Centrifugacin

CENTRIFUGACIN

FRANCISCO C SILGADO L.ISMAL A. GONZALEZ R.MOISS D. RODRGUEZ D.

ANTONIO MERCADO MsC.

UNIVERSIDAD DE CRDOBAFACULTAD DE CIENCIAS BSICASPROGRAMA DE QUMICALAB. BIOQUMICAMONTERIA, COLOMBIA2015

Es una tcnica que permite la separacin bien sea clulas molculas etc.Se utiliza la propiedad de sedimentacin de la partculasedimentacinSe basa en la diferencia de densidades entre un slido y el lquido que lo rodea. Solamente est influenciada por la gravedad.

CENTRIFUGACINDe este modo cuando un cuerpo est sumergido en el fluido se generaunempujehidrostticoresultantedelaspresionessobrela superficie delcuerpo que acta siempre hacia arriba atravs del centro degravedad del cuerpo del fluido desplazado y de valor igual al peso del fluido desplazado

PRINCIPIOS FSICO - QUMICOSPRINCIPIO DE ARQUMEDESse comprueba quLa velocidad de sedimentacin de cada partcula es proporcional a su tamaoLavelocidaddesedimentacinesproporcionalaladensidaddela partcula y a la del medio.La velocidad de sedimentacin es nula cuando ambas densidades se igualan, La velocidad de sedimentacin disminuye al aumentar la viscosidad del medio,.Lavelocidaddesedimentacinaumentaalaumentarelcampode fuerzaPrincipio de Stokes

Fuerza centrfuga: es la que tiende a alejar los objetos del centro derotacin mediante lavelocidadtangencial, perpendicular alradio, en unmovimientocircular.Fuerza centrpeta:Se llama as a la fuerza que tira de un objeto hacia el centro de un camino circular mientras que el objeto sigue dicha trayectoria a una rapidez constante.

Fuerza friccional:La fuerza de friccin a veces tambin es conocida como resistencia al rozamiento. Esta es la fuerza friccional que se generaenlasuperficiedeltubodeensayo(conunamuestra) causada por el movimiento del aire alrededor de esta. Es por ello que las muestras en una centrfuga deben estar en un tubo de ensayo grueso,porquesinoestosse romperan. Esto ayuda a minimizar la fuerza de friccin.

FUERZAS QUE INTERVIENEN EN EL PROCESOCentrifugacin a escala preparativa

Centrifugacin a escala analtica

CENTRIFUGACIN: DOS TIPOS DE ESCALA

Escala preparativa Centrifugacin diferencial Centrifugacin en gradiente de concentracin Centrifugacin zonal Centrifugacin isopcnica2. Escala analtica

TIPOS DE CENTRIFUGACIN

El principio de separacin se basa en la diferente velocidad de sedimentacin de las partculas en funcin de su tamao y densidad.En un tubo, los diferentes tipos de partculas se encuentran distribuidos uniformemente, pero al someterla a un campo centrifugo, las molculas sedimentarn a distintas velocidades, por lo que se irn separando a lo largo del proceso de centrifugacin.CENTRIFUGACIN DIFERENCIAL

En este tipo de centrifugacin, la muestra se deposita en forma de capa en la parte superior del medio en que se va a realizar la separacin, el cul presenta un gradiente de densidad continuo. Una ves depositada la muestra, se procede a la centrifugacin de los tubos .CENTRIFUGACIN ZONAL O EN BANDAS

CENTRIFUGACIN ISOPCNICA

BAJA VELOCIDADSe caracterizan:Pequeo tamao.Sin refrigeracin.Mxima velocidad: 5000 rpm.til para partculas grandes (clulas, precipitados de sales insolubles)

TIPOS DE CENTRIFUGAS

ALTA VELOCIDADSe caracterizan por:Velocidad entre 18000 y 25000 rpm.Refrigeradas, algunas con sistema de vaco.tiles en la separacin de fracciones celulares.Insuficientes para la separacin de ribosomas, virus o macromolculas.

ULTRACENTRFUGAS Velocidad: a partir de 50000 rpm.Presentan sistemas auxiliares: sistemas de refrigeracin,sistemas de alto vaco. 2 tipos:-Analticas: obtencin de datos precisos de propiedades de sedimentacin (s, PM).-Preparativas: aislamiento de partculas de bajo S (microsomas,virus, macromolculas).TIPOS DE CENTRIFUGAS

Separarmolculasenfuncindeltamao molecular yladensidad.Obtencindehematocrito.Laseparacindelaslipoprotenasdelplasma (colesterol).Obtencindesuerooplasmaapartirdesangre total.Concentracindeclulasdeloslquidosbiolgicos.Separacindesustancias.

APLICACIONES DE LA CENTRIFUGACIN

FUNDAMENTOS MATEMTICOS Se conseguir una misma separacin en 2 centrfugas distintas cuando sea igual FCR, no si es igual la velocidad de giro (rpm). Es importante, por ello, dar las condiciones de centrifugacin en FCR, no en rpm.

Centrifugacin

Fundamentos

Fuerza Centrifuga(Principio de Arqumedes)

Todo cuerpo sumergido total o parcialmente en un fluido (lquido o gas) recibe un empuje ascendente, igual al peso del fluido desalojado por el objeto.

COEFICIENTE DE SEDIMENTACIN

La tcnica de centrifugacin permite la separacin muchos componentes: en bioqumica, tales como clulas, orgnulos; protenas, carbohidratos, etc.

Muchas de las separaciones que se llevan a cabo en centrifugacin depende de: su tamao, forma y densidad de los componentes a separar.

La tcnica de centrifugacin cumple con un principio fundamental que permite la sedimentacin de los componentes de inters de un anlisis. CONCLUSIONES

GRACIAS !!!POR SU ATENCIN.