peces: proteómica, lipidómica, metabolómica y bases ... · la disponibilidad y el uso de...
TRANSCRIPT
“Foodomics” en el cultivo de peces: proteómica, lipidómica, metabolómica y bases moleculares de la nutrición.
ESPE - Sangolqui 20 al 22 de mayo
Por Emmerik Motte, Ph.D.
Desembarques totales globales aumentaron: 18 mtm (1950) 159 mtm (2011)
Producción mundial de la pesca
de captura y la acuicultura
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
2001950
1953
1956
1959
1962
1965
1968
1971
1974
1977
1980
1983
1986
1989
1992
1995
1998
2001
2004
2007
2010
2013
2016
2019
2022
2025
Mil
lon
es d
e T
m.
Producción mundial de acuicultura supera los 65 millones de toneladas (FAO 2012). Se producen 78% más peces, 308% más crustáceos y 60% más moluscos que hace 20 años.
Producción mundial de la acuicultura
La producción en agua dulce: alrededor de 62% en 2010 (33.7 mtm para peces) En 2010, la producción en agua dulce represento el 58.1% del valor de la producción global.
La tasa de crecimiento anual promedio de la producción dulceacuícola entre 2000 y 2010 fue de 7.2%, comparado con 4.4% para la producción acuícola marina.
Producción mundial de la acuicultura
En 2008, la acuicultura con alimentación contribuyó al 81,2 % de la producción mundial de peces y crustáceos de piscifactoría con 38,8 millones de toneladas.
> 200 especies de peces y crustáceos alimentados con piensos. Sólo 8 especies representan el 62,2 % de la alimentación total utilizada.
Satisfacer la demanda futura de alimentos procedentes de la acuicultura dependerá en gran medida de la disponibilidad de alimentos de calidad en las cantidades requeridas para lograr la producción.
Principales ingredientes para la acuicultura
Principales ingredientes para la acuicultura
La disponibilidad y el uso de ingredientes de alimentos acuícolas: harina y aceite de pescado.
Entre 1994-2009, la producción global de harina y aceite de pescado proveniente de la pesca han disminuido en un promedio anual de 1.7 y 2.6 %, respectivamente.
La sostenibilidad probablemente estará estrechamente vinculada con el suministro de proteínas animal y vegetal, aceites y carbohidratos terrestres para alimentos acuícolas.
Aceite vegetal
Producción Rentable de Animales Sanos con un Impacto Ambiental Limitado mejorar las tasas de crecimiento , mejorar la eficacia de la alimentación mejorar la reproducción, disminuir las pérdidas causadas por las enfermedades, mejorando la respuesta inmune, mejorar las técnicas de diagnóstico y las medidas profilácticas.
La Revolución Biotecnológica “Omics” y mejor nutrición puede acelerar la consecución de estos objetivos.
La FAO proyectó que, para satisfacer las necesidades de la población humana, la producción total debería aumentar a 165 mtm.
Aumentar Eficiencia en la Producción de las especies cultivadas. Para lograrlo Amplios esfuerzos en investigación en acuicultura.
Retos de la producción mundial en acuicultura
La Productividad y Bienestar del cultivo de peces = proceso complejo. Además de los aspectos genéticos, depende de otros procesos mutuos interdependiente: - Estado de desarrollo (embrión, larva, juvenil, adulto), - Maduración y Reproducción, - Nutrición, - Estado inmune, - Metabolismo y - Estrés fisiológicos (pH, O2, Densidad, Temperatura, Manejo, etc.)
Implica la contribución de múltiples tejidos (ej., hígado, intestino, páncreas, músculos, etc.) Requiere de un enfoque multidisciplinario y global para tener una visión completa de todos los factores que contribuyen con la Rentabilidad.
Genómica / Transcriptómica, Proteómica, Metabolómica (lipidómica) Para comprender y reconstruir las vías y las redes funcionales que gobiernan el proceso de crecimiento en los Peces.
¿Cómo la Expresión de los Genes esta correlacionada con la producción de Proteínas?
Retos de la producción mundial en acuicultura
genes
los genes
contienen
instrucciones
para la síntesis
de proteínas
las proteínas actúan solas
o en complejos para
realizar las funciones
celulares
ADN ADN ARN (TRANSCRIPTOMICA)
PROTEÍNAS
Bases moleculares de la vida: del gen a la proteína
(GENÓMICA)
(PROTEÓMICA)
Proteínas: Proteómica
Biotecnología moderna “Ómicas”
ADN: Genómica y Metagenómica Estudia los genomas de los organismos. Secuenciación del ADN, Secuencación de nueva generación “NGS”, Análisis de las secuencias Id. genes.
ARN: Transcriptómica
Estudia y compara los conjuntos de ARN mensajeros Los transcriptomas muestran qué genes se están expresando en un momento dado.
Estudia y compara cuali- y cuantitativamente el perfil de proteínas (proteoma). También estudia las modificaciones post-traduccionales, así como la interacción entre ellas.
Micro-arrays
Espectrometría de Masa
Electroforesis y secuenciación
Electroforesis 2D
La metabolómica estudia los metabolomas = colección de todos los metabolitos (moléculas de bajo peso molecular).
Biotecnología moderna “Ómicas”
Estudia cómo cambian los perfiles metabólicos como respuesta a estrés, tales como enfermedades, tóxicos o cambios en la dieta.
Lipidómica es el estudio de las vías y redes de los lípidos celulares en los sistemas biológicos. “Lipidoma" el perfil lipídico completo dentro de una célula, tejido u organismo. subconjunto de la "metaboloma“.
Factores ambientales, Moléculas, Patógeno, Nutrientes, etc…
Las “Ómicas” y sus tecnologías
Genómica---------- Análisis de polimorfismos
Clonaje de genes Diagnósticos moleculares
Secuenciación
Transcriptómica--- Análisis de expresión por
RT-PCR y Realtime-PCR Expresión diferencial por
Hibridación sustractiva Micro-arrays “ DNA Chips”
Proteómica Inmuno-diagnosticos ELISA Electroforesis 2D Mapeo de péptidos Espectrometría de Masa
Metabolómica Cromatografía de Gas o Líquida. Electroforesis capilar Espectrometría de masa Espectroscopia de resonancia magnética
Las “-Omics” en Acuacultura
‘OMICS’ EN ACUACULTURA
In: Aquaculture Book, Muchlisin Z.A. (ed.). InTech Open Access Publisher, Rijeka, Croatia, 361-390, (2011)
Rev. Fish Sci. 16(S1): 73-94
“Foodomics” : Estudia los alimentos y la nutrición basándose en las tecnologías “Ómicas”, con el fin de mejorar el bienestar y la salud de los consumidores, protegiéndolos de las enfermedades . (Cifuentes et al.; J. Chromatogr. A ,
1216(43), (2009).
Nutrición: Nuevos desafios
BIOLOGIA DE SISTEMAS Nutrición: Food-Omics (Biología de Sistemas)
Alimento Nutrigenómico: componentes de la dieta que influencian el metabolismo, con el fin de conseguir un bienestar y prevenir o tratar enfermedades.
Food-Omics: Nutrigenética y Nutrigenómica
- Transcriptómica - Proteómica
Los nutrientes
afectan a la expresión de genes y a las
funciones celulares.
Food-Omics: Nutrigenómica
Nutrigenómica para la nutrición y la salud: Los ingredientes vegetales, afecta al genoma animal, por impacto directo de sus bioactivos (proteínas y péptidos), o indirectamente a través del metabolismo microbiano intestinal proporcionando nutrientes con los cuales bacterias específicas intestinales pueden alimentarse.
Genoma bacteriano Proteoma / Metaboloma
Genoma del huésped Proteoma / Metaboloma
Genoma vegetal Proteoma / Metaboloma
Prebióticos Moléculas señal
Nutriproteómica
Nutri-proteómica: Estudia el efecto de los nutrientes en la síntesis y localización de las proteínas, las interacciones nutrientes-proteínas y proteínas-metabólitos…
Two-dimensional electropho--resis gel of proteins
Separación de proteínas
Identificación de nuevas proteínas
Secuenciación de proteínas, …
Lipidómica: Estudio a gran escala de las sustancias lipídicas existentes en una célula o sistema biológico y las vías y redes metabólicas que las relacionan.
Los lípidos = moléculas orgánicas. Funciones: Almacenar energía (células adiposas), otros forman capas impermeables y protectoras, integran las membranas de las células o funcionan como hormonas.
Nutri-Lipidómica
Nutri-Lipidómica
Alimentos funcionales: Nutraceúticos
Los nutraceúticos = productos de origen natural con propiedades biológicas activas, beneficiosas para la salud y con capacidad preventiva y/o terapéutica definida.
Los nutraceúticos entre: ALIMENTO y el MEDICAMENTO
Los aceites de pescado “nutraceúticos” = ácidos grasos esenciales poli-insaturados de cadenas largas (PUFA), en particular los de tipo "omega 3”.
Ácido docosahexaenoico (DHA)
Ácido eicosapentaenoico (EPA) Efectos múltiples de los PUFAs
sobre funciones celulares
FOOD-OMICS
Aplicaciones de Nutri-ómica en Acuacultura
Nuevas alternativas para reemplazar harinas y aceites de pescado: - Harinas de origen vegetal - Hidrolisados obtenidos de co-productos (desechos de carne y acuícolas,
menudencias, plumas, sangre), o subproductos de desechos animales = Fuente de péptidos de cadenas cortas (di, tri-péptidos) y amino ácidos libres, péptidos bioactivos…
Propiedades importantes: - Mejor absorción, digestión y asimilación… - Mejor atractabilidad (inosina) y sabor agradable… - Actividades antioxidantes (carotenoïdes, carnosina “dipéptido de
histidina”, ) y antimicrobianas (péptidos ricos en cisteínas, arginina)…
Calidad de las harinas (peptidos cortos) y aceites (contenido de PUFAs).
Genes asociados con la absorción de nutrientes = peptide transporter, glucose transporter...
Inmuno-Nutrición, Control de la Reproducción, etc…
PROTEOMICA: Espectrometría de masa
La espectrometría de masa sola o combinada con otras técnicas, permite la
separación e identificación de proteínas y péptidos simultáneamente.
Identificación de las proteínas expresadas por un organismo.
Caracterizar e identificar organismos y microorganismos.
Entender las interacciones huésped-patógenos
Analizar los cambios en niveles de expresión asociados con procesos
fisiológicos, nutricionales, infecciosos, estrés biótico ó abiótico, etc.…
Identificación de conjuntos funcionales
Controlar la calidad nutricionales dietas…
Secuenciación “de novo” de péptidos desconocidos
Proteómica: MALDI-TOF MS
El MALDI-TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionisation-Time-Of-Flight Mass) es una técnica de ionización suave utilizada en espectrometría de masa.
Alta capacidad de análisis Alta sensibilidad Alta precisión en la determinación de masas moleculares proteicas.
Láser (337nm)
Cámara
Microplaca
Matriz: - ácido sinapínico (proteínas) - α –ciano-4-hidroxicinámico (péptidos) -ácido 2,5-dihidroxibenzóico (carbohidratos)
Zona de aceleración TOF1
Fuente de ionización 1
Fuente de iones 2
Zona de decaimiento TOF2
Detector
Selector de iones
Detector lineal
Espejos de iones (Reflectrón)
Pila de desaceleración
Proteómica: MALDI-TOF MS
Análisis de espectros Huella peptídica
Nutri-ómica: Nuevas alternativas y Péptidos Bioactivos
Nuevas alternativas : - Harinas de origen vegetal → proteína = familia de las Globulinas (legumin,
vicilin, glycin, beta-conglycin, ), Albuminas, Gluten (gliadins y glutenins) y Proliminas.
Tripeptide: IAP y YPK son Inmuno-moduladores
Motivos biológicos activos de cadenas polipeptídicas = fragmentos que son activos mientras “permanecen” en sus secuencias precursoras, pero por liberación proteolítica, pueden interactuar con receptores y ejercer su bioactividad. (Schlimme and Meisel, 1995; Meisel and
Bockelmann, 1999).
Por digestión enzimática o fermentación, los péptidos bioactivos pueden ser liberados sea in vitro (por procesamiento) ó in situ in vivo (trás digestión).
Proteómica de las cereales
Harina vegetal
Extracción de fracciones protéicas (albuminas, globulinas, glicidinas , gluteninas)
Maldi TOF MS ESI-MS
Análisis espectro
Técnicas de separación
Péptidos sintéticos y
sondas cDNA para selección
de harinas
Análisis de propiedades de la
materia y su transformación
(viscosidad, masa, cocción…) Ensayos
espectroscópicos
Análisis por MS de proteínas y péptidos
- Identificación de nuevos alelos.
-Relación estructura / función (calidad)
- Detección cuantitativa
Análisis computacional predictiva estructural
La selección varietal, la evaluación de calidad (materias primas y productos finales)
Medición precisa de MW Huella varietal
Detección de alérgenos
Análisis estadístico
Valorización de harinas y aceites de pescado
El problema central del sector productor de harinas y aceites de pescado es doble;
- Analizar de manera precisa la composición de cada lote de harina o aceite a fin de estimar su valor comercial.
- Modificar la composición de cada lote de harina o aceite, para enriquecerlos con componentes de alto valor eliminando los componentes nocivos.
La biotecnología de aceites de pescado, basada en modificaciones enzimáticas específicas, permite la concentración y/o el aumento significativo de sustancias de interés sin riesgo de desnaturalización ocasionada con los procesos químicos. Las enzimas implicadas naturalmente y utilizables en biotecnología son: las proteasas, peptidasas, lipasas, desaturasas y las elongasas.
ANÁLISIS PROTEÓMICO DE LA ANCHOVETA
(Engraulidae ringens)
Protein Pilot
UniProt
Proteína Sarcoplasmatica
Proteína Contráctil
Proteína Tejido conectivo
Huella espectral de harina de pescado (diferentes calidades)
ANÁLISIS PROTEÓMICO DE HARINA DE PESCADO
Valorización de piensos en la producción de hidrolizados
Dietary arginine promotes digestion and absorption capacity enhances fish growth. An real-time quantitative PCR analysis was performed to determine the relative expression in fish muscle, hepatopancreas and intestine. Dietary arginine increased: (1) glutamate-oxaloacetate transaminase and glutamate-pyruvate transaminase activities in muscle and
hepatopancreas; (2) intestine and hepatopancreas protein content, folds height, and trypsin, chymotrypsin, lipase, Naþ/Kþ-ATPase, alkaline phosphatase, g-glutamyl transpeptidase and creatine kinase activities in intestine; (3) Lactobacillus counts; (4) relative expression of TOR in the muscle, hepatopancreas and distal intestine (DI); (5) relative expression of 4E-BP in proximal intestine (PI) and mid-intestine (MI), as compared with the control group. Dietary arginine reduced: (1) plasma ammonia content; (2) Aeromonas hydrophila and Escherichia coli counts; (3) relative expression of TOR in PI and MI; (4) relative expression of 4E-BP in the muscle, hepatopancreas and DI.
These results indicate that arginine improved fish growth, digestive and absorptive ability and regulated the expression of TOR and 4E-BP genes.
Una excesiva producción de ROS puede sobrepasar la capacidad antioxidante fisiológica. Daño oxidativo Afecta proteínas, lípidos y ADN (enzimas, Mb. Celular, mat. Genético).
En alimentos produce: rancidez, aparición de sabores no aceptables para el consumidor, disminución de la vida comercial. Uso de antioxidantes sintéticos (riesgo de toxicidad).
Búsqueda de antioxidantes naturales de los alimentos: tocoferol, carotenoides, catequinas, polifenoles… Problemas de baja capacidad anti-oxidante e insolubilidad … PEPTIDOS 3-16 aa Hidrolizados de pescado, caseína, proteínas lácteas, albumina de huevo, o de origen vegetal (garbanzo, soya, girasol, etc. Requiere demostración experimental..
Análisis de perfiles lipídicos y componentes alergénicos en aceites de peces
MALDI TOF en Aceite de hígado de bacalao y el efecto de concentraciones de matriz sustrato en la intensidad de la señal. Rapid Commun. Mass Spectrom. 13, 1762-1769 (1999) Folahan O. Ayorinde, Quentin L. Keith Jr. and Lilly W. Wan.
Aceite comercial de hígado de bacalao
La espectrometría MALDI-TOF permite obtener datos sobre la composición de aceites de pescado antes y después de tratamientos enzimáticos, en base a análisis espectrales.
Lipidómica
A partir de muestras de aceite de bacalao, los autores desarrollaron un protocolo de preparación de muestras para el análisis rápido y en rutina mediante espectrometría MALDI TOF.
Hidrolasas
Proteasas
Hidrolizan los enlaces peptídicos de moléculas proteicas
ACEITE DE PESCADO
Enzimas involucradas en la transformación de aceites de peces
Oxidoreductasas - Ligasas
Lipasas
Desaturasas Elongasas
Añaden dobles enlaces en posiciones especificas dentro de la cadena de a. graso
Añaden dos carbonos a la cadena de acido graso por el extremo carboxilo
Hidrolizan los enlaces esteres de los triacilgliceridos
Enzimas en la biosíntesis de PUFAs: Ácido docosaexanóico (DHA) y ácido eicosapentanóico (EPA).
Caracterización por MALDI y valorización por LIPASA, DESATURASA Y ELONGASA
(MICRO)ALGAS PROTISTAS MARINOS (Traustoquítridos)
= Alternativas para la producción de ácidos grasos poli-insaturados (PUFAs) de tipo “omega-3” (ácido docosahexaenóico [DHA] y ácido eicosapentaenóico [EPA]).
a Dunaliella sp. 100x, b Chaetoceros sp. 100x,
c Chlorella sp., d Haematococcus sp.,
e Spirulina sp.
Células de cepa de Schizochytrium sp. (Traustoquítrido) presantando numerosos
cuerpos lipídicos.(Bara 20 μm).
Caracterización de microorganismos, sus genes y proteínas enzimáticas implicadas en la
transformación y valorización del aceite de anchoveta
2010
Lipasas - Aplicaciones en aceite de pescado
LIPIDÓMICA
Estudio de la composición de acidos grasos en ovarios
Promedio de las cantidades de cada ácido graso (AG) por peso de ovario (mg/mg)
Imaging mass spectrometry mostrando la distribución de fosfatidilcolinas (PCs) y triacilgliceroles (TAGs) en secciones de
tejido ovárico
Conocer los lípidos y su localización puede ayudar a formular dietas para las hembras y promover la fecundidad y producción larval.
La metabolómica está madurando como un enfoque experimental en ciencias de la nutrición, y es un análisis útil para revelar resultados en biología asociados con cambios en la dieta .
Revelar las conexiones entre el perfil metabólico de un individuo y la ingesta diaria variada naturalmente o experimentalmente manipulada.
Perfiles de metabolitos en el tejido , suero , orina o heces reflejan los cambios en las vías metabólicas que responden a la intervención dietética .
Tres áreas definidas de la investigación relacionada con las estrategias metabolómica de la dieta incluyen: ( 1 ) que describe la variación metabolito dentro y entre las exposiciones o intervenciones dietéticas ; ( 2 ) la caracterización de la respuesta metabólica en el tiempo; y ( 3 ) evaluación de la variación individual en la línea de base nutricional, salud y/o estado de la enfermedad.
Metabolómica
Metabolómica
Proton Nuclear Magnetic Resonance
Metabolómica
Además del aporte en la coloración, la astaxantina → esencial para el crecimiento y como precursor de vitamina A en peces. Aditivo alimenticio en la acuacultura.
five astaxanthin monoesters (4, 5, 15-17)
Free astaxanthin (14)
Eight astaxanthin diesters (11, 18-24)
H. pluvialis extract
shrimp extract (P. borealis)
Enfoque de la Transcriptómica y Proteómica para la identificación, caracterización, y la detección de genes y péptidos específicos de peces.
Genómica funcional: Transcriptómica / Proteómica
Pruebas moleculares
Microarrays
Real-Time PCR
Cuantificación
de la
expresión de
genes.
Expresión de genes
Caracteres monogénicos (ej.: Resistencia a enfermedades)
Caracteres poligénicos = Expresión de varios genes (ej.: Crecimiento, Fecundidad)
Los diferentes genes codifican para proteínas involucradas en el Transporte de nutrientes, crecimiento, fecundidad, resistencia, etc.
Bases genéticas de la variabilidad
Diferentes alelos de los genes a nivel: - de Secuencia - de Promotor - de Numero de copias, etc.
Ensayos con diferentes dietas o variaciones en nutrientes para medir el efecto sobre los genes Id. de Biomarcadores
Selección asistida por Biomarcadores
Ef1 Ef2 Ef3 Muestras
Real-Time PCR Cuantificación precisa del nivel de expresión de los genes (Digestión, Transp. Nutrientes, Metabolismo proteico, lipídico, Hormonal, Sist. innmune, etc).
Transcriptómica Expresión diferencial de genes
DIETA A DIETA B
“Chip” de ADN
- Altas mortalidades ocurren durante el desarrollo larval Destete
Comprender el desarrollo larval es de importancia para poder definir una correcta alimentación y condiciones de cultivo. La ontogenia de las funciones esenciales como: la digestión, la osmoregulación, la inmunidad y el metabolismo han sido extensamente investigadas durante el desarrollo larval de peces, a nivel de los componentes celulares, enzimas, metabolitos y la expresión de génica.
Transcriptómica (Nutrigenómica)
Fig- Agrupamiento hierárquico global de >400 familias de genes diferencialmente expresados durante el desarrollo larval de la lubina Europea. Rojo: AUMENTO y Verde: Reducción de la expresión relativa (Adapted from Darias et al. 2008).
Grupos de genes Co-expresados
1era fase, días 7 a 23 post-eclosión: - Genes involucrados en desarrollo visual y
neuronal. - Genes del metabolismo aeróbico.
2da fase, días 25 a 43 post-eclosión: - Grupos de genes relacionados con la
osificación y desarrollo muscular. - Metabolismo anaerobico y maduración
del tracto digestivo.
Transcriptómica (Nutrigenómica)
Transcriptómica: Aplicaciones
Transcriptómica (Nutrigenómica)
Estudio de la expresión de Péptido Transportador (PEPT1)
Estudio de la expresión de Péptido Transportador (PEPT1)
Anal Chem. 2013 Oct 10.
Distribución de dipeptidos en la membrana intestinal de rata luego del experimento de transporte de peptido. La visualización de los iones correspondientes a Gly-Sar (147.1 m/z), Val-Tyr (281.2 m/z), y Tyr (182.2 m/z) fue obtenida por MALDI-IMS luego de distintos tiempos de transporte.
Estudio de la distribución de di-peptidos a nivel de la membrana intestinal de rata, por MALDI-
Imaging-MS.
Inmuno-Nutricion: Genes inmunitarios
Ef1 Ef2 Ef3 Muestras
Real-Time PCR Cuantificación precisa del nivel de expresión de los genes inmunitarios (iNOS, Mx, dicer, argonauta, etc).
3 genes distintos codifican para las isoenzimas: eNOS (endotelial) nNOS (neuronal) iNOS (inducible)
Nitric Oxide Synthase (NOS) ARN de interferencia (ARNi) (Dicer/Argonauta):
Argonauta
ARN viral
Dicer
ARNm blanco
Inmunofortificantes
Amino ácidos (Arginina, Lisina)
Unas 220-290 y 300-400 “spots” de proteínas en gel 2-D. 29 y 28 proteínas alteradas de hemocitos y hepatopancreas fueron sometidas al anális por MALDI-TOF/MS.
Las prinicipales proteínas expresadas: - hemocianina, - proteína de coagulación, --β-hemoglobina, - MnSOD citosólica, - tripsina, - catepsina I(L) y - proteinasa Zinc Mcp1. Juntos Vc yCH = inmunostimulantes y 7 proteinas involucradas en el aumento de la actividad inmune.
Investigación en inmunología: Inmuno-nutrición
Hepatopancreas Hemocitos
Patología experimental:
Aditivo alimenticio (Ej.: Hidrolizados)
c
Investigación en inmunología: Inmuno-nutrición
Diseño Experimental: - Dieta comercial 28%CP (control) - Dieta comercial + hidrolizado 1 - Dieta comercial + hidrolizado 2 - Dieta comercial + hidrolizado 3 - Dieta comercial + hidrolizado 4 Tanque = 400 Lt; 50 individuos/Tq 2 meses entre 1.5g a 9.0g Mortalidad = 0% Challenge = induccion de la expresión de genes por inyección con bacterias.
Hidrolizado 1 Hidrolizado 2
Hidrolizado 3 Hidrolizado 4
Hidrolizado 1
Hidrolizado 2
Hidrolizado 3
Hidrolizado 4
Hidrolizado 1
Hidrolizado 2
Hidrolizado 3
Hidrolizado 4 Hidrolizado
1
Hidrolizado 2
Hidrolizado 3
Hidrolizado 4
Resultados de la evaluación de hidrolizados sobre el crecimiento y genes inmunitarios
Hidrolizado 4: 37% de ganancia en crecimiento Otros = 14%
Inhibición del plasma = 150 a 600%
Inhibición del plasma = 24 a 67% (normalizado con Susp. Sal.)
Análisis de la expresión relativa de iNOS en los distintos tratamientos, normalizados con respecto al tratamiento control.
Análisis de la expresión relativa de Argonauta y Dicer en los diferentes tratamientos norm. control no inducidos.
Hidrolizados B C D E
Hidrolizado B
Hidrolizado C
Hidrolizado D
Hidrolizado E
Expresión de Ago = 1,8 a 5,5 veces más con inducción (normalizado con el grupo control)
Expresión de Dicer = 2 a 30 veces con inducción (normalizado con el grupo control)
GRACIAS POR SU ATENCION
Guayaquil - Ecuador
Teléfonos: (593-4) 292471
Celulares: (09-423695) - (09-516186)
e-mail: [email protected]
www.conceptoazul.com.ec
Tumbes - Perú
Calle Philipinas
Teléfonos: 522559
Celulares: 072 972 701 484
e-mail: [email protected]\
EL FUTURO DE LA ACUICULTURA ESTA EN LA BIOTECNOLOGÍA La Revolución “Ómica”