MTODOS DE ANLISIS DE ZOOPLANCTON

Fijacin La fijacin y preservacin de las muestras zooplanctnicas se realiza utilizando productos qumicos que cumplen esta funcin. Entre los mas utilizados tenemos el formol y el alcohol. Debido a que el formol puro es un gas, se utiliza su forma acuosa que constituye el formaldehido.

Fijacin El formaldehido puro se encuentra en una concentracin de 38 40 %. Para obtener una fijacin de la muestra al 4 %, diluimos una parte de formaldehido puro en diez partes del volumen de la muestra.

Fijacin, pH Teniendo en cuenta que el formol es ligeramente cido, y que un pH alto puede daar a los organismos, es necesario reducir el la acidez hasta obtener un pH de aproximadamente 7,5.

Narcotizacin Algunos organismos se estresan al entrar en contacto con el fijador, se contraen y su identificacin se hace difcil. Para resolver esta situacin se los narcotiza con: Formaldehido en baja concentacin, soda, alcohol, Sulfato fe magnesio o temperatura, previo a su fijacin definitiva.

Tincin Para identificar algunos organismos zooplanctnicos, particularmente aquellos transparentes o traslcidos, se utiliza productos como rosa de bengala, azul de metileno o verde de malaquita.

Separacin Muchas veces es necesario o deseable separar unos taxones de otros para realizar un anlisis determinado. La separacin de organismos de una muestra en funcin de su tamao puede realizarse pasando la muestra por tamices o mallas de diferente porosidad. Primero se lo hace usando la de mayor porosidad hasta la ms fina deseada.

Separacin Muchas veces es necesario o deseable separar unos taxones de otros para realizar un anlisis determinado. La separacin de organismos de una muestra en funcin de su tamao puede realizarse pasando la muestra por tamices o mallas de diferente porosidad. Primero se lo hace usando la de mayor porosidad hasta la ms fina deseada.

Diferentes taxones del zooplancton tienen mayor peso que otros; en este caso se puede utilizar un sistema consistente en un cilindro largo de vidrio que posee varias salidas que pueden ser abiertas por medio de pinzas que estrangulan una manguera. El cilindro se llena casi en su totalidad con agua a la cual se aumenta de densidad ya sea con cloruro de sodio o sulfato de magnesio hasta alcanzar una densidad entre 1,1 y 1,2 gr/cm3. Luego, desde la parte superior, se agrega la muestra y los organismos irn descendiendo lentamente en funcin de su peso.

A continuacin se abren las salidas inferiores obteniendo, de esta manera, diferentes grupos de organismos.

Anlisis cualitativo. Dependiendo del tipo de organismo, se emplean claves taxonmicas correspondientes a los diferentes grupos. Como herramientas se utilizan el estereoestereomicroscopio y el microscopio compuesto. En ciertos casos es necesario recurrir a procedimientos de tincin y diseccin.

Anlisis cuantitativo. El contaje de animales pertenecientes al zooplancton se realiza generalmente con la utilizacin de un estereo-microscopio o estereomicroscopio de diseccin colocando las muestras (o una alcuota) en una cmara de contaje. La ms utilizada en nuestro medio es la cmara de Bogorov (1959).

Con la finalidad de acelerar los procesos de contaje, Priegerl (1970), construy una bandeja circular con un canal que contiene el zooplancton.

Otra cmara de contaje es aquella diseada por Lindenberg, por medio de la cual se hace pasar la muestra con organismos de un recipiente a otro por medio de una banda accionada manualmente; a travs de un canal pasan los organismos que son contados con un estereoestereomicroscopio.

Bajo la inspiracin del trabajo de Bossanyi (1959), se dise un sistema que permite contar y separar organismos zooplanctnicos vivos.

Biomasa zooplanctnica La determinacin determinacin de la biomasa zooplanctnica puede ser realizada por diferentes mtodos. El ms preciso consiste en el contaje e identificacin de los organismos. Esto implica que se debe conocer el volumen y peso de cada uno de ellos en sus diferentes estados de desarrollo, lo que es algo casi imposible. Por otra parte existen dos mtodos para determinacin de su biomasa: el volumtrico y el gravimtrico.

El mtodo volumtrico puede ser realizado por sedimentacin o por desplazamiento. El mtodo de sedimentacin consiste en colocar la muestra en una probeta graduada y luego de un tiempo determinado, observar el volumen ocupado por los organismos. Este mtodo es muy impreciso debido a que el volumen ocupado depende del tipo, tamao y forma de los organismos que componen la muestra.

El volumen por desplazamiento se determina utilizando la cmara de Sutcliffe (1957) que tiene la ventaja de determinar el volumen en ausencia del agua intersticial entre los organismos. Consiste de un cilindro de vidrio con la parte inferior roscada a la cual se pega una malla de la porosidad deseada. Este cilindro se enrosca en una base con cierre hermtico. En la parte superior posee un tornillo graduable y una perforacin para el ingreso de agua.

Con el sistema cerrado, se introduce una cantidad conocida de agua y se ajusta la aguja hasta que haga contacto con el agua, fijando la aguja en ese punto. Para operar el sistema, se retira el cilindro de la base, se retira la tapa y se introduce la muestra (o submuestra) de zooplancton; se la deja descansar en una superficie de material absorbente para eliminar el agua intersticial. A continuacin, por el orificio de la tapa, utilizando una bureta, se introduce agua hasta que esta haga contacto con la punta de la aguja. Determinando cunta agua fue utilizada, por diferencia, se determina el volumen de plancton.

Los mtodos gravimtricos (peso) puede comprender peso hmedo, peso seco y, si se desea conocer la cantidad de materia orgnica, se reduce la muestra a cenizas.

Peso hmedo: Se filtra la muestra a travs de una malla previamente pesada, se extrae el agua intersticial y se determina el peso utilizando una balanza de precisin. Peso seco: La muestra se coloca en una estufa a una temperatura de 60 o hasta obtener peso constante y se determina su peso.

Materia orgnica: Se coloca la muestra en una mufla a una temperatura de 350 400 C durante tres horas para quemar toda la materia orgnica y obteniendo como resultado las cenizas. Por diferencia entre el peso seco y las cenizas, se obtiene el valor de la materia orgnica de la muestra. La desventaja de los mtodos de peso seco y materia orgnica es que resultan destructivos para los organismos.

Evasin

Muchos organismos zooplanctnicos presentan la reaccin de escape cuando sienten vibraciones frente a ellos. Es por esto que los sistemas de muestreo que poseen menos estructuras frente a su boca de entrada son ms eficientes que aquellos que poseen cuerdas, flujmetros o sistemas de apertura y cierre.

Enquistamiento Como ocurre con los dinoflagelados, ciertos organismos del zooplancton tienen la capacidad de enquistarse o entrar en estado de latencia cuando las condiciones ambientales (por ejemplo desecacin de cuerpos de agua) no son favorables. Sars (1901), describe un significante nmero de cladceros, ostrcodos y coppodos dulceacucolas provenientes de sedimentos secos de Sudamrica.