cromatografía de partición
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Cromatografía de partición
• María del Rocío Bautista Paredes• Dante Estrada Castro• Sabine Schauer Cué • Cecilia Silva Magaña
1941
Iniciaron el uso de la cromatografía de reparto o
partición.
1952
Recibieron el premio nobel de química por el desarrollo
de la cromatografía de partición.
¡Un poco de historia!
¿Que es?
Se caracteriza por una FASE ESTACIONARIA líquida anclada en un SOPORTE SOLIDO y una FASE LÍQUIDA MOVIL.
Ambas fases son inmiscibles.
Columnas de tipo liquido-liquido
Los líquidos se mantenían en su lugar mediante
adsorción liquida.
Columnas de Fase Liquida Unida
Los líquidos están ligados n enlace por un enlace tipo
iónico.
Provocando rellenos muy estables e insolubles en la
fase móvil.
El soporte solido por lo general es gel de sílice.
• Solidos formados por partículas mecánicamente resistentes, porosas y uniformes con diámetros de 3 a 5 µm.
• La fase de sílice totalmente hidrolizada (por calentamiento con HCl 0.1 M durante 1 o 2 días) esta constituida por grupos silanol químicamente reactivos.
• Los grupos silanol se transforman con organoclorosilanos en grupo siloxanos , lo que proporciona una fase liquida estacionaria técnicamente estable y difícil de hidrolizar en condiciones normales.
Un componente de la mezcla se va desplazando por la columna
depende de su
FASE ESTACIONARIA (F.E.)
Soluble
Lento
FASE ESTACIONARIA (F.E.)
Puede modificarse en función de lo que esté unido a la
superficie de sílice (éteres, nitrilos, aminas alifáticas).
En función
Fase normal
Fase inversa
Permite disponer de F.E. selectivas.
• Cromatografía en fase normal.
La F.E. está constituida por un líquido de carácter POLAR (trietilenglicol, agua).
Como FASE MÓVIL (F.M.) se emplean disolventes relativamente no polares (hexano, éter isoproílico).
Mezcla polar/no polar
El componente menos polar es el primero que se detecta.
Soluble F.E.
Tiempo de eluciónSe utiliza para la separación
de compuestos muy polares .
• Cromatografía en fase inversa. La F.E. está constituida por un líquido de carácter NO
POLAR (usualmente hidrocarburo).
Como F.M. se emplean mezclas de agua con disolventes polares miscibles, como metanol o acetonitrilo .
El componente más polar es el primero que se detecta.
Soluble F.E.
Tiempo de elución
Se emplea para la separación de mezclas de compuestos de polaridad baja.
• La mayor parte de las separaciones por cromatogarfía de líquidos se realizan en esta fase.
• Empaquetado: Octil u octodecilsiloxano
• Fase Móvil: Disolución acuosa con contenido variable de un disolvente (metanol, acetonitrilo o tetrahidrofurano)
C8 H17- / C18 H37-
FASE NORMAL FASE INVERSA
F. E. POLAR F. E. NO POLAR
F.M. NO POLAR F. M. POLAR
Elución: Menos polar 1° Elución: Más polar 1°
Separación de comp. POLARES Separación de comp. NO POLARES
Stock, R. Chromatographic Methods, Chapman and Hall and Science Paperbacks, 1974 p.p. 42
Establecimiento del Método
• Acetonitrilo• Hexano• Dioxano
Cuando la fase móvil es líquida, los componentes de la muestra interaccionan
con la fase móvil y la estacionaria; por ejemplo:
Polaridad ascendente grupos funcionales
Hidrocarburos
La polaridad de la fase estacionaria apenas se debe parecer a la de los analitos y para la elución se utiliza entonces una fase móvil
considerablemente distinta
La fuerza del solvente depende de la naturaleza del analito y de la fase estacionaria (por lo
regular polares
Índice de Polaridad de Snyder
Índice de polaridades es una mezcla de solventes de A y B
Donde y son los indices de polaridad de los dos solventes y y son las fracciones en volumen de cada uno de los solventes A y B
APLICACIONES DE LA
CROMATOGRAFÍA DE REPARTO
Fármacos
Bioquímica
Productos alimenticios
Productos de industria química
Propulsores
Contaminantes
Ciencias forenses
Química clínica