UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEBAJA CALIFORNIA SUR
NIVELES DE `CIDO L`CTICO EN HEMOLINFAy MÚSCULO DE CAMARÓN CAFÉPenaeus californiensis Holmes 1900EN DIFERENTES GRADOS DE HIPOXIAALCALOSIS E HIPERAMONIA
TESIS
Que para obtener el titulo de
Biólogo Marino
PRESENTALludmila MorÆn Morales
Agosto del 2003La Paz Baja California Sur MØxico
UNIVERSIDAD AUTÓNOMADE
BAJA CALIFORNIA SURApartado Postal 19 B
Codigo Postal 23080
La Paz B C S
Tels 1280440 12805 69
y1280432Fax 1280801 Y 1280880
AREA INTERDISCIPLlNARlA
DE CIENCIAS DELMAR
Departamnto de Biología Marina
Fecha 18 Jtm 03
BIOL MAR EMELIO BARJAU GONZALÉZJEFE DEL DEPARTAMENTO DE BIOLOG˝A MARINA
PRESENTE
Los abajo firmantes comunicamos a Usted que habiendo revisado el Trabajo de Tesis querealizó ron el la pasante s
Lltrlnila MJrÆn Mlrales
Con el Titulo Niveles de Æcioo lÆctioo en harolinfa y rrÚsculo de carærm æfØPenaeus æliforniensis fblrres 1UJ en diferentes grados de hifOxia alælæis
e hirerarraria
Otorgamos nuestro voto aprobatorio y consideramos que dicho Trab estÆ listo para su
defensa a fin de obtener e1 titulo de Licenciado en Biología MarintJM en c Aurora RelxllErlo IoIEZ
Nombre Completo F a
Biól Francisoo Javier M3gallm BarajasNombre Completo Firma
VOCAL
Biól Francisoo Javier M3glllm B3ra jas
Nombre Completo
M en C Renato Pefu M1rtinez
Nombre Completo
Biól M3r M3roo Antroio Mrlina
Nombre CompletoSUPLENTE
M en C RæaÚa Servin VilleçasNombre Completo
R
C cp Coordinador del Area Inkrdisciplinaria de Ciencias del Mar
ecp Director del Servicios Escolares
C ep Interesado
6
ltf086ð
05R04 1
Agradecimientos
A mi familia por todo el apoyo brindado en la realización
de este y todos mis proyectos
A Armando Herrero por su apoyo incondicional
A la familia Magallón Servín por adoptarme como parte de ella
A Guillermo Portillo Ciro Calderón y Karina Magdaleno
por ser los mejores compaæeros
A Aurora Rebolledo Renato Peæa y Marco Medina por los acertados
comentarios sobre este trabajo
A Diana Carreæo Roberto HernÆndez Mayra Vargas Pedro Luna
Sandra de la Paz Gilberto Colado Orlando Lugo Armando Tejas y Adriana
Landa por todas las facilidades para la realización de esta tesis
Reconocimientos
La presente tesis se realizó en el Centro de Investigaciones Biológicas del
Noroeste CIBNOR bajo la dirección del Biol Francisco Javier Magallón Barajas
responsable del proyecto POSG 3 TambiØn se contó con el apoyo de la M e Rosalia
Servín Villegas responsable del proyecto AGEC 2 y del Biol Guillermo Portillo Clark a
cargo del proyecto PAC 24
Participantes
Los organismos experimentales se obtuvieron de los estanques supralitorales y de
mareas a cargo del Ing JosØ Gilberto Colado DurÆn y Biol Jesœs Aguilar Villavicencio
y se mantuvieron en el patio de cultivos con el apoyo del tØcnico Pedro Luna para luego
ser transferidos al Laboratorio de Nutrición Acuícola bajo la responsabilidad de la Biol
Sandra de la Paz Reyes TambiØn se contó con la colaboración de la coordinación de los
laboratorios acuícolas en esos momentos a cargo de la lng en Acuicultura Mayra
Vargas Mendieta Las detenninaciones bioquímicas se realizaron en el Laboratorio de
Bioquímica Fisiológica bajo la dirección de la M e Diana P Carreæo León y del M C
Roberto HernÆndez Herrera Durante los bioensayos y anÆlisis de laboratorio se contó
con el apoyo del BiolMar Ciro Calderón Flores Rosa Karina Magdaleno Castillo y en
los bioensayos de toxicidad con el apoyo del IB Q Orlando Lugo Lugo
INDICE
˝ndice de Figuras i
˝ndice de Cuadros iii
1 Resumen 1
2 Introducción 2
3 Justificación 6
4 Objetivos 9
4 1 Objetivo General 9
4 2 Objetivos Específicos 9
5 Hipótesis 10
6 Antecedentes 11
6 1 Biología de la especie 11
6 1 1 Clasificación taxonómica 11
6 12 Características Generales 12
6 13 Distribución y hÆbitos 13
6 2 Aspectos fisiológicos y ambientales relacionados con la
acidolactosis
6 2 1 Acidolactosis
6 2 2 Acidolactosis y ejercicio
6 2 3 Acidolactosis e hipoxia
6 24 Acidolactosis e hiperamonia
6 2 5 Acidolactosis y alcalosis
14
15
16
18
19
21
7 Material y MØtodos 25
7 1 Obtención de organismos y aclimatación 25
7 2 Diseæo Experimental 25
7 3 Comportamiento 27
7 4 Sistema de ejercitación 27
7 5 Toma Almacenamiento y AnÆlisis de Muestras 29
7 6 CÆlculo de los consumos de oxígeno 31
7 7 Procesamiento de datos 31
8 Resultados 33
8 1 Comportamiento durante el experimento 33
8 2 Consumo de oxígeno 34
8 3 Acidolactosis Muscular 35
8 3 1 pH 8 sin amonio 35
8 3 2 pH 8 con amonio 37
8 3 3 pH 9 sin amonio 38
8 3 4 pH 9 con amonio 39
8 3 5 Comparación de todos los tratamientos 40
8 3 6 Lactato muscular en la jaula 4 41
8 3 7 Lactato muscular en la jaula 5 41
8 3 8 Lactato muscular en la jaula 6 42
8 3 9 Lactato muscular en los organismos muertos 42
8 4 Acidolactosis HemolinfÆtica 43
8 4 1 pH 8 sin amonio 43
8 4 2 pB 8 con amonio
8 4 3 pB 9 sin amonio
8 4 4 pB 9 con amonio
45
46
47
8 4 5 AnÆlisis comparativo de hemolinCa entre tratamientos 48
8 4 6 Lactato hemolinCÆtico en las jaulas 1 2 Y 3 49
8 4 7 Lactato hemolinCÆtico en la jaula 4 49
8 4 8 Lactato hemolinCÆtico en la jaula 5 50
84 9 Lactato hemolinCÆtico en la jaula 6 51
84 10 Lactato hemolinCÆtico en los organismos muertos 52
9 Discusión 53
9 1 Cambios en la tasa respiratoria durante la hipoxia 53
9 2 Acidolactosis muscular 56
9 2 Acidolactosis hemolinCÆtica 60
9 3 Relación entre la acidolactosis muscular y hemolinCÆtica 62
9 4 Respuestas comportamentales a la hipoxia 62
9 5 Respuestas fisiológicas a la hipoxia 64
9 6 Respuestas metabólicas a la hipoxia 66
9 7 Acidolactosis por intoxicación por amonio 67
10 Conclusiones 68
11 Recomendaciones 69
12 Glosario 70
13 Literatura Citada 72
14 Anexos 79
˝ndice de Figuras
Fig 1 Anatomía externa de Penaeus californiensis 12
Fig 2 Ciclo de vida del camarón 14
Fig 3 Variación diaria del pH en aguas interiores 23
Fig 4 Sistema experimental 26
Fig 5 Sistema de ejercicio 27
Fig 6 Curva patrón 32
Fig 7 Niveles de oxígeno disuelto dentro de los tanques de exposición
durante los experimentos 34
Fig 8 Consumo de oxígeno en los tanques de los tratamientos con amonio 35
Fig 9 Consumo de oxígeno en los tanques de los tratamientos sin amonio 35
Fig 10 Lactato en mœsculo a pH 8 sin amonio 36
Fig 11 Lactato en mœsculo apH 8 con amonio 37
Fig 12 Lactato en mœsculo a pH 9 sin amonio 38
Fig 13 Lactato en mœsculo apH 9 con amonio 39
Fig 14 Lactato en mœsculo en todos los tratamientos en hipoxia 40
Fig 15 Lactato en mœsculo en todos los tratamientos en normoxia 40
Fig 16 Lactato muscular en la jaula 4 1 mg 02L 41
Fig 17 Lactato muscular en la jaula 5 0 5 mg 02L 41
Fig 18 Lactato muscular en la jaula 6 0 5 mg 02L 42
Fig 19 Lactato en mœsculo en los organismos muertos 42
Fig 20 Lactato en hemolinfa apH 8 sin amonio 43
Fig 21 Lactato en hemolinfa apH 8 con amonio 45
Fig 22 Lactato en hemolinfa apH 9 sin amonio 46
Fig 23 Lactato en hemolinfa a pH 9 con amonio 47
Fig 24 Lactato en hemolinfa en tratamientos sin aireación 48
Fig 25 Lactato en hemolinfa en tratamientos con aireación 48
Fig 26 Lactato hemolinfÆtico en las jaulas 1 2 Y 3 5 4 Y 2 mg 02L
a pH 8 Y 9 con y sin amonio 49
Fig 27 Lactato hemolinfÆtico en la jaula 4 1 mg 02L entre tratamientos 50
Fig 28 Lactato hemolinfÆtico en la jaula 5 0 5 mg 02L entre tratamientos 50
Fig 29 Lactato hemolinfÆtico en la jaula 6 0 5 mg 02L entre trataIIÙentos 51
Fig 30 Lactato en hemolinfa de los organismos muertos 52
Fig 31 Lactato en hepatopÆncreas a pH 8 con amonio 88
II
˝ndice de Cuadros Anexos
Cuadro 1 Niveles de Æcido lÆctico en mœsculo por jaula 79
Cuadro 2 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 8
sin amonio y en hipoxia 79
Cuadro 3 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 8
sm amoruo y en normOXIa
Cuadro 4 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo apH 8
con amonio y en hipoxia
Cuadro 5 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 8
con amonio y en normoxia 80
Cuadro 6 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 9
sin amonio y en hipoxia 81
Cuadro 7 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 9
sin amonio y en normoxia 81
Cuadro 8 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo apH 9
con amonio y en hipoxia 81
Cuadro 9 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 9
con amoruo y en normmoa
Cuadro 10 Comparación de los niveles de lactato en mœsculo en los cuatro
tratamientos en la Jaula 4 1 mg 02L
Cuadro 11 Comparación de los niveles de lactato en mœsculo en los cuatro
tratamientos en la Jaula 5 0 5 mg 02L 82
Cuadro 12 Lactato en mœsculo en lajaula 6 0 5 mg 02L 82
Cuadro 13 Lactato en mœsculo de organismos muertos en los experimentos 83
Cuadro 14 Datos estadísticos de los anÆlisis de varianza de los niveles de
lactato en mœsculo de organismos muertos en los experimentos 83
Cuadro 15 Niveles de Æcido lÆctico en hemolinfa 83
Cuadro 16 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfu apH 8
sin amonio y enhipoxia 84
Cuadro 17 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 8
sm amoruo y en normOXla
80
80
82
82
84
ID
Cuadro 18 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 8
con amonio y enhipoxia 84
Cuadro 19 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 8
con amonio y en normoxia 85
Cuadro 20 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 9
sin amonio y en hipoxia 85
Cuadro 21 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 9
sin amonio y en normoxia 85
Cuadro 22 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 9
con amonio y en hipoxia 86
Cuadro 23 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 9
con amonio y en normoxia 86
Cuadro 24 Comparación de los niveles de lactato en hemolinfa en las jaulas
1 2 Y 3 entre los tratamientos 86
Cuadro 25 Comparación de los niveles de lactato en hemolinfa en los cuatro
tratamientos en la Jaula 4 1 mg 02L 86
Cuadro 26 Comparación de los niveles de lactato en hemolinfa en la jaula 5
0 5 mg 02L 87
Cuadro 27 Comparación de los niveles de lactato en hemolinfa en la jaula 6
0 5 mg02L 87
Cuadro 28 Datos estadísticos de los anÆlisis de varianza de lactato en
hemolinfa de organismos muertos en los experimentos 87
Cuadro 29 Niveles de Æcido lÆctico en hepatopÆncreas 89
Cuadro 30 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hepatopÆncreas
a pH 8 con amonio y en hipoxia 89
Cuadro 31 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hepatopÆncreas
a pH 8 con amonio y en normoxia 89
Cuadro 32 Niveles de lactato reportados en la literatura 93
IV
1 Resumen
En este trabajo se estudiaron las variaciones en los niveles de Æcido lÆctico del
camarón cafØ Penaeus californiensis Holmes 1900 utilizando un modelo experimental
en el laboratorio por lo que se combinaron factores como esfuerzo muscular hipoxia
alcalosis e hiperamonia induciendo variaciones en los niveles de Æcido lÆctico así como
la correlación entre estas variables evaluando la respuesta de P californiensis mediante
la incubación en diferentes condiciones ambientales controladas hasta alcanzar niveles
de hipoxia Ølmbiental cercanos a la anoxia para estudiar los efectos de estos factores
sobre la reducción de los niveles de lactato durante el proceso de recuperación post
eJerCICIO
Los resultados obtenidos indican que la acidolactosis muscular se eleva
principalmente por ejercicio en condiciones de normoxia alcanzando niveles extremos
cuando se combina con la presencia de amonio y pH elevado mostrando recuperación
por reposo despuØs de una acidolactosis funcional siempre y cuando existan condiciones
de normoxia pH neutro y bajos niveles de amonio ya que tanto la hipoxia como la
presencia de hiperamonia y alcalosis dificultan la recuperación provocando un bloqueo
del metabolismo aerobio aœn en reposo y presencia de oxígeno en el medio externo En
cambio la acidolactosis hemolinfÆtica se incrementa principalmente por hipoxia
ambiental mostrando una tendencia ascendente en los niveles de lactato a medida que
disminuye la concentración de oxígeno disuelto dentro de los tanques sin aireación con
niveles extremos en concentraciones de oxígeno menores a 1 mgL nivel en el que el
efecto de la hipoxia se hace mas evidente indicando un límite en el proceso del Æcido
pirœvico por el metabolismo aerobio
2 Introducción
El hombre con el propósito de satisfacer sus necesidades alimenticias ha
desarrollado actividades como la agricultura la ganadería y la pesca Esta œltima se
diferencia de las dos primeras en que se toman los recursos de la naturaleza sin aplicar
en la mayoría de los casos esfuerzos para su renovación trayendo como consecuencia
una disminución en las reservas naturales especialmente de aquellas especies mÆs
explotadas entre las que se encuentra el camarón por tal razón la acuicultura representa
una importante alternativa para la solución parcial de este problema Cifuentes el al
1988
La acuicultura es la disciplina dedicada al cultivo de organismos acuÆticos bajo
condiciones controladas desde la producción de larvas la engorda de los organismos
incluyendo tambiØn la cosecha procesamiento comercialización y consumo del producto
Wheaton 1982 Esta actividad se practica desde la antigüedad ya que los primeros
registros de origen japonØs datan del aæo 2 000 ac Sin embargo el primer libro sobre
acuicultura fue escrito en el aæo 475 ac por Fan Li debido a su conocimiento en el
cultivo de peces Cifuentes el al 1988 El pilar del desarrollo de la acuicultura durante
muchos siglos se fundamentó en el cultivo de especies acuÆticas forrajeras las cuales
corresponden a los consumidores primarios incorporando Æreas acuÆticas a la producción
de proteína animal para la alimentación humana
En MØxico la acuicultura fue introducida en los aæos 30 pero con resultados
poco favorables No fue sino hasta la dØcada de los aæos 80 cuando se dio un impulso
mayor de forma industrial Durante los aæos 90 se fomentó a mayor escala con la
incorporación de nuevas tecnologías En los œltimos aæos esta actividad ha tomado
2
mucha importancia como parte de un proceso económico social por lo que ha sido
promovida como una alternativa de producción a travØs de un proceso de sustentabilidad
económica ambiental y social Aragón 2000 Uno de los fenómenos que se destaca en
la acuicultura moderna es la domesticación de especies ornnívoras y carnívoras de alto
valor comercial integrantes de los eslabones de consumo secundario
Aunque la carnaronicultura nació en el sudeste asiÆtico mediante un modelo de
desarrollo extensivo y como una alternativa para la generación de proteína proveniente
del medio acuÆtico Su adopción en el Hemisferio Occidental rÆpidamente la transformó
en un modelo de cultivo semi intensivo e intensivo dependiente del subsidio proteico
proveniente de otras industrias Dicha modalidad fue adoptada en MØxico durante los
aæos 80 como un proceso de transformación de proteína mÆs que de producción de la
misma generando importantes divisas en nuestro país Su actividad se concentra en la
región Noroeste siendo Sonora y Sinaloa los principales productores registrando en
1999 una cosecha mayor a las 12 000 toneladas Aragón 2000
La intensificación y crecimiento de la camaronicultura ha enfrentado corrientes
de opinión contrarias a la expansión de su actividad las cuales han planteado entre otras
críticas la ineficiencia de este tipo de cultivo para generar proteína de origen marino así
como las consecuencias negativas de la exportación de nutrientes en las aguas residuales
PÆez Osuna et al 1998
Por otra parte se ha reconocido que estas especies tienen mÆs facilidad para
utilizar la proteína como fuente de energía que los carbohidratos Por tal razón se han
venido realizando esfuerzos de investigación tendientes a entender los mecanismos por
los cuales son ineficientes para utilizar los carbohidrato s constituyendo el estudio de los
3
niveles de lactato uno de los aspectos bÆsicos que contribuyen a entender las dificultades
de estas especies para catabolizar la glucosa dado que son un buen indicador de la
acumulación de piruvato Shiau 1998
El camarón cafØ o patiamarillo P californiensis no sólo es la principal especie de
camarones explotada a lo largo de las costas del Pacífico Mexicano y del Golfo de
California Hendrickx 1996 sino que tambiØn constituye una opción para la
diversificación el policultivo y la rotación de especies en la camaronicultura de la zona
Adicionalmente por sus características fisiológicas relacionadas con el estrØs muscular
representa un modelo de investigación que permite conocer las variaciones en los niveles
de Æcido lÆctico originadas por presiones fisiológicas y ambientales entre las que
destacan aquellas relacionadas con las sustancias tóxicas provenientes del metabolismo
de los organismos y con el manejo de los parÆmetros ambientales como pH oxígeno
disuelto y salinidad pudiendo alcanzar valores críticos al incrementarse la biomasa por
unidad de volumen BANCOMEX 1999 Martínez 1998
Uno de los parÆmetros mÆs importantes es el oxígeno ya que durante las horas de
oscuridad puede disminuir en los estanques de cultivo generÆndose hipóxia
especialmente durante el amanecer Este efecto se puede agudizar con la cantidad de
sedimentos cargados de materia orgÆnica y de una elevada biomasa microbiana
fitoplanctónica y zooplanctónica debido a sus requerimientos de oxígeno
Adicionalmente conforme se incrementa la biomasa en el estanque tambiØn aumenta la
excreción de amonio N1I4 especialmente durante los eventos en los que el pH se eleva
en el ambiente de cultivo tal situación conlleva a que este producto se transforme en
amoniaco NH3 el cual es tóxico para muchos organismos acuÆticos Las
4
concentraciones de NH3 suelen incrementarse durante el atardecer debido a la elevación
de pH como respuesta al consumo del C02 por la fase obscura de la fotosíntesis Por
ello una variación en las concentraciones de oxígeno amonio y cambios en el pH
pueden generar estrØs en los organismos provocando mortalidades masivas y por ende
mermas económicas Es necesario entonces conocer el origen y la dinÆmica del estrØs
especialmente el relacionado con el manejo de los parÆmetros ambientales para evitar que
ocurran eventos letales o subletales y garantizar en la medida de lo posible una exitosa
productividad BANCOMEX 1999 Martínez 1998 Nicovita 1997
Por otra parte se sabe que a medida que los organismos en cultivo van ganando
peso el aumento de biomasa por unidad de volumen provoca un incremento en la
respiración por lo que las requerimientos de oxígeno dentro de un estanque aumentan de
acuerdo a la etapa del ciclo en desarrollo BANCOMEXT 1999 AdemÆs la demanda
de oxígeno de un organismo depende tanto de la actividad que realice como del nivel de
estrØs al que estØ sometido por lo cual entre mayores sean estos dicha demanda serÆ
mayor De igual manera si el medio no es capaz de cubrir estos requerimientos o por las
condiciones fisiológicas propias de la especie el oxígeno no llega a los tejidos puede
presentarse una anaerobiosis ambiental o funcional La primera de ellas puede ocurrir
cuando el organismo estÆ expuesto en un medio hipóxico o anóxico ya sea por una baja
en la producción de oxígeno o por el consumo por la respiración de los organismos en
cultivo En cambio la anaerobiosis funcional o celular se presenta cuando los
organismos realizan excesiva actividad locomotora y el transporte de oxígeno hacia el
mœsculo es menor a los requerimientos del mismo derivando en una descompensación
entre la ruta anaeróbica y la aeróbica lo que genera una acumulación de los productos del
5
metabolismo anaerobio Gäde 1984 Eckert el al 1998 Si dicha acumulación rebasa
ciertos límites en un tejido como suele ocurrir en el mœsculo activo y al mismo tiempo
Øste recibe menos oxígeno del necesario para oxidar el NADH entonces la deficiencia de
NAD reduce la actividad del ciclo de Krebs generando la acumulación del Æcido
pirœvico cuyo exceso al no ser procesado por el complejo de la piruvato deshidrogenasa
se acumula en forma de lactato y detiene la producción de acetil CoA Eckert el al 1998
Dicha situación afecta la condición fisiológica de los animales en cultivo especialmente
en su carga energØtica lo que los hace susceptibles a diversos padecimientos de origen
parasitario y vira como lo ha citado Vargas Albores 1992
3 JustificaC˛ón
Se seleccionó la especie P californiensis porque como se seæaló anteriormente
se ha convertido en un modelo de investigación para estudios de fisiología comparada de
los camarones nativos TambiØn porque es la mÆs importante en la pesca de estas
especies en el Golfo de California y siendo dominante en las costas de la Península de
Baja California Sur Adicionalmente persiste un gran interØs por el desarrollo de su
acuicultura en la cual aunque se dominan todos los aspectos para su cultivo aun no ha
alcanzado una expansión de la fase experimental a la comercial porque desde el punto de
vista económico es menos rentable que el cultivo de L vannamei Boone 1921
Algunas de las dificultades para su cultivo consisten en las bajas tasas de
crecimiento su densodependencia baja tolerancia a altas temperaturas altos
requerimientos de proteína hÆbitos de cavar durante la noche provocando caídas de
6
oxígeno y suspensión de sedimentos y la facilidad con la que su mœsculo abdominal se
contractura por estrØs durante el día
Se eligió la medición de los niveles de Æcido lÆctico porque son indicadores de
los excedentes de Æcido pirœvico los cuales son a su vez un producto intermedio en la
combustión de carbohidratos por lo que sus variaciones permiten conocer indirectamente
la dinÆmica del metabolismo de los animales tanto en la demanda de energía como en la
velocidad a la que ocurre el metabolismo aerobio Estos estudios son necesarios para
entender las causas por las cuales estas especies son mÆs eficientes para utilizar la
proteína como fuente de energía que los carbohidratos Por otra parte en casos extremos
estÆn relacionadas con el estrØs muscular y pueden ser un indicador de cambios
fisiológicos derivados de presiones fisiológicas y ambientales tales como el ejercicio la
hipoxia la hiperamonia y la alcalosis
Los niveles de Æcido lÆctico se estudiaron en ejercicio porque es un mecanismo
mediante el cual se puede inducir acidolactosis muscular por exceso de Æcido pirœvico lo
que permite conocer la variación entre los niveles de reposo y los niveles de actividad
La variación de estos niveles se estudió en normoxia e hipoxia para conocer la
dinÆmica entre ambos así como los límites de concentración de oxígeno a los que ocurre
el metabolismo aerobio ya que en otros modelos animales se ha observado que es
bloqueado por la hipoxia obligÆndolos a depender solo del metabolismo anaerobio para
su subsistencia AdemÆs los eventos de hipoxia constituyen uno de los problemas mÆs
frecuentes en la acuicultura del camarón que en el caso particular del cultivo de P
californiensis se agravan por ser una especie nocturna cavadora que suspende los
sedimentos incrementando la demanda de oxigeno
7
TambiØn se estudió esta variación en condiciones de alcalosis e hiperamonia
porque ambos eventos soncomunes en la acuicultura ademÆs de que su combinación estÆ
relacionada con la intoxicación por amoniaco que en condiciones extremas puede
bloquear el metabolismo aerobio propiciando un exceso de Æcido pirœvico y con ello una
acumulación de lactato
Aunque en los œltimos afios se ha ido generando información sobre las respuestas
fisiológicas de los organismos al estrØs causado por la hipoxia alcalosis e hiperamonia
se sabe relativamente poco sobre la forma en que estos factores se interrelacionan y
afectan a la especie P californiensis así como los mecanismos y tiempos en los que estos
procesos suceden lo que puede estar relacionado con las dificultades para su cultivo por
lo que este conocimiento es importante para su desarrollo acuícola ademÆs de contribuir
con el conocimiento para generar las tecnologías adecuadas para el manejo de las
espeCIes que se cultivan actualmente evitando grandes pØrdidas en la producción
acuíco la
Asimismo es relevante determinar los mÆrgenes de variación en las
concentraciones de Æcido lÆctico en el camarón cafØ a nivel muscular y hemolinfÆtico ya
que esto permite interpretar su estado de estrØs Por 10 tanto se decidió realizar el presente
trabajo con los siguientes objetivos
8
4 Objetivos
4 1 Objetivo General
Determinar los niveles de acidolactosis en hemolinfa y mœsculo de
camarón cafØ Penaeus californiensis Holmes 1900 en diferentes grados de hipoxia
alcalosis e hiperamonia para conocer los niveles de estrØs asociados a los ambientes de
cultivo
4 2 Objetivos Específicos
Determinar los niveles de acidolactosis en mœsculo y plasma en condiciones
de post ejercicio y en diferentes grados de hipoxia 5 4 2 1 05 Y 0 5 mg
de 02L
Determinar los cambios en los niveles de acidolactosis hemolinfÆtica y
muscular bajo condiciones de post ejercicio en dos niveles de pH 8 Y 9
Obtener los niveles de acidolactosis hemolinfÆtica y muscular en estado de
post ejercicio a una concentración de 7 mg NI4CVL
Relacionar los niveles de acidolactosis en las diferentes combinaciones de
hipoxia alcalosis e hiperamonia
9
5 Hipótesis
El estrØs por acidolactosis a nivel muscular puede generarse por manipulación
o esfuerzo muscular movimiento rÆpido o ejercicio prolongado aœn en
presencia de oxígeno en cambio a nivel hemolinfÆtico el estrØs se genera
principalmente por hipoxia y no necesariamente por esfuerzo muscular
La disminución de los niveles de estrØs en los períodos de post ejercicio
reflejados como acidolactosis muscular estÆ relacionada con el tiempo de
reposo y las concentraciones de oxígeno situación que puede alterarse cuando
los niveles de amonio y pH alcanzan condiciones de hiperamonia y alcalosis
10
6 Antecedentes
6 1 Biología de la especie
6 11 Clasificación taxonómica
El camarón cafØ o patiamarillo originalmente fue clasificado como PenaellS
cn1ifomiensis Hohnes 1900 y recientemente reclasificado como Farfantepenaeus
californiensis PØrez Farfante y Kensley 1997 apesar de ello para evitar controvers
en el presente trabajo se consideró la clasificación de Holmes 1900 descrita a
continuación
Phylum Arthropoda Von Siebold 1848
Superclase Crustacea Latreille 1777
Clase Malacostraca Latreille 1806
Subclase Eumalacostraca Grobben 1892
Superorden Eucarida Calman 1904
Orden Decapoda Latreille 1803
Suborden Dendrobranchiata Bate 1888
Superfarnilia Penaeoidea Rafinesque 1815
Familia Penaeidae Rafinesque 1815
GØnero Penaeus Fabricius 1789
Especie califoniensis Holmes 1900
Dentro del gØnero Penaeus esta especie pertenece al grupo de camarones de tØlico
cerrado en contraposición a L vannamei que pertenece a los de tØlico abierto y la cual
domina en la camaronicultura en el Hemisferio Occidental
11
6 1 2 Características generales
El camarón cafØ P californiensis Fig 1 presenta un rostro con 8 a 11 dientes
dorsales surco y carina adrostrales largas que se extienden mÆs allÆ del nivel del diente
epigÆstrico con una carina gastro frontal bien defInida ocupando por lo menos las tres
cuartas partes posteriores de la distancia entre la espina hepÆtica y la órbita Su cuerpo se
divide en tres grandes regiones principales cefalotórax abdomen y telson Los apØndices
del cefalotórax son las antØnulas antenas mandíbulas maxilas maxilípedos y
pereiópodos En el abdomen se encuentran los pleópodos o apØndices natatorios y en el
telson los urópodos que forman el abanico caudal Hendrickx 1996
Fig 1 Anatomía externa de Penaeus californiensis
Presentan dimorfIsmo sexual ya que las hembras tienen tØlico cerrado el cual es
una depresión ventral formada por placas laterales que constituye un receptÆculo seminal
para la protección del espermatóforo mientras que los machos presentan un petasma
localizado en la parte interna del primer par de pleópodos el cual es usado como órgano
copulador García 1994
12
6 1 3 Distribución y hÆbitos
Es una especie de hÆbitos nocturnos que se entierra durante el día y se activa
durante el atardecer Se encuentra en la Plataforma Continental y el ambiente costero del
PaclllCO 0rien1al Tropic la Bahía de San Francisco California Oeste de Baja
California y Golfo de California hasta Callao Perœ Habita generalmente en fondos
arenosos fums o arcillosos Fenucci 1988 En HernÆndez GonzÆlez 1997 Hendrickx
1996 y en temperaturas epibentónicas entre los 13 y 190C con límite superior de 270C a
una profundidad entre los 2 y los 180m aunque su mayor abundancia es entre los 25 y 50
m de profundidad Son detritívoros alimentÆndose de la materia orgÆnica que se
encuentra en el fondo aunque tambiØn pueden ser omnívoros Hendrickx 1996
Su ciclo de vida es corto entre uno y dos aæos y se caracteriza por presentar una
fase oceÆnica desovando entre 5 y 10 millones de huevecillos los cuales una vez
eclosionados y al llegar a la fase de postlarva se dirigen a las costas para penetrar en las
ÆreasJagururres donde llevan a cabo una permanencia de aproximadamente doce
semanas a fin de desarrollarse hasta el estado pre juveni4 para posteriormente emigrar
hacia el mar y continuar el desarrollo de juvenil a adulto Hendrickx 1996 como se
muestra en la Figura 2
13
EsrE AlUCQSTEM˘ JJJJlIfL w
Fig 2 Ciclo de vida del camarón
6 2 Aspectos fisiológicos y ambientales relacionados con la acidolactosis
A diferencia de especies como L vannamei y P stylirostris que emigran hacia
aguas oceÆnicas en tallas de 15 a 25 gr las formas juveniles de P californiensis lo hacen
en edades mÆs tempranas tallas menores a 5 gr por lo que pasan la mayor parte de su
vida en la Plataforma Continental hasta alcanzar la forma adulta con tallas promedio de
18 a 20 cm equivalentes a 60 a 80 gr aunque se pueden encontrar hembras de hasta 120
gr Pero cuando una especie oceÆnica como P californiensis se mantiene bajo
condiciones de cultivo en un estanque costero se le somete a variaciones ambientales
mayores que cuando se desarrolla de manera natural ya que los parÆmetros ambientales
en ambientes oceÆnicos se mantienen mÆs estables que los de un estanque de cultivo los
14
cuales presentan una mayor variación de las concentraciones de oxígeno el pH y
compuestos nitrogenados que a su vez se ven incrementados por la intensificación de los
cultivos generando variaciones que se pueden presentar como hipoxia alcalosis e
hiperamonia De forma paralela los cultivos experimentales de esta especie han
mostrado un descenso en las tasas de crecimiento al incrementar las densidades de cultivo
y su manipulación diurna provocando estrØs el cual se manifiesta por un cambio en el
color del mœsculo abdominal contractura e inmovilidad del mismo Aunque en la
literatura no existen antecedentes sobre la importancia de la acidolactosis en la especie
mencionada ni tampoco de la relación de esta con la hipoxia hiperamonia yalcalosis
por los resultados obtenidos con otras especies se ha demostrado su interrelación e
importancia Racotta y HemÆndez Herrera 2000 López 2001 García 2001
6 2 1 Acidolactosis
Se define como el proceso de acumulación de Æcido lÆctico en mœsculo
hepatopÆncreas hemolinfa y otros tejidos reflejando de manera indirecta los niveles de
Æcido pirœvico existente en las cØlulas Este compuesto es un metabolito resultante de la
glucólisis anaeróbica procesado normalmente por el complejo de la piruvato
deshidrogenasa para transferir los grupos acetilo al ciclo del Æcido cítrico Cuando el
Æcido pirœvico que se genera en la primera fase no es transformado al mismo ritmo que es
producido entonces puede transformarse en Æcido lÆctico en presencia de NADH y en
alanina en presencia de NRt De esta manera la acidolactosis es un indicador de los
cambios metabólicos que operan en los organismos como producto de su actividad los
niveles de oxígeno y ciertas circunstancias de intoxicación provocadas por compuestos
15
que interfieren con su metabolismo Lehninger 1995 Eckert el al 1998 Las
variaciones en los niveles de Æcido lÆctico reflejan de manera indirecta
descompensaciones metabólicas que a su vez pueden alterar las funciones que
demandan energía TambiØn se ha sugerido que en los peneidos puede causar una
reducción en la tasa de crecimiento debido a una disminución en la eficiencia de la tasa
de conversión de alimento lo que en condiciones extremas puede provocar contracturas y
eventualmente la muerte Allan y Maguire 1992 Ocampo 1994
6 2 2 Acidolactosis y ejercicio
Si bien no hay antecedentes sobre los niveles de Æcido lÆctico en relación al
ejercicio en P californìensìs sí existe información para otras especies de crustÆceos Tal
es el caso del cangrejo Crangon crangon Line 1758 el cual incrementa sus niveles de
lactato en mœsculo y en hemolinfa en donde su oxidación es mÆs lenta despuØs del
ejercicio debido a que los procesos aeróbicos aparentemente no pueden consumir los
excesos de Æcido pirœvico para una rÆpida restitución de sus niveles y una recuperación
de la actividad muscular Así mismo a que el oxígeno que provee la hemolinfa es
limitado por lo que los mœsculos no tienen suficiente capacidad de producción de energía
aeróbica produciendo fatiga Onnen y Zebe 1983
El ejercicio constante tambiØn puede provocar acumulación de lactato en
hemolinfa ya que estimaciones realizadas en el cangrejo Carcinus maenas Linnaeus
1758 han permitido observar que Øste responde a Øste incremento aumentando su ritmo
cardiaco haciendo que se eleve el contenido total de oxígeno en la hemolinfa evitando
así una acidosis metabólica Hamilton y Houlihan 1992 Así mismo tanto
16
Macrobrachium rosenbergii de Man como Penaeus duorarum Burkenroad 1939
incrementan 6 y 5 veces respectivamente los niveles de Æcido lÆctico en su hemolinfa
despuØs de ser sometidos a manipulación dentro de los estanques de cultivo Spotts y
Lutz 1981 Resultados similares se obtuvieron con L vannamei quien tambiØn
incrementó sus niveles de lactato hemolinfÆtico significativamente despuØs de una
manipulación durante el muestreo generando estrØs Racotta y Palacios 1998 Por otra
parte si el ejercicio es prolongado puede llegarse al agotamiento requiriendo tiempos
diferentes segœn la especie encontrando unas con mÆs capacidad que otras debido a
adaptaciones fisiológicas inducidas por el medio donde habitan Henry et al 1994
Existe conocimiento que indica diferencias significativas en los niveles de lactato
entre el estado de reposo y el de ejercicio despuØs de haberse sometido a períodos de
actividad mediante nado y o caminata o tambiØn de escape en las especies
Macrobrachium rosenbergii Penaeus duorarum Spotts y Lutz 1981 Callinectes
sapidus Cardisoma guanhumi Gecarcinus lateralis Henry et al 1994 Homarus
gammarus pbillips et al 1977 Crangon y crangon Onnen y Zebe 1983 Penaeus
aztecus Flick y Lovell 1972 En Spotts y Lutz 1981 y Pachygrapsus crassipes Burke
1979 En Spotts y Lutz 1981
Hagerman y Szaniawska 1986 encontraron con distintas especies de camarones
que la mÆxima actividad se alcanza cuando usan su mœsculo abdominal durante el nado
de escape causando un incremento en la tasa respiratoria hasta del 211 Spotts y Lutz
1981 y Racotta y Palacios 1998 concluyen que durante el muestreo y la manipulación
de los animales se puede alcanzar el mÆximo nivel de estrØs por acidolactosis
17
6 2 3 Acidolactosis e hipoxia
AdemÆs del efecto que tiene el ejercicio sobre la acidolactosis tambiØn la
disminución de las concentraciones de oxígeno en el medio de cultivo bajo niveles que
interfieren con la fosforilación oxidativa puede verse reflejada en los organismos como
una acumulación de lactato De acuerdo con lo reportado por Van Aardt 1988 la
exposición a un ambiente anóxico del cangrejo Potamon warreni puede incrementar los
niveles de lactato a nivel hemolinfÆtico Así mismo Racotta y Palacios 1998
encontraron esta misma acumulación tanto en hemolinfa como en mœsculo de L
vannamei
A pesar de que no existen reportes sobre los niveles de Æcido lÆctico en P
californiensis en relación a la hipóxia se ha demostrando que existe una relación directa
entre la temperatura y el consumo de oxígeno en post larvas de esta especie Ocampo
1994 Rivera 1992 y que a una concentración de 1 8 mgL de oxígeno se alcanza el
punto crítico en el que el organismo cambia su condición de conformador para adoptar la
de regulador Segœn 10 reportado por Hendrickx 1996 y Ocampo 1998 esta especie no
tolera niveles de oxigenación bajos ya que sus límites se encuentran entre 1 3 y 5 mg
02L
Las bajas de oxígeno en el medio de cultivo ocurren diariamente durante el
período nocturno ya que los estanques de cultivo son susceptibles a cambios
ambientales Las causas de dicha variación se atribuyen al balance entre la producción de
oxígeno por la fotosíntesis la captación del mismo desde la atmósfera y el consumo
originado por los procesos respiratorios En esta oscilación las micraalgas tienen un
papel fundamental por su actividad fotosintØtica ya que ellas aportan aproximadamente
18
el 75 del oxígeno disuelto en un estanque a pesar de ello una vez que termina la
fotosíntesis inicia el período de descenso del 02 el cual depende de la respiración en el
estanque Martínez 1998 BANCOMEX 1999
Los consumidores de oxígeno en la columna de agua son los organismos en
cultivo el zooplancton el bentos el fitoplancton y la comunidad bacteriana De igual
forma ocurren una serie de reacciones químicas que demandan oxígeno derivadas de la
descomposición de la materia orgÆnica en los estanques El consumo de oxígeno no sólo
depende de la biomasa presente sino tambiØn de otros factores entre los que destacan la
temperatura el peso individual el grado de actividad y la tasa de consumo
BANCOMEX 1999
6 2 4 Acidolactosis ehiperamonia
Racotta y HemÆndez Herrera 2000 reportan que existe una relación entre las
concentraciones de amonio y la acidolactosis a nivel hemolinfÆtico hepatopancreÆtico y
muscular en L vannamei sin embargo no se ha determinado aœn la existencia de
interferencia entre la acidolactosis y la toxicidad por amonio en esta especie
Se considera que en casos de intoxicación este compuesto puede bloquear el ciclo
del Æcido cítrico siempre y cuando su exceso agote las reservas de alfa oxoglutarato
durante el proceso de formación de glutamato debido a la reversión de la actividad de la
glutamato deshidrogenasa lo cual bloquea el proceso del Æcido pirœvico Lehninger
1995 La dinÆmica de la acidolactosis ha sido determinada en varias especies sin
embargo aœn no se tiene este conocimiento para P californiensis a pesar de su
importancia
19
El amonio es el producto final del metabolismo de las proteínas en la mayor parte
de los invertebrados acuÆticos Schmidt Nielsen 1997 Así mismo en los sistemas de
cultivo Øste es liberado dentro del agua por amonificación de materia orgÆnica del
alimento no consumido y de organismos muertos presentes en los estanques
BANCOMEX 1999 Schmidt Nielsen 1997 Por sus características moleculares es
altamente soluble en el agua lo que le confiere gran poder de difusión Wilson 1989
logrando su excreción a travØs de las membranas branquiales de los organismos acuÆticos
por medio de difusión pasiva a favor de un gradiente de concentración entre la hemolinfa
y el medio externo Eckert el al 1998 lo cual puede propiciar una entrada de Øste
cuando las concentraciones en el medio externo son mayores a las del interno hasta
alcanzar el equilibrio entre ambos medios Colt y Armstrong 1981
El amonio en el agua estÆ disponible tanto en su forma ionizada NH como no
ionizada NH3 existiendo un equilibrio entre ambas en cualquier sistema acuÆtico el
cual puede ser afectado por la temperatura y el pH Bower y Bidwell 1978 Boyd 1990
que al incrementarse inclinan el equilibrio hacia la forma no ionizada la cual es tóxica
para la mayoría de los organismos acuÆticos Wheaton 1982 Se ha encontrado que las
membranas celulares son permeables al amoniaco NH3 sin embargo lo son muy poco al
ionizado NH l así mismo este œltimo puede ser tóxico a elevadas concentraciones aœn
en niveles de pH neutros debido a que provoca una sustitución en el transporte de iones
una obstrucción en la excreción de amoniaco y dafio en las membranas celulares
Por otra parte la toxicidad del NH3 se debe a que puede incrementar el pH
causando alteraciones en la estructura terciaria de las proteínas provocando cambios en
las reacciones enzimÆticas interfiriendo con algunos mecanismos del transporte de iones
20
afectando el flujo sanguíneo cerebral la transmisión sinÆptica Eckert el al 1998
Regnault 1987 Kaushik 2000 y el transporte de oxígeno Spotte 1979 En Chen y Lin
1995
El NlLtCl cloruro de amonio al estar en solución acuosa da lugar a NH cr Ir
y OH El NlLt en un medio alcalino tiende a desionizarse rÆpidamente y a formar NH3
el cual por ser tóxico no es conveniente en la acuicultura Es œtil entonces mantener las
condiciones de los estanques bajo cierto grado de acidez para que el amonio se encuentre
en su forma ionizada Dicha acidez puede originarse de la liberación del bióxido de
carbono como producto de la respiración de los organismos en cultivo ya que este
provoca un descenso en el pH al formar H2C03 Martínez 1998 BANCOMEX 1999
N Cl NRt 8C Cr ac
H20 It OH
N OH H20 NH3
7 Acidolactosis y alcalosis
Los eventos de alcalosis ocurren cuando el pH del medio de cultivo se eleva a
niveles superiores al pH neutro lo cual puede originarse principalmente por tres
procesos el encalamiento de los suelos de los estanques con óxido y o hidróxido de
calcio la adición de Ca OH 2 a la columna de agua durante el cultivo y el agotamiento
del bióxido de carbono producto de la actividad fotosintØtica diurna De estos eventos
los dos primeros ocurren en periodos posteriores al encalamiento y su duración puede ser
variable dependiendo de la cantidad suministrada y el horario de aplicación Mientras
que el tercero ocurre de manera regular durante el atardecer siendo un evento periódico
05A04l 21
diurno y de corta duració cuya intensidad depende del consumo de C02 de los
productores primarios Los eventos de alcalosis extrema ocurren cuando se combinan los
eventos de encalamiento con los de actividad foto sintØtica y se utilizan cantidades
importantes de Ca OH2 BANCOMEX 1999
El pH en aguas naturales fluctœa entre 4 y 12 aunque en el mar se registran
valores ligeramente alcalinos próximos a los 8 5 debido a la predominancia de
carbonatos En ambientes costeros la variación diurna presenta un ciclo en función de la
respiración nocturna la cual acidifica el medio mientras que la fotosíntesis diurna
provoca su alca1inizació debido a las siguientes reacciones
C02 H20 H2C03
H2C03 W HC03
HC03 C03 W
Dado que en los estanques de cultivo hay una mayor proliferación de productores
primarios que en el ambiente externo las fluctuaciones de pH originadas por los eventos
foto sintØtico s son normalmente mayores que en aguas naturales de baja productividad y
similares a las de los cuerpos costeros de productividad elevada
22
9 5
9
8 5
xQ
8
7 5
7
6 a m 12a m 6 p m 12p m
Horas
6 a m
Fig 3 Variación diaria del pH en aguas interiores Martínez 1998
Los eventos de alcalosis por un lado facilitan la formación de amonio tóxico
Schmitt y Santos 1999 y por otro pueden afectar el balance Æcido base del organismo y
con ello algunas funciones fisiológicas López 2001 y García 2001 determinaron que
los niveles de toxicidad del amonio en Postlarvas deL vannamei estÆn relacionados tanto
con las concentraciones de amonio como con incrementos en la temperatura y el pH del
medio de cultivo De aquí que un aspecto importante a considerar es la variación del pH
en los estanques y su relación con los niveles tóxicos de amoniaco NH3 los cuales
pueden variar a lo largo del día Robinette 1976 En Martínez 1998
A pesar de que la mayoría de los crustÆceos toleran cambios de pH dentro de 6 a
9 Martínez 1998 pueden regular su pH interno en rangos mucho mÆs estrechos que en
el medio externo por medio del intercambio de sustancias a travØs de las branquias
Allan y Maguire 1991 o por el aumento o disminución de la ventilación y la
eliminación de C02 Eckert el al 1998 Un evento de alcalosis ambiental puede afectar
23
el pH interno y con ello alterar algunas funciones que dependen de un balance Æcido
base muy estricto
El transporte de Û2 en los camarones peneidos como en el resto de los crustÆceos
se realiza por medio de la hemolinfa en donde la hemocianina juega un papel muy
importante Las hemocianinas de estos organismos tienen una afinidad por el oxígeno que
se modifica con los cambios de pH de acuerdo al efecto Bohr Bridges el al 1984 ya
que en condiciones de alcalosis dicha afinidad se incrementa facilitando la unión del O2
con la hemocianina pero dificultando su liberación en los tejidos celulares Por lo tanto la
presencia de Æcido lÆctico puede contrarrestar los efectos de una alcalosis interna
facilitando el transporte de oxígeno Eckert el al 1998
Aunque los eventos de alcalosis tienen una relación directa con la toxicidad del
amonio y pueden afectar la fisiología de los organismos no existe información referente
a la relación entre un evento de alcalosis y la acidolactosis en P californiensis
24
7 Materiales y MØtodos
El presente trabajo se realizó en las instalaciones del Centro de Investigaciones
Biológicas del Noroeste S C CIBNOR localizado a 17 kilómetros al norte de la cuidad
de La Paz Baja California Sur MØxico en la costa de la ensenada de La Paz Los
organismos experimentales fueron mantenidos y aclimatados en el patio de cultivos los
bioensayos se realizaron en el laboratorio de Nutrición Acuícola y los anÆlisis de las
muestras en el laboratorio de Bioquímica Fisiológica
7 1 Obtención de organismos y aclimatación
Se utilizaron 500 organismos de la especie Penaeus californiensis en estadio
juvenil obtenidos de los estanques supralitorales y de mareas del CIBNOR y aclimatados
en el Patio de Cultivos en un tanque circular con 800 L de agua marina filtrada al menos
durante 2 semanas con recambios de agua del 50 diarios y alimentación ad libitum con
una dieta a base de granulado comercial PIASA con 35 de proteína manteniendo
siempre el nivel de oxígeno cercano a la saturación con pH 8 0 83 salinidad de 38 o Y
temperatura ambiental
7 2 Diseæo Experimental
Se realizó un conjunto de experimentos que estuvieron orientados a evaluar los
niveles de lactato en hemolinfa y mœsculo en camarones de la especie P californiensis
inmediatamente despuØs de someterlos a un período de ejercicio y manipulación
Posteriormente fueron incubados a 300C bajo diferentes concentraciones de oxígeno
25
desde normoxia hasta niveles cercanos a la anoxia empleando diferentes escenarios de
pH Y amonio
Para el proceso de incubación post ejercicio se aplicaron 4 tratamientos que se
realizaron en distintos días para las diferentes combinaciones de pH 8 Y 9 Y amonio O y
7 mgIL y cada uno con un tanque con aireación permanente en normoxia y otro sin
aireación en el que se indujo la hipoxia por consumo de 02 Fig 4 En el caso de los
tratamientos con amonio se agregó una solución de cloruro de amonio a una
concentración de 1 mg mL hasta alcanzar una concentración de 7 mglL en los tanques
experimentales correspondientes
Se eligió el pH 8 por ser el pH normal en las Æreas de crianza natural de esta
especie mientras que el pH de 9 y la concentración de amonio de 7 mgIL fueron
utilizados de acuerdo a lo reportado por López 2001 y García 2001 quienes
determinaron que a partir de ese valor se incrementa la mortalidad de los organismos en
presencia de amonio a 300 centígrados
pH 8 9
Sin
NH4CI100 L
1
100L
2
5
Con
NH4CI
T mg L
4 3
100L 100 L4 jtOOL 1834
100L
5 2 5
6 3 6
Con aireación Sin aireación Con aireación Sin aireación
Fig 4 Sistema experimental
26
7 3 Comportamiento
Previo al experimento se realizaron observaciones en las cuales fueron estudiados
los tipos de movimiento del camarón con el propósito de seleccionar el mÆs adecuado
para inducir la fatiga de una forma uniforme en todos los organismos logrando así un
nivel de estrØs por ejercicio
7 4 Sistema de ejercitación
Con objeto de inducir la generación de acidolactosis por ejercicio antes de cada
experimento de incubación los animales se pusieron en movimiento mediante natación a
contracorriente Fig 5 dentro de la tina de flujo continuo durante aproximadamente 45
minutos tiempo en el que los organismos empiezan a abandonar el esfuerzo de nado a
contracorriente mostrando fatiga
Fig 5 Sistema de ejercicio
Terminando el período de ejercicio dentro de la tina de flujo se prepararon 13
jaulas en cada una de las cuales se introdujeron 9 camarones al azar los cuales fueron
capturados con redes y colocados uno por uno en las distintas jaulas con el propósito de
que todas tuvieran el mismo tiempo de captura Una de ellas fue muestreada directamente
27
de la tina de aclimatación para ser utilizada como testigo de los niveles de acidolactosis
alcanzados por el ejercicio y antes de ser incubados en los tratamientos
Las jaulas fueron preparadas previamente colocando una funda de malla negra en
su interior con el propósito de favorecer el reposo de los organismos ya que de acuerdo
con observaciones hechas durante el manejo de los animales estos mostraron menos
movimientos al encontrarse sostenidos de alguna superficie con sus pereiópodos Lo cual
favorece las condiciones de reposo que requiere la incubación de los organismos para
evaluar el descenso de los niveles de acidolactosis muscular Así mismo cada una de las
jaulas fue cubierta con otra malla de color blanco la cual se ajustó al contorno de las
mismas mediante un elÆstico evitando así la salida de los camarones durante su
˛Ilcubación
Una vez depositados los organismos en las 12 jaulas se formaron dos grupos de 6
cada uno mediante una selección sistemÆtica de ellas transfiriendo una para un tanque y
la siguiente para el otro y así sucesivamente hasta completar las 6 jaulas de cada uno de
los 2 tanques de exposición que contenían 120 L de agua marina filtrada a 300C y 380
de salinidad Previamente ambos tanques se mantuvieron por un período superior a las 4
horas en aireación continua hasta alcanzar niveles de oxígeno entre 5 5 y 6 mg 02L que
se encuentran cerca del nivel de saturación el cual es de 6 05 mgL para condiciones de
300C y 400 de salinidad Boyd 1990 El tanque de normoxia se mantuvo destapado y
con el sistema de aireación activo por lo que se mantuvo en el nivel de saturación
mientras que al tanque seleccionado para trabajar en condiciones hipóxicas se le retiró el
sistema de aireación en el momento de la introducción de las 6 jaulas de exposición Para
mantener el oxígeno uniformemente distribuido se utilizó una bomba sumergible
28
Adicionalmente y con objeto de evitar la entrada de oxígeno atmosfØrico al sistema
experimental se colocó en la superficie del agua una lÆmina de plÆstico adherida por
tensión superficial manteniØndola estabilizada con un aro de plÆstico evitando así el
intercambio gaseoso con la atmósfera durante el periodo experimental en el cual la
concentración de oxígeno se mantuvo por debajo del nivel de saturación debido al
consumo de los animales
Los parÆmetros ambientales como pR temperatura y concentración de oxígeno
disuelto fueron monitoreados cada 15 minutos con un pHmetro y un oxímetro
previamente calibrados
Cada vez que los niveles de oxígeno en el tanque hipóxico alcanzaron valores de
5 4 2 1 05 Y 0 5 mgL se retiró una jaula de este tratamiento y simultÆneamente otra
del tanque con aireación permanente ambas fueron colocadas en un recipiente de
recepción durante su muestreo De cada una de las jaulas contenidas en ambos tanques
fueron muestreados 6 de los 9 camarones colocados dejando 3 de ellos los cuales fueron
regresado s a la tina de aclimatación Solamente en el caso de la œltima jaula 0 5 mg
02L fue sacada del tanque cuando presentó tres organismos muertos por lo que fueron
muestreados los 6 animales vivos y los 3 muertos
Cada una de las jaulas contenía 9 camarones para aumentar el consumo de
oxígeno por respiración y lograr un nivel de hipoxia menor a 0 5 mg 02L
aproximadamente en 6 horas
7 5 Toma Almacenamiento y AnÆlisis de Muestras
A cada camarón se le tomó una muestra de hemolinfa del seno ventral ubicado
entre el œltimo par de pereiópodos y el primero de pleópodos Para tal efecto se introdujo
29
superficialmente la agUja de una jeringa de 1 rnL previamente enjuagada con
anticoagulante oxalato de potasio al 5 Mendoza 1992 En HemÆndez 1998
obteniendo un volumen de muestra mayor a 200 JlL Las muestras de hemolinfa fueron
colocadas en tubos Eppendorf de 1 5 mI dentro de una hielera para transportadas al
laboratorio en donde se centrifugaron a 3 600 rpm durante 10 min a 50C separando el
sobrenadante plasma el cual se almacenó en congelación a 4OC hasta realizar las
determinaciones en un tiempo no mayor a 1 mes
Posterionnente a la toma de hemolinfa los organismos fueron pesados y cortados
en la parte posterior al cefalotórax para inmovilizar los mœsculos durante su congelación
en nitrógeno líquido previamente embolsados y etiquetados para ser conservados en
ultracongelación a 80oC para realizar los anÆlisis de tejido Con tal propósito se pesaron
015 g de tejido de cada muestra colocando cada una de ellas en tubos Eppendorfde 2 5
rnL se taparon con parafilm haciendo algunas perforaciones para su liofilización
Posteriormente se molieron y rehidrataron con 1 5 rnL de una solución de TCA al 10
Æcido tricloroacØtico para ser homogeneizadas DespuØs se centrifugaron conservando
el sobrenadante del cual se colocaron 20JlL en celdas de microplaca procedimiento que
tambiØn se siguió para las muestras de hemolinfa Posteriormente se agregaron 200llL de
solución reactiva kit comercial Randox a cada muestra dejando incubar durante 10
minutos para realizar la lectura con un filtro de 540 nm utilizando un lector de
microplaca determinando así la concentración de lactato presente en cada muestra ya
que al agregar el reactivo el Æcido lÆctico presente es convertido a piruvato y peróxido
de hidrógeno por medio de una lactato oxidasa El peróxido de hidrógeno es oxidado por
una peroxidasa que cataliza la condensación oxidativa de precursores cromógenos
30
formando un compuesto colorido por lo que el incremento en la absorbancia a 540 nm es
directamente proporcional a la concentración de lactato de la muestra
Como estÆndar se utilizaron diferentes concentraciones de lactato O 1 25 2 5 5
10 20 Y 40 l Y como blanco fueron usados SIC solución isotónica de crustÆceos para
muestras de hemolinfa y TCA al 10 para las de mœsculo Cuando los valores de las
muestras sobrepasaron el mÆximo valores del estÆndar se realizaron diluciones con SIC o
TeA segœn el caso volviØndose a leer hasta que los valores estuvieron dentro de los
rangos del estÆndar
Nota Durante el procesamiento de las muestras de mœsculo del experimento a pH
8 con amonio se realizó una prueba analizando tambiØn los hepatopÆncreas para lo que
se siguió la mima metodología que para el tejido muscular obteniØndose los resultados
que se muestran en el anexo en la pÆgina 88
7 6 CÆlculo de los Consumos de Oxígeno
La tasa de consumo de oxígeno dentro del tanque fue calculada en función de la
biomasa y de la concentración de oxígeno presente en cada muestreo para ello se
utilizaron los pesos de los organismos muestreados Esta determinación se realizó solo en
los tanques sin aireación ya que los que permanecieron con aireación se mantuvieron
siempre con niveles constantes de oxígeno entre los 5 y los 6 mg 021 por lo que no es
posible realizar una medición del consumo
7 7 Procesamiento de datos
Para calcular las concentraciones de lactato presentes en la muestra se utilizó una
curva patrón con concentraciones de lactato conocidas Fig j en la cual se realizó un
31
anÆlisis de regresión y se tomó la pendiente para aplicar la siguiente fórmula en las
lecturas de las muestras obteniendo como unidades mg dL y mg g en la hemolinfa yel
tejido respectivamente
Conc abs di mg dL ó mg gm w
dondeabs Lectura de la absorbancia de la muestra menos la lectura del blanco
dil Dilución de la muestra
m Pendiente de la regresión de la curva tipow Peso hœmedo de la muestra a liofilizar en caso de tejido debe ser expresado en mgg
1 2
0 8e
º 0 6O11I
04
0 2
o
O 5 10 15 20 25
Concentración mg dl o mg g
Fig 6 Curva patrón
Los resultados de los anÆlisis bioquímicos fueron capturados en hoja de cÆlculo
Microsoft Excel en donde las mediciones de los parÆmetros ambientales dentro de los
tanques como oxígeno y pH así como de los consumos de oxígeno fueron graficados y
comparados Se realizaron los anÆlisis estadísticos pertinentes utilizando el programa
estadístico Statgraphics en el que se hicieron anÆlisis de varianza de una vía y grÆficas
comparativas para las concentraciones de lactato entre tratamientos con y sin amonio y
con pH 8 Y 9 así como entre los tanques con y sin aireación
Se realizó la prueba de rangos mœltiples para observar si existían diferencias
significativas entre las jaulas de un mismo experimento y entre experimentos
32
8 Resultados
8 1 Comportamiento durante el experimento
Durante el período de ejercicio se observó que algunos camarones trataban de ir
haciaJaparte del centro de la tina en donde la corriente era menor tratando de fijarse en
el fondo del estanque con los pereiópodos sobre todo cuando empezaban a fatigarse
pero fueron regresados a la corriente colocando un cilindro en el centro de la tina durante
el periodo de ejercicio para generar un canal circular de flujo
Durante la exposición a los tratamientos los camarones se mantuvieron en reposo
y no se presentaron disturbios dentro de los tanques ni en el momento de realizar las
mediciones con el pHmetro y el oxímetro Se observaron caminando tranquilamente
dentro de sus jaulas sobre todo en las primeras horas
Al momento del muestreo de hemolinfa los organismos reaccionaron mediante
contracciones musculares rÆpidas realizando nado de escape
En las jaulas que fueron muestreadas cuando los niveles de oxígeno eran menores
al rngIL pudieron observarse algunos camarones con una coloración blanquecina opaca
en la porción dorsal del mœsculo abdominal
En los tanques sin aireación se observaron organismos muertos al llegar a niveles
de 05 mgIL Jos cuajes fueron muestreados e incluidos en el grupo de organismos
muertos
Durante el tratamiento a pH 8 con amonio exp 4 algunos animales salieron de la
jaula debido a la manipulación durante el acomodo por lo que las mediciones de Iactato
fueron hechas sólo en los dos organismos que permanecieron dentro
33
8 2 Consumo de oxígeno
La concentración de oxígeno dentro de los tanques Fig 7 tuvo un
comportamiento muy semejante en los cuatro experimentos ya que en los tanques sin
aireación se mantuvo un descenso constante en la concentración de oxígeno durante todo
el tiempo de exposición disminuyendo rÆpidamente en las primeras horas y lentamente
en las œltimas hasta alcanzar la asíntota en el momento en el que quedaban pocos
orgamsmos y comenzaron a monr
J5Q
5 4o
i 3Q
2O
7
6 Sep 1 Hpo
Sep 2 Hpo
Sep 3 Hpoi Sep 4Hpo
Sep 1 fhrm
Sep 2fhrm
Sep 3fhrm
Sep 4fhrm1
O
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25
Muestreo
Fig 7 Niveles de oxígeno disuelto dentro de los tanques de exposición durantelos experimentos
En cuanto a los consumos de oxígeno se observó que en todos los tratamientos
sin aireación hubo una disminución en el consumo cuando el oxígeno iba cayendo dentro
del tanque La mayor variación se dio a una concentración de 3 mg OzL punto en el cual
el consumo disminuyó a la mitad del inicial
34
Así mismo se observó una diferencia en el consumo de oxígeno entre los
tratamientos con y sin amonio encontrando mayor estabilidad cuando este compuesto no
se aplicó Fig 8 Y 9
Tales resultados indican que en general los valores de oxígeno menores a 3 mg L
provocan una alteración e irregularidad en la respuesta de los animales ante la hipoxia
07
0 6 JI
í
II
EO3o
e
02
f
iI
IiI
I iì 1
f
f IX IJ J
0 505
a
e04
0 1
X
i 04pH 8 con
pH 9 cono
e03lO
02
o
O 2 3
Oxígeno mgIL
4 5
Fig 8 Consumo de oxígeno en los
tanques de los tratamientos con amonio
07
0 6
o
0 1
o
o 2 3
Oxígeno mgJL
4
Fig 9 Consumo de oxígeno en los
tanques de los tratamientos sin amonio
8 3 Acidolactosis muscular
8 3 1 pH 8 sin amonio
Los mayores niveles de lactato muscular se obtuvieron en las jaulas con los
animales reciØn ejercitados los cuales se tomaron directamente de la tina de aclimatación
Fig 10
En el tanque en condiciones de hipoxia se observan diferencias significativas solo
entre la jaula 6 y los niveles de lactato post mortem en donde se encontraron los valores
mÆs altos No se encontraron diferencias significativas entre los niveles post mortem y
pH8sin
pH9sin
5
35
los de post ejercicio En condiciones de normoxia se observa una clara tendencia a la
disminución en las concentraciones de lactato una vez iniciado el período de exposición
alcanzando el mínimo valor en la jaula 6 despuØs de 6 horas de reposo mostrando
diferencias significativas entre las jaulas 5 y 6 con los organismos muertos y la jaula 2 y
o mientras que la 1 3 Y 4 fueron intermedias entre estos dos grupos
14
1 2
1
0 8
06
0 4
0 2
O
Nonnoxia
Hipoxia
O 1 2 3 4
Jaula
5 6 M
Fig 10 Lactato en mœsculo a pH 8 sin amonio
HipoxiaPrueba de rangos mœltiples por Jaula
Sin datos aberrantes
MØtodo 95 0 Porciento LDE P 01894
Jaula Media Grupos HomogØneos6 0 662917 X
2 0 70245 XX
I 0 744533 XX
3 0 76366 XXX
4 0 76117 XXX
5 0 774617 XXX
M 0 870467 XX
O 0 96466 X
Normoxia
Prueba de rangos mœltiples por Jaula
Sin datos aberrantesMØtodo 95 0 Porciento LDE
Jaula Media Grupos HomogØneos5 0 62882 X
6 0 665499 X
4 0 710083 XX
3 0 776267 XXI 0 85895 XX
M 0 954008 X
O 0 96466 X
2 0 99094 X
36
8 3 2 pO 8 con amonio
A diferencia del tratamiento anterior al utilizar amonio los niveles obtenidos son
muy variables Fig 11 Y las varianzas entre jaulas muy grandes Anexo Cuadro 4 y 5
por lo que no presentan diferencias estadísticas significativas entre los niveles de lactato
de todas las jaulas en normoxia y enhipoxia
1 4
12
o 1o
S 0 8
Sł 0 6u
0 4
02
O
O
Normoxia
Hipoxia
1 2 63 4 5
Jaula
Fig 11 Lactato en mœsculo apH 8 con amonio
HipoxiaPrueba de rangos mœltiples por Jaula
MØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 156
Jaula Media Grupos HomogØneos5 0458722 X
2 0582379 X
O 0 631561 X
1 0 776058 X
4 0 781549 X
6 0 884361 X
3 0 954116 X
Normoxia
Prueba de rangos mœltiples por Jaula
Con datos completos P 0 5482
MØtodo 95 0 Porciento LDE
Jaula Media Grupos HomogØneos5 0 518837 X
6 0 633318 X
2 0 8755 X
3 0 972915 X
1 1 05045 X
4 1 05455 X
37
8 3 3 pH 9 sin amonio
En el tanque de hipoxia se observó una disminución significativa de los niveles de
åcido lÆctico de la jaula 1 a la 4 Fig 12 para volver a incrementarse en la 5 y 6 aunque
estas diferencias no fueron significativas Los valores presentados en los organismos
muertos fueron menores a los observados en la tina de aclimatación aunque no
significativamente diferentes
En los tanques con normoxia hubo mucha variación en la respuesta sin tendencia
aparente aunque los anÆlisis estadísticos indican que existen diferencias significativas
entre la jaula 3 con la 2 y 5 mientras que las jaulas 1 4 Y 6 presentaron valores
intermedios
1 4
1 2CC 1æ
0 8o
1 0 6o1
04J
0 2
O
O 1 2 3 4 5 6 MJaula
Normoxia
Hipoxia
Fig 12 Lactato en mœsculo a pH 9 sin amonioHipoxia Normoxia
Prueba de rangos mœltiples por Jaula Prueba de rangos mœltiples por Jaula
Sin datos aberrantes MØtodo 95 0 Porciento LDE P 01890
MØtodo 95 0 Porciento LDE P 04646 Jaula Media Grupos HomogØneosJaula Media Grupos HomogØneos 3 0 604521 X4 0 665663 X 1 0 681391 XX6 0 681069 XX 4 0 705914 XXM 0 718091 XX 6 0 771802 XX3 0 725458 XX 2 0 831456 X2 0 78231 XX 5 0 832188 X1 0 836633 XX
O 0 869448 X
5 0 881383 X
38
8 3 4 pB 9 con amonio
En ambiente con amonio durante el período de incubación los datos se
mantienen altos pero con poca variación tanto en normoxia como en hipoxia
presentando diferencias significativas solo con la jaula tomada directamente del tanque
de aclimatación la cual presentó el valor mÆs alto Fig 13 Con respecto a las jaulas 1 a
la 4 hay una disminución bajo condiciones de hipoxia sin embargo no es
estadísticamente significativa
14
1 2
1at
S 0 8o
oS 0 6oCIJ 04
0 2
O
11I Normoxia
11I Hipoxia
O 1 2 3 4Jaula
5 6 M
Fig 13 Lactato en mœsculo a pH 9 con amonio
HipoxiaPrueba de rangos mœltiples por Jaula
Con datos completosMØtodo 95 0 Porciento LDE
Jaula Media Grupos HomogØneos4 0 841049 X
6 0 860071 X
5 0 904017 X
3 0 947898 X
M 0 954008 X
2 100214 X
1 1 04353 X
O 138127 X
Normoxia
Prueba de rangos mœltiples por Jaula
MØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 9262
Jaula Media Grupos HomogØneos4 0 902824 X
6 0 912238 X
3 0 921986 X
2 0 931096 X
5 0 966169 X
1 101492 X
39
8 3 5 Comparación de todos los tratamientos
En general en los tratamientos sin aireación se observa una disminución de las
concentraciones de lactato con niveles de oxígeno mayores de 1 mglL Fig 14 pero
cuando se encontró por debajo de este punto los niveles se incrementaron excepto enel
tratamiento a pH 8 con amonio en donde no se aprecia ninguna tendencia En cambio en
condiciones de normoxia Fig 15 esta disminución sólo se observa a pH 8 sin amonio
manteniØndose constante a lo largo del experimento Sin embargo es importante
mencionar que tanto en normoxia como en hipoxia al usar amonio se encontraron los
valores de lactato mÆs altos
14
12
f f
T
14
12
1a
11i8 sn a
eP 8
IIi 8 con6
O 1i9 sn
4OIi 9 con 1
02
O
1
CJ
E 0 8
06
04
02
O
5 4 2 1 05 5 MConcentración de oxígeno mgil
Fig 14 Lactato en mœsculo en todoslos tratamientos en hipoxia
40
1
f f
l i I
l iOl
o 9 sr
O 9 oo
o 2 3 4
Jaula
5 6
Fig 15 Lactato en mœsculo entodoslos tratamientos en normoxia
8 3 6 Lactato muscular en la jaula 4 1 mg 02L
El mÆximo valor es alcanzado apH 9 con amonio Fig 16 aunque no hay mucha
diferencia entre con los demÆs valores por lo que no es significativa
o a
08
07
0 6III
SOS04
031
0 2
0 1
o
pH 8 sin pH 8 con pH 9 sin
Tratamiento
pH 9 con
Fig 16 Lactato muscular en la jaula 5
1 mg 02L
Prueba de rangos mœltiplesMØtodo 95 0 Porciento LDE
Tratamiento Media Grupos HomogØneospH 9 sin 0 665663 X
pH 8 sin 0 768117 X
pH 8 con 0 781549 X
pH9 con 0 841049 X
8 3 7 Lactato muscular en la jaula 5 0 5 mg 02L
Existen diferencias estadísticas significativas entre el tratamiento con pH 8 con
amoIÙO y los tratamientos con pH 9 Fig 17 mientras que el de pH 8 sin amonio se
mantiene intermedio entre los dos grupos
t
0 9
0 8
07
06
io s
04
03
02
0 1
o
pH 8 sin pH 8 con pH 9 sin
Tratamiento
pH 9 con
Fig 17 Lactato muscular en lajaula 5
05 mg 02L
Prueba de rangos mœltiplesMØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 0408Tratamiento Media Grupos HomogØneospH8 con 0458722 X
pH8 sin 0 774604 XX
pH 9 sin 0 881383 X
pH9 con 0 904017 X
41
83 8 Lactato muscular en la jaula 6 0 5 mg 02L
Se observó el mÆximo valor de lactato muscular en el tratamiento con pH 9 con
amonio Fig 18 apesar de que no existen diferencias estadísticas significativas
1
09
08
íiì 07
06
i 05
10 4
0 3
02
0 1
o
pH 8sin pH 9sin
Tratamierto
pH 9con
Fig 18 Lactato muscular en la jaula 605 mg 02L
Prueba de rangos mœltiplesMØtodo 95 0 Porciento LDE
Tratamiento Media Grupos Homo Øneos
1 0 662917 X
2 0 790599 X
3 0 860071 X
8 3 9 Lactato muscular en los organismos muertos
El mÆximo valor se alcanza a pH 9 con amonio Fig 19 sin embargo no
mostraron diferencias estadísticas significativas
1 2
0811
E06
j 04J
02
o
pH 8 sin pH 9 sin
Tratamiento
pH 9con
Fig 19 Lactato en mœsculo en los
organismos muertos
42
Prueba de rangos mœltiples por Jaula
MØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 2865
Jaula Media Grupos HomogØneos2 0 78091 X
1 0 870463 X
3 0 954008 X
8 4 Acidolactosis HemolinfÆtica
84 1 pH 8 sin amonio
Los niveles iniciales de lactato hemolinfÆtico se mantienen por debajo de los 20
mgdL tanto en condiciones de hipoxia como de nonnoxia los cuales no muestran
diferencias estadísticas significativas pero a partir de la jaula 4 en condiciones de hipoxia
1 mg 02L se presenta una clara tendencia ascendente Fig 20 con diferencias
significativas entre las jaulas O a la 3 con las 5 y 6 para alcanzar su mÆximo valor en los
organismos en post mortem mostrando que ellactato hemolinfÆtico se incrementa con la
disminución de las concentraciones de oxígeno por debajo de 1 mg 02L
En cambio en normoxia los valores de lactato se mantienen en niveles inferiores
a 19 mgldL durante todo el período de exposición sin existir diferencias estadísticas
significativas
800
700
600
J500
400
300
200
100
o
o 2 3 4Jaula
5 6 M
Fig 20 Lactato en hemolinfa apH 8 sin amonio
43
HiponaPrueba de rangos mœltiples por Jaula
MØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 6327
Jaula Media Grupos HomogØneos1 344122 X
4 4 645 X
3 536677 X
2 540028 X
6 751917 X
5 18 9409 X
NormonaPrueba de rangos mœltiples por Jaula
MØtodo 95 0 Porciento LDE P O OOOOJaula MedIa Grupos HomogØneos2 6 08906 X
1 12 2021 X
3 261835 X
4 38 8038 X
6 236 059 X
5 25443 X
M 437 741 X
44
8 4 2 pB 8 con amonio
En condiciones de hipoxia se registraron valores iniciales de lactato en hemolinfa
inferiores a 25 mg dL presentando un incremento en la jaula 5 y 6 Fig 21 Y alcanzando
valores de 66847 mg dL por lo que las diferencias estadísticas son significativas En
cambio en el tratamiento con normoxia los valores se mantuvieron alrededor de 5 mg dL
Cuadro 19 sin mostrar diferencias significativas
800
700
600
J500
400
300
200
100
o
o 1
I Nonnoxia
I Hipoxia
2 J a 4 5 6
Fig 21 Lactato en hemolintà a pH 8 con amonio
HipoxiaPrueba de rangos mœltiples por Jaula
MØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 0958
Jaula Media Grupos Homo Øneos
O 4 18887 X
3 6 94281 X
4 143448 X
1 23˘541 X
2 64 1322 X
5 266 271 XX6 66847 X
Normoxia
Prueba de rangos mœltiples por Jaula
MØtodo 95 0 Porciento LDE P 03856
Jaula Media Grupos Homo Øneos
5 2 90737 X
1 3 733 X
6 5 00898 X
2 5 26285 X
4 543063 X
3 5 84786 X
45
8 4 3 pH 9 sin amonio
En condiciones de hipoxia los niveles de lactato hemolinfÆtico iniciales son
inferiores a 40 rngdL sin que existan diferencias significativas entre las jaulas 1 a la 4
sin embargo hay un incremento en las jaulas 5 y 6 tal situación es significativamente
diferente alcanzando el mÆximo valor de este compuesto en los organismos una vez
muertos 437 74 rngdL por lo que se puede decir que hay una clara tendencia
ascendente a partir de la jaula 4 es decir una vez que el oxígeno alcanzó una
concentración menor a lrng OzL Fig 22 En cambio bajo normoxia las jaulas O a la 5
presentaron valores por debajo de 13 rngIdL Y sin diferencias significativas hasta la jaula
6 en donde hay un incremento significativo
800
700
600
1500
200
100
o
o 2 3 4 5 6 M
Jaula
Fig 22 Lactato en hemolinfa a pH 9 sin amonio
HipoxiaPrueba de rangos mœltipJes por JaujaMØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 0000
Jaula Media Grupos HomogØneos2 6 08906 X
l 12 2021 X
3 26 1835 X
4 38 8038 X
6 236 059 X
5 25443 X
M 437 741 X
Normoxia
Prueba de rangos mœltiples por Jaula
MØtodo 95 0Porciento LDE P 0 0009Jaula Media Grupos HomogØneos2 410732 X
4 9 0004 X
3 9 51449 X
5 112858 X
1 12 9186 X
6 914158 X
46
8 44 pH 9 con amonio
Durante los primeros muestreos se registraron valores inferiores a 16 mgdL de
lactato hemolinfÆtico tanto en hipoxia como en normoxia Fig 23 sin embargo en el
primer caso se observa una elevación de los niveles de este en las jaulas 5 6 Y
organismos muertos con un nivel mÆximo de 789 44 rngIdL presentando diferencias
significativas con el grupo de las jaulas 1 2 3 Y 4 a pesar de que el nivel de la 4 es
mucho mas elevado en comparación con las jaulas 1 2 Y 3 Mientras que en el caso del
tratamiento en normoxia los niveles se mantuvieron por debajo de 11 mgldL mostrando
solo diferencias significativas entre la jaula 3 y la 1 5 Y 6 Y no con las 2 Y 4 en donde
los valores fueron intermedios
800
700
600
3500
400
200
100
o
o
li Normoxia
li Hipoxia
2 3 4
Jada
5 6 M
Fig 23 Lactato en hemolinfa a pH 9 con amomoHipoxiaPrueba de rangos mœltiples por Jaula
Con datos completos P 0 0000
MØtodo 95 0 Porciento LDE
Jaula Media Grupos HomogØneosO 382288 X
1 8 66926 X
3 12 0566 X
2 15386 X
4 144569 X5 626 801 X
6 645 26 X
M 789445 X
Normoxia
Prueba de rangos mœltiples por Jaula
MØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 0732
Jaula Media Grupos HomogØneosO 3 82288 X
3 4 26457 X
2 7 67014 XX
4 816361 XX
5 9 99433 X
6 10168 X
1 10 8838 X
47
8 4 5 AnÆlisis comparativo de hemolinfa entre tratamientos
El patrón general observado en los tratamientos sin aireación Fig 24 fue una
acumulación gradual de lactato la cual se disparó cuando el oxígeno alcanzó niveles
menores a 1 mg 02L independientemente de la concentración de amonio y pH desde
valores de lactato menores a los 20 rngIdL hasta mayores de los 600 mgdL lo cual
significa un incremento de mÆs de 30 veces respecto a los valores iniciales pero los
niveles mÆximos fueron alcanzados durante el estado post mortem 724 mgdL a pH 9
con amonio mientras que bajo condiciones de normoxia se observa claramente que en los
tratamientos con pH 9 los niveles son mas altos que los de pH 8 Fig 25
lX 16
700 14
Em 12
iilpH8 sinSOO
ipH8 con10
aa
XE
oopH9 sin 8
Sm OpH 9 con Õ 6o
2004
1002
OO
5 4 2 1 05 05 M O 2 3 4 5Concentración de oxígeno mgIL Jaula
Fig 24 Lactato en hemolinfa en
tratamientos sin aireaciónFig 25 Lactato en hemolinfa en
tratamientos con aireación
48
8 4 6 Lactato hemolinfÆtico en las jaulas 1 2 Y 3
Al comparar los niveles de lactato en los diferentes tratamientos se encontró que
los mÆximos valores corresponden a pH 9 con un valor de 8 84 mgJg Fig 26 sin
embargo en el anÆlisis estadístico realizado no se obtuvieron diferencias estadísticas
significativas entre los cuatro tratamientos aplicados Cuadro 23
10
9
8
ì 7U
Q 6
S 5
4
3J
2
1
O
pH 8 sin pH 9sin pH 9 con
Tratamiento
pH 8con
Prueba de rangos mœltiplesMØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 2155
Tratamiento Media Grupos HomogØneospH8 sin 4 73609 X
pH8 con 4 9479 X
pH9 con 7 60617 X
pH9 sin 8 8468 X
Fig 26 Lactato hemolinfÆtico en las
jaulas 1 2 Y 3 5 4 Y 2 mg 02L a pH 8
Y 9 con y sin amonio
8 4 7 Lactato hemolinfÆtico en la jaula 4 1 mg OzL
Se observan diferencias significativas entre los distintos tratamientos Cuadro 24
mostrando el valor mÆximo a pH 9 con amonio 144 56 rngdL Fig 27 mientras que el
menor se obtuvo a pH 8 con amonio 1434 mgdL
49
11Kl
140
1201
1oo
g 80S
I 00
1 40
20
O
pH8 sin pH 9 sin pH 9 con pH 8 con
Tratamiento
Fig 27 Lactato hemolinfÆtico en la
jaula 4 1 mg 02L entre tratamientos
Prueba de rangos mœltiplesMØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 0007
Tratamiento Media Grupos HomogØneospH8 con 143448 X
pH9 sin 38 8038 XX
pH8 sin 79 0555 X
pH9 con 144 569 X
8 4 8 Ladato hemolinfÆtico en la jaula 5 0 5 mg O
Se observó el mínimo valor de lactato en el tratamiento con pH 8 con amonio
mostrando diferencias significativas con los otros tratamientos sobre todo con el pH 9
con amonio quien presentó el mÆximo niveL mientras que los tratamientos con pH 8 Y 9
sin amonio tuvieron valores intermedios Fig 28
Xl
500
J
1S 300
ili2001
100
o
pH 8 sin pH 8 con pH 9 sin
Tra1amienlo
pH 9 con
Fig 28 Lactato hemolinfÆtico en la
jaula 5 0 5 mg 02L entre tratamientos
50
Prueba de rangos mœltiplesMØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 0007
Tratamiento Media Grupos HomogØneospH8 con 35 0342 X
pH8 sin 182166 X
pH9 sin 25443 X
pH9 con 477571 X
8 4 9 Lactato hemolinfÆtico en la jaula 6 0 5 mg OzIL
El tratamiento a pH 9 con amonio muestra el mÆximo valor de lactato
hemolinfÆtico Fig 29 presentando diferencias estadísticas significativas con los
tratamientos a pH 8 Y 9 sin amonio
700
600
1500r400S 30011
1200J
100
o
pH S sin pH9 conpH 9 sin
Trataniento
Fig 29 Lactato hemolinfÆtico
en la jaula 6 0 5 mg 02L en los
distintos tratamientos
Prueba de rangos mœltiplesMØtodo 95 0 Porciento LDE P 0 0051
Tratamiento Media Grupos HomogØneospH9 sin 236 059 X
pH8 sin 346 056 X
pH9 con 645 26 X
51
8 4 10 Lactato bemolinfÆtico en los organismos muertos
El mÆximo valor se alcanza en el tratamiento a pH 9 con amonio Fig 30
mostrando diferencias estadísticas significativas con los tratamientos apH 8 Y 9 sin
amonio
800
700
600J
5001lI
5 400S
200
100
o
pH 8 sin pH 9 sin
Tratamiento
pH 9 con
Fig 30 Lactato en hemolinfa de los
organismos muertos
52
Prueba de rangos mœltiplesMØtodo 95 0 Porciento LDE P0 0054
Tratamiento Media Grupos Homo Øneos
2 452 964 X
1 514 212 X
3 726 706 X
9 Discusión
El tØrmino acidolactosis ha sido utilizado en este trabajo para identificar las
variaciones extremas en los niveles de Æcido lÆctico en mœsculo hemolinfa y
hepatopÆncreas como un indicador de los procesos metabólicos inducidos por ejercicio
hipóxia e intoxicación por NH3 en un ambiente de hiperamonio y alcalosis En este
trabajo se discute la dinÆmica de este metabolito en cada uno de estos tres puntos de
medición así como la interacción de las condiciones mencionadas con los niveles
observados
Un factor de estrØs es cualquier condición ambiental que provoque disturbio en la
funcionalidad normal del animaL reduciendo la salud del mismo y por lo tanto su
posibilidad de sobrevivir Koehn y Bayne 1989 por lo que la hipoxia la alcalosis y la
hiperamonia se discuten como factores de estrØs para el camarón cafØ P californiensis
9 1 Cambios en la tasa respiratoria durante la hipoxia
El costo metabólico que implica la alimentación absorción mantenimiento
locomoción crecimiento y reproducción de un organismo ocupa un gran porcentaje de su
energía disponible pero si a estos requerimientos le agregamos el gasto que implica
contrarrestar algœn factor de estrØs se produce un desequilibrio energØtico que tarde o
temprano se refleja en la salud o la supervivencia del mismo Koehn y Bayne 1989 Tal
situación provocó un incremento en la tasa de consumo de oxígeno al inicio de los
experimentos creando una deuda de oxígeno que puede ser estimada en función del
lactato producido utilizando las tasas medias de producción de lactato y las de deuda de
oxígeno Bridges y Brand 1980 por lo que las tasas respiratorias mas altas fueron
53
obtenidas inmediatamente despuØs del ejercicio y la captura ya que la tasa respiratoria de
un organismo se incrementa rÆpidamente debido a las altas cantidades de energía
requeridas para realizar la violenta actividad del nado de escape Hagerman y
Szaniawska 1986 Esta deuda de oxígeno tiende a ser recuperada en el momento en el
que Øste se encuentre disponible aunque el tiempo de saldo depende de la especie ya que
el proceso de recuperación muestra una amplia gama de respuestas originadas por los
hÆbitos adaptaciones morfológicas y fisiológicas a sus hÆbitats y ecología en general
siendo algunas especies mÆs rÆpidas que otras Koehn y Bayne 1989 En este sentido se
han visto diferencias en los tiempos de recuperación entre varios tipos de crustÆceos
decÆpodos tal es el caso del cangrejo que por lo general se mantiene oculto Corystes
cassivelaunus a quien le toma de 4 a 5 horas normalizar sus niveles de lactato
hemolinfÆtico mientras que a la langosta que por el contrario se haya preferentemente
expuesta Galatea strigosa le toma 20 horas y entre 12 y 24 horas al cangrejo
dulceacuícola Potamon warreni Bridges y Brand 1980 Van Aardt y Wolmarans 1987
Esto sugiere que las especies que se enfrentan frecuentemente a episodios de hipoxia en
sus ambientes naturales estÆn fisiológicamente mejor adaptadas para remover ellactato
acumulado cuando las condiciones aeróbicas regresan a niveles de normoxia Bridges y
Brand 1980 Tal situación explica por quØ P californiensis presenta una recuperación
rÆpida de aproximadamente 6 horas bajo condiciones de normoxia reposo y pH 8 sin
amonio de acuerdo con lo reportado para especies que se mantienen ocultas como
Corystes cassivelaunus
En cuanto a las mediciones del consumo de oxígeno de P californiensis Øste
mostró que hay un incremento durante la fase de ejercicio el cual disminuye al entrar en
54
reposo bajando aœn mas cuando se encuentra en condiciones de hipoxia Al respecto en
los tratamientos con amonio se observaron mayores oscilaciones desde el inicio de la
exposición indicando una respuesta en el consumo de oxígeno del organismo bajo
condiciones de hiperamonia A lo largo del experimento que duró aproximadamente 6
horas se presentaron diferencias en los consumos de oxígeno lo cual coincide con lo
reportado por Chen y Nan 1994 quienes mencionan que durante las primeras 6 horas
las tasa de consumo de oxígeno cambian en condiciones de hipoxia moderada para
estabilizarse despuØs
Los niveles de oxígeno disuelto en el agua de un estanque estÆn directamente
relacionados con el bienestar o salud del camarón pudiendo ser críticos Al respecto se
ha demostrado que niveles entre O y 1 mg 021L son letales entre 1 y 1 5 son letales en
exposición prolongada y entre 1 7 Y 3 provocan crecimiento lento en el organismo por la
pobre conversión alimenticia haciØndolo mas susceptible a enfermedades Nicovita
1997
En el presente trabajo se observó mucha variación en todos los tratamientos al
alcanzarse niveles de oxígeno por debajo de 3 mglL lo cual coincide con lo reportado
para P monodon quien presenta un punto crítico a una concentración de oxígeno de 448
rngIL Liao y Huang 1975 En Chen y Nan 1994 AdemÆs se observaron altos
consumos de oxígeno en los tratamientos con hiperamonia lo mismo que para juveniles
de P chinensis quienes incrementaron su consumo en estas condiciones 5 mg
amoniolLChen y Lin 1995
Estos cambios en el consumo de oxígeno pueden deberse a que su transporte a los
tejidos se realiza por medio de una cadena de eventos en un organismo complejo como el
55
camarón Herreid 1980 dependiendo de su estilo de vida así como de factores bióticos
y abióticos como el peso del animal el estado nutricional el grado de actividad el sexo
la edad estado de desarrollo proceso de muda presión osmótica temperatura hora del
día estación del aæo concentración de oxígeno bióxido de carbono en el agua y
disturbios a los que estØ sujeto Martínez y de la Cruz 1985 Watt el al 1999
En algunos decÆpodos la tensión del oxígeno externo afecta directamente su tasa
de consumo haciendo que al llegar a niveles de estrØs se comporten como oxígeno
confonnadores Regnault y Aldrich 1988 Martínez y de la Cruz 1985 aunque es
evidente pensar que son organismos que regulan su consumo de oxígeno hasta el punto
en el que no pueden disponer de estrategias que les permitan regular la falta de este gas
Otro aspecto que afecta la respuesta al pago de la deuda de oxígeno es la presencia de
otros factores de estrØs como la alcalosis y la hiperamonia los cuales impiden la
aplicación de las estrategias reguladoras como en el caso de P californiensis ya que en
los tratamientos en los que se presentan estas dos condiciones no se observa
recuperación AdemÆs despuØs de 6 horas de exposición a un ambiente de hiperamonia
la excreción de amonio se vuelve mas lenta como lo reportan Chen y Nan 1994 para
juveniles de P chinensis
9 2 Acidolactosis muscular
Durante el periodo de ejercicio y captura se generó una acumulación de Æcido
lÆctico muscular que alcanzó los niveles mÆs elevados al tenninar el ejercicio indicando
que se presentó una hipoxia celular o funcional ya que ellactato se incrementó a pesar de
estar en un medio de nonnoxia ambiental Este incremento indica que el consumo
56
metabólico del Æcido pirœvico es mÆs lento que la generación de Øste por lo que toma
forma de lactato con la acción de una lactato deshidrogenasa y se acumula hasta ser
oxidado Mathews y Van Holde 1998 Lehninger 1995 Esta acidolactosis inducida por
ejercicio tiene fuerte repercusión en los organismos y es alcanzada por periodos de
excesiva actividad muscular que en este caso fue producto de la suma del ejercicio por
nado a contracorriente y del nado de escape realizado durante la captura y el traslado ya
que se ha reportado con anterioridad que la actividad locomotora que causa el mÆximo
costo energØtico en los penaeidos es el uso de su mœsculo abdominal el cual estÆ
especializado para realizar poderosas contracciones que lo hacen saltar para escapar de
sus depredadores Hagennan y Szaniawska 1986 en este sentido se han reportado
niveles de Æcido lÆctico en mœsculo para Macrobrachium rosenbergii y P duorarum con
incrementos de 6 de 0 091 a 0 61 mgg y 5 veces de 0121 a 0 63 mgg
respectivamente mostrando una rÆpida acumulación de Æcido lÆctico por estrØs Spotts y
Lutz 1981 Con Crangon crangon tambiØn se han realizado estudios que indican que la
fatiga se presenta rÆpidamente al cabo de 15 contracciones despuØs de las cuales ya no
reacciona al estímulo aunque sin detectar incremento de lactato circulante despuØs de la
actividad exhaustiva Hagerman y Szaniawska 1986 por lo tanto podemos decir que las
condiciones de ejercicio a las que P californiensis fue sometido en este experimento lo
llevaron a niveles de agotamiento lo que explica por quØ al final del ejercicio algunos
camarones estaban exhaustos y eran arrastrados por la corriente reflejÆndose en los
niveles de lactato muscular mostrando valores de lactato post ejercicio cercanos a 1
rngIg
57
AdemÆs se han realizado comparacIones entre las 3 especies de cangrejos
Calinectes sapidus acuÆtico Cardisoma guanhumi semi terrestre y Gecacinus
lateralis terrestre quienes mostraron que despuØs de 10 minutos de vigoroso ejercicio
algunos presentan mayor resistencia a la fatiga por lo que los mÆximos niveles de lactato
son alcanzados en diferentes tiempos de actividad siendo los acuÆticos mÆs resistentes
soportando hasta 20 minutos de ejercicio y una hora de natación con un incremento de
2 6 veces en los niveles de lactato tanto en hemolinfa como en mœsculo mientras que los
terrestres se fatigaron rÆpidamente pero presentaron altas tasas de recuperación y
relativamente altas concentraciones de glucógeno en sus mœsculos locomotores Henry et
al 1994 Por los resultados obtenidos en este y otros trabajos y de acuerdo con Onnen y
Zebe 1983 se considera relevante el estudio de los niveles de tolerancia de las especies
debido a la gran diversidad en sus respuestas y a que cuando el mœsculo se encuentra
fatigado o con deuda de oxígeno la habilidad para escapar se reduce y con ella la
probabilidad de sobrevivir
Al iniciar el periodo de incubación y entrar en reposo se presentó una
recuperación de la acidolactosis muscular de P californiensis ya que durante las
primeras horas ambos tanques contenían niveles de oxígeno cercanos a la normoxia por
10 que fue posible observar esta recuperación en los primeros muestreos pero al llegar a
niveles de oxígeno inferiores a 1 mgL Østa cesó y los niveles se mantuvieron elevados
Sin embargo esta recuperación no pudo ser observada en los tratamientos con
hiperamonio debido a que la presencia de amonio ambiental provoca un bloqueo del
metabolismo aerobio Estos resultados contrastan con los reportados por Racotta y
HernÆndez Herrera 2000 quienes observaron una disminución en las concentraciones
58
de lactato en hemolinfa y mœsculo de L vannamei a concentraciones de amonio de 2 14
mmolL
En el caso de P californiensis 45 minutos de ejercicio de nado a contracorriente
fueron suficientes para elevar los niveles de Æcido lÆctico de 0 8 a 13 mgg mientras que
durante el reposo se dio la disminución de esos niveles siempre y cuando se presentaran
condiciones normales de pH y niveles de oxígeno superiores a 1 mgL El tiempo
requerido para alcanzar los niveles mínimos de lactato fue de 6 horas bajando hasta 0 58
mgg Sin embargo esta recuperación se puede bloquear por hipoxia alcalosis e
hiperamonia aunque los niveles inducidos por estos factores no son tan altos como los
alcanzados por ejercicio aœn comparÆndolos con los organismos en post mortem
La rapidez con la que se fatiga el mœsculo del camarón puede ser debida a que
presenta fibras musculares blancas ya que se ha comprobado que existen diferencias en
la velocidad de recuperación entre estas y las rojas presentes en otros organismos Las
fibras rojas contienen una cantidad mayor de mioglobina y mitocondrias por lo que la
rapidez de utilización dellactato acumulado es mucho mayor en Østas que en las blancas
las cuales son de movimiento lento debido a que son usadas para síntesis de ATP a largo
plazo por medio del metabolismo aerobio En estos mœsculos la glucólisis es la fuente
energØtica principal para la fosforilación del ATP distinguiØndose por un bajo nivel en
miosina ATPasa una lenta velocidad de contracción y una capacidad glicolítica menor
que la desarrollada en las fibras de movimiento rÆpido las cuales por lo contrario tienen
un alto nœmero de mitocondrias relativamente grandes que facilitan el metabolismo
anaerobio Los altos niveles de mioglobina les dan esa coloración roja y los hace mucho
59
mÆs resistentes a la fatiga y a ejercicios aeróbicos prolongados Schdmit Nielsen 1997
Eckert et al 1998
9 3 Acidolactosis hemolinfÆtica
Durante las primeras horas de incubación y mientras existieron niveles de oxígeno
mayores a 1 mgL las concentraciones de lactato permanecieron menores a 10 rngdL
tanto en los tratamientos con normoxia como en los de hipoxia Pero cuando las
concentraciones de oxígeno fueron inferiores a 1 mgL se observó un claro incremento en
los niveles de lactato hemolinfÆtico de forma ascendente hasta alcanzar valores
superiores a 600 mgdL lo que indica que a esos niveles de oxígeno provocan una
acumulación constante de lactato en la hemolinfa creando una deuda de oxígeno Eckert
et al 1998
A pesar de que en la hemolinfa no se acumulan grandes cantidades de lactato
mientras haya buena aireación parece haber un efecto causado por el pH ya que los
niveles de lactato de la jaula 4 en los experimentos a pH 9 con valores de 8 1 Y 9 rngdL
con y sin amonio respectivamente fueron casi el doble de los registrados a pH 8 con
valores 54 y 4 6 mgdL con y sin amonio respectivamente Anexo Cuadro 15 Sin
embargo este efecto no fue significativo
Aunque no han sido reportados previamente los niveles de lactato en hemolinfa de
P californiensis se reporta que en el cangrejo Potaman warreni los niveles aumentan de
0 54 a 34 78 rnmol durante 6 horas de anoxia en una atmósfera de nitrógeno AdemÆs de
mostrar un rÆpido decremento del pH y del contenido de C02 total en la hemolinfa lo
que indica un gran disturbio en el balance Æcido base Van Aardt y Wolmarans 1987
60
Comœnmente la acumulación de los productos del metabolismo anaeróbio es
rÆpida pero su recuperación suele ser mucho mas lenta ya que en peces y crustÆceos
puede tomar de 24 a 48 horas para que todos los parÆmetros de la hemolinfa regresen a
sus niveles normales McMahon el al 1978 En Spotts y Lutz 1981 en este trabajo P
californiensis mostró una recuperación de la acidolactosis muscular en 6 horas mientras
que en humanos se da en sólo 30 minutos segœn Phillips el al 1977 Sin embargo
durante este tiempo los animales pueden ser susceptibles a infecciones o efectos de estrØs
adicional Vargas Albores 1992 Cheng el al 2002 lo que hace que este tipo de estudio
sea de gran relevancia ya que aspectos tan importantes como el crecimiento la
alimentación la reproducción y por lo tanto la condición individual y la supervivencia
ademÆs de las implicaciones eco lógicas que todo esto trae consigo pueden ser afectados
por la hipoxia Rudolf 2002 así tambiØn el decremento general de las actividades
durante largos períodos de hipoxia moderada lo que provoca una reducción en la
habilidad para evitar a sus depredadores Hagerman y Szaniawska 1986 Por lo tanto el
efecto de la hipoxia puede ser estimado con un declinamiento en la salud del organismo o
su muerte Koehn y Bayne 1989
En el caso de P californiensis concentraciones de oxígeno inferiores a 1 mgL
son suficientes para elevar los niveles de Æcido lÆctico en hemolinfa y mœsculo así como
para bloquear la recuperación de una acidolactosis muscular post ejercicio ya que los
niveles de lactato se incrementaron en relación directa con el grado de hipoxia al que
estuvieron sometidos alcanzando su mÆximo valor en estado de post mortem
61
lo
Por lo tanto los niveles de lactato se pueden tomar como indicadores de calidad
de los productos ya que conociendo los niveles en vivo se puede saber si el producto es
de captura reciente o estuvo mucho tiempo almacenado Spotts y Lutz 1981
9 3 Relación entre la acidolactosis muscular y hemolinfÆtica
Relacionando los resultados obtenidos con la acidolactosis muscular y
hemolinfÆtica es claro que cuando existe un bloqueo en los mecanismos asociados al uso
de la energía dentro de un organismo tarde o temprano se ve reflejado en los demÆs
órganos por ello si existe acidolactosis en hemolinfa significa que no existe el oxígeno
suficiente para cubrir las necesidades fisiológicas y no se cubrirÆn los requerimientos de
cualquier otro tejido
9 4 Respuestas comportamentales a la hipoxia
Los organismos presentan diversos cambios comportamentales para contrarrestar
los efectos de la hipoxia lo que depende bÆsicamente de sus hÆbitos Si son organismos
móviles pueden responder desplazÆndose a sitios de mayor cantidad de oxígeno otros
tienden a aumentar el Ærea de superficie para el intercambio de gases reducen su
actividad conservando energía y oxígeno como una respuesta compensatoria por lo que
la mayoría disminuyen su movilidad Herreid 1980 Rudolf 2002
Bajo estas condiciones es entendible como la manipulación diurna del camarón
cafØ P californiensis eleva significativamente su nivel de estrØs
La respuesta entre diferentes especies acuÆticas ante periodos de hipoxia es muy
diversa inclusive dentro de la misma especie bajo ciertas circunstancias y los mØtodos
62
para estudiar tales condiciones son muy variados utilizando diferentes combinaciones de
factores que tienen influencia sobre ella comportÆndose algunas veces como
conformadores y otras como reguladores de oxígeno lo que hace dificil la ubicación de
las especies en estas categorías ya que eso sería llevarlas a los extremos de un amplio
espectro de respuesta Herreid 1980
Sin embargo se dice que los crustÆceos decÆpodos son reguladores de oxígeno
debido a que han adoptado varios mØtodos para su mantenimiento cuando son sometidos
a hipoxia utilizando mecanismos comportamentales y fisiológicos incrementando su
tasa de ventilación y perfusión lo que se logra a travØs del uso de hemocianina de alta
afinidad Wamer 1977 Arundprasam y Taylor 1964 Batterton y Cameron 1978 Butler
el al 1978 Bridges el al 1984 Morris y Taylor 1985 En Van Aardt y Wolmarans
1987 Racotta el al 2002 Herreid 1980 Watt el al 1999 Otra estrategia es incrementar
el nœmero de cØlulas sanguíneas Rudolf 2002 y los niveles de cobre en casos de
hipoxia moderada pero prolongada Racotta el al 2002 Pero las adaptaciones se
presentan a todos los niveles desde molecular Herreid 1980 Koehn y Bayne 1989 en
citoplasma y en membranas celulares por lo que es posible que un organismo con buenas
estrategias de regulación pueda mantener constante su consumo de oxígeno durante una
fase de decremento de la presión parcial ambiental incrementando la conductancia del
flujo del gas Herreid 1980
63
9 5 Respuestas fisiológicas a la hipoxia
Las altas concentraciones de lactato en la hemolinfa despuØs de un episodio de
hipoxia pueden modificar la actividad de la hemocianina De acuerdo con algunos
autores esto sucede en varias especies atribuyØndolo como una estrategia fisiológica de
organismos que habitan ocultos en fango o en madrigueras para contrarrestar los efectos
de las bajas de oxígeno demostrando así la importancia del L lactato en la modulación de
la afinidad de la hemocianina en algunos crustÆceos Bridges et al 1984 Chen y Cheng
1993 Taylor et al 2000
Otros autores mencionan que la alta concentración de proteínas presentes en la
hemolinfa le confieren un efecto buffer por lo que Østa no presenta cambios en su
afinidad por el oxígeno en presencia de lactato Taylor et al 2000 ademÆs de que la
capacidad de ventilación de los organismos influye en el balance Æcido base de la
hemolinfa debido a su relación con la presión parcial de CO2 y de las proteínas
reguladoras Van Aardt y Wolmarans 1987 Watt et al 1999 Otro factor es el pH que
influye en el movimiento y la liberación de los productos finales del metabolismo
anaeróbico como ellactato por lo que se da cierta distribución de estos metabolitos y
protones entre compartimientos intra y extracelulares Hochachka etal 1993
Sin embargo la diferencia mÆs marcada se presenta al hacer comparaciones entre
especies que disponen de un órgano especializado para la oxidación de los productos
fmales del metabolismo anaerobio con aquellos que carecen de Øl La presencia del ciclo
de Cori en vertebrados es una gran ventaja para la recuperación despuØs de episodios de
hipoxia tanto ambiental como celular o funcional ya que en este caso el lactato es
64
transportado por la sangre desde el mœsculo y metabolizado en el hígado Phillips el al
1977 Mathews y Van Holde 1998 Eckert et al 1998
Van Aardt 1988 menciona que los cangrejos no tienen un órgano
gluconeogØnico altamente especializado como el hígado de los vertebrados aunque en el
caso de los invertebrados como el camarón se reporta que la deshidrogenación dellactato
se lleva a cabo en el hepatopÆncreas en las branquias o en los hemocitos de la hemolinfa
Jonson el al 1971 Jonson y Davies 1972 Jonson et al 1973 En Phillips et al 1977
Van Aardt 1988 Henry et al 1994 Sin embargo existen autores que mencionan que en
el camarón aœn no se ha identificado algœn órgano que realice esta función y que lo mas
probable es que se lleve a cabo en las cØlulas sanguíneas y del tejido hasta se ha
propuesto que se le deje de llamar hepatopÆncreas y se nombre como glÆndula del
intestino medio o digestiva Phillips el al 1977 Henry etal 1994 AdemÆs los elevados
niveles de lactato en mœsculo decrecen muy lentamente así que parece improbable que
exista una extensiva remoción del mismo en los mœsculos vía hemolinfa Onnen y Zebe
1983 En cambio en este trabajo los niveles de lactato en la hemolinfa se incrementaron
significativamente en períodos de hipoxia ambiental sin mostrar efecto por ejercicio por
lo que podemos decir que el Æcido lÆctico no se transporta en la hemolinfa del camarón
cafØ P californiensis Sin embargo es necesario evaluar otras molØculas como la alanina
para identificar si hay un transporte de piruvato al hepatopÆncreas ya que la
gluconeogØnesis es importante para mantener constante el aporte circulatorio de
combustibles metabólicos al sistema nervioso central despuØs de periodos de ejercicio en
vertebrados mayores aunque debido a que los crustÆceos carecen de un sistema nervioso
bien desarrollado parece que el eficiente recic1amiento de lactato a glucosa circulante no
65
representa una ventaja selectiva ademÆs de que las relativamente bajas tasas metabólicas
que muestran tanto crustÆceos como peces pudieron haber retardado el desarrollo
evolutivo del ciclo de Cori hasta la emergencia de la combinación de un sistema
circulatorio central desarrollado y las altas tasas metabólicas encontradas en vertebrados
terrestres Henry el a 1994
9 6 Respuestas metabólicas a la hipoxia
Cuando se presentan condiciones de estrØs como a las que fueron expuestos los
organismos en este trabajo se presentan eventos adversos en el metabolismo tales como
la acumulación de lactato como consecuencia del exceso de piruvato provocado por el
bloqueo del metabolismo aerobio Ellactato es una forma mÆs estable que el piruvato
por lo que puede ser almacenado para despuØs ser convertido nuevamente a piruvato el
cual ingresa al complejo de la piruvato deshidrogenasa en donde es convertido en acetil
CoA para entrar como sustrato en el ciclo del Æcido cítrico pasando electrones a la
cadena respiratoria por medio de los transportadores NAD y FAD pero si no existe el
oxígeno suficiente para capturar los electrones de la cadena respiratoria el ciclo se
detiene provocando un bloqueo y por lo tanto un incremento en los niveles de Æcido
lÆctico Esta hipoxia a nivel de la cadena respiratoria puede deberse a una deficiencia en
el trasporte de oxígeno por la sangre debido a una baja afinidad de la hemocianina una
obstrucción en el epitelio respiratorio deficiencias en el sistema de ventilación o hipoxia
ambiental Eckert el a 1998 Lehninger 1995 Mathews y Van Holde 1998
Otra forma de bloqueo del ciclo del Æcido cítrico es a travØs del a oxoglutarato
que en ambientes con exceso de amoniaco tiende a formar glutarato deteniendo el ciclo
66
del Æcido cítrico y provocando una acumulación de lactato en el organismo de esta
manera cuando se presentan estas condiciones las rutas metabólicas pueden cambiar
minimizando la desaminación de las proteínas ya que esto favorece el incremento de la
concentración de amonio hemolinfÆtico o tambiØn puede virar su condición de
amoniotØlicos a ureotØlicos Schmith y Santos 1999 Chen y Chen 2000 pero ademÆs
de la reducción en el metabolismo se presenta una disminución en la regulación de la
síntesis proteica así como en la de enzimas regulatorias Rudolf 2002
9 7 Acidolactosis por intoxicación por amonio
Cuando en el medio extracelular existen altas concentraciones de amonio hay un
ingreso de este en forma de amoniaco debido a su permeabilidad en las membranas
hasta alcanzar un equilibrio entre los niveles de amonio ionizado dentro y fuera de la
cØlula sin embargo dicho amoniaco captura hidrogeniones del agua provocando
alcalosis intracelular Schmitt y Santos 1999 Eckert et al 1998 Este fenómeno puede
causar pequeæos pero significativos cambios en el pH como los reportados para P
paulensis quien en 30 mino presenta alcalosis hemolinfÆtica despuØs de ser expuesto a un
medio con elevada concentración de amonio Schmitt y Santos 1999
67
10 Conclusiones
En el camarón cafØ la acidolactosis hemolinfÆtica se eleva principalmente por
hipoxia ambiental
La acidolactosis hemolinfÆtica en P californiensis se incrementa rÆpidamente a
niveles extremos en concentraciones de oxígeno inferiores a 1 mgL
independientemente de la concentración de amonio y del pH
Los niveles extremos de Æcido lÆctico en la hemolinfa de P californiensis bajo
condiciones de hipoxia son mayores cuando se combinan con la presencia de
amonio y pH elevado
La acidolactosis muscular se eleva por ejercicio en P californiensis
Durante el periodo de reposo post ejercicio en condiciones de nonnoxia en P
californiensis se da una recuperación de la acidolactosis muscular que se bloquea
en condiciones de hipoxia
La acidolactosis muscular de P californiensis post ejercicio es mayor en alcalosis
e hiperamonia al final de la incubación tanto en normoxia como en hipoxia
68
11 Recomendaciones
Realizar anÆlisis comparativos de los niveles de lactato hemolinfÆtico muscular y
hepatopancreÆtico y correlacionarlos para ver si la acidolactosis de un punto de
muestreo puede ser tomada como indicador del incremento en otro
Evaluar otras molØculas relacionadas con el piruvato para entender quØ sucede
con este cuando no es procesado Tal es el caso de la alanina que puede ser
formada a partir de piruvato y actœa como precursora del ciclo de la urea
Realizar ensayos inmunológicos con organismos sometidos a estrØs por hipoxia
ambiental y celular para conocer el nivel de respuesta del sistema inmune ante
periodos de acidolactosis
Realizar un estudio comparativo de las concentraciones de lactato entre diferentes
especies para conocer los niveles normales y los mÆximos alcanzados en cada
una así como las diferencias que existen entre ellas de acuerdo a sus hÆbitos
69
12 Glosario
Aeidolactosis Acumulación de Æcido lÆctico que provoca una acidificación corporalexcesiva Puede ser de origen metabólico como resultado del metabolismo o función
renal así como respiratorio resultado de hipoventilación pulmonar
Alealosis Tendencia a la elevación del pH como consecuencia de la distorsión de la
compensación en el balance Æcido base
ConConnador de oxígeno Cuando el metabolismo aeróbico depende de la tensión de
oxígeno es decir que el animal permite que caiga su consumo de oxígeno al disminuir el
oxígeno ambiental
Cultivo intensivo Cultivo con alta densidad de organismos en el que el productor debe
crear su espacio de cultivo aportar alimento y aireación debido a que la alta densidad
supera la capacidad de carga del sistema
Deuda de oxígeno Diferencia negativa entre los requerimientos de oxígeno y el aporte
del mismo
EstrØs Situación de un individuo vivo o de alguno de sus órganos o aparatos que por
exigir de ellos un rendimiento superior al normal extiende la respuesta adaptativa
norma lo que provoca un disturbio en la funcionalidad normal y reduce
significativamente su oportunidad de sobrevivir
HemolinCa Líquido del celoma de algunos invertebrados equivalente a la sangre y la
linfa de los animales superiores
Hemocianina Pigmento respiratorio de color azul de la sangre de muchos moluscos y
artrópodos DespuØs de la hemoglobina es el pigmento respiratorio mÆs frecuente
HepatopÆncreas GlÆndula anexa al tubo digestivo que desempeæa una función anÆloga
a la del higado y el pÆncreas de los vertebrados Se encarga de la producción de enzimas
y absorción de alimentos ingeridos Aunque algunos autores proponen que se le llame
glÆndula del intestino medio o digestiva
Hiperamonia Que contiene una concentración de amonio mayor que una solución de
referencia
Hiperoxia Concentración de oxígeno superior al nivel de saturación
Hipoxia Concentración de oxígeno inferior al nivel de saturación
Metabolismo Conjunto de reacciones químicas que suceden dentro de todas las cØlulas
vivas Ocurren por medio de vías metabólicas ya sea degradando absorbiendo y
transformando los alimentos en productos complejos por medio del anabolismo o
degradÆndolos en otros mas simples por medio del catabolismo
Aeróbico En el cual las molØculas de alimento al final son oxidadas
completamente a dióxido de carbono yagua por el oxígeno molecular
Anaeróbico En el que las molØculas de alimento son oxidadas incompletarnente
a Æcido lÆctico Implica una menor producción de energía por molØcula de glucosa
Normoxia Nivel de oxígeno que se encuentra en los mÆrgenes del nivel de saturación
Punto crítico Nivel de presión de oxígeno en el que un organismo regulador se
convierte en conformador de oxígeno
Regulador de oxígeno Organismo que mantiene constante su consumo de oxígeno
aunque la tensión de oxígeno ambiental disminuya
71
13 Literatura Citada
Allan G L Y G B Maguire 1991 Letballevels oflow dissolved oxygen and effects of
short term oxygen stress on subsequent growth of juvenile Penaeus monodon
Aquaculture 94 27 37
Allan G L Y G B Maguire 1992 Effects of pH and salinity on survival growth and
osmoregulation in Penaeus monodon Fabricius Aquaculture 107 33 47
Aragón E A 2000 Investigación regional desarrollo histórico de la camaronicultura en
el noroeste de MØxico Pesca y conservación 4 13 5 7
BANCOMEXT 1999 Camarón Mexicano Resuelva problemas en el cultivo
BANCOMEXT 104pp
Bower C E y 1P Bidwell 1978 Ionization of arnmonia in sea water effects of
temperature pH and salinity J Fish Res Board Can 35 1012 1015
Boyd CE 1990 Water quality in ponds for aquaculture Alabama Agricultural
Experiment Station 482 pp
Bridges C R y AR Brand 1980 The effect of hypoxia on oxygen consumption and
blood lactate levels of some marine crustacean Comp Biochem Physiol 65 A
399 409
Bridges C R Morris S y M K Grieshaber 1984 Modulation of haemocyanin oxygen
affinity in the intertidal prawn Palaemon elegans Rathke RespiratioD
Physiology 57 189 200
Chen le y S Y Cheng 1993 Hemolymph PC02 Hemocyanin protein levels and urea
excretion of Penaeus monodon exposed to ambient arnmonia Aquatic
Toxicology 27 V 281 291
72
Chen IC y C Y Lin 1995 Responses of oxygen consumption arnmonia N excretion
and urea N excretion of Penaeus chinensis exposed to ambient ammonia at
different salinity and pH levels Aquaculture 136 243 255
Chen IC y H H Nan 1994 Effects of dissolved oxygen on oxygen consumption and
ammonia type fIxed nitrogen excretion ofPenaeus chinensis Zoological Studies
33 1 90 93
Chen 1M y IC Chen 2000 Study on the free amino acid levels in the hemolymph
gill hepatopancreas and musc1e of Penaeus monodon exposed to elevated
ambient ammonia Aquatic Toxicology 50 27 37
Cheng W Liu CH Hsu IP y IC Chen 2002 Effect of hypoxia on the immune
response of giant freshwater prawn Macrobraquium rosenbergii and its
susceptibility to pathogen Enterococcus Fish and Immunology 13 351 365
Cifuentes IL Torres García P y M Frías 1988 El ocØano y sus recursos VII El
aprovechamiento de los recursos del mar Fondo de Cultura Económica MØxico
Colt lE y D A Armstrong 1981 Nitrogen toxicity to crustaceans fish and molluscs
Bio Engineering Symposium for Fish Culture 34 45
Eckert R D Randall W Burggren y K French 1998 Fisiología Animal mecanismos
y adaptaciones McGraw Hill Interamericana 795pp
Gäde C G 1984 Anaerobic Energy Metabolism En Hoffman ed K H
Environmental and biochemistry ofinsects Springer Erlag 119 136
García 1 2001 Toxicidad provocada por amonio en postlarvas de distinta edad de
camarón blanco Litopenaeus vannamei Boone 1931 en condiciones de
laboratorio Tesis de licenciatura UNAM
73
García M U 1994 Influencia de la temperatura en el desarrollo larvario de camarón
cafØ Tesis de Licenciatura UABCS 82 pp
Hagerman L y A Szaniawska 1986 Behaviour tolerance and anaerobic metabolism
under hypoxia in the brackish water shrimp Crangon crangon Manne Ecology
Progress series 34 125 132
Hamilton N M y D F Houlihan 1992 Respiratory and circulatory adjustments during
aquatic treadmill exercise the European shore crab Carcinus maenas J Exp
BioL 162 37 54
Hendrickx E 1996 Los camarones penaeoidea bentónicos Crustacea decÆpoda
Dendrobranchiata del Pacífico mexicano CONABIO UNAM 147pp
Henry R P Booth C E Lallier F H y PJ Walsh 1994 Post exercise lactate
production and metabolism in three species of aquatic and terrestrial decapod
crustaceans J Exp BioL 186 215 234
HernÆndez R 1998 Evaluación del efecto de diferentes concentraciones de amonio
sobre el metabolismo del camarón blanco Penaeus vannamei en condiciones de
laboratorio Tesis de licenciatura UABCS 64 pp
HernÆndez GonzÆlez G 1997 Estudio sobre los requerimientos en proteína de juveniles
de camarón cafØ Penaeus californiensis Tesis de Licenciatura UABCS 57pp
Herreid C F 1980 Hypoxia in invertebrates Comp Biochem Physiol 67 A 311 320
Hochachka P W Lutz P L Sick T Rosenthal M y G Van den Thillart Eds 1993
Surviving bypoxia Mechanisms ofcontrol and adaptation
Kaushik SJ 2000 Factores que afectan la excreción nitrogenada en teleósteos y
crustÆceos 237 250 En Civera Cerecedo R PØrez Estrada CJ Rieque MarieD
74
y Cruz Suarez LE Eds Avances en nutrición acuíola IV Memorias del IV
Simposium internacional de nutrición acuícola Nov 15 18 La Paz B C S
MØxico
Koehn RK y RL Bayne 1989 Towards a physiological and genetical and genetical
understanding ofthe energetics ofthe stress response Biological Journal on tbe
Linnean Society 37 157 171
Lehninger AL 1995 Bioquímica Las bases moleculares de la estructura y función
celular Ediciones Omega Segunda edición Espaæa 1117 pp
López AB 2001 Efecto del amonio a distintos niveles de pH y temperature sobre la
sobrevivencia y excreción de portlarvas de camarón Tesis de licenciatura
UNAM 93
Martínez A Y A De la Cruz 1985 Respiración de camarones en condiciones de
transporte en agua Revista de Investigaciones Marinas VI 1 70 78
Martínez LR 1998 Ecología de los sistemas acuícolas AGT 227
Mathews C K y K E Van Holde 1998 Bioquímica McGraw Hill Interamericana
MØxico 1283pp
Nicovita 1997 Interrelaciones de la temperatura oxígeno y amoniaco en el cultivo de
camarón en Tumbes Boletín nicovita Camarón de Mar 2 8 1 7
Ocampo L 1994 Evaluación del efecto de la temperatura y del peso en el consumo de
oxígeno del camarón cafØ Penaeus californiensis Tesis de maestría IPN
Ocampo L 1998 Efecto del oxígeno disuelto y de la temperatura en el crecimiento
metabolismo respiratorio y energØtica de juveniles de camarón cafØ CIB
75
Onnen T Y E Zebe 1983 Energy metabolism in the tail muscles ofthe shrimp Crangon
crangon during work and subsequent recovery Comp Biochem Physiol 74 4
833 838
PÆez Osuna F Guerrero GalvÆn S R y A C Ruiz FernÆndez 1998 The environmental
impact of shrimp aquaculture and the coastal pollution in MØxico Marine
Pollution Bulletin 36 1 65 75
PØrez Farfante I y B Kensley 1997 Penaeoid and Sergestoid shrimps and pnwns of
the world MØmories du musØum national d historie naturelle Tome 175 233pp
Phillips J W RJ W McKinney FJR Hird Y D L MacMillan 1977 Comparative
Biochemistry and Physiology 56 B 427 433
Racotta IS y E Palacios 1998 Hemolymph metabolic variables in response to
experimental manipulation stress and serotonin injection in Penaeus vannamei
Joumal ofthe World Aquaculture Society 29 3 351 356
Racotta IS y R HernÆndez Herrera 2000 Metabolic responses of white shrimp
Penaeus vannamei to ambient arnmonia Comparative Biochemistry and
Physiology 125 A 437 443
Racotta IS Palacios E y L MØndez 2002 Metabolic responses to short and long term
exposure to hypoxia in white shrimp Penaeus vannamei Mar Fresh Behav
Physiol 35 4 269 275
Regnault M 1987 Nitrogen excretion in marine and fresh water crustacean Biology
Rev 62 1 24
76
Regnault M Y le Aldrich 1988 Short term effect of hypoxia on arnmonia excretion
and respiration rates in the crab Carcinus maenas Marine Behaviour and
Physiology 13
Rivera lA 1992 Evaluación del efecto de la variación de la temperatura y la salinidad
en el metabolismo respiratorio de post larvas de camarón cafØ Tesis de
licenciatura
Rudolf S S 2002 Hypoxia from molecular responses to ecosystem responses Marine
PoUution Bulletin 45 1 12 35 45
Schmidt Nielsen K 1997 Animal Phisiology Cambridge Univ Press E U A 602pp
Schmitt AS C y E A Santos 1999 Haemolymph nitrogenous constituents and nitrogen
efllux rate of juvenile shrimp Penaeus paulensis PØrez Farfante exposed to
ambient ammonia N Aquaculture Research 30 1 11
Shiau S Y 1998 Nutrient requirements ofpenaeid shrimps Aquaculture 164 77 93
Spotts D G y P L Lutz 1981 L Lactic acid accumulation during activity stress in
Macrobrachium rosenbergii and Peanaeus duorarum J World MaricuL Soco 12
2 244 249
Taylor AC Astall C M y RJ A Atkinson 2000 A comparative study of the oxygen
transporting properties al the haemocyanin of five species ofthalassinidean mud
shrimps Journal ofExperimental Biology and Ecology 244 265 283
Van Aardt WJ 1988 Lactate metabolism and glucose pattems in the river crab
Potamon warreni Calman during anoxia subsequent recovery Comp Biochem
Physiol 91A 2 299 304
77
Van Aardt WJ y C T Wolrnarans 1987 Effects oí anoxia on the haemolyrnph
physiology and lactate concentrations in the freshwater crab Potamon warreni
Calman Comp Biochem Physiol 88 4 671 675
Vargas Albores AF 1992 Sistema de defensa del camarón cafØ Penaeus
californiensis Tesis doctoral UNAM
Watt AJ S Whiteley N M y E W Taylor 1999 An in situ study oí respiratory
variables in three British sublittoral crabs with different routine rates of activity
J Exp Mar Biot Ecol 239 177 185
Wheaton W F 1982 Acuacultura Diseæo y construcción de sistemas AGT Editor
MØxico 558 560
Wilson lA 1989 Fundamentos de fisiología animal Editorial Limusa 984pp
78
14 Anexos
Niveles de Æcido lÆctico en el mœsculo de los camarones
Cuadro 1 Niveles de Æcido lÆctico en mœsculo por jaula me e
Nivel de pH8 pH9
Jaula oxígeno Normoxia Hipoxia Normoxia HipoxiaO 6 0 964643 0 869448
1 5 0 858163 0 744525 0 681391 0 836633
2 4 0 899456 0 702451 0 831456 0 78231
Sin amonio 3 2 0 776261 0 81049 0 604521 0 725458
4 1 0 710091 0 768118 0 705914 0 665663
5 05 0589686 0 774604 0 832188 0 881383
6 0 5 04792 0 662914 0 771802 0 790599
Muertos 0 870463 0 718091
O 6 0 631561 1381269
1 5 1 050454 0 776058 1014915 1 043533
2 4 0 8755 0582379 0 931096 1002136
Con amonio 3 2 0 972915 0 954116 0 921986 0 947898
4 1 1054549 0 781549 0 902824 0 841049
5 05 0518837 0458722 0 966169 0 904017
6 05 0 633318 0 884361 0 912238 0 860071
Muertos 0 958089
Cuadro 2 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 8 sinamonio y en hipoxia m
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Varianza
O 0 78949 116627 0 96464 0 18934 003585
1 052122 0 94461 0 74453 0 15094 002278
2 046993 0 90528 0 70245 0185 0034220 8344
3 0 6811 104466 0 81049 01265 0 016
4 051151 0 98392 0 76812 0 18152 003295
5 0 67789 0 9574 0 7746 010193 0 01039
6 030482 100316 0 66291 0 26965 0 07271
M 0 73089 1 06932 0 87046 0 10312 0 01063
79
Cuadro 3 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 8 sin
amonio y en nonnoxia m2 2
Jaula Mínímo MÆximo Media D E Varianza0 8121 0 9062
1 0 60282 UI033 0 85816 0 16366 0 026780 8446
2 0 44216 113396 0 89946 0 24823 006162
3 0 60911 0 94811 0 77626 0 14646 0 02145
4 057289 0 80943 0 71009 0 09743 0 00949
0 61055 039394 0 65043 0 58969 0 09737 0 00948
6 01793 0 80036 04792 0 23261 0 05411
Total 01793 113396 0 71881 0 21986 004834
Cuadro 4 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 8 con
amonio y en h ipoxia m2 2
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Varianza
O 0 01832 135187 0 63156 0 54857 030093
1 0 03345 2 0217 0 77606 0 82674 0 68351
2 014862 11125 0 58238 038379 014729
3 033419 158225 0 95412 050334 0 25335
4 0 02814 13284 0 78155 0 55662 030982
5 0 05893 117017 045872 051648 0 26675
6 035204 141668 0 88436 0 75282 056674
Cuadro 5 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 8 con
amonio y en n
80
ormoxia mg2
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Varianza
1 0 04918 2 06684 105045 0 68739 047251
2 0 33626 151804 0 8755 045169 0 20403
3 017236 2 01002 0 97292 0 77535 0 601171194427
4 053545 178648 105455 041925 0 17577
5 0 0224 107779 051884 045403 0 20614
6 0 01536 193048 0 63332 0 76582 0 58648
Total 0 01536 2 06684 0 85093 0 60372 036448
Cuadro 6 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 9 sinamonio y en hipoxia m2 2
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Varianza
O 0 68357 107928 0 86945 015865 0 02517
1 0 54876 1 13606 0 83663 0 24202 0 05857
2 0 61092 0 93037 0 78231 012188 0 01485
3 0 58857 0 87084 0 72546 012862 0 01654
4 0 42676 101322 0 66566 0 20776 0 04317
5 0 73031 106055 0 88138 01336 0 01785
0 7755876 049327 133825 0 7906 0 29155 0 085
M 052599 0 945 0 71809 013312 0 01772
Cuadro 7 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 9 sinamonio y en n 1onnoXIa m2 2
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Varianza
1 047677 0 99103 0 68139 019984 0 03994
2 0 69954 100407 0 83146 010258 0 01052
3 036252 0 84949 0 60452 016928 0 02866
4 055431 0 93288 0 70591 014681 0 02155
5 0 67196 0 99166 0 83219 0 U727 0 01375
6 038292 100109 0 7718 0 2619 0 06859
Tota 036252 100407 0 73788 018204 0 03314
Cuadro 8 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 9 con
amonio y en hipoxia m2 2
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Varianza
O 126713 159958 138127 0 12334 0 01521
1 0 83863 137896 104353 0 22907 0 05247
2 0 667 145252 100214 0 27525 0 07576
3 0 70992 113554 0 9479 018216 0 03318
4 0 6327 103269 0 84105 0 16313 0 02661
5 0 76223 100266 0 90402 0 09825 0009650 836276
6 054446 1 04357 0 86007 017156 0 02943
M 0 25126 139531 0 95401 040133 016107
81
Cuadro 9 Estadísticos de las concentraciones de lactato en mœsculo a pH 9 con
amonio y en normoxia mwJaula Mínimo MÆximo Media D E Varianza
1 0 67833 129465 101492 0 22589 0 05103
2 0 74574 112406 0 9311 l2773 0 01631
3 0 62641 130552 0 92199 0 2814 0 07919
4 0 69307 109188 0 90282 015787 0 02492
5 0 62554 12671 0 96617 0 23281 0 0542
6 0 79345 1 03733 0 91224 010215 0 01044
Total 0 62554 130552 0 94154 018773 0 03524
Cuadro 10 Comparación de los niveles de lactato en mœsculo en los cuatro
tratamientos en la Jaula 4 1 mg 02L mg 7
Tratamiento Mínimo MÆximo Media D E VarianZ8
1 0 5115 0 9839 0 768117 0 181513 0 032947
2 0 426763 101322 0 665663 0 201764 0 043166
3 0 632695 103269 0 841049 0 163131 0 026612
Total 0 426763 1 03269 0 758276 0188925 0 035693
Cuadro 11 Comparación de los niveles de lactato en mœsculo en los cuatrotratamien tos en la Jaula 5 0 5 m OiL m Vg
Tratamiento Mínimo MÆximo Media D E Varianza
pH 8 sin 0 67789 0 957399 0 774604 0 101933 0 01039
pH 8 con 0 058932 1 17017 0458722 0 516479 0 266751
pH 9 sin 0 730306 1 06055 0 881383 0 133604 0 01785
łH9 con 0 762231 1 00266 0 904017 0 098252 0 009653
Total 0 058932 1 17017 0 754681 0 314939 0 099186
Cuadro 12 Lactato en mœsculo en la jaula 6 0 5 m o 1
Tratamiento Mínimo MÆximo Media D E VarianZ8
pH 8 sin 03048 10032 0 2917 0 269655 OØ12714
pH 9 sin 0493266 133825 0 790599 0 291548 0 085
pH 9 con 0 544459 1 04357 0 860071 0171551 0029432
Total 03048 133825 0 171196 0 249202 0 062102
82
Cuadro 13 L t tac a o en muscu o e o aDlsmos muertos en os expenme
Tratam Mínimo MÆximo Media D E Varianza
pH 8 sin 0 730886 1 06932 0 870463 0103119 0 010634
pH 9 sin 0525993 0 944996 0 718091 0 133116 0 01772
pH 9 con 0 25126 139531 0 954008 0401332 0161068
Total 025126 139531 0 847521 0 260008 0 067604
l d l ntos mg g
Cuadro 14 Datos estadísticos de los anÆlisis de varianza de los niveles de lactato en
mœsculo de ot anismos muertos en los experimentos mg dL
Tratamiento Mínimo MÆximo Media D E Varianza
pH 8 sin 0 730886 106932 0 870463 0 103119 0 010634
pH 9 sin 0 525993 0 944996 0 718091 0 133116 0 01772
pH 9 con 0 25126 139531 0 954008 0 401332 0161068
Total 0 25126 139531 0 847521 0 260008 0 067604
Niveles de Æcido lÆctico en la hemolinfa de los camarones
Cuadro 15 Niveles de Æcido lÆctico en hemolinfa mg dL
Nivel de pH8 pH9Jaula oxígeno Normoxia Hipoxia Normoxia Hipoxia
O 6 4 998159 5 60694
1 5 3441228 3143762 12 9186 12 20209
2 4 540028 5 067757 4107317 6 089057
Sin amonio 3 2 536677 6 062749 9 514485 26 18348
4 1 4 645014 79 05546 9 000405 38 80376
5 05 2 220946 182166 112858 2544299
6 0 5 7519149 346 0561 9141577 236 0589
Muertos 514 2123 452 9635
O 6 4188867 3 822884
I 5 3 733003 23 65413 10 8838 8 669264
2 4 5 26285 64 13216 7 670136 1538596
Con amonio 3 2 5 847857 6 942812 4 264571 12 05655
4 I 5430626 143448 8163608 144 569
5 05 2 907372 266 2706 9 994328 626 8006
6 0 5 5 00898 6684703 1016796 645 2601
Muertos 724 9467
83
Cuadro 16 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinCa a pH 8 sinamonio y en h ipoxia m2 dL
Jaula Mínimo MÆximo Media D E VananZ8
O 33098 66195 4 99817 141429 2 00022
1 2 5365 841361 314376 313183 980 833
2 1825 10 1922 5 06775 2 98086 8 88551
3 3 217 115378 6 06275 3 68717 13 5952
4 55369 159 147 79 0555 70 8983 5026 57
5 918692 271432 182166 7348 539932
6 207 866 456562 346 056 109 785 12052 8
M 456 098 547 967 516509 35 0707 1229 95
Cuadro 17 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinCa a pH 8 sin
amonio y en nonnoxia dL
Jau12 Mínimo MÆximo Media D E Varianza
1 1 0826 6 8206 344122 90266 3 62013
2 3 7892 7 9806 540028 163252 2 665 1
3 2 1962 9 8829 5 36677 3 05986 936276
4 18405 7 996 4 645 23135 535234
5 13765 02541 18 9409 40 9588 677 63
6 31706 12 0482 7 5 917 315 26 9 93043
Total 1 0826 02 541 7 55223 65007 272 273
Cuadro 18 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinCa a pH 8 con
amonio y en h
84
ipoxia m2 dL
JauJa Mínimo MÆximo Media D E VarianZ8
O 156296 7 13929 4 18887 2 83972 8 0640320 74234
1 2 76829 915524 23 6541 33 799 114238
1050363
2 2 25172 353 918 64 1322 142 001 201643
3 3 08618 155899 6 94281 451919 20 4231
4 2 91399 25 1001 143448 8 8421 1 78 183
68 240455 22 7424 0422 45 266 271 566 66 321103
6 95 8969 124104 66847 809 741 655681
Total 156296 142245 10016 309 646 95880 8
Cuadro 19 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 8 con
amonio y en n IdLormoxla m j
Jaula Mínímo MÆxímo Media D E Vananza
1 242391 6 29158 3 733 145018 2 10301
2 2 63584 10 0798 5 26285 2 6565 7 057
3 430476 8 67576 5 84786 162753 2 64887
4 316566 8 62277 543063 215714 4 65327
5 181462 442397 2 90737 1 02898 105881
6 148349 14 8084 5 00898 4 97945 24 7949
Total 148349 14 8084 4 69845 2 67289 714436
Cuadro 20 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 9 sinamonio y en h ipoxia m dL
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Varianza
O 2 58905 103242 5 60694 337635 113997
1 5 05024 26 7535 122021 8 05689 64 9134
2 3 88357 105799 6 08906 251153 630778
3 3 64385 43 6942 261835 16 3287 266 626
4 12306 117 083 38 8038 45 212 204413
5 157 261 335138 25443 73 5186 5404 99
6 14 8471 574385 236 059 217 708 47396 9
M 376 85 558563 437 741 83338 6945 23
Cuadro 21 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinfa a pH 9 sin
amonio y en normoxia t mg dL
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Varíanza
1 115069 49 959 12 9186 18 5537 344 238
2 191781 5 86531 4 10732 147598 2 1785
3 242923 33 6257 9 51449 119926 143 822
4 190183 17 8996 9 0004 5 71516 32 6631
5 210959 28 7352 112858 9 62968 92 7307
6 16 7809 202 809 914158 811479 6584 98
Tota 115069 202 809 23 0404 44 6987 1997 98
85
Cuadro 22 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinCa a pB 9 con
amonio y en h ipoxia m2 dL
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Varianu
O 2 52219 5 28198 3 82288 0 883613 0 780772
1 4 2402 14 2559 8 66926 3 56052 12 6773
2 535508 45 7649 15 386 15 2297 231945
3 4 58746 33 3368 12 0566 10 6277 112 947
4 90 3602 192 125 144 569 42 7905 183103
SS 11985 444 673 1372 95 626 801 367 851 135314
6 467 702 1042 87 645 26 213 944 457719
M 691957 107358 789 445 160 184 25659
Cuadro 23 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hemolinCa a pB 9 con
amo l̨o y en nonnoxia dL
Jaula Mínimo MÆximo Media D E Vanaou
1 5 95822 23 0287 10 8838 6 77232 45 643
2 3 91122 12 6841 7 67014 3 07122 943242
3 2 28459 5 99477 4 26457 14564 2 1211
4 2 72323 105274 8 16361 2 89248 836643
5 6 67101 16 2115 9 99433 343356 117894
6 6 67101 17 8198 10168 3 98963 15 9172
Total 2 28459 23 0287 8 52407 4 28973 184018
Cuadro 24 Comparación de los niveles de factato en hemolinCa en las jaulas 1 2 Y 3entre los tratamientos m2 dL
Tratamiento Mínimo MÆximo Media D E Varianu
pH 8 sin 10826 9 8829 4 73609 234312 549021
pH 8 con 242391 10 0798 4 9479 2 07726 4315
pH 9 sin 1 15069 49 959 8 8468 125748 158 125
pH 9 con 2 28459 23 0287 7 60617 4 96202 24 6217
Total 1 0826 49 959 653424 7 0149 49 2088
Cuadro 25 Comparación de los niveles de lactato en hemolinfa en los cuatro
tratamientos en la Jaula 4 1 m20zL mwdL
Tratamiento Mínimo MÆximo Media D E Varianu
pH 8 sin 5 5369 159 147 79 0555 70 8983 5026 58
pH 8 con 2 91399 25 1001 14 3448 8 84211 78183
pH 9 sin 1 2306 117 083 38 8038 45 212 2044 13
pH 9 con 903602 192 125 144 569 42 7905 183103
Total 1 2306 192125 691932 66 9729 4485 36
86
Cuadro 26 Comparación de los niveles de lactato en hemolinfa en la jaula 5 0 5 mg02L mg dL
Tratamiento Mínimo MÆximo Media D E Varianza
pH 8 sin 91 8692 271432 182 166 7348 5399 32
pH 8 con 22 7424 68 2404 35 0342 18 7497 351 553
pH 9 sin 157 261 335 138 25443 73 5186 5404 99
pH9 con 444 673 558 72 477 571 46 0623 2121 73
Total 22 7424 558 72 235 573 165 768 27478 9
Cuadro 27 Comparación de los niveles de lactato en bemolinfa en la jaula 6 D5
mgOVL mlwdLTratamiento Mínimo MÆximo Media D E VanaoD
pH8 sin 207 866 456 562 346 056 12052 8 109 785
pH9 sin 4 8471 574385 236 059 47396 9 217 708
pH9 con 467 702 1042 87 645 26 457719 213 944
Total 14 847 042 87 409125 62602 6 250 205
Cuadro 28 Datos estadísticos de los anÆlisis de varianza de lactato en bemoliBf de
organismos I t IdLmuertos en os expenmen os mI
Tratamiento Mínimo MÆximo Media D E Vamoza
pH 8 sin 456 098 547 967 5 4 212 26 2252 687 76
pH9 sin 376 85 558563 452 964 575032 3306 62
pH 9 con 2385 1 1073 58 726 706 262 873 69102 1
Total 238 511 1073 58 564 627 191324 36605
87
Acidolactosis BepatopancreÆtica
pH 8 con amonio
En el tratamiento bajo normoxia se puede observar un incremento inicial en los
niveles de lactato hepatopancreÆtico Fig 31 no obstante se detiene y disminuye en la
jaula 3 observÆndose una clara tendencia descendente en los niveles de este compuesto
sin embargo no se obtuvieron diferencias significativas entre las distintas jaulas Cuadro
22
En hipoxia tambiØn se observa un incremento inicial que se atribuye a la
presencia de amonio ya que los niveles de lactato obtenidos de los organismos
mantenidos en la tina de aclimatación son menores a los registrado en las primeras jaulas
1 Y 2 alcanzando el mÆximo valor en la jaula 3 para despuØs incrementarse
notoriamente aunque a pesar de ello no se encontraron diferencias estadísticas
significativas
1 2
08
iO 6
04
02
o
o 2 3 4 5 6
Jaula
Fig 31 Lactato en hepatopÆncreas apH 8 con amonio
88
HipoxiaPrueba de rangos mœltiples porJaulaMØtodo 95 0 Porciento LDE
Jaula Media Grupos HomogØneosO 03925 X3 0485 X2 0565 Xl 0596667 X4 0 716667 X5 0 798333 X6 105 X
Normoxia
Prueba de rangos mœltiples porJaulaSin datos aberrantes
MØtodo 95 0 Porciento LDE
Jaula Media Grupos HomogØneos2 0 292 X6 0347219 XO 03925 X5 0585 X1 0 628333 X4 0 7375 X
3 0 756667 X
Cuadro 29 Niveles de Æcido lÆctico en hepatopÆncreas m2
pHSJaula
Ox˝2eno Normom HioomO
6 0 3930441
5 0 629728 0 5969282 4 0553271 0 566734
Con amonio3
2 0 75542 0 4840344
I 0 677841 0 716947
5 0 5 0585964 07995256 05 0344892 1053083
Cuadro 30 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hepatopÆncreas a pH8 con amonio y en hipoxia m l
Jaula Minimo MÆximo Media D E Varianza
O 0 08 112 0 3925 0487673 0 237825
1 0 08 148 0596667 0594261 0 353147
2 0 06 109 0565 0 424959 018059
3 016 0 87 0 485 0 273258 007467
4 014 159 0 716667 0 641082 0 410987
5 0 2 154 0 798333 0 554524 0 307497
6 017 193 105 124451 15488
Total 0 06 193 0 628889 0 530454 0 281382
Cuadro 31 Estadísticos de las concentraciones de lactato en hepatopÆncreas a pH8 con amonio y en normoxia m
Jaula Mínimo Mœimo Media D E VariaDZll
O 0 08 112 03925 0487673 0 237825
1 011 127 0 628333 0 486186 0 2363770 61
2 0 1 185 0551667 0 662221 0438537
3 0 13 117 0 756667 0 416541 01735070 71 0 76
4 025 0 88 068 0 21918 0 04804
5 011 178 0 585 0 721963 052123
6 013 0 91 0420663 0350737 0123016
Total 0 08 185 0586752 0 481938 0 232264
89
Es claro el desarrollo de acidolactosis hepatopancreåtica cuando se exponen los
organismos a tratamientos con hiperamonia dÆndose un incremento de mÆs del doble en
los niveles de lactato a pesar de la concentración normal de oxígeno a diferencia de lo
que ocurre con los organismos antes de ser trasladados a los tanque de incubación
pudiendo observar una aclimatación a estas condiciones o una recuperación por reposo
favorecida por un medio normóxico mostrando capacidad de recuperación
De acuerdo con lo reportado por Racotta y HemÆndez Herrera 2000 se da un
incremento en los niveles hepatopancreÆticos en L vannamei a medida que aumenta la
hiperamonia aunque estos resultados no fueron estadísticamente significativos
mostraron valores de 2 86 a 34 l1moVg así tambiØn reportan niveles de 2 86 JlmoVg
para condiciones ambientales con 0 007 rnmoVL de amonio incrementÆndose a 34 al
aumentar la concentración de amonio a 214 rnmollL lo que indica un aumento en el
lactato hepatopancreÆtico al incrementar las concentraciones de amonio Racotta y
HemÆndez Herrera 2000
90
Tipos de movimiento observados en los camarones durante su manejo en cautiverio
Durante el presente trabajo se realizaron observaciones sobre los tipos de
movimiento de los camarones en su cautiverio con objeto de seleccionar un tipo de
movimiento que pudiera ser utilizado de manera experimental para inducir acidolactosis
muscular
El movimiento de natación a contracorriente es nonnalmente utilizado para el
desplazamiento de un lugar a otro y para contrarrestar el movimiento provocado por la
corriente 10 que impide que el animal sea arrastrado Esta actividad se realiza con los
segmentos abdominales junto con los pleópodos y el telson La ventaja de este tipo de
movimiento para experimentos de ejercicio consiste en que se manifiesta como un
comportamiento grupa que se activa cuando los camarones son sometidos a una
corriente
El movimiento de escape es una reacción evasiva que principalmente utilizan los
organismos para huir de los depredadores Es realizado principalmente por los segmentos
abdominales y el telsOn generÆndose movimientos rÆpidos con gran gasto de energía
por 10 que se realiza durante cortos períodos de tiempo provocando gran fatiga la que se
reconoce por falta de actividad Se genera por medio de los segmentos abdominales 10
cuales presentan mœsculo estriado que permite esta respuesta La desventaja de este
ejercicio es que produce acidolactosis extrema rÆpida e individualmente
Movimiento reptante se consiste en un desplazamiento lento sobre el fondo
generado por los pereiópodos que es utilizado principalmente para desplazarse o
sujetarse al fondo evitando ser arrastrado por las corrientes
91
Excavación de trincheras sobre el fondo se utiliza para excavar surcos en el fondo
en busca de organismos bentónicos como por ejemplo poliquetos
Durante el movimiento de enterramiento los organismos mueven el sedimento
por mediQ de excavación y sacudidas del cuerpo hasta que la arena los cubre totalmente
dejando fuera solo los pedœnculos oculares y el escafocerito para succionar agua y seguir
ventilando aunque en ocasiones pueden parecer completamente enterrados En este tipo
de movimiento principalmente utilizan los ple6podos y pereiópodos
Movimiento giratorio y errÆtico en forma espiral se observa en animales
enfermos que no coordinan sus movimientos
El movimiento que resultó mÆs apropiado para la medición del estrØs por
ejercicio fue el de nado a contracorriente el cual provocó un grado de acidolactosis mÆs
homogØ o en todos los organismos expuestos ya que es un movimiento tipo cardumen
en el que todos los organismos se ven obligados a nadar al mismo ritmo
Con objeto de evitar el reposo en el nado a contracorriente la tina de ejercicio fue
diseæada como un canal circular ya que en un tanque circular los animales fatigados
tienden a descansar en el centro del mismo
92
Especie
Cuadro 32 Niveles de actato reportados en la literatura
Penaeus vannamei
Camarón blanco
Tejido
Hemoljnfa
Hemoljnfa
Hemolinfa
Mœsculo
Mœsculo
Mœsculo
Penaeus vannamei Hemolinfa
Camarón blanco Hemolinta
Hemolinta
Hemoljnta
Hepatopancreas
Hepatopancreas
Hepatopancreas
Hepatopancreas
Mœsculo
Mœsculo
Mœsculo
Mœsculo
Macrobrachium
rosenbergiiLangostino
dulceacuícola
Penaeus duorarum
Camarón rosa
Penaeus aztecus
Pachygrapsuscrassipes
Crangon crangon
Langostino
Jasus edwardsii
Langosta espinosa
Mœsculo
Mœsculo
Mœsculo
Mœsculo
Mœsculo
Mœsculo
Hemoljnta
Hemolinta
Hemolinta
Hemolinta
Hemolinta
Hemolinfa
Hemolinfa
Hemolinta
Mœsculo abdominal
Mœsculo abdominal
Mœsculo abdominal
Mœsculo abdominal
Mœsculo abdominal
Mœsculo abdominal
Mœsculo abdominal
Mœsculo abdominal
Mœsculo 4 pereiópodoMœsculo nexor
abdominal
Mœsculo 4 pereiópodo
Condiciones
Blanco Normoxia
Tres dias de hipoxia 1 525
mg 021L
2 semanas hipoxia 1 6 3 4 mg02 L
Blanco Normoxia
Tres dias de hipoxia 1 525
mg 02 L
2 semanas hipoxia 16 34mgO2 U
0 007 mmollL de amonio
0 36 mmollL de amonio
107 mmollL de amonio
2 14 mmollL de amonio
0 007 mmollL de amonio
0 36 mmolll de amonio
1 07 mmollL de amonio
2 14 mmollL de amonio
0 007 mmollL de amonio
0 36 mmol L de amonio
1 07 mmollL de amonio
2 14 mmol L de amonio
Reposo
Actividad
Reposo
Actividad
Actividad
Actividad
Reposo
10 seg Trabajo
50 seg Trabajo
120 seg Trabajo
30 m in recuperación
60 mino recuperación
3horas recuperación
10 horas recuperación
Reposo
10 segundos de actividad
50 segundos de actividad
120 segundos de actividad
0 5horas
1 hora
3horas
10 horas
Inmersión en cautiverio
Inmersión en cautiverio
Emersión en cautiverio
Lactato
805 mg dL
30 1 mg dL
34 4 mg dL
14mgg
1 7 mgg
1 7 mala
0 77 mmollL
0 84 mmollL
0 72 mmollL
0 59 mmollL
2 86 Imollg
2 71 Imollg
3 22 Imollg
34llmollg
14 161lmollg
13 64 Imollg
11 38 Ilmollg
10 36 Ilmollg
0 091 mgg
0 610 mgg
0 121 mg g
0 630 mala
0 16 mg g
0 327 mala
0 4llmollml
0 9llmollml
1 1llmollml
0 7 Ilmollml
0 7llmollml
1 0 Imollml
0 9llmol ml
0 3 Imollml
3 5 ImoUg seco
58 Ilmollg seco
6 6llmollg seco
7 1 Ilmollg seco
251lmollg seco
18 2 Ilmol gseco
12 111mollgseco
12 51lmollgseco
2 27 Ilmollg
4 58 Ilmol g
11 56 Ilmol g
Autor
Racotta y Palacios
1998
Racotta y HemÆndezHerrera 2000
Spotts y Lutz 1981
Flick y Lovell 1972
En Spotts y Lutz 1981Burke 1979 En Spottsv Lutz 1981
OnnenvZebe 1983
Speed 2oo1
93
Mœsculo ftexorabdominal Emersión en cautiverio 18 261lmoUg
Mœsculo pereiópodo Inmersas silvestres 0 191lmoUgMœsculo ftexorabdominal klmersas sihestres 0 77 llmoUa
C rcinus maenas Hemolinfa Preejercicio 296 Ilmol g
Cangrejo marino Hemolinfa Ejercicio 4 29 Ilmoltg
Mœsculo Preejercicio 3 89 mmoUg Hamilton y Houlihan
Mœsculo Eiercicio 977 mmolfa 1992
Polamonaues
warreni Controles 1 91 1 3 mmol
Cangrejo de rio 6horas de anoxia agua de mar 40 31 5 3 mmal
6 horas de anoxia en alm deHemolinfa N2 32 1 1 4 3 mmol Van Aardt 1988
Callineetes sapidus Mœsculo rojo elevador Descanso 1 94 Ilmo1tg
Cangrejo acuÆtico Mœsculo rojo elevador Ejercicio exhaustivo 12 7 Ilmo1 g
Mœsculo blanco elevador Descanso 1 33 Ilmolfg
Mœsculo blanco elevador Ejercicio exhaustivo 13 9llmolfgCaroisoma
guanhumi Pata Descanso 1 56 Ilmol g
Cangrejo semi
terrestre Pata Ejercicio exhaustivo 15 3 Ilmolfg
Geearcinus taterafis Pata Descanso 0 63 Ilmolfg
Cangreio terrestre Pata Eiercicio exhaustivo 86 umolfll Henry et al 1994
Nefrops norvegicus Hemolinfa Antes delejercicio 0 141lmol mL
Langostino Hemolinfa Despues del ejercicio 2 min 0 5llmolfmL
Carcinus maenas Hemolinfa Antes delejercicio 0 3pmoUmL
Cangrejo Hemolinfa Despues del ejercicio 6 min 4 0llmolfmL
Caneerpaguros Hemolinfa Antes del ejercicio O 14llmoltmL
Cangrejo Hemolinfa Oespues 1181 ejercicio 8 min 2 1 pmollml
Portunis puber Hemolinfa Antes del ejercicio 0 34 IlmolfmL
Cangrejo Hemolinfa Despues delejercicio 7 min 1 lOllmolfmL
Maia tithodes Hemolinfa Antes delejercicio 0 151lmolfmL
Cangrejo Hemolinfa Despues del ejercicio 7min 0 47 11molfm L
Homarus
gammarus Hemolinfa Antes delejercicio 0 10llmoJlml
Canareio Hemolinfa Despues del eiercicio 4 min 0 57 umolfmL Phillips elat 1977
Atœn aleta amarilla Sangre En estrØs por captura 15mM
Atœn Skipjack Sangre En estrØs por captura 7mM
Marlin rayado Sangre En estrØs por captura 26mM
Marlin azul Sangre En estrØs por captura 24mM
Marlin negro Sangre En estrØs por captura 17mM
Tiburón azul Sangre En estrØs por captura 9mM
Tiburón mako Sanare En estrØs Dor caDtura 13mM Wells elat 1986
94