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Diagnóstico microbiológico indirecto y i inmunidad humoral

Alba Miriam Poche Ceballos Estudiante Inmunodiagnóstico Veterinario, LCV UDCA


INMUNIDAD HUMORAL

Imagen tomada del artículo métodos fisicoquímicos en biotecnología. Universidad nacional Autónoma de México.

Cuando hablamos de la inmunidad humoral nos referimos a la respuesta de un individuo frente a a la presencia de un agente causante de infección. Debido a que la inmunidad humoral esta mediada por los anticuerpos. Aquellos anticuerpos que son producidos como mecanismo de defensa. Y que estos son producidos por los linfocitos T o células de la inmunidad celular. Aunque también se dice que pueden ser anticuerpos con memoria inmunológica. Teniendo en cuenta que para la inmunidad humeral también forman parte las inmunoglobulinas A, B y M, que estas son producidas por células plasmáticas del retículo endotelial ósea los linfocitos B maduros.

Adicional a ello también se debe tener en cuenta que también existe un sistema de complemento encargado de la activación de los linfocitos B. para que después sean activados los mecanismos de anticuerpos. Estos anticuerpos se dividen en diferentes tipos según su estructura y función: una de las especificaciones más claras son los de clase IgG que predominan en la circulación y que además persisten durante muchos años después de la exposición. Mientras que los de clase IgM son los primeros anticuerpos específicos en aparecer como respuesta a la infección pero no se mantiene con picos elevados y que después de un tiempo pueden desaparecer. Cuando hablamos de la IgA es la encargada de la inmunidad en las superficies mucosas, mientras que la IgE es importante en las enfermedades alérgicas y parasitarias. Estos anticuerpos pueden actuar directamente, impidiendo la función de un microorganismo invasor, neutralizando las toxinas y enzimas secretadas o facilitando la eliminación del antígeno por las células fagocitarias.



Tipo de técnica de evaluación inmunidad humoral

Serología: dentro de esta podemos ubicar métodos como: inmunofluorescencia, aglutinación o enzimoinmunoanálisis, más inhibición de la hemólisis o fijación del complemento, con el objetivo de detectar el nivel de anticuerpos presentes en el suero, especialmente las IgM o IgG que actúan contra antígenos de superficie, teniendo en cuenta que es un marcador indirecto y que adicionalmente a ello se puede dividir en dos grupos según su objetivo:

- El primer grupo tiene como objetivo determinar la presencia de anticuerpos protectores. Por tal razón es valorado como un método cualitativo.

- El segundo grupo tiene como objetivo mider los cambios cuantitativos en los títulos de anticuerpos durante la infección. Para ello se deben manejar muestras pareadas, una durante la fase aguda y otra en la fase de convalecencia.

Inmunofluorescencia: Es una de las técnica que se utiliza para la identificación rápida de un antígeno, exponiéndolo a anticuerpos conocidos marcados con fluoresceína y observando la característica reacción de la precipitación antígeno-anticuerpo.

Existen 2 tipos que podemos clasificar en:

Directa; cuando el anticuerpo se acopla con fluoresceína y se expone al antígeno y esa unión permite ver estructura o microorganismos.

Indirecta; El método indirecto es utilizado con un anticuerpo sin marcar llamado diana, que se une a un antígeno específico, adicionalmente a esa reacción se le añaden varios anticuerpos policlonales marcados con fluorescina que tienen afinidad por el anticuerpo diana.

Imagen tomada del artículo métodos fisicoquímicos en biotecnología.



Aglutinación : técnica que funciona como resultado de su interacción con anticuerpos específicos denominados aglutininas. Que puede detectar proteínas o polisacáridos antigénicos. Este método puede realizarse directamente sobre muestras clínicas.


EIA (Enzimoinmunoanálisis): Este método consiste en la asociación de un anticuerpo con una enzima, donde esta asociación produce una reacción que convierte un sustrato incoloro en un producto final coloreado, lo que confirma que se ha producido la unión y por tanto aumenta la sensibilidad del análisis. Es utilizado para detectar toxinas bacterianas, proteínas y polisacáridos antigénicos de microorganismos.


Radioinmunoensayo RIE: Esta es una técnica radiológica que se utiliza para determinar las concentraciones de un antígeno, un anticuerpo o algún tipo de proteína en el suero.




ELISA : Este es un análisis de inmunoabsorción ligada a enzimas que busca detectar antígenos o anticuerpos específicos utilizando inmunoreactivos.

Inmunoblot o westernblot: Técnica que se utiliza para aislar proteínas mezcladas en una muestra. Donde lo primero que se hace es separar las proteínas unas de otras mediante una electroforesis en gel, este debe manejarse con el criterio de peso molecular. Después de este primer paso, pasan a una membrana absorbente en donde se exponen a un anticuerpo asociado a una enzima o a fluoresceína que se une a una proteína en especial y permite confirmar la presencia de la proteína en cuestión mediante la amplificación de la detección.


Modalidades: están caracterizadas por presentarse de forma directa o indirecta. Donde la gran mayoría reacciona de forma indirecta; y lo hace a través de la medición de la reacción antígeno - anticuerpo debido a que esta es la forma de evaluar cómo está funcionando el mecanismo de inmunidad o defensa.



Mientras que la modalidad directa: está basada en la identificación de la estructura del microorganismo como tal.

Principios en que se basan: en la creación de anticuerpos de memoria con el fin de que; en el momento de que se presente el microorganismo causante de la enfermedad o infección. El sistema inmunológico reaccione de forma completa buscando inhibir el crecimiento y proliferación del microorganismo, ya que activa el mecanismo de defensa detectando los anticuerpos e inmediatamente activa la inmunidad humoral para que ayude a combatir la infección.

Aplicaciones: pueden ser empleadas para la determinación de antígeno-anticuerpo en enfermedades como DVB, IBR, BRUCELLA ect. Que permiten la valoración y adicionalmente a ello el diagnóstico e interpretación de títulos presentes de la inmunidad humoral.

Lectura e interpretaciones diagnósticas: las lecturas e interpretaciones van de acuerdo a los títulos expresados por cada técnica donde especifica de que valor o porcentaje pasa a ser un animal o individuo positivo o negativo ya que lo que mide son los títulos presentes.

Referencias bibliográficas

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Calderón P. Rocío V. Junio 2007. Instituto de biotecnología, universidad

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Carvalho Gomes, P.A., 2000, Surface plasmon resonance as a tool in the functional analysis of an immunodominant site in foot-and-mouth disease virus, Tesis de doctorado, Universitat de Barcelona

Vélez H. et al. Enfermedades Infecciosas. Corporación para investigaciones Biológicas. Medellín, 1991.


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