MARCADORES TUMORALES

MARCADORES TUMORALESDRA KARINA PRIETO BEJARLABORATORIO CLINICOMARCADORES TUMORALESSustancias producidas por clulas neoplsicas o por el cuerpo como respuesta a la presencia de cncer o condiciones benignasRefleja crecimiento ,actividad Conocer la presencia ,evolucin o rpta teraputica de tumor malignoPueden ser hormonas, enzimas y protenasCARACTERISTICAS DEL MARCADOR IDEALSolo en tjdo tumoral y se liberaEspecificidad para un rgano determinadoDetectarse cuando la carga viral es bajaConcentracin en sangre y otros ,relacin directa con la carga celular tumoralCARACTERISTICAS DE MARCADORES TUMORALESNo es especifico de malignidad Elevados en diseminacin No hay un marcador especificoRangos de referencia no establecidosCLASIFICACION DE LOS MARCADORES TUMORALESPOR SU ORIGENAntgenos Oncofetales-inicia en vida fetal CEA,AFP,bHCGHormonas-actividad fisiolgicas catecolaminas,calcitoninaGlucoproteina-antgeno de clulas escamosas CA15,3; CA125 ;CYFRA 21-1

Enzimas-enolasa neuronal especifica NSE deshidrogenasa lctica LDHProtenas sricas-tiroglobulina, ferritina, inmunoglobulina

2- Por FuncionabilidadMarcadores de Susceptibilidad-mayor riesgo deteccin de alteracin genMarcadores de Diagnostico-existencia de neoplasia confirmacin de DX histopatolgico BHCG,AFPMarcador de PX-evolucin clnica ,trminos de sobrevidaMarcadores Predictivos-pacientes que responden al tratamiento PSAMarcadores de Seguimiento-monitorizar,estado del paciente CA15-3MARCADORES TUMORALES ESPECIFICOSALFA FETO PROTEINASEs una glicoprotenaProducida por feto Nivel elevado en2 trimestreDesaparece despus de nacimiento Se origina en hgado,saco vitelinoUTILIDADCA hepatocelular Tumores de clulas germinales testiculares ,extra gonadales y ovricasRANGOS NORMALES Rn- 80-100 ng/ mlEmbarazo 10 ng/mlNios 30ng/mlAdulto 40 ng/mlVALORES ELEVADOSDefecto de tobo neuralDefecto de pared abdominalCarcinoma hepticoTumor renalVALORES DISMINUIDOSTrisoma 21Emaciacin fetal

BETA 2 MICROGLOBULINAEs una protenaAntgeno principal de histocompEsta en leucocitos, clulas linfticasDetermina actividad del tumorPronostico

RESULTADOS NORMALESSangre =1,1-2,4 mg/lOrina =0-160 microg/lLCR =0-2,4 mg/lNIVELES INCREMENTADOSNefropatas tubularesToxicidad renal iatrognicaNefropatas por metales pesadosLinfomas NIVELES SERICOS DISMINUIDOSLinfoma, leucemiasNefropatas glomerularesRechazo a trasplante renal Infecciones vricasCA-125 (antgeno cancergeno)Marcador preciso de clulas t no mucinosas del ovarioDefinido por anticuerpos monoclonalesEn mas del 80% de mujeres con CA ovarioCarcinoma de ovario serosos, endometriales y clulas clarasSeguimiento Seguimientos de tumores uterinos UTILIDADDiagnostico Pronostico Deteccin precoz de recidiva Monitorizacin teraputica VALORES NORMALES 0-35 U/mlVALORES INCREMENTADOS MALIGNOSCA ovario ,Ca mama; CA colon, CA pulmnVALORES INCREMENTADOS BENIGNOSCirrosis, embarazo, endometriosis pancreatitisCA 15-3, CA 27,29Marcadores sricosEstadificacion del CA de mamaCA metastasico de mama 80 % (CA 15-3)CA metastasico de mama 65 % (CA 27,29)Antgeno circulante Identificado por 2 cuerpos monoclonales CA 15-3, CA 27,29Anticuerpo monoclonal conjugado-fase solida MAb115D8Capturar antgeno MAM-6 en plasmaDenominado MabDF3 como marcadorMAb115-D8 se preparo contra G grasos de leche hMAbDF3 se preparo contra la lnea celular MCG-7 del carcinoma de mamaCA 15-3, CA 27,29Marcador muy sensible-especificoControlar el curso del paciente CA mamaCorrelaciona con progresin, regresin o estabilidadCA 15-3, CA 27,29UTILIDADPrincipal aplicacin Diagnostico precoz de recidivaControl evolutivo de la enfermedadCA 15-3, CA 27,29VALORES NORMALESCa 15-3 = 31 U/mlCa 27,29 = 38 U/mlVALORES ELEVADOSCA 19-9Diagnostico Evaluacin de la respuesta al tratSeguimiento Ca pncreas o hepatobiliarHidrato de carbono en la superficie de clulas caRelacionado con grupo sanguneo Lewis

CA 19-9Pacientes Ca pncreas 70%Pacientes CA hepatobiliar 65%CA 19-9VALORES NORMALES 37 U/mlVALORES ANORMALESINCREMENTADO

CA 19-9

CALCITONINA

Hormona segregada por cel parafolicularesO cel C de Estimulada Niveles altosDe calcioFuncin principal contrib homeostasis del Calcio

CALCITONINA

UTILIDADEvaluacin pacientes carcinoma medularSeguimiento de respuesta al tratCALCITONINA

VALORES NORMALESVarn : 19 ng/lDama : 14ng/lVALORES ANORMALES

CALCITONINA

VALORES ANORMALESCirrosis alcohlicaHiperplasia de cel CCancer de pancreasCEA (ANTG CARCINOEMBRIONARIO)Protena de origen intestinal fetalNo es especifica Incrementado en procesos malignos como benignosDeterminacin al pronosticoEvaluacin de respuesta al trat Cncer de mama y estomago

CEA (ANTG CARCINOEMBRIONARIO)UTILIDADCA colorectalNeoplasias epitelialesCarcinoma de tracto digestivoCa mamaAdenocarcinoma de pulmnCEA (ANTG CARCINOEMBRIONARIO)VALORES NORMALES 5 ng/mlReferencial : fumadores 8-10 ng/ml no fumadores 5 ng/mlCEA (ANTG CARCINOEMBRIONARIO)VALORES ANORMALESCA digestivoColon MamaPulmnCirrosis Enfermedad de CrohnPSA (ANTG ESPECIFICO PROSTATICO)Glucoproteina (carbohidrato-prot)Sintetizada por cel del epitelio glandular de prstataGlndula mamaria y salivalesUbicada en citoplasma de cel epiteliales

Se detecta solo en sexo masculinoSensible para respuesta al tratPSA (ANTG ESPECIFICO PROSTATICO)PSA mnimamente elevado en hipertrofia BPProstatitisPSA mayor de 10 ng probabilidad ca prstataPsa libre diferenciar HPB y ca prstataPSA libre alto > 23% se asocia HPBPSA libre bajo 6% CA prstataPSA (ANTG ESPECIFICO PROSTATICO)UTILIDADEspecifico para un tejidoMarcador de diagnostico,PX,Diagnostico precoz de recidivaControl evolutivoPSA (ANTG ESPECIFICO PROSTATICO)VALORES NORMALES 4 NG/ML40-50 aos : 2,5 ng/mlMayor de 70 aos :5,5-6,5 ng/mlPSA (ANTG ESPECIFICO PROSTATICO)VALORES ANORMALESCA prstataHBPProstatitis CYFRA 21-1Fragmento de cito queratina 19 en sueroExpresado en epitelio simpleElevacin mal pxCarcinoma de cel escamosas CA pulmnBHCGHormona glicoprotena Sintetizada en sincitiotrofoblastoFormada por 2 subunidades a y bBHCGUTILIDADMarcador en tumores trofoblasticosTumores testiculares Pronostico Deteccin precoz de recidivaRespuesta al tratBHCGVALORES ANORMALESCA testicularCA mamaCA pulmn CA vejigaBHCGNO CA:EmbarazoUso de marihuana Enfermedad trofoblasticaMETODOS DE DETERMINACION DE MARCADORES TUMORALES Tcnicas de inmunoanlisis, que son mtodos basados en la reaccin especfica que ocurre entre un antgeno, su correspondiente anticuerpo y un marcador.Entre los mtodos mas importantes tenemos:1. Radioinmunoensayo (RIA) 2. nlisis de inmunoabsorcin enzimtico (ELISA) 3. Tecnologa de inmunoensayo enzimtico de micropartculas (MEIA)

1. Radioinmunoensayo (RIA)

Se basa en la utilizacin de Ag. o Ac. radiomarcados con istopos radioactivos, que clsicamente fue diseado como un ensayo de competencia

1. Radioinmunoensayo (RIA)Procedimiento:a. Se toma un Ag. marcado de concentracin conocida reaccionando con una concentracin de Ac. equivalentes. b. Luego se realiza la reaccin en presencia de la muestra problema, si sta contiene el Ag, ocupar los sitios de unin de los Ac, no dejando que el Ag marcado se le una.c. Se precipitan los Ac, y estos en caso de ser positiva la muestra arrastran menos Ag marcado.

1. Radioinmunoensayo (RIA)Otra metodologa es el de tipo directo:a. Los Ac marcados con un istopo radioactivo reaccionan con el Ag.b. Se lava y luego se ve la cantidad de radiacin que contienen la muestra problema, la cual ser proporcional a la cantidad de Ag.Marcadores Tumorales evaluados por RIA y sus respectivos valores de referencia

2. Anlisis de inmunoabsorcin enzimtico (ELISA)

El ELISA es un enzimoinmunoanlisis heterogneo basado en el mismo principio que el RIA, que permite la deteccin y cuantificacin de sustancias tales como: pptidos, protenas, anticuerpos y hormonas; en los cuales el elemento crucial de la deteccin es la reaccin antgeno-anticuerpo.

2. Anlisis de inmunoabsorcin enzimtico (ELISA)2.1 Componentes bsicos de un ELISA:a. Fase SlidaEl soporte o fase slida de los ensayos ELISA son usualmente placas de microtitulacin de 96 pocillos, hechas de poliestireno o polivinilo, al cual se unen los anticuerpos y otra protena usando buffers.

2. Anlisis de inmunoabsorcin enzimtico (ELISA)2.1 Componentes bsicos de un ELISA:b. EnzimasUna caracterstica clave de todos los ELISAs es el hecho que uno de los reactantes est marcado con una enzima, lo ms comn es usar un anticuerpo marcado (denominado conjugado).2. Anlisis de inmunoabsorcin enzimtico (ELISA)2.2 Tipos de ELISAa. Anlisis competitivos Conjugado Ag-enzima Anlisis de Ac marcado con enzimab. Anlisis no competitivo Anlisis inmunoenzimomtrico sandwich de 2 sitios Anlisis indirecto para medir Ac.

2. Anlisis de inmunoabsorcin enzimtico (ELISA)

Anlisis inmunoenzimomtrico sandwich de 2 sitios

a. El anticuerpo inmovilizado en fase slida se incuba con los antgenos estndar o de prueba.

b. Despus del lavado, el complejo anticuerpo inmovilizado-antgeno se incuba con un exceso de anticuerpo marcado enzimticamente, que se fija a uno de los sitios antignicos restantes.

MARCADORES TUMORALES EVALUADOS POR ELISA

3. Tecnologa de Inmunoensayo Enzimtico de Micropartculas ( MEIA). Esta tecnologa utiliza una solucin de partculas anticuerpos monoclonales de ratn suspendidas en ltex.a.El reactivo y la muestra para la determinacin son transferidos a un recipiente de reaccin especfico, en donde se mezclan y se incuban.b.La mezcla es transferida a una matriz inerte de fibra de cristal donde se lavan y se elimina el exeso.

3. Tecnologa de Inmunoensayo Enzimtico de Micropartculas ( MEIA).c. Se adiciona un conjugado enzimtico a la matriz, el cual se une al anticuerpo del complejo inmune.Se realiza un nuevo lavado.

3. Tecnologa de Inmunoensayo Enzimtico de Micropartculas ( MEIA).d. Se agrega finalmente un substrato fluorescente: el fosfato 4-Methylumbelliferyl (MUP), a la matriz. La conjugacin cataliza la hidrlisis del fosfato 4-Methylumbelliferyl (MUP) a 4-Methylumbelliferyl (MU).

Marcadores Tumorales evaluados por MEIA y sus respectivos valores de referencia

CONCLUSIN

Debido a la prevalencia creciente en el desarrollo de cncer en la , resulta de suma importancia el desarrollo de campaas enfocadas a la disminucin de factores de riesgo predisponentes al desarrollo de esta enfermedad, as como medidas especficas destinadas a la deteccin temprana de esta patologa y en el pronstico, la deteccin precoz de recidiva y la monitorizacin teraputica del tratamiento.CONCLUSIN

los marcadores tumorales no cumplen las caractersticas de ser un marcador especfico, ya que pueden detectarse en el suero de pacientes sin cncer, y es por ello que a la hora de aplicarlo al estudio de algn tumor es preciso tener la mayor informacin posible sobre las caractersticas del tumor.

CONCLUSIN

Para mejorar la especificidad es necesario tener en claro que algunos de los resultados falsos positivos pueden estar determinados por enfermedades no neoplsicas o en alteraciones de la funcin en los rganos donde son catabolizadas y/o eliminadas dichas sustancias. la deteccin de marcadores tumorales presenta mayor utilidad en la evaluacin del seguimiento y control de la eficacia del tratamiento de la enfermedad y no como un elemento especfico de diagnstico en procesos cancergenosCONCLUSIN

Los mtodos de determinacin de marcadores se basan principalmente en la reaccin antgeno- anticuerpo, lo que les da una gran especificidad y sensibilidad, pudiendo as determinar pequeas variaciones de estos componentes en los lquidos corporales. La evolucin creciente en las tcnicas de determinacin de marcadores tumorales ha llevado a que, en la actualidad, se desarrollan nuevas metodologas en el reconocimiento de sustancias ms especficas relacionadas con alteraciones neoplsicas mediante el estudio en base a tcnicas de biologa molecular.GRACIAS