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PRINCIPALES ENFERMEDADES VIRALES EN ABEJAS MELIacuteFERAS
MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ MIGUEL ENRIQUE ARECHAVALETA
VELASCO MAYREL ELIZALDE SALMERON ELIZABETH BACILIO LOacutePEZ
MAYREL ELIZALDE
Centro Nacional de Investigacioacuten
Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
Cuajimalpa Cd de Meacutexico
ISBN 978-607-37-0641-4
Folleto teacutecnico Nuacutem 3 2016
SECRETARIacuteA DE AGRICULTURA GANADERIacuteA
DESARROLLO RURAL PESCA Y ALIMENTACIOacuteN
Mtro Joseacute Eduardo Calzada Rovirosa
Secretario de Agricultura
Mtro Jorge Armando Narvaacuteez Narvaacuteez
Subsecretario de Agricultura
Mtro Ricardo Aguilar Castillo
Subsecretario de Alimentacioacuten y Competitividad
Mtro Heacutector Eduardo Velasco Monroy
Subsecretario de Desarrollo Rural
Lic Marcelo Loacutepez Saacutenchez
Oficial Mayor
INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIONES
FORESTALES AGRIacuteCOLAS Y PECUARIAS
Dr Luis Fernando Flores Lui
Director General
M C Jorge Fajardo Guel
Coordinador de Planeacioacuten y Desarrollo
Dr Rauacutel G Obando Rodriacuteguez
Coordinador de Investigacioacuten Innovacioacuten y Vinculacioacuten
Mtro Eduardo Francisco Berterame Barquiacuten Coordinador de Administracioacuten y Sistemas
CENTRO NACIONAL DE INVESTIGACIOacuteN DISCIPLINARIA EN MICROBIOLOGIA ANIMAL
Dr Viacutector Rubeacuten Tenorio Gutieacuterrez Director
PRINCIPALES ENFERMEDADES VIRALES EN ABEJAS
MELIacuteFERAS
Derechos reservadoscopy 2016
Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agriacutecolas y Pecuarias
Calle Progreso No 5 Barrio Santa Catarina
Delegacioacuten Coyoacaacuten CP 04010 Meacutexico DF
Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
wwwinifapgobmx
ISBN 978-607-37-0641-4
Foto de portada
Marisela Leal Hernaacutendez
Revisioacuten teacutecnica
MC Laura Jaramillo Meza
Dra Edith Rojas Anaya
MC Luis Goacutemez Nuacutentildeez
No estaacute permitida la reproduccioacuten total o parcial de esta publicacioacuten ni la
transmisioacuten de ninguna forma o por cualquier medio ya sea electroacutenico
mecaacutenico por fotocopia por registro u otros medios sin el permiso
previo y por escrito de la institucioacuten
1
Contenido
Importancia de las abejas 2
Virus 3
Virus de la Criacutea Ensacada 6
Virus de la Paraacutelisis Aguda 8
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica 9
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute 10
Virus de las Celdas Reales Negras 11
Virus de Cachemira 12
Virus de las Alas Deformes 13
Varroa destructor como vector de virus 15
Diagnoacutestico 17
Prevencioacuten 19
Literatura recomendada 21
2
Principales enfermedades virales
en abejas meliacuteferas
Importancia de las abejas
En Meacutexico la apicultura tiene una gran importancia social
econoacutemica y ecoloacutegica La produccioacuten nacional de miel alcanza las
58000 toneladas anuales en promedio en el paiacutes existen
aproximadamente 41000 apicultores y el inventario de colmenas
es de casi 2 millones Meacutexico es el quinto productor y el tercer
exportador de miel en el mundo la apicultura es una de las
principales actividades pecuarias generadoras de divisas
Generalmente la actividad apiacutecola es asociada con la produccioacuten
de miel polen jalea real y propoacuteleo sin embargo la actividad
tambieacuten es muy importante por la polinizacioacuten que realizan las
abejas en plantas silvestres y cultivadas Se calcula que la tercera
parte de los alimentos de origen vegetal que consume el ser
humano son polinizados por insectos principalmente abejas La
polinizacioacuten que realizan las abejas en plantas cultivadas es
fundamental para la produccioacuten agriacutecola y asegura la produccioacuten
de alimentos Por otro lado las abejas participan en la
conservacioacuten de los ecosistemas ya que la actividad polinizadora
que realizan las abejas en plantas silvestres es fundamental para
el mantenimiento y la regeneracioacuten natural de los ecosistemas
Debido a la importancia que tiene la apicultura en nuestro paiacutes es
fundamental considerar cualquier situacioacuten que afecte la salud de
3
las abejas pues la desaparicioacuten de estos polinizadores significariacutea
un desastre en teacuterminos bioloacutegicos agronoacutemicos ecoloacutegicos y
econoacutemicos Preservar la salud de las abejas constituye un
desafiacuteo importante que merece toda nuestra atencioacuten
Virus
La investigacioacuten sobre los virus que afectan a las abejas es de
reciente desarrollo Estudios realizados en Suiza Francia
Alemania y EUA han demostrado que existe una correlacioacuten entre
la infeccioacuten por virus con el deterioro y la perdida de las colonias
de abejas lo que ha generado el intereacutes por identificar los
factores que favorecen el desarrollo de los virus que afectan la
salud de las abejas
La transmisioacuten de los virus en las abejas parece implicar diferentes
viacuteas tanto horizontales como verticales (Figura 1) Los virus
pueden afectar los diferentes estadios de desarrollo de las abejas
de una misma generacioacuten por transmisioacuten horizontal a traveacutes de
los siguientes medios alimento transmisioacuten oro-fecal
transmisioacuten sexual o por vectores Los virus tambieacuten pueden
transmitirse en forma vertical de una reina infectada a su
descendencia Ambas viacuteas de transmisioacuten se cree son estrategias
de supervivencia importantes para la persistencia y el
establecimiento de los virus en las poblaciones de abejas
4
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20
13
5
La inspeccioacuten de las colonias para detectar enfermedades es una
actividad importante dentro del manejo general de las abejas A
traveacutes la inspeccioacuten de las colonias se puede identificar signos que
indiquen que las abejas estaacuten enfermas y en algunos casos es
posible relacionar estos signos con el agente causal de la
enfermedad
Los principales signos en abejas adultas que indican que una
colonia se encuentra enferma son temblor de alas abejas
aleteando fuera de la colmena abejas con paraacutelisis progresiva y
abejas muertas cerca de la entrada de la colmena
En el caso de la criacutea los principales signos que indican la presencia
de una enfermedad son la presencia de un patroacuten salteado de
postura en los panales celdas con criacutea que presentan opeacuterculos
hundidos o perforados y cambios en el color normal de las criacuteas
(Figura 2)
Figura 2 a) Patroacuten de criacutea salteada y presencia de opeacuterculos hundidos y
perforados httpbeeinformedorgwp-contentuploads201210IMG_4295-AFB-Perforations-E-SMALLjpg b)
Patroacuten normal de postura de la criacutea Foto Leal HM 2014
La presencia de todos estos signos es uacutetil para identificar a una
colonia enferma sin embargo a traveacutes de estos no es posible
a) b)
6
llegar a obtener una etiologiacutea definitiva particularmente para el
caso de las enfermedades causadas por virus ya que para esto es
indispensable realizar un diagnoacutestico utilizando una prueba en el
laboratorio
Existen 24 virus reportados que afectan a las abejas de estos
siete son los considerados de mayor importancia con base en el
dantildeo que ocasionan a las colonias En Meacutexico se ha reportado la
presencia de seis de los siete virus maacutes importantes el Virus de la
Criacutea ensacada el Virus de las Celdas Reales Negras el Virus de las
Alas deformes el Virus de la Paraacutelisis Aguda el Virus de la Paraacutelisis
Aguda Israeliacute y el Virus de Cachemira
De forma importante las colonias de abejas pueden estar
infectadas por diferentes virus a la vez el resultado de infecciones
mixtas depende del nivel de interaccioacuten de cada virus con el
hueacutesped y entre los virus asiacute como factores medio ambientales
Usualmente las infecciones virales en abejas no se asocian a los
signos cliacutenicos en ciertos casos puede ocasionar una enfermedad
seria y ser mortal para algunas abejas o para la colonia
Virus de la Criacutea Ensacada
La criacutea ensacada es una enfermedad infecciosa causada por el
virus Morator aetatulas este virus se encuentra distribuido en
todos los continentes en donde existen abejas meliacuteferas (Apis
mellifera L) El virus de la criacutea ensacada afecta principalmente a
larvas de dos diacuteas de edad en las colonias infectadas se observan
panales con un patroacuten de criacutea salteado y celdas con criacutea que
7
presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
8
Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
22
Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
23
Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
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Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
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SECRETARIacuteA DE AGRICULTURA GANADERIacuteA
DESARROLLO RURAL PESCA Y ALIMENTACIOacuteN
Mtro Joseacute Eduardo Calzada Rovirosa
Secretario de Agricultura
Mtro Jorge Armando Narvaacuteez Narvaacuteez
Subsecretario de Agricultura
Mtro Ricardo Aguilar Castillo
Subsecretario de Alimentacioacuten y Competitividad
Mtro Heacutector Eduardo Velasco Monroy
Subsecretario de Desarrollo Rural
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Oficial Mayor
INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIONES
FORESTALES AGRIacuteCOLAS Y PECUARIAS
Dr Luis Fernando Flores Lui
Director General
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Coordinador de Planeacioacuten y Desarrollo
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Coordinador de Investigacioacuten Innovacioacuten y Vinculacioacuten
Mtro Eduardo Francisco Berterame Barquiacuten Coordinador de Administracioacuten y Sistemas
CENTRO NACIONAL DE INVESTIGACIOacuteN DISCIPLINARIA EN MICROBIOLOGIA ANIMAL
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PRINCIPALES ENFERMEDADES VIRALES EN ABEJAS
MELIacuteFERAS
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
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ISBN 978-607-37-0641-4
Foto de portada
Marisela Leal Hernaacutendez
Revisioacuten teacutecnica
MC Laura Jaramillo Meza
Dra Edith Rojas Anaya
MC Luis Goacutemez Nuacutentildeez
No estaacute permitida la reproduccioacuten total o parcial de esta publicacioacuten ni la
transmisioacuten de ninguna forma o por cualquier medio ya sea electroacutenico
mecaacutenico por fotocopia por registro u otros medios sin el permiso
previo y por escrito de la institucioacuten
1
Contenido
Importancia de las abejas 2
Virus 3
Virus de la Criacutea Ensacada 6
Virus de la Paraacutelisis Aguda 8
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica 9
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute 10
Virus de las Celdas Reales Negras 11
Virus de Cachemira 12
Virus de las Alas Deformes 13
Varroa destructor como vector de virus 15
Diagnoacutestico 17
Prevencioacuten 19
Literatura recomendada 21
2
Principales enfermedades virales
en abejas meliacuteferas
Importancia de las abejas
En Meacutexico la apicultura tiene una gran importancia social
econoacutemica y ecoloacutegica La produccioacuten nacional de miel alcanza las
58000 toneladas anuales en promedio en el paiacutes existen
aproximadamente 41000 apicultores y el inventario de colmenas
es de casi 2 millones Meacutexico es el quinto productor y el tercer
exportador de miel en el mundo la apicultura es una de las
principales actividades pecuarias generadoras de divisas
Generalmente la actividad apiacutecola es asociada con la produccioacuten
de miel polen jalea real y propoacuteleo sin embargo la actividad
tambieacuten es muy importante por la polinizacioacuten que realizan las
abejas en plantas silvestres y cultivadas Se calcula que la tercera
parte de los alimentos de origen vegetal que consume el ser
humano son polinizados por insectos principalmente abejas La
polinizacioacuten que realizan las abejas en plantas cultivadas es
fundamental para la produccioacuten agriacutecola y asegura la produccioacuten
de alimentos Por otro lado las abejas participan en la
conservacioacuten de los ecosistemas ya que la actividad polinizadora
que realizan las abejas en plantas silvestres es fundamental para
el mantenimiento y la regeneracioacuten natural de los ecosistemas
Debido a la importancia que tiene la apicultura en nuestro paiacutes es
fundamental considerar cualquier situacioacuten que afecte la salud de
3
las abejas pues la desaparicioacuten de estos polinizadores significariacutea
un desastre en teacuterminos bioloacutegicos agronoacutemicos ecoloacutegicos y
econoacutemicos Preservar la salud de las abejas constituye un
desafiacuteo importante que merece toda nuestra atencioacuten
Virus
La investigacioacuten sobre los virus que afectan a las abejas es de
reciente desarrollo Estudios realizados en Suiza Francia
Alemania y EUA han demostrado que existe una correlacioacuten entre
la infeccioacuten por virus con el deterioro y la perdida de las colonias
de abejas lo que ha generado el intereacutes por identificar los
factores que favorecen el desarrollo de los virus que afectan la
salud de las abejas
La transmisioacuten de los virus en las abejas parece implicar diferentes
viacuteas tanto horizontales como verticales (Figura 1) Los virus
pueden afectar los diferentes estadios de desarrollo de las abejas
de una misma generacioacuten por transmisioacuten horizontal a traveacutes de
los siguientes medios alimento transmisioacuten oro-fecal
transmisioacuten sexual o por vectores Los virus tambieacuten pueden
transmitirse en forma vertical de una reina infectada a su
descendencia Ambas viacuteas de transmisioacuten se cree son estrategias
de supervivencia importantes para la persistencia y el
establecimiento de los virus en las poblaciones de abejas
4
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20
13
5
La inspeccioacuten de las colonias para detectar enfermedades es una
actividad importante dentro del manejo general de las abejas A
traveacutes la inspeccioacuten de las colonias se puede identificar signos que
indiquen que las abejas estaacuten enfermas y en algunos casos es
posible relacionar estos signos con el agente causal de la
enfermedad
Los principales signos en abejas adultas que indican que una
colonia se encuentra enferma son temblor de alas abejas
aleteando fuera de la colmena abejas con paraacutelisis progresiva y
abejas muertas cerca de la entrada de la colmena
En el caso de la criacutea los principales signos que indican la presencia
de una enfermedad son la presencia de un patroacuten salteado de
postura en los panales celdas con criacutea que presentan opeacuterculos
hundidos o perforados y cambios en el color normal de las criacuteas
(Figura 2)
Figura 2 a) Patroacuten de criacutea salteada y presencia de opeacuterculos hundidos y
perforados httpbeeinformedorgwp-contentuploads201210IMG_4295-AFB-Perforations-E-SMALLjpg b)
Patroacuten normal de postura de la criacutea Foto Leal HM 2014
La presencia de todos estos signos es uacutetil para identificar a una
colonia enferma sin embargo a traveacutes de estos no es posible
a) b)
6
llegar a obtener una etiologiacutea definitiva particularmente para el
caso de las enfermedades causadas por virus ya que para esto es
indispensable realizar un diagnoacutestico utilizando una prueba en el
laboratorio
Existen 24 virus reportados que afectan a las abejas de estos
siete son los considerados de mayor importancia con base en el
dantildeo que ocasionan a las colonias En Meacutexico se ha reportado la
presencia de seis de los siete virus maacutes importantes el Virus de la
Criacutea ensacada el Virus de las Celdas Reales Negras el Virus de las
Alas deformes el Virus de la Paraacutelisis Aguda el Virus de la Paraacutelisis
Aguda Israeliacute y el Virus de Cachemira
De forma importante las colonias de abejas pueden estar
infectadas por diferentes virus a la vez el resultado de infecciones
mixtas depende del nivel de interaccioacuten de cada virus con el
hueacutesped y entre los virus asiacute como factores medio ambientales
Usualmente las infecciones virales en abejas no se asocian a los
signos cliacutenicos en ciertos casos puede ocasionar una enfermedad
seria y ser mortal para algunas abejas o para la colonia
Virus de la Criacutea Ensacada
La criacutea ensacada es una enfermedad infecciosa causada por el
virus Morator aetatulas este virus se encuentra distribuido en
todos los continentes en donde existen abejas meliacuteferas (Apis
mellifera L) El virus de la criacutea ensacada afecta principalmente a
larvas de dos diacuteas de edad en las colonias infectadas se observan
panales con un patroacuten de criacutea salteado y celdas con criacutea que
7
presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
8
Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
22
Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
23
Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
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Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
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cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
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PRINCIPALES ENFERMEDADES VIRALES EN ABEJAS
MELIacuteFERAS
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
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ISBN 978-607-37-0641-4
Foto de portada
Marisela Leal Hernaacutendez
Revisioacuten teacutecnica
MC Laura Jaramillo Meza
Dra Edith Rojas Anaya
MC Luis Goacutemez Nuacutentildeez
No estaacute permitida la reproduccioacuten total o parcial de esta publicacioacuten ni la
transmisioacuten de ninguna forma o por cualquier medio ya sea electroacutenico
mecaacutenico por fotocopia por registro u otros medios sin el permiso
previo y por escrito de la institucioacuten
1
Contenido
Importancia de las abejas 2
Virus 3
Virus de la Criacutea Ensacada 6
Virus de la Paraacutelisis Aguda 8
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica 9
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute 10
Virus de las Celdas Reales Negras 11
Virus de Cachemira 12
Virus de las Alas Deformes 13
Varroa destructor como vector de virus 15
Diagnoacutestico 17
Prevencioacuten 19
Literatura recomendada 21
2
Principales enfermedades virales
en abejas meliacuteferas
Importancia de las abejas
En Meacutexico la apicultura tiene una gran importancia social
econoacutemica y ecoloacutegica La produccioacuten nacional de miel alcanza las
58000 toneladas anuales en promedio en el paiacutes existen
aproximadamente 41000 apicultores y el inventario de colmenas
es de casi 2 millones Meacutexico es el quinto productor y el tercer
exportador de miel en el mundo la apicultura es una de las
principales actividades pecuarias generadoras de divisas
Generalmente la actividad apiacutecola es asociada con la produccioacuten
de miel polen jalea real y propoacuteleo sin embargo la actividad
tambieacuten es muy importante por la polinizacioacuten que realizan las
abejas en plantas silvestres y cultivadas Se calcula que la tercera
parte de los alimentos de origen vegetal que consume el ser
humano son polinizados por insectos principalmente abejas La
polinizacioacuten que realizan las abejas en plantas cultivadas es
fundamental para la produccioacuten agriacutecola y asegura la produccioacuten
de alimentos Por otro lado las abejas participan en la
conservacioacuten de los ecosistemas ya que la actividad polinizadora
que realizan las abejas en plantas silvestres es fundamental para
el mantenimiento y la regeneracioacuten natural de los ecosistemas
Debido a la importancia que tiene la apicultura en nuestro paiacutes es
fundamental considerar cualquier situacioacuten que afecte la salud de
3
las abejas pues la desaparicioacuten de estos polinizadores significariacutea
un desastre en teacuterminos bioloacutegicos agronoacutemicos ecoloacutegicos y
econoacutemicos Preservar la salud de las abejas constituye un
desafiacuteo importante que merece toda nuestra atencioacuten
Virus
La investigacioacuten sobre los virus que afectan a las abejas es de
reciente desarrollo Estudios realizados en Suiza Francia
Alemania y EUA han demostrado que existe una correlacioacuten entre
la infeccioacuten por virus con el deterioro y la perdida de las colonias
de abejas lo que ha generado el intereacutes por identificar los
factores que favorecen el desarrollo de los virus que afectan la
salud de las abejas
La transmisioacuten de los virus en las abejas parece implicar diferentes
viacuteas tanto horizontales como verticales (Figura 1) Los virus
pueden afectar los diferentes estadios de desarrollo de las abejas
de una misma generacioacuten por transmisioacuten horizontal a traveacutes de
los siguientes medios alimento transmisioacuten oro-fecal
transmisioacuten sexual o por vectores Los virus tambieacuten pueden
transmitirse en forma vertical de una reina infectada a su
descendencia Ambas viacuteas de transmisioacuten se cree son estrategias
de supervivencia importantes para la persistencia y el
establecimiento de los virus en las poblaciones de abejas
4
Figu
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20
13
5
La inspeccioacuten de las colonias para detectar enfermedades es una
actividad importante dentro del manejo general de las abejas A
traveacutes la inspeccioacuten de las colonias se puede identificar signos que
indiquen que las abejas estaacuten enfermas y en algunos casos es
posible relacionar estos signos con el agente causal de la
enfermedad
Los principales signos en abejas adultas que indican que una
colonia se encuentra enferma son temblor de alas abejas
aleteando fuera de la colmena abejas con paraacutelisis progresiva y
abejas muertas cerca de la entrada de la colmena
En el caso de la criacutea los principales signos que indican la presencia
de una enfermedad son la presencia de un patroacuten salteado de
postura en los panales celdas con criacutea que presentan opeacuterculos
hundidos o perforados y cambios en el color normal de las criacuteas
(Figura 2)
Figura 2 a) Patroacuten de criacutea salteada y presencia de opeacuterculos hundidos y
perforados httpbeeinformedorgwp-contentuploads201210IMG_4295-AFB-Perforations-E-SMALLjpg b)
Patroacuten normal de postura de la criacutea Foto Leal HM 2014
La presencia de todos estos signos es uacutetil para identificar a una
colonia enferma sin embargo a traveacutes de estos no es posible
a) b)
6
llegar a obtener una etiologiacutea definitiva particularmente para el
caso de las enfermedades causadas por virus ya que para esto es
indispensable realizar un diagnoacutestico utilizando una prueba en el
laboratorio
Existen 24 virus reportados que afectan a las abejas de estos
siete son los considerados de mayor importancia con base en el
dantildeo que ocasionan a las colonias En Meacutexico se ha reportado la
presencia de seis de los siete virus maacutes importantes el Virus de la
Criacutea ensacada el Virus de las Celdas Reales Negras el Virus de las
Alas deformes el Virus de la Paraacutelisis Aguda el Virus de la Paraacutelisis
Aguda Israeliacute y el Virus de Cachemira
De forma importante las colonias de abejas pueden estar
infectadas por diferentes virus a la vez el resultado de infecciones
mixtas depende del nivel de interaccioacuten de cada virus con el
hueacutesped y entre los virus asiacute como factores medio ambientales
Usualmente las infecciones virales en abejas no se asocian a los
signos cliacutenicos en ciertos casos puede ocasionar una enfermedad
seria y ser mortal para algunas abejas o para la colonia
Virus de la Criacutea Ensacada
La criacutea ensacada es una enfermedad infecciosa causada por el
virus Morator aetatulas este virus se encuentra distribuido en
todos los continentes en donde existen abejas meliacuteferas (Apis
mellifera L) El virus de la criacutea ensacada afecta principalmente a
larvas de dos diacuteas de edad en las colonias infectadas se observan
panales con un patroacuten de criacutea salteado y celdas con criacutea que
7
presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
8
Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
22
Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
23
Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
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Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
wwwinifapgobmx
1
Contenido
Importancia de las abejas 2
Virus 3
Virus de la Criacutea Ensacada 6
Virus de la Paraacutelisis Aguda 8
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica 9
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute 10
Virus de las Celdas Reales Negras 11
Virus de Cachemira 12
Virus de las Alas Deformes 13
Varroa destructor como vector de virus 15
Diagnoacutestico 17
Prevencioacuten 19
Literatura recomendada 21
2
Principales enfermedades virales
en abejas meliacuteferas
Importancia de las abejas
En Meacutexico la apicultura tiene una gran importancia social
econoacutemica y ecoloacutegica La produccioacuten nacional de miel alcanza las
58000 toneladas anuales en promedio en el paiacutes existen
aproximadamente 41000 apicultores y el inventario de colmenas
es de casi 2 millones Meacutexico es el quinto productor y el tercer
exportador de miel en el mundo la apicultura es una de las
principales actividades pecuarias generadoras de divisas
Generalmente la actividad apiacutecola es asociada con la produccioacuten
de miel polen jalea real y propoacuteleo sin embargo la actividad
tambieacuten es muy importante por la polinizacioacuten que realizan las
abejas en plantas silvestres y cultivadas Se calcula que la tercera
parte de los alimentos de origen vegetal que consume el ser
humano son polinizados por insectos principalmente abejas La
polinizacioacuten que realizan las abejas en plantas cultivadas es
fundamental para la produccioacuten agriacutecola y asegura la produccioacuten
de alimentos Por otro lado las abejas participan en la
conservacioacuten de los ecosistemas ya que la actividad polinizadora
que realizan las abejas en plantas silvestres es fundamental para
el mantenimiento y la regeneracioacuten natural de los ecosistemas
Debido a la importancia que tiene la apicultura en nuestro paiacutes es
fundamental considerar cualquier situacioacuten que afecte la salud de
3
las abejas pues la desaparicioacuten de estos polinizadores significariacutea
un desastre en teacuterminos bioloacutegicos agronoacutemicos ecoloacutegicos y
econoacutemicos Preservar la salud de las abejas constituye un
desafiacuteo importante que merece toda nuestra atencioacuten
Virus
La investigacioacuten sobre los virus que afectan a las abejas es de
reciente desarrollo Estudios realizados en Suiza Francia
Alemania y EUA han demostrado que existe una correlacioacuten entre
la infeccioacuten por virus con el deterioro y la perdida de las colonias
de abejas lo que ha generado el intereacutes por identificar los
factores que favorecen el desarrollo de los virus que afectan la
salud de las abejas
La transmisioacuten de los virus en las abejas parece implicar diferentes
viacuteas tanto horizontales como verticales (Figura 1) Los virus
pueden afectar los diferentes estadios de desarrollo de las abejas
de una misma generacioacuten por transmisioacuten horizontal a traveacutes de
los siguientes medios alimento transmisioacuten oro-fecal
transmisioacuten sexual o por vectores Los virus tambieacuten pueden
transmitirse en forma vertical de una reina infectada a su
descendencia Ambas viacuteas de transmisioacuten se cree son estrategias
de supervivencia importantes para la persistencia y el
establecimiento de los virus en las poblaciones de abejas
4
Figu
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al
20
13
5
La inspeccioacuten de las colonias para detectar enfermedades es una
actividad importante dentro del manejo general de las abejas A
traveacutes la inspeccioacuten de las colonias se puede identificar signos que
indiquen que las abejas estaacuten enfermas y en algunos casos es
posible relacionar estos signos con el agente causal de la
enfermedad
Los principales signos en abejas adultas que indican que una
colonia se encuentra enferma son temblor de alas abejas
aleteando fuera de la colmena abejas con paraacutelisis progresiva y
abejas muertas cerca de la entrada de la colmena
En el caso de la criacutea los principales signos que indican la presencia
de una enfermedad son la presencia de un patroacuten salteado de
postura en los panales celdas con criacutea que presentan opeacuterculos
hundidos o perforados y cambios en el color normal de las criacuteas
(Figura 2)
Figura 2 a) Patroacuten de criacutea salteada y presencia de opeacuterculos hundidos y
perforados httpbeeinformedorgwp-contentuploads201210IMG_4295-AFB-Perforations-E-SMALLjpg b)
Patroacuten normal de postura de la criacutea Foto Leal HM 2014
La presencia de todos estos signos es uacutetil para identificar a una
colonia enferma sin embargo a traveacutes de estos no es posible
a) b)
6
llegar a obtener una etiologiacutea definitiva particularmente para el
caso de las enfermedades causadas por virus ya que para esto es
indispensable realizar un diagnoacutestico utilizando una prueba en el
laboratorio
Existen 24 virus reportados que afectan a las abejas de estos
siete son los considerados de mayor importancia con base en el
dantildeo que ocasionan a las colonias En Meacutexico se ha reportado la
presencia de seis de los siete virus maacutes importantes el Virus de la
Criacutea ensacada el Virus de las Celdas Reales Negras el Virus de las
Alas deformes el Virus de la Paraacutelisis Aguda el Virus de la Paraacutelisis
Aguda Israeliacute y el Virus de Cachemira
De forma importante las colonias de abejas pueden estar
infectadas por diferentes virus a la vez el resultado de infecciones
mixtas depende del nivel de interaccioacuten de cada virus con el
hueacutesped y entre los virus asiacute como factores medio ambientales
Usualmente las infecciones virales en abejas no se asocian a los
signos cliacutenicos en ciertos casos puede ocasionar una enfermedad
seria y ser mortal para algunas abejas o para la colonia
Virus de la Criacutea Ensacada
La criacutea ensacada es una enfermedad infecciosa causada por el
virus Morator aetatulas este virus se encuentra distribuido en
todos los continentes en donde existen abejas meliacuteferas (Apis
mellifera L) El virus de la criacutea ensacada afecta principalmente a
larvas de dos diacuteas de edad en las colonias infectadas se observan
panales con un patroacuten de criacutea salteado y celdas con criacutea que
7
presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
8
Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
22
Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
23
Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
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Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
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2
Principales enfermedades virales
en abejas meliacuteferas
Importancia de las abejas
En Meacutexico la apicultura tiene una gran importancia social
econoacutemica y ecoloacutegica La produccioacuten nacional de miel alcanza las
58000 toneladas anuales en promedio en el paiacutes existen
aproximadamente 41000 apicultores y el inventario de colmenas
es de casi 2 millones Meacutexico es el quinto productor y el tercer
exportador de miel en el mundo la apicultura es una de las
principales actividades pecuarias generadoras de divisas
Generalmente la actividad apiacutecola es asociada con la produccioacuten
de miel polen jalea real y propoacuteleo sin embargo la actividad
tambieacuten es muy importante por la polinizacioacuten que realizan las
abejas en plantas silvestres y cultivadas Se calcula que la tercera
parte de los alimentos de origen vegetal que consume el ser
humano son polinizados por insectos principalmente abejas La
polinizacioacuten que realizan las abejas en plantas cultivadas es
fundamental para la produccioacuten agriacutecola y asegura la produccioacuten
de alimentos Por otro lado las abejas participan en la
conservacioacuten de los ecosistemas ya que la actividad polinizadora
que realizan las abejas en plantas silvestres es fundamental para
el mantenimiento y la regeneracioacuten natural de los ecosistemas
Debido a la importancia que tiene la apicultura en nuestro paiacutes es
fundamental considerar cualquier situacioacuten que afecte la salud de
3
las abejas pues la desaparicioacuten de estos polinizadores significariacutea
un desastre en teacuterminos bioloacutegicos agronoacutemicos ecoloacutegicos y
econoacutemicos Preservar la salud de las abejas constituye un
desafiacuteo importante que merece toda nuestra atencioacuten
Virus
La investigacioacuten sobre los virus que afectan a las abejas es de
reciente desarrollo Estudios realizados en Suiza Francia
Alemania y EUA han demostrado que existe una correlacioacuten entre
la infeccioacuten por virus con el deterioro y la perdida de las colonias
de abejas lo que ha generado el intereacutes por identificar los
factores que favorecen el desarrollo de los virus que afectan la
salud de las abejas
La transmisioacuten de los virus en las abejas parece implicar diferentes
viacuteas tanto horizontales como verticales (Figura 1) Los virus
pueden afectar los diferentes estadios de desarrollo de las abejas
de una misma generacioacuten por transmisioacuten horizontal a traveacutes de
los siguientes medios alimento transmisioacuten oro-fecal
transmisioacuten sexual o por vectores Los virus tambieacuten pueden
transmitirse en forma vertical de una reina infectada a su
descendencia Ambas viacuteas de transmisioacuten se cree son estrategias
de supervivencia importantes para la persistencia y el
establecimiento de los virus en las poblaciones de abejas
4
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20
13
5
La inspeccioacuten de las colonias para detectar enfermedades es una
actividad importante dentro del manejo general de las abejas A
traveacutes la inspeccioacuten de las colonias se puede identificar signos que
indiquen que las abejas estaacuten enfermas y en algunos casos es
posible relacionar estos signos con el agente causal de la
enfermedad
Los principales signos en abejas adultas que indican que una
colonia se encuentra enferma son temblor de alas abejas
aleteando fuera de la colmena abejas con paraacutelisis progresiva y
abejas muertas cerca de la entrada de la colmena
En el caso de la criacutea los principales signos que indican la presencia
de una enfermedad son la presencia de un patroacuten salteado de
postura en los panales celdas con criacutea que presentan opeacuterculos
hundidos o perforados y cambios en el color normal de las criacuteas
(Figura 2)
Figura 2 a) Patroacuten de criacutea salteada y presencia de opeacuterculos hundidos y
perforados httpbeeinformedorgwp-contentuploads201210IMG_4295-AFB-Perforations-E-SMALLjpg b)
Patroacuten normal de postura de la criacutea Foto Leal HM 2014
La presencia de todos estos signos es uacutetil para identificar a una
colonia enferma sin embargo a traveacutes de estos no es posible
a) b)
6
llegar a obtener una etiologiacutea definitiva particularmente para el
caso de las enfermedades causadas por virus ya que para esto es
indispensable realizar un diagnoacutestico utilizando una prueba en el
laboratorio
Existen 24 virus reportados que afectan a las abejas de estos
siete son los considerados de mayor importancia con base en el
dantildeo que ocasionan a las colonias En Meacutexico se ha reportado la
presencia de seis de los siete virus maacutes importantes el Virus de la
Criacutea ensacada el Virus de las Celdas Reales Negras el Virus de las
Alas deformes el Virus de la Paraacutelisis Aguda el Virus de la Paraacutelisis
Aguda Israeliacute y el Virus de Cachemira
De forma importante las colonias de abejas pueden estar
infectadas por diferentes virus a la vez el resultado de infecciones
mixtas depende del nivel de interaccioacuten de cada virus con el
hueacutesped y entre los virus asiacute como factores medio ambientales
Usualmente las infecciones virales en abejas no se asocian a los
signos cliacutenicos en ciertos casos puede ocasionar una enfermedad
seria y ser mortal para algunas abejas o para la colonia
Virus de la Criacutea Ensacada
La criacutea ensacada es una enfermedad infecciosa causada por el
virus Morator aetatulas este virus se encuentra distribuido en
todos los continentes en donde existen abejas meliacuteferas (Apis
mellifera L) El virus de la criacutea ensacada afecta principalmente a
larvas de dos diacuteas de edad en las colonias infectadas se observan
panales con un patroacuten de criacutea salteado y celdas con criacutea que
7
presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
8
Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
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7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
22
Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
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DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
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3
las abejas pues la desaparicioacuten de estos polinizadores significariacutea
un desastre en teacuterminos bioloacutegicos agronoacutemicos ecoloacutegicos y
econoacutemicos Preservar la salud de las abejas constituye un
desafiacuteo importante que merece toda nuestra atencioacuten
Virus
La investigacioacuten sobre los virus que afectan a las abejas es de
reciente desarrollo Estudios realizados en Suiza Francia
Alemania y EUA han demostrado que existe una correlacioacuten entre
la infeccioacuten por virus con el deterioro y la perdida de las colonias
de abejas lo que ha generado el intereacutes por identificar los
factores que favorecen el desarrollo de los virus que afectan la
salud de las abejas
La transmisioacuten de los virus en las abejas parece implicar diferentes
viacuteas tanto horizontales como verticales (Figura 1) Los virus
pueden afectar los diferentes estadios de desarrollo de las abejas
de una misma generacioacuten por transmisioacuten horizontal a traveacutes de
los siguientes medios alimento transmisioacuten oro-fecal
transmisioacuten sexual o por vectores Los virus tambieacuten pueden
transmitirse en forma vertical de una reina infectada a su
descendencia Ambas viacuteas de transmisioacuten se cree son estrategias
de supervivencia importantes para la persistencia y el
establecimiento de los virus en las poblaciones de abejas
4
Figu
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al
20
13
5
La inspeccioacuten de las colonias para detectar enfermedades es una
actividad importante dentro del manejo general de las abejas A
traveacutes la inspeccioacuten de las colonias se puede identificar signos que
indiquen que las abejas estaacuten enfermas y en algunos casos es
posible relacionar estos signos con el agente causal de la
enfermedad
Los principales signos en abejas adultas que indican que una
colonia se encuentra enferma son temblor de alas abejas
aleteando fuera de la colmena abejas con paraacutelisis progresiva y
abejas muertas cerca de la entrada de la colmena
En el caso de la criacutea los principales signos que indican la presencia
de una enfermedad son la presencia de un patroacuten salteado de
postura en los panales celdas con criacutea que presentan opeacuterculos
hundidos o perforados y cambios en el color normal de las criacuteas
(Figura 2)
Figura 2 a) Patroacuten de criacutea salteada y presencia de opeacuterculos hundidos y
perforados httpbeeinformedorgwp-contentuploads201210IMG_4295-AFB-Perforations-E-SMALLjpg b)
Patroacuten normal de postura de la criacutea Foto Leal HM 2014
La presencia de todos estos signos es uacutetil para identificar a una
colonia enferma sin embargo a traveacutes de estos no es posible
a) b)
6
llegar a obtener una etiologiacutea definitiva particularmente para el
caso de las enfermedades causadas por virus ya que para esto es
indispensable realizar un diagnoacutestico utilizando una prueba en el
laboratorio
Existen 24 virus reportados que afectan a las abejas de estos
siete son los considerados de mayor importancia con base en el
dantildeo que ocasionan a las colonias En Meacutexico se ha reportado la
presencia de seis de los siete virus maacutes importantes el Virus de la
Criacutea ensacada el Virus de las Celdas Reales Negras el Virus de las
Alas deformes el Virus de la Paraacutelisis Aguda el Virus de la Paraacutelisis
Aguda Israeliacute y el Virus de Cachemira
De forma importante las colonias de abejas pueden estar
infectadas por diferentes virus a la vez el resultado de infecciones
mixtas depende del nivel de interaccioacuten de cada virus con el
hueacutesped y entre los virus asiacute como factores medio ambientales
Usualmente las infecciones virales en abejas no se asocian a los
signos cliacutenicos en ciertos casos puede ocasionar una enfermedad
seria y ser mortal para algunas abejas o para la colonia
Virus de la Criacutea Ensacada
La criacutea ensacada es una enfermedad infecciosa causada por el
virus Morator aetatulas este virus se encuentra distribuido en
todos los continentes en donde existen abejas meliacuteferas (Apis
mellifera L) El virus de la criacutea ensacada afecta principalmente a
larvas de dos diacuteas de edad en las colonias infectadas se observan
panales con un patroacuten de criacutea salteado y celdas con criacutea que
7
presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
8
Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
23
Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
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Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
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FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
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2016
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20
13
5
La inspeccioacuten de las colonias para detectar enfermedades es una
actividad importante dentro del manejo general de las abejas A
traveacutes la inspeccioacuten de las colonias se puede identificar signos que
indiquen que las abejas estaacuten enfermas y en algunos casos es
posible relacionar estos signos con el agente causal de la
enfermedad
Los principales signos en abejas adultas que indican que una
colonia se encuentra enferma son temblor de alas abejas
aleteando fuera de la colmena abejas con paraacutelisis progresiva y
abejas muertas cerca de la entrada de la colmena
En el caso de la criacutea los principales signos que indican la presencia
de una enfermedad son la presencia de un patroacuten salteado de
postura en los panales celdas con criacutea que presentan opeacuterculos
hundidos o perforados y cambios en el color normal de las criacuteas
(Figura 2)
Figura 2 a) Patroacuten de criacutea salteada y presencia de opeacuterculos hundidos y
perforados httpbeeinformedorgwp-contentuploads201210IMG_4295-AFB-Perforations-E-SMALLjpg b)
Patroacuten normal de postura de la criacutea Foto Leal HM 2014
La presencia de todos estos signos es uacutetil para identificar a una
colonia enferma sin embargo a traveacutes de estos no es posible
a) b)
6
llegar a obtener una etiologiacutea definitiva particularmente para el
caso de las enfermedades causadas por virus ya que para esto es
indispensable realizar un diagnoacutestico utilizando una prueba en el
laboratorio
Existen 24 virus reportados que afectan a las abejas de estos
siete son los considerados de mayor importancia con base en el
dantildeo que ocasionan a las colonias En Meacutexico se ha reportado la
presencia de seis de los siete virus maacutes importantes el Virus de la
Criacutea ensacada el Virus de las Celdas Reales Negras el Virus de las
Alas deformes el Virus de la Paraacutelisis Aguda el Virus de la Paraacutelisis
Aguda Israeliacute y el Virus de Cachemira
De forma importante las colonias de abejas pueden estar
infectadas por diferentes virus a la vez el resultado de infecciones
mixtas depende del nivel de interaccioacuten de cada virus con el
hueacutesped y entre los virus asiacute como factores medio ambientales
Usualmente las infecciones virales en abejas no se asocian a los
signos cliacutenicos en ciertos casos puede ocasionar una enfermedad
seria y ser mortal para algunas abejas o para la colonia
Virus de la Criacutea Ensacada
La criacutea ensacada es una enfermedad infecciosa causada por el
virus Morator aetatulas este virus se encuentra distribuido en
todos los continentes en donde existen abejas meliacuteferas (Apis
mellifera L) El virus de la criacutea ensacada afecta principalmente a
larvas de dos diacuteas de edad en las colonias infectadas se observan
panales con un patroacuten de criacutea salteado y celdas con criacutea que
7
presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
8
Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
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FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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2016
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La inspeccioacuten de las colonias para detectar enfermedades es una
actividad importante dentro del manejo general de las abejas A
traveacutes la inspeccioacuten de las colonias se puede identificar signos que
indiquen que las abejas estaacuten enfermas y en algunos casos es
posible relacionar estos signos con el agente causal de la
enfermedad
Los principales signos en abejas adultas que indican que una
colonia se encuentra enferma son temblor de alas abejas
aleteando fuera de la colmena abejas con paraacutelisis progresiva y
abejas muertas cerca de la entrada de la colmena
En el caso de la criacutea los principales signos que indican la presencia
de una enfermedad son la presencia de un patroacuten salteado de
postura en los panales celdas con criacutea que presentan opeacuterculos
hundidos o perforados y cambios en el color normal de las criacuteas
(Figura 2)
Figura 2 a) Patroacuten de criacutea salteada y presencia de opeacuterculos hundidos y
perforados httpbeeinformedorgwp-contentuploads201210IMG_4295-AFB-Perforations-E-SMALLjpg b)
Patroacuten normal de postura de la criacutea Foto Leal HM 2014
La presencia de todos estos signos es uacutetil para identificar a una
colonia enferma sin embargo a traveacutes de estos no es posible
a) b)
6
llegar a obtener una etiologiacutea definitiva particularmente para el
caso de las enfermedades causadas por virus ya que para esto es
indispensable realizar un diagnoacutestico utilizando una prueba en el
laboratorio
Existen 24 virus reportados que afectan a las abejas de estos
siete son los considerados de mayor importancia con base en el
dantildeo que ocasionan a las colonias En Meacutexico se ha reportado la
presencia de seis de los siete virus maacutes importantes el Virus de la
Criacutea ensacada el Virus de las Celdas Reales Negras el Virus de las
Alas deformes el Virus de la Paraacutelisis Aguda el Virus de la Paraacutelisis
Aguda Israeliacute y el Virus de Cachemira
De forma importante las colonias de abejas pueden estar
infectadas por diferentes virus a la vez el resultado de infecciones
mixtas depende del nivel de interaccioacuten de cada virus con el
hueacutesped y entre los virus asiacute como factores medio ambientales
Usualmente las infecciones virales en abejas no se asocian a los
signos cliacutenicos en ciertos casos puede ocasionar una enfermedad
seria y ser mortal para algunas abejas o para la colonia
Virus de la Criacutea Ensacada
La criacutea ensacada es una enfermedad infecciosa causada por el
virus Morator aetatulas este virus se encuentra distribuido en
todos los continentes en donde existen abejas meliacuteferas (Apis
mellifera L) El virus de la criacutea ensacada afecta principalmente a
larvas de dos diacuteas de edad en las colonias infectadas se observan
panales con un patroacuten de criacutea salteado y celdas con criacutea que
7
presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
8
Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
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7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
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DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
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llegar a obtener una etiologiacutea definitiva particularmente para el
caso de las enfermedades causadas por virus ya que para esto es
indispensable realizar un diagnoacutestico utilizando una prueba en el
laboratorio
Existen 24 virus reportados que afectan a las abejas de estos
siete son los considerados de mayor importancia con base en el
dantildeo que ocasionan a las colonias En Meacutexico se ha reportado la
presencia de seis de los siete virus maacutes importantes el Virus de la
Criacutea ensacada el Virus de las Celdas Reales Negras el Virus de las
Alas deformes el Virus de la Paraacutelisis Aguda el Virus de la Paraacutelisis
Aguda Israeliacute y el Virus de Cachemira
De forma importante las colonias de abejas pueden estar
infectadas por diferentes virus a la vez el resultado de infecciones
mixtas depende del nivel de interaccioacuten de cada virus con el
hueacutesped y entre los virus asiacute como factores medio ambientales
Usualmente las infecciones virales en abejas no se asocian a los
signos cliacutenicos en ciertos casos puede ocasionar una enfermedad
seria y ser mortal para algunas abejas o para la colonia
Virus de la Criacutea Ensacada
La criacutea ensacada es una enfermedad infecciosa causada por el
virus Morator aetatulas este virus se encuentra distribuido en
todos los continentes en donde existen abejas meliacuteferas (Apis
mellifera L) El virus de la criacutea ensacada afecta principalmente a
larvas de dos diacuteas de edad en las colonias infectadas se observan
panales con un patroacuten de criacutea salteado y celdas con criacutea que
7
presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
8
Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
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KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
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DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
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presentan opeacuterculos hundidos y perforados Las criacuteas afectadas
inclinan ligeramente su cabeza hacia adelante y se observa un
cambio de color de blanco perlado a amarillo paacutelido
El virus ingresa a la larva por el tracto digestivo a traveacutes del
alimento contaminado que les proveen las abejas nodrizas
posteriormente pasa a la hemolinfa de donde se distribuye a los
tejidos musculares adiposos y nerviosos de la larva La infeccioacuten
por el virus interrumpe el proceso de muda de la larva impidiendo
que la cutiacutecula se desprenda formando un saco que se llena de
liacutequido llamado ecdisial el cual se forma bajo la cutiacutecula y que
contiene grandes cantidades de partiacuteculas virales volviendo
altamente infectivas a las criacuteas enfermas lo que provoca que se
detenga el desarrollo de la larva produciendo su muerte en la fase
de prepupa (figura 3) Posteriormente las prepupas muertas se
van deshidratando formando una costra o escama de color cafeacute
oscura o negra en la cual los virus pierden su capacidad de
infectar
El virus se transmite por contacto directo entre las abejas adultas
que adquieran partiacuteculas virales durante la limpieza de las celdas
estas no presentan signos de la enfermedad pero quedan como
portadoras del virus al almacenarlo en las glaacutendulas hipofariacutengeas
y diseminaacutendolo en el alimento que les proporcionan a las larvas
Tanto las infecciones iniciales como reinfecciones pueden ser
causadas por vectores bioloacutegicos como Varroa destructor y
Aethina tumida asiacute como por el pillaje la deriva y por praacutecticas de
manejo apiacutecola
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Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
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encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
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Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
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muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
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Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
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Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
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La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
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Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
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color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
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Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
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7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
22
Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
lealmariselainifapgobmx
Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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Figura 3 a) Criacutea enferma con signos caracteriacutesticos de la enfermedad de criacutea
ensacada en larvas cambio en la coloracioacuten y la acumulacioacuten de liacutequido ecdisial
entre el cuerpo de la larva y la cutiacutecula b) Criacutea sana con caracteriacutesticas
normales Wrigth 2013
Virus de la Paraacutelisis Aguda
La Paraacutelisis Aguda es una enfermedad ocasionada por el Virus de
la Paraacutelisis Aguda de las Abejas El virus puede afectar a todas las
etapas de desarrollo de la abeja y producir signos visibles en las
colonias Las abejas obreras enfermas no pueden volar y
generalmente se observan arrastraacutendose en el piso de la colmena
hacia la piquera o fuera de la colmena mostrando paraacutelisis y alas
temblorosas generalmente mueren dentro de uno a dos diacuteas
despueacutes
Existen informes que indican que anteriormente este virus no
representaba un problema para la apicultura El virus se podiacutea
a
b
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encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
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pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
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Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
22
Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
23
Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
lealmariselainifapgobmx
Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
contactoreprintcommx wwwreprintcommx
2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
wwwinifapgobmx
9
encontrar de forma natural en las colonias de abejas sin que estas
manifestaran signos cliacutenicos fue hasta que el virus establecioacute una
asociacioacuten con el aacutecaro Varroa destructor que se convirtioacute en un
problema para las abejas a nivel mundial Varroa es capaz de
transmitir el virus directamente en la hemolinfa mientras se
alimenta Las pupas de abeja que son infestadas por aacutecaros
portadores del virus mueren antes de alcanzar la edad adulta
Virus de la Paraacutelisis Croacutenica
El Virus de la Paraacutelisis Croacutenica fue uno de los primeros virus que
fueron aislados en las abejas y se transmite a traveacutes del alimento
o de las heridas Los signos de la infeccioacuten por este virus son
abejas obreras temblorosas que no vuelan y que se arrastran en
la entrada de la colmena las abejas presentan alas asimeacutetricas
sufren de disenteriacutea y mueren en pocos diacuteas Asimismo las abejas
se ven de color negro debido a peacuterdida de las vellosidades Los
signos del virus de la paraacutelisis croacutenica pueden ser confundidos con
los del virus de la paraacutelisis aguda con la diferencia de que en el de
la paraacutelisis croacutenica no estaacute relacionado con infestaciones de
Varroa destructor
La infeccioacuten del virus de la paraacutelisis croacutenica puede pasar
desapercibida aun en casos en que el 30 de las abejas de una
colonia esteacuten infectadas Muchas de las abejas adultas afectadas
mueren en el campo Debido a que los signos producidos por el
virus de la paraacutelisis croacutenica pueden persistir en las poblaciones de
colonias como infecciones inaparentes o latentes y ademaacutes ser
asociados a otras circunstancias como intoxicaciones con
10
pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
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Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
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Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
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La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
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Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
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color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
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Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
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DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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2016
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pesticidas para confirmar su presencia se requiere un diagnoacutestico
de laboratorio
Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute
El Virus de la Paraacutelisis Aguda Israeliacute fue identificado por primera
vez en colonias de abejas meliacuteferas en Israel en 2002 y en algunas
regiones del mundo ha sido identificado como una de las causas
del Siacutendrome del Colapso de las Colonias (CCD)
El virus puede ingresar a la abeja por viacutea oral y diseminarse por la
hemolinfa permaneciendo de forma latente de manera
subcliacutenica aunque en niveles altos puede ser altamente patoacutegeno
Los signos que se pueden observar en criacuteas son un
oscurecimiento del cuerpo y cese simultaacuteneo del desarrollo o
tener un desarrollo normal y presentar eventualmente una
muerte de manera suacutebita (Figura 4)
En abejas adultas los signos que se pueden observar son temblor
de alas abejas aleteando en la piquera abejas con signos de
paraacutelisis aguda causando incapacidad para volar Las abejas llegan
a presentar desorientacioacuten y mueren entre dos y siete diacuteas
despueacutes de la infeccioacuten disminuyendo con esto la poblacioacuten de las
abejas en la colonia
El virus de la paraacutelisis aguda israeliacute ha sido detectado en las
diferentes fases de desarrollo de las abejas asiacute como en las
diferentes castas (obreras zaacutenganos y reina) siendo capaz de
producir una mortalidad raacutepida y aguda en la criacutea y en abejas
adulta
11
Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
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Para mayor informacioacuten dirigirse a
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Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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2016
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Bajo ciertas condiciones este virus tiene efectos sineacutergicos con
otros patoacutegenos como Varroa destructor y Nosema sp
provocando una importante diseminacioacuten del virus dentro de las
colonias ocasionando que las abejas mueran y la produccioacuten de
miel disminuya
Figura 4 Seguimiento de la patogenicidad del virus de la paraacutelisis aguda israeliacute
durante el desarrollo de una pupa 0 a 96 horas los signos progresivos
observados de la enfermedad fueron oscurecimiento de las partes del cuerpo y
cese simultaacuteneo del desarrollo pupal Imagen modificada de Boncristiani et al 2013
Virus de las Celdas Reales Negras
El Virus de las Celdas Reales Negras afecta principalmente a
prepupas o pupas de reina Cuando una criacutea de reina se ve
afectada la celda real adquiere un tono castantildeo oscuro a negro
En las primeras etapas de la infeccioacuten las pupas afectadas
presentan un color amarillo paacutelido y un tegumento duro en forma
de saco el cual se asemeja al de las prepupas de obrera que
mueren por la infeccioacuten del virus de la criacutea ensacada finalmente
cuando la criacutea de reina muere se forma una escama oscura que
presenta la segmentacioacuten del cuerpo de la pupa
0 24 48 72 96
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Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
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Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
23
Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
lealmariselainifapgobmx
Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
contactoreprintcommx wwwreprintcommx
2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
wwwinifapgobmx
12
Este virus se transmite por viacutea oral a traveacutes de la trofolaxia al ser
alimentadas por las abejas nodrizas y por el alimento
contaminado Se presenta con mayor frecuencia en las colmenas
incubadoras que se utilizan para criar reinas en forma artificial que
no tienen reina ni criacutea en estado larvario
Es comuacuten encontrar al virus en abejas adultas y pupas de obrera
sin embargo solo afecta a pupas de reina el virus de las celdas
reales negras no se multiplica faacutecilmente en larvas de obreras o de
zaacutenganos ni cuando se inyecta en obreras o zaacutenganos adultos
Virus de Cachemira
El virus de Cachemira se ha detectado en abejas adultas y en criacuteas
de forma natural el virus persiste en tiacutetulos bajos sin signos
evidentes en las abejas o a nivel de colonia El virus no ha sido
asociado con un signo cliacutenico especiacutefico
Se desconoce queacute tan grave es el problema causado por este
virus De forma experimental al alimentar larvas con partiacuteculas del
virus su desarrollo hacia abejas adultas fue normal sin infeccioacuten
aparente sin embargo en abejas adultas los tiacutetulos se
multiplicaron cuando se alimentaron o se les inyectaron partiacuteculas
purificadas del virus y murieron dentro de los seis diacuteas siguientes
Lo anterior sugiere que la patologiacutea y la virulencia dependen de la
viacutea de transmisioacuten
El virus de cachemira parece ser el maacutes virulento de todos los
virus conocidos hasta ahora que afectan a las abejas meliacuteferas ya
que menos de 100 partiacuteculas virales son necesarias para causar la
13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
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Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
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7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
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Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
contactoreprintcommx wwwreprintcommx
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Impreso y Hecho en Meacutexico
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13
muerte en abejas adultas y pupas en tan soacutelo tres diacuteas El virus de
cachemira estaacute estrechamente vinculado seroloacutegica bioloacutegica y
geneacuteticamente con el VPA ambos virus pueden coexistir dentro de
la misma colonia y auacuten dentro de la misma abeja sus diferencias
se presentan a nivel de las proteiacutenas de caacutepside y son faacutecilmente
distinguibles pero soacutelo con el uso de teacutecnicas de laboratorio
Virus de las Alas Deformes
El Virus de las Alas Deformes es el patoacutegeno viral maacutes persistente
en colonias de abejas Este virus se ha reportado en Europa
Aacutefrica Asia y Ameacuterica El virus se propaga lentamente y las pupas
infectadas pueden presentar deformidad en las alas al emerger
como insectos adultos lo que les ocasiona incapacidad para volar
y una muerte prematura (Figura5)
La mayoriacutea de las abejas infectadas no muestran signos sin
embargo bajo condiciones de laboratorio se han inyectado pupas
con partiacuteculas del virus de las alas deformes y como resultado
emergen adultos con las alas deformes La enfermedad y la
mortalidad de abejas asociada a este virus se ha reportado en
colonias con niveles de infestacioacuten de Varroa destructor elevados
aunque tambieacuten se han reportado casos en los que se detecta el
virus en colonias de abejas que no han sido expuestas al aacutecaro lo
que siacute se sabe es que la presencia de varroa aumenta la
propagacioacuten del virus a traveacutes de las poblaciones de abejas
14
Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
22
Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
23
Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
lealmariselainifapgobmx
Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
contactoreprintcommx wwwreprintcommx
2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
wwwinifapgobmx
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Figura 5 Abeja con las alas deformadas ocasionada por el VAD Imagen tomada de
Wrigth 2013
15
Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
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Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
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Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
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KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
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DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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Impreso y Hecho en Meacutexico
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Varroa destructor como vector de virus
El papel de varroa como vector en la transmisioacuten de la mayoriacutea de
los virus estaacute bien documentado se ha demostrado que el aacutecaro
es capaz de transmitir el virus de la paraacutelisis aguda virus de
cachemira virus de la paraacutelisis aguda israeliacute virus de las alas
deformes y virus de la paraacutelisis lenta ya que el aacutecaro los puede
adquirir de una abeja infectada y transferirlos a otra abeja cuando
se alimenta eludiendo de esta forma las barreras naturales para
la transmisioacuten de virus entre abejas
Varroa destructor utiliza su aparato bucal para perforar la cutiacutecula
de las abejas y las criacuteas para alimentarse succionando hemolinfa
durante este proceso el aacutecaro puede transferir las partiacuteculas del
virus ademaacutes de provocar un debilitamiento e inmunosupresioacuten
del hueacutesped que pueden inducir cambios conductuales y de
desarrollo con consecuencias a nivel de la abeja y de toda la
colonia Esta forma de alimentacioacuten le confiere a la varroa el
potencial para actuar como vector no solo de virus sino tambieacuten
de otras enfermedades
Figura 6 Varroas sobre el cuerpo de una criacutea de abeja Foto Bacilio LE 2014
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
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Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
lealmariselainifapgobmx
Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
contactoreprintcommx wwwreprintcommx
2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
wwwinifapgobmx
16
La infestacioacuten por Varroa destructor es considerada como el
principal factor predisponente para la presencia de virus en una
colonia por su papel como vector en la mayoriacutea de los virus sin
embargo se debe tener en cuenta que otras circunstancias
tambieacuten juegan un papel importante en las manifestaciones
cliacutenicas de las enfermedades virales como son por ejemplo
intoxicaciones por pesticidas el clima friacuteo e infestaciones por
otros microorganismos como Nosema spp
17
Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
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Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
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Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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Diagnoacutestico
Dentro del manejo sanitario de un apiario es esencial que se lleve
a cabo el diagnoacutestico de las enfermedades de las abejas para
conocer el estado de salud de las mismas y establecer medidas
adecuadas de prevencioacuten y control
a) Diagnostico Presuntivo o Cliacutenico
La presencia de signos o cambios en la apariencia de la criacutea y de
las abejas adultas asiacute como cambios en el comportamiento de las
abejas adultas es el principal meacutetodo de diagnoacutestico empleado en
el apiarios para detectar la presencia de alguna enfermedad viral
Este meacutetodo tiene como ventaja que es simple raacutepido y barato
pero su principal desventaja es que soacutelo aplica para enfermedades
cuyos signos son muy caracteriacutesticos ya que algunos virus no
presentan signos visibles en todo momento ni en todas las etapas
de la vida de las abejas y pueden permanecer latentes por largos
periacuteodos sin ocasionar dantildeo aparente para las abejas
b) Diagnoacutestico de Laboratorio
Para establecer un diagnoacutestico definitivo es necesario realizar un
anaacutelisis de laboratorio y asiacute demostrar la presencia de virus
Actualmente en el CENID Microbiologiacutea del INIFAP se cuenta con
la tecnologiacutea para realizar el diagnoacutestico de enfermedades virales
que afectan a las abejas empleando pruebas de deteccioacuten del
genoma viral como la transcripcioacuten en reversa de la reaccioacuten en
cadena de la polimerasa (RT-PCR)
Para realizar el diagnoacutestico en muestras de criacuteas de abejas
primeramente se debe realizar una observacioacuten minuciosa de las
celdas del aacuterea de criacutea y detectar alteraciones como cambios de
18
color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Centro Nacional de Investigacioacuten Disciplinaria en Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
Meacutexico DF
Para mayor informacioacuten dirigirse a
DRA MARISELA LEAL HERNAacuteNDEZ
lealmariselainifapgobmx
Laboratorio de Bacteriologiacutea INIFAP CENID Microbiologiacutea Animal
KM 155 Carretera Meacutexico Toluca Col Palo Alto Delegacioacuten Cuajimalpa
cp 05110 Meacutexico DF
FINANCIADO POR PROYECTO RECURSOS FISCALES INIFAP 15534431993
DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
contactoreprintcommx wwwreprintcommx
2016
Impreso y Hecho en Meacutexico
wwwinifapgobmx
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color criacuteas enroscadas en las paredes de las celdas o criacuteas
momificadas Para la coleccioacuten de muestras se debe utilizar
guantes de laacutetex desechaacutendolos entre cada colonia se debe cortar
un trozo de panal de 10 x 10 cm que tenga celdas con criacutea
afectada envuelto en papel y dentro de una caja de cartoacuten
En el caso de las abejas adultas se debe observar si hay abejas
agonizando o arrastraacutendose en la entrada de la colmena con
cambios de coloracioacuten del cuerpo o desprovistas de vellosidades
Es necesario tomar muestras de aproximadamente 50 abejas en
cajas de cartoacuten La muestra debe incluir abejas que presenten
signos y o abejas aparentemente sanas
Las cajas de cartoacuten con muestras tanto de criacutea como de abejas
adultas se deben colocar dentro de una hielera con refrigerantes y
trasladarlas al laboratorio lo maacutes pronto posible para que las
muestras sean procesadas antes de 48 hrs despueacutes de haber sido
tomada la muestra Es indispensable que junto con las muestras
se remita la historia cliacutenica completa escrita a laacutepiz dentro de una
bolsa de plaacutestico para evitar que se borre la informacioacuten si llegara
a mojarse
La importancia de realizar una deteccioacuten oportuna mediante el
diagnoacutestico de laboratorio es para poder establecer estrategias de
prevencioacuten y control para evitar peacuterdidas de abejas obreras en las
colonias que acarrean peacuterdidas en la produccioacuten de miel Con las
herramientas de diagnoacutestico molecular que se emplean
actualmente se pueden identificar virus en muestras de abejas
aparentemente sanas incluso cuando estos virus se encuentran
en niveles bajos
19
Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
20
7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Prevencioacuten
La mayor parte de enfermedades de las abejas se han propagado
a todas las zonas de produccioacuten por el movimiento de las abejas
(colonias nuacutecleos y reinas) material e insumos apiacutecolas Para
evitar la diseminacioacuten de enfermedades virales es necesario
tomar medidas adecuadas de manejo con la finalidad de evitar la
introduccioacuten de nuevas enfermedades en el apiario y su
diseminacioacuten entre las colonias por lo que se recomienda
1 Vigilancia y muestreo para detectar signos de
enfermedades o cambios de comportamiento de las
abejas
2 Realizar el control de la varroosis con tratamientos
autorizados por la SAGARPA siguiendo las
recomendaciones e instrucciones para su manejo
adecuado para evitar la contaminacioacuten de la miel y el
desarrollo de resistencia al producto por parte del aacutecaro
3 Cambiar las reinas de colonias enfermas por reinas criadas
a partir de colonias sanas que presenten una buena
produccioacuten de criacutea y miel
4 Realizar el cambio anual de reinas y que provengan de
criaderos certificados
5 No adquirir reinas colonias y equipo usado de origen
desconocido
6 Mantener colmenas (cajas tapas y pisos) en buen estado
para evitar la entrada de agua y aire friacuteo Reparar grietas
usar tapas que ajusten bien y reducir la piquera permite
conservar la temperatura del nido
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7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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cp 05110 Meacutexico DF
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DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
LAS PRINCIPALES ZONAS APICOLAS DE MEXICO
Este folleto consta de 1000 ejemplares y se terminoacute de imprimir en Reproducciones instantaacuteneas SA de C V
Andreacutes Quintana Roo Sur No 511 Col Francisco Murguiacutea Toluca Meacutexico Tels 01 (7229 214 5386 Y 2078187
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7 En un apiario revisar al final de la jornada a las colonias
sospechosas o enfermas
8 Al final del trabajo en cada apiario desinfectar con fuego
las herramientas (cuntildea)
9 Realizar el cambio de panales viejos por cera estampada
de origen conocido y destruir con fuego los panales viejos
sobre todo aquellos que contengan criacuteas enfermas
10 Tomar todas las precauciones para evitar el pillaje en el
apiarios no dejando pedazos de cera o propoacuteleo en el
suelo
11 No utilizar equipo infectado con otras colmenas
12 Evitar manejos innecesarios para reducir el estreacutes a las
colonias
13 Mantener colonias fuertes con reinas joacutevenes y bien
alimentadas
21
Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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DETECCION DE LOS VIRUS PRESENTES EN ABEJAS (APIS MELLIFERA) EN
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Literatura recomendada Amiri E Meixner M Nielsen SL Kryger P Four Categories of Viral Infection Describe the Health Status of Honey Bee Colonies PLoS ONE 2015 (10) e0140272 httpdoi101371journalpone0140272 Bailey L Patologiacutea de las abejas Espantildea Acribia 1984 Benjeddou M Leat N Allsopp M y Davison S Detection of Acute Bee Paralysis Virus and Black Queen Cell Virus from Honeybees by Reverse Transcriptase PCR Appl Environ Microbiol 2001 67 (5) 2384ndash2387
Bereacutenyi O Bakonyi T Derakhshifar I Koumlglberger H and Nowotny N Occurrence of Six Honeybee Viruses in Diseased Austrian Apiaries Appl Environ Microbiol 2006 7242414-2420 Boncristiani HF Evans JD Chen Y Pettis J Murphy C et al In Vitro Infection of Pupae with Israeli Acute Paralysis Virus Suggests Disturbance of Transcriptional Homeostasis in Honey Bees (Apis mellifera) PLoS ONE 2013 8 (9) e73429 Carrillo-Tripp J et al In vivo and in vitro infection dynamics of honey bee viruses Sci Rep 6 22265 doi 101038srep22265 (2016) Chen YP Siede R Honey Bee Viruses Advances in Virus Research Elsevier Ed USA Academic Press 2007 PP 33-80 De Miranda J R Bailey L Ball B V Blanchard P Budge G Chejanovsky N Chen Y-P Gauthier L Genersch E De Graaf D Ribiegravere M Ryabov E De Smet L Van Der Steen J J M (2013) Standard methods for virus research in Apis mellifera In V Dietemann J D Ellis P Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK Volume II standard methods for Apis mellifera pest and pathogen research J Apic Res 52(4) httpdxdoiorg103896IBRA152422 Di Prisco Pennacchio F Caprio E Boncristiani HF Evans J and Chen Y Varroa destructor is an effective vector of Israeli acute paralysis virus in the honeybee Apis mellifera J Gen Virol (2011) 92 151ndash155 Enfermedades de las abejas En Fichas de informacioacuten general sobre enfermedades animales OIE Consultado en wwwoieintfileadminHomeespMedia_CenterdocspdfDisease_cardsBEES-ESpdf Food and Agriculture Organization of the United Nations Honey bee diseases and pests a practical guide Agricultural and food technical engineering report 4 Italy (Rome) FAO 2006 Genersch E Aubert M Emerging and re-emerging viruses of the honey bee (Apis mellifera L) Vet Res 2010 41-54 Highfield AC Nagar AE Mackinder LC Noeumll LMJ Hall MJ Martiacuten SJ and Schroeder DC Deformed Wing Virus Implicated in overwintering honeybee Colony Losses Appl Environ Microbiol 2009 75(22)7212-20
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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Leal HM Conceptos baacutesicos en salud animal En Leal HM y Arechavaleta VME Principales enfermedades de las abejas en Meacutexico 2013 27-39 Manual de Buenas praacutecticas pecuarias en la produccioacuten de miel SAGARPA 3a edicioacuten 2015 Consultado en httpsenasicagobmxdoc=21454 Palacios G J Hui P L Quan A Kalkstein K S Honkavuori A V Bussetti S Conlan J Evans Y P Chen D vanEngelsdorp H Efrat J Pettis D Cox-FosterE C HolmesT Briese and W I Lipkin Genetic Analysis of Israel Acute Paralysis Virus Distinct Clusters Are Circulating in the United States J Virol2008 82 13 6209-6217 Ribiegravere M Olivier V Blanchard P Chronic bee paralysis A disease and a virus like no other J Invertebr Pathol 2010 103 S120-S131 Ritter W Enfermedades de las abejas Espantildea Editorial Acribia 2001 Schoumlning C Gisder S Geiselhardt S Kretschmann I Bienefeld K Hilker M Genersch E Evidence for damage-dependent hygienic behaviour towards Varroa destructor-parasitised brood in the western honey bee Apis mellifera J Experm Biol 2012 215 264-271 Shen M Cui L Ostiguy N y Cox-Foster D Intricate transmission routes and interactions between picorna-like viruses (Kashmir bee virus and sacbrood virus) with the honeybee host and the parasitic varroa mite J Gen Virol 2005 86 2281ndash2289 Shen M Yang X Cox-Foster D Cui L The role of varroa mites in infections of Kashmir bee virus (KBV) and deformed wing virus (DWV) in honey bees Virol 2005 342 141 ndash 149 Van Engelsdorp D Hayes J Jr Underwood RM Pettis J A survey of honey bee colony losses in the US fall 2007 to spring 2008 PLoS One 2008 3(12) e 4071 httpwwwncbinlmnihgovpubmed19115015 Ward L Waite R Boonham N Fisher T Pescod K Thompson H Chantawannakul P and Brown M First detection of Kashmir bee virus in the UK using real-time PCR Apidol 2007 38 181ndash190 Wilfert L Long G Leggett HC Schmid-Hempel P Butlin R Martin SJ Boots M Deformed wing virus is a recent global epidemic in honeybees driven by varroa mites Science 2016 351(6273)594-597 doi 101126scienceaac9976 Wrigth E (2013) The effect of pathogens on honeybee learning and foraging behavior PhD Tesis University of Warwick
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