, si está

disponible, en una transformación logit/log]. La concentración de

la muestra IgA se obtiene leyendo el valor A a partir de la curva

de calibración. No intentar extrapolar por encima o debajo del

rango de patrones

CALIBRACION

Recomendamos el Calibrador de Proteína Específica Valorado

Líquido Randox para análisis de muestras diluídas.

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Controles de Proteína Específica Valorados

Líquidos Randox, Nivel 1, 2 y 3 para el control de calidad diario.

Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al día.

Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango

especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su

repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos:









ESPECIFICIDAD

No existe una reacción cruzada con IgG y IgM bajo las

condiciones del análisis.

Las muestras extremadamente lipémicas o hemolíticas y los

niveles elevados de detergentes iónicos pueden interferir en el

análisis.

RANGOS DE NORMALIDAD (1,2)

Adultos: 54 - 268 IU/ml

(0,9 – 4,5 g/l)

90 - 450 mg/dl

Niños:* 90 ± 33 IU/ml

(8-10 años) (1,5 ± 0,5 g/l)

151 ± 55 mg/dl

Recién Nacidos:* 0,18 ± 0,6 IU/ml

(2-8 días) (0,003 ± 0,01 g/l)

0.3 ± 1.0 mg/dl

* valor medio ± desviación estándar




FACTORES DE CONVERSIÓN

IU/ml x 1,68 = mg/dl

mg/dl x 0,595 = IU/ml

(Relacionado al estándar de inmunoglobulina WHO 67/86)


FUNCIONAMIENTO


el analizador Rx Monza a una temperatura de 37°C.

LINEALIDAD Este ensayo es lineal hasta 785 mg/dl.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de IgA es 45.6 mg/dl.

NOTA:

Si el valor de la muestra excede el patrón más alto:

Diluir la muestra diluida previamente (1+20) otra vez 1+1 con

solución NaCl al 0,9% (w/v). Multiplicar el resultado por 2. (P.S.:

ver gammopatía a continuación).

Si el valor de la muestra es inferior al patrón más bajo:

Diluir la muestra pura 1+10 con solución NaCl al 0,9% (w/v).

Multiplicar el resultado por 0,52.

(P.S.: Ver gamopatía a continuación)

GAMMOPATIA

Las muestras que se sospecha tienen gammopatía monoclonal o

policlonal deberán de someterse siempre a electrofórosis de la

proteína para poder detectar cualquier exceso de antígeno. El

exceso de antígeno puede resultar en resultados bajos falsos.

También se podría sospechar Hipergammoglobulinemia si al

volver a empezar la reacción con 100 l de la muestra diluida no

resulta en un incremento significativo en la absorbancia.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA IA 2447

PAGE 3 OF 3

PRECISION


Nivel 1 Nivel 2

Media (mg/dl) 192 291

DE 2.98 5.62

CV (%) 1.55 1.93

n 20 20

Precisión Total

Nivel 1 Nivel 2


DE 13.2 17.8

CV (%) 6.86 6.12

n 20 20

CORRELACIÓN

El método Randox (Y) se comparó con otro método comercial


lineal:

Y = 0.9955 X + 0.4802


Se analizaron 45 muestras de pacientes con valores de entre 49 y

669 U/l.

REFERENCIAS

1. Becker, W.: Laboratoriumblätter 1980; 30: 25.

2. Geiger, H. & Hoffman, P.: Z. Kinderheilk 1970; 109: 22.

3. Whicher, J.J., Price, C.P., Spencer, K., Critical Reviews in Clinical Laboratory Sciences, 1983; 18: 213-216.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

IgG ENSAYO INMUNOTURBIDIMETRICO PARA IgG

Análisis Manual

RX MONZA

PARA SU USO.

Para el análisis cuantitativo in vitro de la IgG en suero y plasma.



Cat. Nos.

IG 2448 R1. Tampón Ensayo 1 x 60 ml

R2. Reactivo Anticuerpo 1 x 5 ml

PRINCIPI

La muestra que contiene IgG humana se diluye adecuadamente y

después se hace reaccionar con antisuero específico para formar

un precipitante que se mide turbidimétricamente a 340 nm. Se

puede determinar la concentración de IgG en la muestra

construyendo una curva estandar a partir de las absorbancias de

los patrones.


Se puede utilizar suero, plasma heparinizado o plasma EDTA.La

IgG es estable durante 3 días entre +15 y +25°C, 7 días entre +2

y +8°C, o 6 meses a -20°C.


Componentes Concentraciones Iniciales en la Prueba

R1. Tampón Ensayo

Glicol Polietileno máximo 6%

Tampón Tris/HCl 20 mmol/l, pH 7,4



IgG Anti (humana)





Los Reactivos R1 y R2 contienen Azida Sódica. Evitar su ingestión

o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de




La Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las cañerías,




deberán limpiarse con hidróxido sódico al 10%.

Hojas de Salud y Seguridad están disponibles si se desean.




laboratorio.


R1. Tampón Ensayo







Tampón Ensayo

Reactivo Anticuerpo


SUMINISTRADOS

Solución de NaCl al 0,9% (w/v).

Calibrador de Proteína Específica Líquido Randox para análisis de

muestras diluídas, (No. Cat IT 2692)

Controles de Proteínas Específicas Valorados Líquidos




PROCEDIMIENTO (Análisis Manual)

Diluir las muestras 1+20 con solución de NaCl al 0,9%.

Se recomienda que todos los reactivos y muestras de suero se

equilibren a temperatura ambiente antes de usar. Se deberá

preparar una curva estandar para cada análisis que se realice y se

recomienda que las muestras se analicen en duplicado junto con

controles apropiados. La frecuencia de recalibración (tras un

cierto número de usos) podrá ser establecida a partir de la

experiencia en el uso de este kit, siempre y cuando se utilizen el

mismo reactivo de trabajo, espetrofotómetro, cubeta y

condiciones del análisis tales como la temperatura.

En caso de elegir esta alternativa se deberá prestar especial

consideración a los resultados del control.

Seleccone la IgG en la pantalla de Ejecución de prueba y llevar a



S0 SO* S1 S1 Muestra Muestra

Blanco Blanco Blanco

ddH2O 10 l 10 l --- --- --- ---

Diluido CAL

Patrón --- --- 10 l 10 µl --- ---

Diluido

Muestra --- --- --- --- 10 µl 10µl

Tampón

Ensayo (R1) 500 µl 500 µl 500 µl 500 µl 500 µl 500 µl

Mezclar bien y se incuba a 25C fuera del analizador durante 10

minutos

Reactivo

Anticuerpo (R2) --- 50 µl --- 50 µl --- 50 µl

Mezclar bien y se incuba a 25C fuera del analizador durante 30

minutos. Inserte en el soporte de RX monza celda de flujo y

pulse leer.

*Blanco de Reactivo

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA IG 2448

PARA USO MANUAL



Temperatura: 25C



Patrones Muestra

Patrones diluidos 20 l de cada -

Muestra diluida - 20 l

Tampón ensayo (R1) 1,0 ml 1,0 ml

Mezclar bien, medir A1 al cabo de 10 minutos.


Reactivo Anticuerpo (R2) 100 l 100 l

Mezclar bien, medir A2 al cabo de 30 minutos.

CÁLCULO MANUAL

Calcular el cambio en absorbancia para cada patrón y muestra.

A = A2 - A1

Después trazar la media de las concentraciones del patrón frente

a los valores A correspondientes utilizando papel gráfico.

[Utilizar un programa de ordenador apropiado para curva, si está

disponible, en una transformación logit/log]. La concentración de

IgG en la muestra se obtiene leyendo el valor A a partir de la

curva de calibración. No intentar extrapolar por encima o debajo

del rango de patrones.

CALIBRACION

Se recomienda el Calibrador de proteína Específica Líquido

Randox para análisis de muestras diluídas.

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Controles de Proteínas Específicas Valorados

Líquidos Randox, Niveles 1, 2 y 3 para el control de calidad diario.

Se deberá de analizar dos niveles distintos de controles al menos

una vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro

del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango

y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes

pasos:









ESPECIFICIDAD

No existe ninguna reacción con IgA e IgM bajo las condiciones

del análisis.

Las muestras extremadamente lipémicas o hemolíticas y altos

niveles de detergentes iónicos pueden interferir con la prueba.

RANGOS DE NORMALIDAD (1,2)

Adultos: 92 - 207 IU/ml

(8 - 18 g/l)

(800 - 1800 mg/dl)

Niños:* 122 ± 23,0 IU/ml

(8-10 años) (10,6 ± 2 g/l)

(1055 ± 200 mg/dl)

Neonatos:* 134 ± 34,7 IU/ml

(2-8 días) (11,6 ± 3,0 g/l)

(1164 ± 301 mg/dl)

* valor medio ± desviación estandar



población.

FACTORES DE CONVERSIÓN

IU/ml x 8,68 = mg/dl

mg/dl x 0,1152 = IU/ml

(Relacionado al patrón de inmunoglobulina WHO 67/86)


FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de RX

monza en el modo de cubeta funcionando a una temperature de

25ºC.

LINEALIDAD

Este ensayo es lineal hasta 5025 mg/dl.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de IgG es 337 mg/dl.

NOTA:

Si el valor de la muestra excede el patrón más alto:

Diluir la muestra diluida previamente (1+20) otra vez 1+1 con

solución NaCl al 0,9% (w/v). Multiplicar el resultado por 2. (P.S.:

ver gammopatía a continuación).

Si el valor de la muestra es inferior al patrón más bajo:

Diluir la muestra pura 1+10 con solución NaCl al 0,9% (w/v).

Multiplicar el resultado por 0,52.

(P.S.: Ver gamopatía a continuación)

GAMMOPATIA

Las muestras que se sospecha tienen gammopatía mononuclear o

polinuclear deberán someterse siempre a electroforosis de la

proteína para poder detectar cualquier exceso de antígeno. El

exceso de antígeno puede resultar en falsos resultados bajos.

También se podría sospechar Hipergamaglobulinemia si al volver

a empezar la reacción con 100 l de la muestra diluida no resulta

en un incremento significativo en la absorbancia.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA IG 2448

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 1043 1648

DE 10.3 19.6

CV(%) 0.99 1.19

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 1043 1648

DE 43.2 26.4

CV(%) 4.14 1.60

n 20 20

CORRELACIÓN

El método Randox (Y) se comparó con otro método comercial


lineal:

Y = 0.9780 X + 18.137


Se analizaron 49 muestras de pacientes con valores de entre 399

y 4859 mg/dl.

REFERENCIAS

1. Becker, W.: Laboratoriumblätter 1980; 30: 25.

2. Geiger, H. & Hoffman, P.: Z. Kinderheilk 1970; 109: 22.

3. Whicher, J.J., Price, C.P., Spencer, K., Critical Reviews in

Clinical Laboratory Sciences, 1983; 18: 213-216.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

L-LACTATO (LAC) PAP Determinación Enzimática de L-Lactato MANUAL RX MONZA PARA SU USO Para la determinación cuantitativa in vitro de L-Lactato en plasma y CSF. Este ensayo és específico para la determinación de L-Lactato. Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador Rx Monza. Cat No. LC 2389 R1a. Tampón 1 x 100 ml 16 x 6 ml R1b. Reactivo Enzima 16 x 6 ml CAL Patrón 1 x 5.5 ml METODO COLORIMETRICO La concentración de L-Lactato en la muestra se determina de acuerdo a la siguiente reacción. Lactato Oxidasa L-Lactato + O2 piruvato + H2O2 H2O2 + 4-aminoantipirina + TOOS Peroxidasa

Producto púrpura + 4H2O TOOS = N-etil-N-(2 hidroxi-3-sulfopropil) m-toluidina El L-Lactato es uno de resultados netos de la gluconeogénesis producida en el músculo esquelético activo. El L_Lactato és metabolizado en el hígado. El NADH és producido en la glucólisis en los tejidos por oxidación aeróbica. Si no hay presencia suficiente de oxígeno para que se produzca esta oxidación, se regenera NAD+ a partir de NADH en la reducción de piruvato a lactato Una concentración incrementada de lactato en la sangre es así un indicador de metabolismo anaeróbico hecho que se da, por ejemplo, si disminuye el flujo de sangre a los tejidos y el suministro de oxígeno es insuficiente. En casos de reducciones de oxígeno severas, podría darse la “Acidosis Láctica”. El L-Lactato por lo tanto se puede utilizar como un indicador de fallo circulatorio severo. MUESTRA Plasma (anticoagulantes: litio heparina lodoacetato, fluoruro EDTA, fluoruro oxalato, fluoruro sódico). CSF Utilizar sin modificación. La sangre se toma de una vena libre de estasis y se conserva en un baño de hielo. El plasma se separa por medio de la centrifugación durante los 30 minutos siguientes. La demora en la separación puede llevar a un incremento de los valores de lactato observados. El análisis se deberá llevar a cabo inmediatamente. COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Componentes Concentraciones Iniciales R1a. Tampón Tampón Pipes 100 mmol/l, pH 7,20 TOOS 2,1 mmol/l Azida Sódica 1 g/l R1b. Reactivo Enzima 4-aminofenazono 0,4 mmol/l Peroxidasa ≥ 1000 U/l Lactato oxidasa ≥ 600 U/l Ascorbato oxidasa ≥ 10000 U/l CAL Patrón Especifico para cada lote






contacto con la piel o las membranes mucosas. En caso de

contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante








al 10%.

Existen hojas de Salud y Seguridad disponibles

Los reactivos deben utilizarse solamente para su propósito por personal de laboratorio cualificado, y



REACTIVOS

R1a. Tampón



R1b. Reactivo Enzima

Reconstituir el contenido de un frasco de Reactivo

Enzima R1b con 6 ml de Tampón R1a. Estable

durante 6 semanas entre +2 y +8C ó 2 semanas entre

+15 y +25C, cuando se conserva protegido de la luz.

CAL Patrón




Tampón

Reactivo Enzima

Patrón




NOTAS

Evitar la contaminación del reactivo, muestras y material de

cristal por medio de la saliva o el sudor dado que tienen

contenidos elevados de lactato.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

PROCEDIMIENTO Seleccione LAC en la pantalla de Monza ejecutar prueba y llevar a cabo un blanco de agua con agua dulce doble destilada (ddH2O) como se indica en las instrucciones. Pipetear en la Cubeta: Reactivo Blanco S0 Patrón S1 Muestra dd H2O 5 µl - - Patrón - 5 µl - Muestra - - 5 µl Reactivo 500 µl 500 µl 500 µl Mezclar e incubar por 5 minutos a 37°C. Inserte la cubeta en

el soporte del flujo de célula y oprima leer. CALIBRACION Se recomienda la calibración durante el cambio de lote de

reactivo, o como se indica en los procedimientos de control

de calidad, usando el estándar proporcionado en el Kit. PARA USO MANUAL Longitud de onda 550 nm Cubeta 1 cm de espesor Temperatura de Reacción 20-25C, 37C Medición frente al blanco de reactivo Pipetear en los tubos de ensayo: Blanco del Patrón Muestra Reactivo (l) (l) (l) Muestra -- -- 10 Patrón -- 10 -- Reactivo 1000 1000 1000 Mezclar, incubar durante 10 minutos entre 20 - 25C ó 5 minutos a 37C. Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) y el patrón (Apatrón) frente al blanco del reactivo dentro de los siguientes 30 minutos. CÁLCULO MANUAL Amuestra Concentración de L-Lactato = x Concentración Apatrón del patrón (mg/dl) Amuestra Concentración de L-Lactato = x Concentración Apatrón del patrón (mmol/l) NORMALIZACIÓN El L-Lactato Randox Estándar incluido en este Kit es trazable a

L-Lactato método de referencia Gravimétrico. CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara. 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento


4. Comprobar la temperatura de reacción 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus

componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de


VALORES DE NORMALIDAD(5)

mmol/l mg/dl

Plasma 0,5 – 2,22 4,5 - 20


rango que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de

la población.



Las siguientes características de rendimiento se obtuvieron

utilizando un Rx Monza en modo cubeta funcionando a 37°C y

calibrado en el estándar proporcionado por el Kit.

LINEALIDAD

El test es lineal hasta una concentración de L-Lactato de 19,7

mmol/l (178 mg/dl). Diluir las muestras superiores a esta

concentración 1+1 con NaCl al 0,9% y multiplicar el resultado

por 2.

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de L-lactato con un nivel

aceptable de precisión se determinó en 0,165 mmol/l (1,49

mg/dl).

PRECISION


Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 13.1 53.3

DE 0.106 0.458

CV(%) 0.81 0.86

n 20 20

Precisión Total

Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 13.1 53.3

DE 0.749 1.93

CV(%) 5.72 3.62

n 20 20

CORRELACIÓN



lineal:

Y = 0.9382 X + 0.2605



6.5 y 123 mg/dl.

REFERENCIAS

1. Shimojo N et al, CLIN CHEM 1989; 35(9): 1992 - 1994.

2. Shimojo N, Fujino K et al, CLIN CHEM 1991; 37(11) 1978

- 1980.

3. Lehninger Al: Principles of Biochemistry, Worth Publishers,

New York, 1993, p 416.

4. Mascini M et al, CLIN CHEM. 1987; 34(4) 591 - 593. 5. Jacobs DS, Kasten BL, Demott WR and Wolfson WL:

Laboratory Test Handbook, LEXI COMP INC, OHIO,

1990, p. 245.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

LIPASA (LPS) Triacilglicerol Lipasa

Método UV

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO Para el análisis cuantitativo in vitro de Lipasa en el suero y plasma. Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador Rx Monza.

No. Cat.

LI 188 R1a. Tampón 1 x 70 ml

20 x 2.5 ml R1b. Sustrato 20 x 2.5 ml


LI 194 R1a. Tampón 2 x 70 ml

4 x 30 ml R1b. Substrate 4 x 30 ml



El sistema de test de la lipasa es un medio para medir la actividad

del enzima lipasa en el suero y el plasma. La medición de la lipasa

se utiliza en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades del

páncreas tales como pancreatitis aguda y obstrucción del

conducto pancreático.

METODO TURBIDIMETRICO(3)

PRINCIPIO

Lipasa

Trioleína + 2H2O monoglicérido + 2 ac. oléico

Se mide la disminución de la turbidez a 340 nm.

MUESTRA


La lipasa es estable en la muestra durante 5 días entre

+2 y +8°C ó 24 horas entre +20 y +25°C.


Componentes Concentración en la prueba

R1a. Tampón


R1b. Sustrato

Desoxicolato sódico 16,7 mmol/l Cloruro cálcico 0,04 mmol/l

Trioleína 0,3 mmol/l

Colipasa 4 mg/l

CAL. Patrón Ver valor asignado

en el inserto del lote específico









a un médico.








desean.




laboratorio.


R1a. Tampón



R1b. Sustrato

Reconstituir el contenido de un vial de Sustrato R1b con

el volumen apropiado de Tampón R1a.

2,5 ml para el kit de 20 x 2,5 ml (LI 188)

30 ml para el kit de 4 x 30 ml (LI 194)

Estable durante 2 semanas cuando se conserva entre +2 y

+8°C ó 5 días entre +15 y +25°C.

CAL. Patrón

Disolver el contenido de un vial de Patrón 3 en 3,0 ml

de agua bidestilada, rotar lentamente durante 30 min

antes de utilizar. Estable durante 5 días entre +2 y +8°C.


Tampón

Sustrato

Patrón




NOTAS(2)

En raras ocasiones, el suero del paciente puede presentar un

aumento de la absorbancia en vez de un descenso. La actividad

de la lipasa en estas muestras normalmente se encuentra dentro

del rango normal. Actividades extremadamente elevadas de lipasa

pueden conducir a un considerable consumo de sustrato, siendo

estos casos A1 menor de 0,500. Cuando esto ocurra, diluir la

muestra 1+9 con una solución de NaCl 0,9% y repetir la prueba.

Multiplicar el resultado por 10. Es preferible utilizar cubetas

desechables. Las cubetas de cristal deben lavarse

abundantemente, especialmente después de haber sido utilizadas

para ensayos de triglicéridos o colesterol.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA LI 188

PAGE 2 OF 2

PROCEDIMIENTO Seleccione LIP en la pantalla ejecutar prueba y lleve a cabo un blanco de agua según las instrucciones. Pipetear en la Cubeta: Reactivo Blanco S0 Patrón S1 Muestra ddH20 20uL - - Muestra - - 20uL CAL Patrón - 20uL - Reactivo 500uL 500uL 500uL Mezclar cuidadosamente para evitar la formación de espuma, entonces inserte la cubeta en el soporte de flujo de células de RX monza y oprima leer. CALIBRACIÓN PARA RX MONZA Se recomienda la calibración usando el CAL estándar proporcionado en el Kit. Calibrar en el cambio de lote de reactivo o según se indica en los procedimientos de control de calidad. PARA USO MANUAL Longitud de onda: 340 nm (Hg 365 nm o Hg 334 nm) Cubeta: 1 cm de espesor Temperatura: 37°C Medición: frente al aire Pipetear en la cubeta: Patrón Muestra Macro Semi Micro Macro Semi Micro Reactivo 2,5 ml 1,0 ml 2,5 ml 1,0 ml Muestra --- --- 0,1 ml 0,04 ml Patrón 0.1 ml 0,04 ml --- --- Mezclar. Evitar la formación de espuma. Leer la absorbancia A1 del patrón y de la muestra al cabo de 4 min. Después de otros 5 min leer la absorbancia A2 del patrón y de la muestra. A de la muestra o del patrón = A1 - A2 CÁLCULO MANUAL Calcular el factor de la prueba de la siguiente manera: Actividad(patrón) Factor = ────── Apatrón Actividad lipasa en la muestra = Factor x Amuestra CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y Nivel 3 para el control de calidad diario. Se deberá de analizar dos niveles distintos de controles cada día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara. 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 4. Comprobar la temperatura de reacción. 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los


INTERFERENCIA

La hemólisis interfiere en la prueba.

VALORES NORMALES(4)

Suero: Hasta 190 U/l (37°C)

Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de

referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de la

población.




analizador Rx Monza en funcionamiento a 37ºC.

LINEALIDAD

Si la actividad de la lipasa excede 940 U/l, diluir la muestra 1+1

con NaCl al 0,9% y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por

2.

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de lipasa con un nivel


PRECISION Precisión Dentro del Análisis Nivel 1 Nivel 2 Media (U/l) 129 403 DE 6.05 16.2 CV(%) 4.69 4.02 n 20 20 Precisión Total Nivel 1 Nivel 2 Media (U/l) 129 403 DE 6.57 17.8 CV(%) 5.09 4.41

n 20 20

CORRELACIÓN



lineal:

Y = 1.0495 x -10.67



43-918U/l.

REFERENCIAS

1. Tietz NW et al. Lipase in serum-the elusive enzyme: An

overview. Clin Chem 1993; 39:746-756.

2. Lott, J. A., et al. Clin. Chem. 1986; 32: 1920.

3. Ziegenhorn J., et al. Clin. Chem. 1979; 25: 1067.

4. Weisshaar, H.D., et al. (1981). Dtsch. Med. Wschr.

106: 239.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

MAGNESIO

(AZUL DE XILIDIL) Método Colorimétrico

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de Magnesio en el suero, el

plasma y la orina. Este producto es adecuado para un uso manual

o en el analizador RX monza.

No. Cat.

MG 531 R1. Reactivo de color 3 x 100 ml


SIGNIFICADO CLINICO

El Magnesio es uno de los principales cationes intracelulares en el cuerpo. Su acción está relacionada con la del calcio. La deficiencia

de magnesio, hipomagnesemia, puede resultar en varias

enfermedades neuromusculares, debilidad, temblores, tetania y

convulsiones. Se asocia con hipocalcemia, terapia intravenosa,

diabetes mellitus, alcoholismo, diálisis y embarazo.

Los niveles elevados de magnesio en suero se asocian con

deshidratación, acidez diabética grave y Enfermedad de Addison.

Las condiciones que interfieren con la filtración glomerular como

en el caso de fallo renal resultan en retención de magnesio y por

ello aumento de sus niveles en suero.

PRINCIPIO(1-5)

Los iones de magnesio reaccionan con azul de xilidilo en un

medio alcalino para formar un quelato soluble en agua de color

morado-rojizo. La intensidad del color es proporcional a la

concentración de magnesio en la muestra. El Calcio se excluye

de la reacción por medio de su conjugación con el EGTA.


Suero, Plasma (no plasma tratado con EDTA) u orina. La

muestra de orina de 24 horas puede contener sedimentos que

absorben el magnesio. Añadir unas gotas de ácido clorhídrico

concentrado (pH 3-4) para disolver el sedimento y diluir con

DDH2O 1+4 (resultado x 5).


Componentes Concentración Inicial de los Reactivos

R1. Reactivo de Color

Azul de Xilidilo 0,1 mmol/l

Tampón Tris 0,2 mmol/l

Carbonato Potásico 77 mmol/l

EGTA 0,04 mmol/l

CAL. Patrón Ver inserto lote específico

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo de reactivos de laboratorio. La solución R1 contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua. En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar atención médica inmediatamente. La Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes de agua para evitar la formación de ácidos. Las superficies metálicas expuestas, deberán limpiarse con hidróxido de sodio al 10%. Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se desean. Los reactivos deben utilizarse solamente para su propósito por personal de laboratorio calificado, y bajo condiciones de laboratorio apropiadas. PREPARACION Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS Todos los reactivos están listos para su uso. Estables hasta la

fecha de caducidad cuando se conservan entre +2 y +25C. MATERIALES SUMINISTRADOS Reactivo de Color de Magnesio Patrón de Magnesio MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS

Material de pipeteo para el suministro de 10 l y 1,0 ml. Cronómetro y baño de agua o bloque de calentamiento para

mantener una temperatura entre 20 - 25C. Un espectrofotómetro con una longitud de onda de 520 nm. Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532). Multisueros de Precisión Humanos Randox Nivel 2 (No. Cat. UN1557) y Nivel 3 (No. Cat. UE1558). NOTA Todo el material deberá estar libre de contaminación de Magnesio. Las fluctuaciones en valores de blanco de más de un 10% en una serie, son más probables debido a la contaminación del material con magnesio. Lavar la muestra y los contenedores del reactivo con solución al 10% de Triton X 100, sumergir en ácido clorhídrico o Nítrico diluido de 1 a 2 horas y enjuagar con agua destilada. Invertir y dejar gotear hasta que se seque. PROCEDIMIENTO Seleccione Mg en la pantalla de Ejecución de prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones.


Reactivo Blanco S0 Patrón S1 Muestra

ddH2O 5 l - - Muestra - - 5 l Calibrador - 5 l - Reactivo 500 l 500 l 500 l

Mezclar, incubar durante 5 minutos a 20-25 º C. Inserte la cubeta en el porta-RX monza celda de flujo y pulse Leer. CALIBRACION Recomendó el uso de CAL estándar suministrado en el kit de calibración o de suero Randox Nivel 3. Calibrar el cambio de lote del reactivo o como se indica en los procedimientos de control de calidad.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA MG 531

PAGE 2 OF 2

PARA USO MANUAL Longitud de onda: 520 nm Cubetas: 1 cm de espesor Temperatura: 20 - 25C Medición: frente al blanco de reactivo Procedimiento Macro Pipetear en las cubetas: Blanco de Reactivo Patrón Muestra Reactivo de Color 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml Agua Destilada 20 l - - Patrón - 20 l - Muestra - - 20 l Mezclar bien e incubar durante 5 minutos a temperatura ambiente. Medir la absorbancia final de la muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al Blanco de Reactivo. El color resultante es estable durante 3 horas a temperatura ambiente. Procedimiento Semi Micro Blanco de Reactivo Patrón Muestra Reactivo de Color 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml Agua Destilada 10 l - - Patrón - 10 l - Muestra - - 10 l Mezclar bien e incubar durante 5 minutos a temperatura ambiente. Medir la absorbancia final de la muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al Blanco de Reactivo. El color resultante es estable durante 3 horas a temperatura ambiente. CÁLCULO MANUAL Amuestra Concentración de Magnesio (mmol/l) = x Conc. Apatrón Estándar (mmol/l) Amuestra Concentración de Magnesio (mg/dl) = x Conc. Apatrón Estándar (mg/dl) NORMALIZACIÓN Standard Randox magnesio incluido en el kit se puede rastrear al magnesio de materiales de referencia NIST 909b. CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 4. Comprobar la temperatura de reacción. 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los

Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413. INTERFERENCIA Se analizaron los siguientes analitos hasta los niveles indicados y se encontró que no producen interferencias: Hemoglobina <1000 mg/dl (10 g/l) Bilirrubina <25 mg/dl (427 mol/l) Triglicéridos <1000 mg/dl (11 mmol/l)

VALORES DE NORMALIDAD(6) ADULTOS Suero 0.65 – 1.05 mmol/l (1.58 - 2.55 mg/dl) Orina 3.00 – 5.00 mmol/24 hrs (73 - 122 mg/24 hrs) Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de la población. CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE FUNCIONAMIENTO Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador de RX monza, en el modo de cubeta, calibrado en Calibración de nivel Randox Suero 3. SUERO LINEARIDAD El método es lineal hasta 2,34 mmol/l (5,69 mg/dl). Las muestras con concentraciones más elevadas se deberán diluir 1+1 con agua doblemente destilada y repetir el análisis. Multiplicar el resultado por 2. SENSIBILIDAD El nivel mínimo detectable se ha determinado como 0,036 mmol/l (0,088 mgl/dl). PRECISION Intra assay Nivel 2 Nivel 3 Media (mg/dl) 2.43 4.50 DE 0.017 0.020 CV(%) 0.70 0.44 n 20 20 Inter assay Nivel 2 Nivel 3 Media (mg/dl) 2.43 4.50 DE 0.066 0.081 CV(%) 2.71 1.79 n 20 20 MÉTODO DE COMPARACIÓN El método Randox (Y) se comparó con otro equipo de prueba disponible en el mercado (X). Cuarenta muestras de pacientes con valores que abarca el intervalo 1,75 a 5,58 mg / dl se ensayaron. El análisis de regresión lineal de los datos como resultado la siguiente ecuación. Y = 0.997 X - 0.0004 con un coeficiente de correlación, r = 0,9989 ORINA LINEARIDAD Este método es lineal to12.6 mmol/l (30,6 mg/dl). SENSIBILIDAD El nivel mínimo detectable se ha determinado como 0,618 mmol/l (1,50 mg/dl). REFERENCIAS 1. Mann, C.K., Yoe, J.H., Anal. Chem. (1956), 28: 202-205. 2. Mann, C.K., Yoe, J.H., Anal. Chim. Acta (1957), 16: 155-160. 3. Ogata, H., Hiroi, L., Anal. Chem. (1959), 8: 21. 4. Bohuon, C., Clin. Chim. Acta. (1962), 7: 811-817. 5. Rice E.N., Lapara, C.Z., Clin. Chim. Acta. (1964) 10: 369. 6. Teitz N.W. Clinical Guide to Laboratory Tests. W.B.

Saunders Co (1983).

Revisado 15 Sep 10 bm Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

SODIO (Na) Prueba Colorimétrica Enzimática RX Series1

USO DEL REACTIVOLa cuantificación in vitro de Sodio se determina en suero y plasma. Este producto es apto para utilizarse en los Analizadores de la RX Series.

No. Cat. NA7167 R1a. Solución Tampón 4 x 45 ml

R1b. Enzima 4 x 45 ml R2a. Diluyente 2 x 39 ml R2b. Sustrato 2 x 39 ml

MUESTRASuero, plasma tratada con heparina o litio.

ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOSR1. Solución Tampón/Enzimas

Transferir el contenido de un frasco de solución tampón R1 al frasco de Enzima R1b y disolver agitando suavemente, asegurando que el contenido

quede disuelto completamente. Transferir el contendido de la solución tampón R1a enjuagando el vial R1b varias veces. Evite la formación de espuma. Estable por 2 semanas de +2 hasta +8°C o 5 días de +15 hasta +25°C.

R2. Diluyente/SustratoTransferir el contendio del frasco de Diluyente R2a en el frasco de Sustrato R2b y disolver agitando suavemente, asegurando que el contenido quede dusuelto completamente en el diluyente. Transferir el contendio en el diluyente R2b varias veces. Evite la formación de espuma. Estable por 2 semanas de +2 hasta +8°C o 5 días de +15 hasta +25°C.

MATERIALES PROPORCIONADOS Solución Tampón Enzima Diluyente Sustrato

MATERIALES REQUERIDOS PERO NO SUMINISTRADOS Multi-suero de ensayo Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532). Calibrador Randox Nivel 3 (No. Cat. CAL 2351). NOTAS DE PROCEDIMIENTO Cuando el Sodio y Potasio se solicitan en conjunto, el Sodio debe determinarse inmediatamente antes de analizar el Potasio.

PROCEDIMIENTO Seleccionar NA en la pantalla "Run Test" y realice un blanco de agua.


Blanco de Reactivo S0 Estándar S1 Muestra ddH2O 20 µl - -Estándar - 20 µl -Muestra - - 20 µlR1 500 µl 500µl 500 µl

Mezclar e incubar por 5 minutos a 37ºC. Posteriormente adicionar:

R2 200 µl 200 µl 200 µl

Mezclar adecuadamente, inserte la cubeta en el espacio del RX Monza para la celda de flujo y presione "Read".

CALIBRACIÓN Se recomienda el uso de la Calibración Randox Nivel 3 (CAL 2351), utiliza el blanco como S2 y lo diluye 4+1 como S1 (4 partes Cal Nivel 3 + 1 parte de agua) con agua doblemente destilada. Se recomienda realizar una calibración diaria de 2 puntos como se indica en el procedimiento de control de calidad.

CONTROL DE CALIDAD Se recomienda utilizar el Multi-suero de ensayo Randox Nivel 2 y Nivel 3 para realizar el control de calidad diario. Deben evaluarse al menos dos niveles de calidad una vez al día. Los valoresobtenidos del control de calidad deben caer dentro del rangode valores específicos. Si los valores caen fuera del rango,deberá repetir y excluir los errores siguiendo los siguientespasos:

1. Verificar la configuración del analizador2. Verificar la limpieza del analizador3. Verificar la calidad del agua4. Verificar la temperatura de reacción5. Verificar la fecha de caducidad del reactivo6. Contactar a Soporte Técnico de Randox

Los requerimientos de control de calidad deberían serdeterminados en concordancia con las regulacionesgubernamentales o con los requerimientos acreditativoscorrespondientes.

CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DEL DESEMPEÑOSe obtuvieron las siguientes características específicas de

funcionamiento al utilizar un analizador de la Rx Series.

LINEALIDAD Este método es lineal hasta la concentración de Sodio de 182 mmol/l. Muestras por debajo de esta concentración deberen diluirse 1+1 con agua doblemente destilada (no usar solución salina 0.9% ) y repetir el ensayo. Multiplar el resultado por 2.

SENSITIVITY La concentración mínima detectable para Sodio con un nivel de precisión adecuado se determinó como 57.8 mmol/l.

PRECISIÓN

Precisión dentro de la CorridaLevel 2 Level 3

Media (mmol/l) 139 159 DE 3.82 4.94CV(%) 2.75 3.11n 20 20

Precisión entre CorridasLevel 2 Level 3

Media (mmol/l) 139 159 DE 3.78 5.66CV(%) 2.72 3.56 n 20 20

CORRELACIÓN Se comparó este método (Y) con otro método comercialdisponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación deregresión lineal:

Y = 0.9955 X + 1.2358 y un coeficiente de correlación de r = 0.9813

Se analizaron 41 muestras de pacientes abarcando un rango de 87.85 hasta 188.51 mmol/l.

Revisado 08 Mar 11 lm

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

ESTADO DE LOS ANTIOXIDANTES TOTALES (TAS) MANUAL PARA SU USO Para la determinación cuantitativa in vitro del Estado de los Antioxidantes Totales en suero, plasma, vino, cerveza o zumos de fruta. Este producto es adecuado para su utilización en Manual. Cat No. NX 2332 R1. Tampón 1 x 100 ml 5 x 10 ml R2. Cromógeno 5 x 10 ml 5 x 10 t R3. Sustrato 2 x 5 ml CAL Patrón 5 x 1 ml PRINCIPIO DEL ANALISIS ABTS® (2,2'-Azino-di-[3-etilbenzotiazolín sulfonato]) se incuba con peroxidasa (metamioglobina) y H2O2 para generar el radical catión ABTS®*+. Este radical presenta una coloración verde-azulada relativamente estable, que se mide a 600 nm. La presencia de antioxidantes en la muestra produce una supresión de esta coloración, siendo esta supresión, proporcional a la concentración de antioxidantes presentes en la muestra. HX-FeIII + H2O2 .X - [FeIV = 0] + H2O ABTS® + .X - [FeIV = 0] ABTS®*+ + HX - FeIII HX-FeIII = Metamioglobina .X - [FeIV = 0] = Ferrilmioglobina ABTS®= 2,2'-Azino-di-[3-etilbenzotiazolín sulfonato] ABTS® es marca registrada de Boehringer Mannheim. MUESTRA(2) Suero fresco o plasma heparinizado. Evitar muestras hemolizadas. La muestra puede ser conservada hasta 36 Hs entre +2 y +8°C. El plasma/suero puede ser congelado durante un máximo de 14 días. Evitar ciclos repetidos de congelación-descongelación. Para el vino tinto diluya 1 + 3. Los zumos de frutas pueden ser analizados también, pero deben filtrarse con un filtro de 0.45 µl. COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Componentes Concentraciones en la prueba R1. Tampón Tampón Fosfato Salino 80 mmol/l, pH 7,4 R2. Cromógeno Metamioglobina 6,1 mol/l ABTS® 610 mol/l R3. Sustrato Peróxido de hidrógeno (forma estabilizada) 250 mol/l CAL Patrón 6-hidroxi-2,5,7,8-tetrametilcromán -2-ácido carboxílico Específico por lotes

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren al manejar reactivos de laboratorio. Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se desean. Por favor, desechar todos los materiales Biológicos y Químicos según las pautas locales. Los reactivos deben ser utilizados solo para los propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de laboratorio. ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS R1. Tampón

Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8°C.

R2. Cromógeno

Reconstituir un vial de cromógeno R2 con 10 ml de Tampón R1. Estable 2 días cuando se conserva entre +2 y +8°C u 8 horas entre +15 y +25°C.

R3. Sustrato

Diluir 1 ml de sustrato R3 con 1.5 ml de Tampón R1. Estable 24 horas cuando se conserva entre +2 y 8°C. En la forma no diluida es estable hasta la fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8°C

CAL Patrón

Reconstituir un vial de Patrón con 1 ml de agua doblemente desionizada. Estable durante 2 días cuando se conserva entre +2 y +8°C ó 1 mes a -20°C.

Nota: Si este análisis se utiliza en un sistema

automatizado, por favor, referirse a la hoja de procedimiento para ese sistema, ya que las instrucciones de reconstitución podrían diferir.

MATERIALES SUMINISTRADOS Tampón Cromógeno Sustrato Patrón MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS Control Randox de Antioxidantes Totales Cat.No. NX 2331 0,9% de NaCl de la solución (Na Sin azida) NOTAS 1. Es muy importante controlar exactamente el tiempo de reacción. Los resultados se verán afectados si se cambian los volúmenes, los tiempos de incubación y las temperaturas. El kit del Estado Antioxidante Total sόlo se puede utilizar con un espectrofotόmetro atemperado.

2. Azida de sodio interfiere en el ensayo y no debe ser añadió a

la solución 0,9% de NaCl que puede ser utilizado para diluir las muestras que exceden la linealidad del ensayo.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL NX 2332

PAGE 2 OF 2

PROCEDIMIENTO Longitud de onda: 600 nm Cubeta: 1 cm de espesor Temperatura: 37°C Medida: frente al aire Pipetear en cubeta: Reactivo Patrón Muestra Blanco Agua Bidestilada 20 l - - Patrón - 20 l - Muestra - - 20 l Cromógeno (R2) 1 ml 1 ml 1 ml Mezclar bien, incubar hasta alcanzar la temperatura y leer absorbancia inicial (A1) Añadir: Sustrato (R3) 200 l 200 l 200 l Mezclar y empezar a cronometrar simultáneamente. Leer la absorbancia (A2) al cabo de exactamente 3 minutos. A2 - A1 = A de muestra/patrón/blanco CALCULO Estado de los Antioxidantes Totales: conc del patrón Factor = ────────────────── ( A blanco - A patrón) mmol/l = Factor x ( A Blanco- A Muestra) CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan Control Randox de Antioxidantes Totales para el control de calidad diario. Este control debería procesarse como mínimo una vez al día Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara. 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación, por ej. el crecimiento


Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413. VALORES DE REFERENCIA Rango: 1,30 - 1,77 mmol/l Plasma Este rango fue determinado en población activa Europea. Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de la población.

LINEALIDAD Muestras que presentan concentraciones superiores a 2,5 mmol/l deberían ser diluidas con NaCl al 0,9% y analizadas otra vez. Se recomienda diluir las muestras únicamente cuando sea necesario ya que una dilución lleva consigo un aumento de hasta 20% en los valores. La mayor parte de las muestras no necesitarán ser diluidas porque los resultados serán más bajos de 2,5 mmol/l. PATENTES Este producto está sujeto a Patente UK 2250819 y Patentes y Aplicaciones derivadas de PCT Aplicación de Patente PCT/GB91/02228. REFERENCIAS 1. Miller, N.J., Rice-Evans, C., Davies,

M.J., Gopinathan, V. and Milner, A., Clinical Science (1993) 84, 407-412.

2. Data on file at Randox. Revisado 13 Nov 09 ck

Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

GLUCOSA-6-FOSFATO

DESHIDROGENASA

(G-6-PDH)

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de

Glucosa-6-Fosfato Deshidrogenasa en eritrocitos. Este producto

es adecuado para un uso manual o en el analizador RX monza.

Cat. No.

PD 410 R1. Tampón 1 x 100 ml

100 ml R2. NADP 1 x 2 ml

R3. Sustrato 1 x 2 ml R4. Digitonina 1 x 20 ml

METODO UV

PRINCIPIO(1)

La actividad del enzima se determina midiendo la variación de la

absorbancia a 340 nm que se produce por la reducción del

NADP+.

G-6-PDH

G-6-P + NADP+ gluconato-6-P + NADPH + H+

MUESTRA

Eritrocitos.


Lavar 0,2 ml de sangre con 2 ml alícuotos de solución de NaCl al

0,9%. Centrifugar después de cada lavado a 3000 rpm durante 10

minutos. Repetir 3 veces. Repetir 3 veces. Suspender el

centrifugado de eritrocitos en 0,5 ml de solución 4, dejar durante

15 min a +4C y centrifugar de nuevo. Use el sobrenadante en

el ensayo en un plazo de 2 horas.



R1. Tampón

Tampón trietanolamina 31,7 mmol/l, pH 7,6 EDTA 3,2 mmol/l

R2. NADP 0,34 mmol/l

R3. Sustrato 0,58 mmol/l

R4. Digitonina





La solución R1, R2, R3 y R4 contiene azida sódica. Evitar su

ingestión o el contacto con la piel y mucosas. En caso de

contacto con la piel, lavar inmediatamente el área afectada con

agua abundante. En caso de ingestión o contacto con los ojos

llamar inmediatamente a un médico.







Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se desean.






laboratorio.


R1. Tampón



R2. NADP

Reconstituir el contenido de la botella 2 con 2 ml de agua

bidestilada. Estable durante 4 semanas entre +2 y +8°C.

R3. Sustrato

Reconstituir el contenido de la botella 3 con 2 ml de agua

bidestilada. Estable durante 4 semanas entre +2 y +8°C.

R4. Digitonina




Tampón

NADP

Sustrato

Digitonina


Control para G-6-PDH Randox

Deficiente No. Cat. PD 2617

Normal No. Cat. PD 2618

Agua bi destilada

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA PD 410

PROCEDIMIENTO

Determinar el número de eritrocitos/ml de sangre.

1. RX MONZA

Seleccione G6PD en la pantalla de Ejecución de prueba y llevar a



Mestra

Haemolysate 7.5 l

Reagent R1 500 l

Reagent R2 15 l

Mezclar, incubar durante 5 min a 37°C y añadir:

Reagent R3 7.5 l

Mezclar bien y aspirar en el RX monza.

2. PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm o Hg 365 nm)


Temperatura: 37°C



Macro Semi Micro

R1 3.00 ml 1.00 ml

R2 0.10 ml 0.03 ml

Haemolysate 0.05 ml 0.015 ml

Mezclar, incubar durante 5 min a 37°C y añadir:

R3 0.05 ml 0.015 ml

Mezclar, leer la absorbancia inicial y empezar a cronometrar

simultáneamente.

Leer de nuevo al cabo de 1, 2 y 3 min.

CÁLCULO MANUAL

Para calcular la actividad de la G-6-PDH utilizar las

siguientes fórmulas:

Macro mU/erythrocytes per ml sangre* = 30476 x A 340 nm/min mU/erythrocytes per ml sangre* = 54857 x A Hg 365 nm/min mU/erythrocytes per ml sangre* = 31068 x A Hg 334 nm/min

Semi Micro mU/erythrocytes per ml sangre* = 33650 x A 340 nm/min mU/erythrocytes per ml sangre* = 60571 x A Hg 365 nm/min mU/erythrocytes per ml sangre* = 34304 x A Hg 334 nm/min

La actividad G-6-PDH se expresa como eritrocitos mU/109 o como hemoglobina mU / g . Para el cálculo de actividad G-6-PDH como eritrocitos mU/109 para la comparación con el valor normal, se divide la actividad calculada (mU / ml de sangre por los eritrocitos) con el recuento de los glóbulos rojos por ml. eg. Conteo de RBC por ml = 5.3 x 109 mU/eritrocitos per ml = 695 695 mU/109 eritrocitos = = 131 5.3 Para el cálculo de actividad G-6-PDH como hemoglobina mU/g. La siguiente ecuación se utiliza. mU.eritrocitos por ml x 100 G-6-PDH mU/gHb = Hb (g/dl) 100 = Factor para convertir de ml a dl Hb(g/dl) = Concentración de hemoglobina

determinó para cada muestra eg. mU/ ml por eritrocitos = 695 Hb(g/dl) = 15.0 695 x 100 G-6-PDH mU/gHb = 15.0 = 4633 Corrección de la Temperature Tenga en cuenta que la corrección de la temperatura por debajo solo puede ser utilizada para las muestras de pacientes. Cuando la temperatura es de 37 ° C, no se requiere ningún factor de corrección de temperatura (TCF). Si los resultados de muestras de los pacientes se presentan a una temperatura que no sea 37 ° C, se debe utilizar un TCF.

Cubeta de TCF Temperatura (°C) 25 2.076 30 1.515 CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Control para G-6-PDH Randox , Deficiente y Normal para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar programación del instrumento y el origen de luz. 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento de

bacterias puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 4. Comprobar la temperatura de reacción 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los


GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA PD 410

INTERFERENCIAS

Los reticulocitos tienen un nivel de G6-PDH más elevado que el

de los hematies maduros. No se recomienda por tanto que se

realice este análisis trás una crisis hemolitica severa, ya que esto

puede ofrecer resultados falsaments elevados. El análisis puede

resultar util una vez que los hematies hayan vuelto a su nivel

normal.

VALORES NORMALES(3)

En eritrocitos: 245 - 299 mU/109 eritrocitos (37°C)

6.97 - 20.5 U/g Hb (37°C)

Hemoglobina en sangre (g/dl)

Hombres Adultos 13 - 18

Mujeres Adultos 11 - 16

Recién nacidos 14 - 23



población.





LINEALIDAD

Este método es lineal hasta una concentración de 4303 U / l.

Diluir las muestras con concentraciones mayores con 0,2 ml de

hemolizado con 1,8 ml de solución de NaCl al 0,9% y repita la

prueba. Multiplicar el resultado por 10.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de G6PDH en los

eritrocitos con un nivel aceptable de precisión ha sido

determinada como 154 U/l.

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 1 Nivel 2

Media (U/l) 784 1533

DE 33.2 71.3

CV (%) 4.24 4.65

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 1 Nivel 2

Media (U/l) 784 1533

DE 50.5 78.3

CV (%) 6.45 5.11

n 20 20

CORRELACIÓN


disponible (X) y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión lineal:

Y = 1.0069 x + 47.644


Se analizaron 50 muestras de pacientes con valores de entre 162

y 1200U/l.

REFERENCIAS

1. Kornberg, A. et al., Methods in Enzymology 1,

Academic Press, New York, 1955; p.323.

2. Makarem, A., Clinical Chemistry-Principles and

Techniques. 2nd Ed. R.F. Henry, D. C. Cannon, J.W.

Winkelman, Editors. Harper and Row, Hagerstown

[MD], 1974; 1128-1135.

3. Lohr GW, Waller HD: Glucose-6-Phosphate

Dehydrogenase. Methods of Enzymatic Analysis,

3rd Edition - Varlag Chemie, Wehnheim: 1974; p. 636.

Revised 17 Nov 11 ml Rev.002

GAAMSA

www.gaamsa.com

DE 4

FOSFORO INORGÁNICO

(PHOS) Método UV

MANUAL RX MONZA USO PREVISTO Para la determinación cuantitativa in vitro del fósforo inorgánico en suero y orina. Este producto es adecuado para uso manual y para el analizador Rx Monza. N.° de cat. PH 1016 R1a. Blanco de reactivo 1 x 210 ml 300 ml R1b. Reactivo de molibdato 1 x 90 ml CAL. Patrón 1 x 5,5 ml RELEVANCIA CLÍNICA El cuerpo humano contiene aproximadamente 1 kg de fósforo. Las sales calcificadas del fosfato que constituye la sustancia inorgánica del hueso suponen aproximadamente el 80% del total de fósforo. El resto está distribuido por las restantes células del cuerpo, principalmente como fósforo orgánico en fosfolípidos y fosfoproteínas. En el suero, la mayor parte del fósforo inorgánico se encuentra en forma libre, estando ligado el 15% aproximadamente a proteínas. Cuando aparecen niveles anómalos de fosfato sérico, suelen acompañar a enfermedades del riñón, óseas y paratiroideas. El fosfato se suele medir junto con el calcio sérico, ya que cada una de las mediciones resulta de utilidad para interpretar la otra. PRINCIPIO DEL ENSAYO (1) El fósforo inorgánico reacciona con el molibdato armónico en presencia de ácido sulfúrico para formar un complejo de fósfomolibdato que se mide a 340 nm. RECOGIDA DE LA MUESTRA Y PREPARACIÓN (2) El suero es la muestra recomendada.

El suero es estable durante 5 días si se almacena a +2-8 ºC. Es

estable durante 3 meses si se almacena congelado a -20C. Evite las muestras hemolíticas ya que la hemolisis interfiere en la prueba. Orina: La orina de 24 horas se debe recolectar en una botella lavada con ácido y libre de detergentes. Tras la recolección de la muestra, acidifíquela hasta alcanzar un pH <3,0. Diluir la orina 1+19 con solución de 0,9% NaCl. Multiplicar el resultado por 20. COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Contenido Concentración inicial de las soluciones R1a. Blanco de reactivo Ácido sulfúrico 0,36 mol/l Cloruro de sodio 154 mmol/l Detergente R1b. Reactivo de molibdato Molibdato armónico 3,5 mmol/l Ácido sulfúrico 0,36 mol/l Cloruro de sodio 154 mmol/l CAL. Patrón Fosfato potásico Consulte el prospecto de cada lote

PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DE SEGURIDAD Sólo para uso diagnóstico in vitro. No pipetee con la boca. Aplique las precauciones habituales necesarias para la manipulación de reactivos de laboratorio. Las soluciones R1a y R1b contienen ácido sulfúrico. Evite la digestión de estos productos y su contacto con la piel o las membranas. El CAL contiene azida sódica. Evite la digestión de estos productos y su contacto con la piel o las membranas. En caso de contacto con la piel, lave la zona afectada con gran cantidad de agua. En caso de contacto con los ojos o, si se produce digestión, acuda de inmediato al médico. La azida sódica reacciona con las tuberías de cobre y de plomo y

forma azidas metálicas explosivas en potencia. Al desechar

reactivos de este tipo, lave con gran cantidad de agua para evitar

que se acumulen azidas. Las superficies metálicas expuestas a

estos reactivos se deben limpiar con hidróxido sódico al 10%.

Están disponibles previa petición las fichas técnicas de salud y

seguridad.

Los reactivos deben utilizarse sólo para la finalidad

prevista y por personal de laboratorio adecuadamente

cualificado, en unas condiciones de laboratorio

apropiadas.


Todos los reactivos están listos para usar. Estable hasta la fecha

de caducidad si se almacena a una temperatura de +15 C a

+25C.

ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DEL REACTIVO DE

TRABAJO

Mezcle un envase de Blanco de reactivo R1a con un envase de

Reactivo de molibdato R1b (300 ml de reactivo de trabajo).

Cuando se trata de volúmenes menores, prepare el reactivo de trabajo conforme a lo que indica la tabla siguiente:

Blanco de reactivo (R1a) Reactivo de molibdato (R1B)

7,0 ml 3,0 ml

14,0 ml 6,0 ml

28,0 ml 12,0 ml

Estable durante 8 semanas a una temperatura de +15 a +25C.


Blanco de reactivo

Reactivo de molibdato

Patrón

MATERIALES NECESARIOS QUE NO SE

SUMINISTRAN

Dispositivos de etiquetado capaces de entregar 10 l y 1 ml. Temporizador y baño de agua o bloque calefactor para mantener

la temperatura a +20-+25C o +37C.

Espectro fotómetro que pueda medir a 340 nm.

Multisueros analizados de nivel 2 de Randox (Nº de cat.

HN 1530) y nivel 3 (Nº de cat. HE 1532).

Suero de calibración de nivel 3 de Randox Nivel (Nº de cat.

CAL 2351).

GAAMSA

www.gaamsa.com

DE 4

MANUAL/ RX MONZA PH 1016

PROCEDIMIENTO

Realice una nueva calibración de ganancia [Gain Calibration] con

una cubeta que contenga ddH2O recién preparada. Seleccione el

programa PHOS en la pantalla Run Test [ejecución de prueba] y

realice un blanco de agua la ley como se indica.

Pipetee en la cubeta:

Blanco de reactivo Patrón Muestra

S0 S1

Agua destilada 5 l --- ---

Muestra --- --- 5 l

Patrón --- 5 l ---

Reactivo de trabajo 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml

Mezcle, cubre durante 10 minutos a +20 - +25C antes de realizar la lectura, tal y como se indica en la pantalla.


Se recomienda utilizar el patrón de calibrado CAL se proporciona en

el kit o bien el Suero de calibración de nivel 3 de Randox para

muestras de suero.

Se recomienda utilizar el patrón de calibración CAL proporciona

en el kit para muestras de orina. Calibre cuando cambie de lote

de reactivo o bien cuando indiquen los procedimientos de

control de calidad.

PARA USO MANUAL


Cubeta: Recorrido luminoso de 1 cm

Temperatura: +20- +25C/+37C

Medición: frente a blanco de reactivo

Pipetee en la cubeta:

Blanco Patrón Muestra

Agua destilada 10 l --- ---

Muestra --- --- 10 l

Patrón --- 10 l ---

Reactivo de trabajo 1 ml 1 ml 1 ml

Mezcle, incube durante 10 minutos a +20- +25C o a 5 min a

37C. Mida la absorbancia de la muestra (muestra A) y del patrón

(patrón A) frente al blanco de reactivo.

NOTA

Las muestras ictéricas y ligeramente lipémicas exigen realizar un

blanco de muestra. Utilizando el mismo esquema de pipeteo,

mezcle en 10 l de muestra con 1000 l de blanco de reactivo.

En el Rx Monza, la Concentración de la muestra (mmol/l) =

Muestra (mmol/l) – Blanco de muestra (mmol/l). En el caso de los usuarios que realizan el método manual, a continuación la

absorbancia del blanco de muestra (blanco de muestra A) se resta de la

absorbancia de la muestra (muestra A).

ESTANDARIZACIÓN

El Suero de calibración de nivel 3 de Randox es trazable

conforme a lo que indican los materiales de referencia para

fósforo inorgánico NIST 186lg.

CONTROL DE CALIDAD Se recomienda utilizar los Multisueros analizados de Randox de nivel 2 y 3 para el control de calidad diario. Deben analizarse dos niveles de controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deben situarse dentro de un rango determinado. Si estos valores están fuera del rango y la repetición excluye un posible error, deben realizarse los pasos siguientes: 1. Comprobar los ajustes del instrumento y la fuente de luz. 2. Comprobar que todo el equipo utilizado esté limpio. 3. Comprobar el agua; los contaminantes, como un crecimiento

bacteriano, pueden contribuir a la obtención de resultados imprecisos.

4. Comprobar la temperatura de la reacción. 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y su contenido. 6. Contactar con el servicio técnico de atención al cliente de

Randox Laboratories llamando al teléfono +44 (0) 28 9442 2413 (Irlanda del Norte).

INTERFERENCIA

Los analitos indicados más abajo se sometieron a prueba hasta

alcanzar los niveles siguientes y se determinó que no interferían:

Bilirrubina 500 mol/l

Intralipid® 0,4% Triglicéridos 4,05 mmol/l

Hemoglobina 7 g/l

VALORES NORMALES (2, 3)

Suero: 0,87 - 1,45 mmol/l (2,7 - 4,5 mg/dl)

Orina de 24 horas: 12,9 - 42,0 mmol/d

(0,4 - 1,3 g/d) Dieta libre


intervalo de referencia para reflejar la edad, sexo, dieta y

ubicación geográfica de la población.

CARACTERÍSTICAS DE EFICACIA ESPECÍFICAS

Los siguientes datos de rendimiento se han obtenido utilizando

un analizador Rx Monza, calibrado con el Suero de suero de

calibración de nivel 3 de Randox, a +37oC.

SUERO

SENSIBILIDAD

Se ha determinado que el nivel mínimo detectable era de 0,307

mmol/l (0,953 mg/dl).

LINEALIDAD

El método es lineal hasta 7,77 mmol/l (24,1 mg/dl). Las muestras

que presenten una concentración más elevada se deben diluir

1 + 4 con una solución 0,9% (p/v) NaCl y someterse a nuevo

ensayo, multiplicando el resultado por 5.

PRECISIÓN

Intraensayo Nivel 2 Nivel 3 Promedio (mg/dl) 4,60 6,77 DT 0,040 0,141 CV(%) 0,88 2,08 n 20 20

Interensayos Nivel 2 Nivel 3 Promedio (mg/dl) 4,60 6,77 DT 0,199 0,197 CV(%) 4,32 2,91

n 20 20

GAAMSA

www.gaamsa.com

DE 4


COMPARACIÓN CON OTROS MÉTODOS

El método de Randox (Y) se sometió comparación con otro kit

de prueba comercial (X). Se sometieron a prueba muestras de

71 pacientes, que presentaban un rango de 1,57 a 15,1 mg/dl. El

análisis de regresión lineal de los datos ha producido la siguiente

ecuación:

Y = 0,91 X - 0,6897

con un coeficiente de correlación r = 0,9990

ORINA

SENSIBILIDAD

Se ha determinado que el nivel mínimo detectable era de 1,12

mmol/l (3,48 mg/dl).

LINEALIDAD

El método es lineal hasta 57,7 mmol/l (179 mg/dl). Las muestras

que presenten una concentración más elevada se deben diluir

1 + 4 con una solución 0,9% (p/v) NaCl y someterse a nuevo

ensayo, multiplicando el resultado por 5.

PRECISIÓN Intraensayo Nivel 2 Nivel 3 Promedio (mg/dl) 29,5 89,2 DT 1,06 4,16 CV(%) 3,60 4,66 n 20 20 Interensayos Nivel 2 Nivel 3 Promedio (mg/dl) 29,5 89,2 DT 1,08 3,86 CV(%) 3,68 4,33

n 20 20

REFERENCIAS

1. Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and Techniques,

2nd Edition, Harper and Row, p. 525, 1974.

2. Tietz, N., Clinical Guide to Laboratory Tests, W.B.

Saunders Company, Philadelphia 1983; 5: 384.

3. Tietz, N.W. Clinical Guide to laboratory tests. 2nd edition.

Philadelphia, Pa: WB Saunders Co.; 1990: 444-446.

Revisado: 02 May 12 bm

Rev. 002

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 4


PÁGINA DEJADA EN BLANCO INTENCIONADAMENTE

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

POTASIO (K) MANUAL

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de Potasio en el suero y

plasma. Este producto es adecuado para uso Manual.

Cat. No.

PT 1600 R1. Reactivo Precipitante 1 x 100 ml

100 ml R2a. Na-Tetrafenilboron 1 x 50 ml

R2b. NaOH 1 x 50 ml

CAL Patrón 1 x 5.5 ml

PRINCIPIO

El tetrafenilboron sódico reacciona con los iones de potasio en

un medio alcalino libre de proteínas para producir una

suspensión túrbida de tetrafenilboron potásico. La cantidad de

turbidez producida es proporcional a la concentración de potasio.

MUESTRA

Suero o plasma litio-heparin.

Las elevaciones en los niveles de potasio en suero / plasma puede

ocurrir debido a los posibles efectos de la manipulación de la

muestra. Por esta razón las muestras de sangre debe mantenerse

a temperatura ambiente y el retraso en la centrifugación debe ser

evitado. Recentrifugación no es recomendable.


Componentes Concentración Inicial de las Soluciones

R1. Reactivo Precipitante

Acido Tricloro Acético 0,3 mol/l

R2a. Tetrafenilboron Sódico 0,2 mol/l

R2b. Hidróxido Sódico 2,0 mol/l

CAL Patrón Vedi inserto lotto-specifico






desean.




laboratorio.


Utilizar todas las soluciones sin diluir. Estable hasta la fecha de

caducidad cuando se conserva entre +15 y +25C.


DE TRABAJO (R2)

Mezclar partes iguales de las soluciones R2a y R2b para formar

reactivo suficiente para el número de muestras a analizar. Estable

durante 30 días entre +15 y +25C y 60 días entre +2 y+8C.


Reactivo Precipitante

Na-Tetrafenilboron

NaOH

Patrón




NOTAS PROCEDIMIENTO

Se recomienda utilizar material de plástico desechable durante el

análisis, ya que el material de cristal contaminado puede dar lugar

a grandes errores. Evitar la contaminación con detergentes.

PROCEDIMIENTO

1. Precipitación

Pipetear en tubos de centrifugación:

Macro Micro

Muestra 100 l 50 l

Reactivo Precipitante (R1) 1000 l 500 l

Mezclar y centrifugar durante 8 minutos a 12000 rpm.

2. Análisis de Potasio



Medición: frente al reactivo blanco

Temperatura: +20 - +25C


Macro Micro

Patrón Muestra Patrón Muestra

Reactivo de Trabajo (R2) 2000 l 2000 l 1000 l 1000 l Patrón (CAL) 200 l -- 100 l -- Sobrenadante -- 200 l -- 100 l

El patrón y el sobrenadante claro se deberán añadir en el medio

de la superficie del reactivo de trabajo para producir una

turbidez homogénea. Mezclar cuidadosamente y dejar reposar

durante al menos 5 minutos. Medir la absorbancia del patrón y la muestra frente al reactivo blanco (A).

CALCULO

Concentración de Potasio

Amuestra

mmol/l = x Patrón conc.

Apatrón

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

MANUAL PT 1600

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y Nivel

3 para el control de calidad diario. Se deberá de analizar dos niveles

distintos de controles cada día. Los valores obtenidos deberán












INTERFERENCIA

La hemólisis interfiere con el análisis debido al alto contenido de

potasio en las células sanguíneas rojas, por lo tanto las muestras se deberán separar del coágulo lo antes posible.

VALORES NORMALES(4)

3,5 – 5,1 mmol/l (13,7 – 19,9 mg/dl)




LINEALIDAD

El método es lineal hasta una concentración de Potasio de 10

mmol/l. Para muestras con concentraciones superiores diluir 1+2

con NaCl al 0,9% y multiplicar el resultado por 3.

REFERENCIAS

1. Hillmann, G., Beyer, G., J. Clin. Chem. and Clin. Biochem.,

1967; 5: 93.

2. Henry, R. J., Clin. Chem., Harper and Row, New York, Sec.

Edit., 1974; 646.

3. Teitz, N. W., Fundamentals of Clinical Chemistry, Saunders,

Philadelphia, Sec. Edit., 1976; 876.

4. Teitz, N.W., Textbook of Clinical Chemistry. W.B. Saunders

Company, Philadelphia, 1986; 1842.

Revisado 25 Jan 10 ck

Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

RANSEL Glutation Peroxidasa SOLO PARA INVESTIGACION MANUAL RX MONZA PARA SU USO Para la determinación cuantitativa in vitro de Glutation Peroxidasa en sangre entera. Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador Rx Monza. Cat. No. RS 504 R1a. Reactivo 8 x 6,5 ml 8 x 6,5 ml R1b. Tampón 1 x 70 ml 8 x 6 t Semi micro R2. Hidroperóxido 1 x 1 ml 8 x 2 t Macro de cumeno R3. Diluyente 2 x 200 ml RS 505 R1a. Reactivo 8 x 10 ml 8 x 10 ml R1b. Tampón 1 x 100 ml 8 x 10 t Semi micro R2. Hidroperóxido 1 x 1 ml 8 x 4 t Macro de cumeno R3. Diluyente 2 x 200 ml Complementario del lote: HG 1539 Hemoglobina Reactivo 5 x 100 ml METODO UV(1) Este método está basado en el trabajo de Plagia and Valentine. La Glutation Peroxidasa (GPX) cataliza la oxidación del Glutation (GSH) por el hidroperóxido de cumeno. El Glutation oxidado (GSSG) en presencia de Glutation Reductasa (GR) Y NADPH es inmediatamente convertido en su forma reducida con una oxidación concomitante de NADPH en NADP+. Se mide la disminución de la absorbancia a 340 nm. PRINCIPIO DE LA REACCION GPX 2GSH + ROOH ROH + GSSG + H2O GR GSSG + NADPH + H+ NADP+ + 2GSH MUESTRA Utilizar sangre entera heparinizada. Si la muestra proviene de oveja o cabra, diluir 0,05 ml con 3 ml de diluyente. Para ganado vacuno, caballos y otras especies diluir 0,05 ml de muestra con 2 ml de diluyente. Para muestras humanas ver NOTA. COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Componentes Concentraciones en la prueba R1a. Reactivo Glutation 4 mmol/l Glutation Reductasa ≥ 0,5 U/l NADPH 0,34 mmol/l R1b. Tampón Tampón fosfato 0,05 mol/l, pH 7,2 EDTA 4,3 mmol/l R2. Hidroperóxido de cumeno 0,18 mmol/l R3. Diluyente

COMPOSICIÓN DE LOS REACTIVOS ADICIONALES Componentes Concentraciόn inicial de las Soluciones Fosfato Potásico 10,3 mmol/l Ferricianida Potásica 6.08 mmol/l Cianida Potásica 7,68 mmol/l Surfactante 0.1% v/v

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar las precauciones normales necesarias que se requieren al manejar reactivos de laboratorio. La solución R1b contiene azida sódica. Evitar su ingestión o contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar inmediatamente el área afectada con agua abundante. En caso de ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un médico. La azida sódica reacciona con el cobre y el plomo de las tuberías, lo que podría producir azidas explosivas. Cuando se deseche este reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la formación de estas azidas. Las superficies metálicas que hayan sido puestas en contacto con la azida sódica deben ser lavadas con hidróxido sódico al 10%. La solución R2 es nociva, si se traga o inhala, causa irritación y es combustible. La solución R2 es Hidroperóxido de cumeno que es cáustico. La solución de Drabkin contiene cianuro por lo que puede ser fatal si se ingiere. Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se desean. Los reactivos deben ser utilizados solo para los propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de laboratorio

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA RS 504

PAGE 2 OF 2

ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS R1a. Reactivo

Reconstituir un vial de Reactivo R1a con el volumen apropiado de Tampón R1b:

6,5 ml para el kit de 8 x 6,5 ml (RS 504) 10 ml para el kit de 8 x 10 ml (RS 505)

Estable durante 48 horas entre +4 y +8°C u 8 horas entre +15 y +25°C.

R1b. Tampón

Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8°C.

R2. Hidroperóxido de cumeno

Diluir 10 l R2 con 10 ml de agua bidestilada y mezclar bien, agitando vigorosamente, ya que el cumeno es difícil de disolver. Debe utilizarse solución fresca preparada en el día. Concentrado es estable hasta la fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8°C. Para medir el volumen de hidroperóxido de cumeno se deberá utilizar una pipeta con acción de desplazamiento positiva, y capilares de cristal.

R3. Diluyente

Reconstituir el contenido de un vial de Diluyente R3 con 200 ml de agua bidestilada. Estable durante

4 semanas cuando se conserva entre +2 y +8°C ó 3 días entre +15 y +25°C.

MATERIALES SUMINISTRADOS Reactivo Tampón Hidroperóxido de cumeno Reactivo para diluir MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS Control de Ransel (Cat. No. SC 692) Agua bidestilada Reactivo Hemoglobina (Cat. No. HG 1539) Diluyente Ransel (RS 2318) NOTAS(2,3) Cuando se utiliza sangre entera heparinizada humana, se recomienda el uso de reactivo de Hemoglobina para la dilución. Esto es debido a que la presencia de peroxidasas en sangre humana puede conducir a falsos resultados (más elevados). La adición de cianuro, sirve para inhibir esta interferencia positiva. De todas formas, antes de añadir el reactivo de Hemoglobina, es necesaria la dilución de la sangre con la solución de diluyente 4, para convertir la glutation en su forma reducida. La forma oxidada sería rápidamente inhibida por el cianuro. Se recomienda el siguiente método utilizando reactivo de Hemoglobina. Preparación: Diluir el contenido de un vial de reactivo de Drabkin con 480 ml de agua bidestilada. Conservar protegido de la luz. Estable durante 6 meses o hasta la fecha de caducidad, según sea más corto, cuando se conserva entre +15 y +25°C. Diluir 0,05 ml de sangre entera heparinizada en 1 ml de solución de diluyente (R3); incubar durante 5 min. y añadir 1 ml de reactivo de Hemoglobina. Mezclar bien y ensayar en la forma normal. Se recomienda que las muestras sean analizadas en los 20 min después de la adición del reactivo de Hemoglobina.

PROCEDIMIENTO Seleccione GPx en la pantalla de Ejecución de Prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones. Pipetear en tubos de ensayo: Muestra 10 µl Reactivo R1 500 µl Cumeno R2 40 µl Mézclelo y aspírelo en Rx Monza. CALIBRACIÓN DE RX MONZA Se recomienda diariamente o como se indica en los procedimientos de control de calidad, usando Control Randox Ransel PARA USO MANUAL Longitud de onda: 340 nm Cubeta: 1 cm de espesor Temperatura: 37°C Medición: frente al aire Pipette into cuvette: Macro Semi-Micro Muestra Blanco de Muestra Blanco de diluida Reactivo diluida Reactivo Muestra diluida 0.05 ml --- 0.02 ml --- H2O destilada --- 0.05 ml --- 0.02 ml Reactivo R1 2.50 ml 2.50 ml 1.00 ml 1.00 ml Cumeno R2 0.10 ml 0.10 ml 0.04 ml 0.04 ml Mezclar la muestra, R1 y R2. Leer la absorbancia inicial de la muestra y blanco de reactivo después de un minuto y al mismo tiempo iniciar el temporizador. Leer otra vez pasados 1 y 2 minutos. Restar el valor del blanco de reactivo al de la muestra. MANUAL CALCULOS La concentración de Glutation Peroxidasa puede calcularse a partir de la siguiente fórmula: U/l de hemolisado = 8412 x A 340 nm/minuto (Ver instrucciones técnicas) CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan un control de Ransel para el control de calidad diario. Este control debería procesarse como mínimo una vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar la programación del instrumento y la lámpara 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento bacteriano

puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 4. Comprobar la temperatura de reacción 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los


GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA RS 504

PAGE 3 OF 3

VALORES NORMALES 27,5 - 73,6 U/g Hb 4171 - 10881 U/l Este rango se tomó de una población trabajadora Europea. Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango normal. CARACTERÍSITCAS ESPECÍFICAS DE FUNCIONAMIENTO DE LA TÉCNICA Los siguientes datos se obtuvieron usando un analizador RX Monza en el modo de flujo de células a 37°C con un volumen de aspiración de 450 µl. LINEALIDAD El método es lineal hasta una concentración de 925 U/l. Diluir las muestras con una concentration mayor con el agente diluyendo y multiplicar el resultado por el factor de dilución SENSIBILIDAD La concentración mínima detectable de la peroxidasa de glutación con un nivel aceptable de precisión ha sido determinado como 75 U/l PRECISION Precisión Dentro del Análisis Nivel 1 Nivel 2 Media (U/l) 240 456 DE 11.7 14.6 CV(%) 4.86 3.20 n 20 20 Precisión Total Nivel 1 Nivel 2 Media (U/l) 240 456 DE 17.5 19.9 CV(%) 7.30 4.37 n 20 20 CORRELACION Este método Randox (Y) se comparó con otro método disponible en el mercado (X). Se analizaron 40 muestras de pacientes con valores de entre 102 y 650 U/l. Se obtuvo la siguiente ecuación de regresión lineal: Y= 1.0155 X +8.637 con un coeficiente de correlación r = 0,9829 REFERENCIAS 1. Paglia, D.E. and Valentine, W.N., J. Lab. Clin. Med., 1967; 70:

158. 2. Kraus, R.J. & Ganther, H. E. Biochem. & Biophys. Res. Comm

1980; 96: 1116. 3. Prohaska, J.R., Oh, S.H., Hoekstra, W.G. & Ganther, H.E.

Biochem. & Biophys. Res. Comm. 1977; 74: 64.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

RANSOD Superoxido Dismutasa

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de Superoxido Dismutasa

en sangre entera. Este producto es adecuado para un uso manual

o en el analizador Rx Monza.

No. Cat.

SD 125 R1a. Sustrato Mixto 5 x 20 ml

5 x 20 ml R1b. Tampón 1 x 105 ml

R2. Xantin Oxidasa 3 x 10 ml

CAL Patrón 5 x 10 ml

PRINCIPIO

La función de la superóxido dismutasa (SOD) es acelerar la

dismutación de un radical tóxico, el radical superóxido (O2•.),

producido durante un proceso oxidativo enérgico, en peróxido de hidrógeno y oxígeno molecular.

Este método emplea Xantina y Xantin oxidasa (XOD) para

formar radicales superóxido, los cuales reaccionan con cloruro

de 2-(4-yodofenil)-3-(4-nitrofenol)-5-fenil tetrazolio (I.N.T) para

formar un colorante formazán rojo. Se mide la actividad de la

superóxido dismutasa por el grado de inhibición de esta

reacción. Una unidad de SOD es la que causa un 50% de

inhibición del valor de reducción de INT bajo las condiciones del

análisis.

XOD

Xantina Acido úrico + O2-.

O2•.

I.N.T colorante formazán

O

SOD

O2•. + O2• + 2H+ O2 + H2O2


Utilizar muestras de sangre entera heparinizada o con EDTA. Se

recomienda lavar los eritrocitos 4 veces con una solución de

NaCl al 0,9%.

Centrifugar 0,5 ml de sangre entera durante 10 min a 3000 rpm.

Después aspirar el plasma.

Después lavar los eritrocitos 4 veces con 3 ml de solución de

NaCl al 0,9 %, centrifugando durante 10 min a 3000 rpm después

de cada lavado.

El centrifugado lavado de eritrocitos deberá completarse con

2,0 ml de agua bidestilada fría. Mezclar y dejar reposar durante

15 min a 4C. El lisado se diluye con 0,01 mol/l de Tampón Fosfato pH 7,0, de forma que el porcentaje de inhibición caiga

entre el 30 y el 60%.

Para muestras humanas se recomienda 25 partes de dilución de

lisado (Factor de dilución final = 100) y para muestras de bovinos

50 partes (Factor de dilución final = 200).


Componentes Concentraciones iniciales de las Soluciones

R1a. Sustrato mixto

Xantina 0,05 mmol/l

I.N.T. 0,025 mmol/l

R1b. Tampón

CAPS 40 mmol/l, pH 10,2

EDTA 0,94 mmol/l

R2. Xantín Oxidasa 80 U/l

CAL Patrón Vedi inserto lotto specifico






desean.




laboratorio


R1a. Sustrato Mixto

Reconstituir un vial de Sustrato Mixto R1a con

20 ml de Tampón R1b. Es estable durante 10 días


R1b. Tampón



R2. Xantín Oxidasa

Reconstituir el contenido de un vial de Xantín Oxidasa

R2 con 10 ml de agua bidestilada. Estable durante 2

semanas cuando se conserva entre +2 y +8°C.

CAL Patrones

Reconstituir el contenido de un vial de Patrón (CAL)

con 10 ml de agua bidestilada. Posteriormente las

diluciones de este patrón deben ser preparadas con

muestra diluyente Ransod. Se recomienda hacer las

siguientes diluciones del patrón CAL (o S6) para

construir la curva patrón:

R1 = Sustrato Mixto

R2 = Xantin Oxidasa

Es recomendable que todos los reactivos y muestras

estén equilibrados a temperatura ambiente antes de su

uso.

MATERIALES SUMINISTRADOS Sustrato mixto Tampón Xantín Oxidasa Patrones MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS Diluyente Ransod (No. Cat. SD 124) (0,01 mol/l Tampón Fosfato, pH 7,0). Control de RANSOD No. Cat. SD 126.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL SD 125

PROCEDIMIENTO

Seleccionar SOD en la pantalla Run Test (Realizar análisis), y

llevar a cabo un blanco de agua de la forma indicada.


Patrón Patrón Pruebas Control

S1 S2 TO S6

Diluente Prueba Ransod 15 µl - - -

Patrón - 15 µl - -

Diluir la prueba - - 15 µl -

Diluir el control - - - 15 µl

Sustrato Mixto (R1) 500 µl 500 µl 500 µl 500 µl

Mezclar bien y añadir

Xantin Oxidasa (R2) 75 µl 75 µl 75 µl 75 µl

Mezclar bien, introducir la cubeta en el soporto de la celda de la

Rx Monza y pulsar Read (leer).

CALIBRACIÓN

Calibrar esta prueba usando el patrón proporcionado con el Kit.

Se recomienda que las siguientes diluciones estén realizadas con

el patrón Cal (ó S6) para producir una curva estándar:-

Patrón Volumen de

solución patrón Diluente Prueba

S6 Patrón no diluido -

S5 5 ml of S6 5 ml

S4 5 ml of S5 5 ml

S3 5 ml of S4 5 ml

S2 3 ml of S3 6 ml

S1= Diluente Prueba (0,01 mol fosfato tampón pH 7,0)

Todos los patrones diluidos se mantienen estables durante dos

semanas entre +2 y +8°C.

Se requiere una nueva calibración para cada análisis.

PARA USO MANUAL



Temperatura: 37°C



Muestra Patrones Muestra

Diluyente S2 - S6 diluida

Muestra diluida --- --- 0,05 ml

Patrón --- 0,05 ml ---

Diluyente de Muestra

Ransod 0,05 ml --- ---

Sustrato Mixto (R1) 1,7 ml 1,7 ml 1,7 ml

Mezclar bien

Xantina Oxidasa (R2) 0,25 ml 0,25 ml 0,25 ml

Mezclar y leer la absorbancia inicial A1 al cabo de

30 segundos y empezar a cronometrar el tiempo

simultaneamente. Leer la absorbancia final A2 al cabo de

3 minutos.

CALCULOS

A2 - A1

= A/min de patrón o de muestra

3

Indice de muestra diluyente (Indice S1) =Indice de reacción sin

inhibir = 100%

Todos los indices tanto de los patrones como de las muestras

diluidas deben ser convertidos en porcentajes del indice del

diluyente de muestra y sustraidos del 100% para obtener un

porcentaje de inhibición:

(Apatrón/min x 100)

100 - = % inhibición

(AS1/min)

(Amuestra/min x 100)

100 - = % inhibición

(AS1/min)

Representar el porcentaje de inhibición para cada patrón frente a

Log10 (concentración de patrón en unidades SOD/ml).

Utilizar el porcentaje de inhibición de la muestra para obtener las

unidades de SOD de la curva patrón.

Unidades de SOD/ml de sangre entera =

Unidades de SOD en la curva patrón/ml x factor de dilución

Conversión a unidades de SOD/g de Hemoglobina

Unid.SOD/ml

= Unidades de SOD/g de Hemoglobina

g Hemoglobina/ml

ILUSTRACION

(a) Una muestra de bovino diluida 1 en 300 veces con diluyente

de muestra Ransod produjo una inhibición del 33%.

Desde la curva patrón:

No de unidades SOD en la muestra = 0,575

(b) Conversión en unidades de SOD/ml de sangre entera

0,575 x 300 = 172,5 unidades de SOD/ml

(c) Conversión en unidades de SOD/g hemoglobina

Valor de muestra de hemoglobina = 0,118 g/ml

172,5

(Unid. SOD/ml)/(g hemoglobina/ml) = = 1461,9

0,118

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL SD 125

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan un control Ransod, para el control de calidad

diario. Analizar el control al menos una vez al día. Los valores

obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los

valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error,

se deberán seguir los siguientes pasos:





4. Comprobar la temperatura de reacción.




VALORES NORMALES

1102 - 1601 U/g Hb

164 - 240 U/ml


de referencia que refleje la edad, sexo, dieta y localidad geográfica de la población.




analizador Rx Monza en funcionamiento a 37ºC.

LINEALIDAD

Las muestras deben ser diluidas para conseguir una inhibición

entre el 30% y el 60% del porcentaje del diluyente de la muestra

(por ej. la reacción no inhibida).

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de SOD inferior a la

estándar debe ser relatada como <S1 valor estándar.

PRECISION


Nivel 1 Nivel 2

Media 101.0 131.5

DE 4.88 4.30

CV(%) 4.64 3.58

n 20 20

Precisión Entre Análisis

Nivel 1 Nivel 2

Media 101.0 131.5

DE 6.27 8.50

CV(%) 5.96 7.07

n 20 20

CORRELACIÓN



lineal:

Y = 0.9417 X + 0.1004


Se analizaron 41 muestras de pacientes con valores de entre 23-

318U/ml.

REFERENCIAS

1. Woolliams JA, Wiener G, Anderson PH, McMurray

CH Research in Veterinary Science 1983, 34: 253-256.

2. Suttle NF, The Veterinary Record 1986, 119: 519-522.

3. Suttle NF, McMurray CH Research in Veterinary Science

1983; 35: 47-52.

4. Arthur JR, Boyne R Life Sciences 1985 36: 1569-1575.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

HIERRO SERICO (Fe) Método colorimétrico MANUAL RX MONZA PARA SU USO La determinación cuantitativa in vitro de hierro en suero. Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador Rx Monza. No. Cat. SI 257 R1. Cromógeno 1 x 10 ml 2 x 100 ml R2. Reductor 1 x 15 ml R3. Tampón 2 x 100 ml CAL Patrón 1 x 10 ml SIGNIFICADO CLINICO Medidas de hierro (no hemo) se utilizan en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades como la anemia por deficiencia de hierro, hemocromatosis (una enfermedad asociada con el depósito generalizado en los tejidos de dos pigmentos que contienen hierro, de hemosiderina y de hemofuscin, y se caracteriza por la pigmentación de la piel), y la enfermedad renal crónica. PRINCIPIO(1,2,3) El ion férrico se disocia de su proteína transportadora, transferrina, en medio ácido y se reduce simultá-neamente a su forma ferrosa. Este ion ferroso forma un complejo con el cromógeno, el cual es un indicador sensible al hierro, para formar un cromóforo azul con un máximo de absorción a 595 nm. MUESTRA Suero. No utilizar plasma en este ensayo. COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Componentes Concentración inicial de las soluciones R1. Cromógeno Ferene 22.2 mmol/l R2. Reductor Acido ascórbico 1.3 mol/l R3. Tampón Tampón acetato 0.087 mol/l, pH 4.65 Dimetil sulfóxido Surfactante CAL Patrón Vedi inserto lotto-specifico PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren al manejar reactivos de laboratorio. El Tampón R3 contiene Azida Sódica. Evitar su ingestión o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua. En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar atención médica inmediatamente. La Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes de agua para evitar la formación de ácidos. Las superficies metálicas expuestas, deberán limpiarse con hidróxido de sodio al 10%. El Tampón contiene también dimetil sulfóxido que es nocivo. Evitar el contacto con la piel y los ojos. Hojas Sanitarias y de Seguridad están disponibles si se desean.

Los reactivos deben ser utilizados sólo para los propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de laboratorio. ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS R2. Reductor Disolver el contenido de un vial de Reductor R2 con 15 ml de agua desionizada libre de hierro. Estable durante 4

semanas entre +4 y +8oC. El resto de los componentes están listos para usar. Estables

hasta la fecha de caducidad cuando se conservan entre +15 y +25oC.

MATERIALES SUMINISTRADOS Cromógeno Reductor Tampón Patrón MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS Multisueros Valorados Humanos Randox Nivel 2 (No. Cat. HN 1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532). Sueros de Calibración Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351) NOTAS SOBRE EL PROCEDIMIENTO Es esencial que todos los aparatos utilizados en la recogida de las muestras y en la prueba estén libres de contaminación con trazas de hierro. Para que los recipientes de cristal queden libres de hierro deben lavarse con ácido clorhídrico diluido (aproximadamente 0,1 N) y enjuagarse abundantemente con agua desionizada libre de hierro. No usar plasma en este análisis. PROCEDIMIENTO Usando fresco ddH2O realizar una nueva calibración de ganancia en el modo de cubeta. Seleccione Fe en la pantalla de Ejecución de prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones. Pipetear en la Cubeta: Reactivo Blanco / S0 Patrón S1 Muestra Puffer 500 l 500 l 500 l Reductor 25 l 25 l 25 l Agua libre de hierro 125 l - - Patrón - 125 l - Muestra - - 125 l Mezclar, insertar la cubeta en el soporte de flujo de célula del RX Monza cuando se le pida para muestra en blanco y oprima Leer.

Cromógeno 25 l 25 l 25 l Mezclar, incubar durante 15 minutos a 20-25 º C. Inserte la cubeta en el soporte de flujo de célula RX Monza cuando se le solicite para la muestra y presione leer. CALIBRACIÓN PARA RX MONZA Recomendado en un cambio de lote del reactivo o como se indica en los procedimientos de control de calidad, utilizando el CAL estándar proporcionado en el kit o Suero de calibración Randox Nivel 3.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

MANUAL SI 257

PARA USO MANUAL Longitud de onda: 595 nm (590 nm - 610 nm) Cubeta: 1 cm de espesor Temperatura: 20-25oC Medición: frente a reactivo blanco

PROCEDIMIENTO MACRO Pipetear en la cubeta:

Reactivo Muestra Patrón Blanco Tampón 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml Reductor 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml Agua libre de hierro 0,5 ml - - Patrón - - 0,5 ml Muestra - 0,5 ml - Mezclar, leer la absorbancia inicial de la muestra y del patrón frente a reactivo blanco. Cromógeno 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml Mezclar, incubar durante 5 min entre 20-25oC. Leer la absorbancia final frente a reactivo blanco. Restar la absorbancia inicial de la absorbancia final para obtener el ∆A del patrón y de la muestra. PROCEDIMIENTO SEMI-MICRO Pipetear en la cubeta: Reactivo Muestra Patrón Blanco Tampón 1,00 ml 1,00 ml 1,00 ml Reductor 0,05 ml 0,05 ml 0,05 ml Agua libre de hierro 0,25 ml - - Patrón - - 0,25 ml Muestra - 0,25 ml - Mezclar, leer la absorbancia inicial de la muestra y del patrón frente a reactivo blanco. Cromógeno 0,05 ml 0,05 ml 0,05 ml Mezclar, incubar durante 15 min entre 20-25oC. Lea la absorbancia final contra el blanco de reactivo. A = Absorbancia Final - Absorbancia Inicial CALCULOS Amuestra Concentración = x Conc. de patrón A patrón

NORMALIZACIÓN Suero de Calibración Randox Nivel 3 es trazable al material de de referencia NIST 937 Suero Hierro. CONTROL DE CALIDAD Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2 y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar programación del instrumento y la lámpara 2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento

bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los resultados. 4. Comprobar la temperatura de reacción 5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus componentes. 6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de



Adulto Hombre: 10.6 - 28.3 mol/l (59 - 158 g/dl)

Mujer: 6.6 - 26 mol/l (37 - 145 g/dl)


de referencia para considerar las differencias en edad, sexo,

dieta y localización geográfica.




analizador Rx Monza en funcionamiento a 25oC.

LINEALIDAD

El método es lineal hasta una concentración de 152 µmol/l

(854 µg/dl). Las muestras con concentraciones superiores se

deberán diluir 1+2 con agua desionizada, y repetir la prueba.


SENSITIVITY

The minimum detectable concentration of Serum Iron with an

acceptable level of precision was determined as 0.964 µmol/l

(5.39 g/dl).

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 2 Nivel 3

Media (g/dl) 104 196

DE 1.77 3.96

CV(%) 1.70 2.02

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3

Media (g/dl) 104 196

DE 3.49 6.26

CV(%) 3.35 3.20

n 20 20

CORRELACIÓN



lineal:

Y = 0.902 X + 1.92



10.23 y 599.01 g/dl.

REFERENCIAS

1. Ceriotti, F., and Ceriotti, G., Improved Direct Specific

Determination of Serum Iron. Clin. Chem. 26/2, 327-331

(1980).

2. Henry, R.J.: Clinical Chemistry Principles and Techniques,

New York, Harper and Row (1968) pg. 386.

3. Young, D.S., Hicks, J.M., Method for automatic

determination of serum iron, J. Clin. Pathol. 18: 98 - 102 (1965).

4. Weippl, G. et al. (1973). Blut 27:261.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

SIFILIS RPR (SYP-RPR)TEST RAPIDO DE TARJETA DE REAGINA PLASMATICA

MANUAL

PARA SU USO Para el análisis cuantitativo in vitro de Sífilis en suero y plasma. Este producto es adecuado para uso Manual.

No. Cat. SY 1478 1. Suspensión de Antígeno100 pruebas de Carbono RPR 1 x 2 ml

2. Control Positivo 1 x 0.5 ml 3. Control Negativo 1 x 0.5 ml 4. Botella dispensadora de plástico 1 5. Aguja Dispensadora

calibrada para suministrar 16 µl 1 6. Tarjetas de Pruebas Desechables 10 7. Pipeta Desechable 100

SY 1479 1. Suspensión de Antígenode Carbono RPR 2 x 5 ml 500 pruebas

2. Control Positivo 1 x 1 ml 3. Control Negativo 1 x 1 ml 4. Botella dispensadora de plástico 1 5. Aguja Dispensadora

calibrada para suministrar 16 µl 1 6. Tarjetas de Pruebas Desechables 50 7. Pipeta Desechable 500

Se pueden solicitar otras variaciones de los formatos arriba indicados.

INTRODUCCIÓN La Sífilis es una enfermedad crónica, contagiosa y a menudo venérea congénita producida por el Treponema pallidum. Este organismo pertenece a un grupo de bacterias gram-negativas llamadas Espiroquetas, las cuales se definen por su estructura molecular única. La infección resulta del contacto con superficies húmedas, resultantes de lesiones del tejido epitelial de la piel o las membranas mucosas. Si no se trata, esta enfermedad puede resultar en cambios irreversibles del sistema nervioso y cardiovascular. La sífilis continua siendo una enfermedad de alta incidencia, a pesar de los avances en la terapia antibiótica moderna.

PRINCIPIO La prueba de Sífilis RPR es una prueba macroscópica de floculación no treponémica para la detección y titración de reaginas (anticuerpos en circulación producidos como resultado de la lesión del tejido causada por la enfermedad) en el suero o el plasma. El antígeno utilizado en el kit es una modificación del antígeno de VDRL. Consiste en una suspensión coloidal de cardiolipina equilibrada con licitina y colesterol, y mezclada con carbono microparticulado. La aglutinación ocurre en presencia de las reaginas, la cual es visiblemente intensificada por la presencia del carbono microparticulado.

MUESTRAS Se puede utilizar plasma, suero calentado o sin calentar. Las muestras hemolizadas o contaminadas no son adecuadas para el test. Las muestras de suero fresco se pueden conservar entre +2 y +8°C durante varios días antes del análisis o a -20°C si se conservan durante más tiempo.


1. Suspensión de cardiolipina, que contiene carbono microparticulado. Contiene timerosal.

2. Suero de Control Positivo (Dispensador Rojo)Control líquido estabilizado, reactivo con antígeno deRPR.

3. Suero de Control Negativo (Dispensador Blanco)Control líquido estabilizado, no reactivo con antígenode RPR.

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Ejecutar las precauciones normales requeridas para el manejo de reactivos de laboratorio.

Los controles contienen Azida Sódica. Evitar su ingestión o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante agua. En caso de contacto con los ojos o ingestión, buscar atención médica inmediatamente.

El Azida Sódica reacciona con el plomo y cobre de las cañerías, formando ácidos potencialmente explosivos. Cuando se eliminen dichos reactivos, limpiar con grandes volúmenes de agua para evitar la formación de ácidos. Las superficies metálicas expuestas, deberán limpiarse con hidróxido de sodio al 10%.

El material de origen humano del que se deriva este producto ha sido analizado a nivel de donante para el anticuerpo del Virus de Inmunodeficiencia Humano (HIV 1, HIV 2), el Antígeno de Superficie de Hepatitis B (HbsAg), y el anticuerpo del Virus de Hepatitis C (HCV) y se ha encontrado que es NO-REACTIVO. Los métodos utilizadon están aprobados por el FDA. Sin embargo, dado que ningún método puede ofrecer una seguridad total de la ausencia de agentes infecciosos, este material y todas las muestras de pacientes se deberán manejar como posibles transmisores de enfermedades infecciosas y eliminar apropiadamente.


Los reactivos deben ser utilizados sólo para los propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de laboratorio.

Suspensión de Antígeno de RPR

ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS Sacar la caja que contiene la suspensión de antígeno de R.P.R. y los controles séricos y refrigerarla a su llegada. El antígeno de RPR y el control sérico son estables hasta la fecha de caducidad cuando se conservan entre +2 y +8°C. No guardar las tarjetas de la prueba en el refrigerador, conservarlas a temperatura ambiente. No tocar los círculos de la prueba con los dedos ya que esto podría dejar restos aceitosos en el area de reacción aumentando la probabilidad de resultados del test inválidos.

GAAMSA

www.gaamsa.com

PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Todos los reactivos están listos para su uso después de alcanzar una temperatura ambiente (NOTA 1). Agitar la suspensión de antígeno para obtener una suspensión homogénea y transferir el contenido a la botella dispensadora de plástico suministrada. Para ello, quitar la tapa de la botella de plástico y colocar la aguja dispensadora en el tapón de cierre-luer. Con cuidado apretar la botella de plástico e insertar la punta de la aguja en la suspensión de antígeno. Dejar que la botella se expanda lentamente para que la suspensión de antígeno entre en la botella (NOTA 2).

PROCEDIMIENTO

A. PRUEBA CUALITATIVA 1. Utilizando una pipeta desechable, dispensar una gota

(≈ 50 µl) de suero o plasma en el círculo de la tarjetade la prueba.

2. Con la parte plana de una pipeta desechable, extenderla muestra por toda el área del círculo de la prueba.

3. Repetir los pasos 1 y 2 para cada muestra utilizandouna pipeta nueva.

4. Agitar el ensamblaje de la botella dispensadora, invertiry golpear suavemente la aguja para sacar las burbujas.

5. Poner la aguja en posición perpendicular a la tarjeta detest y dejar que caiga una gota de antígeno en cadamuestra de la prueba.

6. Rotar la tarjeta de test a 100 r.p.m. durante 8 minutosen un rotor mecánico. Tras la rotación mecánica esnecesario rotar e inclinar la tarjeta brevemente a mano(de un lado para otro), para ayudar a diferenciar entrelos resultados reactivos y los no reactivos.

7. Después leer inmediatamente los resultados en elmacroscopio con buena luz.

LECTURA E INTERPRETACIÓN Las lecturas se puntuan según el criterio siguiente:

PATRÓN OBSERVADO INTERPRETACIÓN Agregados grandes en el centro

o

periferia del area del testREACTIVO

Agregados más pequeños en los ejes del area del test

REACTIVO DEBIL

Sin agregados, apariencia gris suave

NO REACTIVO

B. PRUEBA CUANTITATIVA1. Utilizando una pipeta automática dispensar 50 µl de

salino fisiológico en los círculos del 1 al 5 de la tarjetade la prueba. No extender.

2. Utilizando una pipeta dispensar 50 µl de la muestra(suero o plasma) que se va a valorar en el salino delprimer círculo. (Ver Figura. 1)

3. Utilizando el mismo final de la pipeta mezclar el salino yla muestra moviendo la mezcla hacia arriba y abajo 5 o6 veces y transferir 50 µl al salino en el segundocírculo.

4. Realizar de la misma manera diluciones en serie hastael ultimo círculo. Quitar 50 µl del círculo final. (VerFigura 2)

5. Utilizando el extremo plano de una pipeta desechablelimpia para cada muestra, extender las muestrasdiluídas por toda el area de cada círculo de la pruebaempezando por la dilución más alta. (No. de Círculo 5).

6. Proceder como en la prueba cualitativa a partir delpaso 4 en adelante.

INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS El último paso de dilución que contiene agregados macroscópicos indica el titre de la muestra. Si la última dilución da un resultado positivo, entonces las series de dilución se deberán extender.

Cada grupo de resultados se deberá realizar con los controles positivos y negativos suministrados para validar de la prueba.

LIMITACIONES DE LA PRUEBAAl igual que todos los test no treponémicos, el test de sífilis RPR puede dar resultados positivos falsos. Tales reacciones han sido producidas por enfermedades tales como lepra, mononucleosis infecciosa y enfermedades autoinmunes. Por lo tanto, es importante que todas las muestras reactivas sean confirmadas por otro test serológico, preferiblemente un test específico del treponema tal como FTA-ABS o TPHA. El diagnóstico final se deberá basar en una correlación de los resultados del test con el historial clínico del paciente.

La prueba se puede utilizar también para observar la terapia.

MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS 1. Rotor mecánico con etapa horizontal, operando a

100 r.p.m.2. Pipeta automática calibrada para suministrar 50 µl. Es

necesaria para la prueba cuantitativa.

MANUAL - SIFILIS (RPR) - SY 1478

MATERIAL SUMINISTRADO Suspensión de Antígeno de Carbono RPR Control Positivo Control Negativo Botella Dispensadora de Plástico Aguja Dispensadora Calibrada para suministrar 16 l Tarjetas de Test Desechables Pipeta Desechable

NOTAS 1. La sensibilidad puede verse reducida a temperaturas

bajas. Los mejores resultados se obtienen entre23-29°C.

2. La estabilidad a largo plazo del producto se ve reducidacuando el antígeno se conserva en la botelladispensadora de plástico. Por lo tanto, se recomiendaque el antígeno restante se devuelva a la botella decristal original después del análisis del día. La botellade plástico y el ensamblaje de la aguja se deberánaclarar muy bien con agua destilada y secar al aireantes de usar.

3. No volver a utilizar las tarjetas de test. Las tarjetas sepueden secar al aire y archivar como documentos delos resultados permanentes.

PAG 2 DE 3

GAAMSA

www.gaamsa.com

REFERENCIAS 1. McGrew, B.E. et al., Amer. J. Clin. Path., 1968; 50: 52.2. Portnoy, J. et al., U.S. Publ. Health Report, 1962; 77:

645. 3. Stevens, R.W. & Stroebel, E., Amer. J. Clin. Path.,

1970; 53: 32.4. Manual of Tests for Syphilis PHS Publications, No. 411,

U.S. Govt. Printing Office.

Figura. 1

Diluciones

Revisado 31 Julio 06 neRev. 001

PAG 3 DE 3

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

PROTEINAS TOTALES (TP) Método Biuret MANUAL RX MONZA PARA SU USO Para la determinación cuantitativa in vitro de Proteinas Totales en suero y plasma. Este producto es adecuado para su utilización de forma manual y en el analizador RX monza. No. Cat. TP 245 R1. Reactivo Biuret 2 x 100 ml 2 x 500 ml R2. Reactivo blanco 1 x 100 ml CAL. Patrón 1 x 5.5 ml PRINCIPIO En medio alcalino, los iones cúpricos, interaccionan con los enlaces peptídicos de las proteinas formando un complejo coloreado. MUESTRA Suero, plasma heparinizado, EDTA plasma. COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Componentes Concentraciones de las soluciones R1. Reactivo Biuret Hidróxido sódico 100 mmol/l Tartrato Na-K 16 mmol/l Yoduro potásico 15 mmol/l Sulfato cúprico 6 mmol/l R2. Reactivo blanco Hidróxido sódico 100 mmol/l Tartrato Na-K 16 mmol/l CAL. Patrón Proteína Especifico para cada lote PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren al manejar reactivos de laboratorio. Las soluciones R1 y R2 contienen hidróxido sódico que es caústico. En caso de contacto accidental, lavar inmediatamente el area afectada con agua abundante y buscar inmediatamente atención médica. CAL contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar inmediatamente el área afectada con agua abundante. En caso de ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un médico. La azida sódica reacciona con el cobre y plomo de las tuberías, lo que podría producir azidas explosivas. Cuando se tire este reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la formación de estas azidas. Las superficies metálicas que hayan sido puestas en contacto con la azida sódica deben ser lavadas con hidróxido sódico al 10%. Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se desean. Los reactivos deben ser utilizados solo para los propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de laboratorio.


R1. Reactivo Biuret

Diluir el contenido de una botella R1 con 400 ml de agua

bidestilada, enjuagando la botella a fondo. Es estable un

año cuando se conserva herméticamente cerrado entre +2

y +25C.

R2. Reactivo Blanco Diluir el contenido de una botella R2 con 400 ml de agua

bidestilada, enjuagando la botella a fondo. Es estable un

año cuando se conserva herméticamente cerrado entre +2

y +25C.

CAL. Patrón

Listo para usar. Es estable hasta la fecha de caducidad



Reactivo Biuret

Reactivo Blanco

Patrón



3 (No. Cat. HE 1532) Sueros de Calibración Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

NOTAS

Si la lectura no puede llevarse a cabo a Hg 546 nm, debe

utilizarse un patrón para calcular la concentración de proteinas

totales en la muestra. La muestra blanco para sueros claros o

incoloros corresponde aproximadamente a 0,2 g de proteinas

totales/dl, y puede ser ignorada.

Cuando se analicen sueros ictéricos (5 mg bilirrubina/dl),

hemolíticos o lipémicos debe analizarse una muestra blanco

hecha con 0,02 ml de suero o plasma y 1,0 ml de la Reactivo

blanco R2. Esta debe medirse frente al agua y la absorbancia

obtenida debe restarse de la absorbancia de la muestra.

PROCEDIMIENTO Realice una calibración de ganancia nuevo con una cubeta que contiene ddH2O fresco. Seleccione el programa de TP en la pantalla de ejecución de la prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones.

Pipetear en la cubeta: Reactivo blanco Patrón Muestra Muestra S0 S1 en blanco Agua destilada 0.01 ml -- -- -- Patrón (CAL) -- 0.01 ml -- -- Suero -- -- 0.01 ml 0.01 ml R1 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml -- R2 -- -- -- 0.5 ml

Mezclar, incubar durante 30 minutos a +20 a +25C, antes de

leer las instrucciones en la pantalla


Recomendaciones sobre el cambio de lote del reactivo o como

se indica en los procedimientos de control de calidad, utilizando

CAL estándar proporcionado en el kit de calibración o Nivel

Randox Suero 3.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA TP 245

PAGE 2 OF 2

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: Hg 546 nm (530 - 570 nm)

Cubeta: 1 cm light path

Temperatura: 20 to 25C

Medición: against reagent blank


Reactivo Patrón Muestra

Blanco

Agua destilada 0,02 ml --- ---

Patrón (CAL) --- 0,02 ml ---

Suero o plasma --- --- 0,02 ml

R1 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml

Mezclar, incubar durante 30 min entre +20 y +25C. Medir la

absorbancia de la muestra (Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al

reactivo blanco.

CÁLCULO MANUAL

1. Cuando la medición se lleva a cabo a Hg 546 nm, la

concentración de proteínas totales puede ser calculada de la

siguiente manera:

Conc. de Prot. Tot = 190 x Amuestra

(g/l)

Conc. de Prot. Tot = 19 x Amuestra

(g/dl)

2. Utilizando un patrón:

Amuestra

Conc. de Prot. Tot. = x Conc. Patrón Apatrón NORMALIZACIÓN El suero de calibración de nivel 3 de Randox sigue lo indicado en

el material de referencia NIST 927d de Proteinas Totales.

CONTROL DE CALIDAD






deberán seguir los siguientes pasos: 1. Comprobar programación del instrumento y el origen de luz.








INTERFERENCIA

Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes niveles y se

encontró que no interfieren:

Bilirrubina 500 mol/l (29 mg/dl)

Intralipid® 2%

Triglicérido 22,75 mmol/l (20,0 mg/dl)

Hemoglobina 10 g/l


g/dl g/l

Adultos 6,4 - 8,3 64 - 83



población.





LINEALIDAD

El método es lineal hasta una concentración de 13,0 g/dl

(130 g/l). Si la absorbancia de la muestra excede 0,7, diluir 1+1 con NaCl al 0,9%. Multiplicar el resultado por 2.

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de Proteinas Totales con un

nivel aceptable de precisión se determinó en 0,476 g/dl (4,76

g/l).

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 1 Nivel 2

Media (g/dl) 6.04 4.48

DE 0.034 0.024

CV(%) 0.57 0.53

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 1 Nivel 2

Media (g/dl) 6.04 4.48

DE 0.251 0.135

CV(%) 4.15 3.01

n 20 20

CORRELACIÓN



lineal:

Y = 0.9665 X - 0.0589


Se analizaron 40 muestras de pacientes con valores de entre 4,29

y 10,40 g/dl.

REFERENCIAS

1. Weichselbaum, T.E., Amer. J. Clin. Path., 16: 40.

2. Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests. 3rd Edition. WB

Saunders Company. Philadelphia. PA pp 518-519 (1995)


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

TRIGLICERIDOS Método GPO-PAP MANUAL RX MONZA PARA SU USO Para el análisis cuantitativo in vitro de Trigliceridos en suero y plasma. Este producto es adecuado para un uso manual o en el analizador RX monza. Cat. No. TR 210 R1a. Tampón 1 x 100 ml 6 x 15 ml R1b. Reactivo enzima 6 x 15 ml CAL. Patrón 1 x 5.5 ml TR 213 R1a. Tampón 10 x 50 ml 10 x 50 ml R1b. Reactivo enzima 10 x 50 ml CAL. Patrón 1 x 5.5 ml TR 212 R1a. Tampón 5 x 100 ml 5 x 100 ml R1b. Reactivo enzima 5 x 100 ml CAL. Patrón 1 x 5.5 ml SIGNIFICADO CLINICO Las medidas de Triglicéridos se utilizan en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades relacionadas con el metabolismo lipídico (Hiperlipoproteinemias), diversos desordenes endocrinos (neprosis diabetes mellitus) y obstrucción hepática (obstrucción biliar extrahepática). METODO COLORIMETRICO(1) Los triglicéridos se determinan tras hidrólisis enzimática con lipasas. El indicador es una quinoneimina formada a partir de peróxido de hidrógeno, 4-amino-fenazona y 4-clorofenol bajo la influencia catalítica de la peroxidasa. PRINCIPIO(2,3,4) lipasas Triglicéridos + H2O glicerol + ácidos grasos GK Glicerol + ATP glicerol-3-fosfato + ADP GPO Glicerol-3-fosfato + O2 dihidroxiacetona fosfato + H2O2 POD 2H2O2 + 4-aminofenazona + 4-clorofenol quinoneimina + HCl + 4H2O PREPARACION DE LA MUESTRA(1)

Se puede utilizar el suero, plasma heparinizado o con EDTA. Tomar la muestras después de 12 a 14 horas en ayunas. Tras la separación las muestras son estables hasta 7 días cuando se conservan entre +2 y +8C o 3 meses a -20C. Se deberán evitar los tubos recubiertos con Glicerol cerrado al vacío, así como el proceso repetido de congelación y descongelación. COMPOSICION DEL REACTIVO Componentes Concentraciones en la prueba R1a. Tampón Tampón Pipes 40 mmol/l, pH 7,6 4-clorofenol 5,5 mmol/l Magnesio-iones 17,5 mmol/l R1b. Reactivo enzima 4-aminofenazona 0,5 mmol/l ATP 1,0 mmol/l Lipasas ≥ 150 U/ml Glicerol-kinasa ≥ 0,4 U/ml Glicerol-3-fosfato oxidasa ≥ 1,5 U/ml Peroxidasa ≥ 0,5 U/ml CAL. Patrón Vedi inserto lotto-specifico

PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca.



La reactivo R1a contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el




a un médico.


que podría producir azidas explosivas. Cuando se deseche este






desean




laboratorio.


R1a. Tampón



R1b. Reactivo enzima

Cat. No. TR 210 Reconstituir un vial de Reactivo enzima R1b con 15 ml de

Tampón R1a. Estable durante 21 días entre +2 y +8C ó 3

días entre +15 y + 25C conservar protegido de la luz.

Cat. Nos. TR 213 y TR 212

Reconstituir un vial de Reactivo enzima R1b con un

pequeño volumen de Tampón R1a y después transferir

todo el contenido al frasco R1a, enjuagando el vial R1b

varias veces. Estable durante 21 días entre +2 y +8C ó 3

días entre +15 y +25C. Conservar protegido de la luz.

CAL. Patrón

Listo para su uso. Estable hasta la fecha de caducidad,


R1 = Reactivo enzima

R2 = Ninguno


Tampón

Reactivo enzima

Patrón



Nivel 3 (No. Cat. HE 1532) Sueros de Calibración Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

NOTA DE PROCEDIMIENTO

Para corregir para libre de glicerol, restar 0,11 mmol/l (10 mg/dl)

al valor calculado de triglicérido.

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL/ RX MONZA TR 210

PAGE 2 OF 3

PROCEDIMIENTO Usando ddH2O realizar una nueva calibración de ganancia nueva en el modo de cubeta. Seleccione el TRI en la pantalla de Ejecución de prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones. Pipetear en la Cubeta: Reactivo Blanco S0 Patrón S1 Muestra ddH2O - - - Patrón - 5 l - Muestra - - 5 l Reagent R1 500 l 500 l 0.50 ml Mezclar, incubar durante 10 min a 20-25oC o 5 min a 37 º C. Inserte en el soporte de RX Monza celda de flujo y oprima Leer dentro de los 60 minutos. CALIBRACIÓN PARA RX MONZA

Recomendado con el cambio de lote de reactivos o como

inidicated por los procedimientos de control de calidad, utilizando CAL estándar proporcionado en el kit de calibración o

de suero Randox Nivel 3.

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 500 nm; Hg 546 nm

Cubeta: 1 cm

Temperatura: 20-25C ó 37C

Medida: frente a reactivo blanco

sólo es necesario un reactivo

blanco por serie


Reactivo Blanco Patrón Muestra

l l l

Muestra - - 10

Patrón (CAL) - 10 -

Reactivo (R1) 1000 1000 1000

Mezclar, incubar durante 10 minutos a 20-25C ó 5 minutos a

37C. Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) y el patrón

(Apatrón) frente al reactivo blanco en los 60 minutos siguientes.

CÁLCULO MANUAL

1. Utilizando patrón:

Amuestra

Concentración triglicéridos = x 2,29 = mmol/l

Apatrón

Amuestra

x 200 = mg/dl

Apatrón

2. Utilizando factor:

Concentración Triglicéridos

Longitud de onda mmol/l mg/dl

Hg 546 nm 11,95 1048

500 nm 8,47 743

NORMALIZACIÓN

Calibración Randox suero Nivel 3 es atribuible a hacer referencia

a ID-GC/MS método.

CONTROL DE CALIDAD







1. Comprobar programación del instrumento y el la lámpara






componentes.

6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente de los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +44 (0) 28 9442 2413.

INTERFERENCIAS

El método no se ve influenciado por concentraciones de

hemoglobina de hasta 6 g/l (600 mg/dl) o por concentraciones de

bilirrubina de hasta 500 mol/l (29 mg/dl).

VALORES DE REFERENCIA(5)

Se recomiendan los siguientes límites superiores para la

determinación del factor de riesgo de hipertrigliceridemia:

Sospecha de hipertrigliceridemia a partir de:

1,71 mmol/l (150 mg/dl)

Hipertrigliceridemia incrementada a partir de:

2,29 mmol/l (200 mg/dl)








LINEALIDAD

El análisis es lineal hasta una concentración de triglicéridos de

1172 mg/dl. Las muestras que presenten una concentración

superior, deben ser diluidas 1 + 4 con NaCl al 0,9%. Multiplicar el

resultado por 5.

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de Trigliceridos con un nivel

aceptable de precisión se determinó en 22.9 mg/dl.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA TR 210

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 2 Nivel 3


DE 3.19 6.42

CV(%) 2.90 2.48

n 20 20 Análisis (Inter) Nivel 2 Nivel 3 Media (mg/dl) 110 259 DE 5.85 9.89 CV(%) 5.32 3.82 n 20 20

CORRELACIÓN



lineal:

Y = 0.902 X + 16.1


Se analizaron 42 muestras de pacientes con valores de entre 45 y

417 mg/dl.

REFERENCIAS

1. Tietz N.W., Clinical Guide to Laboratory Tests, Second

Edition W.B. Saunders Company, Philadelphia, USA 554-556,

1990.

2. Jacobs N J, VanDemark, P.J., Arch Biochem Biophys 1960;

88: 250-255.

3. Koditschek L K, Umbreit, W W., J Bacteriol 1969; 98:

1063-1068.

4. Trinder P., Ann Clin Biochem 1969; 6: 24-27.

5. Study Group, European Atherosclerosis Society. Strategies

for the prevention of coronary heart disease: A policy

statement of the European Athersclerosis Society. (1987).

Eur. Heart. J. 8 : 77.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

ACIDO URICO (UA) Método Colorimétrico Enzimático

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de Acido Urico en el suero,

plasma y orina. Este producto es adecuado para un uso

manual o en el analizador Rx Monza.

Cat. No.

UA 230 R1a. Tampón 1 x 100 ml

6 x 15 ml R1b. Reactivo Enzima 6 x 15 ml


UA 233 R1a. Tampón 10 x 50 ml


CAL Patrón 1 x 5.5 ml


El ácido úrico se convierte, catalizado por la uricasa, en

alantoina y peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno

formado, catalizado por la peroxidasa, oxida el ácido

3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfónico y la

4-aminofenazona para dar un compuesto de quinoneimina

rojo-violeta.

PRINCIPIO

uricasa

Ac. úrico + O2 + 2H2O Alantoina + CO2 + H2O2

2H2O2 + Ac. 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfónico

+ 4-Amino-fenazona

peroxidasa

N-(4-antipiril)-3-cloro-5-sulfonato-p-benzoquinoneimina

MUESTRA

Suero, plasma heparinizado o plasma EDTA, orina.

Diluir la orina 1+10 con agua destilada.



R1a. Tampón

Tampón HEPES 50 mmol/l, pH 7,0

3,5 DCHBS 4 mmol/l



Peroxidasa ≥ 1000 U/l

Uricasa ≥ 200 U/l

CAL Patrón Especifico para cada lote


Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la

boca. Respetar las precauciones normales necesarias, que se

requieren al manejar reactivos de laboratorio.


contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la

piel, lavar inmediatamente el área afectada con agua

abundante. En caso de ingestión o contacto con los ojos

llamar inmediatamente a un médico.

La azida sódica reacciona con el cobre y plomo de las tuberías,

lo que podría producir azidas explosivas. Cuando se tire este






se desean.


propósitos indicados por personal adecuado

cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas

de laboratorio.

ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO

R1a. Tampón

Listo para su uso. Etable hasta la fecha de caducidad si

se conserva entre +2 to +8oC.


UA 230

Reconstituir un vial de R1b Reactivo enzimático con

15 ml de Buffer R1a. Estable 21 días entre +2 y +8°C

o 5 días entre +15 y +25°C si se almacena protegido

de la luz

UA 233

Reconstituir el contenido de un vial de R1b Reactivo

enzimático con una porción de Buffer R1a y luego

transferir todo el contenido a la botella R1a,

enjuagando el frasco R1b varias veces.

Estable por 21 días entre +2 y +8°C o 5 días entre

+15 y +25°C si se almacena protegido de la luz.

CAL. Patrón

Listo para su uso. Etable hasta la fecha de caducidad si

se conserva entre +2 to +8°C.


Tampón

Reactivo Enzima

Patrón

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA UA 230


Multisuero Valorado Randox Nivel 2 (No. Cat. HN1530) y



PROCEDIMIENTO

Usando ddH2O realizar una nueva Calibración de Ganancia en

el modo de cubeta. Seleccione UA en la pantalla Ejecutar

prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las

instrucciones.



ddH2O - - -

Patrón - 10 l -

Muestra - - 10 l

Reactivo 500 l 500 l 500 l

Mezclar, incubar durante 15 min a 20-25°C ó 5 min a

37ºC. Insertar en el soporte de flujo de célula de RX monza

y oprima Leer dentro de los 30 minutos.


Recomendado con el cambio de lote de reactivos o como se

indica en el procedimiento de control de calidad, utilizando el

CAL estándar proporcionado en el kit o suero de calibración

Randox Nivel 3.

PARA USO MANUAL



Temperatura de reacción: 20-25°C / 37°C


sólo se requiere un

reactivo blanco por serie


Reactivo Muestra (l) Patrón (l)

Blanco (l)

Muestra - 20 -

Patrón (CAL) - - 20

Reactivo (R1) 1000 1000 1000

Mezclar, incubar durante 15 minutos a 20-25oC o durante

exactamente 5 min a 37oC. Medir la absorbancia de la muestra

(Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco

durante los 30 minutos siguientes.

CALCULO MANUAL

El uso de un patrón

Suero o plama

Amuestra

Conc. Acido Urico = patrón x (mol/l)

conc. Apatrón

Amuestra

Conc. Acido Urico = patrón x (mg/dl)

conc. Apatrón

Orina

Amuestra

Conc. Acido Urico = patrón x (mol/l)

conc. Apatrón

Amuestra

Conc. Acido Urico = patrón x (mg/dl)

conc. Apatrón

Utilización de un factor:

NORMALIZACIÓN

El suero de Calibración nivel 3 tiene trazabilidad con el

material de referencia ID-GC/MS.

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y

Nivel 3 para el control de calidad diario. Se deberá de analizar

dos niveles distintos de controles cada día. Los valores

obtenidos deberán encontrarse dentro del rango especificado.

Si los valores se encuentran fuera del rango y su repetición

excluye error, se deberán seguir los siguientes pasos:

1. Comprobar programación del instrumento y el origen de

luz.



bacterias puede contribuir a la inexactitud de los

resultados.



componentes.



94422413.

Conc. Acido Urico

(mol/l) (mg/dl)

Longitud de

onda:

Suero/

Plasma

Orina

Suero/

Plasma

Orina

520 nm

Hg 546 nm

2029

3112

22306

34202

34.1

52.3

375

575

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA UA 230

INTERFERENCIA

Hemoglobina hasta 100 mg / dl y bilirrubina hasta 20 mg / dl

no afectan la determinación. Si las mediciones no puede

llevarse a cabo a 520 nm o Hg 546 nm se debe utilizar la

norma prevista.

VALORES NORMALES

Suero2: Hombre 202 - 416 mol/l

3.4 - 7.0 mg/dl

Mujer 142 - 339 mol/l

2.4 - 5.7 mg/dl

Orina3: 1.5 - 4.5 mmol/24 horas

250 - 750 mg/24 horas






Se obtuvieron los siguientes datos de rendimiento mediante

un analizador Rx Monza en funcionamiento a 37ºC.

SUERO

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de Acido Urico con un

nivel aceptable de precisión se determinó en 0,599 mg/dl.

LINEALIDAD

El método es lineal para una concentración de 24,5 mg/dl.

Para la muestras con concentraciones superiores diluir 1+1

con solución de NaCl al 0,9% y repetir la prueba. Multiplicar el

resultado por 2.

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 5.81 8.97

DE 0.022 0.049

CV(%) 0.38 0.55

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 5.81 8.97

DE 0.328 0.371

CV(%) 5.64 4.14

n 20 20

CORRELACIÓN



lineal:

Y = 0.933 X + 0.16



1.05 y 15.16 mg/dl.

ORINA

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de Acido Urico con un

nivel aceptable de precisión se determinó en 2.06 mg/dl.

LINEALIDAD

El método es lineal para una concentración de 26,7 mg/dl.

Para la muestras con concentraciones superiores diluir 1+1

con agua destilada y repetir la prueba. Multiplicar el resultado

por 2.

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 14.1 23.8

DE 0.250 0.362

CV(%) 1.77 1.52

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 2 Nivel 3

Media (mg/dl) 14.1 23.8

DE 0.557 0.912

CV(%) 3.95 3.83

n 20 20

CORRELACIÓN



lineal:

Y = 0,9853 X + 0,669



3,28 y 21,58 mg/dl.

REFERENCIAS

1. Fossati, P., Prencipe, L., and Berti, G., Clin. Chem. (1980)

26/2, 227-231 .

2. Thefeld, W. et al. Dtsch. Med. Wschr. (1973) 98, 380.

3. Krieg, M. et al. J. Clin. Chem. Clin. Biochem.(1986) 24,

863.

Revisado 16 Sep 10 ck

Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

ACIDO URICO (UA) Reactivo Líquido Método Colorimétrico Enzimático MANUAL PARA SU USO Para el análisis cuantitativo in vitro de Acido Urico en el suero, plasma y orina. Este producto es adecuado para su utilización en Manual. No. Cat. UA 1613 R1. Reactivo Enzima 4 x 100 ml 4 x 100 ml CAL Patrón 1 x 5.5 ml METODO COLORIMETRICO El ácido úrico se convierte, catalizado por la uricasa, en alantoina y peróxido de hidrógeno. El peróxido de hidrógeno formado, catalizado por la peroxidasa, oxida el ácido 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfónico y la 4-aminofenazona para dar un compuesto de quinoneimina rojo-violeta. PRINCIPIO(1,2) uricasa Ac. úrico + O2 + 2H2O alantoina + CO2 + H2O2 2H2O2 + Ac. 3,5-dicloro-2-hidroxibencenosulfónico + 4-Amino-fenazona peroxidasa N-(4-antipiril)-3-cloro-5-sulfonato-p-benzoquinoneimina MUESTRA Suero, plasma heparinizado o plasma EDTA, orina. Diluir la orina 1+10 con agua destilada. COMPOSICION DEL REACTIVO Componentes Concentraciones en la prueba R1. Reactivo Enzima Tampón HEPES 200 mmol/l, pH 7,55 4-Aminofenazona 0,25 mmol/l 3,5 DCHBS 4,0 mmol/l Uricasa ≥ 200 U/l Peroxidasa ≥ 1000 U/l CAL Patrón Especifico para cada lote PRECAUCIONES DE SEGURIDAD Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar las precauciones normales necesarias, que se requieren al manejar reactivos de laboratorio. El R1 reactivo contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto con la piel, lavar inmediatamente el área afectada con agua abundante. En caso de ingestión o contacto con los ojos llamar inmediatamente a un médico. La azida sódica reacciona con el cobre y plomo de las tuberías, lo que podría producir azidas explosivas. Cuando se tire este reactivo enjuagar abundantemente con agua para evitar la formación de estas azidas. Las superficies metálicas que hayan sido puestas en contacto con la azida sódica deben ser lavadas con hidróxido sódico al 10%. Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están disponibles si se desean. Los reactivos deben ser utilizados solo para los propósitos indicados por personal adecuado cualificado de laboratorio bajo condiciones apropiadas de laboratorio.

ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO

El reactivo enzima y el patrón están listos para usar. Los

reactivos son estables hasta la fecha de caducidad cuando se

conservan entre +2 y +8°C, protegidos de la luz.


Reactivo Enzima

Patrón



3 (No. Cat. HE 1532)

PROCEDIMIENTO



Temperatura de reacción: 20-25oC ó 37oC


sólo se requiere un

reactivo blanco por serie


Reactivo Blanco l Muestra l Patrón l

Muestra - 20 -

Patrón (CAL) - - 20

Reactivo 1 1000 1000 1000

Mezclar, incubar durante 15 minutos a 20-25oC o durante

exactamente 5 min a 37oC. Medir la absorbancia de la muestra

(Amuestra) y del patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco durante

los 15 minutos siguientes.

Aunque la absorbancia se puede leer en cualquier momento

durante un período de hasta 15 minutos después del tiempo

especificado de incubación, el intervalo entre la adición de la

muestra y la lectura debe de ser exactamente el mismo que para

el Patrón/Control y la Muestra.

CALCULO DE LA CONCENTRACION DE ACIDO

URICO

Suero o plama

Amuestra

Conc. Acido Urico = x conc. del patrón

Apatrón

Orina

Amuestra

Conc. Acido Urico = x conc. del patrón x 11

Apatrón

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL UA 1613

PAGE 2 OF 2

CONTROL DE CALIDAD

Se recomiendan los Multisueros Ensayados Randox, Nivel 2 y

Nivel 3 para el control de calidad diario. Se deberá de analizar

dos niveles distintos de controles cada día. Los valores obtenidos

deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los valores

se encuentran fuera del rango y su repetición excluye error, se



luz.



bacterias puede contribuir a la inexactitud de los

resultados.



componentes.



94422413.

INTERFERENCIA

Haemoglobin up to 100 mg/dl and Bilirubin up to 20 mg/dl do not

affect the determination.

VALORES NORMALES(3,4)

Suero: Hombre 202 - 416 mol/l

3,4 - 7,0 mg/dl

Mujer 142 - 339 mol/l

2.4 - 5.7 mg /dl

Orina: 1,5 - 4,5 mmol/24 hrs. 250 - 750 mg/24 hrs.




LINEALIDAD

El método es lineal para una concentración de 1189 µmol/l ó 20

mg/dl. Para la muestras con concentraciones superiores diluir

1+1 con solución de NaCl al 0,9% y repetir la prueba. Multiplicar

el resultado por 2.

SENSIBILIDAD


intervalo de sensibilidad ya que esto está limitado por la

sensibilidad del espectrofotómetro utilizado. Bajo las condiciones

del ensayo un cambio de 0,004 unidades de absorbancia es

equivalente a 0,98 mmol / l.

REFERENCIAS

1. Barham, D., and Trinder, P., Analyst 97, 142-145 (1972).

2. Fossati, P., Prencipe, L., and Berti, G., Clin. Chem. 26/2,

227-231 (1980).

3. Thefeld, W. et al. Dtsch. Med. Wschr. (1973) 98, 380.

4. Krieg, M. et al. J. Clin. Chem. Clin. Biochem.(1986) 24, 863.

Revisado 28 June 10 lm

Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

PROTEINAS TOTALES

(UP) (ORINA)

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO

Para la determinación cuantitativa in vitro de Proteinas Totales en

orina y C.S.F. Este producto es adecuado para un uso manual o


No. Cat.

UP 1570 R1. Reactivo colorante 3 x 100 ml


UP 1571 R1. Reactivo colorante 6 x 100 ml


SIGNIFICADO CLINICO(1) El análisis de la Proteína Total en la orina y el líquido cerebro

espinal es de gran valor en el diagnóstico de enfermedades

renales y del sistema nervioso central. Las elevaciones en la

proteína urinaria son muy comunes en las siguientes condiciones:

ejercicio enérgico, fiebre e hipotermia, nefrosis y nefropatía

diabética e infecciones de las vias urinarias. El análisis de la

proteína total en el líquido cerebro espinal ayuda en el

diagnóstico de condiciones tales como meningitis, tumores CNS

y hemorragia cerebral.

PRINCIPIO(2)

El rojo de pirogalol se acompleja con proteinas en un medio

ácido que contiene iones molibdato. El complejo azul resultante

presenta una absorción máxima a 600nm. La densidad óptica a

600 nm es directamente proporcional a la concentración de

proteinas totales de las muestras.

EXTRACCION Y PREPARACION DE LA

MUESTRA(3,4,10)

Orina : extracción de 24 horas, las muestras de orina se pueden

conservan entre +2 y +8C hasta 24 horas o congeladas hasta 3 meses hasta que se analizen.

C.S.F.(Líquido cerebro espinal): Se deberán de analizar durante la

½ hora siguiente a su extracción

OBSERVACIONES

1. Aditivos: No es necesario el uso de conservantes.

2. La heparina puede causar interferencias si se utiliza en

muestras de LCR.


Componentes Concentración inicial de la Solución

R1. Reactivo colorante

Rojo de pirogalol 60 mol/l

Molibdato disódico 40 mol/l

Acido succínico 50 mmol/l

Oxalato sódico 1 mmol/l

Benzoato sódico 3 mmol/l

CAL. Patrón

Proteína (seroalbúmina humana) Vedi inserto lotto

specifico


Sólo para diagnóstico in vitro. No pipetear con la boca. Respetar

las precauciones normales necesarias, que se requieren al

manejar reactivos de laboratorio.

El Patrón (CAL) contiene azida sódica. Evitar su ingestión o el




a un médico.







Precaución: Estándar

El material humano del que se deriva este producto ha sido

evaluado a nivel de donante para buscar anticuerpos del virus de inmunodeficiencia humana (VIH 1, VIH 2), antígenos de superficie

de hepatitis B (HbsAg) y anticuerpos del virus de hepatitis C

(HCV), y resultó ser NO REACTIVO. Se han llevado a cabo los

métodos aprobados por la FDA estadounidense para realizar

dichas pruebas.

No obstante, puesto que ningún método puede garantizar

plenamente que está exento de agentes infecciosos, este material

y todas las muestras de pacientes deben manipularse teniendo en

cuenta su posibilidad de transmisión de enfermedades infecciosas

y deben tratarse en consecuencia.


desean.


según las pautes locales.




laboratorio.


Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se

conservan entre +15 y +25C.

MATERIALES SUMINISTRADOS Reactivo a color de la proteína urinaria

Urinary Protein Standard


1. Material de pipetaje adecuado para suministrar 10 µl,

50 µl, 1 ml y 3 mls.

2. Cronómetro y bloque de calentamiento o baño de agua para

mantener +25C ó +37C. 3. Un espectrofotómetro con una capacidad de longitud de

onda de 600 nm.

4. NaCl al 0,9% para la dilución de la muestra (si es necesario).

5. Controles de orina ensayados de Randox de nivel 2,

(N.º cat. AU 2352) y nivel 3 (N.º cat. AU 2353) o controles

de LCR de Randox de nivel 2 (CF 1500) y nivel 3 (CF 1501).

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA UP 1570

PROCEDIMIENTO

Seleccione UP (Arriba) en la pantalla Run Test (Realizar análisis)

y lleve a cabo un blanco de agua de la forma indicada.



Agua redestilada 10 µl - -

Patrón - 10 µl -

Muestra - - 10 µl

Reactivo R1 500 µl 500 µl 500 µl

Mézclelo y déjelo incubar durante exactamente 10 minutos a

20-25ºC o 5 minutos a 37ºC.

Introduzca la cubeta en el soporte de la celda de flujo del RX

Monza y pulse Read (Leer).

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 600 nm Temperatura: 25/37°C



Método Macro

Reactivo blanco Patrón Muestra

Agua bidestilada 50 l --- ---

Patrón --- 50 l ---

Orina o C.S.F --- --- 50 l

Reactivo 3000 l 3000 l 3000 l

Métro Semi-micro

Reactivo blanco Patrón Muestra

Agua bidestilada 20 l --- ---

Patrón --- 20 l ---

Orina o C.S.F --- --- 20 l

Reactivo 1000 l 1000 l 1000 l

Mezclar, incubar durante exactamente 10 minutos a 25°C ó 5

minutos a 37°C. Medir la absorbancia de la muestra (Amuestra) y

del patrón (Apatrón) frente al blanco de reactivo.

CÁLCULO MANUAL

Amuestra

Concentración de la Proteína (g/l) = x Patrón

Apatrón conc.

Para determinar la Proteína Urinaria de 24 horas, medir el

volumen de la orina de 24 horas en ml y analizar el contenido de

proteína en la orina (g/l) según el procedimiento. Calcular la

Proteína Urinaria de 24h utilizando la siguiente fórmula:

Proteína (g/24h) = Proteína Urinaria (g/l) x TV/1000

donde TV = volumen de orina de 24h en ml

1000 = Convierte ml/día en l/día

CALIBRACION

Se recomienda el patrón de Proteína Urinaria Randox

(1 g/l) suministrado con este kit para la calibración cuando se

analizen muestras de orina o CSF. La dilución del patrón antes de

su uso no es necesaria. El patrón se prepara gravimétricamente

utilizando un grado de reactivo de albúmina de suero humano. Se

recomienda la recalibración para cada serie de muestras

analizadas.

CONTROL DE CALIDAD

Controles de orina ensayados de nivel 2 y nivel 3 o controles de

LCR de Randox de nivel 2 y nivel 3. Analice dos niveles distintos

de controles al menos una vez al día. Los valores obtenidos

deberán encontrarse dentro del rango especificado. Si los

valores se encuentran fuera del rango y su repetición excluye



luz.

2. Comprobar que todo material está limpio. 3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento de bacterias






INTERFERENCIA(9)

Como en todos los métodos de tinción, la subestimación de

proteína puede ocurrir en muestras de orina que contengan

cadenas ligeras de inmunoglobulina (p. ej. proteína de Bence

Jones). Cuando se sospeche de dichas muestras, se deberían

analizar también mediante electroforesis.

VALORES NORMALES

Normalmente se recomienda que, siempre que sea possible, cada

laboratorio establezca su propio rango de valores esperados, o

intervalo de referencia para análisis que se lleven a cabo

normalmente. Dado que tales valores pueden variar con la edad,

sexo, dieta, localidad geográfica o instrumento.

Orina 0.028 - 0.141 g/24h (2)

0.01 - 0.14 g/l (6)

C.S.F. 0.15 - 0.45 g/l (6)

CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO ESPECÍFICAS

Los siguientes datos de rendimiento se obtuvieron mediante el

analizador RX monza en funcionamiento a una temperatura de

37°C.

SENSIBILIDAD

La concentración detectable mínima de proteínas totales en orina

con un nivel aceptable de precisión se determinó en 0,022 g/l.

LINEARIDAD

Este método es lineal hasta una concentración de 2,14 g/l. Las

muestras con concentraciones superiores deben diluirse 1 + 4

con una solución del 0,9% (p/v) de NaCl y deben someterse a

ensayo de nuevo multiplicando los resultados por 5.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL/ RX MONZA UP 1570

PRECISIÓN

Precisión intraensayo

Nivel 1 Nivel 2

Media (g/dl) 0.065 0.275

DE 0.002 0.002

CV (%) 2.93 0.67

n 20 20

Interensayo

Nivel 1 Nivel 2

Media (g/dl) 0.065 0.275

DE 0.003 0.013

CV (%) 5.34 4.74

n 20 20

CORRELACIÓN


disponible y se obtuvo la siguiente ecuación de regresión lineal:

Y = 0.9911 X + 0.0029

con un coeficiente de correlación r = 0,9998


0,04 y 1,36 g/l.

REFERENCIAS

1. Pesce, A.J., Kaplan, L.A.: Methods in Clinical Chemistry

(1987).

2. Watanabe, N., Kamei, S., Ohkubo, A., Yamanaka, M.,

Ohsawa, S., Makino, K., and Tokuda, K., Clin. Chem., 1986;

32/8: 1551.

3. Laboratory Test Handbook, Jacobs et al. ed 2.

4. Orsonneau, J., Dowet, P., Massoubre, C., Lustenberger, P.,

and Bernard, S., Clin. Chem., 1989; 35/11: 2233.

5. Henry R.J., Cannon, D.C., Winkelman, J.W., "Clinical

Chemistry, Principles & Techniques," Harper & Row, 2nd Ed.

1974.

6. Teitz, N.W., "Fundamentals of Clinical Chemistry", W.B.

Saunders Company, 1970 Philadelphia.

7. Young, D.S., et al. Clin. Chem., 21: 5. ID, 1975.

8. Friedman, R.B., et al. Clin. Chem., 26: 4. ID, 1980.

9. Tietz N.W., Textbook of Clinical Chemistry. 2nd ed. W.B.

Saunders Co., 717-723, 1994.

10. Yang J.Y., Chien T.I., Lu J.Y. and Kao J.T.

Heparin Interference in the cerebrospinal fluid Protein Assay

Measured in the Pyrogallol Red – Molybdate Complex. Clin.

Chim Acta 2009 Oct; 408 (1-2): 75-78.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 2

PARA SU USO

Para el análisis cuantitativo in vitro de la Urea en suero, plasma y

orina. Este producto es adecuado para uso Manual.

No. Cat.

UR 107 R1a. Ureasa 5 x 1 ml

5 x 100 ml R1b. Tampón Fosfato 5 x 100 ml

R2. Hipoclorito 1 x 100 ml


METODO COLORIMETRICO(1,2)

PRINCIPIO

El método se basa en la siguiente reacción:-

ureasa

Urea + H2O 2NH3 + CO2

El Salicilato y el hipoclorito en el reactivo reaccionan con los

iones de amonio para formar un complejo verde (2.2

dicarboxilindofenol).

MUESTRA

Suero, EDTA, plasma tratado con citrato o heparinizado.

Orina diluída 1+20 en agua destilada. Multiplicar el resultado por

21.


Componentes Concentraciones Iniciales

de las soluciones

R1a. Ureasa ≥ 5000 U/l

R1b. Tampón Fosfato 120 mmol/l, pH 7,0

Salicilato Sódico 63,4 mmol/l

Nitroprúsido Sódico 5,00 mmol/l

EDTA 1,5 mmol/l

R2. Hipoclorito Sódico 18 mmol/l

Hidróxido Sódico 750 mmol/l




















laboratorio.


La Ureasa R1a, el Tampón Fosfato R1b, el Hipoclorito Sódico R2

y el Patrón están listo para su uso. Estable hasta la fecha de

caducidad cuando se conservan entre +2 y +8°C.

ESTABILIDAD Y PREPARACION DEL REACTIVO DE TRABAJO (R1)

Añadir 1 frasco de ureasa a R1a botella de Tampón Fosfato R1b.

Estable durante 1 mes entre +2 y +8°C protegido de la luz.


Ureasa

Tampón Fosfato

Hipoclorito Sódico

Patrón


SUMINISTRADOS



NOTAS DE PROCEDIMIENTO

Utilizar cristal libre de iones de amonio.

El Reactivo 2 se puede diluir 1+4 con agua doblemente destilada

(estable durante 6 meses entre +2 y +8°C). Después se utiliza

1 ml de Reactivo 2 en la prueba. El volumen final de la reacción

será 2 ml y la linealidad

50 mmol/l (3 g/l).

GAAMSA

www.gaamsa.com

MANUAL UR 107

PAGE 2 OF 2

PROCEDIMIENTO

Longitud de onda: 600 nm (Hg 578 nm - Hg 623 nm)


Temperatura: 25°C, 37°C

Medición: frente al blanco de reactivo

Pipetear en los tubos de ensayo:

Blanco de Patrón Muestrea

Reactivo

Patrón - 10 l -

Muestra - - 10 l

Reactivo de

trabajo (R1) 1000 l 1000 l 1000 l

Mezclar. Incubar durante al menos 3 min a 37°C ó 5 min a 20-

25C.

Sodio 200 l 200 l 200 l

Hipoclorito (R2)

Mezclar. Incubar durante al menos 5 min a 37C ó 10 min a

20-25C. Medir la absorbancia del patrón (Apatrón) y la

absorbancia de la muestra (Amuestra) frente al blanco de reactivo

durante las siguientes 2 horas.

CALCULO

Amuestra

Conc. de urea = x (mmol/l)

Apatrón

Amuestra

Conc. de urea = x (mg/dl) Apatrón

CONTROL DE CALIDAD















VALORES DE NORMALIDAD

Suero o plasma: 2,5 – 7,5 mmol/l (0,15 – 0,45 g/l)

Orina: 338 - 583 mmol/24h (20 - 35 g/24h)




LINEARIDAD

El método es lineal hasta 33,3 mmol/l (200 mg/dl) en el suero o

plasma, y 700 mmol/l (4195 mg/dl) en la orina. Las muestras con

concentraciones más elevadas se diluirán 1 + 1 con NaCl al 0,9%

y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 2.

REFERENCIAS

1. Fawcett, J.K., Scott, J.E., J. Clin. Path., 1960; 13: 156-159.

2. Patton, C.J., Crouch, S.R., Anal. Chem., 1977; 49: 464-469

Revisado 30 Jan 09 bm

Rev. 001

Conc. de patrón

Conc. de patrón

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

UREA Método Enzimático Cinético

MANUAL

RX MONZA

PARA SU USO.

Para el análisis cuantitativo in vitro de la Urea en suero, plasma y

orina. Este producto es adecuado para un uso manual o en el

analizador Rx Monza.

No. Cat.

UR 220 R1a. Tampón 1 x 100 ml









SIGNIFICADO CLINICO(1,2)

La urea se sintetiza en el hígado a partir del amoníaco, como

resultado de la desaminación de amino ácidos. Esta biosíntesis es

el mecanismo principal de eliminación del exceso de nitrógeno

en el organismo. Las mediciones obtenidas en este análisis se

utilizan en el diagnóstico de anomalías metabólicas y sobre todo

renales. Se debe destruir más del 60% del riñón antes de que los

niveles de urea en plasma aumenten significativamente. Este test

se utiliza más frecuentemente junto con el de la creatinina sérica

para niveles de proteínas elevados (descompensación cardíaca,

reducción de agua).

En 1913, Marshall1 introdujo un análisis utilizando ureasa para la

determinación de urea en la sangre. Se realizaba la valoración del

amoníaco liberado a partir de la urea por medición de la ureasa.

Desde entonces se han utilizado muchas otras técnicas para

medir el amoníaco producido.

En 1965 Talke y Schubert2 crearon un procedimiento enzimático

para la determinación de urea, utilizando el sistema enzimático

asociado de ureasa - GLDH (Glutamato deshidrogenasa).

METODO UV(1,2)

La urea se hidroliza en presencia de agua y ureasa para producir

amoníaco y dióxido de carbono. El amoníaco producido en la

primera reacción se combina con -oxoglutarato y NADH en

presencia de glutamato deshidrogenasa para producir glutamato

y NAD+.

PRINCIPIO

ureasa

Urea + H2O 2 NH3 + CO2

GLDH

2 -oxoglutarato + 2 NH4+ + 2 NADH 2 L- glutamato +

2 NAD+ + 2 H2O

TOMA Y PREPARACION DE LA MUESTRA(3,4)

Suero/Plasma: La Heparina se puede utilizar como

anticoagulante.

No utilizar heparinato de amonio.

Orina (24 h): Recoger la orina sin aditivos: refrigerar tras la

toma4

Se recomienda una dilución de 1+20 con NaCl

al 0,9%. Multiplicar el resultado

por 21.

La Urea es estable en el suero/plasma durante 1 día a +25oC, 3

días a +2 y +8oC, ó 3 meses a -20oC.

La Urea es estable en la orina durante 4 días cuando se conserva

entre +2 y +8oC3.


Componentes Concentración Inicial de las Soluciones

R1a. Tampón



Ureasa ≥ 10 U/ml

GLDH ≥ 2 U/ml

NADH 0,26 mmol/l

Adenosina-5-difosfato 3 mmol/l


CAL. Patrón Especifico para cada lote





La solución R1a y el Patrón contienen azida sódica. Evitar su

ingestión o el contacto con la piel o las membranas mucosas. En

caso de contacto con la piel, lavar la zona afectada con abundante












laboratorio.

GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL UR 220

ESTABILIDAD Y PREPARACION DE LOS REACTIVOS R1a. Tampón

Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad cuando se conserva entre +2 y +8ºC.

R1b. Reactivo Enzima UR 220

Reconstituir un vial de Reactivo Enzima 2 con 15 ml de

Tampón 1. Estable durante 4 semanas entre +2 y +8ºC ó 2

días entre +15 y +25ºC.

UR 221, UR 2364

Reconstituir el contenido de un vial de Reactivo Enzima 2

con una parte de Tampón 1 y transferir el contenido

entero a la botella Tampón 1, enjuagando la botella

Reactivo Enzima 2 varias veces. Estable durante 4 semanas

entre +2 y +8ºC ó 2 días entre +15 y +25ºC.

CAL. Patrón

Listo para usar. Estable hasta la fecha de caducidad

cuando se conserva entre +2 y +8ºC.


Tampón

Reactivo Enzima

Patrón MATERIALES NECESARIOS PERO NO

SUMINISTRADOS

Dispositivos para pipeteo adecuados para la entrega de 10 µl y

1000 µl.

Dispositivo temporizador y bloque calentador o baño de de agua

para mantener 37°C. Un espectrofotómetro con capacidad de

longitud de onda de 340/334/365 nm.

Multisera ensayada Randox Nivel 2 (Cat. N º HN 1530) y Nivel 3

(Cat. Nº HE 1532)

Suero de calibración Randox Nivel 3 (Cat. No. CAL 2351)

NOTA Se pueden usar todos los anticoagulantes excepto heparinato de amonio. PROCEDURE Usando ddH2O realizar una nueva calibración de ganancia en el

modo flujo de célula. Seleccione UREA en la pantalla Ejecutar

prueba y llevar a cabo un blanco de agua según las instrucciones.



ddH2O 5 l - -

Patrón - 5 l -

Muestra - - 5 l

Reactivo 500 l 500 l 500 l

Mezclar y aspirar en la Rx Monza.


Se recomiendan para calibración urea estándar Randox

proporcionado en el kit o suero de Calibración Randox Nivel 3.

La norma está preparada gravimétricamente utilizando urea pura

disponible comercialmente.

Calibrar en el cambio de lote del reactivo o como se indica en

los procedimientos de control de calidad.

PARA USO MANUAL

Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 nm or Hg 365 nm)


Temperatura de reacción: 37C



Reactivo Patrón Muestra (l)

Blanco (l)

Patrón -- 10 --

Muestra -- -- 10

Reactivo 1000 1000 1000

Mezclar, leer la absorbancia inicial después de 30 segundos y

activar el temporizador de forma simultánea. Leer de nuevo

después de 1, 2 y 3 minutos.

CALIBRACIÓN PARA EL USO MANUAL Se recomienda para la calibración urea estándar Randox. Por

favor, consulte la hoja de lote específico.

La recalibración se debe completar para cada serie de muestras

analizadas. Consulte el apropiado manual de operador o la hoja

de aplicaciones para instrucciones específicas de calibración del

analizador. La norma está preparada gravimétricamente

utilizando urea pura disponible comercialmente.

CÁLCULO MANUAL

Para calcular la concentracion de urea utilizar la siguiente

fórmula:

AMuestra

Conc de Urea = x Concentración del patrón

(mmol/l or mg/dl) APatrón

Para convertir las unidades convencionales de SI4 unidades de

multiplicar las unidades convencionales por 0.166.

mg/dl urea x 0.166 = mmol/l urea

eg. 20 mg/dl Urea = 20 x 0.166 = 3.32 mmol/l

NORMALIZACIÓN

Suero Calibración Randox Nivel 3 es atribuible a la urea material

de referencia NIST 909b.

CONTROL DE CALIDAD















GAAMSA

www.gaamsa.com

OF 3

MANUAL UR 220

ESPECIFICIDAD/LIMITACIONES(5,6)

Se analizó la posible interferencia de la Bilirrubina hasta 20 mg/dl

y se encontró que no interfiere. Las muestras altamente

lipémicas pueden causar errores de absorbancia, por lo que la

muestra se debe de diluir. Se analizó la posible interferencia de la

hemólisis hasta 500 mg/dl y se encontró que no interfiere.

Se debe tomar especial cuidado para prevenir la contaminación

con amoníaco de las muestras que se vayan a analizar para urea.

El amoníaco existente en la atmósfera, en la habitación, en el

agua o en el reactivo podría elevar los resultados del análisis.

Young et al5 y Friedman et al6 dan una lista de sustancias y

condiciones que se sabe afectan a los niveles de urea. Randox no

se hace responsable de la integridad o exactitud de la

información contenida en estas listas.

VALORES DE NORMALIDAD (7)

Suero/Plasma 1.7-8.3 mmol/l (10-50 mg/dl) Orina (24 Horas) 333-583 mmol/l (20-35 g/24 h)


de referencia para considerar las differencias en edad, sexo, dieta



FUNCIONAMIENTO

Los siguientes datos de rendimiento se obtuvieron usando un

analizador Rx Monza funcionando a una temperatura de 37 ° C

con el volumen de aspiración fijado en 500 µl.

SUERO

LINEARIDAD

El método es lineal hasta 50.3 mmol/l (302 mg/dl). Para

concentraciones superiores diluir la muestra 1+1 con NaCl al

0,9% y repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 2.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de Urea con un nivel

aceptable de precisión se ha determinado en 2,13 mmol/l.

PRECISION

Análisis (Intra)

Nivel 1 Nivel 2


DE 0.312 0.515

CV(%) 4.55 2.64

n 20 20

Análisis (Inter)

Nivel 1 Nivel 2


DE 0.37 1.18

CV(%) 5.41 6.02

n 20 20

CORRELATION

This method (Y) was compared with another commercially

available method (X) and the following linear regression equation

obtained:

Y = 1.089 X - 0.446

and a correlation coefficient of r = 0.9935

43 patient samples were analyzed spanning the range 4.1 to 49

mmol/l.

ORINA

LINEARIDAD

El método es lineal hasta 958 mmol / l (5757mg/dl). Diluir las

muestras con una concentración más alta a 1 +1 con 0,9% de

solución de NaCl y repetir prueba. Multiplique el resultado por

2.

SENSIBILIDAD

La concentración mínima detectable de Urea con un nivel

aceptable de precisión se ha determinado en 43.2 mmol/l.

REFERENCIAS

1. Marshall EK Jr: J Biol Chem 1913; 15:487.

2. Talke H; Schubert GE: Klin Wschr 1965; 43:174.

3. Tietz N. W., Textbook of Clinical Chemistry.

W.B. Saunders Co, 1987, 1254-1316.

4. Tietz N.N: Clinical Guide to Laboratory Tests Philadelphia.

W.B. Saunders Co, 1983 pg 494.

5. Young D.S., Pestaner, L.C., Gibbermann, V. Clin. Chem,

1975; 21: No.5.

6. Friedmann R.B, et al: Clin Chem 1980; 26 No.4.

7. Kerscher,L; Tieqenhorn,J; “Methods of enzymatic Analysis”,

H.U. Bergmeyer Ed., VCH

Verlagsgesellschaft, Weinheim, 1985 3rd Ed; Vd VII, p.453.


Rev. 001

GAAMSA

www.gaamsa.com

técnicas randox

Documents