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INFECCIONES PARASITARIAS EN EPISODIOS INFECCIONES PARASITARIAS EN EPISODIOS
DIARREICOSDIARREICOS
DIAGNOSTICO DE DIARREASDIAGNOSTICO DE DIARREAS
Bioq. Florencia Mongi- 2015 [email protected]
Laboratorio de Parasitología- HNC
Pte sintomático + clínica + epidemiología: DIAGNOSTICO PRESUNTIVO
Laboratorio + muestra adecuada + método apropiado: DIAGNOSTICO CERTERO
¿Cuando sospechar de infecciones parasitarias en episodios diarreicos?¿Cuando sospechar de infecciones parasitarias en episodios diarreicos?
Etapas del diagnósticoEtapas del diagnóstico
Etapa pre-analítica Etapa analítica Etapa post-analítica
• Datos del paciente • Indicaciones: Recolectar
materia fecal en recipiente limpio y seco, NO del inodoro, NO contaminar con orina
• Muestra rotulada
• Identificación de trofozoítos, quistes, larvas, huevos y adultos
• Análisis macro y microscópico, método de concentración y cultivo
• Validación e informe de los resultados
• Observaciones y sugerencias
Toma de muestraToma de muestra
Numero de muestras y frecuencia de recolección
-Muestra fresca: 1 muestra remitida antes de las 2 horas de recolección
CONCENTRAR!!!!CONCENTRAR!!!!
-Muestra conservada: 4 muestras, 1/día, días consecutivos en líquido conservante
IDEAL: 1 muestra fresca/ día Mínimo 4 muestras
Kit comercial Solución conservante
preparada
Ventaja Mayor volumen de muestra a analizar Relación conservante: muestra 3:1
Por qué muestra conservada? Comodidad para el paciente Comodidad para el analista
ConservantesConservantes
Ventajas Desventajas
• Preserva morfología de trofozoítos, quistes, huevos y larvas
• Apropiado para algunos métodos de concentración
•Interfiere en la extracción de ADN: técnicas de biología molecular (PCR) •No permite el cultivo ni desarrollo de estadios in vitro
SAF (acetato de sodio-ácido acético- formaldheído)
Solución salina o acuosa formolada (5 o 10 %)
PVA (alcohol polivinílico)- Schaudinn
Solución de dicromato de potasio (2,5%)
Merthiolate-yodo-formaldehído (MIF)
Procesamiento de la muestraProcesamiento de la muestra
Flotación Faust Willis Sheather
Sedimentación Espontánea
Centrifugación Ritchie
Cultivo de larvas Baermann
Método directo Métodos de concentración
Macroscópico
Microscópico
Coloraciones húmedas
Coloraciones permanentes
Solución fisiológica (SF) movilidad MUESTRA FRESCA!!
Coloraciones: HúmedasColoraciones: Húmedas
* Lugol * Tionina * Azul de metileno
Coloraciones: PermanentesColoraciones: Permanentes
Coccidios Protozoos Microsporidios
Kinyoun +++ - -
Ziehl-Neelsen (ZN) + - -
Safranina + - -
Tricrómica de Wheatley (TCR)
+/- +++ +
Hematoxilina Férrica (HF) - +++ -
Weber - +/- +++
Gram Cromotropo (GC) - +/- +++
Coloraciones: PermanentesColoraciones: Permanentes
Coccidios Protozoos Microsporidios
Kinyoun +++ - -
Ziehl-Neelsen (ZN) + - -
Safranina + - -
Tricrómica de Wheatley (TCR)
+/- +++ +
Hematoxilina Férrica (HF) - +++ -
Weber - +/- +++
Gram Cromotropo (GC) - +/- +++
Si Si no se cuenta con no se cuenta con alguna de alguna de estas estas coloraciones y/o persisten dudas en el resultado coloraciones y/o persisten dudas en el resultado
DERIVAR A CENTROS DE REFERENCIADERIVAR A CENTROS DE REFERENCIA
Métodos Métodos de concentraciónde concentración
Centrifugación- Flotación
Flotación
Centrifugación
Sedimentación espontánea (SE)
Cultivo de larvas: Baermann
Métodos de concentraciónMétodos de concentración
Método de Telemann modificado/ Ritchie/ FAE
Objetivo: Recuperar quistes, huevos
y larvas
Coloraciones:
* Húmedas: Lugol
* Permanentes: TCR, Kinyoun,
Safranina, GC
Solventes
SAF
Sedimento
Métodos de concentraciónMétodos de concentración
Objetivo: Recuperar trofozoítos, quistes y huevos
Coloraciones:
*Húmedas: Lugol
*Permanentes: TCR, Kinyoun, Safranina, GC
EVALUACIÓN DE UNA TÉCNICA DE SEDIMENTACIÓN ESPONTÁNEA Y DEL EXÁMEN
DIRECTO COMO MÉTODOS PARASITOLÓGICOS APLICABLES EN LABORATORIOS NO
ESPECIALIZADOS
Laconte L, Mongi F, Casero R.
Departamento de Parasitología. Hospital Nacional de Clínicas, UNC
Conclusiones:
La técnica de sedimentación espontánea (SE) demostró valores aceptables de Sensibilidad y Especificidad como método de identificación tanto para helmintos como protozoos.
Nuestros resultados indican que la técnica de SE es un método válido, sencillo y económico para concentración e identificación de parásitos si no se contara con otras técnicas para diagnóstico parasitológico
Método sencillo Buena sensibilidad y especificidad
Otros métodos de concentraciónOtros métodos de concentración
Sheather (sacarosa) Willis/Faust (Na Cl/ ZnSO4)
Objetivo: concentración de ooquistes de coccidios
concentración de huevos de bajo peso específico/ no operculados
Observación: En fresco
Otros métodos de concentraciónOtros métodos de concentración
Objetivo: recuperación de larvas
rhabditiformes
de Strongyloides sp
Cultivo de larvas
Cultivo Cultivo y aislamiento de y aislamiento de larvas:larvas:
Rabhditoides
Método Harada- Mori
Filariformes (F1) (Strongyloides stercoralis)
Objetivo: transformación de larvas
Objetivo: evidenciar larvas viables de S stercoralis y Uncinarias
Cultivo en Placa de agar (CPA)
RecomendacionesRecomendaciones
Métodos sencillos y de bajo costoMétodos sencillos y de bajo costo
Técnica de FAE (Formol-acetato de etilo)
Sedimentación espontánea
Técnica de Willis
Técnica de Sheather
Métodos específicos Métodos específicos
Cultivo de Baermann
Harada Mori
Cultivo en Placa de Agar
DERIVAR Muestra fresca!!!
Fresco con Lugol
Blastocystis sp
Coloración Tricromica de Wheatley
Fresco con Lugol Fresco con Lugol Fresco con Tionina
Entamoeba histolytica/ dispar/ moshkovskii/ dysenteriae
Coloración Tricromica de Wheatley
Entamoeba histolytica/ dispar/ moshkovskii/ dysenteriae
Fresco con AM
Dientamoeba fragilis
Fresco con SF Fresco con Lugol
Col Tricromica de Wheatley
Giardia lamblia
Fresco con Lugol
Balantidium coli
Fresco con Lugol Fresco con SF
ARTEFACTO
Fresco con SF
Cryptosporidium parvum
Coloración Kinyoun
Fresco sin Lugol
Fresco con Lugol
Cystoisospora belli
Coloración Kinyoun
Coloración: Kinyoun
Cyclospora cayetanensis
Microporidios
Coloración Gram Cromotropo
Strongyloides stercoralis
Fresco con SF
Fresco con SF
Fresco con Lugol