7/17/2019 Conocimiento y Manejo Del Espectrofotómetro

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Conocimiento y manejo del espectrofotómetro

Knowledge and use of Spectrophotometer

Carrillo Briones Alberto; Cárdenas España Diego Armado ; Mejía Velázquez Yaena, ;

Pérez Méndez Rigoberto, Jazmín

RESUMEN.

En esta práctica se realizó el manejo de diferentes espectrofotómetros; análogos visibles y digitales, para larealización de identificación y cuantificación de diversas sustancias, en este caso se utilizó como muestra

 problema CuSO4 y muestra patrón H2O. La espectroscopia de absorción de basa en ver las longitudes de

onda particulares de la luz que se absorben por moléculas que están en la trayectoria del haz. Por otra parte setomó lectura de diferentes longitudes de onda, así como su absorbancia y transmitancia, finalizando con lacomparación de los datos con los diferentes espectrofotómetros.

Palabras claves: espectrofotómetro, espectroscopia, muestra problema.

INTRODUCCION:

Las espectroscopias ópticas están entre los

métodos físicos más usados en investigaciónde estructuras moleculares, análisiscuantitativo y cualitativo. Una gran ventaja delos métodos es que no son destructivos porello nos permite estudiar estructuras químicasy biológicas en condiciones iguales ocercanas a las condiciones naturales, ademásnos permite trabajar con cantidadessumamente pequeñas.

La Espectrofotometría es una de las técnicasexperimentales más utilizadas para ladetección específica de moléculas. Se

caracteriza por su precisión, sensibilidad y suaplicabilidad a moléculas de distintanaturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc)y estado de agregación (sólido, líquido, gas).

Los fundamentos físico-químicos de laespectrofotometría son relativamentesencillos. Las moléculas pueden absorberenergía luminosa y almacenarla en forma de

energía interna. Esto permite que se inicienciclos vitales de muchos organismos, entreellos el de la fotosíntesis en plantas y bacterias. La Mecánica Cuántica nos dice quela luz está compuesta de fotones cada uno delos cuáles tiene una energía:

Efotón = h⋅ ν = h⋅c/λ  

La espectroscopia de absorción se basa en laslongitudes de onda particulares de la luz quese observan por moléculas que están en latrayectoria de haz. Los primeros instrumentosespectroscópicos fueron diseñas para laregión visible y en consecuencia recibieron ladenominación de instrumentos ópticos.

Los espectros de absorción se midenmediante un instrumento denominadoespectrómetro. Los instrumentos que vamos ausar en esta práctica constan de una fuente deluz “blanca” caracterizada por un espectro deemisión continuo en un intervalo amplio delongitudes de onda (en nuestro caso 325 nm-900 nm) y de un monocromador que actúacomo filtro óptico transmitiendo un haz de

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luz de longitud de onda fija λ e intensidad I0.Este haz de luz penetra en la cubeta deanálisis donde se encuentra la muestra. Undetector sensible a la luz mide la intensidaddel haz a la salida.

METODOLOGÍA Y MATERIA.

1.- Se utilizaron tres soluciones de CuSO4 al0.1N, 0.05 N y una solución desconocida paraconocer su absorbancia

2.- previo se encendió el espectrómetro y secalentó por 20 minutos hasta obtener un haz de luzconstante

3.- se seleccionó una longitud de onda de 540nm.

4.- se ajustó a cero la transmitacia con la perillaintroduciendo una porta cubetas con aguadestilada (blanco).

5.- se retiró el blanco y se introdujo la celda con

CuSO4 al 0.1 N. (hacer la lectura con 0.05 y ´´x´´repitiendo los pasos anteriores).

6.- se tomó lectura de absorbancia y transmitancia,después se casó la muestra del contenedor y sevolvió a repetir los pasos para las siguientes

 pruebas. La longitud de onda fue de 550 y 560

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RESULTADOS Y DISCUSIONES.

En la práctica realizada se demostró que laabsorbancia y la concentración sondirectamente proporcionales. También secomprobó en base a los resultados obtenidos,que para una sustancia (en término deconcentraciones molares), a medida que unadisolución se encuentra más diluida, es decir,está a menor concentración la Absorbancia esmenos, en otras palabras a mayorconcentración de una disolución mayor esla Absorbancia.

Así mismo el conocer el adecuado uso delespectrofotómetro permitió obtener en ellaboratorio resultados con una calidadanalítica en las mediciones que son emitidas por éste. Se identificó que el equipo presenta

una adecuada precisión y exactituddeterminando que las mediciones realizadasen este pueden ser confiables. 

Debido a que el sulfato de cobre presenta una

rango de 550 en el espectrofotómetro, se puedo cuantificar su absorbancia y sutransmitancia en un rango emitido de 540 a560 y así poder comparar los datos en lagráfica y concentraciones fueron de 0.1 N Y0.05 N, estos datos arrojaron unasignificativa diferencia debido a sus

diferentes concentraciones.

CONCLUSIONES.

Con los resultados obtenidos en el análisis de

los dos espectrofotómetros que son el análogo

visible y el electrónico hubo una variacióndebida que el electrónico arrojo los valoresmás precisos en comparación del manual porque a hay una interferencia con el entornoy a la hora de tomar la lectura. 

Espectrofotómetro análogo visible CuSO4

Espectrofotómetro eléctrico (digital )

Bibliografía

Materiales (espectrofotometría)

http://materias.fi.uba.ar/6305/download/Espectrofotometria.pdf  

Onda

540 0.05 M

0 absorbancia

100 transmitancia

0.1 M

0.05 absorbancia

99 transmitancia

Desconocido

0.4 absorbancia

91 transmitancia

Onda 540

0.1 M sulfato de

cobre

0.1 absorbancia

98 transmitancia0.5 absorbancia

89 transmitancia

0.05 M sulfato de

cobre

0.05 absorbancia

99 transmitancia

Onda

560

0.05 M

0.05 absorvancia99 transmitancia

0.01 M

0.01 absorvancia

0.02 98 transmitancia

Desconocido

0.6 absorvancia

87 transmitancia

Onda

550

Desconocido

78.5 transmitancia

- 0.075 absorvancia

0.1M

- 0.168 absorvancia

96.8 transmitancia

0.05 M

- 0.156 absorvancia96.2 transmitancia

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Bioquímica espectrofotometría

Laboratorio. 2010.

http://www.bioquimica.dogsleep.net/Laboratorio/Plummer/Chp04.pdf  

Química Analítica Cuantitativa, Dayand Underwood. Química Analítica,

Skoog and West. Análisis

Instrumental, Douglas R. Skoog and

Donald M. West. 

Quimica II . 2010Espectrofotometriafile:///C:/Users/pedro/Downloads/Guia_TP_2_Quimica_II_2010.pdf