comparación de la acción bactericida de hipoclorito de sodio y microcyn 60 uo091b

7/23/2019 Comparacin de La Accin Bactericida de Hipoclorito de Sodio y Microcyn 60 Uo091b

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Facultad de Odontologa

13, Nm. 1 Marzo 2009

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evista Odontolgica Mexicana

TRABAJO ORIGIN

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SUMEN

ropsito del presente trabajo fue evaluar la capacidad antimi-biana del agua superoxidada (Microcyn 60) sobre cepas bac-anas que segn los reportes de la literatura son causantesracasos endodnticos (E. fecalis, P. aeruginosa) y adems

utiliz el B. subtiliscomo comparativo, se utilizaron para esteudio las pruebas de concentracin mnima inhibitoria (MIC) yde difusin en agar utilizando el agua superoxidada a con-traciones normales y se compararon con concentracioneshipoclorito de sodio al 2.5 y 5%, los resultados obtenidos fue-analizados a travs de una prueba ANOVA con un de

5, los resultados obtenidos fueron que el agua no tiene nin-efecto antimicrobiano sobre estas cepas bacteriolgicas.

ABSTRACT

The aim of this study was to evaluate the antimicrobial capacof super oxygenated water (Microcyn 60) on bacterial strathat according to literature reports are the cause of endodonfailure (E. fecalis, P aeruginosa); B. subtiliswas used as a ctrol. For this study The Minimum inhibitory concentration teand the agar diffusion tests were used utilizing super oxygened water at normal concentrations, and then the results wecompared with those utilizing sodium hypochlorite at 2.5 and 5 The results of this study showed that superoxidized water hnon antimicrobial effect over the strains used in this study.

abras clave:Irrigantes de conductos, MIC, difusin en agar, E. fecalis, P. aeruginosa yB. subtilis.y words:Root canal irrigators, MIC (Minimum inhibitory concentration tests), agar diffusion, E. fecalis,P. aeruginosay B subtilis.

Comparacin de la accin bactericida de hipoclorito de

sodio y Microcyn 60Fabiola Haidee Snchez Ruiz,* Alberto Taketoshi Furuya Meguro,Salvador Arroniz Padilla,

Abel Gmez Moreno,Luciano GmezII

* Egresada de la Especializacin en Endoperiodontologa FIztacala UNAM. Profesores de la Especializacin en Endoperiodontolog

FES Iztacala UNAM.II Profesor de la Facultad de Qumica UNAM.

INTRODUCCIN

El principal factor etiolgico en la enfermedad en-dntica es de origen bacteriano, fundamentalmen-empieza por la caries dental que es una enferme-d microbiana de los tejidos calcificados del diente,acterizada por la desmineralizacin de la porcinrgnica y la destruccin de la porcin orgnica delnte.1

Si el proceso carioso no es detenido a tiempo, va aar el paquete vasculonervioso y va a causar desdesimple fenmeno hiperreactivo hasta necrosis pul-

r con o sin afeccin apical. Otra forma de infeccinla pulpa dental es a travs de los conductos latera-y accesorios.

Actualmente se sabe que la microbiota de la enfer-dad endodntica es muy extensa, se ha encontra-una flora que puede sobrepasar a ms de 400 es-cies.2 Es por este motivo que se necesita laizacin de los agentes irrigantes para poder elimi-

r o disminuir la flora existente en los conductos ra-ulares.Los irrigantes endodnticos ayudan a la asepsia deconductos radiculares de diversas formas, princi-

palmente por su accin mecnica de arrastre, conque se eliminan gran cantidad de detritus dentinariobacterias, dependiendo de la sustancia activa que utilice, la accin de los mismos puede ser sanitizano germicida.

Los requisitos ideales con los que debe cumplir irrigante son:3

1. Limpieza o arrastre fsico de trozos de pulpa, sa

gre lquida o coagulada, virutas de dentina, plasmexudados, restos alimenticios, etc., con el fin evitar el taponamiento del conducto.

2. Disolucin de agentes orgnicos e inorgnicos dconducto radicular, incluyendo la capa de desecque se produce en la superficie de la dentina poraccin de los instrumentos y se compacta al intrior de los tbulos dentinarios.


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Snchez RFH y cols. Comparacin de la accin bactericida de hipoclorito de sodio y Microcyn

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Accin antisptica o desinfectante, y lubricantepara evitar la ruptura de los instrumentos endodn-ticos.Accin blanqueante, debido a la presencia de ox-geno liberado.

Diversas sustancias han sido usadas a lo largo dehistoria tratando de obtener la solucin idnea pararar este fin y tenemos fundamentalmente las si-entes.Soluciones qumicamente inactivas: Solucin sali-agua, soluciones anestsicas.

Soluciones qumicamente activas: Enzimas: es-ptoquinasa, estreptodornasa, papana enzymol ysina. cidos: a. fosfrico al 50%, a. sulfrico al

%, a. ctrico de 6 a 50%, a. lctico al 50%, a. clor-rico al 30%.

lcalis: Hidrxido de sodio, hidrxido de potasio,rxido de calcio en agua (agua de cal), urea, hi-clorito de sodio de 0.5 a 5.25%. Agentes quelan-: sal disdica del cido etilendiaminotetraactico10 al 15% (EDTA), sal disdica del cido etilen-

minotetraactico con perxido de urea (RC-Prep),disdica del cido etilendiaminotetraactico con

tavlon o bromuro de cetil-trimetilamonio (EDTAC),etato de bisdequalinium (Salvizol), largal ultra.Agentes oxidantes: perxido de hidrgeno al 3% yxido de urea (Gly-Oxide).Agentes antimicrobianos: clorhexidina del 0.2 al. Detergentes: lauril sulfato sdico (tergentol).Tambin se han utilizado otras soluciones comoramina T al 5%, yodopax al 0.4%, biosept al 0.1%ibitane al 0.1%.De todos estos diversos agentes mencionados, nin-no ha sido tan eficaz como la solucin de hipoclori-de sodio al 5.25%.4

El hipoclorito de sodio es el irrigante que ha demos-do a travs de los aos y de diferentes estudios

ntficos ser el ms efectivo de todas las sustan-s irrigadoras, posee un amplio poder bactericida, yems de esto tiene la capacidad de disolver el teji-tanto pulpar vivo como necrtico; esta propiedad

ra la mayora de tratamientos endodnticos repre-nta una gran ventaja.

Hipoclorito de sodio: Las propiedades desinfec-tes del cloro fueron primero reconocidas a co-

enzos del siglo XIX. El hipoclorito de sodioaOCl) fue primero recomendado como una solu-

n antisptica por Henry Dakin para la irrigacinheridas para los soldados en la Primera Guerrandial. Posteriormente, en 1920, se describi laucin de Dakin, 0.5% NaOCl, en la terapia endo-

dntica. El NaOCl es an el irrigante ms utilizaden la endodoncia moderna por sus propiedades anbacterianas, lubricativas, y disolvente de tejido. hipoclorito de sodio es una sal formada de la unide dos compuestos qumicos, el cido hipocloroy el hidrxido de sodio, que presenta como caract

rsticas principales sus propiedades oxidantes. frmula qumica de este compuesto es la siguienNaOH + Col = NaOCl.

El hipoclorito de sodio es hipertnico (2,800 mOmol/kg) y muy alcalino (ph = 11.5 a 11.7). La actividsolvente, y las propiedades antimicrobianas son dedas primariamente a: a) la habilidad del hipoclorito sodio de oxidar e hidrolizar las protenas celulares, la liberacin de cloro, para formar cido hipoclorosoc) a largo plazo, su habilidad osmtica de extraer

quidos fuera de las clulas.5Ventajas:Los beneficios que proporciona el hip

clorito de sodio como irrigante durante la terapia enddntica son: efectividad para eliminar el tejido vitano vital, con un amplio efecto antibacteriano, destryendo bacterias, hongos, esporas y virus,6es exclente lubricante y blanqueador, favoreciendo la accide los instrumentos, posee una tensin superficbaja, vida media de almacenamiento prolongada, y poco costoso.6En algunos estudios se ha demostraque la capacidad de penetracin de este irrigante los tbulos dentinales, depende directamente de concentracin utilizada.

Desventajas:Es un agente irritante, citotxico pael tejido periapical7el sabor es inaceptable por los pcientes, y por s solo no remueve el barro dentinarya que slo acta sobre la materia orgnica de la ppa y la predentina.8

Mecanismo de accin:Su uso en clnica es gneralizado en concentraciones que van desde 0hasta 5.25%. El proceso qumico por el cual

NaOCl realiza su accin antimicrobiana ocurre cuado entra en contacto con las protenas tisulares, hciendo que se formen hidrgeno, formaldehdoacetaldehdo. Las cadenas peptdicas se romppara disolver las protenas; en este proceso el hdrgeno es sustituido por el cloro con formacin dcloramina, que interviene directamente como antimcrobiano, ya que interfiere en la accin oxidaticelular con inactivacin enzimtica irreversible endegradacin de lpidos y cidos grasos; de esmodo se disuelve el tejido necrtico y el NaOCl p

netra y limpia mejor las reas infectadas.9La concentracin del NaOCl es otro factor impotante en el deterioro de las soluciones. Las solucnes que contienen 5% disponible de cloro han d


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strado rpida descomposicin a 24 C. Sin embar-similares encuentros no fueron observados en so-

iones al 0.5. El Microcyn 60 fue desarrollado por Oculus Ino-ive Sciens y su filial Oculus Technologies dexico, es una solucin superoxidada, es procesada

n agua purificada y cloruro de sodio, libre de cloronos de 10 pp de slidos disueltos, es procesada avs de electroqumica o proceso de oxidacin-re-ccin. Esto es comnmente sealado como unaaccin electroltica o reaccin redox, donde laerga elctrica es utilizada para producir cambiosmicos en la solucin acuosa (en este caso, elua altamente purificada libre de cloro).10

El agua purificada y la sal (NaCl) son los nicosteriales que se incluyen en su proceso de produc-n.El resultado final de este proceso es agua alta-

nte oxidada, con ph neutral (7.2 - 7.6) con cantida-s controladas de iones de radicales libres.11,12

Lo que nos ofrece es un tiempo de antisepsia de altoel en 60 segundos eliminando una gran variedad decterias Gram+ y Gram- y en 15 minutos una esterili-cin completa eliminando virus, hongos y esporas.13

Frmula de Microcyn 60

Sodio ..........< 55 partes por millnCloro .......... < 80 partes por millnHClO .......... H2O2 Perxido de hidrgeno

(agua oxigenada)ClO .......... O3 Oxgeno trivalenteCl .......... O2 Oxgeno divalenteEl rango de ph (alcalinidad) de Microcyn 60 es 6.4 a

Dentro de los estudios odontolgicos del uso del Mi-cyn 60 se ha reportado que tiene buenos resultadosla esterilizacin y lavado de instrumental utilizando el

ado ultrasnico, se reporta tambin el uso de Micro-n 60 como colutorio en periodoncia con magnficos re-tados, y adems de que no causa irritacin ni irritan-adems se ha reportado su uso como agente irrigantecanales radiculares con magnficos resultados.13

Metodologa: El presente trabajo consisti en compro-la efectividad antimicrobiana del Microcyn 60 (solu-

n superoxidada) y el hipoclorito de sodio al 2.5 y 5%bre Enterococcus fecalis(ATCC 29212), Pseudomonasruginosa(ATCC 27853) y Bacilo subtilis (ATCC 6633),ase experimental fue dividida en dos etapas: la prime-

fue la de concentracin mnima inhibitoria (CMI), endos etapas se estandarizaron los microorganismos aescala de McFarland de 0.5 (Figura 1). Para posterior-nte efectuar la CMI utilizando el mtodo de ELISA.

Los medicamentos fueron diluidos a las siguientconcentraciones: 1:1, 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:hasta la dilucin 1:128.

Efectuado el procedimiento anterior se realiz prueba en la placa de ELISA (Figura 2).

En la placa se colocaron 100 microlitros de cu

vo de la Pseudomonas aeruginosa, Enterococcfecalisy Bacilo subtilis que fueron agregados apozos, los primeros 8 fueron tomados para problas diluciones mnimas inhibitorias (CMI) del Micrcyn 60 y el ltimo pozo fue llenado con Microcyn al 100%. El mismo procedimiento fue efectuadpara el hipoclorito de sodio al 2.5 y 5 %. Posteriomente estos cultivos se llevaron a la incubadora37 C por 24, 48 y 72 horas.

Tubo Lectura en nefelmetro Unidades Kle

5 35 17,500

FASE II EXPERIMENTAL

Prueba de difusin en agar. (Sensidiscos)

Para la realizacin de esta prueba se utilizar3 cajas de Petri con agar sangre, adems las su

Figura 1.Calibracin con el nefelmetro de McFarlacuya turbidez debe ser igual a la del tubo 0.5 de la escade McFarland.


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nsiones de las bacterias Pseudomonas aerugi-sa, Enterococo fecalis, y Bacilo subtilis. En unampana de flujo laminar se procedi hacer unambra masiva, utilizando un hisopo estril embe-o de la suspensin de las Pseudomonas aerugi-

sa, el cual es frotado en el agar sangre impregnan-

todas las superficies del cultivo, y posteriormentecolocaron 3 sensidiscos de 5 mm en tres puntosparados, los cuales fueron impregnados con 30crolitros de cada medicamento de la siguientenera:

En el primer sensidisco se coloc el Microcyn 60 En el segundo sensidisco el hipoclorito de sodio

2.5% En el tercer sensidisco hipoclorito de sodio al 5

(Figura 3).

Lo mismo se realiz en la segunda caja con el Eterococo fecalis y la tercera con Bacilo subtilis.Una vez efectuado este procedimiento, se llev

ron las cajas a una estufa de cultivo a una tempertura de 37 C por 24 horas, al trmino de este tiepo se midi el tamao de los halos de inhibicin dcada uno de los sensidiscos, con una regla y anotaron en la bitcora, con estos datos se efecturon los datos estadsticos de Anova al 0.05.

RESULTADOS

Pseudomonas aeruginosa

A las 24 horas

Microcyn Hipoclorito de Hipoclorito No. pozo 60 sodio 2.5%: sodio 5%

1 dilucin 1:1 + 2 dilucin 1:2 + +

3 dilucin 1:4 + + +4 dilucin 1:8 + + +5 dilucin 1:16 + + +6 dilucin 1:32 + + +7 dilucin 1:64 + + +8 dilucin 1:128 + + +9 sin dilucin +

A las 48 horas


1 dilucin 1:1 + 2 dilucin 1:2 + + 3 dilucin 1:4 + + +4 dilucin 1:8 + + +5 dilucin 1:16 + + +6 dilucin 1:32 + + +

7 dilucin 1:64 + + +8 dilucin 1:128 + + +9 sin dilucin +

ura 2.Preparacin por el mtodo de ELISA.

ura 3.Tres sensidiscos de 5 mm en tres puntos sepa-os, impregnados con 30 microlitros de cada medica-nto.


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as 72 horas estos fueron los cambios:

Microcyn Hipoclorito de Hipoclorito de. pozo 60 sodio 2.5%: sodio 5%

ilucin 1:1 + +

ilucin 1:2 + + + ilucin 1:4 + + + ilucin 1:8 + + +ilucin 1:16 + + +ilucin 1:32 + + +ilucin 1:64 + + +ilucin 1:128 + + + in dilucin +

la prueba del Bacilo subtilis los resultados a las 24ras son los siguientes:

cilo subtilis

as 24 horas


ilucin 1:1 +

ilucin 1:2 + + +ilucin 1:4 + + +ilucin 1:8 + + +ilucin 1:16 + + +ilucin 1:32 + + +ilucin 1:64 + + +ilucin 1:128 + + +in dilucin +

as 48 horas los resultados fueron los siguientes:


ilucin 1:1 + + ilucin 1:2 + + + ilucin 1:4 + + + ilucin 1:8 + + +ilucin 1:16 + + +ilucin 1:32 + + +

ilucin 1:64 + + +ilucin 1:128 + + + in dilucin +

A las 72 horas s hubo cambios:


1 dilucin 1:1 + + +

2 dilucin 1:2 + + +3 dilucin 1:4 + + +4 dilucin 1:8 + + +5 dilucin 1:16 + + +6 dilucin 1:32 + + +7 dilucin 1:64 + + +8 dilucin 1:128 + + +9 sin dilucin + + +

En la prueba del Enterococo fecalis los resultadfueron los siguientes:

Enterococo fecalis

A las 24 horas


1 dilucin 1:1 +

2 dilucin 1:2 + + 3 dilucin 1:4 + + +4 dilucin 1:8 + + +5 dilucin 1:16 + + +6 dilucin 1:32 + + +7 dilucin 1:64 + + +8 dilucin 1:128 + + +9 sin dilucin +

A las 48 horas los resultados fueron los mismos:Microcyn Hipoclorito de Hipoclorito

No. pozo 60 sodio 2.5%: sodio 5%

1 dilucin 1:1 + 2 dilucin 1:2 + + 3 dilucin 1:4 + + +4 dilucin 1:8 + + +5 dilucin 1:16 + + +6 dilucin 1:32 + + +

7 dilucin 1:64 + + +8 dilucin 1:128 + + +9 sin dilucin +


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ESTE DOCUMENTO ES ELABORADO POR MEDIGRAPH

as 72 horas s hubo cambios:


ilucin 1:1 + + +

ilucin 1:2 + + + ilucin 1:4 + + + ilucin 1:8 + + +ilucin 1:16 + + +ilucin 1:32 + + +ilucin 1:64 + + +ilucin 1:128 + + + in dilucin + + +

Nota: Ante la falta de inhibicin del Microcyn 60, se re-piti la prueba para tener mayor certeza de que los re-

sultados eran correctos.Todos los controles fueron positivos.

RESULTADOS DE LA FASE II

En esta fase se midieron los halos de inhibicin:

Pseudomonas aeruginosa

A las 24 horas:

Microcyn 60: No tuvo halo de inhibicinHipoclorito de sodio al 2.5%: Tuvo 12 mm de dimetroHipoclorito de sodio al 5%: Tuvo 13 mm de dimetro

A las 48 horas:


A las 72 horas:


Bacilo subtilis

A las 24 horas:


A las 48 horas:

Microcyn 60: No tuvo halo de inhibicinHipoclorito de sodio al 2.5%: Tuvo 9 mm de dimetHipoclorito de sodio al 5%: Tuvo 10 mm de dimetro

A las 72 horas:

Microcyn 60: No tuvo halo de inhibicinHipoclorito de sodio al 2.5%: Tuvo 8 mm de dimetHipoclorito de sodio al 5%: Tuvo 10 mm de dimet

Enterococo fecalis

A las 24 horas:

Microcyn 60: No tuvo halo de inhibicin

Hipoclorito de sodio al 2.5%: Tuvo 10 mm de dimetHipoclorito de sodio al 5%: Tuvo 11mm de dime

A las 48 horas:

Microcyn 60: No tuvo halo de inhibicinHipoclorito de sodio al 2.5%: Tuvo 10 mm de dimetHipoclorito de sodio al 5%: Tuvo 11mm de dime

A las 72 horas:


ANLISIS DE RESULTADOS

El Microcyn 60 tanto a concentraciones mnimas hibitorias como a concentraciones al 100% no tuvo ngn efecto bactericida sobre las bacterias Pseudomnas aeruginosa, Bacilo subtilis y Enterococo fecalis.

El hipoclorito de sodio al 5% en la dilucin 1(2.5%) fue efectivo con todas las bacterias y en caso de las Pseudomonas aeruginosasu efectividdur hasta 72 horas, cosa que no sucedi con el Enrococo fecalis y el Bacilo subtilis cuyo periodo efectividad fue durante 48 horas.

El hipoclorito de sodio al 5% a concentracin 1(1.25%) las Pseudomonas aeruginosatuvieron efeto hasta las 48 horas, en el caso del B. subtilis slas primeras 24 horas tuvo efecto esta concentrcin y para el E. fecalistuvo efectividad hasta l

48 horas.En el hipoclorito de sodio al 2.5% en la concentrcin 1:1 (1.25%) fue efectiva su accin bactericipara las P. aeruginosahasta las 48 horas en el ca


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B. subtilisslo las primeras 24 horas tuvo efecto yra el E. fecalistuvo efecto 48 horas.El hipoclorito de sodio al 2.5% a concentracin 1:2625%) no tuvo efecto bactericida sobre ninguna debacterias aun en las primeras 24 horas.

Fase II experimental

Debido a los resultados negativos del Microcyn 60procedi a realizar una prueba t de Student, conalfa de 5 grados de libertad entre el hipoclorito de

dio al 5% y el hipoclorito de sodio al 2.5% no en-ntrndose diferencia significativa entre ambas so-iones.

DISCUSIN

Segn el Dr. Miguel ngel Flores Martnez en suculo publicado en la pgina http://odontologia-ine.com/cgi-bin, demostr efectividad antibacteria-del Microcyn 60 en la esterilizacin de instrumen-endodntico, obteniendo resultados favorables,

ems pregona su utilizacin con buenos resulta-s como irrigante pulpar, cosa con la cual nosotrosestamos de acuerdo, ya que las pruebas efectua-s en este trabajo no se les comprob efectividadcteriolgica en ninguna de las pruebas realizadas,to al instrumental como a la muestra extrada del

nducto.Aunque en nuestro experimento usamos grme-s que se han reportado como causantes de fraca-s endodnticos (P. aeruginosay E. fecalis) y elntrol (B. subtilis) consideramos que de alguna for- el Microcyn 60 tena que dar resultados positi-

s, cosa que no sucedi, por lo que consideramose el Microcyn 60 no debe ser utilizado como irri-nte de conductos.Con respecto a la accin bactericida del hipoclorito

sodio encontramos los mismos resultados que elBaumgartner y Mader, ya que en este estudio utili-ndo una prueba estadstica de t de Student no exis-diferencia significativa entre la accin antimicrobia-al 2.5 y al 5%, por lo que ambas concentraciones

eden ser utilizadas con plena confianza como irri-nte de conductos.

CONCLUSIONES

El Microcyn 60 no tiene efectos bactericidas a nin-

na concentracin sobre estas bacterias.El hipoclorito de sodio sigue siendo un irrigantecaz tanto a concentracin de 2.5% como a con-ntracin de 5% esto fue ampliamente comprobado

tanto a concentraciones normales como en dilucnes (CMI).

El Bacilo subtilis result ser poco susceptiblehipoclorito de sodio, ya que las concentraciones mnimas requeridas fueron de 2.5 y 5%, y su efecslo fue las primeras 24 horas, el hipoclorito de s

dio en concentraciones frescas y bien conservapuede mantenerse hasta 72 horas con buenos restados, si a concentraciones mnimas inhibitoriest dando resultado sobre estos grmenes, entoces los podemos usar con confianza en el tratmiento de conductos.

Con los resultados obtenidos en esta investigcin concluimos que aun con los efectos irritantque causa el hipoclorito de sodio sobre los tejidblandos y sus limitantes en el uso de tratamientendodnticos, los efectos bactericidas ofrecidos p

ste en sus diferentes concentraciones y tiempsobrepasan en mucho a los resultados obtenidpor parte del Microcyn 60, lo que nos hace deduque el Microcyn 60 no es un buen candidato a susado como irrigante en la preparacin de condutos, porque aunque tenga cualidades como baja tesin superficial y un ph neutro sus capacidadbactericidas no lograran el objetivo que necesitmos para contrarrestar la carga bacteriana posiben un conducto radicular.

REFERENCIAS

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Direccin para correspondencia:Mtro. Alberto Furuya MeguroTel. [email protected]

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