organizaciÓn de las naciones unidas para la agricultura y ... · aves, pesca) y sus derivados....

ORGANIZACIÓN DE LAS NACIONES UNIDAS PARA LA AGRICULTURA Y LA ALIMENTACIÓN (FAO)

Proyecto TCP/RLA/3013 (A)“Desarrollo de un sistema integral de aseguramiento de calidad para laboratorios de

análisis de alimentos en América del Sur”

TALLER SUBREGIONAL SOBRE ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y VALIDACIÓN DE LA METODOLOGÍA PARA

LABORATORIOS DE MICROBIOLOGÍA

Lima, Perú

3 al 7 de octubre de 2005

Anexo Nº 1

1

Índice

ESTADO ACTUAL DEL ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y VALIDACIÓN ................... 3 Servicio Nacional de Sanidad Animal y Calidad Agroalimentaria ........................................... 4 INTI- Cereales y Oleaginosas ................................................................................................. 21 INTI - Laboratorio de Microbiología de Carnes ..................................................................... 37 Laboratorio INTI Lácteos – PTM ........................................................................................... 52 INTI LACTEOS División Rafaela .......................................................................................... 66 Laboratorio: de Microbiología – INTI Frutas y Hortalizas .................................................... 84 INTI – MAR DEL PLATA ..................................................................................................... 98 Laboratorio de Microbiología de Alimentos Agencia Córdoba Ciencia .............................. 113

II. PROPUESTA DE PLAN DE ACCIÓN NACIONAL PARA SU OPTIMIZACIÓN .......... 128 Laboratorio de Microbiología de INTI-Cereales y oleaginosas ........................................... 129 Laboratorio de Microbiología de INTI-Lácteos – Rafaela ................................................... 130 Laboratorio de Microbiología de INTI- Frutas y Hortalizas ................................................. 131 Laboratorio de Microbiología de INTI- MDP ...................................................................... 132

2

I. ESTADO ACTUAL DEL ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y VALIDACIÓN

HOMOLOGACIÓN NORMA ISO/IEC 17025 EN EL PAIS Homologación de la norma en el país Sí No Observaciones¿El país tiene homologada la norma ISO/IEC 17025?En caso afirmativo indicar su nombre y número.

XNorma IRAM 301/2000

3

Formulario A: ASEGURAMIENTO DE CALIDAD Y VALIDACIÓN DE LA METODOLOGÍA PARA LABORATORIOS DE MICROBIOLOGÍA.

Fecha: 19 de agosto de 2005.

Laboratorio: Dirección de Laboratorios y Control Técnico. Laboratorio Animal. Coord.

De Productos Alimenticios y Conexos. Dto. de Microbiología.

Director/Responsable del Laboratorio: Lic. Verónica Torres Leedham

Dirección del laboratorio: Av. Fleming Nº 1653. (CP 1640).

Ciudad: Martínez. Provincia de Bs. As. País: Argentina

Dependencia

Ministerio: Economía. Secretaría de Agricultura, ganadería, pesca y Alimentación.

Institución: Servicio Nacional de Sanidad Animal y Calidad Agroalimentaria

Organización:___________________________________________________________

Empresa:_______________________________________________________________

4

1. Ensayos:

1.1 Número total de ensayos microbiológicos que realiza el laboratorio:1.2 ¿Cuáles? Listar

Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada1 Detección Salmonella spp Miel de abeja, dulce de

leche.Internacional estándar ISO 65709/02

2 Detección Listeria monocytogenes

Carnes rojas y derivados. Carnes de aves y derivados.

USDA – FSIS / 02

3 Detección Salmonella spp Productos cárnicos e hisopados de carcasas

USDA – FSIS / 02

4 Detección Listeria monocytogenes

Productos lácteos Norma FIL – IDF143A:1995

5 Detección de Escherichia coli O157 : H7

Productos y subproductos carnicos

USDA – FSIS / 02

6 Recuento de colonias a 30ºC. Productos lácteos IDF Estándar 100A: 19877 Enumeración de coliformes.

Recuento en placa y NMPProductos lácteos FIL – IDF 73B: 1998

8 Enumeración de Hongos y Levaduras

Productos lácteos IDF Estándar 50B: 1985

9 Enumeración de Staphylococcus aureus

Productos lácteos FIL – IDF 145B: 1997

10 Detección de Salmonella spp Productos lácteos FIL – IDF 93B: 199511 Microorganismos aerobios

mesofilosAlimentos en gral. Productos cárneos (rojas, aves, pesca) y sus derivados.

ICMSF. Microorganismos de los alimentos. Vol. I. Técnicas de análisis microbiológico.

12 Investigación de Vibrio cholerae y Vibrio parahaemolyticus

Productos de la pesca y aguas

FDA – BAM 8º Ed. 1998.ICMSF. Microorganismos de los alimentos. Vol. I. Técnicas de análisis microbiológico.

13 Examen de productos enlatados

Productos enlatados en general derivados de productos cárneos (rojas, aves y pesca).

FDA 8º Ed. 1995ICMSF. Microorganismos de los alimentos. Vol. I. Técnicas de análisis microbiológico.

14 Investigación de microorganismos aerobios y anaerobios. 35ºC y 55ºC)

Productos enlatados en general derivados de productos cárneos (rojas, aves y pesca).

APHA 1992

15 Investigación de residuos de antibióticos

Músculo y vísceras crudas de especies de abasto

USDA – FSIS 1998.

16 Investigación de residuos de antibióticos y sulfonamidas

Músculo y vísceras crudas de especies de abasto

Método de las 4 – Placas.UCM 90/01.

17 Recuento de aerobios mesófilos.

Agua APHA 1993.

5

Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada18 Recuento de coliformes

(NMP).Agua APHA 1998.

19 Recuento de fecales (NMP). Agua APHA 1998.20 Recuento de enterococos

(NMP).Agua APHA 1998.

21 Inv. Pseudomona aeruginosa. Agua APHA 1998.22 Anaerobios sulfito reductores

(NMP)Agua ISO 6461 / 1986.

23 Escherichia coli (NMP). Agua APHA 1998.24 Inv. Salmonella spp Agua APHA 1998.25 Inv. Paenibacillus larvae Miel Agar BL – según Schuch.26 Rec. Hongos y levaduras Miel ISO 7954 / 1987.27 Rec. enterobacterias Lácteos ICMSF 198328 Anaerobios sulfito reductores Lácteos FAO: 1981

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro: Investigación de Escherichia coli O157. ISO 16654 / 2001.

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación?

Asegurar la calidad analítica de los ensayos por medio de certificados analíticos acreditados.Cumplir con especificaciones microbiológicas del cliente.Reconocimiento de agencias reguladoras de control de alimentos que intervienen en el comercio agroalimentario internacional.

1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio:

4 (cuatro).

1.6 ¿Cuáles? Listar

Ensayos Listar Matrices Metodología usada

Detección Salmonella spp Miel de abeja, dulce de leche

Internacional estándar ISO 65709/02

Detección Salmonella spp Productos cárnicos e hisopados de carcasas

USDA – FSIS / 02

Detección Listeria monocytogenes

Carnes rojas y derivados. Carnes de aves y

USDA – FSIS / 02

Detección Listeria monocytogenes

Productos lácteos Norma FIL/ IDF143A:1995

1.7 Estimar el número de ensayos que realiza el laboratorio de microbiología anualmente:

En el período 2004 se realizaron un total de 4494 ensayos.

6

2. Sistema de calidad Sí %* No Observaciones2.1 ¿El sistema de calidad está implementado en el área de microbiología?

X Fue realizado en forma conjunta por otras áreas del laboratorio

2.2 Indicar la fecha de implementación del sistema

2004

2.3 La documentación del sistema de calidad:a) ¿Es comunicada y entendida por el personal?

X

b) Indicar cómo se comunica la información relativa al sistema de calidad.

El personal es notificado y queda evidencia objetiva de la misma.

c) ¿Está disponible para el personal? X A disposición del mismod) ¿El laboratorio cuenta con un Manual de Calidad?

X

2.4 ¿La organización ha elaborado y aprobado los siguientes procedimientos?:a) Procedimiento para Elaborar y Controlar Documentos.

X

b) Procedimiento para Clasificar y Codificar Documentos.

X

c) Procedimiento para Gestión y Control de Documentos.

X

d) Procedimiento para Control de Registros. Xe) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

X

f) Procedimiento para Revisión de Pedidos, Ofertas y Contratos.

X

g) Procedimiento para Informe de Resultados. Xh) Procedimiento para Servicios al Cliente. Xi) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos.

X

j) Procedimiento para Auditorias Internas Xk) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

X

l) Procedimiento para la Revisión del Sistema de Calidad.

X

m) Procedimiento para la Evaluación de Proveedores

X

n) Procedimiento para la Compra de Servicios y Suministros

X

2.5 ¿La organización ha implementado los siguientes procedimientos?:a) Procedimiento para Elaborar y Controlar Documentos.

X

7


X


X


X


X


X

j) Procedimiento para Auditorías Internas. Xk) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

X


X

m) Procedimiento para la Evaluación de Proveedores.

X

n) Procedimiento para la Compra de Servicios y Suministros.

X

* %: Grado de implementación en porcentajeNota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.

3. Control de trabajo no conforme Sí %* No Observaciones3.1 ¿Están asignadas las responsabilidades y autoridades para gestionar el trabajo no conforme?

X Existe una cadena de responsabilidades documentada para el tratamiento de No conformidades.

3.2 ¿Cuándo se identifica un trabajo no conforme se detiene la realización de los ensayos?

X Se detiene ante una No Conformidad de carácter mayor.

3.3 ¿Se evalúan las implicancias del trabajo no conforme? Indicar en observaciones el cargo del responsable de autorizar la reanudación del trabajo?

X Responsable de la Calidad y Responsable del área involucrada.

3.4 ¿Cuándo se identifica un trabajo no conforme se notifica al cliente y se pide la devolución del trabajo?

X El cliente es notificado. Según la NC se emite nuevo protocolo o se solicita nueva muestra.

4. Personal Sí %* No Observaciones4.1 ¿Cuántas personas trabajan en el área del Total :11

8

laboratorio de microbiología excluyendo las funciones administrativas y de gestión?

6 profesionales.2 técnicos.3 idoneos.

4.2 ¿Están definidos y documentados los perfiles de puesto para cada nivel de responsabilidad, personal directivo, técnico y de apoyo clave afectado a los ensayos?

X Se encuentran documentado en PCG y PCP (perfiles de puesto).

4.3 ¿Comprenden las descripciones del punto 4.2 las responsabilidades asociadas al sistema de calidad?

X Las responsabilidades son asignadas de acuerdo al perfil del puesto.

4.4 ¿Cuál es el criterio para autorizar al personal a realizar una dada actividad?

X Está descripto en “perfil deseado”: Formación, experiencia y aptitud necesaria para el desempeño de la actividad.

4.5 ¿El laboratorio tiene documentado el personal autorizado para cada ensayo?

X Están descriptos en la matriz de responsabilidades.

4.6 ¿El laboratorio cuenta con un programa de capacitación documentado que se confecciona en forma periódica?

X Se cuenta con un área de capacitación que recepciona necesidades de capacitación. Establece un plan y cronograma anual.

4.7 ¿En dicho programa de capacitación el laboratorio incluye temas relativos a la calidad? Detallar los temas en observaciones

X Ejemplos de temas:Implementación de Norma ISO/IEC 17025.Aseguramiento de la Calidad. El plan indica la realización de no menos de 2 cursos anuales (1 externo y otro interno)

4.8 ¿El laboratorio tiene un procedimiento para la capacitación del personal donde describe los requisitos que debe cumplir hasta considerarse competente?

X El documento incluye planilla de entrenamiento y autorización para la ejecución de tareas analíticas.

4.9 ¿En la documentación del sistema, para cada cargo clave, está asignado un reemplazante?

X

4.10 ¿El laboratorio se asegura que todo el personal técnico que trabaja en el laboratorio de microbiología está capacitado o tiene un adecuado manejo en técnicas de esterilidad y manipulación de especimenes potencialmente infecciosos? ¿Cómo? ¿Lo documenta?

X El personal recibe capacitación con evaluación y registro de la misca.Hay un PCP con su registro, del manejo y disposición final de elementos peligrosos

4.11 ¿El laboratorio tiene un Procedimiento para Capacitación del Personal?

X Implica perfil, datos personales, asignación y notificación de funciones para ejecución de ensayos. Identifi

9

cación de necesidades de capacitación.

4.12 ¿El laboratorio conserva los registros, los certificados de cursos realizados, títulos y curriculum vitae de todo el personal?

X

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.1. ¿El acceso al laboratorio está restringido al personal autorizado y existen reglas de uso de áreas que afectan la realización de los ensayos?

X Ingreso por clave de acceso personal. Señalizado.PCP-Personal. Notificación.

5.2 Enumere las áreas separadas del laboratorio teniendo en cuenta las actividades que se llevan a cabo.

1)Salas de siembra (5).2)Sala de patógenos.3)Sala de preparación de muestras.4)Sala de preparación de medios y reactivos.5)Sala de preparación de material de vidrio.6)Sala de lavado y autoclaves.

5.3 ¿Las actividades de preparación de medios de cultivo, preparación de muestras, descontaminaciónde las muestras y cultivos y la siembra son llevadas a cabo en áreas separadas del laboratorio?Detalle cómo realiza el laboratorio estas tareas.

X Existe un flujo de carácter horizontal que describe las diferentes actividades.La matriz de responsabilidad describe el personal involucrado.

5.4 ¿El laboratorio emplea procedimientos para prevenir la contaminación cruzada? ¿Cuáles? Indicar la opción que corresponda.

X

a) Separando las actividades en tiempo y espacio.

X Por tipo de matríz.

b) Mediante la construcción del laboratorio según un diseño “sin camino de regreso”.

El diseño no contempla esa posibilidad.

c) Llevando a cabo los procedimientos de una manera secuencial, usando las precauciones apropiadas para asegurar la integridad de la muestra y del ensayo. Por ejemplo uso de recipientes herméticamente cerrados.

X El traslado de muestras analizadas como tambien del material de lectura bioquímica se retiran en recipientes herméticos de acero inoxidable.

d) Otros X Buenas Prácticas de Laboratorio

5.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada infraestructura para:

10

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observacionesa) la recepción de la muestra Xb) El almacenamiento de la muestra (espacio suficiente y temperaturas adecuadas de almacenamiento en heladeras y congeladores).

X Heladeras vidriadas, freezer y cámaras de frio.Cámara para productos no perecederos.

c) La incubación de los medios de cultivo sembrados (estufas de incubación).

X Cantidad, capacidad y variedad para el nivel operativo establecido.

d) Almacenar los cultivos de referencia. X En refrigerador o freezer según corresponda. El equipo se encuentra en recinto aislado con clave de acceso.

5.6 ¿El laboratorio cuenta con procedimientos para eliminar los desechos químicos o biológicos potencialmente peligrosos?

X Existe PCG / PCP, instructivo y registro. El retiro se realiza por empresas privadas acreditadas en el organismo competente.

5.7 ¿El laboratorio cuenta con suficiente espacio de modo que el personal realice adecuadamente el trabajo durante los ensayos? Detallar el área estimada en m2 por analista

X Cabinas de siembra para 1 y dos personas (2 m líneal por cabina).8 m2 por analista.

5.8 ¿El laboratorio cuenta con un sistema de ventilación?Especificar sus características (tipos de filtros, etc.).

X Por aire forzado. Filtros comunes.

5.9 ¿El laboratorio cuenta con iluminación e instalación eléctrica adecuada para la realización de los ensayos?

X

5.10 ¿El laboratorio cuenta con un sistema de energía eléctrica ininterrumpida?

X Está solicitado la compra de un grupo electrógeno

5.11 ¿El laboratorio toma precauciones de modo que en el área del laboratorio no haya polvo, corrientes de aire o temperaturas extremas?¿Cuáles?

X Condiciones edilicias adecuadas.Aire acondicionado central e individual en áreas administrativas.

5.12 ¿El laboratorio lleva registros de las temperatura ambiente en el área del laboratorio?

X Se encuentra establecido el límite crítico. Verificación diaria. Se realiza con termómetros certificados fijos.

11

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.13 MONITOREO AMBIENTAL DEL AIRE: ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento para monitorear en cuanto a su carga microbiana el aire en la sala de siembra y preparación de muestras?( en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo y diluyentes).

X Recuento de microorganismos mesófilos). Placa expuesta 15´ ( < 10 ufc ). PCA.

5.14 MONITOREO AMBIENTAL DE LAS SUPERFICIES: ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento para monitorear las superficies en la sala de siembra y preparación de muestras?

X Recuento de microorganismos mesófilos

a) En cuanto a su carga microbiana (en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo y diluyentes).

X Esponjados: S. fisiológica, siembra en profundidad, PCA.Petrifilm 3M : Hidratación e impronta.

b) Presencia de microorganismos indicadores de higiene (en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo y diluyentes).

X

c) Presencia de patógenos (en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo, diluyentes, y los microorganismos patógenos investigados).

X

5.15 ¿En los procedimientos mencionados en los puntos 5.13 y 5.14 se ha establecido?:a) Lugar de toma de muestra (En caso afirmativo indicarlas en observaciones).

X En todas las salas sin excepción.

b) Frecuencia de realización del monitoreo ambiental (En caso afirmativo indicarlas en observaciones).

X Cada 15 días

c) Criterio de aceptación o límites de tolerancia (En caso afirmativo indicarlas en observaciones).

X < 15 ufc : ambiente.< 10 ufc : superficie

d) Acciones correctivas en caso de desvío (En caso afirmativo indicarlas en observaciones).

X Superficie :Sanitización.Ambiente: Desinfección con Lysoform, no uso por 24 hs.

5.16 ¿El laboratorio cuenta con un programa implementado de limpieza y de desinfección?

X Existe PCP.

5.17 ¿Dicho programa la limpieza (5.16) qué zonas del laboratorio incluye? Numerar en observaciones.

X La totalidad.

12

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.18 ¿El laboratorio tiene documentado, implementado y disponible para el personal el plan de higiene o los procedimientos operativos empleados durante la realización del trabajo en el laboratorio destinados a evitar la contaminación de las muestras y el personal?

X Se registra la recepción del material por parte del personal.

5.19 ¿El personal técnico cuenta con la indumentaria apropiada (guardapolvo) que deja en el área del laboratorio de microbiología antes de salir de dicha área?

X

5.20 ¿Las instalaciones cuentan con lavamanos provisto con jabón desinfectante y toallas descartables? En caso afirmativo, indicar dónde están ubicadas (sala de siembra, sala de preparación de muestra, sala de lavado, etc.).

X Sal de preparación de muestras.Sala de lavado y autoclaves.Pasillo contigüo a las cabinas de siembra

5.21 ¿En caso que las condiciones ambientales sean inadecuadas el laboratorio interrumpe los ensayos? En caso afirmativo indicar en observaciones si el laboratorio cuenta con un procedimiento.

X Hay PCP. Se suspende el trabajo en el área afectada.

5.22 ¿Utiliza desinfectantes para la limpieza de las mesadas de trabajo antes y después de la realización de la preparación del a muestra o la siembra? En caso afirmativo indicar en observaciones qué desinfectantes usa.

X Alcohol.Amonio cuaternario.Hipoclorito de sodio

5.23 ¿El laboratorio cuenta con medidas para eliminar y prevenir la proliferación de insectos en el área del laboratorio de microbiología? En caso afirmativo indicar las medidas empleadas y si son efectivas.

X Programa de control de plagas. Frecuencia semanal. Realizado por empresa acreditada por organismo competente. Es efectivo.

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.1 ¿El laboratorio que realiza las calibraciones de los equipos críticos para los ensayos está acreditado para dicha actividad?

X Por el Organismo Argentino de Acreditación (OAA).

6.2 ¿El laboratorio está provisto de todos los equipos necesarios para la correcta ejecución del ensayo? En caso que no lo posea indicar en observaciones cuáles.Nota: Tener en cuenta en este punto los requerimientos en cuanto a la exactitud requerida para el ensayo y cumplimiento de las especificaciones de los equipos.

X

13

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.3 ¿Antes de poner en servicio un equipo, el laboratorio, lo calibra o verifica con el fin de asegurar que responde a las exigencias especificadas del laboratorio y está conforme a las especificaciones normalizadas pertinentes?

X Se debe cumplir el procedimiento. Se registra y se autoriza el uso si cumple especificaciones preestablecidas.

6.4 ¿Antes de su uso y a una frecuencia establecida los equipos críticos para los ensayos se calibran y/o verifican? En caso afirmativo indicar en observaciones qué equipos y con qué frecuencia se calibran o verifican.

X Verificaciónes diarias.Mantenimiento: anuales o cuando corresponda.Calibraciones:1) Incubadoras: bianual (est. y uniformidad de temperatura)2) Autoclaves: anual3) Balanza: anual4) Baños termostáticos: bianual (est. y uniformidad de temperatura).5)Cabina de seguridad biologica C II: anual.Microscopio: anual.

6.5 ¿El laboratorio documenta e implementa programas para la limpieza, mantenimiento, calibración y/o verificación y esterilidad de los equipos? En caso afirmativo indicar para qué equipos.

X Hay una planificación que establece un cronograma de calibración para la totalidad del equipamiento.Heladeras, freezer, incubadoras, autoclaves, etc..

6.6 ¿El laboratorio establece un programa para la calibración y/o verificación de los equipos que tengan una influencia directa en los resultados de los ensayos? En caso afirmativo indicar los equipos, la frecuencia de estas calibraciones y/o verificaciones y en función de qué se estableció el criterio de frecuencia.

X Calibración: Cronograma según recomendaciones internacionales (FAO).En caso de cambio de lugar o mal funcionamiento, después de su arreglo se calibra nuevamente

6.7 ¿El mantenimiento de los equipos esenciales se realiza a intervalos especificados? En caso afirmativo indicar en observaciones los equipos, tipo y la frecuencia de mantenimiento.

X Involucra a todos los equipos.El mantenimiento se realiza por servicio externo. La frecuencia según cronograma preestablecido.

6.8 ¿Están disponibles las instrucciones actualizadas de uso y mantenimiento de los equipos (incluido el manual suministrado por el fabricante) para el uso del personal del laboratorio?

X

14

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.9 ¿Están inequívocamente identificado cada equipo con su soporte lógico utilizado para los ensayos (incluido su estado de calibración)?

X

6.10 ¿Los resultados de la calibración y verificación quedan registrados?

X Certificados de calibración.Registros de verificación.

6.11 ¿Cuándo un equipo arroja resultados erróneos o está fuera de servicio se indica claramente para todo el personal? ¿Qué metodología usa? Explique brevemente

X 1) Se registra la No Conformidad.2) Identificación “FUERA DE USO”.3) Se informa al responsable de la calidad.4)Se solicita reparación.

6.12 ¿ Para los termómetros, display y/o equipos de registro continuo de temperatura usados en el registro de temperaturas para las estufas de incubación y baños termostáticos se calcula el rango de aceptación de la temperatura teniendo en cuenta la corrección y la incertidumbre del instrumento y la especificación establecida en la metodología de ensayo? En el caso de no efectuarse indicar en observaciones qué procedimiento emplea el laboratorio.

X El laboratorio utiliza termómetros fijos calibrados en la totalidad de los equipos.

6.13 ¿Con qué frecuencia se registran las temperaturas de estufas de incubación y, heladeras y congeladores? Indicar en observaciones.

X Dos veces al día.Pre y pos-operativa.

6.14 ¿El laboratorio cuenta con el perfil térmico del autoclave?

X

6.15 ¿Se realizan controles químicos y biológicos periódicos para verificar la eficacia del proceso de esterilización del autoclave y la estufa de esterilización? ¿Cuáles y con qué frecuencia?

X 1) Cinta termosensible: siempre.2) Control biológico: a) semanal para esterilizar.b) siempre para eliminación de patógenos.

6.16 pH metro: ¿se ajusta su respuesta usando como mínimo dos buffers de calidad aceptable?

X Soluciones certificadas.

6.17 Pipetas automáticas:¿Se verifica periódicamente la precisión y exactitud del volumen distribuido?

X Hay procedimiento. La frecuencia se establece por apertura de nueva bolsa de tips.

6.18 ¿El laboratorio cuenta con un instructivo o procedimiento para el lavado del material usado en los ensayos?

X

15

7. Rastreabilidad (Trazabilidad) Sí %* No Observaciones7.1 ¿La calibración de los equipos es llevada a cabo por laboratorios de calibración que demuestran su competencia y su capacidad de medición y rastreabilidad? ¿Estos laboratorios de calibración tienen un programa de calibración de los equipos diseñado y operado de modo de asegurar que las calibraciones y las mediciones hechas por el laboratorio de calibración sean rastreables al Sistema Internacional de Unidades (SI)?

X Servicios externos acreditados.

7.2 ¿El laboratorio tiene un programa y un procedimiento para la calibración de sus patrones de referencia?

X

7.3 ¿Los patrones de referencia son calibrados por un organismo que pueda proveer la rastreabilidad?

X Empresas acreditadas

7.4 ¿El laboratorio cuenta con cultivos de referencia?

X ATCC

7.5 ¿De qué colección nacional o internacional provienen los cultivos de referencia?

ATCC

7.6 ¿Qué metodología usa el laboratorio para conservar dichas cepas? Detallar (congelación, liofilización).

Criopreservación

7.7 ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento documentado para el manejo de los cultivos de referencia?

X Se incluye responsables del manejo de cepas.

a) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de reserva?

1

b) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de trabajo?

3

c) ¿Realiza controles de pureza y pruebas bioquímicas? ¿Con qué frecuencia?

X Se realiza en la apertura de la cepa madre.

7.8 ¿Qué uso se le da a las cepas de referencia?

Controles intra – interlaboratorios y control de ensayos en general. Chequeo de medios de cultivo y reactivos.

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones8.1 ¿El laboratorio compra los medios de cultivos y reactivos a proveedores evaluados según un procedimiento documentado?

X

8.2 ¿El laboratorio cuenta con los reactivos y los medios de cultivos necesarios para realizar los ensayos? En el caso que su respuesta sea negativa indicar la causa.

X

16

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones8.3 Medio de cultivo: ¿El fabricante en el momento de la entrega del producto provee información y un certificado acerca de las especificaciones de calidad?

X Especificado en el procedimiento. No se recepciona sin certificado de calidad del producto.

8.4 ¿Las especificaciones de calidad (8.3) incluyen fecha de vencimiento del medio, condiciones de almacenamiento, control de esterilidad, control del crecimiento de los microorganismos de interés (target) y de los microorganismos no deseados (no target) y criterios de aceptabilidad y controles físicos y criterios de aceptabilidad aplicados?

X

8.5 ¿Cada lote de medios de cultivo preparado por el laboratorio o listo para su uso está unívocamente identificado?

X Nombre del medio, fecha de producción, fecha de vencimiento y Nº de envase.

8.6 ¿El laboratorio cuenta con un instructivo o procedimiento documentado para preparar los reactivos y los medios de cultivo?

X PCP e Instructivos y sus correspondientes registros

a) ¿Está especificado el período de validez de los medios preparados y las condiciones de conservación especificadas?

X Según corresponda si el medio está fraccionado en frascos o placas.

b) ¿Se determina el pH del medio de cultivo después del proceso de esterilización?

X

c) ¿Se realizan controles de esterilidad a los medios de cultivos y diluyentes usados en el ensayo? Describir brevemente la metodología.

X 1) Prueba de estufa.2) Blancos.

8.7 ¿El laboratorio ha implementado el instructivo o procedimiento para preparar los reactivos y los medios de cultivo?

X

8.8 ¿Se realizan controles con cepas de referencia de los reactivos usados?

X

8.9 ¿El laboratorio registra y coloca una etiqueta en los medios de cultivo y reactivos indicando la identificación, la concentración, fecha de preparación, fecha de vencimiento, el personal que los preparó?

X Procedimiento de rotulación de medios reactivos y solventes.

8.10 ¿Se efectúan controles periódicos al agua destilada usada en la preparación de medios y reactivos de modo de asegurar su calidad?

X

a) Conductividad. Xb) pH. Xc) Contaminación microbiana. Xd) Presencia de sustancias bactericidas, inhibidoras o interferentes.

X

e) ¿El laboratorio lleva un registro actualizado de los mismos?

X

17

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones8.11 ¿El laboratorio evalúa la calidad de los medios de cultivos en cuanto a su productividad y selectividad? En caso de una respuesta afirmativa especificar la metodología empleada.

X Método ecométrico ( selectividad y productividad )

8.12 Ensayos cuantitativos: ¿El laboratorio verifica que no haya pérdidas significativas de volumen de los diluyentes durante el proceso de esterilización en autoclave? En caso de una respuesta afirmativa especificar la metodología empleada.

No se han acreditado ensayos cuantitativos.

8.13 ¿Está disponible, para el personal técnico, el diagrama de flujo correspondiente al ensayo a realizar?

X

9. Validación de la metodología Sí %* No Observaciones9.1 ¿El laboratorio valida y/o verifica la metodología empleada para realizar los ensayos?9.2 ¿Qué métodos valida y/o verifica? En cada caso indicar el ensayo**, qué matrices y qué parámetro establece y bibliografía de referencia (sensibilidad, especificidad, límite de detección, repetibilidad, reproducibilidad, etc.).a) No normalizados.b) Los métodos que diseña o desarrolla.c) Los métodos normalizados empleados fuera del alcance previsto.d) Métodos normalizados.9.3 ¿La información obtenida de la validación se documenta y archiva?9.4 ¿El laboratorio realiza un informe de validación?

10. Estimación de la incertidumbre Sí %* No Observaciones10.1 ¿El laboratorio realiza la estimación de la incertidumbre de medición?Especificar tipo de ensayo y metodología**.10.2 ¿El laboratorio ha elaborado un procedimiento para la estimación de la incertidumbre de medición?

En los métodos de ensayo se encuentran determinadas las fuentes de incertidumbre.

* %: Grado de implementación en porcentaje** Indicar Nº de ensayo correspondiente al punto 1.2 del formulario A.Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.

18

11. Control de los datos Sí %* No Observaciones11.1 ¿Los cálculos y la transferencia de los datos están sujetos a verificaciones llevadas a cabo de una manera sistemática?11.2 ¿El software usado por el laboratorio está validado? En caso afirmativo especificar tipo de software y su uso.

X Software no validado. Tiene función de auditoria dentro del mismo sistema.

11.3 ¿Se establecen e implementan procedimientos para proteger los datos? ¿Qué procedimientos?

X Resguardo de la información en soporte magnético (PCG). Se realiza back up tres veces al día.

11.4 ¿Se hace el mantenimiento de las computadoras y equipos automatizados con el fin de asegurar que funcionan adecuadamente?

X Responsable de mantenimiento informático.

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio tiene procedimientos para:a) El transporte de las muestras. X No se realiza esa actividadb) La recepción de las muestras. Xc) La manipulación de las muestras. Xd) La protección de las muestras. Xe) El almacenamiento de las muestras. Xf) La conservación o la disposición final de las muestras.

X

12.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la identificación unívoca de las muestras a ensayar a lo largo de la vida de la muestra en el laboratorio?

X Código de barras. Lector óptico.

12.3 ¿El laboratorio tiene procedimientos e instalaciones apropiadas de modo de evitar el deterioro, la pérdida o daño de las muestras durante manipulación, preparación y almacenamiento?

X Instalaciones adecuadas para las diferentes matrices sujetas a ensayo.

12.4 ¿Se verifican las condiciones especificadas para las muestras en el momento de su recepción en el laboratorio y registran y comunican al cliente los apartamientos de las mismas?

X Procedimiento. Mesa de entradas.1) Aceptación o rechazo.2) Desvío autorizado.3) Comunicación al cliente.


19

13. Aseguramiento de la calidad de los resultados

Sí %* No Observaciones

13.1 ¿El laboratorio usa cepas de referencia durante la realización de los ensayos (control positivo, negativo)?

X Control positivo. Solo en métodos cualitativos.

13.2 ¿El laboratorio determina y documenta, para cada ensayo y matriz, la repetibilidad y reproducibilidad de sus analistas en forma periódica? Indicar la frecuencia.

No se han acreditado ensayos cuantitativos. En los métodos cuantitativos en productos lácteos, se determina sólo reproducibilidad. Frecuencia mensual por analista.

13.3 ¿El laboratorio participa en forma periódica de ensayos de interlaboratorio? Indicar los ensayos, la frecuencia y las matrices.

X Productos lácteos: Indicadores de higiene, Salmonella spp y Listeria monocytogenes -cuali y cuantitaivo-.Productos cárnicos: Salmonella spp y Escherichia coli O157 : H7.

13.4 El laboratorio:a) Analiza y documenta los resultados obtenidos durante los ensayo intralaboratorios e interlaboratorios.

X Registros Intra e Interlaboratorios.Solo se realizan intralaboratorios cualitativos.

b) Establece un criterio de aceptación. X Cualitativos (intra – Inter): 1) No falsos positivos.2) No falsos negativos.Cuantitativos (Inter.):1) Sujeto a evaluación externa.

c) Toma acciones correctivas en caso de desviación.

X 1) Identificación de las fuentes de incertidumbre asociadas.2) Nuevo intralaboratorio intensivo.3) Reentrenamiento.

13.5 ¿El laboratorio analiza y documenta las tendencias de los resultados obtenidos durante los ensayo intralaboratorios e interlaboratorios?

X

13.6 ¿En el caso que el laboratorio tome una acción correctiva, dicha acción y su fundamentación queda documentada?

X

* %: Grado de implementación en porcentajeNota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta

encuesta.

20


Fecha: 22 de agosto de 2005

Laboratorio: _INTI- Cereales y Oleaginosas

(Parque Tecnológico Miguelete)

Director/Responsable del Laboratorio: Director Ing. Nicolás Apro/ Responsable del Laboratorio: Dra Marcela Alvarez / Responsable de la Calidad: Bioq. Gladys Mastromónaco

Dirección del laboratorio: Av Gral Paz 5445

Ciudad:_San Martín Buenos Aires______País:__Argentina_____

Dependencia

Institución: Instituto Nacional de Tecnología Industrial

Organización:___________________________________________________________

Empresa:_______________________________________________________________

21

1. Ensayos:

1.1 Número total de ensayos microbiológicos que realiza el laboratorio: Aproximadamente 2200 ensayos anuales1.2 ¿Cuáles? Listar

Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada

1 Recuento en placa Matrices de origen vegetal FDA-BAM 2 Recuento de hongos y

levadurasMatrices de origen vegetal FDA- BAM y APHA

3 Recuento de E. coli y coliformes totales

Matrices de origen vegetal FDA-BAM

4 Recuento de Enterobacterias

Matrices de origen vegetal FDA-BAM

5 Recuento de anaerobios reductores de sulfito

Matrices de origen vegetal Tatcher

6 Presencia de Listeria monocytogenes:

Matrices de origen vegetal ME 304 (Basado en ISO 11290-1: 1996 (E))

7 Presencia de Salmonella: Matrices de origen vegetal ME 301 (FDA-BAM Online Abril 2003

8 Recuento de S aureus coagulasa positiva:

Matrices de origen vegetal Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods APHA 3rd Ed 1992

9 Recuento de B. cereus: Matrices de origen vegetal Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods APHA 3rd Ed. 1992.

10 Recuento de anaerobios reductores de sulfito:

Matrices de origen vegetal Análisis Microbiológico de Alimentos F.S. Tatcher and D.S. Clark 1973.

11 Recuento de esporulados anaerobios mesófilos:

Matrices de origen vegetal Compendium of Analytical Methods vol.3 Minister of Supply and Services Canada MFLP-44Ed. 1992

12 Presencia de Cl. perfringens :

Matrices de origen vegetal Compendium of Analytical Methods vol.2 Minister of Supply and Services Canada MFHPB-23 Ed. 1992.Compendium of Methods for the Microbiological Exanmination of Foods APHA 3rd Ed. 1992.FDA-BAM 8th Ed. Revision A 1998.

22

Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada

13 Recuento de microorganismos osmotolerantes:

Matrices de origen vegetal Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods APHA 3rd Ed. 1992.

14 Recuento de bacterias proteolíticas: :

Matrices de origen vegetal Standard Methods for the Examination of Dairy Products 14 th Ed. 1978.

15 Recuento de bacterias lipolíticas: :

Matrices de origen vegetal Standard Methods for the Examination of Dairy Products 14 th Ed. 1978.

16 Recuento de Lactobacillus: Matrices de origen vegetal Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods APHA 3rd Ed. 1992.

17 Otros ensayos como estudios de vida útil, de esterilidad comercial, etc

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro:Extensión de la acreditación de Listeria monocytogenes a las siguientes matrices: Pizzas congeladas y vegetales congelados.Acreditación de Recuento de hongos y levaduras en muestras de cereales y recuento de coliformes totales y E. coli

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación?Los resultados emitidos aportan confianza y seguridad a la hora de exportar un producto, mas aún con las exigencias del mercado internacional.

1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio:Cuatro


Ensayos Listar Matrices Metodología usadaPresencia de Salmonella en 25g Huevo en polvo, mezclas

para tortas, masas, galletas, panes y postres, fórmulas infantiles, mayonesa, maíz, papas prefritas, caseína, harinas de soja y trigo, productos que contiene huevos, especias, chocolate, muestras ambientales, aceite de jojoba

FDA-BAM Online Abril 2003

23

Ensayos Listar Matrices Metodología usadaPresencia de Listeria monocytogenes

Papas fritas congeladas y muestras ambientales

ISO 11290-1: 1996 (E))

Recuento en Placa por técnica tradicional

Muestras de origen vegetal FDA-BAM Online Enero 2001

Recuento en Placa por técnica Petrifilm 3M

Muestras de origen vegetal ME 303 (Basado en técnicas recomendadas por FDA-BAM Online Enero 2001 Capítulo 3; AOAC 1995 Rev. Marzo 1998 Official Methods 990.12 , Nota 3M, Instructivos y Guías de Interpretación de 3M Petrifilm TM).

1.7 Estimar el número de ensayos que realiza el laboratorio de microbiología anualmente: Aproximadamente 2200 ensayos anuales


x

2.2 Indicar la fecha de implementación del sistema x 1999 recibimos el certificado de acreditación por UKAS

2.3 La documentación del sistema de calidad:a) ¿Es comunicada y entendida por el personal? xb) Indicar cómo se comunica la información relativa al sistema de calidad.

A través de reuniones de Calidad y por los medios de red, e-mail y otros disponiendo la documentación al personal

c) ¿Está disponible para el personal? xd) ¿El laboratorio cuenta con un Manual de Calidad?

x


x


x


x

d) Procedimiento para Control de Registros. xe) Procedimiento para Proteger y Respaldar los x

24

2. Sistema de calidad Sí %* No ObservacionesRegistros almacenados electrónicamente.f) Procedimiento para Revisión de Pedidos, Ofertas y Contratos.

x

g) Procedimiento para Informe de Resultados. xh) Procedimiento para Servicios al Cliente. xi) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos. xj) Procedimiento para Auditorias Internas xk) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

x


x


x


x


x


x


x

d) Procedimiento para Control de Registros. xe) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

x


x

g) Procedimiento para Informe de Resultados. xh) Procedimiento para Servicios al Cliente. xi) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos. xj) Procedimiento para Auditorías Internas. xk) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

x


x


x


x


25


x


x


x


x

4. Personal Sí %* No Observaciones4.1 ¿Cuántas personas trabajan en el área del laboratorio de microbiología excluyendo las funciones administrativas y de gestión?

5 en el laboratorio1 en la administración2 Calidad


x


x


El entrenamiento que haya recibido, su capacidad y habilidad para realizar esa tarea.


x


x


x Norma ISO/IEC 17025, BPM, HACCP, seguridad e higiene, Maestría en calidad industrial de alimentos (INCALIN)


x


x


x Es documentado durante el entrenamiento. Además el laboratorio cuenta con un manual de seguridad.

26

4. Personal Sí %* No Observaciones4.11 ¿El laboratorio tiene un Procedimiento para Capacitación del Personal?

x


x


x


x 8 áreas solo del laboratorio de microbiología

5.3 ¿Las actividades de preparación de medios de cultivo, preparación de muestras, descontaminación de las muestras y cultivos y la siembra son llevadas a cabo en áreas separadas del laboratorio?Detalle cómo realiza el laboratorio estas tareas.

x Existe un área especial para la preparación de los medios de cultivo identificada como cocina, otro sector de autoclaves, una cámara de siembra la cual cuenta con una cabina de seguridad. Éstas áreas están correctamente identificadas y separadas.


x

a) Separando las actividades en tiempo y espacio.b) Mediante la construcción del laboratorio según un diseño “sin camino de regreso”.c) Llevando a cabo los procedimientos de una manera secuencial, usando las precauciones apropiadas para asegurar la integridad de la muestra y del ensayo. Por ejemplo uso de recipientes herméticamente cerrados.

x

d) Otros5.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada infraestructura para:a) la recepción de la muestra xb) El almacenamiento de la muestra (espacio suficiente y temperaturas adecuadas de almacenamiento en heladeras y congeladores).

x


x

d) Almacenar los cultivos de referencia. x5.6 ¿El laboratorio cuenta con procedimientos para eliminar los desechos químicos o biológicos potencialmente peligrosos?

x

27

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.7 ¿El laboratorio cuenta con suficiente espacio de modo que el personal realice adecuadamente el trabajo durante los ensayos? Detallar el área estimada en m2 por analista

x Aproximadamente 3 m2 por persona.

5.8 ¿El laboratorio cuenta con un sistema de ventilación? Especificar sus características (tipos de filtros, etc.).

x Filtros HEPA (presión positiva).


x


x


x Es un área donde se realizan controles ambientales de aire, superficie. Control de temperatura ambiental (termómetro).Se mantiene los ambientes cerrados y se controlan los accesos a toda persona ajena al mismo.Se dan instrucciones escrita al personal de limpieza.


x

5.13 MONITOREO AMBIENTAL DEL AIRE: ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento para monitorear en cuanto a su carga microbiana el aire en la sala de siembra y preparación de muestras?( en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo y diluyentes).

x Por técnica de Petrifilm y metodología tradicional (basada en FDA-BAM) se hace un recuento de bacterias mesófilas totales y de hongos


x Por técnica de Petrifilm, se realiza un recuento de mesófilos totales y de hongos y la presencia de patógenos como Salmonella (por FDA_BAM)


x Por técnica de Petrifilm, se realiza un recuento de mesófilos totales y de hongos


x


x la presencia de patógenos como Salmonella, técnica basada en la del FDA-BAM

28

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.15 ¿En los procedimientos mencionados en los puntos 5.13 y 5.14 se ha establecido?:a) Lugar de toma de muestra (En caso afirmativo indicarlas en observaciones).

x Hisopados de: Picaportes de las puertas de entrada a la oficina; mesadas de las cámaras de siembra, de la sala de tinción, de la sala de lectura de resultados, del lavadero, de la cocina; canilla; heladeras; estufas y manos de un analista


x Cada 3 meses


x Recuento de bacterias mesófilas totales y Hongos: no mas de 5 UFC/placa. En caso de Presencia de Salmo nella el criterio es ausencia


x Programa de limpieza y desinfección. Posterior control.


x


x Sala de siembras de hongos y bacterias. Sala de preparación de medios.Y equipamiento.

5.18 ¿El laboratorio tiene documentado, implementado y disponible para el personal el plan de higiene o los procedimientos operativos empleados durante la realización del trabajo en el laboratorio destinados a evitar la contaminación de las muestras y el personal?

x


x


x Sala de lavado. Allí se hace microscopia y tinción.

29

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.21 ¿En caso que las condiciones ambientales sean inadecuadas el laboratorio interrumpe los ensayos? En caso afirmativo indicar en observaciones si el laboratorio cuenta con un procedimiento.

x Detallado en los métodos de ensayo.


x Alcohol al 70 % y luz UV.


x Fumigación contratada a tercero.


x Las realiza proveedores de la misma institución (INTI)


x

6.3 ¿Antes de poner en servicio un equipo, el laboratorio, lo calibra o verifica con el fin de asegurar que responde a las exigencias especificadas del laboratorio y está conforme a las especificaciones normalizadas pertinentes?

x


x Balanzas anualmente.Autoclaves anualmente.Estufas de incubación verificaciones internas anualmente (perfiles de temperatura).Cabina de seguridad anualmente.Baños de agua verificaciones internas anualmente.Peachímetro en cada uso con buffers de referencia.

30

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.5 ¿El laboratorio documenta e implementa programas para la limpieza, mantenimiento, calibración y/o verificación y esterilidad de los equipos? En caso afirmativo indicar para qué equipos.

x Balanzas, autoclaves, microscopio, estufas de incubación, stomacher, cabina de seguridad, baños de agua.


x Balanzas anualmente.Autoclaves anualmente.Estufas de incubación verificaciones internas anualmente (perfiles de temperatura).Cabina de seguridad anualmente.Baños de agua verificaciones internas anualmente.Criterios definidos internamente y por Normas ENAC para lab de microbiología


x Microscopio: anualmenteCabina de seguridad: anualmente.


x

6.9 ¿Están inequívocamente identificado cada equipo con su soporte lógico utilizado para los ensayos (incluido su estado de calibración)?

x


x


x Etiqueta de color en la cual queda detallada la causa del fuera de servicio.


x

31

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.13 ¿Con qué frecuencia se registran las temperaturas de estufas de incubación y, heladeras y congeladores? Indicar en observaciones.

x Diariamente


x


x Control químico en cada proceso.Control físico en cada proceso Control biológico cada 15 días.


x


x


x


x Todavía hay muchos proveedores de equipos claves que no se encuentran bajo estos requisitos.


x


x

7.4 ¿El laboratorio cuenta con cultivos de referencia? x7.5 ¿De qué colección nacional o internacional provienen los cultivos de referencia?

ATCC


Congelación


x


x Hasta cuatro


x No se hacen repiques de la cepas de trabajo. Se las utiliza por 1 mes o hasta que se agote

32

7. Rastreabilidad (Trazabilidad) Sí %* No Observacionesc) ¿Realiza controles de pureza y pruebas bioquímicas? ¿Con qué frecuencia?

x Aproximadamente cada 3 meses

7.8 ¿Qué uso se le da a las cepas de referencia? x Control positivo.


x


x Salvo en casos donde no se puede tener disponibilidad por costos elevados.

8.3 Medio de cultivo: ¿El fabricante en el momento de la entrega del producto provee información y un certificado acerca de las especificaciones de calidad?

x


x


x


x


x


x


x Se incuba a 35º y 55º C tubos con medio de cultivo o caldo para el control de esterilidad.


x


x


x

8.10 ¿Se efectúan controles periódicos al agua destilada usada en la preparación de meios y reactivos de modo de asegurar su calidad?

x Se controla el agua del destilador

a) Conductividad. xb) pH. x

33

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observacionesc) Contaminación microbiana. xd) Presencia de sustancias bactericidas, inhibidoras o interferentes.

x


x

8.11 ¿El laboratorio evalúa la calidad de los medios de cultivos en cuanto a su productividad y selectividad? En caso de una respuesta afirmativa especificar la metodología empleada.

x Control de productividad del medio (Ecométrico)


x Técnica de pesada diseñada por el laboratorio.


x

9. Validación de la metodología Sí %* No Observaciones9.1 ¿El laboratorio valida y/o verifica la metodología empleada para realizar los ensayos?

x Los que se encuentran en el alcance de la acreditación y los nuevos a incorporar.

9.2 ¿Qué métodos valida y/o verifica? En cada caso indicar el ensayo**, qué matrices y qué parámetro establece y bibliografía de referencia (sensibilidad, especificidad, límite de detección, repetibilidad, reproducibilidad, etc.).

Los métodos acreditados ver 1.6

a) No normalizados. xb) Los métodos que diseña o desarrolla. xc) Los métodos normalizados empleados fuera del alcance previsto.

x

d) Métodos normalizados.9.3 ¿La información obtenida de la validación se documenta y archiva?

x

9.4 ¿El laboratorio realiza un informe de validación?

x

10. Estimación de la incertidumbre Sí %* No Observaciones10.1 ¿El laboratorio realiza la estimación de la incertidumbre de medición?Especificar tipo de ensayo y metodología**.

x Dentro de los ensayos acreditados.

10.2 ¿El laboratorio ha elaborado un procedimiento para la estimación de la incertidumbre de medición?

x


34

11. Control de los datos Sí %* No Observaciones11.1 ¿Los cálculos y la transferencia de los datos están sujetos a verificaciones llevadas a cabo de una manera sistemática?

x

11.2 ¿El software usado por el laboratorio está validado? En caso afirmativo especificar tipo de software y su uso.

x


x Todos los registros son conservados por el laboratorio en libros de acta.


x Se podría hacer mas respecto a este punto.

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio tiene procedimientos para:a) El transporte de las muestras. xb) La recepción de las muestras. xc) La manipulación de las muestras. xd) La protección de las muestras. xe) El almacenamiento de las muestras. xf) La conservación o la disposición final de las muestras. x12.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la identificación unívoca de las muestras a ensayar a lo largo de la vida de la muestra en el laboratorio?

x


x


x


35




x


x Cada 3 meses


x Recuento en placa: (REDELAC) mensualmente y 2 interlaboratorios anuales, matriz leche crudaPresencia de Salmonella y Listeria monocytogenes 2 interlaboratorios anuales matriz leche


x

b) Establece un criterio de aceptación. xc) Toma acciones correctivas en caso de desviación.

x


x


x


encuesta.

36


Fecha: Agosto de 2005

Laboratorio: Laboratorio de Microbiología de INTI-Carnes

Responsable del Laboratorio: Bioq. Carolina Alarcón

Bioq. Valeria La Manna (suplente)

Directora de INTI-Carnes: Ing. Ana Svensen

Dirección del laboratorio: Avda. Gral. Paz 5445 Partido de San Martín – Buenos Aires

País: Argentina

Institución: Instituto Nacional de Tecnología Industrial (INTI)

37

1. Ensayos:


Denominación MétodoAgua (potabilidad) CITECA AM-MA-07, AM-MA-04, AM-MA-08

Habilitado por SENASABacillus cereus ICMSF, 1988

Clostridios sulfito reductores en agua ISO 6461/1, 1986 Habilitado por SENASA

Clostridios sulfito reductores en producto Angelotti, 1962Clostridium perfringens Angelotti, 1962Coliformes Totales y E. coli en agua CITECA AM-MA-07, ref. APHA, 20th Ed., 1998Coliformes Totales y E. coli en producto AOAC 991.14, 1995Enterobacterias NF ISO 7402, 1993Escherichia coli O157:H7 (Detección por método tradicional)

CITECA AM-MA-01, ref. FSIS-USDA (Rev. #2, 2001)

Habilitado por SENASAEscherichia coli O157:H7 (Detección por método rápido)

CITECA AM-MA-06, ref. FSIS-USDA (Rev. #2, 2001) y AOAC N° 2000.14

Habilitado por SENASAEsterilidad comercial FDA-BAM, Ed. 8ª, 1995Estreptococos fecales en agua ISO 7899/2

Habilitado por SENASAEstreptococos fecales en producto ICMSF, 1988 Hongos (mohos y levaduras) APHA, 1992Lactobacilos Deman, Rogosa y Sharpe, 1960Listeria monocytogenes en producto y ambientales

CITECA AM-MA-05, ref. FSIS-USDA, abril 2002Habilitado por SENASA

Pseudomonas aeruginosa en agua CITECA AM-MA-08, ref. APHA, 1998Pseudomonas aeruginosa en producto Brown y Lowbury, 1965Recuento total de aerobios en agua CITECA AM-MA-04, referencia ICMSF 1988

Habilitado por SENASARecuento total de aerobios mesófilos ICMSF, 1988Recuento total de aerobios termófilos APHA, 1992Recuento total de anaerobios mesófilos APHA, 1992Recuento total de anaerobios termófilos APHA, 1992Salmonella en agua APHA, 1998

Habilitado por SENASASalmonella en producto y ambientales CITECA AM-MA-03, ref. Federal Register Vol 61

N° 144 (2002) FSIS-USDAHabilitado por SENASA

Staphylococcus aureus en agua APHA, 1992Habilitado por SENASA

Staphylococcus aureus en producto ICMSF, 1988

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro:Ver 1.6

38

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación?Trabajar para clientes que requieran ensayos acreditados, por ejemplo: exportadores de alimentos.

1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio 1.6 ¿Cuáles? Listar

El listado de métodos que se presenta a continuación corresponde a ensayos acreditados por el UKAS (United Kingdom Accreditation Service) desde 1999 hasta julio de 2005. Se solicitó la baja para dichas acreditaciones y en agosto de 2005 recibiremos la primera Auditoría de Acreditación del OAA (Organismo Argentino de Acreditación) solicitando la acreditación de estos ensayos y además:

a) Determinación de Pseudomonas aeruginosa en aguab) Determinación de coliformes totales y E. coli en carnes

DETERMINACIÓN MATRIZ MÉTODODetección de

E. coli O157:H7Carnes y Productos

CárnicosUSDA-FSIS, Capítulo 5, Revisión 2001 (tradic.)

USDA-FSIS, Capítulo 5, Revisión 2001 (Screening)

Determinación de Coliformes totales y E. coli

Agua APHA, Ed 20th (1998)

Detección de Salmonella Carnes y Productos Cárnicos

USDA-FSIS, Capítulo 4, Revisión2002

Detección de Listeria monocytogenes

Carnes y Productos Cárnicos

USDA-FSIS, Capítulo 8, Revisión 2002



√

2.2 Indicar la fecha de implementación del sistema Año 19992.3 La documentación del sistema de calidad:a) ¿Es comunicada y entendida por el personal? √b) Indicar cómo se comunica la información relativa al sistema de calidad.

El Responsable de Calidad entrega copias controladas de los documentos emitidos al personal involucrado

c) ¿Está disponible para el personal? √d) ¿El laboratorio cuenta con un Manual de Calidad? √2.4 ¿La organización ha elaborado y aprobado los siguientes procedimientos?:a) Procedimiento para Elaborar y Controlar Documentos.

√

39

2. Sistema de calidad Sí %* No Observacionesb) Procedimiento para Clasificar y Codificar Documentos.

√


√

d) Procedimiento para Control de Registros. √e) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

Los registros se conservan en papel


√

g) Procedimiento para Informe de Resultados. √h) Procedimiento para Servicios al Cliente. √i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos. √j) Procedimiento para Auditorias Internas √k) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

√


√

m) Procedimiento para la Evaluación de Proveedores √n) Procedimiento para la Compra de Servicios y Suministros

√


√


√


√

d) Procedimiento para Control de Registros. √e) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

Los registros se conservan en papel

f) Procedimiento para Revisión de Pedidos, Ofertas y Contratos.g) Procedimiento para Informe de Resultados. √h) Procedimiento para Servicios al Cliente. √i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos. √j) Procedimiento para Auditorías Internas. √k) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

√


√

m) Procedimiento para la Evaluación de Proveedores. √n) Procedimiento para la Compra de Servicios y Suministros.

√

40


√


√ Cuando la no conformidad pone en riesgo la validez de los resultados


√ Responsables Técnicos de Área y Director Técnico


√


6


√


√


Existen procedimientos de entrenamiento para distintas actividades y funciones


√


√


√ El personal técnico asiste a cursos de calidad en laboratorios, norma ISO 17025, incertidumbre, etc.


√ Existen procedimientos de entrenamiento y reentrenamiento

4.9 ¿En la documentación del sistema, para cada cargo clave, está asignado un reemplazante? √4.10 ¿El laboratorio se asegura que todo el personal técnico que trabaja en el laboratorio de microbiología está capacitado o tiene un adecuado manejo en técnicas de esterilidad y manipulación de especimenes potencialmente infecciosos? ¿Cómo? ¿Lo documenta?

√ Se registra en la planilla de entrenamiento

41


√


√


√


- Sala de microbiología (1)- Sala de siembra, con cabina de flujo laminar (2)- Sala de estufas (3)


50%

(1) Preparación y esterilización de medios, lavado y acondicionamiento de material, decontaminación. (2) Preparación y seguimiento de muestras, esterilización por filtración.


√


√

b) Mediante la construcción del laboratorio según un diseño “sin camino de regreso”. √c) Llevando a cabo los procedimientos de una manera secuencial, usando las precauciones apropiadas para asegurar la integridad de la muestra y del ensayo. Por ejemplo uso de recipientes herméticamente cerrados.

√

d) Otros

5.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada infraestructura para:a) la recepción de la muestra √b) El almacenamiento de la muestra (espacio suficiente y temperaturas adecuadas de almacenamiento en heladeras y congeladores).

√

c) La incubación de los medios de cultivo sembrados (estufas de incubación). √d) Almacenar los cultivos de referencia. √

42

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.6 ¿El laboratorio cuenta con procedimientos para eliminar los desechos químicos o biológicos potencialmente peligrosos?

√


√ 8 m2 por analista


√Filtro de entrada de aire


√


50%

Cuenta con un grupo electrógeno no automático

5.11 ¿El laboratorio toma precauciones de modo que en el área del laboratorio no haya polvo, corrientes de aire o temperaturas extremas? ¿Cuáles?

√Sistemas de calefacción y aire acondicionado, ventanas selladas, sistema de ventilación con filtros.

5.12 ¿El laboratorio lleva registros de las temperatura ambiente en el área del lab.?

√


√Exposición de placas para Recuento Total de aerobios mesófilos, en medio Plate Count. Alternativamente se utilizan medios para mohos y levaduras.


√Hisopados


√Hisopados, siembra en PC, diluyente SFP.


√

c) Presencia de patógenos (en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo, diluyentes, y los microorg. patógenos investigados).

√SalmonellaListeriaE. coli O157:H7

5.15 ¿En los procedimientos mencionados en los puntos 5.13 y 5.14 se ha establecido?:

43

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observacionesa) Lugar de toma de muestra (En caso afirmativo indicarlas en observaciones). √

Se seleccionan distintos sectores y mesadas rotativamente


√Sala de Siembra: semanalSala de Microb.: mensual


√4 Sala de Siembra: 5 ufc

totales5 Flujo laminar: 1 ufc en

totalSala de Micro.: 15 ufc totales

d) Acciones correctivas en caso de desvío (En caso afirmativo indicarlas en obsev.) √

Limpieza, exposición a la luz UV y nuevo monitoreo

5.16 ¿El laboratorio cuenta con un programa implementado de limpieza y de desinfección? √5.17 ¿Dicho programa la limpieza (5.16) qué zonas del laboratorio incluye? Numerar en observaciones.

Sala de SiembraSala de Microbiología

5.18 ¿El laboratorio tiene documentado, implementado y disponible para el personal el plan de higiene o los proced. operativos empleados durante la realización del trabajo en el laboratorio destinados a evitar la contaminación de las muestras y el personal?

√


√


√En la Sala de Microbiología


√Cuando las condiciones ambientales pueden interferir en la calidad de los ensayos


√Etanol 70%

44

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.23 ¿El laboratorio cuenta con medidas para eliminar y prevenir la proliferación de insectos en el área del laboratorio de microbiología? En caso afirmativo indicar las medidas empleadas y si son efectivas.

√Fumigación con productos habilitadosVentanas selladas


√


√


√


√Están incluidos todos los equipos involucrados en los ensayos para los que se solicita acreditación.


√Están incluidos todos los equipos para los que se considera necesario el programa.


√Están incluidos todos los equipos involucrados en los ensayos para los que se solicita acreditación: Termómetros, balanzas, pesas, incubadoras, baños termostáticos, timers, etc.

6.7 ¿El mantenimiento de los equipos esenciales se realiza a intervalos especificados? En caso afirmativo indicar en observaciones los equipos, tipo y la

√Los datos figuran en los programas anuales

45

frecuencia de mantenimiento.


√

6.9 ¿Está inequívocamente identificado cada equipo con su soporte lógico utilizado para los ensayos (incluido su estado de calib.)?

√

6.10 ¿Los resultados de la calibración y verificación quedan registrados? √6.11 ¿Cuándo un equipo arroja resultados erróneos o está fuera de servicio se indica claramente para todo el personal? ¿Qué metodología usa? Explique brevemente

√Se coloca una etiqueta indicando “fuera de servicio”, en lugar visible sobre el equipo.


√

6.13 ¿Con qué frecuencia se registran las temperaturas de estufas de incubación y, heladeras y congeladores? Indicar en obs.

Diariamente

6.14 ¿El laboratorio cuenta con el perfil térmico del autoclave? √6.15 ¿Se realizan controles químicos y biológicos periódicos para verificar la eficacia del proceso de esterilización del autoclave y la estufa de esterilización? ¿Cuáles y con qué frecuencia?

√Autoclave: control con esporas (mensual)Estufa: control de ausencia de desarrollo (por lote)Medios de cultivo (por lote)Cintas indicadoras de calor (siempre)


√


√

6.18 ¿El laboratorio cuenta con un instructivo o procedimiento para el lavado del material √

46

usado en los ensayos?


√


√


√

7.4 ¿El laboratorio cuenta con cultivos de referencia? √7.5 ¿De qué colección nacional o internac. provienen los cultivos de referencia?

ATCCInst. Dr. Carlos Malbrán


Congelación (crioviales)


√


4 (cuatro)


No está definido

c) ¿Realiza controles de pureza y pruebas bioquímicas? ¿Con qué frecuencia? √

Cada repique de las cepas de referencia


- Control de calidad de ensayos (seg. en paralelo) - Evaluación de medios de cultivo – método ecométrico- Inoculación de muestras intralaboratorio, etc.


√

47

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones8.2 ¿El laboratorio cuenta con los reactivos y los medios de cultivos necesarios para realizar los ensayos? En el caso que su respuesta sea negativa indicar la causa.

√


√


80%


√


√


√

b) ¿Se determina el pH del medio de cultivo después del proceso de esterilización? √c) ¿Se realizan controles de esterilidad a los medios de cultivos y diluyentes usados en el ensayo? Describir brevemente la metodología.

√Incubación y observación de cambios y/o desarrollo.


√

8.8 ¿Se realizan controles con cepas de referencia de los reactivos usados? √8.9 ¿El laboratorio registra y coloca una etiqueta en los medios de cultivo y reactivos indicando la identificación, la concentración, fecha de preparación, fecha de vencimiento, el personal que los preparó?

√


√

a) Conductividad. √b) pH. √

48

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observacionesc) Contaminación microbiana. √d) Presencia de sustancias bactericidas, inhibidoras o interferentes. √e) ¿El laboratorio lleva un registro actualizado de los mismos? √8.11 ¿El laboratorio evalúa la calidad de los medios de cultivos en cuanto a su productividad y selectividad? En caso de una respuesta afirmativa especificar la metodología empleada.

√Método ecométrico


√


√

9. Validación de la metodología Sí %* No Observaciones9.1 ¿El laboratorio valida y/o verifica la metodología empleada para realizar los ensayos? √9.2 ¿Qué métodos valida y/o verifica? En cada caso indicar el ensayo**, qué matrices y qué parámetro establece y bibliografía de referencia (sensibilidad, especificidad, límite de detec., repetibilidad, reproducibilidad, etc)

Todos los métodos habilitados y/o acreditados. Se establece el límite de detección para las técnicas de ausencia/presencia y los parámetros de repetibilidad y reproducibilidad para las técnicas cuantitativas.

a) No normalizados. * * Los métodos se validan independientemente de su origen

b) Los métodos que diseña o desarrolla. * * Los métodos se validan independientemente de su origen

c) Los métodos normalizados empleados fuera del alcance previsto.

* * Los métodos se validan independientemente de su origen

d) Métodos normalizados. * * Los métodos se validan independientemente de su origen

9.3 ¿La información obtenida de la validación se documenta y archiva? √9.4 ¿El laboratorio realiza un informe de validación? √

10. Estimación de la incertidumbre Sí %* No Observaciones10.1 ¿El laboratorio realiza la estimación de la incertidumbre de medición?

Ver parámetros mencionados anteriormente

49

Especificar tipo de ensayo y metodología**.10.2 ¿El laboratorio ha elaborado un procedimiento para la estimación de la incertidumbre de medición?

√

** Indicar Nº de ensayo correspondiente al punto 1.2 del formulario A.


√


√


√Normas para seguridad de documentación


√

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio tiene procedimientos para:a) El transporte de las muestras. Sólo recomendaciones al clienteb) La recepción de las muestras. √c) La manipulación de las muestras. √d) La protección de las muestras. √e) El almacenamiento de las muestras. √f) La conservación o la disposición final de las muestras. √12.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la identificación unívoca de las muestras a ensayar a lo largo de la vida de la muestra en el laboratorio?

√

12.3 ¿El lab. tiene proced. e instalaciones apropiadas para evitar deterioro, pérdida o daño de las muestras durante manipulación, preparación y almacenamiento?

√

12.4 ¿Se verifican las condiciones especificadas para las muestras en el momento de su recepción y registran y comunican al cliente los apartamientos?

√



13.1 ¿El laboratorio usa cepas de referencia durante la realización de los ensayos (control √

50

positivo, negativo)? 13.2 ¿El laboratorio determina y documenta, para cada ensayo y matriz, la repetibilidad y reproducibilidad de sus analistas en forma periódica? Indicar la frecuencia.

√Determinac. de coliformes y E. coli en productos


√ - Salmonella

- Listeria- E. coli O157:H7- Recuento de Aerobios- Coliformes Totales y E. coliMatrices: prod. cárnicos y leche


√

b) Establece un criterio de aceptación. √c) Toma acciones correctivas en caso de desviación. √13.5 ¿El laboratorio analiza y documenta las tendencias de los resultados obtenidos durante los ensayo intralaboratorios e interlaboratorios?

√


√

51


Fecha: 19 de agosto de Agosto

Laboratorio: INTI Lácteos – PTM.

Director/Responsable del Laboratorio:_Roberto Castañeda_

Dirección del laboratorio: Av. Gral Paz 5445

Ciudad: San Martín ( Bs As) País:Argentina

Dependencia

Ministerio: Economia - Sub- secretaría de Industria y Comercio

Institución: Instituto Nacional de Tecnología Industrial - INTI

Organización:___________________________________________________________

Empresa:_______________________________________________________________

52

1. Ensayos:


Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada1 Rto de microorganismos a 30ºC Leche cruda y en

polvoNorma FIL- IDF 100B :1991

2 Rto de coliformes a 30ºC Leche y productos lácteos.

Norma FIL- IDF 73B :1998parte 1 y 2

3 Rto de coliformes a 45ºC Leche y productos lácteos.

CMMEF APHA: 1992

4 Rto presuntivo de E. coli Leche y productos lácteos.

Norma FIL- IDF 170:1999Parte 2

5 Rto de S. aureus coagulasa positiva

Productos lácteos en polvo , Leche y

productos lácteos

Norma FIL- IDF 60 C: 1997Norma FIL- IDF 145 A: 1997

6 Detección de Salmonella spp Leche y productos lácteos

Norma FIL- IDF 93B: 2001

7 Detección de L. monocytogenes Leche y productos lácteos

Norma FIL- IDF 143 A : 1995

8 Recuento de esporulados fermentadores de lactato

Leche - Quesos Rev. LF Nº4511986

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro:Detección de Salmonella Spp, en leche en polvo y quesos , según Norma FIL-IDF 93B :2001

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación?Dar garantía de la calidad y confianza de los resultados emitidos.

1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio:1.6 ¿Cuáles? Listar

Ensayos Listar Matrices Metodología usadaRto de microorganismos a 30ºC Leche cruda y en polvo Norma FIL- IDF 100B :1991

1.7 Estimar el número de ensayos que realiza el laboratorio de microbiología anualmente: 1500


x


x Marzo 1998

53

2. Sistema de calidad Sí %* No Observaciones2.3 La documentación del sistema de calidad:a) ¿Es comunicada y entendida por el personal?

x


Documentación y talleres


x


x


x


x


x


x

g) Procedimiento para Informe de Resultados. xh) Procedimiento para Servicios al Cliente. xi) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos.

x

j) Procedimiento para Auditorias Internas xk) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

x


x


x


x


x


x


x


x

54

2. Sistema de calidad Sí %* No Observacionesf) Procedimiento para Revisión de Pedidos, Ofertas y Contratos.

x

g) Procedimiento para Informe de Resultados. xh) Procedimiento para Servicios al Cliente.i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos.

x

j) Procedimiento para Auditorías Internas. xk) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

x


x


x


x


55


x


x


x Responsable del laboratorio


x


Cinco (5)


x


x


Capacitarlo


x


x


x Maestría en Calidad DGQTalleres y cursos sobre ISO 17025Formación de auditores


x


x


x Plan de Calidad


x


x

56


x


-Preparación de muestras-Sala de siembra-Preparación de medios de cultivo-Sala de lavado - Sala de autoclave-Oficinas


Se realizan las tareas en las áreas correspondientes (5.2)


x

a) Separando las actividades en tiempo y espacio. xb) Mediante la construcción del laboratorio según un diseño “sin camino de regreso”.

x


x

d) Otros Uso de campana de Bioseguridad

5.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada infraestructura para:a) la recepción de la muestra xb) El almacenamiento de la muestra (espacio suficiente y temperaturas adecuadas de almacenamiento en heladeras y congeladores).

x


x

d) Almacenar los cultivos de referencia. x5.6 ¿El laboratorio cuenta con procedimientos para eliminar los desechos químicos o biológicos potencialmente peligrosos?

x


x Area aprox 12m2/ personal


x


x

57

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.10 ¿El laboratorio cuenta con un sistema de energía eléctrica ininterrumpida?

x

5.11 ¿El laboratorio toma precauciones de modo que en el área del laboratorio no haya polvo, corrientes de aire o temperaturas extremas? ¿Cuáles?

x Ventanas herméticasAire acondicionado SplitLimpieza húmeda


x


x Técnica de sedimentaciónAgar recuento


x

a) En cuanto a su carga microbiana (en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo y diluyentes).b) Presencia de microorganismos indicadores de higiene (en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo y diluyentes).c) Presencia de patógenos (en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo, diluyentes, y los microorganismos patógenos investigados).5.15 ¿En los procedimientos mencionados en los puntos 5.13 y 5.14 se ha establecido?:a) Lugar de toma de muestra (En caso afirmativo indicarlas en observaciones).

x Sala de siembraSala de preparación de muestra


x mensual


10 ufc/placa


x Desinfección y nuevo monitoreo ambiental


x


Mesadas , pisos,ventanas.


x


x

58

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.20 ¿Las instalaciones cuentan con lavamanos provisto con jabón desinfectante y toallas descartables? En caso afirmativo, indicar dónde están ubicadas (sala de siembra, sala de preparación de muestra, sala de lavado, etc.).

x Sala de siembra,sala de preparación de medios de cultivos.


x Plan de calidad


x Alcohol 70v


x


x


x


x


x Autoclave Baño termostátitoCampana de flujoBalanzaIncubadorasTermometrosAnual


x Equipos 6.4

59

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.6 ¿El laboratorio establece un programa para la calibración y/o verificación de los equipos que tengan una influencia directa en los resultados de los ensayos? En caso afirmativo indicar los equipos, la frecuencia de estas calibraciones y/o verificaciones y en función de qué se estableció el criterio de frecuencia.

x Autoclave Baño termostátitoCampana de flujoBalanzaIncubadorasTermometrosAnual


x


x


x


x


x Se coloca un cartel rojo y una leyendaFuera de uso


x


diaria


x


x Control quimico con cada autoclavado y control biológico mensual


x

6.17 Pipetas automáticas: ¿Se verifica periódicamente la precisión y exactitud del volumen distribuido?

x

60

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.18 ¿El laboratorio cuenta con un instructivo o procedimiento para el lavado del material usado en los ensayos?

x


x


x


x


x


ATCC


Congelación crioviales


x


Cuatro (4)


Uno (1)


x 6 meses


Control de calidad de medios de cultivosValidación de métodos

61


x


x


x


x


x


x


x


x


x Incubación de los medios de cultivoDiluyente siembra en agar recuento


x


x


x


x

a) Conductividad. xb) pH. x

62

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observacionesc) Contaminación microbiana. x Se esterilizad) Presencia de sustancias bactericidas, inhibidoras o interferentes.

x


x


x Método ecométrico


x Verificar el volumen antes y después de autoclavar


x


x

9.2 ¿Qué métodos valida y/o verifica? En cada caso indicar el ensayo**, qué matrices y qué parámetro establece y bibliografía de referencia (sensibilidad, especificidad, límite de detección, repetibilidad, reproducibilidad, etc.).a) No normalizados xb) Los métodos que diseña o desarrolla.c) Los métodos normalizados empleados fuera del alcance previsto.

x

d) Métodos normalizados.9.3 ¿La información obtenida de la validación se documenta y archiva?

x

9.4 ¿El laboratorio realiza un informe de validación? x


x Recuento de microorganismosEnsayos interlaboratorios


x


63


x


NA


x


x

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio tiene procedimientos para:a) El transporte de las muestras. x NAb) La recepción de las muestras. xc) La manipulación de las muestras. xd) La protección de las muestras. xe) El almacenamiento de las muestras. xf) La conservación o la disposición final de las muestras. x12.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la identificación unívoca de las muestras a ensayar a lo largo de la vida de la muestra en el laboratorio?

x


x


x


64




x


x 3 veces al año


x Anual: (2)en leche cruda Rmo antib.(3 )en leche en polvo Rmo,antib,coliformes.(3) en quesoscoliformes S aureus(1) en Leche en polvo salmonella spp y L.monocytógenes


x


x


x


x


encuesta.

65


Fecha: 18 de Agosto de 2005

Laboratorio: INTI LACTEOS División Rafaela ______________________________________________________________________

Director/Responsable del Laboratorio: Mónica Demaria

Dirección del laboratorio: Ruta 34 km 227.6

Ciudad: Rafaela País: Argentina

Dependencia

Ministerio: Ministerio de Economía

Institución: Instituto Nacional de Tecnología Industrial ____________________________________________________________

Organización:___________________________________________________________

Empresa:_______________________________________________________________

66

1. Ensayos:


Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada1 Recuento total de microorganismos

aerobios mesófilosLeche fluida, leche en polvo y productos deshidratados, manteca, crema, suero y cuajos

Norma FIL 100 B: 1991

2 Recuento de coliformes a 30ºC Leche fluida, queso, crema, manteca, yogurt y otras leches fermentadas, suero y fermentos

Norma FIL 73 B: 1998 Parte 1

3 Recuento de coliformes a 30ºC -técnica NMP

Leche en polvo y productos lácteos deshidratados


4 Recuento de Staphylococcos coagulasa +

Leche fluida, Queso, yogurt y leches fermentadas, dulce de leche, manteca, crema y suero

Norma FIL 145 A: 1997

5 Detección de Staphylococcos coagulasa + - Técnica NMP

Leche en polvo y productos lácteos deshidratados, dulce de leche, yogurt y leches fermentadas, manteca, crema y suero

Norma FIL 60 – ISO 5944: 2001

6 Recuento de Bacillus cereus- Técnica recuento en placa

Leche en polvo y productos lácteos deshidratados

NORMA ISO 7932- 2° edición : 1993

7 Detección de Salmonella spp Leche, leche en polvo y productos deshidratados, quesos, yogurt y leches fermentadas, manteca, crema, suero

Norma ISO 6785 - FIL 93: 2001

8 Recuento de mohos y levaduras Leche, leche en polvo y productos lácteos deshidratados, quesos, dulce de leche, yogurt y leches fermentadas, manteca, crema, suero

Norma ISO 6611- FIL 94: 2004

9 Recuento de bacterias psicrótrofas – Técnica de recuento en placa a 6.5°C

Leche Norma FIL 101 A: 1991.-

10 Recuento de microorganismos psicrótrofos- técnica rápida a 21°C

Leche Norma FIL 132A : 1991.-

11 Identificación de microorganismos característicos de Yogur

Yogurt Norma FIL 146 : 1991.-

67

Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada12 Enumeración de microorganismos

característicos de yogur – Técnica de recuento a 37°C

Yogurt Norma FIL 117B : 1997

13 Enumeración de Escherichia coli presuntivo- Técnica NMP

Leche, leche en polvo y productos lácteos deshidratados, queso, yogurt y leches fermentadas, manteca, crema, suero

Norma FIL 170 A: 1999.- Parte 1-

14 Recuento de bacterias lipolíticas. Leche, quesos, manteca, crema

Norma FIL 41: 1966.-

15 Detección de sustancias inhibidoras -Test del yoghurt

Leche BOLETIN FIL Nº 258: 1991.-

16 Número más probable de Coliformes a 45ºC.

Leche en polvo, suero y queso

Procedimiento interno INTI LACTEOS - ICR-PE-MB-004

17 Recuento de bacterias lipolíticas Leche, suero, manteca , crema y queso

Control microbiológico de leche y productos lácteos- Métodos recomendados – de Ratto, Lette y Alba – 1983- pag 74.

18 Número más probable de microorganismos esporulados anaerobios fermentadores de lactato

Leche CNERNA – 1986 – Revue Laitiere Francaise N° 451, 39-45

19 Recuento de coliformes y E. coli Leche, leche en polvo y productos lácteos deshidratados, quesos, yogur y leches fermentadas, suero

Método de film seco rehidratable - PETRIFILM TM

20 Recuento de bacterias acido lácticas Queso, fermentos Método de film seco rehidratable - PETRIFILM TM

21 Recuento de bacterias heterótrofas en placa.

Agua Métodos Normalizados de Aguas y Aguas residuales – APHA AWWA WEF – 19 edición 1995- Examen Microbiológico N° 9215 B. Método de placa fluida

22 Número más probable de Coliformes totales

Agua Métodos Normalizados de Aguas y Aguas residuales – APHA AWWA WEF – 19 edición 1995- Examen Microbiológico - N° 9221 B

23 Detección de Escherichia coli en 100 ml

Agua Métodos Normalizados de Aguas y Aguas residuales – APHA AWWA WEF – 19 edición 1995- Examen microbiológico N° 9221 F

24 Detección de Pseudomona aeruginosa en 100 ml

Agua NORMA ISO 8360-1: 1988 (E)

68

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro: Ensayos Listar Matrices Metodología usada

Recuento de Coliformes y Escherichia coli

Leche , leche en polvo y queso

Método de film seco rehidratable - PETRIFILM

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación?Poder contar con esta metodología acreditada nos permitirá demostrar nuestra competencia en este ensayo que es muy solicitado.

1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio: 41.6 ¿Cuáles? Listar


Recuento total de microorganismos aerobios mesófilos

Leche fluida, leche en polvo y suero en polvo

Norma FIL 100 B: 1991

Recuento de coliformes a 30ºC Leche fluida y queso Norma FIL 73 B: 1998 Parte 1Recuento de coliformes a 45ºC -técnica NMP

Leche en polvo, suero en polvo y queso


Recuento de Staphylococcos coagulasa +

Queso Norma FIL 145 A: 1997



x


12/2002

2.3 La documentación del sistema de calidad:a) ¿Es comunicada y entendida por el personal? Xb) Indicar cómo se comunica la información relativa al sistema de calidad.

x Según manual calidad y procedimientos generales

c) ¿Está disponible para el personal? Xd) ¿El laboratorio cuenta con un Manual de Calidad?

X


X


X


X

d) Procedimiento para Control de Registros. X

69

2. Sistema de calidad Sí %* No Observacionese) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

X


X


X

j) Procedimiento para Auditorias Internas Xk) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

X


X


X


X


X


X


X


X


X


X

j) Procedimiento para Auditorías Internas. Xk) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

X


X


X


X

* %: Grado de implementación en porcentaje

70

Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.


X


X Según procedimiento de Trabajos no Conformes


X Responsable del Laboratorio


X Según procedimiento de Trabajos no Conformes


4


X


X


Se indica en el Procedimiento General de Gestión de Personal de nuestro sistema de calidad. Resumiendo algunos puntos, debe cumplir con el programa de autorización que incluye un periodo de iniciación seguido por un periodo de practicas y/o pruebas de aptitud supervisado por personal experimentado. Realizar una serie de actividades como: comparación de los resultados de las actividades frente a un personal cualificado, utilización de material de referencia y realización de actividades bajo supervisión.


X


X

71

4. Personal Sí %* No Observaciones4.7 ¿En dicho programa de capacitación el laboratorio incluye temas relativos a la calidad? Detallar los temas en observaciones

X Programa de Formación en ISO 17025: Curso “ISO 17025, Requisitos de la Norma e Implantación” , Curso Herramientas estadísticas para calidad en laboratorios, Validación de Métodos para Análisis Químicos , Curso de incertidumbre en la medición en el análisis químico y microbiológico.


X


X


X Mediante el programa de formación.Se registra en planillas de autorización y de revalidación de la autorización.


X


X


X


Área de Recepción de muestrasOficina Área almacenamiento muestrasSala preparación de medios de cultivo Sala preparación de muestras Sala siembraÁrea de estufas Sala de esterilización Sala de lavado de material

72

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.3 ¿Las actividades de preparación de medios de cultivo, preparación de muestras, descontaminación de las muestras y cultivos y la siembra son llevadas a cabo en áreas separadas del laboratorio?Detalle cómo realiza el laboratorio estas tareas.

x Cada actividad es llevada a cabo en el área respectiva.


X

a) Separando las actividades en tiempo y espacio.b) Mediante la construcción del laboratorio según un diseño “sin camino de regreso”.

X

c) Llevando a cabo los procedimientos de una manera secuencial, usando las precauciones apropiadas para asegurar la integridad de la muestra y del ensayo. Por ejemplo uso de recipientes herméticamente cerrados.d) Otros5.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada infraestructura para:a) la recepción de la muestra Xb) El almacenamiento de la muestra (espacio suficiente y temperaturas adecuadas de almacenamiento en heladeras y congeladores).

X


X

d) Almacenar los cultivos de referencia. X5.6 ¿El laboratorio cuenta con procedimientos para eliminar los desechos químicos o biológicos potencialmente peligrosos?

X


X 30m2


X Filtros HEPA


X


x Esta previsto la adquisición de un grupo electrógeno

73

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.11 ¿El laboratorio toma precauciones de modo que en el área del laboratorio no haya polvo, corrientes de aire o temperaturas extremas? ¿Cuáles?

x Mediante un equipo de refrigeración con filtros adecuados se mantiene una temperatura constante.


X


x Metodología: según métodos normalizados para el examen de productos lácteos-16º edición 1992- Capitulo 13- Análisis para la calidad microbiológica del aire ( 13.5C Sedimentación ) Medios de cultivo: Agar Plate Count y Agar YGC


x .


x Según instrucciones Petrifilm para monitoreo – metodo de contacto directoMedios de cultivo: Placas de Petrifilm para recuento total . Diluyente Caldo Letheen.


x


x


x Se indican en un croquis (plano del laboratorio los distintos puntos de las salas y la campana de flujo laminar )


x Frecuencia de 15 días


x Nivel aceptable: < 15 ufc

74

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observacionesd) Acciones correctivas en caso de desvío (En caso afirmativo indicarlas en observaciones).

x En el caso que el recuento fuera > 15 ufc el analista deberá repetir el control y si se reitera el resultado el responsable del laboratorio informa al personal de limpieza que realice una limpieza exhaustiva con un producto desinfectante. Se realiza un nuevo control de ambiente para chequear la efectividad de la medida correctiva. En el caso de obtener hasta 3 controles sucesivos superiores a 15 ufc el responsable del laboratorio deberá suspender las actividades hasta que compruebe que las condiciones ambientales del laboratorio son las requeridas.


x


todas


x


x


x Sala de preparación de medios, sala de preparación de muestras, sala de siembra


x Se cuenta con un procedimiento especifico

75

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.22 ¿Utiliza desinfectantes para la limpieza de las mesadas de trabajo antes y después de la realización de la preparación del a muestra o la siembra? En caso afirmativo indicar en observaciones qué desinfectantes usa.

x Cloroxilenol Alcohol 70º


X


X


X


x


x Balanza analítica: verificación: diaria y calibración anualPipetas automáticas: verificación semanal y calibración mensualTermómetros y sensores: calibración semestralDatalogger: calibración anual


x Autoclave, agitador rotativo, cabezal termostático, campana de flujo laminar, microscopio, heladeras, estufas, microondas, pHmetro, stomacher, pipetas automáticas.

76


x Balanza analítica : verificación: diaria y calibración anualPipetas automáticas: verificación semanal y calibración mensualTermómetros y sensores: calibración semestralDatalogger: calibración anual


x Autoclave: , agitador rotativo, cabezal termostático, campana de flujo laminar, microscopio, heladeras, estufas, microondas, pHmetro, stomacher, pipetas automáticas.


X


X


X


X Se le coloca una tarjeta de color rojo que indica que el equipo está ¨ fuera de servicio"


x

77

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.13 ¿Con qué frecuencia se registran las temperaturas de estufas de incubación y, heladeras y congeladores? Indicar en observaciones.

La toma de datos es constante y quedan almacenados en una computadora.


x


x Control Químico: con cada usoControl Biológico: mensualmente


x


x


x


X


X


X


X


ATCC


Congelación en termo de nitrógeno líquido

7.7 ¿El laboratorio cuenta con un X

78

procedimiento documentado para el manejo de los cultivos de referencia?a) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de reserva?

1 repiques


Hasta 5 repiques


X Cepas de reserva: cada 6 mesesCepas de trabajo: cada 3 meses y en cada transferencia


Control calidad de medios de cultivo, utilización para cálculos de exactitud de metodologías .


X


X


X


X


X


X


X


X


X Los medios de cultivo y diluyentes se plaquean e incuban a la temperatura y tiempo adecuados.

79

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones8.7 ¿El laboratorio ha implementado el instructivo o procedimiento para preparar los reactivos y los medios de cultivo?

X


X


X


X


X


X


X En medios de cultivo sólidos mediante método econométrico En medios de cultivo líquidos mediante método cualitativo.


x Procedimiento de verificación de volumen de diluyente mediante calculo del CV < 2%


X


x


17

a) No normalizados.

b) Los métodos que diseña o desarrolla.

c) Los métodos normalizados empleados fuera del alcance previsto.

80

d) Métodos normalizados. x Validación de coliformes a 45ºC Matriz: leche en polvo Sensibilidad: superior a 075 (expresada respecto de 1 ufc )Especificidad: se considera que el procedimiento es especifico cuando los resultados obtenidos con la adición de cepas de Staphylococos aureus sub. Aureus se encuentran dentro de los limites de confianza del 95 % de los valores de las muestras inoculadas solamente con cepas de E. coli Limite de cuantificación: intervalo con limite inferior 9Repetibilidad inferior a 0.6 ( expresada como desviación estándar)Reproducibilidad: inferior a 0.7 ( expresada como desviación estándar)Incertidumbre: cada resultado afectado con la incertidumbre estándar relativa debe permanecer dentro de los limites de confianza del 95% de la tabla de NMP de Man

9.3 ¿La información obtenida de la validación se documenta y archiva?

x


x


x 1 , 2 , 4 y 17


X

* %: Grado de implementación en porcentaje

81

** Indicar Nº de ensayo correspondiente al punto 1.2 del formulario A.Nota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.


X


X


x Las hojas de calculo están protegidas por el responsable del laboratorio a través de una clave doble


X

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio tiene procedimientos para:a) El transporte de las muestras. Xb) La recepción de las muestras. Xc) La manipulación de las muestras. Xd) La protección de las muestras. Xe) El almacenamiento de las muestras. Xf) La conservación o la disposición final de las muestras. X12.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la identificación unívoca de las muestras a ensayar a lo largo de la vida de la muestra en el laboratorio?

X


X


X


82




X


X Mensualmente


x Rto. Total de microorganismos aerobios mesófilos: matriz leche fluida, frecuencia mensual Matriz leche en polvo: frecuencia: trimestralRto. De coliformes totales y rto. De Staphylococos coagulasa positiva: matriz queso, frecuencia trimestralRto de células somáticas: matriz leche, frecuencia mensual


X

b) Establece un criterio de aceptación. Xc) Toma acciones correctivas en caso de desviación.

X


X


X


encuesta.

83


Fecha: __18 de agosto de 2005_______________________________

Laboratorio: de Microbiología – INTI Frutas y Hortalizas__________________

Director/Responsable del Laboratorio:_ Lic. Ramón Manzino, Br. Virginia Gracia__

Dirección del laboratorio:___Araoz 1511 y Acceso Sur_

Ciudad:__Luján de Cuyo - Mendoza______País:____Argentina_____

Dependencia

Ministerio:_____________________________________________________________

Institución:___INSTITUTO NACIONAL DE TECNOLOGÍA INDUSTRIAL_______

Organización:___________________________________________________________

Empresa:_______________________________________________________________

84

1. Ensayos:

1.1 Número total de ensayos microbiológicos que realiza el laboratorio: 151.2 ¿Cuáles? ListarNº Ensayos Listar Matrices Metodología usada1 Recuento total de mesófilos

aerobios y anaerobiosAguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

AOAC- BAMSiembra en placa . Filtración por membrana

2 Recuento total de termófilos aerobios y anaerobios

Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

ICMSF. Siembra en placa

3 Recuento de esporulados mesófilos aerobios y anaerobios



4 Recuento de esporulados termófilos aerobios y anaerobios



5 Coliformes totales Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

ICMSF. Siembra en placa. Filtración por membrana. Número más probable

6 Coliformes fecales Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

ICMSF. Siembra en placa. Filtración por membrana. Número más probable

7 Escherichia coli Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

ICMSF. Filtración por membrana. Número más probable

8 Salmonella sp. Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

ICMSF Siembra en superficie

9 Staphilococcus aureus Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

ICMSF Siembra en placa

10 Hongos y levaduras Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

ICMSF Siembra en placa y Filtración por membrana

11 Clostridium perfringens Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

ICMSF Siembra en placa

12 Lactobacillus sp. Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales, productos de cosmética

Siembra en placa

13 Vibrio cholerae Agua y hortalizas ICMSF Siembra en superficie14 Pseudomonas sp. Agua Filtración por membrana15 Proteus sp. Aguas, pasturas y hortalizas

agroindustriales.Siembra en superficie

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro: Recuento total de microorganismos aerobios mesófilos y detección de Salmonella por AOAC BAM, en alimentos frescos e industrializados y aguas.

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación?Confiabilidad de los resultados, jerarquización del laboratorio, servicio diferencial al cliente.

85

1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio:1 (en proceso de acreditación)1.6 ¿Cuáles? Listar

Ensayos Listar Matrices Metodología usadaRecuento total de microorganismos aerobios mesófilos (en proceso de acreditación)

Aguas, alimentos frescos e industrializados, insumos agroindustriales.

AOAC- BAM

1.7 Estimar el número de ensayos que realiza el laboratorio de microbiología anualmente: aproximadamente 2500 ensayos2. Sistema de calidad Sí %* No Observaciones2.1 ¿El sistema de calidad está implementado en el área de microbiología?

X 60

2.2 Indicar la fecha de implementación del sistema Agosto 20022.3 La documentación del sistema de calidad:a) ¿Es comunicada y entendida por el personal? X b) Indicar cómo se comunica la información relativa al sistema de calidad.

Escrita, informático

c) ¿Está disponible para el personal? X 100d) ¿El laboratorio cuenta con un Manual de Calidad? X 1002.4 ¿La organización ha elaborado y aprobado los siguientes procedimientos?:a) Procedimiento para Elaborar y Controlar Documentos. Xb) Procedimiento para Clasificar y Codificar Documentos. Xc) Procedimiento para Gestión y Control de Documentos. Xd) Procedimiento para Control de Registros. Xe) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

X


X

g) Procedimiento para Informe de Resultados. Xh) Procedimiento para Servicios al Cliente. Xi) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos. Xj) Procedimiento para Auditorias Internas Xk) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

X

l) Procedimiento para la Revisión del Sistema de Calidad. Xm) Procedimiento para la Evaluación de Proveedores Xn) Procedimiento para la Compra de Servicios y Suministros X2.5 ¿La organización ha implementado los siguientes procedimientos?:

100

a) Procedimiento para Elaborar y Controlar Documentos. X 100b) Procedimiento para Clasificar y Codificar Documentos. X 100c) Procedimiento para Gestión y Control de Documentos. X 100d) Procedimiento para Control de Registros. X 100

86

2. Sistema de calidad Sí %* No Observacionese) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

X


X 100

g) Procedimiento para Informe de Resultados. X 100h) Procedimiento para Servicios al Cliente. X 100i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos. X 100j) Procedimiento para Auditorías Internas. X 100k) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

X 100

l) Procedimiento para la Revisión del Sistema de Calidad. X 100m) Procedimiento para la Evaluación de Proveedores. X 100n) Procedimiento para la Compra de Servicios y Suministros. X 100* %: Grado de implementación en porcentajeNota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.


X


X


X Director del Centro


X


2 (dos)


X


X


Capacitación previa y regular


X


X

87

4. Personal Sí %* No Observaciones4.7 ¿En dicho programa de capacitación el laboratorio incluye temas relativos a la calidad? Detallar los temas en observaciones

X Implementación Norma ISO 17025, metrología, cálculo de incertidumbre, validación de métodos


X


X


X 50 En proceso de implementación


X


X


X 70


Sala de recepción de muestras. Área para preparación de material. Área para conservación e incubación de muestras. Área para limpieza y desinfección de material. Área de esterilización. Sala de Siembra. Sala administrativa


X La preparación de los medios de cultivos se realiza en una mesada . La siembra bajo campana de flujo laminar. La descomtaminación se realiza por autoclavado, o incineración en el exterior del laboratorio. En la sala de siembra se realiza la preparación de muestra en un sector independiente de las otras actividades.


X

a) Separando las actividades en tiempo y espacio. X

88

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observacionesb) Mediante la construcción del laboratorio según un diseño “sin camino de regreso”.c) Llevando a cabo los procedimientos de una manera secuencial, usando las precauciones apropiadas para asegurar la integridad de la muestra y del ensayo. Por ejemplo uso de recipientes herméticamente cerrados.

X

d) Otros5.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada infraestructura para:a) la recepción de la muestra Xb) El almacenamiento de la muestra (espacio suficiente y temperaturas adecuadas de almacenamiento en heladeras y congeladores).

X


X

d) Almacenar los cultivos de referencia. X Está programada la compra heladera con freezer


X 50 En proceso de elaboración


X 15 m2/analista


X La sala de siembra no cuenta con sistema de ventilación. En las otras áreas, la ventilación es a través de ventanas al exterior


X


X


X 70 No hay instalación de aire acondicionado por lo que no se puede evitar temperaturas extremas


X En implementación


X Exposición de placas con medio de cultivo para recuento total de bacterias, levaduras y hongos, durante 15 minutos. Medios de cultivos: PCA y Agar Rosa Bengala con cloranphenicol

89

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.14 MONITOREO AMBIENTAL DE LAS SUPERFICIES: ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento para monitorear las superficies en la sala de siembra y preparación de muestras?

X Se han realizado algunos controles a través de hisopados


X Hisopados de la superificie y siembra en superficie en Agar plate count y Agar rosa bengala con cloranphenicol


X


X


X Campana de flujo laminar, dos mesadas


X En cada siembra y mensual


X Control ambiental: 15 UFC/ 15 minutos de exposición. Para superficies, está en estudio para fijar el criterio


X Limpieza y desinfección, eventualmente cambios de filtros de la campana




Sala de siembra y preparación de muestras. Área de preparación de material y medios de cultivos


X En proceso de elaboración


X


X El lavamanos está ubicado en sala de lavado. No se cuenta con toallas descartables

90

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.21 ¿En caso que las condiciones ambientales sean inadecuadas el laboratorio interrumpe los ensayos? En caso afirmativo indicar en observaciones si el laboratorio cuenta con un procedimiento.

X No se cuenta con procedimiento


X Alcohol 70ºGL


X


X


X Contador de coloniasPipetas automáticas


X


X Ver item 6.6


X Estufas, Campana de flujo laminar, heladera y frezeer, balanzas, phmetro, baño termostatizado, autoclave, material de vidrio y utensilios

91


X Baño termostatizado: anualEstufas de incubación y esterilización: anualCampana de flujo laminar: en cada uso y/o mensualHomogeneizador: anualpHmetro: en cada usoAutoclave: mensual y bianual. Heladera y frezeer: diaria.Balanza: diaria y anualTermómetros: anualMaterial de vidrio volumétrico: anual(en proceso de implementación)


X Autoclave, Balanza (en proceso de implementación


X




X


X Etiqueta: Fuera de Servicio, se detalla las causas, fecha, etc.


X


Diaria


X

92

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.15 ¿Se realizan controles químicos y biológicos periódicos para verificar la eficacia del proceso de esterilización del autoclave y la estufa de esterilización? ¿Cuáles y con qué frecuencia?

X Tiras indicadoras de esterilidad: en cada usoMateriales esterilizados, control microbiológico: con cada lote (en proceso de implementación)


X


El laboratorio no posee pipetas automáticas




X


X


X

7.4 ¿El laboratorio cuenta con cultivos de referencia? X7.5 ¿De qué colección nacional o internacional provienen los cultivos de referencia?7.6 ¿Qué metodología usa el laboratorio para conservar dichas cepas? Detallar (congelación, liofilización).7.7 ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento documentado para el manejo de los cultivos de referencia?

X

a) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de reserva?b) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de trabajo?c) ¿Realiza controles de pureza y pruebas bioquímicas? ¿Con qué frecuencia?7.8 ¿Qué uso se le da a las cepas de referencia?


X

8.2 ¿El laboratorio cuenta con los reactivos y los medios de cultivos necesarios para realizar los ensayos? En el caso que su

X

93

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observacionesrespuesta sea negativa indicar la causa.8.3 Medio de cultivo: ¿El fabricante en el momento de la entrega del producto provee información y un certificado acerca de las especificaciones de calidad?

X


X 70


X


En proceso de elaboración


En proceso de implementación


X


X Siembra en placa


En proceso de elaboración


X


X En proceso de implementación


X


X Cloro residual

94

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observacionese) ¿El laboratorio lleva un registro actualizado de los mismos?

X


X


X Diferencia de pesada


X


X


N° 1

a) No normalizados.b) Los métodos que diseña o desarrolla.c) Los métodos normalizados empleados fuera del alcance previsto.d) Métodos normalizados. X Aguas y alimentos frescos e

industrializados. Reproducibilidad y repetibilidad ( en proceso de implementación)

9.3 ¿La información obtenida de la validación se documenta y archiva?




10. Estimación de la incertidumbre Sí %* No Observaciones10.1 ¿El laboratorio realiza la estimación de la incertidumbre de medición? Especificar tipo de ensayo y metodología**.





95


X


X


X


X

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio tiene procedimientos para:a) El transporte de las muestras. Xb) La recepción de las muestras. X 100c) La manipulación de las muestras. X 100d) La protección de las muestras. X 100e) El almacenamiento de las muestras. X 50 En proceso de elaboraciónf) La conservación o la disposición final de las muestras.


12.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la identificación unívoca de las muestras a ensayar a lo largo de la vida de la muestra en el laboratorio?

X 100




X


96




X


X En proceso de implementación. Frecuencia: anual


Recuento total de microorganismos, Frecuencia: trimestral, matriz: leche



b) Establece un criterio de aceptación. En proceso de implementación

c) Toma acciones correctivas en caso de desviación.





X 100


97


Fecha: ______24/8/05_______________________________________________

Laboratorio: __INTI – MAR DEL PLATA______________________________________________________________________

Director/Responsable del Laboratorio:____Lic. Diego Palacios_____________________

Dirección del laboratorio Técnica : Ing. Ricardo Boeri_________________________

Ciudad:___Mar del Plata_____________________País:________Argentina___________

Dependencia

Ministerio:_____________________________________________________________

Institución:_____________________________________________________________

Organización:___________________________________________________________

Empresa:_______________________________________________________________

98

1. Ensayos:


Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada1 Recuento de aerobios

a 30ºCPescado – Vegetales – Alimentos no tradicionales

Procedimiento interno basado en FDA (BAM VIII, 1998)

2 Recuento de aerobios a 35°C

Pescado – Vegetales – Alimentos no tradicionales


3 Recuento de Coliformes totales


FDA (BAM VIII, 1998)

4 Recuento de Enterobacterias totales



5 Recuento de Esporulados totales



6 Recuento de Mohos y levaduras



7 Recuento de Staphylococcus aureus



8 Recuento de Bacterias ácido lácticas



9 Recuento de Bacterias halofílicas



10 Recuento de Micrococcus spp



11 Recuento por NMP de Coliformes fecales



12 Recuento por NMP de Staphylococcus aereus



13 Recuento por NMP de Coliformes totales



14 Recuento por NMP de Escherichia coli



15 Detección de Coliformes fecales



16 Detección de Shigella spp.



17 Detección de Sulfito reductores


MNKL N°56- 1994

18 Identificación de Escherichia coli



19 Identificación de Salmonella spp.



99

20 Identificación de Listeria monocytogenes.



21 Identificación de Pseudomona aeruginosa


USP XXiV

22 Identificación de Staphylococcus aereus



23 Identificación de Bacillus cereus



24 Identificación de Vibrio cholerae



25 Detección de Anaerobios mesófilos


APHA 3° ed. 1992

26 Detección de Anaerobios termófilos


APHA 3° ed. 1992

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro: salmonella spp, recuentos de microorganismos halofílicos, pseudomona aeruginosa, escherichia coli, en matrices agua y productos de la pesca

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación?Ampliar el sistema de calidad del laboratorio, y proporcionar confianza a los clientes.1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio: 21.6 ¿Cuáles? Listar


Recuentos de aerobios a 30 y 35 °C

Productos de la pesca frescos y congelados y vegetales congelados


Identificación de Listeria monocytogenes

Productos de la pesca frescos y congelados y vegetales congelados


1.7 Estimar el número de ensayos que realiza el laboratorio de microbiología anualmente:aproximadamente 1000

100

NOTA: PG y PE significan Procedimientos generales y específicos respectivamente2. Sistema de calidad Sí %* No Observaciones2.1 ¿El sistema de calidad está implementado en el área de microbiología?

x


Año 2002 28/3/2003 –Fecha de acreditación

2.3 La documentación del sistema de calidad:a) ¿Es comunicada y entendida por el personal?

X


Mediante reuniones o información en cartelera y capacitación


x


x a), b) c) corresponden al mismo procedimiento interno CC-PG01


x


x

d) Procedimiento para Control de Registros. x CC-PG19e) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

Está en redacción


x CC-PG02

g) Procedimiento para Informe de Resultados. x CC-PG13h) Procedimiento para Servicios al Cliente. x CC-PG17i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos.

x CC-PG04

j) Procedimiento para Auditorias Internas x CC-PG07k) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

x CC-PG05- CC-PG06 -- CC-PG18


x CC-PG08


x CC-PG16


x CC-PG03

2.5 ¿La organización ha implementado los siguientes procedimientos?:

SI, ESTÁN ENUMERADOS EN EL INCISO ANTERIOR

101

2. Sistema de calidad Sí %* No Observacionesa) Procedimiento para Elaborar y Controlar Documentos.b) Procedimiento para Clasificar y Codificar Documentos.c) Procedimiento para Gestión y Control de Documentos.d) Procedimiento para Control de Registros.e) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.f) Procedimiento para Revisión de Pedidos, Ofertas y Contratos.g) Procedimiento para Informe de Resultados.h) Procedimiento para Servicios al Cliente.i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos.j) Procedimiento para Auditorías Internas.k) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.l) Procedimiento para la Revisión del Sistema de Calidad.m) Procedimiento para la Evaluación de Proveedores.n) Procedimiento para la Compra de Servicios y Suministros.* %: Grado de implementación en porcentajeNota: En la columna de observaciones se incluirán todas las aclaraciones o datos requeridos en esta encuesta.

102


XX


x


x


X3


3


x


x


Capacitación apropiada, experiencia


x


x


x Se tratan de desarrollar en las capacitaciones internas todos los temas relacionados con la norma


x CC-PG09


x


x CC-PE 24

103


x CC-PG09


x


x


Oficina, área de laboratorio, sala de siembra, sala de descontaminación y lavadoSala de esterilización Sala de incubación


x En los sectores antes descriptos


x No hay procedimiento específico para el caso


X

b) Mediante la construcción del laboratorio según un diseño “sin camino de regreso”.

X


x CC-PE24CC-PE31

d) Otros CC-PE325.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada infraestructura para:a) la recepción de la muestra x CC-PE24b) El almacenamiento de la muestra (espacio suficiente y temperaturas adecuadas de almacenamiento en heladeras y congeladores).

x CC-PE24


x

d) Almacenar los cultivos de referencia. x CC-PE255.6 ¿El laboratorio cuenta con procedimientos para eliminar los desechos químicos o biológicos potencialmente peligrosos?

x CC-PE03CC-PE24

104

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.7 ¿El laboratorio cuenta con suficiente espacio de modo que el personal realice adecuadamente el trabajo durante los ensayos? Detallar el área estimada en m2 por analista

x 15 m2 / analista


x Sistema de aire filtrado con presión positiva


x


x Próxima etapa


x Ventana con vidrios fijosNo hay corrientes de aire. Procedimientos específicos de limpiezaTemperatura regulada con sistema de aire filtrado


x


x CC-PE02 Método de sedimentación que utiliza agar plate count


x CC-PE02


x CC-PE02


x Carga total en superficie sistema petrifilm ( por contacto)


x


x En todo el laboratorio excepto oficina

105

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observacionesb) Frecuencia de realización del monitoreo ambiental (En caso afirmativo indicarlas en observaciones).

x Semanal


x CC-PE02


x CC-PE02


x CC-PE01


x Todo el laboratorio


x CC-PE01CC-PE03 CC-PE24 CC-PE31 CC-PE32


x


x Sala de laboratorioSala de descontaminación y lavado


x Instalaciones adecuadas


x Alcohol 70%


x

106


x Calibraciones internas


x CC-PG10


x


x Balanzas (anual)Material volumétrico (semestral)Estufas de cultivo (trianual)Sondas de temperatura (anual)Pehachímetro (semanal)


x Estufas de cultivo y esterilizaciónAutoclavesBalanzasMicroscopiopHmetro


x


x


x CC-PE07 al CC-PE18CC-PE27 al CC-PE29


x CC-PG10


x

107

6. Equipos Sí %* No Observaciones6.11 ¿Cuándo un equipo arroja resultados erróneos o está fuera de servicio se indica claramente para todo el personal? ¿Qué metodología usa? Explique brevemente

x CC-PG10Etiquetas con códigos de colores


x


Cada 30 min. para estufas y 2 veces al día para heladeras y freezers.


x


x Biológico (control de esporas –mensual)Químicos (en cada lote esterilizado o autoclavado – cinta térmica)


x CC-PE27 y 28


x CC-PE37


x CC-PE04


x INTI- CEFISMETROCalibración de patrón de temperatura, patrones de masa para calibraciones internas


x


x

7.4 ¿El laboratorio cuenta con cultivos de referencia? x ATCC7.5 ¿De qué colección nacional o internacional provienen los cultivos de referencia?

x ATCC


x Congelación

108

7. Rastreabilidad (Trazabilidad) Sí %* No Observaciones7.7 ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento documentado para el manejo de los cultivos de referencia?

x CC-PE25

a) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de reserva? x 2b) ¿Cuántos repiques permite para las cepas de trabajo? x 3c) ¿Realiza controles de pureza y pruebas bioquímicas? ¿Con qué frecuencia?

x Semestral (cepas reserva)Trimestral (cepas trabajo)

7.8 ¿Qué uso se le da a las cepas de referencia? x Control de medios de cultivo/sitemas APIControl de ensayosValidación de técnicas


x CC-PG16


x


x

8.4 ¿Las especificaciones de calidad (8.3) incluyen fecha de vencimiento del medio, condiciones de almacenamiento, control esterilidad, control del crecimiento de los microorganismos de interés (target) y de los microorganismos no deseados (no target) y criterios de aceptabilidad y controles físicos y criterios de aceptabilidad aplicados?

x


x CC-PE19


X CC-PE19


X CC-PE19


X CC-PE19


X CC-PE19


X CC-PE19


X CC-PE23


X CC-PE19


X CC-PE19

a) Conductividad. X

109

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observacionesb) pH. Xc) Contaminación microbiana. Xd) Presencia de sustancias bactericidas, inhibidoras o interferentes.

X

e) ¿El laboratorio lleva un registro actualizado de los mismos? X8.11 ¿El laboratorio evalúa la calidad de los medios de cultivos en cuanto a su productividad y selectividad? En caso de una respuesta afirmativa especificar la metodología empleada.

X CC-PE23Método ecométrico


x CC-PE34


x


x CC-PE34 y 35


Cualitativos CC-PE34Cuantitativos CC-PE35Bibliogr.Skjerve, E 2001NMKL, 2002, N° 8

a) No normalizados. xb) Los métodos que diseña o desarrolla. xc) Los métodos normalizados empleados fuera del alcance previsto.

x

d) Métodos normalizados. x9.3 ¿La información obtenida de la validación se documenta y archiva?

x

9.4 ¿El laboratorio realiza un informe de validación? x


x CC-PE22 Recuento de aerobios (cuantitativo)


x CC-PE40



x

110

11. Control de los datos Sí %* No Observaciones11.2 ¿El software usado por el laboratorio está validado? En caso afirmativo especificar tipo de software y su uso.

x Validado por el fabricante


x


x

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio tiene procedimientos para:a) El transporte de las muestras. xb) La recepción de las muestras. X CC-PE22 y 24c) La manipulación de las muestras. X CC-PE24d) La protección de las muestras. X CC-PE24e) El almacenamiento de las muestras. X CC-PE24f) La conservación o la disposición final de las muestras. X CC-PE2412.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la identificación unívoca de las muestras a ensayar a lo largo de la vida de la muestra en el laboratorio?

X CC-PE24


X CC-PE24


x CC-PE24 y PG17


111




X


X CC-PE34


X Salmonella spp ronda anual matriz leche en polvoListeria spp una ronda en leche en polvo y otra en carnecongeladaRec. Aerobios 2 rondas anuales en leche fluida


X CC-PE34

b) Establece un criterio de aceptación. X CC-PE34c) Toma acciones correctivas en caso de desviación.

X CC-PE34


X CC-PE34


X CC-PE34


112


Fecha: 19 de agosto 2005

Laboratorio: Laboratorio de Microbiología de Alimentos Agencia Córdoba Ciencia (Unidad CEPROCOR)

Director/Responsable del Laboratorio:

Bioquímica Especialista en Bromatología Nancy Passalacqua

Dirección del laboratorio: Álvarez de Arenales 230 Bº Juniors

Ciudad: Córdoba País: República Argentina

Dependencia

Ministerio:_____________________________________________________________

Institución: AGENCIA CORDOBA CIENCIA SE . Gobierno Provincia de Córdoba

Organización:______________

Empresa:_______________________________________________________________

113

1. Ensayos:


Nº Ensayos Listar Matrices Metodología usada1 Recuento de Bacterias aerobias

mesófilasAlimetos ICMSF

2 Recuento de Enterobacteriaceae Alimentos ISO 21528-2: 20043 Determinación de coliformes,

coliformes fecales y Escherichia coli (recuento en placa y NMP) Alimentos FDA - BAM

4 Detección de Salmonella spp Alimentos ISO 6579:20025 Detección de Escherichia coli

O157:H7Carnes USDA

6 Determinación de Staphylococcus aureus (recuento en placa y NMP)

Alimentos FDA - BAM

7 Determinación de Bacillus cereus Alimentos ISO 79328 Determinación de Mohos y levaduras Alimentos Método de recuento en

placa en Agar YGC9 Determinación de Anaerobios sulfito

reductores (recuento en tubo) AlimentosMétodo de recuento en tubo en Agar SPS o TSN

10 Determinación de bacterias acidófilas

Alimentos Compendio de métodos para análisis microbiológico de alimentos APHA 3º edición

11 Determinación de bacterias lácticas Alimentos Compendio de métodos para análisis microbiológico de alimentos APHA 3º edición

1.3 Indicar los ensayos, las matrices y las metodologías que planifica acreditar en el futuro:Detección de Escherichia coli O157:H7 y Listeria monocytogenes según metodología del USDA

1.4 ¿Qué ventaja considera usted que le aportará dicha acreditación?Considero que es muy importante para la certificación de productos en el comercio internacional.

1.5 Indicar el número total de ensayos microbiológicos acreditados que realiza el laboratorio:El laboratorio está Certificado bajo ISO 9001:2000, en su sistema de gestión de calidad y acreditado bajo ISO 17025 (auditado sin No conformidad a la espera del certificado de acreditación) en 2 ensayos


114

Ensayos Listar Matrices Metodología usadaRecuento de Enterobacteriaceae

Alimentos ISO 21528-2: 2004

Detección de Salmonella spp

Alimentos ISO 6579:2002

1.7 Estimar el número de ensayos que realiza el laboratorio de microbiología anualmente:Se analizan aproximadamente 600 alimentos mensuales con un promedio de 4 ensayos por muestra.

2. Sistema de calidad Sí %* No

Observaciones

2.1 ¿El sistema de calidad está implementado en el área de microbiología?

x 100

2.2 Indicar la fecha de implementación del sistema x ISO 9001:2000 año 2003ISO 17025:1999 año 2005

2.3 La documentación del sistema de calidad:a) ¿Es comunicada y entendida por el personal? x 100b) Indicar cómo se comunica la información relativa al sistema de calidad.

A través de instructivos impresos que se entregan a laboratorio y se realiza capacitación para la explicación de ellos.A la vez se encuentran en el sistema informático al cual tiene acceso todo el personal.

c) ¿Está disponible para el personal? x 100d) ¿El laboratorio cuenta con un Manual de Calidad?

x


X 100


X 100


X 100

d) Procedimiento para Control de Registros. X 100e) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

X 100


X 100

g) Procedimiento para Informe de Resultados. X 100h) Procedimiento para Servicios al Cliente. X 100i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos.

X 100

j) Procedimiento para Auditorias Internas X 100k) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

X 100

115

2. Sistema de calidad Sí %* No

Observaciones


X 100


X 100


X 100


X 100


X 100


X 100

d) Procedimiento para Control de Registros. X 100e) Procedimiento para Proteger y Respaldar los Registros almacenados electrónicamente.

X 100


X 100

g) Procedimiento para Informe de Resultados. X 100h) Procedimiento para Servicios al Cliente. X 100i) Procedimiento para Tratamiento de los Reclamos.

X 100

j) Procedimiento para Auditorías Internas. X 100k) Procedimiento para el Tratamiento de las No Conformidades- Acciones Correctivas- Desviaciones Autorizadas- Acciones Preventivas.

X 100


X 100


X 100


X 100


116


x El responsable del laboratorio o su adjunto


Depende de la criticidad de la No conformidad


El responsable o adjunto evalúa la criticidad del trabajo No conforme y actúa en relación a eso


x


8 ocho


x 100


x Hay una Gerencia de Calidad, en la Institución pero externa al laboratorio, que apoya y orienta el mismo para llevar adelante la Gestión de Calidad


Su capacitación


x 100


x El programa de capacitación se confecciona semestralmente


x Los relacionados a la ISO 17025, sobretodo Incertidumbre de las mediciones


x El responsable del Laboratorio evalúa si los conocimientos teóricos y el desempeño en la práctica lo hacen competente.


x

117

4. Personal Sí %* No Observaciones4.10 ¿El laboratorio se asegura que todo el personal técnico que trabaja en el laboratorio de microbiología está capacitado o tiene un adecuado manejo en técnicas de esterilidad y manipulación de especimenes potencialmente infecciosos? ¿Cómo? ¿Lo documenta?

x A través de capacitaciones que quedan documentadas en la gerencia de RRHH


x 100


x 100 Esta en la gerencia de RRHH


x


1. Área administrativa2. Recepción de muestras3. Preparación de la muestras 4. Siembra5. Lectura y seguimiento de los ensayos6. Área de Refrigeradores7. Área de Estufas y Baños8. Área de descontaminación9. Lavado de material10. Preparación de medios de cultivo autoclavables11. Preparación de medios de cultivo no autoclavables

5.3 ¿Las actividades de preparación de medios de cultivo, preparación de muestras, descontaminación de las muestras y cultivos y la siembra son llevadas a cabo en áreas separadas del laboratorio? Detalle cómo realiza el laboratorio estas tareas.

x Existen diferentes box en donde se realiza el trabajo por separado para evitar la contaminación cruzada.

5.4 ¿El laboratorio emplea procedimientos para prevenir la contaminación cruzada? ¿Cuáles? Indicar la opción que corresponda.a) Separando las actividades en tiempo y espacio.b) Mediante la construcción del laboratorio según un diseño “sin camino de regreso”.

x

c) Llevando a cabo los procedimientos de una manera secuencial, usando las precauciones apropiadas para asegurar la integridad de la muestra y del ensayo. Por ejemplo uso de recipientes herméticamente cerrados.d) Otros

118

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.5 ¿El laboratorio cuenta con adecuada infraestructura para:a) la recepción de la muestra x 10

0b) El almacenamiento de la muestra (espacio suficiente y temperaturas adecuadas de almacenamiento en heladeras y congeladores).

x 100


x 100

d) Almacenar los cultivos de referencia. x 100


x 100


x


x 100

Todos los box tienen un sistema de acondicionamiento de aire independiente, donde el aire que entra pasa por un filtro Hepa de alta eficiencia


x


x 50 Las áreas de equipos (heladeras y estufas) están conectadas a un sistema de generación de energía, grupo electrógeno que se activa automáticamente frente a un corte de energía


x Las ventanas poseen doble vidrio y están selladas.El sistema de aire acondicionado tiene un termostato regulable.


x Porque el termostato esta regulado entre 20 – 25ºC

5.13 MONITOREO AMBIENTAL DEL AIRE: ¿El laboratorio cuenta con un procedimiento para monitorear en cuanto a su carga microbiana el aire en la sala de siembra y preparación de muestras? ( en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo y diluyentes).

x Método de placa expuesta durante 15 minutos.Agar para Recuento en placa y Agar YGC para mohos y levaduras.


x

119

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observacionesa) En cuanto a su carga microbiana (en caso afirmativo especificar la metodología, medio de cultivo y diluyentes).

x Se utilizan placas Petrifilm prehidratadas para el recuento de la carga microbiana de superficies.


Agar para recuento en placa de petrifilm


x


x Se registran los lugares de la mesada donde se realiza el muestreo y si en el box hay actividad o no en el momento del muestreo


x 15 días


5 colonias para mohos y levaduras y 5 colonias para recuento total.


Limpieza de los conductos de aire y cambio de los filtros.


x


Todas las zonas.Empresa de limpieza: pisos, vidrios, paredes, puertas.Material de vidrio:Personal especializado. Todos los operarios fueron Capacitados por personal del laboratorio para que interpretaran los instructivos de limpieza.Las mesadas de trabajo son limpiadas antes y después de los ensayos por el personal del laboratorio.


x

120

5. Instalaciones y condiciones ambientales Sí %* No Observaciones5.19 ¿El personal técnico cuenta con la indumentaria apropiada (guardapolvo) que deja en el área del laboratorio de microbiología antes de salir de dicha área?

x


x En todas las salas.

5.21 ¿En caso que las condiciones ambientales sean inadecuadas el laboratorio interrumpe los ensayos? En caso afirmativo indicar en observaciones si el laboratorio cuenta con un procedimiento.5.22 ¿Utiliza desinfectantes para la limpieza de las mesadas de trabajo antes y después de la realización de la preparación del a muestra o la siembra? En caso afirmativo indicar en observaciones qué desinfectantes usa.

x Alcohol al 70%


Nunca tuvimos problemas con insectos.


x

6.2 ¿El laboratorio está provisto de todos los equipos necesarios para la correcta ejecución del ensayo? En caso que no lo posea indicar en observaciones cuáles. Nota: Tener en cuenta en este punto los requerimientos en cuanto a la exactitud requerida para el ensayo y cumplimiento de las especificaciones de los equipos.

x


x


x Balanzas: Calibración anual, verificación trimestralEstufas y autoclaves: Perfil térmico y homogeneidad anual, verificación Temp. diaria.Heladeras: verificación Temp. diaria Termómetros y data logger: calibración anualpHmetro: calibaración con el uso

121

6. Equipos Sí %* No ObservacionesCabina de seguridad biológica: Conteo de partículas: anualPipetas automáticas: calibración anual, verificación trimestral


x Para todos los equipos


x La frecuencia en algunos casos se estableció siguiendo lineamientos de manuales de calidad para laboratorios de microbiología, en otros casos en función de los valores históricos encontrados.


x LimpiezaAutoclave: semanal Estufas: mensualHeladeras: bimestralCabina de seguridad biológica: formolización trimestral


x


x Cada equipo tiene un rótulo de estado con la fecha de caducidad de la calibración


x


x Se indica en el Rótulo del equipo “ FUERA DE SERVICIO”


x


Una vez al día


x

6.15 ¿Se realizan controles químicos y biológicos periódicos para verificar la eficacia del proceso de

Controles químicos: en cada proceso de esterilización para

122

6. Equipos Sí %* No Observacionesesterilización del autoclave y la estufa de esterilización? ¿Cuáles y con qué frecuencia?

estufa y autoclaveControl Biológico: mensualmente para esterilización en autoclave


x


x


x


x Calibramos los equipos en empresas acreditadas bajo ISO 17025


x


x

7.4 ¿El laboratorio cuenta con cultivos de referencia? x7.5 ¿De qué colección nacional o internacional provienen los cultivos de referencia?

Cepas ATCC


Mantenimiento a – 70ºC


x


Uno


De la cepa de reserva se repica a la de trabajo, la cual tiene un lapso de 2 meses, luego se descarta.


x Cuando se repica la cepa ATCC, antes de conservarla a – 70ºC, cada vez que se realiza control de método de ensayo (mensualmente)

123

7. Rastreabilidad (Trazabilidad) Sí %* No Observaciones7.8 ¿Qué uso se le da a las cepas de referencia? Control + y - de medios de

cultivos, control de método de ensayo (control +), Rendimiento de medios de cultivo.


x


x


x 70 Algunos fabricantes no proveen esta información


x


x


x


x


x


x A la salida del autoclave un porcentaje del lote del medio preparado se incuba para determinar su esterilidad.


x


x Se realizan antes de su uso los controles para microorganismos target y no target


x

124

8. Medios de cultivo y reactivos Sí %* No Observaciones8.10 ¿Se efectúan controles periódicos al agua destilada usada en la preparación de medios y reactivos de modo de asegurar su calidad?a) Conductividad. xb) pH. xc) Contaminación microbiana. xd) Presencia de sustancias bactericidas, inhibidoras o interferentes.

x


x


x Para los medios que el fabricante provee el certificado de calidad con estos datos, esta tarea no se realiza.En los casos que no lo provee, se realiza a través del método ecométrico o de lo normatizado por la ISO 11133-1 y 11133-2


x


x


x Verificación


2 y 4Se verifica a través de ensayos intralaboratorios, se establece límite de detección.

a) No normalizados.b) Los métodos que diseña o desarrolla.c) Los métodos normalizados empleados fuera del alcance previsto.d) Métodos normalizados. x verificación9.3 ¿La información obtenida de la validación se documenta y archiva?

x


x

125


Para la estimación de la incertidumbre en caso de Recuento de microorganismos se usa la fórmula de la Norma ISO 7218 (2)En el caso de Detección de Salmonella, se verifica el límite de detección de la técnica.


Se elaboró la espina de pescado con todos las factores que influyen en la incertidumbre de la medición



x

11.2 ¿El software usado por el laboratorio está validado? En caso afirmativo especificar tipo de software y su uso.11.3 ¿Se establecen e implementan procedimientos para proteger los datos? ¿Qué procedimientos?

x Back up


x

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones12.1 Para las muestras a ensayar, el laboratorio tiene procedimientos para:a) El transporte de las muestras. Xb) La recepción de las muestras. Xc) La manipulación de las muestras. Xd) La protección de las muestras. Xe) El almacenamiento de las muestras. Xf) La conservación o la disposición final de las muestras. X12.2 ¿El laboratorio tiene un sistema para la identificación unívoca de las muestras a ensayar a lo largo de la vida de la muestra en el laboratorio?

X

126

12. Manipulación de las muestras Sí %* No Observaciones12.3 ¿El laboratorio tiene procedimientos e instalaciones apropiadas de modo de evitar el deterioro, la pérdida o daño de las muestras durante manipulación, preparación y almacenamiento?

X


X





x


x


x Detección de Salmonella spp en leche, frecuencia bianual


x


x


x


x


encuesta.

127

II. PROPUESTA DE PLAN DE ACCIÓN NACIONAL PARA SU OPTIMIZACIÓN

E n la Argentina tenemos tres laboratorios del ámbito oficial que pertenecen a la RILAA y son los laboratorios de las siguientes instituciones: INAL, INTI y SENASA, hay un cuarto laboratorio en la Provincia de Córdoba CEPROCOR que integrará la Red Nacional.

Estos laboratorios han podido superar el cambio cultural que significa la implantación de un sistema de gestión de la calidad tanto a niveles directivos como técnico –administrativos y han podido gestionar los recursos necesarios para el proceso.

Los puntos 9(validación de métodos de ensayo) y 10 (Cálculo de la incertidumbre) han sido un problema debiendo aún profundizar en ambos temas.

B. ESTATEGIAS Y ACCIONES A DESARROLLAR. Punto de la Norma ISO /IEC 17025

Problema hallado

Estrategia propuesta para solucionar el problema

Acciones a desarrollar para su optimización

Responsable de su ejecución

Fecha

5.4.5 Validación. Actividades de capacitación.

Talleres de validación de ensayos.

Miembros de la RILAAFAO¿?

2005 - 2006

5.4.6 Estimación de incertidumbre de la medición.

Actividades de capacitación.

Talleres de incertidumbre de calidad analítica de ensayos.

Miembros de la RILAA ¿?FAO¿?

2005 - 2006

Así mismo los tres laboratorios tienen como estrategia incrementar el número de ensayos acreditados a fin de fortalecer sus sistemas de gestión y su posición antes demantes externos

128

Laboratorio de Microbiología de INTI-Cereales y oleaginosas

Punto de la Norma ISO/IEC 17025

Problemahallado

Estrategia propuesta para solucionar el

problema

Acciones a desarrollarpara su optimización

Responsablede su ejecución

Fecha

5.6 Métodos de ensayo y calibración y validación de métodos5.4.5 Validación de métodos

Criterios de validación

Formar grupos de trabajo con metodologías afines y discutir los criterios con mayor influencia.

Trabajar en la redacción de la documentación.

El responsable del laboratorio y el responsable de la calidad de la Institución

Enero 2006

5.4.6 Estimación de la incertidumbre de la medición

Cálculo de Incertidumbre Formar grupos de trabajo con metodologías afines

Convocar expertos en el tema.Grupos de trabajo (práctica)

Documentar.


Julio 2006

5.5 Equipos Criterios para las verficaciones y calibraciones de equipos

Recopilar Normas y contar con la experiencia de los expertos en calibración

Convocar expertos en el tema y armar talleres


Enero 2006

4.6 Compra de servicios y suministros

Disponibilidad de proveedores acreditados en el mercado

Búsqueda de proveedores acreditados.Realizar una campaña de evaluación y concientización para la implementación de la Norma

Contar con un listado de proveedores bien identificados y aprobados.

idem Marzo 2006

5.9 Aseguramiento de la calidad de los resultados de ensayo y calibración

Disponibilidad de matrices para interlaboratorios.

Materiales de referencia.

Búsqueda u disponibilidad en el mercado,Organizar interlaboratorios entre los participantes de la RILLAA

Contar un catalogo de los interlaboratorio y materiales de referencia.

idem Junio 2006

129

Laboratorio de Microbiología de INTI-Lácteos - Rafaela


Problemahallado

Estrategia propuesta para solucionar el

problema

Acciones a desarrollarpara su optimización

Responsablede su

ejecución

Fecha

5.4.5- Validación de los métodos

Debido a no poder cumplir con un punto de la Norma APHA para la determinación de NMP de coliformes fecales (temperatura del baño termostatico a 45ºC ± 0.2ºC ) la misma fue modificada y necesaria la validación

Realizar la validación de la metodología utilizada

Determinación de las características del método usado, Verificación que los requisitos pueden ser satisfechos utilizando este método y declaración de la validez.

Mónica DemariaEnero a Marzo 2003

5.4.6- Estimación de la incertidumbre

Falta de información sobre como realizar el calculo de incertidumbre en los ensayos microbiológicos.

Búsqueda de bibliografía internacional y solicitud de asesoramiento a expertos europeos

Realización del calculo de incertidumbre basados de una publicación del Centro de metrología y acreditación de Finlandia Incertidumbre de determinaciones cuantitativas derivadas del cultivo de microorganismos¨ de Seppo Niñéemela- 2002

Mónica Demaria Enero a Marzo 2003

5.6.3.2-Materiales de referencia

No se contaba con el certificado de las cepas ATCC de referencia

Gestionar la compra de las Cepas ATCC

Realización de compra de las cepas ATCC y se solicitó el correspondiente certificado de análisis

Mónica Demaria Enero 2003

130

Laboratorio de Microbiología de INTI- Frutas y Hortalizas


Problemahallado

Estrategia propuesta para solucionar el problema

Acciones a desarrollar

para su optimización

Responsablede su

ejecución

Fecha

5.4.6. Estimación de la incertidumbre de la medición

Bibliografía y ofertas de capacitación escasas

El O.A.A. elabore guías sobre este tma. Organización de cursos sobre este tema

131

Laboratorio de Microbiología de INTI- MDP

Teniendo como base el diagnóstico efectuado anteriormente identifique:a) PROBLEMAS PARA IMPLEMENTAR EL ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD

Y VALIDACION DE METODOLOGIA EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA: Identifique los principales problemas encontrados en la implementación en el(los) laboratorio(s) de microbiología. Tener en cuenta los requerimientos de la Norma 17025.

1. El laboratorio de Microbiología no encuentra actualmente problemas particulares para la aplicación de la norma ISO/IEC 17025, habiendo resuelto aspectos relacionados con validación de métodos e incertidumbre de recuentos.

2. Se dificulta resolver problemas presupuestarios en relación con la adquisición de equipamiento e insumos

3. El aseguramiento de la calidad de los resultados de las calibraciones internas no se encuentra puesto en marcha, y tampoco se participa aún en ensayos interlaboratorios de calibraciones.

4. Una dificultad también es la realización de interlaboratorios para recuentos de microorganismos aerobios en matriz cárnica.

b) ESTRATEGIAS Y ACCIONES A DESARROLLAR: para cada problema encontrado, plantee las correspondientes estrategias con acciones a desarrollar para superar estos problemas y optimizar el sistema de aseguramiento de la calidad y la validación de la metodología en el(los) laboratorio(s) que se incluyeron en este diagnóstico. El plan de acción nacional en caso necesario debe discriminar, si es pertinente, el desarrollo de planes de acción particulares para cada laboratorio.

1. Aumento de fondos institucionales dirigidos a apoyar tareas relativas a la acreditación o traslados de los costos de calidad o los aranceles de los análisis acreditados.

2. Actualmente se trabaja en la búsqueda de entidades que organicen rondas de interlaboratorios de este tipo. Quizás el CEFISmetro debiera ser el organizador de este tipo de rondas debido a su gran experiencia en el tema calibraciones.

3. No encontramos entidades nacionales que organicen actualmente interlaboratorios de recuentos en matrices cárnicas. Quizás el SENASA que organiza rondas anuales para detección de microorganismos patógenos en este tipo de matrices pudiera resolver este inconveniente dada su gran experiencia.

132

organizaciÓn de las naciones unidas para la agricultura y ... · aves, pesca) y sus derivados....

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