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Mediciones de pH más rápidas y coherentesHerramientas y técnicas que agilizan el trabajo

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Solu

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estándar para la medición precisa que lleva ya en práctica más de 65 años. Con un instrumento de alta cali-dad, un sensor adecuado y una buena técnica, su sistema de me-dición logrará resultados extraor-dinariamente precisos y exactos en ensayos de alto rendimiento, microvolúmenes y complicados

Acelerando la investigaciónEl control de la variabilidad es la clave

El control de pH en las muestras y los reactivos es esencial para conseguir resultados precisos y repetibles.

Los sistemas biológicos son tan sensibles, que cambios aparente-mente insignificantes en su entorno pueden alterar sustancialmente su comportamiento y modificar los resultados. En METTLER TOLEDO, somos conscientes de la importancia del control de la variabilidad en los ex-perimentos y hemos establecido un

Visita virtual de ciencias de la vidaDesde I+D hasta la entrega del producto, la precisión cuentaPágina 4

Fiabilidad y reproducibilidadLas mediciones precisas requieren planificación y preparaciónPágina 6

Planifique el éxitoExiste una solución de medición específica para cada aplicación

Página 8

La calibración es fundamental¿Su medidor satisface sus necesidades?

Página 10

Interior

Selección del medidor

Selección del sensor

Sensor calibración

procesos químicos y al mismo tiempo asegurará el cumplimiento de conformidades reglamentarias. METTLER TOLEDO ofrece una am-plia gama de medidores de pH de calidad y una tecnología superior de sensores. Sea cual sea el desa-fío de medición al que se enfrente, contamos con las herramientas adecuadas para Usted.

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Medición de pHLa temperatura es un compo- nente determinante

Página 12

Soluciones de pH de METTLER TOLEDO:sencillamente fiables

¿Mide muestras pequeñas?Los microsensores de pH dan respuesta a sus necesidades

Página 14

Sensores semi-micro eficaces Pequeños, robustos, versátiles

Página 16

Control de la contaminaciónPara obtener resultados seguros

Página 18

4

Requisitos clave de pHExactitud y precisión Facilidad de uso del equipo de pHSoluciones de alto rendimientoAumento de la productividad

Riesgos y costes de erroresResultados positivos/negativos falsos

– Oportunidades perdidas– Candidatos que fallan en los ensayos

clínicosEquipo complejo:

– Baja eficiencia– Tiempo de formación largo del personal– Riesgo de errores

Mediciones de pH deficientes– Desperdicio de muestras

En cada fase del proceso de desarrollo de un medicamento, la medición con-lleva numerosos riesgos, cada uno de los cuales tiene un modo intrínseco de afectar negativamente en el tiempo la comercialización y la calidad general del producto. Todo, desde los soluciones para la cromatografía, la electrofo-resis y la enzimología, hasta la composición de los medios de cultivo y las tinciones, debe tener la exactitud precisa.

Famoso por su exactitud y precisión, METTLER TOLEDO ofrece una amplia gama de instrumentos de calidad que reducen los riesgos de las mediciones en cada fase de su proceso de producción.

I+D 1 millón de compuestos – ID obje-tivo, Validación del objetivo, Identi-ficación de leads, Optimización de lead

Visita virtual de ciencias de la vida

Desarrollo clínico

Control de calidad y de procesos

FabricaciónI+D

Desarrollo preclínico

Visi

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cien

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de

la v

ida Calidad para toda la vida útil

Precisión: de I+D hasta la producción

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Requisitos clave de pHExactitud y precisiónCompetencia y eficienciaTrazabilidad y repetibilidadFacilidad de uso del equipo de pH

Riesgos y costes de erroresResultados positivos/negativos falsos

– Ensayos clínicos en riesgo– Pérdida de eficiencia – Pérdida de tiempo en detección de

erroresDocumentación y administración de pH deficiente

– Incumplimiento de la normativa

Desarrollo preclínico100 compuestosFarmacología y toxicología

Requisitos clave de pH:Exactitud y precisiónTrazabilidad y repetibilidadExcelencia de usuarioConformidad con normativas

Riesgos y costes de errores:Efectos secundarios no detectados

– Retrasos en los tiempos de comercialización

– Repetición de series de ensayos completas

Falta de pruebas estadísticas– Retrasos en los tiempos de

comercialización– No aprobación de medicamentos– Vigilancia de todo el proceso

Desarrollo clínico3 compuestosFase I-III: Estudios de eficacia de medicamentos

Requisitos clave de pH:Máxima exactitud y precisiónEstricto control de calidadConformidad con normativasSin tiempos de inactividad

Riesgos y costes de errores:Errores de producción no detectados

– Retiradas de lotes del mercadoResultados no fiables de ensayos en control de calidad

– Parada de la producción o devoluciones de lotes

– Pérdida de imagen

Fabricación1 compuestoControl de calidad y de procesos

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Fiabilidad y reproducibilidadLas medidas precisas no se improvisan

Fiab

ilidad

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ltado

Técnica y mantenimiento correctosA menudo, los problemas de la medición electroquímica son consecuencia de una manipulación inade-cuada del sensor durante la calibración, el almacenamiento, el mantenimiento y el funcionamiento diario. La calidad de los tampones, la temperatura de la muestra, y las técnicas de llenado y almacenamiento también pueden incidir en los resultados.

El sensor adecuadoCon tantos tipos de sensores disponibles, elegir uno que mejor se adapte a su aplicación agilizará su tiempo de respuesta y producirá resultados más precisos. Con el sensor adecuado, se minimiza el tiempo de mantenimiento, se reducen los costes de laboratorio y se mejora la ergonomía.

Un medidor de calidadLa calidad del medidor electroquímico incide directamente en la reproducibilidad de los resultados. En la elección de un medidor deben tenerse en cuenta su precisión y ajustabilidad, su facilidad de uso, su resistencia al agua, su nivel de automatización y su capacidad para gestionar datos.

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Calibración y mantenimiento

correctos aumentan la coherencia y la fiabilidad.

Calibración del sensor

Elegir el sensor adecuado para la aplicación simplifica

la automatización y la conformidad y optimiza el flujo de trabajo.

Selección del sensor

Elija el medidor que más se ajuste al flujo de

trabajo completo.

Selección del medidor

Con el equipo adecuado para la aplicación y siguiendo una reglas básicas para la manipulación y la calibración del sensor, el sistema de medición elec-tromecánico puede ofrecer la máxima la exactitud y precisión posibles.

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• ¿Tienen estas soluciones tampón el valor correcto de pH? • ¿Tiene este medio de cultivo la composición correcta?• ¿Cuáles de estas áreas funcionales favorecen o dificultan el flujo de trabajo?

Las respuestas a preguntas como estas requieren una medición precisa de los parámetros electroquímicos.

Planifique el éxitoSoluciones para cada aplicación

Aplic

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Desafío Parámetro Solución

Calibración precisa pH, conductividad, ISE, ORP Página 10

Evitar o compensar los efectos de la temperatura

pH, conductividad, ISE Página 12

Recipientes de microvolume-nes, como placas de 96 poci-llos o tubos NMR

pH, conductividad Página 14

Recipientes altos, como tubos de ensayo o tubos de centrífuga

pH, conductividad, ORP Página 16

Evitación de la contaminación de la muestra de electrolito

pH Página 18

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Muestras pequeñasMuchos electrodos son grandes y la medición del pH en volúmenes pequeños puede ser complicada. Puede suceder que el electrodo desplace una cantidad relativa-mente grande de volumen o senci-llamente que no quepa en el tubo. METTLER TOLEDO ofrece una gama de microsensores y semimicro- sensores que evitan estos proble-mas (véanse las páginas 14–17).Algunas aplicaciones de volumen pequeño:• Análisis de muestras de ARN con

microarrays. • Análisis de muestras de ADN con

PCR • Análisis de muestras de proteí-

nas con inmunoprecipitación

Volúmenes grandes Los volúmenes en torno a 50 mL son, por lo general, más fáciles de medir, mientras que los volúmenes muy grandes, de 1 L o más, re-quieren más mezclado en el ajuste del pH. Si se remueve muy rápi-damente un líquido con la barrita de agitación, el valor de pH puede fluctuar; agite a una velocidad lenta pero constante. Los tampones y las aplicaciones de volumen grande incluyen: • Tampón citrato en inmuno- histoquímica • Tampón fosfato PBS en biología

celular • Tris HCl pH8,8 para geles de

acrilamida • Tampón TBE para electroforesis

Los análisis de las muestras tam-bién pueden verse afectados por el pH de las mismas. Por ejemplo, muchas muestras de proteínas se preparan con un pH bajo y des-pués se agrega un tampón neu-tra lizador para aumentar el pH a 7 antes de proseguir con el análisis. Con frecuencia, los volúmenes de estas muestras son de < 500 μL. Si se comprueba el pH después de un experimento, puede que haya sólo de 20 a 100 μL o menos.

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SevenExcellence™

Para laboratorios regulados y para los que necesiten una au-tomatización mas avanzada

SevenCompact™

Idóneo para el trabajo habitual de laboratorio

El medidor adecuado Optimice la exactitud y la precisión con un medidor que: … disponga de los límites de error

y rango de medición adecua-dos para sus aplicaciones.

… permita un rango lo suficien-temente amplio de puntos de calibración y algoritmo de cali-bración.

Es muy sencillo cometer errores en la calibración, pero siguiendo esta sencilla regla y, por supuesto, con el equipo adecuado, puede conseguir resultados altamente precisos.

La calibración es fundamental¿Su medidor satisface sus necesidades?

Med

idor

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Las soluciones de mantenimiento adecuadas Con un mantenimiento regular, au-mentará la precisión del medidor y prolongará su vida útil. METTLER TOLEDO ofrece muchas opciones de mantenimiento (adap-tadas a sus necesidades) para garantizar el funcionamiento fiable de su medidor.

… ofrezca el nivel adecuado de seguridad en cuanto a la ges-tión de usuarios, la protección con contraseña, etc.

… garantice la conformidad con la normativa y sus requisitos de automatización.

Busque el medidor que mejor se adapte a sus necesidades en www.mt.com/pH

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Para resultados de calibración perfectos • Utilice tampones nuevos. • Aplique las mismas condiciones

de agitación que para la propia medición.

• Elija la los estándares de cali-bración que abarquen el rango de medición previsto.

• Calibre y mida a la misma temperatura.

Específico para la conductividad • Utilice estándares de baja

conductividad, como 10 o 84 μS/cm, lo más rápido que pueda: reaccionan con el CO2.

• Evite las cargas electrostáticas del recipiente de medición.

• Evite las burbujas en el sensor.

Específico para ISE (electrodos selectivos de iones)• Utilice siempre la solución de

ajuste de la fuerza iónica (ISA) correcta con la concentración adecuada.

• Acondicione el ISE según las instrucciones de funcionamiento.

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Compensación manual de temperatura

La MTC es extremadamente pre-cisa, pero puede ser muy lenta. • Si conoce la temperatura de la

muestra (trabaja en un ambiente de clima controlado o las mues-tras acaban de salir del refrigera-dor), introduzca esta temperatura en los ajustes de medición del instrumento para corregir la se-ñal de pH (o conductividad).

• Si mide muestras de temperatu-ras diferentes, la MTC puede re-sultar muy lenta, porque el ajuste debe modificarse con cada cam-bio de temperatura.

Compensación automática de temperatura

La ATC funciona mejor con muestras de tamaño normal• Utilice un sensor con detector de

temperatura integrado y espere la señal estable. El medidor corrige automáticamente la señal de pH. La ATC funciona mejor en mues-tras de más de 10 mL.

• Cualquiera de los sensores InLab® tipo "Pro" (InLab® Micro Pro, Science Pro, Expert Pro) tiene un sensor de temperatura integrado, lo cual eliminará los errores en los valores de tem-peratura y la no detección de la misma.

• Si utiliza sensores sin sensor de temperatura integrado, utilice uno independiente.

Los resultados de pH solo son correctos si se tiene en cuenta la tempe-ratura de la muestra. Con esta sencilla pero eficaz regla para evitar consecuencias negativas de la temperatura, es fácil conseguir resultados precisos y reproducibles.

Medición de pHLa temperatura es un componente crítico

Efec

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Mida la muestra, no su sensor.Con muestras muy pequeñas, el sensor puede tardar tanto en al-canzar el equilibrio que la tempera-tura del sensor puede interpretarse incorrectamente como la tempera-tura de la muestra. La masa de la muestra es insignificante en com-paración con la masa del sensor; por lo tanto, es importante que se tome el tiempo necesario para ase-gurarse de que realmente mide la temperatura de la muestra.

Tecnología de sensores de METTLER TOLEDO:siempre tenemos en mente su aplicación

Guarde los sensores con la muestra.Asegúrese de que las temperaturas se correspondan almacenando el sensor con las muestras en el refrigerador o el incubador, o bien a temperatura ambiente. De este modo, garantizará la máxima pre-cisión, puesto que la membrana de pH, el sistema de referencia y la muestra estarán a la misma temperatura.

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Maravillas tecnológicas en miniatura Mientras en el sensor de conduc-tividad InLab® 751-4mm todavía consigue integrar una sonda de temperatura, los sensores micro pH son demasiado pequeños para poder incluir esta característica.

Cuanto más valiosa o rara es la muestra, mayor es el reto que presenta su análisis. Los nuevos microsensores de pH de METTLER TOLEDO se adaptan a todos los tamaños de contenedor de muestras, y son particularmente adecuados para las muestras valiosas y raras porque no es necesario utili-zar volúmenes mayores en el análisis electroquímico.

¿Mide muestras pequeñas?Los microsensores son la solución

Mic

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ones

Para asegurarse de que los posi-bles efectos de las temperaturas se corrigen de forma adecuada, siga los consejos y trucos que figuran en las páginas 12 y 13.

InLab® Micro – el clásico probado y de confianza

El InLab® Micro es perfecto para realizar mediciones del pH en viales profundos y tubos de cen-trifugadora gracias a su largo cuerpo de 60 mm. Rigurosa-mente probado y testado, mide con toda fiabilidad la mayoría de aplicaciones micro estándar. Se ha convertido en todo un clásico de la familia InLab® Micro.

El InLab® Nano mide el pH en volúmenes mínimos desde tan sólo 5 µL. Su aguja de acero no se rompe con facilidad a pesar de su diámetro súper pequeño de 1,7 mm. Su punta inclinada pro-tege la membrana de pH contra daños mecánicos, a la vez que permite perforar septos.

InLab® Nano – tecnología pH de vanguardia

InLab® Ultra-Micro – un micro sensor evolucionado

Comparado con el InLab® Micro, el cuerpo del sensor de este electrodo es más corto (40 mm) para facilitar su manejo y que haya menos roturas. El diafragma cerámico se encuentra más abajo para permitir tomar mediciones de muestras con volúmenes pe-queños desde tan sólo 15 µL.

15

Gracias a su diámetro de sólo 4 mm, el InLab® 751-4mm sigue integrando una sonda de tempe-ratura y corrige las lecturas de conductividad a una temperatura de referencia deseada. Para ob-tener unos resultados correctos, sumerja el sensor hasta la marca de nivel de inmersión mínimo que figura en la sonda.

InLab® 751-4mm – micro-con-ductividad con facilidad

Volumen mínimo de muestra de este tipo de contenedor específico

pH Conductividad

Diámetro de1,7 mm

Diámetro de3,0 mm

Diámetro de3,0 mm

Diámetro de4,0 mm

Tipo de envase InLab®

NanoInLab®

Ultra-MicroInLab®

MicroInLab®

751-4mm

Tubos de ensayo pequeños> 2 mL

50 μL 100 μL 200 μL 500 μL

Viales de reacción LiteTouch1,5 – 1,7 mL

20 μL 25 μL 65 μL 300 μL

Tubos de ensayo0,5 mL

20 μL 25 μL 65 μL 300 μL

Placas de 96 pocillos200 – 300 µL

10 μL 20 μL 45 μL 150 μL

Placas de 384 micro pocillos5 – 100 µL

5 μL 15 μL – –

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Solu

cion

es s

emi-m

icro

La utilización de semimicro-sensores es mucho más sencilla que la de los microsensores con tubos de ensayo y otros contenedores pequeños. El volu-men de la muestra sigue siendo relativamente pequeño y los sensores semi-micro de 5–6 mm de diámetro facilitan que el flujo de trabajo sea eficaz.

Pequeños, robustos, versátilesSensores eficaces semi-micro

InLab® Redox Micro – potencial de reducción de oxidación sencillo

Con InLab® Redox Micro, puede determinarse fácilmente el impor-tante factor en biología ORP (po-tencial reducido de la oxidación), también conocido como potencial redox. Este tradicional producto InGold está basado en el contras-tado y auténtico diseño de anillo de platino.

InLab® Micro Pro, con un sensor de temperatura integrado, admite la compensación de temperatura automática (véase la página 12). Provisto de un diámetro de eje de tan sólo 5 mm, es una obra maestra de la tecnología.

InLab® Micro Pro – pH corregido por temperatura

InLab® Semi-Micro – mediciones de pH sin mantenimiento ni contaminación

InLab® Semi-Micro contiene lo más nuevo en electrolitos de polímero: XEROLYT® EXTRA. Su mantenimiento y funcionamiento no pueden ser más sencillos gra-cias al electrolito y a la conexión de referencia abierta. Sin uniones, no existe la posibilidad de conta-minación ni obstrucción.

17

Gracias a este electrodo de pH que flexionará antes de romperse, puede olvidarse de los microelec-trodos estropeados. A partir de ahora, un movimiento incorrecto ya no implicará la sustitución de un costoso electrodo. Es un miembro eficaz del equipo.

Con un rango de medición de 1 μS/cm a 200 mS/cm, este sen-sor de conductividad semimicro es un auténtico generalista, idóneo para las mediciones di rectas en tubos de ensayo o micro-valo-raciones. Su diámetro de 6 mm permite una profundidad de inmer-sión mínima de sólo 17 mm.

InLab® Flex-Micro – Precisión de pH flexible

InLab® 752-6 mm – conductividad semi-micro versátil

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Los electrodos InLab® de METTLER TOLEDO están específicamente diseñados para que sean compa-tibles con los tampones basados en TRIS, lo que presupone unos resultados fiables y unos valores precisos del tampón. El electrolito de los electrodos InLab® no conti-ene iones de plata, lo que impide la contaminación de la unión en tampones que contienen TRIS o proteínas.

Evite la contaminación de los sensores con los tampones TRISLa medición precisa del pH es un factor determinante en la calidad del tampón. Los tampones basa-dos en TRIS, ampliamente utiliz-ados en la investigación biológica (desde la biología molecular hasta la histología), pueden dañar el equipo de pH estándar.

Siempre existe un riesgo de contaminación en la medición de muestras, ya sea por conta-minación cruzada o bien genética o microbiológica. Los electrodos de pH convencionales también pueden quedar dañados al medir muestras proteínicas o tampones basados en TRIS. Esto no ocurre con los electrodos InLab®.

Control de la contaminación para unos resultados seguros

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¿Cómo daña TRIS? Cuando se mide el pH en la prepa-ración de tampones TRIS, la unión de referencia en los electrodos de pH convencionales puede ob-turarse en el momento en que TRIS reacciona con los iones de plata en la solución de llenado. Esta reacción también puede producirse con la proteína del tampón, como BSA. La consecuencia es que el resultado es lento y fluctuante o incluso erróneo.

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Limpie con los limpiadores RNasa y DNasa y en autoclave para garantizar la bioseguridadLos modelos de electrodos de pH InLab® Power, Power Pro, Viscous y Viscous Pro pueden esterilizarse por autoclavización. Al limpiar el sensor con las soluciones des-contaminantes RNasa y DNasa primero, la posibilidad de conta-minación biológica disminuye de forma significativa.

Evite la contaminación de las muestras con mediciones superficiales de las gotas de muestraA fin de evitar la contaminación de las muestras en general (como el KCl de una muestra), coloque con la pipeta una muestra del ta-maño de una gota (10 μL mínimo) de su muestra principal y mí-dalo con un electrodo de superficie de membrana plano.Esto fun-ciona mejor con una portaobjetos y sólo se necesitan 10 μL de muestra.

www.mt.com/pHPara más información

Mettler-Toledo AG, AnalyticalCH-8603 Schwerzenbach, SuizaTel. +41 22 567 53 22Fax +41 22 567 53 23

Sujeto a cambios técnicos© 07/2013 Mettler-Toledo AG, 51725347AMarketing pH Lab / MarCom Analytical

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