prÁctica 1 fisiología vegetal
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Pascual Del Campo Gracia Diego Ibáñez Martínez
PRÁCTICA 1: MEDIDA DEL POTENCIAL HÍDRICO
Objetivo: Determinación del potencial hídrico de la patata (Solanum tuberosum L).
Material y métodos: Para llevar a cabo la práctica necesitamos preparar seis
disoluciones de 20ml de sacarosa con las concentraciones 0.1, 0.15, 0.2, 0.25, 0.3 y 0.4
molal en tubos de ensayo grandes. Partimos de una solución stock de sacarosa 1m.
Una vez preparadas las disoluciones, sacamos 10ml de cada tubo de ensayo y pasamos
6ml a un tubo mediano y 4ml a un tubo pequeño. Numeramos los tubos. También
tenemos que obtener 12 cilindros de patata de 2cm de longitud, para ello empleamos
el sacabocados de 1cm de diámetro.
Realizamos la medida del potencial hídrico de la patata de dos formas: midiendo los
cambios de peso producidos en los cilindros de patata por la variación de su contenido
en agua, y observando los cambios de densidad de la solución producidos por el
intercambio de agua con los cilindros de patata (método de Chardakov).
-Método de Chardakov: añadimos 1 gota de azul de metileno a cada tubo de ensayo
mediano e introducimos un cilindro de patata en cada uno. Transcurridos 15 minutos,
agitamos los tubos y extraemos una alícuota con la pipeta Pasteur. Introducimos la
punta de la pipeta Pasteur hasta la mitad del tubo de ensayo pequeño con la solución
correspondiente y soltamos una gota de la solución azul. Retiramos la pipeta y
observamos, sobre un fondo blanco, si la gota sube, se mantiene, o baja en el tubo.
Repetimos la misma operación transcurridos otros 15 minutos. Anotamos los
resultados.
-Método del cambio de peso: cogemos los 6 cilindros de patata que nos quedan, los
pesamos en la balanza de precisión e introducimos uno en cada tubo de ensayo
grande. Agitamos los tubos cada 10 minutos. Una vez transcurridos 60 minutos,
extraemos los cilindros de patata, les quitamos el exceso de agua con papel de filtro y
los volvemos a pesar. A continuación calculamos el incremento de peso, que nos
servira para calcular potencial hídrico de nuestra patata.
Resultados: En el método de cambio de densidad (método de Chardakov), podemos
determinar que el potencial hídrico de la patata lo calcularíamos para la concentración
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Pascual Del Campo Gracia Diego Ibáñez Martínez
de sacarosa en la cual la gota de solución vertida permanezca suspendida, sin subir ni
bajar. Los resultados obtenidos los podemos ver en la Tabla 1, en la cual se representa
con símbolos azules los datos tomados a los 15 minutos y con símbolos rojos los
obtenidos a los 30 minutos. No es un método muy preciso.
Tabla 1. Movimiento de la gota (Método de Chardakov)
MOLALIDAD
GRUPO 1
GRUPO 2
GRUPO 3
GRUPO 4
GRUPO 5
GRUPO 6
GRUPO 7
GRUPO 8
0,10 = = = ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ ↑ ↑ ↓ ↓ = ↓ ↓ ↓0,15 = ↓ = = ↑ ↑ = = ↑ ↑ ↓ ↓ = ↑ = =0,20 = ↓ = = ↑ ↑ = = ↑ ↑ ↓ ↓ = ↑ ↑ ↑0,25 ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ = ↑ = ↑ ↓ ↓ = ↑ = ↑0,30 ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ = ↑ ↑ ↑ ↑ ↑0,40 ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑
Los resultados obtenidos con el método del cambio de peso se muestran en la Figura
1. La concentración a la cual el incremento de peso es 0 nos indica que no ha habido
intercambio de agua, con lo cual el potencial hídrico de la patata será el mismo que el
de la solución. Calcularemos el potencial hídrico mediante la ecuación: Ψπ=-m.R.i.T. En
nuestro caso el valor de la concentración de la disolución de sacarosa a la cual no hay
incremento de peso es de 0.25 molal. Sustituyendo en la fórmula obtenemos un
potencial osmótico de -0.618 MPa, que sería equivalente al potencial hídrico ya que no
hay intercambio neto de agua en el tejido. Este método es más preciso que el de
Chardakov.
0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.4
-200-150-100
-500
50100150
Media
Concentración molal Sacarosa
Incr
emen
to d
e pe
so
Figura 1. Representación del incremento de peso de los cilindros de patata con respecto a la concentración molal de sacarosa.