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CITOGENÉTICA CLÍNICA

Es la rama de la genética médica que tiene por objeto el estudio de la estructura y el comportamiento cromosómico y su relación con la patología genética

Dra. Verónica Cazayous

Bioquímica a cargo del Área de Citogenética del Laboratorio HEC

Bioquímica del Centro Nacional de Genética Médica. C.A.B.A

ESTUDIO CITOGENÉTICOINDICACIONES:

1. PERÍODO PRENATAL:- Edad mayor de 35 años- Triple screening alterado- Retraso de crecimiento intrauterino (CIR)- Anomalía ecográfica- Antecedentes de cromosomopatía balanceada en un progenitor

2. PERÍODO NEONATAL:- Malformaciones/ Defectos congénitos- Rasgos dismórficos- Genitales ambiguos- Muerte neonatal de causa inexplicada

3. PERÍODO LACTANCIA/ESCOLAR:- Dificultades para el aprendizaje- Rasgos dismórficos- Retraso psicomotor

5. PERÍODO DE ADOLESCENCIA:- Ginecomastia- Falta de desarrollo puberal- Amenorrea primaria o secundaria

6. PERÍODO DEL ADULTO:- Padres de niños con anomalías cromosómicas estructurales- Abortos de repetición- Infertilidad inexplicable

7. EN TODAS LAS EDADES:- Procesos malignos (cariotipo constitucional y tumoral)- Control de trasplantes de medula ósea

ANOMALÍAS CROMOSÓMICAS

Estructurales• Inversiones • Inserciones• Duplicaciones• Deleciones• Cromosomas marcadores• Anillos• Isocromosomas• Translocaciones

ANOMALÍAS CROMOSÓMICAS

Numéricas

• Aneuploidías

• Poliploidías

Se encuentran anomalías cromosómicas en aproximadamente 30 de 10000 nacimientos, mientras que los desórdenes del sistema nervioso (como defectos del tubo neural) se expresan en 20 de 10000 nacimientos

Incidencia de desórdenes cromosómicos

18.171.47

1.942.18

3.58

1.37 0.89

Sindrome de DownSindrome de KlinefelterMonosomía y deleciónSindrome de PatauSindrome de TurnerOtras trisomías Sindrome de Edward

ESTUDIO CITOGENÉTICO

CARIOTIPO

“IDENTIFICACION Y ORDENAMIENTO SISTEMÁTICO DE LOS CROMOSOMAS

DE UNA CÉLULA DE ACUERDO A CONVENCIONES INTERNACIONALES”

CARIOTIPO MASCULINO

46,XY

CARIOTIPO FEMENINO

46,XX

DIAGNÓSTICO PRENATAL CITOGENÉTICOPrincipio

El cariotipo constitucional de un individuo es determinado en la concepción. Las mitosis sucesivas darán lugar a copias del complemento cromosómico en todas las células que posteriormente originarán los distintos tejidos derivados. Se incluye tanto al tejido fetal propiamente dicho como a los tejidos extraembrionarios (córion, amnios, saco vitelino, etc.)

Biopsia de Vellosidades Coriales

CULTIVO DE LINFOCITOS

1. Toma de muestra2. Cultivo:

medio de cultivo+SFB+PHA

1. 72 hs. 37ºC2. Colchicina

Centrifugación1. Shock hipotónico

Centrifugación1. Fijación: AcH:MeOH 3:12. Preparación de extendidos3. Coloración4. Técnicas de bandeo5. Análisis al microscopio

óptico

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE PERIFERICA PARA ESTUDIO CITOGENETICO 1) Datos del pacienteNombre y ApellidoSexoFecha de NacimientoDomicilioTeléfonoMédico solicitante2) Motivo del Estudio

Observaciones.Transfusiones : hay que esperar al menos treinta días luego de una transfusión para realizar el estudio Medicamentos : (Preferentemente si están tomado antibióticos no realizar el estudio , hay más posibilidades que el cultivo no tenga éxito). Si el medicamento no se puede suspender igual se realizar el estudio . Es fundamental mantener las condiciones de estricta esterilidad de la muestra como también la viabilidad celular .Las condiciones en que llegue la muestra es importantísima para la obtención de buenas preparaciones cromosómicas.

3) Extracción : Limpiar bien la mesada de extracción con alcohol 70 (antes de apoyar agujas – jeringas) Humedecer el interior de una jeringa de 5ml. ( BD o Terumo ) con heparina sódica ESTÉRIL , dejando unos 0,05 ml dentro de la jeringa ( hasta el émbolo ). Mantener en estricta esterilidad . Extraer entre 2 y 5 ml venosa o estéril , previa desinfección con alcohol el brazo .La mínima cantidad de sangre para un cultivo exitoso es de 0,5 ml.Siempre que se pueda, debe evitarse maniobras que impidan la conservación de la muestra en condiciones de esterilidad .Tapar la jeringa con el capuchón de la aguja , impidiendo el contacto de la muestra con el aire .NO DOBLAR LA AGUJA NI TAPARLA CON OTROS ELEMENTOS (tapones de goma ,gasas , algodón)Rotular la jeringa con el nombre del paciente y fecha de extracción .

4) ConservaciónLa muestra se conserva en la jeringa ( sin trasvasar) y a temperatura ambiente hasta el momento del cultivo . Si por algún motivo el cultivo se demora mas de 24 horas , la muestra puede conservarse en heladera a 4º C SIN CONGELAR .5) Envío Debe elegirse una vía que permita la llegada de la muestra en el día . De no ser posible recuerde que la misma debe llegar antes de las 48 horas.La muestra debe enviarse en la misma jeringa en la que se hizo la extracción , sin transvasar y a temperatura ambiente en condiciones de bioseguridad.

ESTUDIO CITOGENETICO – PRENATALDatos de la paciente : •Nombre y Apellido•Dirección •Teléfono•Edad•Cantidad de Hijos•Fecha de última menstruación •Edad gestacional•Antecedentes familiares :(Abortos espontáneos – AE- hijos sanos- hijos con malformaciones- AE en familiares – familiar con anomalía cromosómica (AC)- anomalías ecográficas- Todos los datos que el médico crea relevante para el estudio citogenético) •Médico que deriva (Teléfono-mail de contacto)•Hospital

Toma de Muestra

Muestra : Vellosidades CorialesSe realiza en condiciones de esterilidad bajo seguimiento ecográfico por un profesional médico . Se prepara una jeringa TERUMO de 20 ml ; con 5 ml de medio de transporte ( material provisto por el Laboratorio del Hospital El cruce) . Este medio de transporte se prepara con cualquier medio de cultivo ( RPMI- F10) de esterilidad probada y heparina estéril (100 ml medio y 2 ml heparina) .La muestra recién tomada se envía inmediatamente al laboratorio a temperatura ambiente en condiciones de bioseguridad .

MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN