cromatografía de exclusión

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 Cromatografía de exclusión La cromatografía es una técnica que permite la separación de moléculas diferentes presentes en una misma muestra. El método está basado en la circulación de una fase móvil (que arrastra a la mezcla de compuestos a separar! a través de una fase estacionaria.

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Cromatografía de Exclusión

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7/21/2019 Cromatografía de Exclusión

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Cromatografía de exclusión

• La cromatografía es una técnica quepermite la separación de moléculasdiferentes presentes en una misma

muestra.• El método está basado en la

circulación de una fase móvil (que

arrastra a la mezcla de compuestos aseparar! a través de una faseestacionaria.

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• La cromatografía de exclusiónmolecular (a menudo tambiénllamada "ltración en gel o de tamizmolecular es una de las técnicasmás sencillas de las empleadas en laseparación de proteínas # ácidos

nucleicos. ($%C&'$'LECL%)

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• *extranos con enlaces cruzados (sep+adex.

•  %garosa (sep+arose! ,io-gel %.

• oliacrilamida (,io-gel ,.

 /odos estos geles (fase estacionaria se+allan constituidos por gránulos (partículasde un material espon0oso +idratado! quecontiene poros con un tama1o de diámetrodeterminado.

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• Cuando se +ace pasar una mezcla demoléculas de distinto tama1o! a travésde una columna de "ltración en gel2

aquellas moléculas con un tama1o ma#orque el diámetro de los poros de laspartículas! sólo podrán moverse en sucamino! a través de la fase estacionaria!en el espacio que queda entre laspartículas2 # por lo tanto! no se veránretrasadas en su descenso.

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• En cambio aquellas moléculascapaces de penetrar en las partículasse verán retrasadas por la fase

estacionaria2 en ma#or medida!cuanto menor sea su tama1o. or lotanto! las moléculas elu#en en este

tipo de cromatografía por ordendecreciente de tama1o molecular.

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$ecanismo de la cromatografía deexclusión

Las mallas del gel permiten la entrada selectiva de laspartículas de menor masa molecular. *e a+í que las partículas

de ma#or peso molecular salgan primero.