ESTRUCTURA

DE LOS

ÁCIDOS NUCLEICOS

MONÓMEROS

POLIMERIZACIÓN

ESTRUCTURA DEL ADN

ESTRUCTURA DEL ARN

PROPIEDADES

CLASES DE ACIDOS NUCLEICOS

FUNCIONES

DESNATURALIZACIÓN

PRECIPITACIÓN

ABSORCIÓN UV

ALTERACIONES

Propiedades

pH extremos

temperatura > 80 °C

Desnaturalización del ADN

Ruptura de puentes de H

Desapilamiento de bases

hibridización

urea

formamida

Desnaturalización

Bioquímica 2009 A. Esteves Facultad de Ciencias

Al aumentar la temperatura las bases se desapilan y los enlaces de H se rompen

A temperaturas altas, aún las zonas ricas en GC se desaparean las

Area rica en pares de bases A/T

DNA doble

cadena

DNA parcialmente desenrollado

DNA totalmente desnaturalizado, hebras separadas

A medida que la solución baja de temperatura, las regiones complementarias de ambas cadenas se aparean

Area de nucleación

Una vez iniciada la nucleación el proceso se completa rápidamente.

Desnaturalización

In vivo el proceso de desnaturalización y renaturalización tienen lugar durante la

Desnaturalización

TRANSCRIPCION y la REPLICACION

•Se define la temperatura en la cual el 50% de la molécula está desnaturalizada como:

Temperatura de fusión

(Tm)

Desnaturalización

Temperatura

Desnaturalización

Temperatura

• Cada molécula de ADN tiene una temperatura de desnaturalización (o de fusión) característica

•¿De qué depende esta temperatura, en condiciones de pH y fuerza iónica definidas?

• ¿Cómo afecta la Tm la fuerza iónica?

Desnaturalización

• Cada molécula de ADN tiene una temperatura de desnaturalización (o de fusión) característica

•¿De qué depende esta temperatura, en condiciones de pH y fuerza iónica definidas?

• ¿Cómo afecta la Tm la fuerza iónica?

Desnaturalización

Temperatura

del contenido en GC (ó AT)

Desnaturalización

Temperatura

Desnaturalización

Temperatura

• Cada molécula de ADN tiene una temperatura de desnaturalización (o de fusión) característica

•¿De qué depende esta temperatura, en condiciones de pH y fuerza iónica definidas?

• ¿Cómo afecta la Tm la fuerza iónica?

Desnaturalización

Temperatura

Desnaturalización

Tm- Fuerza iónica

< m < Tm > m >Tm

Propiedades Absorción de la luz

Absorbancia 260nm = 1 equivale a 50 mg/ml ADN doble hebra

La transición de la forma doble hebra a monohebra puede detectarse por una disminución en la viscosidad o mediante un incremento de la absorción de luz ultravioleta (260nm).

Propiedades Absorción de la luz

EFECTO HPERCRÓMICO

PRECIPITACION

Constante diélectrica

pH

Fuerza iónica

Temperatura

Propiedades Precipitación

desaminación C U

hidrólisis del enlace glucosídico

metilación

Propiedades Alteraciones

¿Cómo se descifra una secuencia de ADN? ¿Qué información nos brinda?

Propiedades

Secuencia

Métodos de secuenciación (1977) • Sanger • Maxam y Gilbert

• identificar mutaciones • predicciones de potenciales enfermedades • como se regula un gen • que proteína expresa • relaciones filogenéticas

H FABP Bos taurus

H FABP Sus scrofa

H FABP Hs

FABP Mus musculus

H FABP Gallus gallus

H FABP Xl

H FABP Dr

Rep1

M ensis CRABP

Ms CRABP

P xylostella CRABP

D plexippus CRABP

Bm CRABP

Bt CRABP1

Mus musculus CRABP1

Homo sapiens CRABP2

Daio rerio CRABP2

DrCRABP2

Xl CRABP2

MmCRABP2

Hs CRABP2

Bt CRABP2

Ss CRABP2

C.clemensi CRABP2

C rogercresseyi CRABP2

Nucleosoma

Fibras de cromatina

Bucles de cromatina

Cromosomas

doble hebra de ADN se organiza en

El ADN en la célula eucariota El ADN en la célula eucariota

El ADN en la célula procariota

ARN Monohebra

Tres formas

Contienen uracilo en lugar de timina

Estructuras trimidensionales complejas

ARNr

ARNm

ARNt

• Estructuras muy complejas • Formas helicoidales (forma A más favorecida) • Apareamientos W y C • Otros apareamientos ( G-U) • No hay estructuras regulares • Bucles y salientes formas por zonas no apareadas

Estructura de los Ácidos Nucleicos

Estructura de los Ácidos Nucleicos

ARNm

Asa D (Dihidrouridina)

Asa variable

Anticodón

Asa anticodón

Brazo aceptor

Asa U (pseudouridina)

Estructura del ARN ARNt

Asa D

Asa variable

Asa anticodón

Brazo aceptor

Asa U Base

discriminadora Tallo aceptor

Tallo anticodón

Estructura del ARN

ARNr 5.8S 160 nucleótidos

ARNr 5 S 120 nucleótidos

ARNr 28S 4700 nucleótidos

49 proteínas

ARNr 18S

33 proteínas

ARN Ribosomal Eucariota

RESUMEN

• La molécula de ADN está formada por dos hélices antiparalelas y complementarias.

• Las moléculas de ARN están formadas por una sola hebra y existen cuatro tipos fundamentales: ARNm, ARNt, ARNr y pequeños ARNs.

• Los ácidos nucleicos absorben la luz ultravioleta a 260nm

• Presentan efecto hipercrómico

• Pueden desnaturalizarse y renaturalizarse

• La temperatura de fusión es un parámetro específico que depende del % de bases A/T o G/C

• Las modificaciones en el ADN que dan lugar a modificaciones permanentes reciben el nombre de mutaciones.