UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TESIS

PRESENTADA AL HONORABLE CONSEJO DIRECTIVO COMO REQUISITO

PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE:

MÉDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

TÍTULO

“EVALUAR LA PRESENCIA DE Sarcocystis sp. POR EXAMEN MICROSCÓPICO EN CERDOS FAENADOS EN EL

MATADERO MUNICIPAL DEL CANTÓN DURÁN”

AUTOR

PEDRO GREGORIO BALDÉON ESTRADA

DIRECTOR DE TESIS

DR.OSCAR MACÍAS PEÑA

GUAYAQUIL – ECUADOR

2012

ÍNDICE

INTRODUCCIÓN……………………………………..……………………………....1

I. OBJETIVOS…………………………………………………………………….…...3

1.1 OBJETIVO GENERAL…………………………………………………......... 3

1.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS………………………………………….……...3

II. MARCO TEÓRICO ………………………………………………………….…....4

2.1 Etiología…………………………………………………….………….…….…4

2.2 Clasificación taxonómica ……………………………………………….….4

2.3 Ciclo Biológico …………………………………………………………….….6

2.4 Patogenia……………………………………………………………….……...9

2.5 Importancia en Salud Pública…….…………………………………………11

2.6 Epidemiología……………………………………………………………..…..12

2.7 Presentación en el hombre……………………………………………….....12

2.8 Presentación en los animales……………………………………………….12

2.9 Diagnóstico…………………………………………………………….……...14

2.10 Tratamiento………………………………………………………………..…15

2.11 Prevención y Control……………………………………………….……....15

III. Hipótesis ……………………………………………………………………..…16

IV. MATERIALES Y MÉTODOS…………………………………………………....17

4.1 Localidad y Características………………………………………………….17

4.2 Materiales……………………………………………………………………...17

4.2.1 Materiales de vidrio………………………………………………………...18

4.2.2 Sustancias……………………………………………………………….….18

4.2.3 Equipos……………………………………………………………………...18

4.2.4 Materiales de oficina……………………………………………………….19

4.2.5 Personal………………………………………………………………….….19

4.3 Metodología…………………………………………………………………...20

V. Resultados ……………………………………..…………………………….25

VI. CONCLUSIONES y DISCUSIÓN………………………………………………26

Vll. RECOMENDACIONES …………………………………………………….….28

lX. RESÚMEN …………………………………………………………………….…29

X. SUMARIO ………………………………………………………………….……..30

XI. BIBLIOGRAFÍA ……………………………………………………………..…...31

XII. ANEXOS ………………………………………………………………………33

DEDICATORIA

Dedico esta tesis a Dios y a mis padres. A Dios

porque ha estado conmigo a cada paso que doy,

cuidándome y dándome fortaleza.

Especialmente dedico esta tesis a mi MADRE,

quien estuvo siempre a mi lado brindándome su

mano amiga, dándome a cada instante una

palabra de aliento para llegar a culminar mi

carrera, siendo un apoyo en todo momento,

depositando su entera confianza en cada reto

que se me presentaba sin dudar ni un solo

momento en mi inteligencia y capacidad. Es por

ellos que soy lo que soy ahora. Los amo con mi

vida.

AGRADECIMIENTO

En primer lugar a Dios por haberme guiado por el

camino de la felicidad hasta ahora; en segundo

lugar a todos y cada una de mi familia, a mis

padres, mis hermanos y a mi abuelita.

A mis profesores a quienes les debo gran parte de

mis conocimientos, gracias a su paciencia y

enseñanza.

Agradezco al Dr. Rosendo Santos Barreto mi

asesor, por haberme guiado durante el desarrollo

de esta tesis. Gracias por el trabajo exigido que en

su momento me hizo flaquear, pero que ahora le

agradezco infinitamente porque fortaleció mi

carácter, me enseñó a trabajar con mayor

disciplina y a darme cuenta que puedo hacer más

de lo que creo.

“

EVALUAR LA PRESENCIA DE Sarcocystis sp. POR

EXAMEN MICROSCÓPICO EN CERDOS FAENADOS EN EL

MATADERO MUNICIPAL DEL CANTÓN DURÁN”

AUTOR

Pedro Gregorio Baldeón Estrada

TESIS

PRESENTADO AL HONORABLE CONSEJO DIRECTIVO COMO REQUISITO

PREVIO A LA OBTENCIÓN DEL TITULO PROFESIONAL DE:

MÉDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

Los Miembros del Tribunal de Sustentación designados por el Honorable

Consejo Directivo de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la

Universidad de Guayaquil, damos por Aprobado la presente investigación con

la Nota de ( ), Equivalente a ( ).

Dr. Òscar Macías Peña

PRESIDENTE

Dr. Mauro Loor Macías Dr. Héctor Rivas Quinto

EXAMINADOR PRINCIPAL EXAMINADOR PRINCIPAL

Dr. Lucila Sylva Morán

EXAMINADOR SUPLENTE

Dr. Carlos Cedeño Navarrete

RECTOR

Dr. Mario Cobo Cedeño

DECANO

Dr. Mauro Loor Macías

SECRETARIO Ad hoc

Dr. Oscar Macías Peña

DIRECTOR DE TESIS

AUTORÍA

La responsabilidad de los resultados y

conclusiones presentadas en este

trabajo de investigación, pertenecen

exclusivamente al autor.

Pedro Gregorio Baldeón Estrada

INTRODUCCIÓN

La sarcosporidiosis, también denominada sarcocystosis, es una

enfermedad parasitaria producida por un protozoo de la clase Sporozoea,

del género Sarcocystis, en el cual se han identificado varias especies,

entre ellas las que afectan al cerdo como son el S. suihominis, S.

miescheriana y el S. porcifelis. Este protozoo posee un ciclo de

transmisión indirecto que requiere para su desarrollo de dos

hospedadores, los carnívoros, como hospedadores definitivos, donde

ocurre la fase sexual del ciclo y los herbívoros como hospedadores

intermediarios, que constituyen la presa y donde se desarrolla la fase

asexual del parásito. Estos últimos se infectan por el consumo de

ooquistes dando origen a los esquizontes en el endotelio vascular y a los

bradizoitos localizados en quistes visibles en musculatura esquelética y

cardíaca lo que ocasiona considerables pérdidas económicas (Herbert y

Smith, 1987).

Experimentalmente se han administrado a cerdos altas dosis de formas

infectantes de Sarcocystis, presentando disminución en el crecimiento,

hematomas cutáneas en las orejas, dificultad locomotora, fiebre e incluso

la muerte. Aparentemente la dificultad motora se debe a una toxina que

libera el parásito denominada sarcocistina cuyo blanco es el sistema

nervioso central (Mondragón et al., 2001).

Es importante resaltar el aspecto zoonótico que caracteriza a la

sarcosporidiosis, debido a que el S. suihominis es capaz de realizar

parte de su ciclo de vida en el tracto intestinal del hombre, ocasionado por

el consumo de carne de cerdo parasitada, y a quien le ocasiona

trastornos digestivos (Piekarski, et al., 1978; Kimmig, et al., 1979; Heipe

et al., 1979).

1

La distribución de la parasitosis es mundial, Europa y América son las

zonas con más elevadas prevalencias. En Estados Unidos y Canadá la

prevalencia oscila entre 5 y 75%; en el resto del continente se han

registrado cifras hasta de 90%, en Australia de 2-17% y en Rusia, China y

Japón alrededor de 10%. En Europa, los países del centro tienen tasas

del 40%; en España se han realizado estudios de prevalencia en las

provincias de León (35%), Granada (99%), La Coruña (85%) y Zaragoza

(100%) (Dubey, 1989 y Hernández Rodríguez y Acosta García, 1999).

En México se conoce la existencia de Sarcocystis sp. en cerdos, sobre

todo en investigadores que tienen como modelo experimental a este tipo

de animal, pues es un hallazgo continúo en muestras de músculo

tomadas a animales de experimentación.

En nuestro país la sarcosporidiosis ha sido poco estudiada.

Investigadores reportaron la presencia de este parásito en músculos de

bovinos en un trabajo realizado en el matadero municipal en la ciudad de

Guayaquil (Santos, R. 1979). De un total de 200 animales, el 96 %

resultaron positivos con Sarcocystis sp. Determinándose que el parásito

tiene preferencia de ubicación para el músculo cardiaco.

Conociendo que se trata de una enfermedad zoonótica, la presente

investigación está orientada determinar la presencia de este parásito en la

especie porcina, ya que su carne constituye una de las proteínas más

apetecidas y de mayor consumo en nuestro país y el mundo.

Con los resultados hasta estos momentos presentados, se pone de

manifiesto la importancia que tiene el obtener registros adecuados de este

tipo de parasitosis y su relación con zoonosis tan importantes como la

triquinelosis y cisticercosis por las repercusiones que tienen en la salud

humana.

2

I. OBJETIVOS

1.1 OBJETIVO GENERAL

Evaluar la presencia de Sarcocystis Sp. por examen microscópico en

cerdos faenados en el Matadero Municipal del Cantón Durán.

1.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

1.2.1 Identificar la presencia del parásito de Sarcocystis sp. en el

ganado porcino faenado en el Matadero Municipal del Cantón

Durán.

1.2.2 Determinar el grado de Incidencia de la parasitosis en los porcinos

muestreados.

1.2.3 Evaluar el parasitismo por Sarcocystis sp. en diferentes órganos.

3

II. MARCO TEÓRICO

Sarcosporidiosis es una enfermedad cosmopolita, zoonótica, causada por

protozoos del género Sarcocystis sp. El nombre se deriva del griego

Sarx: carne y kystis: quistes.

2.1 ETIOLOGÍA

Sarcocystis sp. es el agente etiológico causante de la Sarcosporidiosis o

Sarcocistiosis en diferentes animales. Fue reportada por primera vez en

Suiza (1843) por Miescher, quien encontró en el músculo esquelético del

ratón (Mus musculatus), lo que llegó a conocerse como Túbulos de

Miescher en Suiza (Dubey, 1976; Levine, 1986).

2.2 CLASIFICACIÓN TAXONÓMICA

Reino: Protista

Sub reino: Protozoa

Phylum: Apicomplexa

Clase: Sporozoea

Sub clase: Coccidia

Orden: Eucoccidiida

Género: Sarcocystis

Los sarcocistos son coccideas de la familia apicomplexa. Si bien estas

coccideas están relacionadas con Isospora, Criptosporidium, Cyclospora y

Toxoplasma, requieren obligatoriamente de un huésped definitivo y uno

intermediario. El huésped definitivo de S. hominis y S. suihominis es el

hombre y los huéspedes intermediarios son el bovino y el cerdo,

respectivamente.

Durante muchos años a falta de la definición morfológica de las distintas

especies, y sobre todo al desconocimiento de los ciclos biológicos se

4

creyó que los quistes encontrados en cada especie hospedadora

pertenecían a una misma especies parasitaria, actualmente se ha

demostrado lo contrario, que pueden ser varias especies y que alguna de

ellas pueden desarrollarse en varios hospederos definitivos (Cordero del

Campillo et al., 1999).

Las especies que se conocen han demostrado ser altamente específicas

para el hospedero intermediario, pero no para el hospedero definitivo

(Rojas, 1990). Varias especies de Sarcocystis son altamente

patogénicas para los hospederos intermediarios, siendo poco patogénicos

para el hospedero definitivo (Barriga, 2002).

Denominación de algunas especies del género Sarcocystis.

Especie y sinónimo Huésped

intermediario

Huésped

definitivo

S. bovifelis (S. hirsuta) Bovino Gato

S. bovicanis (S. cruzi) Bovino Perro (lobo, zorro)

S. bovihorninis (S. hominis) Bovino Hombre

S. ovifelis (S. gigantea) Ovino Gato

S. ovicanis (S. tenella) Ovino Perro

S. porcifelis Porcino Gato

S. suicanis (S. miescheriana) Porcino Perro

S. suihominis porcino Hombre

S. equicanis (S. bertrami) Equino Perro

S. fayeri Equino Perro

S. capracanis Caprino Perro

S. hircicanis Caprino Perro

5

S. aucheniae CSA Perro

S. lamacanis Llama Perro

S. tilopoidi Guanaco Perro

Las especies que en la literatura han sido asociadas con el cerdo son las

siguientes:

Sarcocystis miescheriana Kühn, 1865, forma quistes de diversos

tamaños que pueden llegar a medir hasta 1500 m de longitud, tiene

distribución mundial. El huésped definitivo más común es el perro, aunque

también se tienen registrados otros cánidos como lobos, coyotes y

chacales. Los quistes se localizan preferentemente en músculos

esquelético y cardiaco y se caracterizan por tener proyecciones

digitiformes de unos 5 m en forma de empalizada.

Sarcocystis suihominis Tadros y Larman, 1976 es parecido al anterior

en cuanto a su localización y tamaño, sólo que sus proyecciones

digitiformes son más largas, de 10 a 15 m y, según la literatura, está

circunscrito a Europa. El huésped definitivo es el hombre.

Sarcocystis porcifelis sólo se ha registrado en Rusia, se ha indicado

como huésped definitivo al gato. No se conocen detalles de su morfología

y se duda mucho de su validez.

2.3 CICLO BIOLÓGICO

El ciclo vital de los sarcocistos parece ser similar en todas las especies. El

huésped definitivo los adquiere al consumir carne infectada con el

parásito. El músculo estriado infectado contiene quistes (sarcoquistes)

maduros de color blancuzco y de forma generalmente ovalada, cuyo

tamaño puede ser desde microscópico hasta claramente visible por

observación directa.

6

El sarcoquistes tiene una pared con septos internos que dividen al quiste

en compartimientos llenos de cientos o miles de parásitos fusiformes que

se dividen lentamente, los bradizoitos. Una vez ingerido el quiste, los

bradizoitos se liberan en el intestino, invaden las células de la lámina

propia y se transforman inmediatamente en parásitos sexuados, por

gametogonia y se fusionan y forman ooquistes, por esporogonia.

No existe una fase de multiplicación asexual en el intestino del huésped

definitivo. Los ooquistes maduran en el intestino, destruyen la célula

huésped y salen al exterior con las deposiciones. Cuando son eliminados

ya contienen dos esporoquistes con cuatro esporozoitos cada uno.

El huésped intermediario adquiere la infección al consumir ooquistes o

esporoquistes maduros. Los esporozoitos se liberan al intestino,

atraviesan la mucosa intestinal, invaden la circulación y se multiplican

asexualmente por merogonia en las células endoteliales de los vasos

sanguíneos pequeños durante 1 ó 2 generaciones. Estas formas, los

taquizoitos, no forman quistes, se multiplican rápidamente y

seguidamente invaden las fibras del músculo estriado, forman la pared del

sarcoquiste y se multiplican asexualmente por merogonia durante varias

generaciones de formas intermediarias llamadas merozoitos. Estas

formas son las que generan los bradizoitos infectantes (Rommel, 1989)

7

(Tomado de: Beaver PC, Jung RC, Cupp EW. Parasitología Clínica. Salvat México 2ª Ed. 1986.)

El ciclo de vida del parásito presente en la Fig., ejemplificado con

Sarcocystis suihominis. Se inicia con la ingestión, por fecalismo, de los

esporoquistes que contienen cuatro esporozoítos, cada esporozoíto (1)

penetra una célula endotelial (2) del cerdo que da lugar a una o varias

generaciones de merozoítos por división múltiple del núcleo o

endopoligenia, al romperse la célula huésped, salen los merozoítos (3)

que invadirán las fibras musculares y por el mismo proceso de

endopoligenia y endodiogenia darán origen a conjuntos de metrocitos

redondeados y bradizoítos alargados conocidos también como

zoítoquistes o sólo zoítos (4). Este proceso se conoce como

esquizogonia.

8

Cuando el hombre come carne de cerdo insuficientemente cocida o cruda

con los quistes, los bradizoítos se liberan (5) y penetran células de la

lámina propia; una parte de ellos desarrollan, dentro de vacuolas

parasitóforas, microgametos flagelados móviles (6 y 9) y macrogametos

inmóviles (7), cuando los microgametos se liberan (9), fecundan el

macrogameto (8) y forman una célula huevo o zigoto con una doble

membrana conocido como ooquiste (10), esta fase del ciclo se conoce

como gamogonia.

El ooquiste sufre una división transformándose en un ooquiste con dos

esporoblastos (11) que a su vez se dividirán cada uno dos veces

formándose dos esporoquistes (12) con cuatro esporozoítos cada uno,

este proceso se conoce como esporogonia. En seguida se liberan los

ooquistes maduros y se encuentran en contenido intestinal en dos formas:

en pares, enlazados por una tenue membrana o aislados (13), los que al

ser ingeridos por un huésped intermediarios, reinician el ciclo.

2.4 PATOGENIA

La sarcocistosis involucra a varias especies animales, causando en ellas

diferentes patologías dependiendo de la carga parasitaria ingerida y del

tejido que infecten.

Los hospederos definitivos son los carnívoros (por consumo de tejidos

infectados con los bradizoitos). Los ooquistes varían en tamaño según la

especie, son del tipo Isospora (2 esporoquistes con 4 esporozoitos cada

uno) y salen ya esporuladas. La pared del ooquiste es muy delgada y a

menudo se rompe dejando libres a los esporoquistes en el intestino, los

cuales penetran en las células epiteliales del intestino delgado donde

desarrollan inmediatamente gametos. Los cigotos engendrados

evolucionan a ooquistes maduros, los que abandonan el intestino. Los

bradizoitos que constituyen quistes en el músculo son de paredes gruesas

y están divididos por tabiques. Los sarcocistos no generan la etapa de

9

merogonia como las otras coccideas en el hospedero definitivo, pero cada

quiste muscular tiene tantos bradizoitos que aun así se producen millones

de ooquistes, creciendo notablemente (macroscópicos de hasta 2 cm) y

formar estrías blancas como granos de arroz incrustados en los músculos.

El periodo prepatente es de 7 a 12 días y el pasaje de ooquistes dura

entre 14 a 45 días.

Los sarcocistos son poco patógenos para el hospedero definitivo

(carnívoros); sólo S. suihominis puede ocasionar una enfermedad de

cuidado en humanos (vómitos, diarrea y dificultades respiratorias). Perros

y gatos se infectan con varias especies pero solo algunos perros

desarrollaron vómitos y anorexia pasajera.

Las especies más patógenas para bovinos son el S. bovicanis o el S.

cruzi y para ovinos la especie S. ovicanis (abortos). Los síntomas agudos

en rumiantes son causados por la destrucción de los endotelios por los

parásitos y el cuadro crónico en la naturaleza no se manifiesta

clínicamente en estos animales, aunque en EEUU y Canadá se reporta la

“Enfermedad de Dalmeny”, causada por los sarcocistos con síntomas

parecidos a la infección experimental (alopecia en el cuello, grupa y cola,

hipersalivación, secreción nasal y crecimiento deficiente). Los terneros

utilizaban el nitrógeno pobremente y producían menos somatomedina C.

Pero en forma natural, las dosis ingeridas no son tan altas como para

causar este cuadro.

En porcinos la infección es muy común, pero generalmente asintomática,

sin embargo, un alto consumo de parásitos simultáneamente puede

causar una enfermedad severa en la segunda semana de infección

(fiebre, apatía, disnea, anemia, hiperexcitabilidad, espasmos musculares,

postración y abortos).

10

2.5 IMPORTANCIA EN LA SALUD PÚBLICA

La Sarcocistiosis es una enfermedad transmitida por alimentos y se debe

considerar como una zoonosis tóxica, ya que se han reportado evidencias

de trastornos gastroentéricos en personas que consumieron carne

insuficientemente cocida infectada con Sarcocystis aucheniae debido a

la acción de sustancias tóxicas dentro de los quistes (Leguía, 1989; Sam

et al., 1998).

La Sarcocistiosis intestinal del hombre, parece tener una distribución

mundial; mientras que la Sarcocistiosis muscular solo ha sido notificada

en ciertos países como Egipto, India, Malasia y Tailandia (Acha, 2003).

La enfermedad se presenta como un cuadro gastrointestinal, donde hay

una infección producida por coccidios del género Sarcocystis, que desde

el punto de vista de la zoonosis interesan los siguientes:

Sarcocystis hominis, Sarcocystis bovihominis, Sarcocystis

suihominis, se ubican en el subepitelio intestinal y Sarcocystis

lindemani infesta la musculatura esquelética y cardiaca (Atías, 1995).

Sarcocystis ha sido reportado en amplio rango de edad en humanos a

partir de un infante de 26 días de edad hasta un adulto de 75 años. La

mayoría han sido encontrados en músculo esquelético y cardiaco así

como en músculos de la laringe, faringe y esófago.

La carne puede contaminarse con agentes patógenos para el ser

humano. La carne inadecuadamente procesada puedes ser una

importante fuente de bacterias patógenas que pueden ser la causa de

enfermedades o infecciones alimentarias. El hombre se infecta por

carnivorismo, al ingerir carne insuficientemente cocida de vacuno o de

cerdo infectado respectivamente con sarcoquistes maduros de S.

bovihominis o S. suihominis (Atías, 1995). En el caso de individuos que

ingirieron carne de alpaca y/o llama, infectada, principalmente niños,

presentaron dolores estomacales, diarrea, escalofríos, nauseas y vómitos,

11

lo que generalmente los pobladores atribuyen a que la carne de alpaca o

llama es «fresca» (Leguía y Clavo, 1989; Leguía, 1991).

2.6 EPIDEMIOLOGÍA

Distribución geográfica: La sarcocistosis intestinal del hombre parece

tener una distribución mundial. La sarcocistosis muscular ha sido

notificada solo en Egipto, La India, Malasia y Tailandia.

2.7 PRESENTACIÓN EN EL HOMBRE

La infección intestinal del hombre está distribuida en la mayor parte del

mundo, con una incidencia de 6 % a 10% (OMS, 1981). El hábito de

consumir carne cruda, sin embargo, influye sobre estas cifras.

2.8 PRESENTACIÓN EN LOS ANIMALES

La prevalencia de infección muscular por Sarcocystis sp. En bovinos y

cerdos es muy alta; a veces alcanza una tasa superior a 90%. Los

bovinos albergan también a las especies S. cruzi (también denominada

S. bovicanis) y S.hirsuta (también denominada S. bovifelis), cuyos

huéspedes definitivos son el perro y el gato, respectivamente; los porcinos

albergan a las especies S. miescheriana (también denominada S.

suicanis) y S. porcifelis, y sus huéspedes definitivos son el perro y el

gato respectivamente. Como la diferenciación de especies en el huésped

intermediario es difícil, no se sabe qué porcentaje de prevalencia

corresponde a parásitos infectantes para el hombre.

La Organización mundial de la Salud (1981) estima que cerca de la mitad

de los quistes musculares de los bovinos y cerdos corresponden a S.

hominis o S. suihominis. Efectivamente, en la India se encontró que la

prevalencia de S. suihominis en cerdos era cerca del 47 % y la de S.

miescheriana era de 43% (Saleque y Bhatia, 1991). Otros estudios han

12

demostrado que los monos Rhesus pueden infectarse y mantener una

infección intestinal con S. hominis durante una semana por lo menos.

La enfermedad en rumiantes es más bien rara pero la infección es muy

frecuente, probablemente porque hay al menos 3 especies que infectan al

bovino y 2 a los ovinos. Los ooquistes viven por varios mese en

ambientes moderadamente húmedos y fríos. Por otro lado, los

hospedadores definitivos no desarrollan inmunidad y cada infección

resulta en nuevas ondas de ooquistes que contaminan el ambiente.

Se ha observado que la alta prevalencia de las infecciones asintomáticas

está relacionada con la asociación que se mantiene entre perros y gatos y

los animales de granja de los cuales se alimentan, por ejemplo las ovejas

y perros juegan un papel importante en la transmisión de S. ovicanis, de

lo cual se deduce que solamente se debe administrar a los perros carne

cocida. La forma aguda probablemente aparece de maneras habitual en

rebaños que se han criado si contacto con perros y posteriormente son

expuestos a gran número de esporoquistes procedentes de las heces de

perros. Se desconoce la supervivencia de los esporoquistes eliminados

de las heces.

El hombre adquiere sarcosporidiosis o sarcocistosis cuando consume

carne cruda o semicocida de vacuno o cerdo infectados con quistes de

Sarcocystis. La frecuencia de infección por este protozoo en las especies

de abasto es muy elevada llegando incluso al 100% de los vacunos. En

las otras especies la frecuencia es de alrededor de 75%. Plantear el

decomiso de los animales infectados a nivel de mataderos es imposible

debido a la alta prevalencia. Además los quistes en estas especies son

microscópicos. Se exceptúan los camélidos sudamericanos en los que se

desarrollan quistes macroscópicos de hasta 2 cm. de longitud, lo cual

determina pérdidas económicas por el decomiso de la zona muscular o

canal afectada.

13

2.9 DIAGNÓSTICO:

El diagnóstico in vivo de sarcocistosis aguda es difícil ya que los síntomas

no son totalmente específicos, por lo que pueden confundirse con otros

procesos patológicos.

La infección en los huéspedes definitivos carnívoros, puede

diagnosticarse mediante la búsqueda de los esporoquistes en exámenes

coprológicos de flotación.

Métodos serológicos: ELISA, Inmunofluorescencia indirecta y

hemoaglutinación utilizando antígeno con bradizoitos.

Exámenes post mortem: detectar sarcosporidiosis muscular se basa en

observaciones macroscópicas de los quistes, que pueden verse

principalmente en la necropsia, o durante la inspección de las canales en

el matadero. Los quistes microscópicos, en cambio, se pueden detectar

mediante la fototriquinoscopía (en cerdos), o bien a través de cortes

histológicos o digestión artificial de trozos musculares. De éstas técnicas

post-mortem la más eficiente es la digestión artificial, ya que se analiza

una gran cantidad de tejido y permite la liberación de los merozoitos de

los quistes musculares aumentando las probabilidades de su hallazgo.

2.10 TRATAMIENTO

Generalmente no se tratan animales domésticos por infección. La

administración de drogas antiprotozoarias a los carnívoros, no son muy

eficientes para controlar la sarcosporidiosis intestinal y evitar la

diseminación de esporoquistes. Aun así, existen investigaciones y se ha

comprobado la eficacia que tendría el toltrazuril en perros, que a partir del

6º día de tratamiento puede controlar la Sarcocistiosis, este fármaco

impide el desarrollo de los distintos estadios de los coccidios (fase sexual

y asexual). Cuando aparece un brote en rumiantes se ha sugerido la

introducción de amprol en la dieta de los animales de efecto profiláctico.

14

En caballos se debe colocar Pirimetamina (antiprotozoario) +

Sulfa/Trimetoprim (antimicrobiano), Ponazuril (síntomas neurológicos) y

Toltrazuril (antiprotozoario). En humanos la infección por Sarcocystis

hominis no requiere tratamiento antiparasitario, aunque en presencia de

eosinofilia u otros datos sugerentes de reacción de hipersensibilidad

pueden utilizarse corticosteroides.

2.11 PREVENCIÓN Y CONTROL

No existe vacuna para prevenir la sarcosporidiosis, pero existen

investigaciones que indican que ovinos, caprinos, bovinos y cerdos

pueden ser inmunizados con bajas concentraciones de esporoquistes.

Para controlar la sarcosporidiosis se debe cortar el ciclo del parásito, para

esto se debe asegurar que los carnívoros (perro, gato, hombre) se

alimenten con comida enlatada, seca o cocida y evitar que cacen.

También se debe evitar en lo posible que perros y gatos frecuenten los

corrales de animales o las bodegas de alimentos. Una forma de prevenir

la diseminación de esporoquistes en el ambiente es limitar el número de

perros en zonas ganaderas y eliminar perros vagos y zorros

En el caso de los herbívoros, los alimentos almacenados deben estar

cubiertos y los comederos y bebederos deben estar en altura para evitar

contaminación con heces.

Otra medida de control importante es el rol del médico veterinario en la

inspección de las canales. Las carcasas que son inspeccionadas y están

parasitadas deben ser decomisadas para evitar su comercialización.

También es fundamental centralizar la matanza de animales en

mataderos autorizados y con buenas condiciones higiénico-sanitarias

para evitar la matanza clandestina o domiciliaria.

15

III. HIPÓTESIS

Hi: En los cerdos faenados en el matadero Municipal del Cantón Durán

hay presencia de Sarcocystis sp. en los tejidos de sus órganos.

16

IV. MATERIALES Y MÉTODOS

4.1 LOCALIDAD Y CARACTERÍSTICAS

El presente trabajo de investigación se realizó en el Matadero Municipal

del Cantón Durán, ubicado en la ciudadela “Los Helechos”. El mismo que

cuenta con un clima cálido, con temperaturas que oscilan entre 250C a

300 C, una Altitud máxima 88 msnm (Cerro Las Cabras) y una superficie

de 58,6 Km2. Sus coordenadas son: Latitud -2º 10' S y Longitud 79º 54' O.

En el Matadero se faenan mensualmente 1.680 cerdos (con un total de

20.160 cerdos durante el año).

4.2 MATERIALES

4.2.1 Materiales de laboratorio

Tejido muscular

Cuchillos

Pinzas

Tijera

Bisturí

Barras de Leuckart

Espátulas

Bandejas

Gasa

Algodón

Mechero de Bunsen

17

4.2.2 Materiales de vidrio

Probetas

Pipetas

Baso de Cóplin

Placas porta-objeto

Lámina porta-objeto

Frascos de plásticos (boca ancha)

4.2.3 Sustancias

Formol al 10 %

Alcohol absoluto

Xilol o benzol

Hematoxilina

Eosina

Bálsamo se Canadá

Parafina granulada (56º)

Albumina de Mayer

Agua destilada

4.2.4 Equipos

Procesador de tejido

Micrótomo de parafina

18

Afilador de cuchillos

Balanza

Microscopio óptico (Dialux Leitz Wetzlar)

Jarro eléctrico

Baño de María

Secador de placas

Estufa

Reloj de tiempo

Archivador de placas

4.2.5 Materiales de Oficina

Etiquetas

Formularios

Esferográfica

Computadora

4.2.6 Personal

El egresado

Jefe del laboratorio de Patología de Salud Animal

Asistente técnico

Auxiliar de servicio

19

4.3 METODOLOGÍA

4.3.1 Toma de las muestras:

Se realizaron 40 visitas para tomar muestras al azar de cerdos adultos

(mayores de 6 meses de edad) faenados en el Matadero Municipal del

Cantón Durán, se colectaron muestras de 240 cerdos, durante los meses

de Enero a Junio del 2012.

Durante la inspección post-morten, se colectaron muestras de

aproximadamente de 1 cm a 4 cm del músculo cardíaco, diafragmático y

de lengua de los cerdos del matadero, Estos tejidos fueron puestos

inmediatamente en envases debidamente identificados, que contenían

formol al 10%, respetando una relación de 10 ml. de formol por 1 a 4 cm.

de tejido, las mismas que posteriormente fueron llevadas al Laboratorio

de Patología, Salud Animal del Instituto Nacional de Higiene y Medicina

Tropical Leopoldo Izquieta Pérez para su procesamiento.

4.3.2 Procesamiento de las muestras:

En el área de Patología, Salud Animal del Instituto Nacional de Higiene,

las muestras permanecieron en formol al 10 % por un período de 48

horas, las mismas que previamente se cortaron en fragmentos de

aproximadamente 1 x 0,5 x 0,5 cm.

Las muestras fueron retiradas del fijador (formol al 10 %), luego colocadas

en capsulas de tejidos y debidamente identificadas, fueron puestas en

canastillas, las mismas que después de recibir el lavado correspondiente

fueron introducidas en el procesador automatizado por un período de 22

horas.

En el procesador las muestras fueron deshidratadas en alcohol etílico de

graduación creciente de 700, 900 y 1000, por el tiempo de 6 horas en

20

cada recipiente, luego sumergidas en xilol en dos recipiente por espacio de 1

hora en cada baño (proceso de aclaramiento) y posteriormente sumergidas en

parafina de 520c a 560c de punto de fusión en dos recipientes por espacio de 1

hora en cada una.

Una vez saturadas las piezas en parafina se realizó la inclusión definitiva o

formación de los bloques o tacos. Para esto se colocaron las piezas en moldes

(barras de leuckart), vertiendo parafina fundida, del mismo punto de fusión, de

la que sirvió para la inclusión, calentándola precisamente a 520c – 560c se

colocaron las piezas en los moldes, orientándolas y dejándolas enfriar (20 a 30

minutos) o enfriándolas rápidamente ya sea sumergiendo en el agua o

colocándola en refrigeración (40c) hasta que quede completamente sólida.

Una vez formado los bloques se separaron de sus moldes y se procedió a

realizar los cortes histológicos, utilizando el micrótomo, los mismos que fueron

cercenados a un espesor de 5 a 10 micras para luego ser coloreados con

Hematoxilina y Eosina.

Los cortes ahilados obtenidos con el micrótomo, se extendieron, es decir, se

desplegaron haciendo que su superficie fuese perfectamente plana. Para esto

se depositaron los cortes sobre la superficie del agua contenida en baño de

maría a 400c y con un par de agujas de disección o un pincel de pelo fino se

extendieron haciendo desaparecer todo sus pliegues.

Luego se procedió a recoger los cortes y a pegarlos al porta-objetos de la

siguiente manera: colocando sobre la superficie del porta-objeto albumina de

Mayer y frotando cuidadosamente con un hisopo, se levantaron los cortes,

haciendo escurrir el exceso de líquido para luego ser llevados a una estufa o a

un secador de placas a una temperatura de 40-450c por un espacio de 20 a 30

minutos.

21

Una vez montado los cortes sobre el porta-objetos y puesto al secador se

precedió a eliminar la parafina de ellos sumergiéndolos en dos recipientes

(vaso de Cóplin) con xilol por espacio de 5 minutos en cada uno.

Después que se eliminó la parafina de los cortes se procedió a hidratar las

muestras, puesto que se utilizó un colorante de solución acuosa (hematoxilina)

y se lo sumergió en alcoholes de graduación decrecientes de 1000, 900 y 700

por espacio de 1 a 3 minutos en cada alcohol. Luego de hidratado los cortes,

se sumergieron en el agua, y con un lienzo o gasa se secó la superficie de los

porta-objetos limpiando con cuidado alrededor de los cortes para sumergir los

cortes en hematoxilina para colorearlos dejando por un tiempo de 3 a 5

minutos.Inmediatamente a la coloración de los cortes con hematoxilina se

realizó el viraje de la muestra sumergiéndolas en agua corriente. El preparado

virará del color rojo vinoso que presenta al salir del baño colorante al violeta

oscuro. En el agua permanecieron por el tiempo de 5 a 20 minutos hasta que

las partes coloreadas tomen la coloración deseada.Después de realizado el

viraje de las muestras, se procedió a colorearla con eosina durante ½ a 1

minuto, y se lavaron con agua para quitar el exceso de colorante y detener su

acción.

Coloreada las muestras con eosina, se realizó el proceso de diferenciación

para extraer paulatinamente el exceso de colorante, utilizando para ello alcohol

de 700 (reactivo diferenciador) por unos instantes, renovándolos cuando fuese

necesario, hasta obtener por regresión la intensidad de la coloración deseada.

Durante la diferenciación con el alcohol de 700 las muestras comenzaron a

deshidratarse. Esta deshidratación se la obtuvo con el paso de los cortes por

una serie de alcoholes de graduación creciente (70, 90 y 1000), donde

permanecieron sumergidos por espacio de 1 a 3 minutos en cada alcohol.

22

Una vez realizada la deshidratación completa de los cortes se procedió a

realizar como último paso la clarificación o diafinización y el montaje.Esta

operación se realizó con el objeto de que las muestras estuvieran en

condiciones de ser observadas al microscopio y también para protegerlas del

ambiente y evitar su deshidratación y deterioro. Se limpió el porta-objetos

alrededor del corte y se depositó sobre el unas gotas de bálsamo de Canadá

disuelto en xilol (consistencia de jarabe) y se cubrió con una laminilla de vidrio.

La ejecución de este último paso se realizó con cierta rapidez, cuidando de no

respirar sobre el preparado para evitar que las muestras se hidraten,

quedando así listas para ser observadas al microscopio.

4.3.3 Recolección de datos:

Cada preparado histológico se examinó en toda su extensión (estudio

topográfico) con objetivos de 6X, 16X, y 40X de un microscopio óptico

marca Dialux Leitz Wetzlar. Los datos obtenidos fueron recopilados en un

protocolo de observación que incluía datos sobre el matadero,

procedencia y número de los cerdos muestreados, así como la presencia

y número de quistes en corazón, diafragma y lengua.

Se consideró como positivo todo fragmento muscular que presentó al

menos un quiste de Sarcocystis sp.

4.3.4 Análisis de resultados estadísticos

Los resultados se procesaron en forma ordenada utilizando el método

porcentual, para ser presentado finalmente en cuadros y figuras en base a

la frecuencia y porcentaje, lo mismos que fueron diseñados en

programas computacionales como Microsoft Excel, Microsoft Word y

Mapinfo.

23

Cálculo de la prevalencia: El cálculo de la prevalencia se realizó según

Bush et al., (1997), aplicando la siguiente fórmula:

p = N° de cerdos positivos x 100

N° de cerdos estudiados

Análisis estadístico: Para la comprobación de la prevalencia se aplicó la

prueba estadística Chi cuadrado con el paquete estadístico STATS V.1.1.

Para determinar el tejido muscular más afectado se aplicó la prueba de

Coeficiente de Correlación de Pearson del paquete estadístico SPSS

13.0.

24

V. RESULTADOS

De las observaciones realizadas se obtuvieron los siguientes resultados:

Se analizaron un total de 240 cerdos faenados, siendo positivo a

sarcocystosis 65, que representa el 27% de prevalencia. (ver anexos

cuadro N°1, figura 1 y 2)

De acuerdo a la procedencia de porcinos, tenemos que los animales

analizados provenían de los cantones Bucay (100), Naranjal (80) y

Milagro (60). (ver cuadro N°2 y figura 3)

Se analizaron tejidos de diferentes órganos: músculo del corazón,

diafragma y lengua, encontrándose un total de 162 quistes (Corazón 16,

diafragma 21 y lengua 125) (ver cuadro N° 3 y figuras 4-10)

25

VI. CONCLUSIONES Y DISCUSIÓN

Se concluyó que el Sarcocystis sp. es un parásito que está presente en

los cerdos de granjas porcinas procedente de los cantones Milagro,

Naranjal y Bucay de la provincia del Guayas, con una prevalencia del 27

% considerándose bajo en relación a la especie bovina en la que se

obtuvo un porcentaje del 96 %, trabajo de investigación realizado en la

provincia del Guayas, (Santos R. 1979).

El número de quistes por corte de tejido parasitado fué de 16 en corazón,

21 en diafragma y 125 en lengua. Este último fue el tejido muscular más

afectado de los cerdos positivos a Sarcocystis sp., lo que reafirma que

esta parasitosis se mantiene como un problema endémico de importancia

para la salud pública.

La tabla 3, evidencia una intensidad numérica de microquistes de

Sarcocystis sp. por tejido muscular en cerdos faenados en el Matadero

Municipal del Cantón Durán, cuyos resultados fue de 16 microquistes en

corazón, 21 en diafragma y 125 en lengua, lo que contrasta con el trabajo

ejecutado en Perú (Castro,1974), quién realizó estudios de Sarcocystis

de llamas, en el Departamento de Puno, encontrando que el 98.4 % de

positividad en las observaciones macroscópicas del esófago y músculo de

la pierna; y en el examen histológico demostró la presencia de

microquistes en el corazón llegando a un porcentaje de 98.4 % y 90.1 %

en diafragma.

La carga quística por intervalos aparece en la tabla 3, siendo lo más

significativo que se detectaron en animales con un número de quiste

elevado de 19 a 41 en lengua sin que se haya observado lesiones

macroscópicas en el órgano afectado o se haya visto un cuadro clínico del

animal antes de su faenamiento.

26

Es necesario hacer énfasis en que la biología de este tipo de parásitos está

poco estudiada en el humano, puesto que se tiene conocimiento de casos de

sarcocystosis muscular con signos y síntomas marcados como son los cinco

casos registrados por Beaver, Gadgil y Morera, en 1979 en estos casos, se

trató de la parasitosis en la cual el humano actuó como huésped intermediario.

Otra situación es cuando actúa como definitivo y aquí cabe hacer la pregunta si

no estará sucediendo que a través del autofecalismo, el hombre también esté

padeciendo la sarcocystosis intestinal por la misma especie.

Sarcocystis fue identificado en la autopsia con especímenes en músculo

esquelético y cardíaco de 15 personas cuya causa de muerte era

desconocida (Limsuwan y Bunyaratavej, 1978). Debido a que tanto el

ganado y los cerdos son alimentos de consumo humano, este estudio

tuvo como objetivo estudiar el prevalencia de la infección en los cerdos en

Sarcocystis Bang Phli Distict, provincia de Samut Prakan, Tailandia.

En conclusión, es posible afirmar que con el mejoramiento general de las

condiciones de crianza y del saneamiento ambiental en nuestro país, la

incidencia y prevalencia del Sarcocystis han mostrado una constante

declinación en la especie porcina, situación complementada

positivamente por el progreso científico y tecnológico en la crianza y

mantenimiento de cerdos, en los cuales la incidencia de la parasitosis ha

presentado un progresivo descenso.

27

VII. RECOMENDACIONES

1. Divulgar el peligro que representa la presencia de esta enfermedad en

los planteles porcinos, especialmente porque no presenta signos clínicos

aparentes.

2. Debido a que la Sarcocistiosis es una enfermedad transmitida por

alimentos se debe considerar como una zoonosis tóxica.

3. Orientar a los porcicultores sobre el control, especialmente de vectores

carnívoros que diseminan la enfermedad al consumir las vísceras o

despojos de animales contaminados.

4. Debido a que sólo la presencia masiva de síntomas asociados a este

parásito permite el diagnóstico macroscópico de la enfermedad, se

recomienda que las muestras de animales sospechosos deben ser

enviados al laboratorio para su comprobación.

5. La carne debe ser sometida a congelación y cocción, ya que ambos

procedimientos son adecuados para la destrucción del protozoo.

6. Es necesario tener presente una realidad muy difícil de manejar,

determinada por los dispersos grupos poblacionales, en los que un

número indeterminado de cerdos son criados en viviendas y faenados,

sin control veterinario, constituyendo una eventual fuente para adquirir la

sarcosporidiosis.

7. Dada la importancia de esta enfermedad en el país, se debe intensificar

los estudios epidemiológicos que permitan conocer y entender a fondo la

dinámica de infección de esta parasitosis, esto permitiría implementar

programas de control dirigidos a la detección y tratamiento masivo de

poblaciones humanas y porcinas en regiones endémicas.

28

VIII. RESUMEN

El objetivo de esta investigación, fué evaluar la presencia de Sarcocystis

Sp. por examen microscópico en cerdos faenados en el Matadero

Municipal del Cantón Durán, para los cuales se utilizó muestras de tejidos

muscular cardiaco, diafragmático y lingual.

Para la realización de esta investigación se cumplieron 40 visitas al

Matadero, los meses de Enero a Junio del 2012, en las que se

escogieron 240 cerdos adultos al azar (mayores de 6 meses de edad), de

los cuales se tomaron 3 muestras por cada animal (corazón, diafragma y

lengua) dando un total de 720 muestras, las mismas que fueron fijadas en

formol al 10%, usando la técnica de cortes en parafina y tiñéndolas con

hematoxilina y eosina.

La procedencia de los especímenes escogidos para este estudio fue la

siguiente: 100 correspondían al Cantón Bucay, 60 al Cantón Naranjal y 80

al Cantón Milagro; El 80 % de los animales muestreados procedían de

granjas tecnificadas y un 20% de granjas domésticas.

De los 240 cerdos estudiados 65 fueron positivos (27%) de los cuales 16

correspondieron al músculo cardiaco, 21 al diafragmático y 125 a la

lengua; mientras que 175 resultaron negativos (73%).

Los resultados de la presente investigación nos demuestra la presencia

de Sarcocystis Sp. con una prevalencia relativamente baja (27%) en

relación a la especie bovina (96%).

A pesar de la positividad en las muestras analizadas, los animales no

demostraron signos clínicos de la enfermedad producida por el

Sarcocystis Sp., ni hubo reacción inflamatoria alrededor de los quistes

en los músculos examinados.

29

IX. SUMMARY

The objective of this study was to evaluate the prevalence of Sarcocystis

sp. By microscopic examination in pigs slaughtered in the municipal

slaughterhouse of the Durán Cantón, using samples of heart muscle

tissue, diaphragm and tongue.

For the conduct of this research is carried out 40 visits to the

slaughterhouse the months of January to June 2012, at which time 240

pigs were chosen at random adults (older than 6 months of age), of which

3 samples were taken for each animal (heart, diaphragm and tongue)

giving a total of 720 samples, the same that were fixed in formal to 10 %,

using the technique of cuts in paraffin and by staining in hematoxylin and

eosin.

The origin of the specimens chosen for this study was the following: 100

corresponded to the Bucay Cantón, 60 at the Cantón El Naranjal and 80 at

the Cantón Milagro; 80% of the sampled animals came from well-

managed farms and 20% of household farms.

Of the 240 pigs studied 65 were positive (27 %) of which 16 corresponded

to the heart muscle, the diaphragm 21 and 125 to the tongue; while 175

were negative (73 %).

The result of the present research shows us the presence of Sarcocystis

sp. With a relatively low prevalence (27 %) in relation to the bovine

species (96 %) investigative work carried out in the province of Guayas.

In spite of the positivity in the analyzed samples, the animals showed no

presence of clinical signs of the disease produced by the Sarcocystis sp.,

and there was no inflammatory reaction around the cysts in the muscles

examined.

30

X. BIBIOGRAFIA:

1. Acha, P.; B. Szyfres. 2003. Zoonosis y enfermedades transmisibles

comunes al hombre y a los animales. 3ª ed. p 84-87. Editorial. Washington

DC.

2. Atías, N. 1995. Parasitología clínica. 3ª ed. p 489-492. Editorial

editerráneo. Santiago.

3. Barriga, O. 2002. Las enfermedades parasitarias de los animales

domésticos en la América Latina. Editorial Germinal. Santiago, Chile.

247p.

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report of five cases. Am J Trop Med Hyg 1979; 28:819-44.

5. CASTRO, Julia. 1974. Sarcocystis aucheniae en llamas (Lama

glama).Rev. Inv. Pec. (IVITA) U.N.M.S.M. 3 (1) 91 – 92.

6. Cordero del Campillo, M.; F. Rojas; M. Fernández; M. Sánchez; S.

Rodríguez; I. López. 1999. Parasitología veterinaria. p 319- 327. Editorial

Mc Graw-Hill. España.

7. Dubey, J. P. 1976. A review of Sarcocystis of domestic animals and

other coccidia of cats and dogs. J. Am. Vet. Med. Assoc., 169: 1061-

1078.

8. Dubey JP. Sarcocystosis of animals and man. Boca Raton CRC Press,

1989.

9. Herbert, I. & Smith, T. (1987). Sarcocystosis. Parasitology Today. 3

(1):16-21.

10. Hernández Rodríguez S, Acosta García I. En: Cordero del Campillo M,

Rojo Vázquez FA, Martínez Fernández AR y cols. Parasitología

Veterinaria. McGraw-Hill. Interamericana Madrid, 1999.

11. Kuhn, 1865. La microscopía electrónica de Sarcocystis miescheriana

12. Leguía, J.; C. Guerrero; R. Sam; A. Chávez. 1989. Infección

experimental de perros y gatos con macroquistes y microquistes de

Sarcocystis de alpacas (Lama pacos). Rev. Cienc. Vet., 5(3): 10- 13.

31

13.Leguía, G.; N. Clavo. 1989. Sarcocistiosis o «triquina». Boletín Técnico N°7

– CICCS UNMSM CI IVITA Agosto - Lima - Perú. p 5- 19.’

14.Leguía, G. 1991. The epidemiology and economic impact of llama parasites.

Parasit Today, 7:54–56.

15.Levine, N. 1986. The taxonomy of Sarcocystis (Protozoa: Apicomplexa)

species. Parasitology today, 7: 54-56.

16. Limsuwan A. Bunyaratavej S. Zoonosis. J Parasitol Trop Med Assoc de

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México. Trabajo BIO/UBE-11/026.

18.Piekarski, G., Heydorn, A. et al. P. (1978). Clinical, parasitological and

investigations in sarcosporidiosis (Sarcocystis suihominis) of man (authors transl).

Immun. Infekt. 6(4): 153 – 9.

19. Rojas, M. 1990. Parasitismo de los rumiantes domésticos: terapia,

prevención y modelos para su aprendizaje. p 335-343. Editorial Mijosa. Lima.

20. Saleque A., Bhatia BB (1991) Prevalence of Sarcocystis in domestic pigs

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21. Radostits, O.; C. Gay; D. Blood; W. Kenneth; H. Cliff. 2002. Medicina

veterinaria: Tratado de las enfermedades del ganado bovino, ovino, porcino,

caprino y equino. p 1550-1553. Editorial Mc Graw-Hill. España.

22. Rommel M, Heydorn AO, Gruber F. Beiträge zum Lebenzyclus der

Sarkosporidien. I. Die Sporozyste von S. tenella in der Fäzes dér Katze. Berl

Munich Tierärztl Wocgenschr 1972; 85:101-5.

23. Santos, R. 1979. Investigación de Sarcocystis sp. Matadero Municipal de

Guayaquil (Tesis Doctoral), Ecuador.

32

XI. ANEXOS

ANEXO Nº 1

MAPA DE LA PROVINCIA DEL GUAYAS

33

ANEXO Nº 2

PROTOCOLO DE TOMA DE MUESTRAS FICHA Nº............................................................... FECHA................................... LUGAR............................................................ PROVINCIA................................. OBSERVACIONES

Muestreador (s----------------------------------------------------------------

34

ANEXO N° 3

CUADRO Nº. 1 Prevalencia de Sarcocystis sp. de los 240 cerdos estudiados

en el Laboratorio de Patología, Salud Animal del INHMT “LIP”.

MATADERO CERDOS POSITIVO NEGATIVO % PREVALENCIA

DURÁN 240 65 175 27

*P<0,01

FIGURA 1. Número de animales infestados

FIGURA 2. Porcentaje de animales infestados

35

65

175

FIGURA 1. NÚMERO DE ANIMALES INFESTADOS

POSITIVO NEGATIVO

27%

73%

POSITIVO NEGATIVO

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

CUADRO Nº. 2 Procedencia de los cerdos examinados para determinar la

presencia de Sarcocystis sp. en el Matadero Municipal del Cantón Durán.

Periodo Enero a Junio del 2012.

CANTÓN No. ANIMALES %

BUCAY 100 41,67

NARANJAL 80 33,33

MILAGRO 60 25,00

TOTAL 240 100,00

FIGURA 3. Porcinos examinados según su lugar de procedencia

10041,67%

8033,33%

6025,00%

BUCAY

NARANJAL

MILAGRO

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

36

CUADRO Nº. 3 Quistes encontrados en los tejidos examinados en el

Laboratorio de Patología Salud Animal del INHMT “LIP” según intervalo

quístico.

INTERVALO QUÍSTICO

QUISTE MUSCULAR

CORAZÓN AFECTADO

DIAFRAGMA AFECTADO

LENGUA AFECTADA

TOTAL % TOTAL % TOTAL % TOTAL %

(1-2) 51 31,48 8 50 20 95,24 23 18,40

(3-4) 26 16,05 8 50 1 4,76 17 13,60

(5-9) 11 6,80 11 8,80

(14-19) 33 20,37 33 26,40

(41) 41 25,30 41 32,80

TOTAL 162 100,00 16 100 21 100,00 125 100,00

FIGURA 4. Número de carga de Sarcocystis sp. por muestra de tejido

37

1621

125

CORAZÓN AFECTADO DIAFRAGMA AFECTADO

LENGUA AFECTADA

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

FIGURA 5. Porcentaje de carga de Sarcocystis sp. por muestra de tejido

FIGURA 6. Carga de Sarcocystis sp. en tejido muscular cardiaco según intervalo

quístico

38

10%13%

77%

CORAZÓN AFECTADO DIAFRAGMA AFECTADO

LENGUA AFECTADA

850%

850%

(1-2) (3-4)

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

FIGURA 7. Carga de Sarcocystis sp. en tejido diafragmático según intervalo

quístico

FIGURA 8. Carga de Sarcocystis sp. en tejido de la lengua según intervalo quístico

39

2095,24%

14,76%

(1-2) (3-4)

2318%

1714%

119%

3326%

4133%

(1-2) (3-4) (5-9) (14-19) (41)

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

FIGURA 9. Total de quiste muscular encontrados según intervalo quístico

FIGURA 10. Porcentaje de quiste muscular encontrados según intervalo quístico

40

51

26

11

3341

0

10

20

30

40

50

60

(1-2) (3-4) (5-9) (14-19) (41)

(1-2)

(3-4)

(5-9)

(14-19)

(41)

31,48%

16,05%

6,79%

20,37%

25,31%

Total de quiste muscular según intervalo quístico

(1-2)

(3-4)

(5-9)

(14-19)

(41)

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

CUADRO Nº 4. Evaluación de casos positivos carga de Sarcocystis sp. en

tejido del corazón según intervalo quístico, mediante la Prueba No Paramétrica

para una sola muestra, Prueba de Chi Cuadrado.

INTERVALO QUÍSTICO Fo Fe (Fo – Fe) (Fo – Fe)2 (Fo – Fe)2/Fe

1 - 2 8 8 0 0 0

3 - 4 8 8 0 0 0

SUMAN 16 16 *****

16/2=8

El resultado obtenido es 0

Los g.l. = (r – 1)

g.l. = 2 – 1 = 1

g.l. = 1

Buscamos en la tabla 2 con un α 0,05 y 1 g.l. = 3,84; Por tanto no se acepta

la hipótesis de investigación porque el 2 calculado es inferior al 2 de la tabla.

No hay significancia estadística en tejido del corazón según intervalo quístico,

(P 0.05).

41

CUADRO Nº 5. Evaluación de casos positivos carga de Sarcocystis sp. en

tejido del diafragma según intervalo quístico, mediante la Prueba No

Paramétrica para una sola muestra, Prueba de Chi Cuadrado.

INTERVALO QUÍSTICO Fo Fe (Fo – Fe) (Fo – Fe)2 (Fo – Fe)2/Fe

1 - 2 20 10,5 9,5 90,25 8,59

3 - 4 1 10,5 -9,5 90,25 8,59

SUMAN 21 21 ***** 17,19

21/2=10.5

El resultado obtenido es 17,19

Los g.l. = (r – 1)

g.l. = 2 – 1 = 1

g.l. = 1

Buscamos en la tabla 2 con un α 0,05 y 1 g.l. = 3,84; Por tanto si se acepta la

hipótesis de investigación porque el 2 calculado es superior al 2 de la tabla. Si

hay significancia estadística en tejido del diafragma según intervalo quístico.

(P 0.05).

42

CUADRO Nº 6. Evaluación de casos positivos carga de Sarcocystis sp. en

tejido de la lengua según intervalo quístico, mediante la Prueba No Paramétrica

para una sola muestra, Prueba de Chi Cuadrado.

INTERVALO QUÍSTICO Fo Fe (Fo – Fe) (Fo – Fe)2 (Fo – Fe)2/Fe

1 - 2 23 25 -2 4 0,16

3 - 4 17 25 -8 64 2,56

5 - 9 11 25 -14 196 7,84

14 - 19 33 25 8 64 2,56

41 41 25 16 256 10,24

SUMAN 125 125 ***** 23,36

125/5=25

El resultado obtenido es 23,36

Los g.l. = (r – 1)

g.l. = 5 – 1 = 4

g.l. = 4

Buscamos en la tabla 2 con un α 0,05 y 4 g.l. = 9,49; Por tanto si se acepta la

hipótesis de investigación porque el 2 calculado es superior al 2 de la tabla. Si

hay significancia estadística en la evaluación de la lengua con respecto a los

intervalos quísticos. (P 0.05).

43

FOTOS

FOTO Nº 1 Cortando las muestras en fragmentos de 1 x 0,5 x 0,5 cm. (fijadas

en formol al 10 %).

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

44

FOTO Nº. 2 Colocando las muestras en el procesador automático de tejidos

(histokinette).

Baldeón, P. 2012. Tesis de Grado

45

FOTO Nº. 3 Vaciando parafina en los moldes - barra de leuckart (formación de

bloques).

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FOTO Nº. 4 Identificando los bloques de parafina (tacos).

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FOTO Nº. 5 Realizando los cortes histológicos (micrótomo tipo Minot de

parafina).

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FOTO Nº. 6 Realizando la extensión y adhesión de los cortes histológicos

(baño de María).

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FOTO Nº. 7 Aplicando la técnica de coloración (método hematoxilina –

eosina).

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FOTO Nº. 8 Observación microscópica del Sarcocystis sp. (microquistes).

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FOTO Nº. 9 Microquiste de Sarcocystis sp. Tejido muscular en lengua de

cerdo.

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FOTO Nº. 10 Microquiste de Sarcocystis sp. Tejido muscular en lengua de

cerdo.

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